CN101052630A - 取代的杂环化合物和其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及取代的杂环化合物和包含取代的杂环化合物的组合物。本发明还涉及通过将一种或多种取代的杂环化合物给予需要它们的个体来预防或治疗各种疾病或病症的方法。本发明尤其涉及通过将一种或多种取代的杂环化合物给予需要它们的个体来预防或治疗癌症或炎性病症的方法。本发明还涉及制造用物品和包括一种或多种取代的杂环化合物的试剂盒。

Description

取代的杂环化合物和其用途
本申请要求于2004年9月3日提交的美国临时申请60/607,408的优选权，其全部内容通过引用而纳入本文中。
1.发明领域
本发明涉及取代的杂环化合物和包括一种或多种所述化合物的组合物。本发明还涉及通过将一种或多种取代的杂环化合物给予需要的个体来预防或治疗各种疾病和紊乱的方法。本发明特别涉及通过将一种或多种取代的杂环化合物给予需要的个体而预防或治疗癌症或炎性病症的方法。
2.发明背景
2.1微管
真核细胞的细胞骨架由微丝、微管和中间丝的广泛网络组成。微管在有丝分裂中具有重要的作用。α-、β-和γ-微管蛋白亚单位是负责形成微管的真核细胞骨架蛋白质。微管为由α-、β-微管蛋白杂二聚体组成并沿微管轴端对端连接的中空圆柱体。γ-微管蛋白包含于微管组织中。一经形成，微管就处于平衡状态，微管蛋白杂二聚体持续地加到微管的一端并在相对端去除。该平衡使得微管的长度可以控制，并且这种控制是微管在细胞中执行它们的多种功能所必需的。
在细胞分裂过程中，微管负责传送子染色体组到每个单独的子代细胞中。具体地讲，在分裂前期细胞核中的DNA被复制且两组遗传物质组织成单独的子染色体组。在分裂前期即将结束时，微管从正在分裂的亲代细胞的任一端的中心体朝向两个相同的染色体组生长。这种生长中的微管束形成被称作有丝分裂纺锤体的结构。在分类前中期微管将自身附着在染色体上，一旦进入分裂后期，微管变得不稳定并缩短，将子染色体分离到位于正在分裂的细胞的相对端它们各自的子代细胞中。因此，微管密切地参与细胞分裂过程。
2.2癌症和肿瘤性疾病
目前的癌症治疗包括手术、化学治疗和/或放射治疗来根除患者的肿瘤细胞(参见例如Stockdale，1998，″Principles of Cancer PatientManagement″，in Scientific American：Medicine，vol.3，Rubenstein andFederman，编，第12章，第IV节))。所有这些手段对患者都有显著的缺点。例如由于患者的健康，手术可成为禁忌，或者手术为患者无法接受。此外，手术可能无法完全根除肿瘤组织。只有当受到辐射的肿瘤组织显示比正常组织更高的辐射敏感度时放射治疗才有效，而且放射治疗经常引起严重的副作用。(出处同前)
至于化学治疗，许多化学治疗性制剂可以用于治疗肿瘤性疾病。化学治疗性制剂的具体实例包括靶向微管蛋白(例如抑制微管蛋白的聚合或稳定性或微管蛋白的稳定性)或微管的药物，例如秋水仙碱(一种从秋水仙中提取的生物碱)、长春花生物碱类药物(例如长春花新碱、长春花碱和脱水长春花碱(vinorlbine))和紫杉烷类药物(例如紫杉醇(Taxol)和多西他赛(Taxotere))。秋水仙碱通过单一高亲和力的结合位点(称作秋水仙碱位点)结合微管蛋白杂二聚体来发挥它的细胞毒性效应。这种结合引发二聚体结构的改变并阻碍二聚体组装为微管。秋水仙碱结合位点显示出对一组各种各样的分子结构的亲和力，包括但不限于鬼臼毒素(podophyllotoxins)、五加前胡素(steganacin)、查耳酮(chalcones)、诺可唑(nocodazole)和TN-16。快速分裂中的细胞(例如癌细胞)暴露于秋水仙碱导致有丝分裂纺锤体消失，将细胞阻断于细胞周期的M期并最终杀死细胞。长春花生物碱结合β-微管蛋白上的位点(称作长春花生物碱结合位点)导致微管蛋白二聚体不稳定。中毒的二聚体随后可被加到微管聚合物中并阻止微管的进一步生长。紫杉烷类直接结合完整微管的微管蛋白亚单位，使微管稳定并抑制解聚作用或稳定性。当分裂中的细胞进入分裂后期，稳定化的微管不能收缩并无法将各组子染色体拉到它们相应的子代细胞中。因此，细胞分裂无法发生，并且细胞被阻断在细胞周期的M阶段并最终调亡。
尽管可以获得多种化学治疗性制剂，传统的化学治疗具有许多缺点(参见例如Stockdale，1998，″Principles Of Cancer Patient Management″inScientific American Medicine，vol.3，Rubenstein and Federman，编，第12章，第10节))。几乎所有的化学治疗性制剂都有毒性，且化学治疗性制剂可导致显著且往往危险的副作用，包括严重的恶心、骨髓抑制、免疫抑制等。此外，许多肿瘤细胞由于多重耐药而对化学治疗性制剂有抵抗力或产生抵抗力。因此，本领域亟需用于治疗癌症或肿瘤性疾病且具有最低限度的副作用或没有任何副作用的新型化合物、组合物和方法。此外，还需要提供特异性增强毒性降低的癌细胞特异性治疗的癌症治疗。
2.3炎性疾病
炎症在宿主防御和免疫介导疾病的进展中起着主要作用。炎症反应的启动是由于复杂的事件级联(包括化学介质(例如细胞因子和前列腺素)和炎性细胞(例如白细胞))响应损伤(例如创伤、局部缺血和外来颗粒)和感染(例如细菌或病毒感染)。炎症反应的特征是血流量增加、毛细血管通透性提高和吞噬细胞的流入。这些事件导致在损伤或感染的部位形成肿胀、充血、温度增高(改变的温度模式)和脓液。
细胞因子和前列腺素控制炎症反应，并通过有序和自我限制的级联被释放到血液或受感染的组织中。细胞因子和前列腺素的这种释放增加了损伤或感染区域的血流量并可导致充血和温度增高。一些这样的化学物质导致液体渗入到组织中引起肿胀。这种保护性过程可刺激神经并引起疼痛。如果这些变化在相关区域内持续有限时间，对身体有好处。
炎症反应中体液和细胞免疫元素之间的精细平衡的相互作用可以消除有害物质并启动受损组织的修复。当这种精细平衡的相互作用被破坏时，炎症反应可对正常组织产生相当大的伤害，可以比引发该反应的原始损伤的危害更大。在这些失控的炎症反应中，需要临床介入来预防组织受损和器官功能紊乱。例如类风湿性关节炎、骨关节炎、克罗恩氏病、哮喘、变态反应或炎性肠病等疾病的特征是慢性炎症。
当前炎性疾病的治疗包括对症药物治疗和免疫抑制剂来控制症状。例如非甾体抗炎药(NSAID)如阿司匹林、布洛芬、非诺洛芬、萘普生、托美丁、舒林酸、甲氯芬那酸钠、吡罗昔康、氟比洛芬、双氯芬酸、奥沙普嗪、萘丁美酮、依托度酸和酮洛芬具有镇痛和消炎效果。然而，认为NSAID不能改变疾病的进展。(Tierney等(编著)，Current Medical Diagnosis &Treatment，第37版，Appleton & Lange(1998)，第793页)。此外，NSAID经常导致胃肠副作用，影响下消化道导致穿孔或加重炎性肠病，产生肾脏毒性和延长的出血时间。皮质类固醇是另一类通常用于控制炎症症状的药物。皮质类固醇和NSAID一样不会改变疾病的自然进展，因此当停用药物时，活动性疾病的临床症状通常再次出现。长期皮质类固醇治疗所导致的不良反应的严重问题(例如骨质疏松症、感染风险提高、食欲增加、高血压、浮肿、消化性溃疡、精神病)大大限制了它的长期使用。
低剂量的免疫抑制剂(例如细胞毒制剂)也通常用于治疗炎性疾病。例如甲胺蝶呤(一种叶酸拮抗剂)经常用于治疗银屑病、类风湿性关节炎和其它炎性疾病。象其它细胞毒剂一样，甲胺蝶呤经常导致口腔炎、红斑、slopecia、恶心、呕吐、腹泻并损害主要器官(例如肾和肝)。免疫抑制剂的长期使用通常使患者对感染缺乏抵抗力。
人们不断寻找治疗炎性疾病的新方法。特别地，人们不断寻找降低当前所用药物的给药剂量和/或频率，或能够使当前所用治疗更为有效的任何新疗法。
2.4中枢神经系统疾病
中枢神经系统疾病以不同的严重程度影响广泛的人群。通常，这种疾病的一个主要特征包括认知力或记忆力的严重损伤，表现为先前功能水平的显著衰退。例如痴呆的特征是几种认知损伤(包括严重的记忆力缺乏)，并可为各种疾病(包括阿尔茨海默病、帕金森氏病、亨廷顿病和多发性硬化等)的独立或基础特征。其它中枢神经系统疾病包括短时间发生的谵妄或意识紊乱，以及在没有其它中枢神经系统损伤的情况下发生健忘症或离散记忆受损。
3.发明概述
本发明提供了新的化合物、新的药物组合物和那些化合物或药物组合物在预防、治疗或控制各种疾病中的用途。本发明特别提供了预防、控制或治疗癌症(包括用常规的或当前可用的癌症治疗难以治愈的或没有响应的癌症)的方法，包括给予需要的患者有效量的本发明的化合物。
本发明提供了具有式I的化合物和下表1的化合物。
在一个实施方案中，本发明提供了具有式I的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物，其中X、R1、R2、R3、R4、R5、Ra和Rb如本文所述。
Figure A20058003770400171
本发明还提供了包括一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物的药物组合物，本发明还特别包含一种或多种本发明的化合物的药物组合物。
本发明提供了包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物和一种或多种预防性制剂或治疗性制剂的药物组合物，所述预防性制剂或治疗性制剂已知可用于或已经或当前正在用于预防、治疗或改善伴随有或特征为异常血管形成的疾病或病症、中枢神经系统病症、增生性病症、炎症、或通过抑制磷酸二酯酶IV(″PDE4″)活性和/或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的疾病或病症，或其一种或多种的症状。在另一个实施方案中，本发明的药物组合物可包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物和一种或多种血管靶向制剂。
本发明还提供了抑制或降低微管蛋白聚合或稳定性的方法，所述方法包括将细胞与有效量的本发明的化合物接触。
本发明还提供了抑制或降低微管蛋白聚合或稳定性和PDE4活性的方法，所述方法包括将细胞与有效量的本发明的化合物接触。
本发明还提供了抑制PDE4活性的方法，所述方法包括将细胞与有效量的本发明的化合物接触。
本发明还提供了靶向、阻断或破坏肿瘤血管功能的方法，所述方法包括将肿瘤与有效量的本发明的化合物接触。
本发明还提供了靶向、阻断或破坏肿瘤血管内皮的方法，所述方法包括将肿瘤与有效量的本发明的化合物接触。
本发明还提供了闭塞已存在的肿瘤血管的方法，所述方法包括将肿瘤与有效量的本发明的化合物接触。
本发明还提供了杀死肿瘤细胞的方法，所述方法包括将肿瘤细胞与有效量的本发明的化合物接触。
本发明还提供了引起肿瘤细胞内急性血管塌陷的方法，所述方法包括将肿瘤细胞与有效量的本发明的化合物接触。
本发明还提供了通过血管抑制阻断血管生成的方法，所述方法包括将细胞与有效量的本发明的化合物接触。
本发明提供了抑制血管生成的方法，所述方法包括将有效量的本发明的化合物给予需要它的个体。
在另一个实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善增生性病症或炎症或它们的一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的本发明的化合物单独给药或与预防或治疗有效量的一种或多种除本发明的化合物之外的用于预防、治疗、控制或改善增生性病症或炎症或它们的一种或多种症状或已知对预防、治疗、控制或改善增生性病症或炎症或它们的一种或多种症状有效的治疗性制剂联合给药。
在另一个实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善中枢神经系统病症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的本发明的化合物单独给药或与预防或治疗有效量的一种或多种除本发明的化合物之外的用于预防、治疗、控制或改善中枢神经系统病症或其一种或多种症状或已知对预防、治疗、控制或改善中枢神经系统病症或其一种或多种症状有效的治疗性制剂联合给药。
在一个具体的实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善对微管蛋白结合剂(例如秋水仙碱、紫杉醇或长春花生物碱)耐受的癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的本发明的化合物单独给药或与预防或治疗有效量的一种或多种除本发明的化合物之外的用于预防、治疗、控制或改善增生性病症或炎症或它们的一种或多种症状或已知对预防、治疗、控制或改善增生性病症或炎症或它们的一种或多种症状有效的治疗性制剂(例如秋水仙碱、紫杉醇或长春花生物碱)联合给药。
3.1术语和缩写
此处所用术语“烷氧基”是指具有式-O-烷基、-O-低级烷基、-O-环烷基、-O-低级烷基-环烷基、-O-苄基、-O-低级烷基-苄基的化合物，其中烷基、低级烷基和环烷基定义如下。-O-低级烷基的代表性基团包括但不限于-O-甲基、-O-乙基、-O-正丙基、-O-正丁基、-O-正戊基、-O-正己基、-O-正庚基、-O-正辛基、-O-异丙基、-O-仲丁基、-O-异丁基、-O-叔丁基、-O-异戊基、-O-2-甲基丁基、-O-2-甲基戊基、-O-3-甲基戊基、-O-2，2-二甲基丁基、-O-2，3-二甲基丁基、-O-2，2-二甲基戊基、-O-2，3-二甲基戊基、-O-3，3-二甲基戊基、-O-2，3，4-三甲基戊基、-O-3-甲基己基、-O-2，2-二甲基己基、-O-2，4-二甲基己基、-O-2，5-二甲基己基、-O-3，5-二甲基己基、-O-2，4-二甲基戊基、-O-2-甲基庚基、-O-3-甲基庚基、-O-乙烯基、-O-烯丙基、-O-1-丁烯基、-O-2-丁烯基、-O-异丁烯基、-O-1-戊烯基、-O-2-戊烯基、-O-3-甲基-1-丁烯基、-O-2-甲基-2-丁烯基、-O-2，3-二甲基-2-丁烯基、-O-1-己基、-O-2-己基、-O-3-己基、-O-乙炔基、-O-丙炔基、-O-1-丁炔基、-O-2-丁炔基、-O-1-戊炔基、-O-2-戊炔基和-O-3-甲基-1-丁炔基。-O-环烷基的代表性基团包括但不限于-O-环丙基、-O-环丁基、-O-环戊基、-O-环己基、-O-环庚基、-O-环辛基、-O-环壬基和-O-环癸基。-O-低级烷基-环烷基的代表性基团包括但不限于-O-CH2-环丙基、-O-CH2-环丁基、-O-CH2-环戊基、-O-CH2-环己基、-O-CH2-环庚基、-O-CH2-环辛基、-O-CH2-环壬基、-O-CH2-环癸基、-O-(CH2)2-环丙基、-O-(CH2)2-环丁基、-O-(CH2)2-环戊基、-O-(CH2)2-环己基、-O-(CH2)2-环庚基、-O-(CH2)2-环辛基、-O-(CH2)2-环壬基和-O-(CH2)2-环癸基。
此处所用术语“烷基”指具有1到20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和烃。直链烷基的代表性基团包括但不限于-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基、-正己基、-正庚基、-正辛基、-正壬基、-正癸基、-正十一烷基、-正十二烷基、-正十三烷基、-正十四烷基、正十五烷基等；支链烷基包括但不限于-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基、2-甲基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2，2-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、2，2-二甲基戊基、2，3-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2，3，4-三甲基戊基、3-甲基己基、2，2-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、3，5-二甲基己基、2，4-二甲基戊基、2-甲基庚基、3-甲基庚基；不饱和烷基包括但不限于-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-异丁烯基、-1-戊烯基、-2-戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基、-2，3-二甲基-2-丁烯基、1-己基、2-己基、3-己基、-乙炔基、-丙炔基、-1-丁炔基、-2-丁炔基、-1-戊炔基、-2-戊炔基、-3-甲基-1-丁炔基、-1-己炔基、-2-己炔基、-1-庚炔基、-2-庚炔基、-1-辛炔基、-2-辛炔基、-1-壬炔基、-2-壬炔基、-1-癸炔基、-2-癸炔基。
此处所用术语“烯基”指具有2到10个碳原子且包括至少一个碳-碳双键的直链或支链非环状烃。直链和支烯基的代表性基团包括-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-异丁烯基、-1-戊烯基、-2-戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基、-2，3-二甲基-2-丁烯基、-1-己烯基、-2-己烯基、-3-己烯基、-1-庚烯基、-2-庚烯基、-3-庚烯基、-1-辛烯基、-2-辛烯基、-3-辛烯基、-1-壬烯基、-2-壬烯基、-3-壬烯基、-1-癸烯基、-2-癸烯基、-3-癸烯基等。
此处所用术语“炔基”指具有2到10个碳原子且包括至少一个碳-碳三键的直链或支链非环状烃。直链和支链-(C2-C10)炔基的代表性基团包括-乙炔基、-丙炔基、-1-丁炔基、-2-丁炔基、-1-戊炔基、-2-戊炔基、-3-甲基-1-丁炔基、-4-戊炔基、-1-己炔基、-2-己炔基、-5-己炔基、-1-庚炔基、-2-庚炔基、-6-庚炔基、-1-辛炔基、-2-辛炔基、-7-辛炔基、-1-壬炔基、-2-壬炔基、-8-壬炔基、-1-癸炔基、-2-癸炔基、-9-癸炔基等。炔基可为未取代的或取代的。
此处所用术语“抗体”指单克隆抗体、多特异性抗体、人抗体、人源化抗体、骆驼源化(camelised)抗体、嵌合抗体、单域抗体、单链Fv(scFv)、单链抗体、Fab片段、F(ab′)片段、二硫键连接的Fv(sdFv)和抗独特型(anti-Id)抗体(包括例如抗本发明的抗体的抗独特型抗体)和以上任一种的表位结合片段。具体地说，抗体包括免疫球蛋白分子，例如包括抗原结合位点的分子。免疫球蛋白分子可为任何型(例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、类(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或亚类。
此处所用术语“芳基”是指碳环芳基。芳基的实例包括但不限于苯基、苄基、萘基和蒽基。
此处所用术语“环烷基”指3-、4-、5-、6-、7-或8-元饱和或不饱和非芳香族碳环。代表性的C3-C8环烷基包括但不限于-环丙基、-环丁基、-环戊基、-环戊二烯基、-环己基、-环己烯基、-1，3-环己二烯基、-1，4-环己二烯基、-环庚基、-1，3-环庚二烯基、-1，3，5-环庚三烯基、环辛基和环辛二烯基。术语“环烷基”也包括-低级烷基-环烷基，其中低级烷基和环烷基如此处所定义。-低级烷基-环烷基的实例包括但不限于-CH2-环丙基、-CH2-环丁基、-CH2-环戊基、-CH2-环戊二烯基、-CH2-环己基、-CH2-环庚基和-CH2-环辛基。
此处所用术语“化合物”和“本发明的化合物”可互换使用，指此处特别说明或一般公开的任何化合物，包括其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。在一个实施方案中，本发明的化合物为具有式I的化合物和表1中的化合物，及其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物。
此处所用术语“病症”和“疾病”可互换使用指个体的不适。某些不适可具有多于一种病症的特征。例如，某些不适可同时具有非癌性增生性病症和炎性病症的特征。在一个实施方案中，增生性病症是癌症。
此处所用术语“有效量”是指本发明的化合物的量，所述量足以减轻或改善病症(例如以异常血管生成为特征的病症、中枢神经系统病症、增生性病症或特征为炎症的病症(即炎性病症))或其一种或多种症状的严重程度或持续时间，预防病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)的发展，使病症(例如增生性病症或炎性病症)消退，预防病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)所伴随的一种或多种症状的复发、发展或发作，或者提高或改善另一种治疗的预防或治疗效果。在一个具体的实施方案中，针对癌症治疗，有效量指抑制或减缓癌细胞的增生，抑制或减缓肿瘤细胞的扩散(转移)，抑制或减缓伴随癌症的一种或多种症状的发作、发展或进展，减小肿瘤的尺寸或杀死肿瘤细胞的本发明的化合物的量。在一个实施方案中，本发明的化合物的治疗有效量为攻击肿瘤血管系统并切断对肿瘤的血液和/或氧气供应的量。相对于对照或安慰剂(例如磷酸盐缓冲盐水(″PBS″))计算，优选本发明的化合物的治疗有效量抑制或减少癌细胞的增生或肿瘤的尺寸至少5％，优选至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％，或至少99％。在另一个实施方案中，针对炎症，有效量是指减轻关节、器官或组织的炎症的本发明的化合物的量。相对于对照或安慰剂(例如磷酸盐缓冲盐水)计算，优选本发明的化合物的有效量将关节、器官或组织的炎症减轻至少5％，优选至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％，或至少99％。在另一个实施方案中，针对银屑病的治疗，有效量是指将人的银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分减少至少20％、至少35％、至少30％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％或至少85％的本发明的化合物的量。在一个可选择的实施方案中，针对银屑病的治疗，有效量优选地指将人总体评定评分提高至少25％、至少35％、至少30％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的本发明的化合物的量。本发明的化合物的治疗有效量的实例见以下4.4.5节。
此处所用术语“卤素”是指-F、-Cl、-Br或-I。
此处所用术语“杂环”是指芳香族或非芳香族环烷基，其中1到4个环碳原子独立地被选自O、S和N的杂原子置换。杂环的代表性实例包括但不限于苯并呋喃基、苯并噻吩、吲哚基、苯并吡唑基、香豆素基、异喹啉基、吡咯基、吡咯烷基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、喹啉基、嘧啶基、吡啶基、吡啶酮基、吡嗪基、哒嗪基、异噻唑基、异噁唑基、(1，4)-二氧六环、(1，3)-二氧戊环、4，5-二氢-1H-咪唑基和四唑基。杂环可为取代或未取代的。杂环也可在任何环原子(即在杂环的任何碳原子或杂原子)上成键。
此处所用术语“联合”是指采用多于一种治疗(例如一种或多种预防性制剂和/或治疗性制剂)。使用术语“联合”不限制给予患有病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)的个体施以治疗(例如预防性制剂和/或治疗性制剂)的顺序。第一种治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂，如本发明的化合物)可在给予第二种治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂，如抗炎制剂或抗血管生成制剂)之前(例如5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周以前)、同时或之后(例如5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周以后)给予患有病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)的个体。
这里与化合物(例如本发明的化合物)一起出现的术语“分离的”是指基本不含化学前体，其它化合物(化学合成时)或其它异构体的化合物。在一个具体的实施方案中，该化合物为60％、65％、75％、80％、85％、90％、95％或99％不含其它不同的化合物(例如其它异构体)。优选本发明的化合物为分离的化合物。
此处所用术语“低级烷基”指具有1到8个碳原子的直链或支链饱和或不饱和烃。直链低级烷基的代表性基团包括但不限于-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基、-正己基、-正庚基和-正辛基；支链低级烷基包括但不限于-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基、-2-甲基丁基、-2-甲基戊基、-3-甲基戊基、-2，2-二甲基丁基、-2，3-二甲基丁基、-2，2-二甲基戊基、-2，3-二甲基戊基、-3，3-二甲基戊基、-2，3，4-三甲基戊基、-3-甲基己基、-2，2-二甲基己基、-2，4-二甲基己基、-2，5-二甲基己基、-3，5-二甲基己基、-2，4-二甲基戊基、-2-甲基庚基、-3-甲基庚基。不饱和的C1-C8烷基包括但不限于-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-异丁烯基、-1-戊烯基、-2-戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基、-2，3-二甲基-2-丁烯基、-1-己基、-2-己基、-3-己基、-乙炔基、-丙炔基、-1-丁炔基、-2-丁炔基、-1-戊炔基、-2-戊炔基和-3-甲基-1-丁炔基。
此处所用术语“低级羟烷基”是指被一个或多个羟基取代的此处所述的低级烷基。代表性的低级羟烷基包括但不限于-CH2OH、-(CH2)2OH、-(CH2)3OH、-(CH2)4OH、-(CH2)5OH、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2CH3、-CH(OH)(CH2)2CH3、-CH2CH(OH)CH3、-CH2CH(OH)CH2CH3等。
当此处所述的基团被称为“取代或未取代的”时，在取代的情况下，它们可以被任何不会对化合物的所期望的活性产生不利影响的取代基取代。优选的取代基的实例为此处所公开的示例性化合物和实施方案的化合物的那些取代基以及卤素(例如氯、碘、溴或氟)、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羟基、C1-6烷氧基、氨基、硝基、巯基、硫醚、亚胺、氰基、酰氨基、膦酸根合(phosphonato)、膦、羧基、硫代羰基、磺酰基、氨磺酰、酮、醛、酯、乙酰基、乙酰氧基、氨基甲酰基、氧代基(＝O)、卤代烷基(例如三氟甲基)、取代的氨酰基和氨基烷基、碳环环烷基(可为单环或者稠合或非稠合多环(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基))或杂环烷基(可为单环或者稠合或非稠合多环(例如，吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或噻嗪基))、碳环或杂环、单环或稠合或非稠合多环芳基(例如苯基、萘基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、吡啶基、喹啉基、异喹啉基、吖啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基或苯并呋喃基)、氨基(伯、仲或叔)、O-低级烷基、O-芳基、芳基、芳基-低级烷基、CO2CH3、CONH2、OCH2CONH2、NH2、SO2NH2、OCHF2、CF3、OCF3，以及也可任选地被稠环结构或桥(例如-OCH2O-或-O-低级烷基-O-)取代的部分。这些取代基可任选地进一步被选自这类基团的取代基取代。在一个实施方案中，当低级烷基(例如亚甲基)被取代时，它被天然氨基酸的侧链取代。
本发明的各种化合物包括一个或多个手性中心并可以以对映体的外消旋混合物、非对映体混合物、或对映体或光学纯化合物存在。本发明包括这些化合物的立体异构纯形式的用途，以及那些形式的混合物的用途。例如，包含等量或不等量的本发明具体化合物的对映体的各混合物可用于本发明的方法和组合物中。这些异构体可通过标准技术(例如手性柱或手性拆分试剂)不对称合成或拆分。参见例如Jacques，J.等的Enantiomers，Racemates and Resolutions(Wiley-Interscience，New York，1981)、Wilen，S.H.等的Tetrahedron 33：2725(1977)、Eliel，E.L.等的Stereochemistfy ofCarbon Compounds(McGraw-Hill，NY，1962)和Wilen，S.H.的Tables ofResolving Agents and Optical Resolutions第268页(E.L.Eliel编，Univ.ofNotre Dame Press，Notre Dame，IN，1972)。
还应该指出本发明的化合物包括E和Z异构体或其混合物，以及顺式和反式异构体或其混合物。在某些实施方案中，本发明的化合物被分离为E或Z异构体。在其它实施方案中，本发明的化合物为E和Z异构体的混合物。
除非另有说明，此处所用的术语“立体异构纯的”是指包含化合物的一种立体异构体并基本不含该化合物的其它立体异构体的组合物，或者包含化合物的一种几何异构体(例如围绕双键)并基本上不含其它几何异构体的组合物。例如具有一个手性中心的本发明的立体异构纯化合物或其组合物基本上不含该化合物的相反的对映体。具有两个手性中心的本发明的立体异构纯化合物或其组合物基本上不含该化合物的其它非对映体。具有一个能形成E/Z异构的双键的本发明的立体异构纯化合物或其组合物基本上不含E/Z异构体中的一种。典型的立体异构纯化合物包含大于约80％重量的该化合物的一种立体异构体或E/Z异构体和小于约20％重量的该化合物的其它立体异构体或E/Z异构体，更优选大于约90％重量的该化合物的一种立体异构体或E/Z异构体和小于约10％重量的该化合物的其它立体异构体或E/Z异构体，甚至更优选大于约95％重量的该化合物的一种立体异构体或E/Z异构体和小于约5％重量的该化合物的其它立体异构体或E/Z异构体，最优选大于约97％重量的该化合物的一种立体异构体或E/Z异构体和小于约3％重量的该化合物的其它立体异构体或E/Z异构体。除非另有说明，此处所用的术语“立体异构富集”是指本发明的化合物或其组合物包含大于约60％重量的本发明的化合物的一种立体异构体或E/Z异构体，优选大于约70％重量，更优选大于约80％重量的本发明的化合物的一种立体异构体或E/Z异构体。除非另有说明，此处所用的术语“对映异构体纯的”是指具有一个手性中心的本发明的立体异构纯化合物或其组合物。类似地，术语“立体异构富集的”是指具有一个手性中心的本发明的立体异构富集化合物或其组合物。
应该指出如果结构或部分结构的立体化学没有用例如粗实线或虚线表示，则该结构或部分结构可理解为包括它所有的立体异构体。
此处所用术语“控制”是指个体从治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)中获得的有利结果，但该有利结果并未使疾病痊愈。在某些实施方案中，给予个体一种或多种治疗(例如一种或多种预防性制剂或治疗性制剂)来“控制”疾病或其症状从而预防该疾病或其症状的进展或恶化。
此处所用术语“不响应”和“难以治愈的”描述了用当前可用的治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)来治疗病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)的个体，该治疗在临床上不足以减轻伴随这类病症的一种或多种症状。通常这类个体忍受严重的持续活动性疾病并要求另外的治疗来改善伴随他们病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)的症状。
此处所用短语“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的药学上可接受的有机或无机盐。优选的盐包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐(isonicotinate)、乳酸盐、水杨酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、鞣酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、glucaronate、糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐(即1，1′-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐))。药学上可接受的盐可包含另一种分子，例如醋酸根离子、琥珀酸根离子或其它抗衡离子。抗衡离子可为稳定母体化合物上的电荷的任何有机或无机部分。此外，药学上可接受的盐在其结构中可具有多于一个带电荷原子。在药学上可接受的盐具有多个带电荷原子部分的情形下，可有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可具有一个或多个带电荷原子和/或一个或多个抗衡离子。
此处所用术语“药学上可接受的溶剂化物”是指一个或多个溶剂分子和本发明的化合物的缔合。形成药学上可接受的溶剂化物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。
此处所用术语“药学上可接受的水合物”是指本发明的化合物或其盐进一步包含通过非共价分子间力结合的化学计量或非化学计量的水。
此处所用术语“预防”是指给予个体治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)或联合治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂的联合)，来预防其所患病症或病症的一种或多种症状的复发、发作或进展。
此处所用短语“预防有效量”是指治疗(例如预防性制剂)的量足以预防病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)或病症的一种或多种症状的发展、复发或发作，或增强或改善另一种治疗(例如另一种治疗性制剂)的预防效果。化合物的预防有效量的实例见述于以下4.4.5节。
此处所用短语“副作用”包括治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)的不希望的和不利的作用。副作用总是不希望的，但不希望的副作用不一定是不利的。治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)的不利作用可能是有害的或不舒服或危险的。副作用包括但不限于发热、寒战、嗜睡、胃肠毒性(包括胃和肠的溃疡以及糜烂)、恶心、呕吐、神经毒性、中毒性肾损害、肾毒性(包括乳突状坏死和慢性间质性肾炎的情况)、肝毒性(包括升高的血清肝酶水平)、骨髓中毒(包括白血球减少症、骨髓抑制、血小板减少症和贫血症)、口干、金属味、妊娠延长、虚弱、嗜眠、疼痛(包括肌肉疼痛、骨骼疼痛和头痛)、脱发、无力、头晕、锥体束外症状、静坐不能、心血管紊乱和性功能障碍。
此处所用术语“个体”和“患者”在此处可以互换使用。术语“个体”是指动物，优选包括非灵长类(例如牛、猪、马、猫、狗、鼠和小鼠)和灵长类(例如猿如猕猴、黑猩猩和人)在内的哺乳动物，更优选人。在一个实施方案中，个体的病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)是难治愈的或对当前治疗不响应。在另一个实施方案中，个体为家畜(例如马、牛或猪)或宠物(例如狗或猫)。在另一个实施方案中，个体不是免疫受损的或免疫抑制的哺乳动物，优选人(例如HIV个体)。在另一个实施方案中，个体不是淋巴细胞计数低于约500个细胞/mm3的哺乳动物，优选人。在一个优选的实施方案中，个体是人。
此处所用术语“协同”是指本发明的化合物和另一种治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)联合，所述另一种治疗已经或当前正在用于预防、控制或治疗病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)，所述联合比各治疗的累加效果更为有效。联合治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂的联合)的协同效果使得可以对患有病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)的个体使用较少剂量的一种或多种治疗和/或以较低频率给予所述治疗。能够采用较少剂量的治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)和/或以较低频率给予所述治疗减轻了给予个体的该治疗所伴随的毒性，而没有降低所述治疗在预防、控制或治疗病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)的效果。此外，协同效果可以改善制剂预防、控制或治疗病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)的效果。联合治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂的联合)的协同效果可避免或减轻单独使用各个治疗所伴随的不利或不希望的副作用。在一个实施方案中，术语协同是指本发明的单一化合物对肿瘤或肿瘤细胞的生物学效果。不受理论的限制，由于本发明的化合物同时具有血管靶向活性(对抗中心肿瘤细胞特别有效)和抗血管生成活性(对抗外周肿瘤细胞特别有效)，本发明的化合物特别用于根除大部分肿瘤，并在一个实施方案中完全根除肿瘤。因此，由于其双重活性(血管靶向制剂和抗血管生成剂)的协同效果，本发明的化合物能够非常积极地对抗肿瘤。
此处所用术语“治疗”是指给予一种或多种治疗(例如一种或多种治疗性制剂如本发明的化合物)来减轻或改善病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)的进展、严重程度和/或持续时间，或改善病症的一种或多种症状。在一个具体的实施方案中，这类术语是指抑制或减缓癌细胞的增生，抑制或减缓肿瘤细胞的播散(转移)，抑制或减缓伴随癌症的一种或多种症状的发作、发展或进展，减小肿瘤的尺寸，或改善患者的ECOG或Karnofsky评分。在其它实施方案中，这类术语是指减轻一个或多个关节、器官或组织的肿胀，或减轻与炎性病症相伴随的疼痛。在其它实施方案中，这类术语是指降低人PASI评分或改善人总体评定评分。
此处所用术语“微管蛋白结合制剂”、“微管蛋白结合性制剂”或其不同方式是指可结合细胞中的微管蛋白、α，β-微管蛋白二聚体或完整的微管的任何细胞(增殖)抑制剂或细胞毒性剂。在一个实施方案中，微管蛋白结合制剂抑制微管蛋白的聚合或稳定性。在另一个实施方案中，微管蛋白结合制剂为微管蛋白去稳定剂。
此处所用术语“抑制微管蛋白的聚合或稳定性”或“对微管蛋白的聚合或稳定性的抑制”是指对微管蛋白二聚体的结构的任何改变，对微管蛋白二聚体组装为微管的任何阻碍，或对微管蛋白的任何去稳定作用。
以下缩写用于此处并具有所示的定义：Dess-Martin Periodinane为1，1，1-三乙酰氧基-1，1-二氢-1，2-苯碘酰-3-(1H)-酮，DMF为N，N-二甲基甲酰胺，DMSO为二甲基亚砜，EtOAc为乙酸乙酯，HPLC为高效液相色谱，HUVEC为人脐静脉内皮细胞，KHMDS为六甲基二硅基氨基钾，LHMDS为六甲基二硅基氨基锂、PBMC为外周血液单核细胞，PCC为氯铬酸吡啶鎓，PDC为重铬酸吡啶鎓，Ph为苯基，THF为四氢呋喃，TLC为薄层色谱，TPAP为过钌酸四正丙铵。
4.发明详述
本发明提供了化合物以及所述化合物的用途。本发明包括本发明的化合物抑制微管蛋白的聚合和/或微管蛋白稳定性和/或抑制有丝分裂的用途。本发明还包括本发明的化合物抑制血管生成的用途。本发明还包括本发明的化合物抑制PDE4活性的用途。本发明还包括本发明的化合物作为血管靶向制剂的用途。
本发明包括治疗方案，所述治疗方案对多种病症(例如以异常血管生成为特征的病症、增生性病症或炎性病症)或其一种或多种症状提供了比当前单一制剂治疗或联合治疗更好的预防或治疗效果。具体地，本发明提供了用于预防、治疗、控制或改善增生性病症(例如癌症)、黄斑变性或炎性疾病或其一种或多种症状的预防和治疗方案，所述方案包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物单独或与预防或治疗有效量的至少一种除本发明的化合物之外的其它预防性制剂或治疗性制剂联合给予个体。
4.1本发明的化合物
本发明包括具有式I的化合物和下表1所列的化合物。
在一个实施方案中，本发明提供了具有式I的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物，
Figure A20058003770400341
其中：
X为取代或未取代的咪唑、取代或未取代的吡啶、取代或未取代的吡咯烷、取代或未取代的噻吩、取代或未取代的吲哚、取代或未取代的2，3-二氢苯并呋喃、取代或未取代的3，4-二氢-2H-苯并(b)(1，4)噁嗪、取代或未取代的1H-苯并(d)(1，2，3)三唑、取代或未取代的喹啉、取代或未取代的苯并呋喃、取代或未取代的苯并(d)噁唑-2(3H)酮或取代或未取代的嘧啶；
R1和R2各自独立地为-H、-CN、卤素、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、-NHC(O)R9、-NHC(O)OR9、-COOH、-C(O)-低级烷基、-C(O)O-低级烷基、-C(O)-N(R9)2、取代或未取代的芳基、或取代或未取代的杂环；
Ra和Rb各自独立地为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
R3为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2、或R3与Ra或R4一起形成-O-C(R16R17)O-、-O-(C(R16R17))2-O-或-O-(C(R16R17))3-O-；
R4为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
R5为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
每个R9各自独立地为-H、取代或未取代的低级烷基、或取代或来取代的环烷基；
每个R10各自独立地为取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的低级羟烷基，或R10和其所连接的氮原子形成取代或未取代的杂环，或适当情况下，R10为-H；和
R16和R17各自独立地为-H或卤素。
在另一个实施方案中，具有式I化合物是以下这些，其中当：(1)X为吡啶、取代的吡啶、吡咯烷、咪唑、萘或噻吩；(2)Ra和Rb是H；和(3)R4为氢、硝基、氰基、三氟甲基、乙氧羰基、甲氧羰基、丙氧羰基、乙酰基，氨基甲酰基、乙酰氧基、羧基、羟基、氨基、低级烷基、低级亚烷基甲基、低级烷氧基，或卤素时；如果R3或R5之一为H，则另一个不为-O-C1-10烷基、-O-C1-10单环烷基、-O-C1-10多环烷基、-O-C1-10苯并环烷基、-C0-3-C1-10烷基、-C0-3-C1-10单环烷基、-C0-3-C1-10多环烷基、-C0-3-C1-10苯并环烷基、-CH＝C1-10烷基、-CH＝C1-10单环烷基或-CH＝C1-10双环烷基。
在另一个实施方案中，具有式I化合物是以下这些，其中当X为取代或未取代的咪唑、取代或未取代的吡啶、取代或未取代的吡咯烷或取代或未取代的噻吩时，如果R3或R5之一为H，则另一个不为取代或未取代的烷基、取代的烯基，或取代或未取代的烷氧基。
在一个实施方案中，具有式I化合物是以下这些，其中R1、R3、R4、R5、Ra和Rb如上所述，X为取代或未取代的吲哚、取代或未取代的2，3-二氢苯并呋喃、取代或未取代的3，4-二氢-2H-苯并(b)(1，4)噁嗪、取代或未取代的1H-苯并(d)(1，2，3)三唑、取代或未取代的喹啉、取代或未取代的苯并呋喃、取代或未取代的苯并(d)噁唑-2(3H)酮，或取代或未取代的嘧啶。
在另一个实施方案中，具有式I化合物是其中R1和R2之一为-H的那些化合物。
在另一个实施方案中，具有式I化合物是其中R3或R5为烷氧基，优选甲氧基或乙氧基的那些化合物。
在另一个实施方案中，具有式I化合物是其中R3和R5为烷氧基，优选甲氧基或乙氧基的那些化合物。
在另一个实施方案中，具有式I化合物是其中R4以及R3或R5中的一个为烷氧基，优选甲氧基或乙氧基的那些化合物。
在另一个实施方案中，具有式I化合物是其中R1为氰基的那些化合物。
在另一个实施方案中，具有式I化合物是其中X被取代的那些化合物。
在另一个实施方案中，具有式I化合物是其中X被低级烷基，优选甲基取代的那些化合物。
本发明的化合物的说明性实例包括表1所列的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物。应该指出这些化合物的E/Z和顺/反异构体是特别预期的。
                        表1
Figure A20058003770400371
Figure A20058003770400381
具体地说，本发明包括抑制或降低微管蛋白聚合和/或稳定性的化合物。在一个具体的实施方案中，本发明包括抑制或降低微管蛋白聚合或稳定性以及抑制或降低一种或多种肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活性表达的化合物。在另一个实施方案中，本发明包括抑制或降低微管蛋白聚合或稳定性以及抑制或降低一种或多种PDE4活性表达的化合物。在另一个实施方案中，本发明包括具有式I的化合物，该化合物抑制或降低微管蛋白聚合或稳定性，抑制或降低一种或多种TNF-α活性表达以及抑制或降低一种或多种PDE4活性表达。在另一个实施方案中，本发明包括将细胞周期停滞于G2/M阶段的化合物。
如上所述，本发明的某些化合物可包括一个或多个手性原子。因此，本发明包括所有的立体异构体(即几何异构体)，所述立体异构体包括构象和构型异构体(例如对映体、非对映异构体及其混合物)。在一个实施方案中，本发明包括此处所述所有化合物的外消旋或者R-或S-对映体。各对映体可以基本不含其它对映体(例如至少75％(重量/重量)，至少90％(重量/重量)或至少99％(重量/重量)不含其它对映体)或以混合物(例如外消旋混合物)的形式提供。
本发明的化合物还包括烯烃，所述烯烃如果被不对称取代可以以E和Z或顺式和反式构型存在。因此，本发明包括E和Z以及顺式和反式烯烃异构体。例如，认为具有下式结构的化合物
Figure A20058003770400391
包括具有以下结构的E和Z烯烃异构体
Figure A20058003770400392
4.1制备本发明的化合物的方法
本发明的化合物可通过常规的有机合成制备。例如但不限于，具有上述式I的本发明的化合物可用如方案1-4所示的方法制备。
方案1显示具有式I的化合物如何通过Friedel-Crafts酰化反应方法制备。
                        方案1
具有式44的苯甲酰氯化合物与取代或未取代的具有式45的杂环化合物通过Friedel-Crafts酰化反应(March，J.Advanced OrganicChemistry-Reactions，Mechanisms and Structure，第4版，John Wiley和Sons，New York，1992，第539-542页)偶联得到具有式46的中间体。具有式46的化合物随后通过Wittig反应(March，J.Advanced OrganicChemistry-Reactions，Mechanisms and Structure，第4版，John Wiley和Sons，New York，1992，第956-963页)，在碱(例如六甲基二硅基氨基锂或六甲基二硅基氨基钾)的存在下，与具有式47的膦烷或具有式48的膦酸酯反应得到相应的化合物I。
在一个实施方案中，Wittig反应中所使用的碱为LHMDS。
在另一个实施方案中，Wittig反应中所使用的碱为KHMDS。
通用方法A-Friedel-Crafts酰化反应
将三氯化铝(约1当量)加入温度为0℃的0.5到1.0M的取代或未取代的具有式45的杂环化合物(约1当量)的二氯甲烷溶液中。将具有式44的苯甲酰氯(约1当量)加入所得的混合物中并使反应物升到室温。反应混合物随后用二氯甲烷稀释，用水洗涤(3×)，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩得到粗残余物。该粗残余物用快速柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)纯化来获得具有式46的化合物。
通用方法B-Wittig反应
将KHMDS(约2当量)加入温度为0℃的0.5到1.0M的具有式47的膦烷或具有式48的膦酸酯(约2当量)的THF溶液中。将所得的混合物升到室温并随后搅拌约15分钟到约1小时，此后加入约1.0M的具有式46的化合物(约1当量)的THF溶液，将所得的混合物加热回流约4小时到约36小时，同时用TLC监测。将反应物冷却至室温并随后真空浓缩得到粗残余物，将该粗残余物用快速柱色谱法(己烷/乙酸乙酯)纯化来获得具有式I的化合物。
方案2显示如何通过Grignard反应制备具有式I的化合物。
                        方案2
Figure A20058003770400421
将具有式43的溴苯或氯苯与镁反应制备相应的Grignard试剂，所述Grignard试剂随后与具有式44的苯甲醛反应得到具有式45的羟基化合物。羟基化合物45随后用氧化剂处理得到具有式40的中间体化合物，所述中间体化合物如上述方案1所述在Wittig反应中与合适的膦烷47或膦酸酯48反应得到具有式I的化合物。
用于将具有式45的化合物转化为具有式40的化合物的合适的氧化剂包括但不限于氯铬酸吡啶鎓(PCC)、重铬酸吡啶鎓(PDC)、Jones试剂、Dess-Martin periodinane、MnO2和过钌酸四正丙酯(TPAP)。
在一个优选的实施方案中，氧化剂为PCC。
通用方法C-Grignard反应
将约1/4体积的约0.5M的具有式43的溴苯化合物(约1.2当量)的THF溶液缓慢加到约0.5M的镁屑(约1.2当量)的THF溶液中。将所得的混合物加热回流约30分钟，随后移除热源并滴入其余的具有式43的溴苯化合物。将所得的混合物加热回流约5小时到约24小时，随后冷却至室温并在室温下搅拌约18小时。随后将所得的溶液加到约0.5M的具有式44的苯甲醛化合物的THF溶液(约0℃)中，控制加入速度使得反应温度在加入过程中不超过15℃。加毕，将所得的反应物在室温下搅拌约12小时到约24小时，随后冷却到约0℃并用饱和氯化铵水溶液终止反应。所得混合物用乙酸乙酯(3×)萃取，合并的有机萃取物用水(3×)和盐水洗涤，用硫酸镁干燥并真空浓缩得到粗残余物，将该粗残余物用快速柱色谱法(己烷/乙酸乙酯洗脱液)纯化来获得具有式45的羟基化合物。
通用方法D-具有式45的羟基化合物的氧化反应
将氯铬酸吡啶鎓(约1.5当量)和硅藻土(约100mg每1mmol具有式45的羟基化合物)加到约0.5M的具有式45的羟基化合物(约1当量)的二氯甲烷溶液中，将所得的混合物搅拌约6小时到约24小时。将反应混合物过滤，所得滤饼用二氯甲烷洗涤，合并滤液和洗液并真空浓缩得到粗残余物，将该粗残余物用快速柱色谱法纯化获得具有式40的二苯甲酮化合物，该二苯甲酮化合物可通过上述通用方法B转化为具有式I的化合物。
方案3显示通过苯乙烯和溴苯的钯催化偶联来合成具有式I的化合物。
                        方案3
通用方法E-苯乙烯和溴苯的钯催化偶联
将约0.5M的Pd(OAc)4(约0.03当量)的DMF溶液加到具有式52的苯乙烯化合物(约1当量)、具有式53的溴苯化合物(约1.5当量)、醋酸钠(约1.7当量)和四正丁基溴化铵(约1.1当量)的DMF悬浮液中。将所得的混合物加热到60℃并在此温度下搅拌约6小时到约18小时，随后冷却至室温并将其倒入水∶乙酸乙酯(3∶1)的混合物中。收集有机相，水相用乙酸乙酯(3×)洗涤。合并的有机相依次用水和盐水洗涤，随后用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩得到粗残余物，将该粗残余物用快速柱色谱法纯化来获得具有式I的化合物。
方案4显示利用苯基锂中间体制备具有式I的化合物的方法。
                        方案4
具有式49的溴化化合物与正丁基锂反应得到相应的中间体有机锂试剂，该有机锂试剂随后与具有式50的苯甲醛反应得到具有式51的羟基化合物。羟基化合物51随后用氧化剂处理得到具有式46的中间体化合物，所述中间体化合物如上述方案1所述在Wittig反应中与合适的膦烷47或膦酸酯48反应得到具有式I的化合物。
用于将具有式51的化合物转化为具有式46的化合物的合适的氧化剂包括但不限于氯铬酸吡啶鎓(PCC)、重铬酸吡啶鎓(PDC)、Jones试剂、Dess-Martin periodinane、MnO2和过钌酸四正丙酯(TPAP)。
在一个优选的实施方案中，氧化剂为PCC。
有机化学领域技术人员知悉如何采用方案1-4中所述的方法并通过对方案1-4的方法制得的产物进行简单的化学转化来制备本发明的化合物。
本发明的化合物一经合成，则可通过标准纯化技术从化学前体或其它化学品中分离，所述标准纯化技术例如色谱法(例如快速柱色谱法和HPLC)、不对称合成法、重结晶和差异溶解度。
4.2与本发明的化合物联用的试剂
本发明提供了预防、控制、治疗或改善病症(例如增生性病症、伴随有或特征为异常血管生成的病症，通过抑制或减少PDE4表达和/或活性、或者抑制或减少微管蛋白聚合和/或稳定性来预防、控制或治疗的病症或炎性病症)的方法，所述方法包括将一种或多种本发明的化合物和除本发明的化合物之外的一种或多种治疗(例如一种或多种预防性制剂或治疗性制剂)给予需要它们的个体。
本发明还提供了包含一种或多种本发明的化合物和除本发明的化合物之外的一种或多种预防性制剂或治疗性制剂的组合物，以及使用所述组合物预防、控制、治疗或改善增生性病症或炎性病症的方法。预防性制剂或治疗性制剂包括但不限于小分子、合成药物、肽、多肽、蛋白质、核酸(例如DNA和RNA核苷酸包括但不限于反义核苷酸序列，RNAi，三螺旋和编码生物活性蛋白质、多肽或肽的核苷酸序列)、抗体、合成或天然无机分子、模拟制剂(mimetic agents)以及合成或天然有机分子。
任何已知可用或已经使用或当前正用于预防、控制、治疗或改善病症(例如增生性病症、伴随有或特征为异常血管生成的病症，增生性病症，炎性病症、通过抑制PDE4或者减少或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或病症的一种或多种症状的制剂可与此处所述的本发明的化合物联用。关于已用或当前正用于预防、治疗、控制或改善增生性病症或炎性病症或其一种或多种症状的预防性制剂或治疗性制剂的信息，参见例如Gilman等的Goodman and Gilman′s：The PharmacologicalBasis of Therapeutics(治疗药理学基础)，第10版，McGraw-Hill，New York，2001、The Merck Manual of Diagnosis and Therapy(默克诊疗手册)，BerkoW，M.D.等编著，第17版，Merck Sharp & Dohme Research Laboratories，Rahway，NJ，1999、Cecil Textbook of Medicine(塞氏医学教材)，第20版，Bennett和Plum编著，W.B.Saunders，Philadelphia，1996。这类制剂的实例包括但不限于抗炎制剂(例如皮质甾类(例如泼尼松和氢化可的松)、糖皮质激素类、类固醇、非类固醇抗炎药物(例如阿司匹林、布洛芬、双氯芬酸和COX-2抑制剂)、β-激动剂、抗胆碱剂和甲基黄嘌呤)、免疫调节剂、金注射剂、柳氮磺胺吡啶、青霉胺、抗血管生成剂(例如血管生成抑制素、TNF-α拮抗剂(例如抗TNFα抗体)和内皮生长抑素)、抗纤维化制剂、止吐剂(例如甲氧氯普胺、多潘立酮、普鲁氯嗪、异丙嗪、氯丙嗪、三甲氧苯酰胺、昂丹司琼、格拉司琼、羟嗪、乙酰亮氨酸(acethylleucine)单乙醇胺、阿立必利、阿扎司琼、苯喹胺、氨醇醋茶碱(bietanautine)、溴必利、氯苯丁嗪、氯波必利、苯甲嗪、茶苯海明(dimenhydinate)、地芬尼多、多拉司琼、氯苯甲嗪、美沙拉妥、美托哌丙嗪、大麻隆、氮羟哌丙嗪、哔哌马嗪、东莨菪碱、舒必利、四氢大麻酚、硫乙拉嗪、硫丙拉嗪和托烷司琼)、阿片样物质(例如吗啡、二乙酰吗啡、氢吗啡酮、氢可酮、羟吗啡酮、羟考酮、美托酮、阿朴吗啡、去甲吗啡、唉托啡、丁丙诺啡、哌替啶、洛哌丁胺、阿尼利定、依索庚嗪、匹米诺定(piminidine)、β-普鲁丁、地芬诺酯、芬太尼(fentanil)、舒芬太尼、阿芬太尼、瑞芬太尼、左吗啡、右甲吗南、非那佐辛、喷他佐辛、环佐辛、美沙酮、异美沙酮和丙氧芬)、造血细胞集落刺激因子(例如非格司亭、乙二醇化非格司亭(pegfilgrastim)、沙格司亭、莫拉司亭和阿法依泊丁)、止吐剂(例如甲氧氯普胺、多潘立酮、普鲁氯嗪、异丙嗪、氯丙嗪、三甲氧苯酰胺、昂丹司琼、格拉司琼、羟嗪、乙酰亮氨酸(acethylleucine)、单乙醇胺、阿立必利、阿扎司琼、苯喹胺、氨醇醋茶碱、溴必利、氯苯丁嗪、氯波必利、苯甲嗪、茶苯海明、地芬尼多、多拉司琼、氯苯甲嗪、美沙拉妥、美托哌丙嗪、大麻隆、氮羟哌丙嗪、哔哌马嗪、东莨菪碱、舒必利、四氢大麻酚、硫乙拉嗪、硫丙拉嗪和托烷司琼)、达普宋、补骨酯素(例如甲氧沙林(methoxalen)和三甲沙林)、抗组胺药、抗疟疾制剂(例如羟氯喹)、抗病毒剂、抗生素(例如更生霉素(以前称为放线菌素)、博莱霉素、红霉素、青霉素、光辉霉素和安曲霉素(AMC))、血管靶向制剂(例如微管去稳定药物、combretastatin A-4磷酸二钠、ZD6126、AVE8062、Oxi 4503、TZT 1027和DMXAA)、IMiD和SelCID(Celgene Corporation，New Jersey)(例如Revimid、Actimid和美国专利第6,075,041、5,877,200、5,698,579、5,703,098、6,429,221、5,736,570、5,658,940、5,728,845、5,728,844、6,262,101、6,020,358、5,929,117、6,326,388、6,281,230、5,635,517、5,798,368、6,395,754、5,955,476、6,403,613、6,380,239和6,458,810号所公开的药物，这些文献通过引用而纳入本文中)。
4.2.1免疫调节剂
任何本领域技术人员熟知的免疫调节剂都可用于本发明的方法和组合物中。
免疫调节剂的实例包括但不限于蛋白制剂，例如细胞因子、肽模拟制剂和抗体(例如人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、Fv片段、ScFv片段、Fab片段或F(ab)2片段或表位结合片段)，核酸分子(例如反义核酸分子、三螺旋和编码免疫调节性基因产物的核酸分子)、小分子、有机化合物和无机化合物。具体地，免疫调节剂包括但不限于甲氨蝶呤(methothrexate)、来氟米特、环磷酰胺、cytoxan、Immuran、环孢菌素A、米诺环素、硫唑嘌呤、抗生素(例如FK506(藤霉素))、甲泼尼龙(MP)、皮质甾类、类固醇(steriods)、霉酚酸酯(mycophenolate mofetil)、雷伯霉素(西罗莫司)、咪唑立宾、去氧精胍菌素、布喹那、malononitriloamindes(例如来氟米特)、T细胞受体调节剂和细胞因子受体调节剂。
细胞因子受体调节剂的实例包括但不限于可溶性细胞因子受体(例如TNF-α受体的胞外域或其片段、IL-1β受体的胞外域或其片段和IL-6受体的胞外域或其片段)、细胞因子或其片段(例如白介素(IL)-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-15、IL-23、TNF-α、TNF-β、干扰素(IFN)-α、IFN-β、IFN-γ和GM-CSF)、抗细胞因子受体抗体(例如抗-IFN受体抗体、抗-IL-2受体抗体(例如Zenapax(Protein DesignLabs))、抗-IL-4受体抗体、抗-IL-6受体抗体、抗-IL-10受体抗体、抗-IL-12受体抗体、抗-IL-15受体抗体和抗-IL-23受体抗体)、抗细胞因子抗体(例如抗IFN α抗体、抗IFN-β抗体、抗IFN-γ抗体、抗TNF-α抗体、抗IL-1β抗体、抗-IL-2抗体、抗-IL-4抗体、抗-IL-6抗体、抗-IL-8抗体(例如ABX-IL-8(Abgenix))、抗-IL-9抗体、抗-IL-10抗体、抗-IL-12抗体和抗-IL-23抗体)。在具体的实施方案中，细胞因子受体调节剂为IL-4、IL-10或其片段。在另一个实施方案中，细胞因子受体调节剂为抗-IL-1β抗体、抗-IL-6抗体、抗-IL-12受体抗体或抗TNF-α抗体。在另一个实施方案中，细胞因子受体调节剂为TNF-α受体的胞外域或其片段。在某些实施方案中，细胞因子受体调节剂不是TNF-α拮抗剂。
4.2.2抗血管生成剂
本领域技术人员熟知的任何抗血管生成剂可用于本发明的组合物和方法。抗血管生成剂的非限制性实例包括减缓或抑制血管生成的蛋白质、多肽、肽、融合蛋白、抗体(例如人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、Fv片段、ScFv片段、Fab片段、F(ab)2片段及其抗原结合片段)例如免疫特异性结合TNF-α的抗体、核酸分子(例如反义分子或三螺旋)、有机分子、无机分子和小分子。具体地，抗血管生成剂的实例包括但不限于内皮生长抑素、血管生成抑素、apomigren、抗血管生成的抗凝血酶III、纤连蛋白的29kDa N-端和40kDa C-端蛋白水解片段、uPA受体拮抗剂、催乳素的16kDa蛋白水解片段、血小板因子-4的7.8kDa蛋白水解片段、血小板因子-4的抗血管生成的24氨基酸片段、标记为13.40的抗血管生成因子、凝血酶致敏蛋白(thrombospondin)I的抗血管生成的22氨基酸肽片段、SPARC的抗血管生成的20氨基酸肽片段、含RGD和NGR的肽、层连蛋白、纤连蛋白、前胶原和EGF的抗血管生成的肽、抗整联蛋白αvβ3抗体、酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)拮抗剂、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)拮抗剂、血管内皮生长因子(VEGF)拮抗剂(例如抗VEGF抗体)和VEGF受体(VEGFR)拮抗剂(例如抗VEGFR抗体)。
整联蛋白αvβ3拮抗剂的实例包括但不限于蛋白质制剂，例如非催化剂的金属蛋白酶片段、RGD肽、肽模拟、融合蛋白、解联蛋白或其衍生物或类似物，和免疫特异性结合整联蛋白αvβ3的抗体、核酸分子、有机分子和无机分子。免疫特异性结合整联蛋白αvβ3的抗体的非限制性实例包括11D2(Searle)。小分子peptidometric整联蛋白αvβ3拮抗剂的非限制性实例包括S836(Searle)和S448(Searle)。解联蛋白的实例包括但不限于Accutin。本发明还包括以下美国专利和国际申请公开所披露的任何整联蛋白αvβ3拮抗剂在本发明的组合物和方法中的用途：美国专利第5,652,109、5,652,110、5,578,704、5,149,780、5,196,511、5,204,445、5,262,520、5,306,620、5,478,725、5,498,694、5,523,209、5,578,704、5,589,570、5,652,109、5,652,110、5,693,612、5,705,481、5,753,230、5,767,071、5,770,565、5,780,426、5,817,457、5,830,678、5,849,692、5,955,572、5,985,278、6,048,861、6,090,944、6,096,707、6,130,231、6,153,628、6,160,099和6,171,58号，以及国际申请公开WO 95/22543、WO 98/33919、WO 00/78815、WO 00/31248、WO 98/46264、WO 98/40488和WO 02/070007，各文献通过引用而纳入本文中。
在本发明的一个具体的实施方案中，抗血管生成剂为内皮生长抑素。天然的内皮生长抑素由胶原蛋白XVIII的C-端～180氨基酸组成(编码胶原XVIII的两种剪接形式的cDNA，其GenBank登录号为AF18081和AF18082)。在本发明的另一个实施方案中，抗血管生成剂为纤溶酶原片段(纤溶酶原的编码序列可参见GenBank登录号NM_000301和A33096)。血管生成抑素肽天然地包括纤溶酶原的四个kringle域(kringle 1到kringle4)。已经证明重组kringle 1、2和3具有天然肽的抗血管生成性质，而kringle4没有这种活性(Cao等，1996，J.Biol.Chem.271：29461-29467)。因此，细胞生长抑素肽包括至少一个，优选多于一个选自kringle 1、kringle 2和kringle 3的kringle域。在一个具体的实施方案中，抗血管生成肽为人血管生成抑素分子的40kDa同种型、人血管生成抑素分子的42kDa同种型、人血管生成抑素分子的45kDa同种型或其组合。在另一个实施方案中，抗血管生成剂为纤溶酶原的kringle 5域，它是比血管生成抑素(包含kringle 1-4域的血管生成抑素)更为有效的血管生成抑制剂。在本发明的另一个实施方案中，抗血管生成剂为抗凝血酶III。抗凝血酶III(以下称抗凝血酶)包含将蛋白质束缚到血管壁的肝素结合域和与凝血酶相互作用的活性部位环。当抗凝血酶被束缚到肝素上时，该蛋白质引出构象变化使得活性环与凝血酶相互作用，导致所述环被凝血酶蛋白水解解离。蛋白水解解离事件导致抗凝血酶构象的另一个变化，即(i)改变了凝血酶和抗凝血酶相同作用界面，并(ii)从肝素中释放出络合物(Carrell，1999，Science 285：1861-1862，以及其中的参考文献)。O′Reilly等(1999，Science 285：1926-1928)已经发现解离的抗凝血酶具有强抗血管生成活性。因此，在一个实施方案中，抗血管生成剂是抗凝血酶的抗血管生成形式。在本发明的另一个实施方案中，抗血管生成剂为纤连蛋白的40kDa和/或29kDa蛋白水解片段。
在本发明的另一个实施方案中，抗血管生成剂为尿激酶纤溶酶原活化剂(uPA)受体拮抗剂。在一个实施方案中，拮抗剂为uPA的显性负性突变(参见例如(Crowley等，1993，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：5021-5025)。在另一个实施方案中，拮抗剂为肽拮抗剂或其融合蛋白(Goodson等，1994，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91：7129-7133)。在另一个实施方案中，拮抗剂为显性负性可溶性uPA受体(Min等，1996，Cancer Res.56：2428-2433)。在本发明的另一个实施方案中，抗血管生成剂为包含约120个氨基酸的催乳素的16kDa N-端片段或其生物活性片段(催乳素的编码序列可见于GenBank登录号NM_000948)。在本发明的另一个实施方案中，抗血管生成剂为7.8kDa血小板因子-4片段。在本发明的另一个实施方案中，抗血管生成剂为对应于血小板因子-4的抗血管生成的13氨基酸片段的小肽、标记为13.40的抗血管生成因子、凝血酶致敏蛋白(thrombospondin)I的抗血管生成的22氨基酸肽片段、SPARC的抗血管生成的20氨基酸肽片段，层连蛋白纤连蛋白、前胶原或EGF的抗血管生成小肽，或整联蛋白αvβ3或VEGF受体的小肽拮抗剂。在另一个实施方案中，小肽包含RGD或NGR基序。在某些实施方案中，抗血管生成剂为TNF-α拮抗剂。在其它实施方案中，抗血管生成剂不为TNF-α拮抗剂。
根据本发明的方法，可以将编码具有抗血管生成活性的蛋白质、多肽或肽的核酸分子，或者具有抗血管生成活性的蛋白质、多肽或肽给予患有病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症或通过抑制PDE4或者通过减少或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)的个体。此外，根据本发明的方法，可以将编码具有抗血管生成活性的蛋白质、多肽或肽的衍生物、类似物、片段或变异体的核酸分子，或者具有抗血管生成活性的蛋白质、多肽或肽的衍生物、类似物、片段或变异体给予患有病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症或通过抑制PDE4或者通过减少或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)的个体。优选地，这类衍生物、类似物、变异体和片段保留全长野生型蛋白质、多肽或肽的抗血管生成活性。
可用作抗血管生成剂的蛋白质、多肽或肽可用本领域熟知或此处所述的任何技术制备。具有抗血管生成活性的蛋白质、多肽或肽可通过本领域熟知或此处所述的技术进行工程化，以提高这类蛋白质、多肽或肽的体内半衰期。优选将市售抗血管生成剂用于本发明的组合物和方法。制剂的抗血管生成活性可通过本领域技术人员熟知或此处所述的任何技术在体外和/或体内测定。
抗血管生成剂及其剂量、给药途径和推荐用法为本领域所已知，且已经见述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)这样的文献中。
4.2.3TNF-α拮抗剂
本领域技术人员熟知的任何TNF-α拮抗剂可用于本发明的组合物和方法。TNF-α拮抗剂的非限制性实例包括阻断、减缓、抑制或中和TNF-α的功能、活性和/或表达的蛋白质、多肽、肽、融合蛋白、抗体(例如人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、Fv片段、ScFv片段、Fab片段、F(ab)2片段及其抗原结合片段)例如免疫特异性结合TNF-α的抗体、核酸分子(例如反义分子或三螺旋)、有机分子、无机分子和小分子。在各个实施方案中，TNF-α拮抗剂相比对照(例如磷酸盐缓冲盐水(PBS))而言将TNF-α的功能、活性和/或表达降低至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％，或至少99％。
免疫特异性结合TNF-α的抗体的实例包括但不限于infliximab(REMICADE；Centacor)、D2E7(Abbott  Laboratories/KnollPharmaceutical Co.，Mt.Olive，N.J.)、CDP571(也称作HUMICADETM)和CDP-870(均来自Celltech/Pharmacia，Slough，U.K.)和TN3-19.12(Williams等，1994，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91：2762-2766；Thorbecke等，1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：7375-7379)。本发明还包括免疫特异性结合TNF-α的抗体在本发明的组合物和方法中的用途，所述抗体在以下美国专利中披露：美国专利第5,136,021、5,147,638、5,223,395、5,231,024、5,334,380、5,360,716、5,426,181、5,436,154、5,610,279、5,644,034、5,656,272、5,658,746、5,698,195、5,736,138、5,741,488、5,808,029、5,919,452、5,958,412、5,959,087、5,968,741、5,994,510、6,036,978、6,114,517和6,171,787号。各文献通过引用而纳入本文中。可溶性TNF-α受体的实例包括但不限于sTNF-R1(Amgen)、etanercept(ENBRELTM；Immunex)及其大鼠同系物RENBRELTM、来源于TNFr I、TNFr II(Kohno等，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：8331-8335)和TNF-αInh(Seckinger等，1990，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：5188-5192)的TNF-α的可溶性抑制剂。
在一个实施方案中，用于本发明的组合物和方法中的TNF-α拮抗剂为可溶性TNF-α受体。在一个具体的实施方案中，用于本发明的组合物和方法中的TNF-α拮抗剂为etanercept(ENBRELTM；Immunex)或其片段、衍生物或类似物。在另一个实施方案中，用于本发明的组合物和方法中的TNF-α拮抗剂为免疫特异性结合TNF-α的抗体。在一个具体的实施方案中，用于本发明的组合物和方法中的TNF-α拮抗剂为infliximab(REMICADE；Centacor)，其衍生物、类似物或抗原结合片段。
本发明所包括的其它TNF-α拮抗剂包括但不限于IL-10(已知其通过干扰素γ-激活巨噬细胞来阻断TNF-α的产生(Oswald等1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：8676-8680)、TNFR-IgG(Ashkenazi等，1991，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88：10535-10539)、小鼠制品TBP-1(Serono/Yeda)、疫苗CytoTAb(Protherics)、反义分子104838(ISIS)、肽RDP-58(SangStat)、沙利度胺(Celgene)、CDC-801(Celgene)、DPC-333(Dupont)、VX-745(Vertex)、AGIX-4207(AtheroGenics)、ITF-2357(Italfarmaco)、NPI-13021-31(Nereus)、SCIO-469(Scios)、TACE targeter(Immunix/AHP)、CLX-120500(Calyx)、Thiazolopyrim(Dynavax)、金诺芬(Ridaura)(SmithKline Beecham Pharmaceuticals)、奎纳克林(米帕林二氯水合物)、tenidap(Enablex)、黑色素(Large Scale Biological)和抗-p38MAPK制剂(Uriach)。
TNF-α拮抗剂及其剂量、给药途径和推荐用法为本领域所已知，且已经见述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)这类的文献中。
4.2.4抗炎剂
抗炎剂在增生性病症或炎性病症的治疗中取得成功，目前成为这类病症以及其它病症的常见和标准的治疗。本领域技术人员熟知的任何抗炎治疗(例如抗炎剂)可用于本发明的组合物和方法中。抗炎剂的非限制性实例包括各种非甾体抗炎药(NSAID)、甾体抗炎药、β-激动剂、抗胆碱(anticholingeric)制剂、抗组胺药(例如乙醇胺、乙二胺、哌嗪和吩噻嗪)和甲基黄嘌呤。NSAID的实例包括但不限于阿司匹林、布洛芬、水杨酸盐、acetominophen、celecoxib(CELEBREXTM)、双氯芬酸(VOLTARENTM)、依托度酸(LODINETM)、非诺洛芬(NALFONTM)、消炎痛(INDOCINTM)、酮咯酸(ketoralac)(TORADOLTM)、恶丙嗪(DAYPROTM)、萘丁美酮(nabumentone)(RELAFENTM)、舒林酸(CLINORILTM)、托美丁(tolmentin)(TOLECTINTM)、rofecoxib(VIOXXTM)、萘普生(ALEVETM，NAPROSYNTM)、酮洛芬(ACTRONTM)和萘丁美酮(RELAFENTM)。这类NSAIDs通过抑制环氧合酶酶(例如COX-1和/或COX-2)来起作用。甾体抗炎药的实例包括但不限于糖皮质激素、地塞米松(DECADRONTM)、可的松、氢化可的松、泼尼松(DELTASONETM)、泼尼松龙、氟羟泼尼松龙、水杨酰偶氮磺胺吡啶(azulfidine)和类二十烷酸(例如前列腺素、血栓烷和白三烯)。
抗炎剂及其剂量、给药途径和推荐用法为本领域所已知，且已经见述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)这类的文献中。
4.2.5抗癌剂
任何已知可用、已经使用或当前正用于预防、治疗、控制或改善伴随增生性病症(例如癌症)的一种或多种症状的治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)可用于本发明的组合物和方法。预防性制剂或治疗性制剂包括但不限于肽、多肽、融合蛋白、核酸分子、小分子、模拟制剂、合成药物、无机分子和有机分子。癌症治疗的非限制性实例包括化学治疗、放射治疗、激素治疗和/或生物治疗/免疫治疗。
在某些实施方案中，抗癌剂为免疫调节剂，例如化学治疗性制剂。在其它实施方案中，抗癌剂不是免疫调节剂。在具体的实施方案中，抗癌剂为抗血管生成剂。在其它实施方案中，抗癌剂不是抗血管生成剂。
抗癌剂的实例包括但不限于：阿西维辛、阿柔比星、盐酸阿考达唑、阿克罗宁、阿多来新、阿地白介素、六甲蜜胺、安波霉素、醋酸阿美蒽醌、氨鲁米特、安吖啶、anastrozole、安曲霉素、天门冬酰胺酶、曲林菌素、阿扎胞苷、阿扎替派、含氮霉素、巴马司他、苯佐替派、比卡鲁胺、盐酸比生群、bisnafide dimesylate、二膦酸盐/酯(例如帕米膦酸盐/酯(Aredria)、sodium clondronate(Bonefos)、zoledronic acid(Zometa)、阿仑膦酸盐/酯(Fosamax)、依替膦酸盐/酯、ibandornate、cimadronate、利塞膦酸盐/酯和替鲁膦酸盐/酯)、比折来新、硫酸博莱霉素、布喹那钠、溴匹立明、白消安、放线菌素C、卡鲁睾酮、卡醋胺、卡贝替姆、卡铂、卡氮芥、盐酸卡柔比星、卡折来新、西地芬戈、苯丁酸氮芥、西罗霉素、顺氯氨铂、克拉屈滨、crisnatol mesylate、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素D、盐酸柔红霉素、地西他滨、右奥马铂、地扎呱宁、甲磺酸地扎呱宁、地吖醌、docetaxel、阿霉素、盐酸阿霉素、屈洛昔芬、柠檬酸屈洛昔芬、丙酸屈他雄酮、重氮霉素、依达曲沙、盐酸依氟鸟氨酸(eflornithine)、依沙芦星、恩洛铂、恩普氨酯、依匹哌啶、盐酸表柔比星、厄布洛唑、盐酸依索比星、雌二醇氮芥、雌二醇氮芥磷酸钠、依他硝唑、依托波苷、磷酸依托波苷、etoprine、盐酸法倔唑、法扎拉滨、芬维A胺、氟尿苷、磷酸氟达拉滨、氟尿嘧啶、氟西他滨、磷喹酮、福司曲星钠、吉西他滨、盐酸吉西他滨、羟基脲、盐酸依达比星、异环磷酰胺、伊莫福新、白介素-2(包括重组白介素2或rIL2)、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素α-nl、干扰素α-n3、干扰素β-Ia、干扰素-β-Ib、异丙铂、盐酸伊立替康、醋酸兰瑞肽、来曲唑、醋酸亮丙瑞林、盐酸利阿唑、洛美曲索钠、罗氮芥、盐酸洛索蒽醌、马索罗酚、美坦素、盐酸氮芥、抗-CD2抗体、醋酸甲地孕酮、醋酸美仑孕酮、美法仑、美诺立尔、巯基嘌呤、甲氨蝶呤、甲氨蝶呤钠、metopline、美妥替哌、米丁度胺、mitocarcin、mitocromin、丝林霉素、米托马星、丝裂霉素、米托司培、米托坦、盐酸米托蒽醌、麦考酚酸、诺考达唑、诺加霉素、奥马铂、奥昔舒仑、帕利他西、培门冬酶、佩里霉素、溴新斯的明、硫酸培洛霉素、过磷酰胺、哌泊溴烷、哌泊舒凡、盐酸吡罗蒽醌、普卡霉素、普洛美坦、卟吩姆钠、泊非霉素、松龙苯芥、盐酸丙卡巴肼、嘌呤霉素、盐酸嘌呤霉素、吡唑呋喃菌素、利波腺苷、罗谷亚胺、沙芬戈、盐酸沙芬戈、司莫司汀、辛曲秦、sparfosate sodium、司帕霉素、盐酸螺旋锗、螺莫司汀、螺铂、链黑霉素、链佐星、磺氯苯脲、他利霉素、tecogalan sodium、替加氟、盐酸替洛蒽醌、替莫泊芬、替尼泊苷、替罗昔隆、睾内酯、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤、噻替派、噻唑呋林、替拉扎明、托瑞米芬柠檬酸盐、醋酸曲托龙、磷酸曲西立滨、三甲曲沙、醛酸三甲曲沙葡萄糖、曲普瑞林、盐酸妥布氯唑、尿嘧啶氮芥、乌瑞替派、伐普肽、verteporfin、硫酸长春花碱、硫酸长春新碱、长春地辛、硫酸长春地辛、硫酸长春匹定、硫酸长春甘酯、硫酸长春罗辛、酒石酸长春瑞滨、硫酸长春罗定、硫酸长春利定、伏氯唑、折尼铂、净司他丁和盐酸佐柔比星。
其它抗癌药包括但不限于：20-表-1，25-二羟维生素D3、5-乙炔基尿嘧啶、abiraterone、阿柔比星、acylfulvene、腺环戊醇(adecypenol)、阿多来新、阿地白介素、ALL-TK拮抗剂、六甲蜜胺、氨莫司汀、amidox、氨磷汀、氨基果糖酸、氨柔比星、安吖啶、阿那格雷、anastrozole、穿心莲内酯、血管生成抑制剂、拮抗剂D、拮抗剂G、antarelix、抗背部化形态发生蛋白质-1、抗雄激素(前列腺癌)、抗雌激素、抗癌酮(antineoplaston)、反义寡核苷酸、甘氨酸阿非迪霉素、调亡基因调节剂、调亡调节剂、脱嘌呤核酸、ara-CDP-DL-PTBA、精氨酸脱氨基酶、asulacrine、阿他美坦、阿莫司汀、axinastatin 1、axinastatin 2、axinastatin 3、阿扎司琼、azatoxin、重氮酪氨酸、浆果赤霉素III衍生物、balanol、巴马司他、BCR/ABL拮抗剂、苯并二氢卟酚、苯甲酰斯他菌素、β-内酰胺衍生物、beta-alethine、betaclamycin B、桦木酸、bFGF抑制剂、比卡鲁胺、比生群、双吖丙啶基精胺、bisnafide、bistratene A、比折来新、breflate、溴匹立明、布度肽、丁硫氨酸亚砜胺(buthionine sulfoximine)、卡泊三醇、卡弗他丁C、喜树碱衍生物、canarypox IL-2、capecitabine、甲酰胺-氨基-三唑、羧基酰氨基三唑、CaRest M3、CARN 700、软骨来源的抑制剂、卡折来新、酪蛋白激酶抑制剂(ICOS)、粟精、杀菌肽B、西曲瑞克、chlorlns、氯代喹喔啉磺酰胺、西卡前列素、顺卟啉、克拉屈滨、氯米芬类似物、克霉唑、collismycinA、collismycin B、combretastatin A4、combretastatin类似物、conagenin、crambescidin 816、crisnatol、cryptophycin 8、cryptophycin A衍生物、curacinA、环戊蒽醌、cycloplatam、cypemycin、cytarabine ocfosfate、溶细胞因子、cytostatin、dacliximab、地西他滨、去氢膜海鞘素B、地洛瑞林、地塞米松、dexifosfamide、右雷佐生、右维拉帕米、地吖醌、膜海鞘素B、didox、二乙基去甲精胺、二氢-5-氮杂胞苷、9-二氢紫杉醇、dioxamycin、二苯基螺莫司汀、多西他赛、二十二醇、多拉司琼、去氧氟尿苷、屈洛昔芬、屈大麻酚、duocarmycin SA、依布硒、依考莫司汀、依地福新、edrecolomab、eflornithine、榄香烯、乙嘧替氟、表柔比星、epothilone A、epothilone B、依立雄胺、雌莫司汀类似物、雌激素激动剂、雌激素拮抗剂、依他硝唑、磷酸依托泊苷、依西美坦、法倔唑、法扎拉滨、芬维A胺、非格司亭、非那雄胺、flavopiridol、氟卓斯汀、fluasterone、氟达拉滨、盐酸fluorodaunorunicin、福酚美克、福美坦、福司曲星、福莫司汀、gadolinium texaphyrin、硝酸镓、加洛他滨、加尼瑞克、明胶酶抑制剂、吉西他滨、谷胱甘肽抑制剂、HMG CoA还原酶抑制剂(例如阿托伐他汀、cerivastatin、氟伐他汀、lescol、lupitor、洛伐他汀、rosuvastatin和斯伐他汀)、hepsulfam、heregulin、六亚甲基双乙酰氨、金丝桃素、ibandronic acid、依达比星、艾多昔芬、idramantone、伊莫福新、ilomastat、imidazoacridones、咪喹莫特、免疫刺激剂肽、胰岛素类生长因子-1受体抑制剂、干扰素激动剂、干扰素、白介素、碘苄胍、碘阿霉素、ipomeanol，4-、iroplact、伊索拉定、isobengazole、isohomohalicondrin B、伊他司琼、jasplakinolide、kahalalide F、lamellarin-N triacetate、兰瑞肽、leinamycin、来格司亭、硫酸香菇多糖、leptolstatin、来曲唑、白血病抑制因子、白细胞α干扰素、亮丙瑞林+雌激素+孕酮、亮丙瑞林、左旋咪唑、LFA-3TIP(Biogen，Cambridge，MA；美国专利第6,162,432号)、利阿唑、线形聚胺类似物、亲油二糖肽、亲油铂化合物、lissoclinamide 7、洛铂、蚯蚓磷脂、洛美曲索、氯尼达明、洛索蒽醌、洛伐他汀、洛索立宾、lurtotecan、lutetiumtexaphyrin、lysofylline、溶菌肽、美登碱、mannostatin A、marimastat、马索罗酚、maspin、基质溶解因子抑制剂、基质金属蛋白酶抑制剂、美诺立尔、merbarone、meterelin、甲硫氨酸酶、甲氧氯普胺、MIF抑制剂、米非司酮、米替福新、米立司亭、错配双链RNA、米托胍腙、二溴卫矛醇、丝裂霉素类似物、米托萘胺、mitotoxin fibroblast growth factor-saporin、米托蒽醌、莫法罗汀、莫拉司亭、单克隆抗体、人绒膜促性腺激素、氮磷酰基脂A+分枝杆菌夏宝壁骨架、莫哌达醇、耐多种药物基因的抑制剂、基于多肿瘤抑制剂的治疗、芥子抗癌剂、mycaperoxide B、分支杆菌细胞壁提取物、myriaporone、N-乙酰地那林、N-取代苯甲酰胺、那法瑞林、nagrestip、纳洛酮+喷他佐辛、napavin、naphterpin、那托司亭、萘达铂、nemorubicin、奈立膦酸、中性肽链内切酶、尼鲁米特、nisamycin、氧化氮调节剂、nitroxide antioxidant、nitrullyn、O6-苄基鸟嘌呤、奥曲肽、okicenone、寡核苷酸、奥那司酮、昂丹司琼、oracin、口服细胞因子诱导剂、奥马铂、奥沙特隆、奥沙利铂、oxaunomycin、帕利他西、帕利他西类似物、帕利他西衍生物、palauamine、palmitoylrhizoxin、帕米膦酸、panaxytriol、帕诺米芬、parabactin、帕折普汀、培门冬酶、peldesine、戊聚糖多硫酸钠、喷司他丁、pentrozole、全氟溴烷、过磷酰胺、紫苏醇、phenazinomycin、乙酸苯酯、磷酸酯酶抑制剂、溶链菌制剂、盐酸毛果芸香碱、吡柔比星、吡曲克辛、placetin A、placetin B、纤溶酶原活化剂抑制剂、铂络合物、铂化合物、铂-三胺络合物、卟吩姆钠、泊非霉素、泼尼松、丙基双吖啶酮、前列腺素J2、蛋白酶体抑制剂、基于蛋白A的免疫调节剂、蛋白激酶C抑制剂、蛋白激酶C抑制剂，microalgal、蛋白酪氨酸磷酸酯酶抑制剂、嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂、红紫素、pyrazoloacridine、pyridoxylated hemoglobin polyoxyethylene conjugate、raf拮抗剂、raltitrexed、雷莫司汀、ras法尼基蛋白转移酶抑制剂、ras抑制剂、ras-GAP抑制剂、retelliptine demethylated、依替膦酸铼Re 186、rhizoxin、核酶、RII retinamide、罗谷亚胺、rohitukine、罗莫肽、罗喹美克、rubiginoneB1、ruboxyl、沙芬戈、saintopin、SarCNU、sarcophytol A、沙格司亭、Sdi1模拟制剂、司莫司汀、源自衰老的抑制剂1、有义寡核苷酸、信号转导抑制剂、信号转导调节剂、信号链抗原结合蛋白、西佐喃、索布佐生、sodium borocaptate、苯乙酸钠、solverol、促生长因子结合蛋白、索纳明、sparfosic acid、spicamycin D、螺莫司汀、splenopentin、spongistatin 1、squalamine、干细胞抑制剂、干细胞分裂抑制剂、stipiamide、基质分解素抑制剂、sulfinosine、超活性的血管活性肠肽拮抗剂、suradista、苏拉明、斯烷宁、合成糖胺聚糖、他莫司汀、5-氟尿嘧啶、甲酰四氢叶酸、他莫昔芬甲碘化物、牛磺莫司汀、他扎罗汀、tecogalan sodium、替加氟、tellurapyrylium、端粒酶抑制剂、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、tetrachlorodecaoxide、tetrazomine、thaliblastine、thiocoraline、血小板生成素、血小板生成素模拟制剂、thymalfasin、胸腺生成素受体激动剂、胸腺曲南、甲状腺刺激激素、tin ethyl etiopurpurin、替拉扎明、二茂基二氯化肽、topsentin、托瑞米芬、全能干细胞因子、翻译抑制剂、维甲酸、三乙酰基尿核苷、曲西立滨、三甲曲沙、曲普瑞林、托烷司琼、妥罗雄脲、酪氨酸激酶抑制剂、酪氨酸磷酸化抑制剂、UBC抑制剂、ubenimex、泌尿生殖静脉窦来源的生长抑制因子、尿激酶受体拮抗剂、伐普肽、variolin
B、载体系统(红细胞基因治疗)、沙利度胺、维拉雷琐、veramine、verdins、verteporfin、长春瑞滨、vinxaltine、伏氯唑、zanoterone、折尼铂、亚苄维和zinostatin stimalamer。
在更为具体的实施方案中，本发明还包括联合施用本发明的化合物和一种或多种治疗(例如但不限于表2所公开的抗癌剂)，优选用于治疗乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、前列腺癌、结肠癌和肺癌。
                                           表2
  治疗性制剂                    剂量/给药方式/剂型
  盐酸多柔比星(多柔比星RDF和多柔比星PFS) 静脉 第1天60-75mg/m2 21天间隔
  盐酸表柔比星(EllenceTM) 静脉 每个周期第1天100-120mg/m2或均匀分配并在周期的第1-8天给药 3-4周周期
  氟尿嘧啶 静脉 药物规格：5ml和10ml小瓶(分别含有250和500mg氟尿嘧啶)
  多西他赛(Taxotere) 静脉 1小时内60-100mg/m2 每3周1次
  帕利他西(Taxol) 静脉 3小时内175mg/m2 共4个疗程，每3周1次(与含有多柔比星的联合化学治疗顺序给药)
  柠檬酸他莫昔芬(Nolvadex) 口服(片剂) 20-40mg多于20mg的剂量应按分开剂量给药(早晨和晚上) 每天
  注射用亚叶酸钙 静脉或肌内注射 药物规格：350mg小瓶 文本未指明剂量PDR 3610
  luprolide acetate(Lupron) 单剂皮下注射 1mg(0.2mL或20单位标志) 每天1次
  氟他胺(Eulexin) 口服(胶囊) 250mg(每粒胶囊含125mg氟他胺) 按8小时间隔每天3次(日剂量总共750mg)
  尼鲁米特(Nilandron) 口服(片剂) 300mg或150mg(每片含50或150mg尼鲁米特) 每天300mg，共30天，接着每天一次150mg
  比卡鲁胺(Casodex) 口服(片剂) 50mg(每片含50mg比卡鲁胺) 每天1次
  孕酮 注射 USP 50mg/ml芝麻油
  酮康唑(Nizoral) 乳膏 2％乳膏根据症状每天涂敷1次或2次
  泼尼松 口服(片剂) 初始剂量可为5mg到60mg/天，取决于受治疗的具体疾
病实体
  雌莫司汀磷酸钠(Emcyt) 口服(胶囊) 14mg/kg体重(即每10kg或221b体重一粒140mg胶囊) 每天按3或4个分剂量给药
  依托泊苷或VP-16 静脉 5mL的20mg/mL溶液(100mg)
  达卡巴嗪(DTIC-Dome) 静脉 2-4.5mg/kg 每天1次，共10天。可按每4周的间隔重复
  聚苯丙生20卡莫司汀植入剂(BCNU)(亚硝基脲)(Gliadel) 糯米纸囊剂(wafer)置于切除腔中 如果切除腔的尺寸和形状允许，放置8个糯米纸囊剂，每个含7.7mg卡莫司汀，共61.6mg
  顺铂 注射 [n/a在PDR 861中]药物规格：50ml和100ml多剂量小瓶中的1mg/ml溶液
  丝裂霉素 注射 以5mg和20mg小瓶(含5mg和20mg丝裂霉素)提供
  盐酸吉西他滨(Gemzar) 静脉 已研究了NSCLC-2方案但未确定最优方案4周方案-30分钟内静脉给药1000mg/m23周方案-在30分钟内静脉给予Gemzar 1250mg/m2 4周方案-每个28天周期的第1、8和15日。第1天在注射Gemzar后以100mg/m2静脉给予顺铂3周方案-每个21天周期的第1和8日。第1天在注射Gemzar后以100mg/m2静脉给予顺铂
  卡铂(Paraplatin) 静脉 单制剂治疗：第1天360mg/m2I.V.(输注持续15分钟或更长时间)其它剂量计算：与环磷酰胺联合治疗，剂量调整推荐，处方剂量等。 每4周
  Ifosamide(Ifex) 静脉 每天1.2g/m2 连续5天每3周重复或从血液毒性中恢复后重复
  盐酸托泊替康 静脉 每天1.5mg/m2静脉注射30 从21天疗程的第1
  (Hycamtin)   分钟  天起连续5天
在具体的实施方案中，将放射治疗(包括使用x射线、γ射线和其它放射源来破坏癌细胞)与本发明的抗体联用。在优选的实施方案中，放射治疗通过外部放射束或远程放射治疗来进行，其中放射来自远程源。在其它优选的实施方案中，放射治疗作为内部治疗或近程放射治疗来进行，其中放射源被置于体内接近癌细胞或肿瘤组织处。
癌症治疗及其剂量、给药途径和推荐用法为本领域所已知，且已经见述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)这类的文献中。
4.2.6抗生素
本领域技术人员熟知的抗生素可用于本发明的组合物和方法。抗生素的非限制性实例包括青霉素、头孢菌素、亚胺培南、axtreonam、万古霉素、环丝氨酸、杆菌肽、氯霉素、红霉素、克林霉素、四环素、链霉素、妥布霉素、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、新霉素、壮观霉素、甲氧苄啶、诺氟沙星、利福平、多粘菌素、两性霉素B、制霉菌素、ketocanazole、异烟肼、甲硝哒唑和戊双脒。
抗生素及其剂量、给药途径和推荐用法为本领域所已知，且已经见述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)这类的文献中。
4.2.7抗病毒制剂
本领域技术人员熟知的任何抗病毒制剂都可用于本发明的组合物和方法。抗病毒制剂的非限制性实例包括抑制或降低病毒与其受体的结合、病毒进入细胞而内化、病毒的复制或病毒从细胞中释放的蛋白质、多肽、肽、融合蛋白抗体、核酸分子、有机分子、无机分子和小分子。具体地，抗病毒剂包括但不限于核苷类似物(例如齐多夫定、阿昔洛韦、gangcyclovir、阿糖腺苷、碘苷、曲氟尿苷和利巴韦林)、膦甲酸、金刚烷胺、金刚乙胺、沙奎那韦、茚地纳韦、ritonavir、α-干扰素和其它干扰素以及AZT。
抗病毒制剂及其剂量、给药途径和推荐用法为本领域所已知，且已经见述于例如Physician’s Desk Reference(第56版，2002年)这类的文献中。
4.2.8血管靶向制剂
本领域技术人员熟知的任何血管靶向制剂可用于本发明的组合物和方法(参见，例如Thorpe，P.E.，Clin.Can.Res.10：415-427(2004)，此文献通过引用而纳入本文中)。
血管靶向制剂的非限制性实例包括小分子血管靶向制剂(例如微管去稳定药物、combretastatin A-4磷酸二钠、ZD6126、AVE8062、Oxi 4503、TZT 1027和DMXAA)和基于配体的血管靶向制剂，包括但不限于融合蛋白(例如连接植物毒素gelonin的血管内皮生长因子)、免疫毒素(例如与篦麻蛋白A共轭的endoglin的单克隆抗体)、连接细胞因子的抗体和脂质体包裹的药物。
在一个实施方案中，基于配体的血管靶向制剂包括任何选择性结合肿瘤血管的组分的配体，所述配体连接(例如通过化学交联剂或肽键)能够阻塞肿瘤血管的制剂。选择性结合肿瘤血管组分的配体的实例包括但不限于对准标识物的抗体或肽，与正常组织内皮细胞相比，所述标识物选择性地在肿瘤组织内皮细胞中上调。与正常组织内皮细胞相比选择性地在肿瘤组织内皮细胞上调的标识物的实例包括但不限于炎性介质(例如白介素(IL)-1)诱导的细胞粘结分子和伴随发生于肿瘤血管内皮的高凝血变化的分子。能够阻塞肿瘤血管的制剂的实例包括但不限于凝血诱导蛋白(例如组织因子)、毒素(例如白喉毒素、蓖麻毒、gelonin)、细胞毒制剂(例如多柔比星、neocarzinostatin)、细胞因子(例如白介素-2、白介素-12、肿瘤坏死因子-α)、调亡诱导剂(例如RAF-1基因、线粒体-膜破裂肽)、放射性同位素(例如碘-131、锕-225、铋-213)和脂质体包裹的效应物(例如胞嘧啶阿拉伯糖苷衍生物)。
血管靶向制剂及其剂量、给药途径和推荐用法为本领域所已知，且已经见述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)这类的文献中。
4.3本发明的化合物的用途
本发明涉及将一种或多种本发明的化合物或包含所述化合物的组合物给予个体(优选人类个体)来预防、治疗、控制或改善疾病或病症或其一种或多种症状的治疗方法。在一个实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善疾病或病症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物给予需要的个体。
本发明还提供了预防、治疗、控制或改善疾病或病症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将一种或多种本发明的化合物和一种或多种当前正用、已用或已知可用于预防、治疗或改善伴随所述疾病或病症的一种或多种症状的治疗(例如一种或多种预防性制剂或治疗性制剂)给予需要它们的个体。本发明的联合治疗的预防性制剂或治疗性制剂可按顺序或同时给药。在一个具体的实施方案中，本发明的联合治疗包括一种或多种化合物和至少一种与所述化合物具有相同作用机理的其它治疗(例如另一种预防性制剂或治疗性制剂)。在另一个具体的实施方案中，本发明的联合治疗包括一种或多种本发明的化合物和至少一种与所述化合物具有不同作用机理的其它治疗(例如另一种预防性制剂或治疗性制剂)。在某些实施方案中，本发明的联合治疗通过与各化合物共同作用来获得加成的或协同的效果来提高一种或多种本发明的化合物的预防或治疗效果。在某些实施方案中，本发明的联合治疗减轻了治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)所伴随的副作用。
联合治疗的预防性制剂或治疗性制剂可在同一药物组合物中给予个体(优选人类个体)。在可选择的实施方案中，联合治疗的预防性制剂或治疗性制剂可在不同的药物组合物中同时给予个体。预防性制剂或治疗性制剂可通过相同或不同的给药途径给予个体。
在一个具体的实施方案中，将包含一种或多种本发明的化合物的药物组合物给予个体(优选人)来预防、治疗、控制或改善伴随疾病或病症的一种或多种症状。根据本发明，本发明的药物组合物还可包含当前正用、已用或已知可用于预防、治疗或改善伴随疾病或病症的一种或多种症状的一种或多种预防性制剂或治疗性制剂。
可通过给予有效量的一种或多种本发明的化合物来预防、治疗、控制或改善的疾病或病症包括但不限于特征为或伴随有异常血管生成的病症、中枢神经系统病症、增生性病症、炎性病症、自身免疫性病症，通过血管抑制(例如通过血管抑制来阻断血管生成)来预防、控制、治疗或改善的病症，以及通过抑制和/或降低PDE4的表达和/或活性或者通过抑制或降低微管蛋白的聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症。特征为或伴随有血管生成的病症的实例包括但不限于增生性病症(例如癌症)。通过抑制或降低PDE4的表达和/或活性来预防、控制、治疗或改善的病症的实例包括但不限于炎性病症，例如哮喘、炎症、慢性或急性肺阻塞疾病、慢性或急性肺部炎性疾病、炎性肠病、克罗恩氏病、白塞氏病、HSP、结肠炎和再灌注引起的炎症。通过抑制或降低微管蛋白的聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症的实例包括但不限于增生性病症(例如癌症)和非癌性病症(例如银屑癣和纤维化)。
在一个具体的实施方案中，本发明提供了预防、控制、治疗或改善以下疾病或病症的方法，所述疾病或病症包括通过血管抑制(例如通过血管抑制阻断血管生成)来预防、控制、治疗或改善的病症，通过抑制和/或降低PDE4的表达和/或活性或者通过抑制或降低微管蛋白的聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症，当前治疗难以治愈的癌症，或已经对多种药物产生耐药性的癌症，所述方法包括将有效量的一种或多种具有式I的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物给予需要的患者。
在一个实施方案中，所述癌症用秋水仙碱、紫杉烷(taxane)或长春碱难以治愈。
在一个实施方案中，本发明的3，4-二取代的化合物为优选的PDE4抑制剂。在另一个实施方案中，本发明的3，4-二烷氧基取代的化合物为优选的PDE4抑制剂。在另一个实施方案中，本发明的3，4-二甲氧基取代的化合物为优选的PDE4抑制剂。
4.3.1增生性病症
本发明的化合物和包含所述化合物的组合物可用于预防、治疗、控制或改善增生性病症(例如癌症)或其一种或多种症状。不受理论的约束，在一个实施方案中，本发明的化合物结合癌症或肿瘤细胞中的α-或β-微管蛋白亚单位并抑制微管蛋白的聚合或稳定性，从而破坏癌症或肿瘤细胞复制的能力。在一个可选择的实施方案中，本发明的化合物结合血管化肿瘤的内皮细胞的α-或β-微管蛋白亚单位并使这些细胞的形状发生改变。这些内皮细胞形状的改变使得给肿瘤供应血液和氧的血管收缩，从而使得肿瘤萎缩或死亡。
在一个实施方案中，本发明的化合物结合肿瘤细胞或癌细胞的α-或β-微管蛋白亚单位。在另一个实施方案中，本发明的化合物结合血管化肿瘤的内皮细胞的α-或β-微管蛋白亚单位。在一个具体的实施方案中，本发明的化合物可用于预防、控制、治疗或改善对微管蛋白结合制剂敏感的癌症。在另一个实施方案中，本发明的化合物可用于预防、控制、治疗或改善对微管蛋白结合制剂耐受的癌症。
在另一个实施方案中，本发明提供了抑制癌细胞或肿瘤细胞增殖的方法，所述方法包括将癌细胞或肿瘤细胞与有效量的本发明的化合物接触。在一个实施方案中，所述癌细胞或肿瘤细胞对传统的癌症治疗具有耐受。在另一个实施方案中，所述癌细胞或肿瘤细胞为对多种药物具有耐药性的癌细胞或肿瘤细胞。
本发明提供了预防、治疗、控制或改善伴随有细胞过度增生，特别是上皮细胞过度增生(例如在哮喘、COPD、肺部纤维化、支气管高反应性、银屑病、淋巴增生性病症和脂溢性皮炎中)和内皮细胞过度增生(例如在再狭窄、过度增生性血管疾病、白塞氏综合症、动脉粥样硬化和黄斑变性中)的非癌性病症的一种或多种症状的方法，所述方法包括将一种或多种本发明的化合物给予需要的个体。本发明还提供了预防、治疗、控制或改善伴随细胞过度增生的非癌性病症的方法，所述方法包括将一种或多种本发明的化合物和一种或多种可用于预防，治疗，控制或改善所述病症的其它治疗(例如一种或多种其它预防性制剂或治疗性制剂)给予需要的个体。
在一个具体的实施方案中，本发明提供了预防、控制、治疗或改善伴随有细胞过度增生(例如白塞氏综合症、结节病、瘢痕瘤、肺部纤维化、黄斑变性和肾脏纤维化)的非癌性病症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物给予需要的个体。在另一个实施方案中，本发明提供了预防、控制、治疗或改善伴随有细胞过度增生(例如白塞氏综合症、结节病、瘢痕瘤、肺部纤维化和肾脏纤维化)的非癌性病症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物和预防或治疗有效量的一种或多种其它治疗(例如一种或多种预防性制剂或治疗性制剂)给予需要的个体。
本发明包括预防、治疗、控制或改善个体的伴随有细胞过度增生的病症的一种或多种症状的方法，所述个体用这类病症的常规治疗难以治愈，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物给予个体。本发明还提供了预防、控制、治疗或改善个体的伴随有细胞过度增生的非癌性病症的方法，所述个体用这类病症的常规治疗难以治愈的，所述方法包括将一种或多种本发明的化合物和一种或多种用于预防，治疗，控制或改善所述病症的其它治疗(例如一种或多种其它预防性制剂或治疗性制剂)给予需要的个体。
本发明提供了预防、治疗、控制或改善癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将一种或多种本发明的化合物给予需要的个体。本发明还提供了预防、治疗、控制或改善癌症的方法，其中一种或多种本发明的化合物与一种或多种用于预防，治疗，控制或改善癌症或继发症状的其它治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)联合施用。
在一个具体的实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物给予需要的个体。在另一个实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善癌症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物和预防或治疗有效量的用于预防、治疗、控制或改善癌症或继发症状(例如病毒、细菌或真菌感染)的一种或多种治疗(例如一种或多种预防性制剂或治疗性制剂)给予需要的个体。
本发明的化合物特别可用作血管靶向制剂。不受理论的约束，可以认为本发明的化合物为有效的抗肿瘤制剂，因为它们能够阻塞肿瘤血管(例如已存在的血管)使得肿瘤细胞由于缺血和出血性坏死而死亡。因此，本发明的化合物可用于破坏或瓦解肿瘤的血管系统。
本发明的化合物作为对抗肿瘤内部血管的血管靶向制剂特别有效，因此可与有效对抗外周肿瘤细胞的抗肿瘤剂(例如抗血管生成剂)联合而协同使用。不受理论的约束，本发明的化合物由于其靶向肿瘤细胞血管系统的能力对远离血管的药物渗透不良的位置的肿瘤细胞特别有效。这类肿瘤细胞更可能对放射和药物治疗耐受。因此，本发明的化合物对于已对传统癌症治疗耐受的肿瘤和肿瘤细胞特别有效。
在一个实施方案中，本发明提供了靶向、阻断或破坏肿瘤血管系统功能的方法，所述方法包括将肿瘤与有效量的本发明的化合物接触。
在另一个实施方案中，本发明提供了靶向、阻断或破坏肿瘤血管内皮的方法，所述方法包括将肿瘤与有效量的本发明的化合物接触。
在另一个实施方案中，本发明提供了阻塞已存在的肿瘤血管的方法，所述方法包括将肿瘤与有效量的本发明的化合物接触。
在另一个实施方案中，本发明提供了杀死肿瘤细胞的方法，所述方法包括将肿瘤细胞与有效量的本发明的化合物接触。
在另一个实施方案中，本发明提供了在肿瘤细胞中产生急性血管塌陷的方法，所述方法包括将肿瘤细胞与有效量的本发明的化合物接触。
在另一个实施方案中，本发明提供了通过血管抑制阻断血管生成的方法，所述方法包括将细胞与有效量的本发明的化合物接触。
在另一个实施方案中，本发明提供了通过血管抑制来抑制肿瘤生长的方法，所述方法包括将有效量的本发明的化合物给予需要的个体。
不受理论的约束，可以认为由于本发明的化合物同时具有血管靶向活性(特别有效地对抗中心肿瘤细胞)和抗血管生成活性(特别有效地对抗外周肿瘤细胞)，本发明的化合物对于根除大多数肿瘤特别有效，在一个实施方案中完全根除肿瘤。因此，由于作为血管靶向制剂和抗血管生成剂的双重活性的协同效果，本发明的化合物特别有效地对抗肿瘤。
本发明的化合物可以体外或以离体方式用于控制、治疗或改善某些癌症(包括但不限于白血病和淋巴瘤)，这种治疗包括自体干细胞移植。这可包括多步骤过程，其中采集个体的自体造血干细胞并清除所有癌细胞，随后在伴随或不伴随高剂量放射治疗下给予高剂量的本发明的化合物来根除个体剩余的骨髓细胞群，将干细胞移植物回输给个体。随后在骨髓功能恢复时提供支持护理，个体康复。
一种或多种本发明的化合物可用作第一、第二、第三、第四或第五线癌症治疗。本发明提供了预防、治疗、控制或改善个体的癌症或其一种或多种症状的方法，所述个体用这类癌症的常规治疗是难以治愈的，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物给予所述个体。当癌细胞的至少一些重要部分没有被杀死或它们的细胞分裂停止对治疗响应，则癌症可被确定为对治疗是难以治愈的。这种判定可在体内或体外通过任何本领域已知用于评估癌细胞治疗有效性的方法进行，在这里采用本领域接受的“难以治愈的”的含义。在一个具体的实施方案中，当癌细胞的数目没有显著减少或在治疗后增多时，癌症是难以治愈的。
本发明提供了预防、控制、治疗或改善个体的癌症或其一种或多种症状的方法，所述个体对这类癌症的现有单制剂治疗是难以治愈的，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物和用于预防、治疗、控制或改善癌症或继发症状的预防或治疗有效量的一种或多种治疗(例如一种或多种预防性制剂或治疗性制剂)给予所述个体。本发明还提供了预防、治疗、控制或改善癌症或继发症状的方法，所述方法将一种或多种本发明的化合物与任何其它治疗(例如放射治疗、化学治疗或手术)联合给予个体，所述个体已证明对其它治疗是难治愈的，但不对这种治疗是难治愈的。
在一个具体的实施方案中，本发明提供了预防、控制、治疗或改善癌症(用秋水仙碱、帕利他西、多西他赛和/或长春碱和/或其它长春碱是难治愈的)或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物给予需要的个体。在另一个实施方案中，本发明提供了预防、控制、治疗或改善癌症(用秋水仙碱、帕利他西、多西他赛和/或长春碱难以治愈)或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物和预防或治疗有效量的一种或多种其它治疗给予需要的个体。根据本发明，其它治疗可为化学治疗性制剂、免疫调节剂、抗血管生成剂、放射治疗或手术。
本发明提供了预防、治疗、控制或改善患有癌症并由于先前接受的其它癌症治疗而产生免疫抑制的患者的方法。本发明还提供了预防、治疗、控制或改善癌症的方法，其中已证明或可证明化学治疗、放射治疗、激素治疗和/或生物治疗/免疫治疗的毒性过大，即对接受治疗的个体产生无法接受或无法忍受的副作用。此外，本发明提供了通过向已接受治疗且没有任何疾病活性的个体给予一种或多种本发明的化合物来预防癌症复发的方法。
可用本发明的方法来预防、控制、治疗或改善的癌症包括但不限于赘生物、肿瘤(恶性和良性)和转移瘤，或任何特征为失控的细胞生长的疾病或病症。癌症可为原发性或转移性癌症。可根据本发明的方法来预防、控制、治疗或改善的癌症的具体实例包括但不限于以下部位的癌症：头部、颈部、眼部、口腔、咽喉、食管、胸部、骨骼、肺部、结肠、直肠、胃、前列腺、乳腺、卵巢、肾、肝、胰腺和脑部。其它的癌症包括但不限于：白血病(例如但不限于急性白血病，急性淋巴细胞白血病，急性髓细胞白血病例如髓母细胞白血病、前髓细胞白血病、骨髓单核细胞白血病、单核细胞白血病、红白血病和骨髓增生异常综合症，慢性白血病例如但不限于慢性髓细胞(粒细胞)白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病；奥斯勒氏病；淋巴瘤例如但不限于何杰金病、非何杰金病；多发性骨髓瘤例如但不限于无症状多发性骨髓瘤(smoldering multiple myeloma)、无分泌功能骨髓瘤、骨硬化骨髓瘤、浆细胞性白血病、孤立性浆细胞瘤和髓外浆细胞瘤；瓦氏(Waldenstrom′s)巨球蛋白血症；未定性的单克隆丙种球蛋白病；良性单株丙种球蛋白病；重链病；骨骼和结缔组织肉瘤，例如但不限于骨骼肉瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、尤因氏肉瘤、恶性巨细胞瘤、骨骼纤维肉瘤、脊索瘤、骨膜肉瘤、软组织肉瘤、血管肉瘤(血管肉瘤)、纤维肉瘤、卡波济氏肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、淋巴管肉瘤、神经鞘瘤、横纹肌肉瘤、滑膜肉瘤；脑部肿瘤例如但不限于神经胶质瘤、星形细胞瘤、脑干神经胶质瘤、室管膜瘤、少突胶质细胞瘤、非神经胶质瘤、听神经瘤、颅咽管瘤、成神经管细胞瘤、脑膜瘤、松果体瘤、成松果体细胞瘤、原发性脑淋巴瘤；乳腺癌包括但不限于腺癌、小叶(小细胞)癌、管内癌、髓样乳腺癌、粘蛋白乳腺癌、管状乳腺癌、乳头状乳腺癌、佩吉特氏病和炎性乳腺癌；肾上腺癌例如但不限于嗜铬细胞瘤和肾上腺皮质癌；甲状腺癌例如但不限于乳头状或滤泡状甲状腺癌、髓样甲状腺癌和退行性甲状腺癌；胰腺癌例如但不限于胰岛瘤、促胃液素瘤、胰高血糖素瘤、血管活性肠肽瘤、生长激素抑制素分泌瘤和类癌瘤或胰岛细胞瘤；垂体癌例如但不限于库欣氏综合症、催乳素分泌瘤、肢端肥大症和尿崩病(diabetes insipius)；眼癌例如但不限于眼黑素瘤例如虹膜黑素瘤、脉络膜黑素瘤、睫状体黑素瘤和视网膜母细胞瘤；睾丸鞘膜癌例如鳞状细胞癌、腺癌和黑素瘤；阴道癌例如鳞状细胞癌、黑素瘤、腺癌、基底细胞癌、肉瘤和佩吉特氏病；子宫颈癌例如但不限于鳞状细胞癌和腺癌；子宫癌例如但不限于子宫内膜癌和子宫肉瘤；卵巢癌例如但不限于卵巢上皮癌、交界瘤、生殖细胞瘤和间质瘤；食管癌例如但不限于鳞状癌、腺癌、腺样囊性癌、粘液表皮样癌、腺鳞状上皮癌、肉瘤、黑素瘤、浆细胞瘤、疣状癌和燕麦(小细胞)细胞癌；胃癌例如但不限于腺癌、蕈伞样(息肉状)、溃疡、表面扩散、弥漫性扩散、恶性淋巴瘤、脂肉瘤、纤维肉瘤和癌肉瘤；结肠癌；直肠癌；肝癌例如但不限于肝细胞癌和肝胚细胞瘤、胆囊癌例如腺癌；胆管癌例如但不限于乳头状、结节状和弥漫性癌；肺癌例如非小细胞肺癌、鳞状细胞癌(表皮样癌)、腺癌、大细胞癌和小细胞肺癌；睾丸癌例如但不限于生殖肿瘤，精原细胞瘤，退行性、经典(典型)的精细胞非精原细胞瘤，胚胎癌，畸胎瘤，绒毛膜癌(卵黄囊肿瘤)；前列腺癌例如但不限于腺癌，平滑肌肉瘤和横纹肌肉瘤；阴茎癌；口腔癌例如但不限于鳞状细胞癌；基底癌；唾液腺癌例如但不限于腺癌、粘液表皮样癌和腺囊癌；咽癌例如但不限于鳞状细胞癌和疣；皮肤癌例如但不限于基底细胞癌、鳞状细胞癌和黑素瘤、表浅扩散的黑素瘤、结节性黑素瘤、着色斑恶性黑素瘤、肢端着色斑性黑素瘤；肾癌例如但不限于肾细胞癌、腺癌、肾上腺样瘤、纤维肉瘤、移行细胞癌(肾盂和/或uterer)；肾母细胞瘤；膀胱癌例如但不限于移行细胞癌、鳞状细胞癌、腺癌、癌肉瘤。此外，癌症包括粘液肉瘤、骨肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管内皮细胞瘤、间皮瘤、滑膜瘤、成血管细胞瘤、上皮癌、囊腺癌、支气管癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌和乳头状腺癌(有关这类病症的评论参见Fishman等，1985，Medicine，第二版，J.B.Lippincott Co.，Philadelphia andMurphy等，1997，Informed Decisions：The Complete Book of CancerDiagnosis，Treatment，and Recovery，Viking Penguin，Penguin Books U.S.A.，Inc.，United States of America)。还可以认为由调亡失常引起的癌症也可用本发明的方法和组合物来治疗。这类癌症可包括但不限于滤泡淋巴瘤、p53突变癌，乳腺、前列腺和卵巢的激素依赖性肿瘤，以及癌前病变例如家族性腺瘤息肉病和骨髓发育异常综合征。
在一个具体的实施方案中，根据本发明的方法来预防、控制、治疗或改善的癌症为前列腺癌、乳腺癌、骨癌、黑素瘤、肺癌和卵巢癌。在另一个实施方案中，根据本发明的方法来预防、控制、治疗或改善的癌症为转移性肿瘤，包括但不限于已经或可能转移到骨胳的肿瘤(非限制性实例为已经转移或有可能转移到骨胳的前列腺癌、乳腺癌和肺癌)、已经或可能转移到肺的肿瘤、已经或可能转移到脑的肿瘤、已经或可能转移到个体的其它器官或组织的肿瘤。在另一个实施方案中，根据本发明的方法来预防、控制、治疗或改善的癌症不伴随TNF-α的表达和/或活性。
4.3.2炎性病症
一种或多种本发明的化合物和包含所述化合物的组合物可用于预防、治疗、控制或改善炎性病症或其一种或多种症状。本发明的化合物或包含所述化合物的组合物还可与一种或多种用于预防、治疗、控制或改善炎性病症或其一种或多种症状的其它治疗(例如一种或多种其它预防性制剂或治疗性制剂)联合施用。
在一个具体的实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善炎性病症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物给予需要的个体。在另一个实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善炎性病症或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物和预防或治疗有效量的一种或多种其它治疗(例如一种或多种其它预防性制剂或治疗性制剂)给予需要的个体。
本发明提供了预防、控制、治疗或改善个体的炎性病症或其一种或多种症状的方法，所述个体用这类炎性病症的常规治疗(例如甲胺蝶呤和TNF-α拮抗剂(例如REMICADETM或ENBRELTM))是难以治愈的，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物给予所述个体。本发明还提供了预防、治疗、控制或改善个体的炎性病症或其一种或多种症状的方法，所述个体用这类炎性病症的现有单一制剂治疗是难以治愈的，所述方法包括将预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物和预防或治疗有效量的一种或多种其它治疗(例如一种或多种其它预防性制剂或治疗性制剂)给予所述个体。本发明还提供了通过将一种或多种本发明的化合物与任何其它治疗联合给予患者来预防、治疗、控制或改善炎性病症的方法，所述患者已证明用其它治疗是难以治愈的，但用这种治疗不是难以治愈的。本发明还提供了预防、治疗、控制或改善炎性病症的可选择性方法，其中另一种治疗已经证明或可能证明毒性太大，即对接受治疗的个体产生无法接受或无法忍受的副作用。此外，本发明通过给予已接受治疗且没有任何疾病活性的患者一种或多种本发明的化合物而提供了预防炎性病症复发的方法。
可用本发明的方法预防、控制、治疗或改善的炎性病症的实例包括但不限于哮喘、变应性紊乱、特征为1型介导的炎症的炎性病症、特征为2型介导的炎症的炎性病症、纤维化疾病(例如肺纤维化)、银屑病、多发性硬化、系统性红斑狼疮、慢性阻塞性肺病(COPD)、脑炎(encephilitis)、炎性肠病(例如克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)、缺血性再灌注损伤、痛风、白塞氏综合症、脓毒性休克、未分化脊椎关节病、未分化关节病、关节炎、类风湿性关节炎(少年和成人)、骨关节炎、牛皮癣关节炎、炎性骨质溶解、脓毒症、脑膜炎和慢性病毒或细菌感染导致的慢性炎症。在一个具体的实施方案中，根据本发明的方法来预防、治疗、控制或改善的炎性病症为以2型介导的炎症为特征的炎性病症。2型介导的炎症的特征为嗜酸性和嗜碱性组织浸润和/或广泛的肥大细胞脱颗粒，该过程依赖表面结合的IgE的交联。在另一个实施方案中，根据本发明的方法来预防、治疗、控制或改善的炎性病症为哮喘、白塞氏综合症、关节炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺纤维化、肾纤维化、痛风或变应性紊乱。
在一个具体的实施方案中，将有效量的一种或多种本发明的化合物与有效量的一种或多种用于预防、治疗、控制或改善哮喘或其一种或多种症状的治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)联合给予个体。这类治疗的非限制性实例包括但不限于肾上腺素能激动剂(例如儿茶酚胺(例如肾上腺素、异丙肾上腺素和异他林)、雷琐辛(例如奥西那林、特布他林和非诺特罗)、水杨醇(例如沙丁胺醇))、抗胆碱能药(例如硫酸阿托品、甲基硝酸阿托品和异丙托溴铵(ATROVENTTM))、β2-激动剂(例如abuterol(VENTOLINTM和PROVENTILTM)、比托特罗(TORNALATETM)、左沙丁胺醇(XOPONEXTM)、奥西那林(ALUPENTTM)、吡布特罗(MAXAIRTM)、terbutlaine(BRETHAIRETM和BRETHINETM)、沙丁醇胺(PROVENTILTM、REPETABSTM和VOLMAXTM)、福莫特罗(FORADIL AEROLIZERTM)和沙美特罗(SEREVENTTM和SEREVENT DISKUSTM))、皮质类固醇(例如甲泼尼龙(MEDROLTM)、泼尼松(PREDNI SONETM和DELTASONETM)和泼尼松龙(PRELONETM、PEDIAPREDTM))、糖皮质激素(例如口服类固醇或其它全身或口服类固醇、吸入糖皮质激素)、其它类固醇、免疫抑制剂(例如甲氨蝶呤和金盐)、白三烯改性剂(例如孟鲁司特(SINGULAIRTM)、扎鲁司特(ACCOLATETM)和齐留通(ZYFLOTM))、肥大细胞稳定剂(例如色甘酸钠(INTALTM)和萘多罗米钠(TILADETM))、甲基黄嘌呤(例如茶碱(UNIPHYLTM、THEO-DURTM、SLO-BIDTM、AND TEHO-42TM))和粘液溶解剂(例如乙酰半胱氨酸)。
在一个具体的实施方案中，将有效量的一种或多种本发明的化合物与有效量的一种或多种用于预防、治疗、控制或改善变应性或其一种或多种症状的治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)联合给予个体。所述治疗的非限制性实例包括抗介质药(例如抗组胺药，参见表3)、皮质类固醇、减充血剂、拟交感神经药(例如α-肾上腺素能药和β-肾上腺素能药)、茶碱及其衍生物、糖皮质激素和免疫治疗(例如变应原的反复长期注射、短期脱敏和毒物免疫治疗)。
                       表3-H1抗组胺药
  化学分类和代表性药物   常规日剂量
  乙醇胺二苯醇胺(Diphehydramine)氯马斯汀乙二胺曲吡那敏烷基胺溴苯那敏氯苯那敏曲普利啶(1.25mg/5ml)吩噻嗪异丙嗪哌嗪羟嗪哌啶阿司咪唑(非镇静)阿扎他定西替利嗪赛庚啶 每4-6小时25-50mg每12小时0.34-2.68mg每4-6小时25-50mg每4-6小时4mg；或每8-12小时8-12mg缓释剂型每4-6小时4mg；或每8-12小时8-12mg缓释剂型每4-6小时2.5mg睡前25mg每6-8小时25mg10mg/d每12小时1-2mg10mg/d每6-8小时4mg每12小时60mg
  非索非那定(非镇静)氯雷他定(Loratidine)(非镇静)   每24小时10mg
在一个具体的实施方案中，将有效量的一种或多种本发明的化合物与有效量的一种或多种用于预防、治疗、控制或改善COPD或其一种或多种症状的治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)联合给予个体。所述治疗的非限制性实例包括但不限于支气管扩张药(例如短效β2-肾上腺素能激动剂(例如沙丁胺醇、吡布特罗、特布他林和奥西那林)、长效β2-肾上腺素能激动剂(例如口服持续释放的沙丁醇胺和吸入的沙美特罗)、抗胆碱能药(例如异丙托溴铵)和茶碱及其衍生物(茶碱治疗用量优选10-20ug/mL))、糖皮质激素、外源性α1AT(例如衍生自每周60mg/kg剂量静脉注射的混合人血浆的α1AT)、氧气、肺移植术、肺减容术、气管插管、换气支持、每年接种流感疫苗和用23-价多糖肺炎球菌接种、运动和戒烟。
在一个具体的实施方案中，将有效量的一种或多种本发明的化合物与有效量的一种或多种用于预防、治疗、控制或改善肺部纤维化或其一种或多种症状的治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)联合给予个体。这类治疗的非限制性实例包括氧气、皮质类固醇(例如每日给予泼尼松，开始为1-1.5mg/kg/d(最高达100mg/d)，给药6周，在3-6个月缓慢减少到最小维持剂量0.25mg/kg/d)、细胞毒性药物(例如环磷酰胺，每天一次口服100-120mg，以及硫唑嘌呤，每天一次口服3mg/kg，最高达200mg)、支气管扩张剂(例如短效和长效β2-肾上腺素能激动剂、抗胆碱能药和茶碱及其衍生物)和抗组胺药(例如苯海拉明和多西拉敏)。
抗炎治疗及其剂量、给药途径和推荐用法为本领域所已知，且已经见述于例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)这类的文献中。
4.3.3中枢神经系统病症
一种或多种本发明的化合物和包含所述化合物的组合物可用于预防、治疗、控制或改善中枢神经系统病症或其一种或多种症状。本发明的化合物或包含所述化合物的组合物还可与一种或多种用于预防、治疗、控制或改善中枢神经系统病症或其一种或多种症状的其它治疗(例如一种或多种其它预防性制剂或治疗性制剂)联合施用。
中枢神经系统病症包括但不限于帕金森氏症、运动徐缓、肌体强直、帕金森氏病样震颤、帕金森氏病样步态障碍、运动冻结、抑郁症、长期记忆缺失，鲁宾斯坦-泰比综合征(RTS)、痴呆、睡眠障碍、姿势不稳、运动功能减退症、炎症、突触核蛋白病症、多系统萎缩(multiple systemartrophies)、纹状体黑质变性(striatonigral degeneration)、橄榄体脑桥小脑萎缩、Shy-drager综合征、具有帕金森氏特征的运动神经元疾病、路易小体痴呆(Lewy body dementia)、Tau病理病症、进行性核上性麻痹(progressive supranculear palsy)、皮质基底核变性(corticobasaldegeneration)、额颞叶型痴呆(frontotemporal dementia)、淀粉样病理病症、轻度认知功能障碍、阿尔茨海默病、具有帕金森氏神经机能障碍的阿尔茨海默病、可具有帕金森氏病特征的遗传病症、Wilson氏病、Hallervorden-Spatz疾病、Chediak-Hagashi疾病、SCA-3脊髓小脑性共济失调、X-连结肌张力障碍帕金森氏综合征、亨廷顿病、朊病毒病、运动过度症、舞蹈病、颤搐、张力障碍性震颤、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)、中枢神经系统创伤和肌阵挛。
在本发明的具体实施方案中，本发明的化合物与一种或多种第二有效成分一起使用、给药或配制来治疗、预防或控制中枢神经系统病症。第二有效成分的实例包括但不限于多巴胺激动药、左旋多巴、用于增进左旋多巴治疗的化合物例如单胺氧化酶抑制剂(MAO)和儿茶酚氧位甲基转移酶抑制剂(COMT)、金刚烷胺、抗胆碱能药、止吐剂和其它用于中枢神经系统病症的标准治疗。在另一个实例中，第二有效成分为抗炎制剂包括但不限于非甾体抗炎药(NSAIDs)、甲氨蝶呤、来氟米特、抗疟药和柳氮磺胺吡啶、金盐、糖皮质激素、免疫抑制剂和其它用于中枢神经系统病症的标准治疗。
4.4组合物和施用治疗的方法
本发明提供了用于治疗、预防和改善特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，和通过抑制或降低PDE4的表达和/或活性或者通过抑制或降低微管蛋白的聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症的组合物。在一个具体的实施方案中，组合物包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物。在另一个实施方案中，本发明的组合物包含一种或多种除本发明的化合物之外的预防性制剂或治疗性制剂，或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物，所述预防性制剂或治疗性制剂已知可用于或已用于或当前正用于预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症或通过抑制PDE4或者通过降低或抑制微管蛋白的聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状。在另一个实施方案中，本发明的组合物包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物和一种或多种预防性制剂或治疗性制剂，所述预防性制剂或治疗性制剂已知可用于或已用于或当前正用于预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，或通过抑制PDE4或者通过降低或抑制微管蛋白的聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状。
在一个具体的实施方案中，组合物包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物和一种或多种免疫调节剂。在另一个实施方案中，组合物包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物和一种或多种抗血管生成剂，其中所述抗血管生成剂不是本发明的化合物。在另一个实施方案中，组合物包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物和一种或多种抗炎剂，其中所述抗炎剂不是本发明的化合物。在另一个实施方案中，组合物包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物和一种或多种抗癌剂，其中所述抗癌剂不是本发明的化合物。根据本实施方案，抗癌剂可以是或可以不是免疫调节剂或抗血管生成剂。在另一个实施方案中，组合物包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物和一种或多种抗病毒剂。在另一个实施方案中，组合物包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物或一种或多种抗生素。在另一个实施方案中，组合物包含一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物和一种、两种、三种或多种以下预防性制剂或治疗性制剂的任何组合：免疫调节剂、抗血管生成剂、除免疫调节剂或抗血管生成剂以外的抗癌剂、抗炎剂、抗病毒剂或抗菌剂(例如抗生素)。
在优选的实施方案中，本发明的组合物为药物组合物或独立单位剂型。本发明的药物组合物和独立单位剂型包含预防或治疗有效量的一种或多种预防性制剂或治疗性制剂(例如本发明的化合物或其它预防性制剂或治疗性制剂)和通常一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。在一个具体的实施方案和本文中，术语“药学上可接受的”是指由联邦或州政府管理机构批准或列于美国药典或其它普遍认可的药典中用于动物，更具体地讲用于人的。术语“载体”是指稀释剂、佐剂(例如弗氏佐剂(完全和不完全))、赋形剂或用于施用治疗的媒介物。这类药用载体可为无菌液体，例如水和油(包括那些石油、动物、植物或合成来源的)，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当药物组合物是静脉给药时，水是优选的载体。盐溶液和含水葡萄糖和甘油溶液也可用作液体载体，特别是用于注射溶液。合适的药用载体的实例见述于E.W.Martin编著的″Remington′s PharmaceuticalScience″。
典型的药物组合物和剂型包含一种或多种赋形剂。合适的赋形剂为药学领域技术人员所熟知，合适的赋形剂的非限制性实例包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化钠、干脱脂乳、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。具体的赋形剂是否适合加到药物组合物或剂型取决于本领域已知的各种因素，包括但不限于将剂型给予患者的方式和剂型中具体的有效成分。如果需要，组合物或独立单位剂型还可包含少量润湿剂或乳化剂或pH缓冲剂。
本发明的不含乳糖的组合物可包含本领域熟知且列于例如美国药典(USP)SP(XXI)/NF(XVI)的赋形剂。一般来说，不含乳糖的组合物包含有效成分、粘合剂/填充剂、药学上兼容的和药学上可接受的量的润滑剂。优选的不含乳糖的剂型包括有效成分、微晶纤维素、预凝胶化淀粉和硬脂酸镁。
因为水会促进一些化合物的分解，因此本发明还包括包含有效成分的无水药物组合物和剂型。例如在制药技术中普遍接受加水(例如5％)为模拟长期存储的方法以确定制剂随着时间的属性例如保存期限或稳定性。参见例如(Jens T.Carstensen，Drug Stability：Principles & Practice，2d.Ed.，Marcel Dekker，NY，NY，1995，第379-80页)。实际上，水和热加速一些化合物的分解。因此，水对制剂可具有重要的影响，因为在制剂的制造、处理、包装、存储、运输和使用中普遍会遇到水分和/或湿气。
本发明的无水药物组合物和剂型可通过使用无水或含水量低的成分和低水分或低湿度条件制备。如果预期在制造、包装和/或存储过程中与水分和/或湿气大量接触，含有乳糖和至少一种有效成分(包含伯胺或仲胺)的本发明的药物组合物和剂型优选无水。
无水药物组合物的制备和存储应维持其无水属性。因此，无水组合物优选采用已知防止暴露于水的材料来包装使得它们能够被装在合适的制剂盒中。合适的包装的实例包括但不限于气密封的箔、塑料、单位剂量容器(例如小瓶)、泡罩包装和条带包装(strip packs)。
本发明还包括包含一种或多种降低有效成分分解速率的化合物的药物组合物和剂型。这类化合物(此处指“稳定剂”)包括但不限于抗氧化剂(例如抗坏血酸)、pH缓冲剂或盐缓冲剂。
药物组合物和独立单位剂型可为溶液、悬浮液、乳液、片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、持续释放制剂等形式。口服制剂可包括标准载体，例如药物级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。这类组合物和剂型将包含预防或治疗有效量的预防性制剂或治疗性制剂(优选为纯净形式)和适量的载体从而提供给予患者的适当剂型。制剂应适应给药方式。在一个优选的实施方案中，药物组合物或独立单位剂型为无菌，并且为适合给予个体的形式，所述个体优选为动物个体，更优选为哺乳动物个体，最优选人个体。
本发明的药物组合物的配制与其预期的给药途径相适应。给药途径的实例包括但不限于肠胃外(例如静脉)、真皮下、皮下、口服(例如吸入)、鼻内、透皮(局部)、透粘膜、肿瘤内、滑膜内和直肠给药。在一个具体的实施方案中，组合物按照常规步骤配制为适于经静脉、皮下、肌内、口服、鼻内或局部给予人的药物组合物。在一个优选的实施方案中，药物组合物按照常规步骤配制为经皮下给予人。通常，静脉给药的组合物为无菌等渗含水缓冲溶液。如果需要，组合物还可包含增溶剂和局部麻醉剂(例如利多卡因(lignocane))来减轻注射部位的疼痛。剂型的实例包括但不限于：片剂、囊片、胶囊剂(例如软弹性明胶胶囊)、扁囊剂、糖锭、锭剂、分散剂、栓剂、软膏剂、泥敷剂(泥罨剂)、糊剂、粉剂、敷料、乳膏、膏药、溶液、贴剂、气雾剂(例如鼻喷雾剂或吸入剂)、凝胶剂、适于经口服或粘膜给予个体的液体剂型(包括悬浮液(例如水性或非水性的液体悬浮液、水包油乳剂或油包水液体乳剂)、溶液和酏剂)、适于患者肠胃外给药的液体剂型以及可复原提供适于患者肠胃外给药的液体剂型的无菌固体(例如晶体或无定形固体)。
本发明的剂型的组成、形状和类型通常根据它们的用途而不同。例如，用于急性治疗炎症或相关病症的剂型与用于慢性治疗相同疾病的剂型相比可包含更多量的一种或多种有效成分。同样，治疗有效的剂型可根据不同类型的癌症而不同。类似地，肠胃外剂型比口服剂型在治疗相同疾病或病症中可包含更少量的一种或多种有效成分。本发明所包括的具体剂型的这些或其它方式将彼此不同，并为本领域技术人员熟知。参见例如Remington′s Pharmaceutical Sciences(雷明顿制药科学)，第18版，MackPublishing，Easton PA，1990年。
一般来说，本发明的组合物的成分以单独的或混合为单位剂型来提供，例如在气密的容器(例如标示有效成分的量的安瓿或小药囊(sachette))的干冻干粉或无水浓缩物。如果组合物通过输入给药，可将组合物配制于含有无菌的药物级用水或盐水的输注瓶内。如果组合物通过注射给药，可提供注射用无菌水或盐水安瓿以使各成分在给药前混合。包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物的本发明的典型剂型按每天约1mg到约1000mg给药，每天一次单剂量在清晨给药，但优选在进食的情况下按分剂量全天给药。
4.4.1口服剂型
适于口服给药的本发明的药物组合物可为分散的剂型，例如但不限于片剂(例如咀嚼片)、囊片、胶囊剂和液体(例如调味糖浆剂)。这类剂型包括预定量的有效成分，并可通过本领域技术人员熟知的制药方法制备。参见Remington′s Pharmaceutical Sciences(雷明顿制药科学)，第18版，MackPublishing，Easton PA，1990年。
根据常规制药配料技术，本发明的典型的口服剂型通过将有效成分与至少一种赋形剂充分混合为混合物而制得。赋形剂可具有多种形式，取决于给药所期望的制剂形式。例如适于在口服液体或气雾剂剂型中使用的赋形剂包括但不限于水、乙二醇、油、醇、调味剂、防腐剂和着色剂。适用于固体口服剂型(例如粉剂、片剂、胶囊剂和囊片)的赋形剂的实例包括但不限于淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂。
由于便于给药，使用固体赋形剂的片剂和胶囊剂代表了最有利的口服剂型。如果需要，片剂可通过标准水性或非水性技术来包被。这类剂型可通过任何药学方法制备。一般来说，通过将有效成分与液体载体、细分的固体载体或两者均匀和密切地混合并随后将产物成形为所要求的外观(如果需要)来制备药物组合物和剂型。
例如片剂可通过压缩或模压制备。压缩的片剂可通过将任选与赋形剂混合的自由流动形式(例如粉末或颗粒)的有效成分在合适的机器中压缩而制得。模压的片剂可通过将用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物在合适的机器中模压而制得。
可用于本发明的口服剂型的赋形剂的实例包括但不限于粘合剂、填充剂、崩解剂和润滑剂。适用于药物组合物和剂型的粘合剂包括但不限于玉米淀粉、马铃薯淀粉或其它淀粉、明胶、天然和合成的树胶(例如阿拉伯胶)、海藻酸钠、海藻酸、其它海藻酸盐、粉末状黄蓍胶、瓜尔胶、纤维素及其衍生物(例如乙基纤维素、醋酸纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、预凝胶化淀粉、羟丙基甲基纤维素(例如2208、2906、2910号)、微晶纤维素以及它们的混合物。
适用于此处公开的药物组合物和剂型的填充剂的实例包括但不限于滑石粉、碳酸钙(例如颗粒或粉末)、微晶纤维素、粉末状纤维素、葡萄糖结合剂、高岭土、甘露醇、硅酸、山梨醇、淀粉、预凝胶化淀粉和它们的混合物。本发明的药物组合物中的粘合剂或填充剂通常占药物组合物或剂型重量的约50％到约99％。
适当形式的微晶纤维素包括但不限于商品名为AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103、AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105(获自FMCCorporation，American Viscose Division，Avicel Sales，Marcus Hook，PA)的材料和它们的混合物。一种具体的粘合剂为微晶纤维素和商品名为AVICEL RC-581的羧甲基纤维素钠的混合物。合适的无水或低含水量赋形剂或添加剂包括AVICEL-PH-103TM和Starch 1500LM。
崩解剂用于本发明的组合物中以使片剂在暴露于水性环境中时崩解。含过多崩解剂的片剂可在存储过程中崩解，而崩解剂含量过小的片剂可能无法按所要求的速率或在所要求的条件下崩解。因此，应使用即不过多也不过少的足够量的崩解剂来制备本发明的固体口服剂型，从而不会不利地改变有效成分的释放。所使用的崩解剂的量随制剂类型的不同而变化，并为本领域技术人员所知悉。典型的药物组合物包含约0.5％重量到约15％重量的崩解剂，具体为约1％重量到约5％重量的崩解剂。
可用于本发明的药物组合物和剂型的崩解剂包括但不限于琼脂、海藻酸、碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、波拉克林钾、淀粉羟乙酸钠、马铃薯或木薯淀粉、预凝胶化淀粉、其它淀粉、粘土、其它褐藻胶、其它纤维素、树胶和它们的混合物。
可用于本发明的药物组合物和剂型的润滑剂包括但不限于硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻质矿物油、甘油、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其它二醇、硬脂酸、十二烷基硫酸钠、滑石粉、氢化植物油(例如花生油、棉籽油、葵花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯(ethyl laureate)、琼脂和它们的混合物。其它的润滑剂包括例如syloid硅胶(硅胶)(AEROSIL 200，由W.R.Grace Co.Baltimore，MD制造)、合成二氧化硅的凝结气溶胶(由Degussa Co.Plano，TX销售)、CAB-O-SIL(火成二氧化硅产品，由Cabot Co.Boston，MA销售)和它们的混合物。如果使用，润滑剂的用量通常少于使用其的药物组合物或剂型重量的约1％。
4.4.2缓释剂型
本发明的有效成分可通过本领域技术人员熟知的控释方法或给药装置来给药。实例包括但不限于如美国专利第3,845,770、3,916,899、3,536,809、3,598,123、4,008,719、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556和5,733,566号所述的实例，各文献通过引用而纳入本文中。通过使用羟丙基甲基纤维素、其它聚合物基质、凝胶、渗透膜、渗透系统、多层包衣、微颗粒、脂质体、微球或它们的组合以提供所期望的不同比例的释放方式，这类剂型可用于提供一种或多种有效成分的缓慢和可控的释放。本领域技术人员已知的合适的控释制剂包括此处所述的制剂，可易于选择与本发明的有效成分一起使用。本发明因此包括适于控释并适于口服给药的独立单位剂型，例如但不限于适合于片剂、胶囊剂、胶丸和囊片。
所有控释药品的共同目的是相比它们的非控释对应物而言改善药物治疗。理想地，在药物治疗中使用优化设计的控释制剂的特征为在最短的时间内使用最少量的药物物质来治愈或控制病情。控释制剂的优点包括药物的延长活性、减少的剂量频率和提高的患者顺应性。此外，控释制剂可用于影响作用开始作用时间或其它属性(例如血药浓度)，并因此可影响副(不利)作用的出现。
大多数控释制剂被设计为最初释放一定量的药物(有效成分)来迅速产生所要求的治疗效果，并逐步和连续地释放其它量的药物来在延长的时间周期内维持该水平的治疗或预防效果。为维持药物在体内的这种恒定水平，药物必须以能替代被代谢和排泄的药物量的速率从剂型中释放。可通过各种条件来促进有效成分的控释，所述条件包括但不限于pH、温度、酶、水或其它生理条件或化合物。
4.4.3肠胃外剂型
肠胃外剂型可通过各种途径(包括但不限于皮下、静脉(包括弹丸注射)、肌内和动脉)来给予个体。由于它们的给药通常规避患者对污染物的天然防御屏障，肠胃外剂型优选为无菌或能够在给予患者之前被灭菌。肠胃外剂型的实例包括但不限于注射用溶液、可以被溶解或悬浮于药学上可接受的注射用介质中的干制品、注射用悬浮液和乳液。
可用于提供本发明的肠胃外剂型的合适的媒介物为本领域技术人员所熟知。实例包括但不限于：USP注射用水、水性媒介物(例如但不限于氯化钠注射液、林格氏注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化钠注射液以及乳酸林格氏注射液)、水可混溶的媒介物(例如但不限于乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇)和非水性媒介物(例如但不限于玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯和苯甲酸苄酯)。
提高此处公开的一种或多种有效成分的溶解度的化合物也可以加入本发明的肠胃外剂型中。
4.4.4透皮、局部和粘膜剂型
本发明的透皮、局部和粘膜剂型包括但不限于眼用溶液、喷雾剂、气雾剂、乳膏、洗剂、凝胶剂、溶液、乳剂、悬浮液或本领域技术人员已知的其它形式。参见Remington′s Pharmaceutical Sciences，第16和第18版，Mack Publishing，Easton PA(1980 & 1990)以及Introduction toPharmaceutical Dosage Forms，第4版，Lea & Febiger，Philadelphia(1985)。适用于治疗口腔内粘膜组织的剂型可配制为漱口剂或口凝胶。此外，透皮剂型包括“储存型”或“基质型”贴剂，所述贴剂可用于皮肤并能被保持特定的时间周期以使所期望量的有效成分透入。
可用于提供本发明所包括的透皮、局部和粘膜剂型的合适的赋形剂(例如载体和稀释剂)和其它材料为制药领域技术人员所熟知，并取决于特定药物组合物或剂型将施用的具体组织。据此，典型的赋形剂包括但不限于水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙二醇、1，3-丁二醇、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、矿物油和它们的混合物来形成洗剂、酊剂、乳膏、乳剂、凝胶剂或软膏剂，这些剂型无毒且药学上可接受。如果需要，药物组合物和剂型中还可加入保温液或湿润剂。这类附加成分的实例为本领域所熟知。参见Remington′s Pharmaceutical Sciences，第16和第18版，MackPublishing，Easton PA(1980 & 1990)。
附加组分可早于、同时或晚于本发明的有效成分的治疗，这取决于要治疗的具体的组织。例如，渗透增强剂可有助于将有效成分输送给组织。合适的渗透增强剂包括但不限于：丙酮、各种醇(例如乙醇、油醇和四氢呋喃醇)、烷基亚砜(例如二甲基亚砜)、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、聚乙二醇、吡咯烷酮(例如聚乙烯吡咯烷酮)、Kollidon grades(Povidone、Polyvidone)、尿素和各种水溶性或水不溶性糖酯，例如吐温80(聚山梨醇酯80)和斯潘60(脱水山梨糖醇单硬脂酸酯)。
也可调节药物组合物或剂型的pH或施用药物组合物或剂型的组织的pH以改善一种或多种有效成分的输送。类似地，也可以调节溶剂载体的极性、它的离子强度或张力以改善输送。药物组合物或剂型中还可加入化合物(例如硬脂酸盐/酯)来有利地改变一种或多种有效成分的亲水性或亲油性从而改善输送。从这个角度考虑，硬脂酸盐/酯可用作制剂的脂质媒介物、乳化剂或表面活性剂，用作输送增强剂或渗透增强剂。有效成分的不同的盐、水合物或溶剂化物可用于进一步调节所得组合物的性质。
4.4.5给制剂量和频率
对预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，或通过抑制或减少PDE4或者抑制或降低微管蛋白聚合或稳定性、或通过减轻或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状有效的本发明的化合物或组合物的量将随疾病或症状的性质和严重程度以及有效成分的给药途径而变化。频率和剂量也将根据每个患者的具体因素根据给予的具体治疗(例如治疗性制剂或预防性制剂)、疾病、病症或症状的严重程度，给药途径以及年龄、身体、体重、响应和患者的既往病史而不同。有效剂量可从获自体内或动物模型试验系统的剂量-响应曲线中外推得到。本领域技术人员通过考虑这类因素并根据例如Physician’s Desk Reference(第57版，2003年)的文献所报告和推荐的剂量来选择合适的方案。
小分子的示例性剂量包括毫克或微克量小分子/千克个体或样品重量(例如约1微克/千克到约500毫克/千克、约100微克/千克到约5毫克/千克或约1微克/千克到约50微克/千克)。
一般来说，用于此处所述情况的本发明的化合物的推荐日剂量为约0.01mg到约1000mg/天，以每天一次单剂量给药，优选以分剂量全天给药。在一个实施方案中，日剂量按等分分剂量每天给药两次。具体地说，日剂量应为约5mg到约500mg/天，更具体地，为约10mg到约200mg/天。在控制患者病症期间，治疗应起始于较低剂量，可能约1mg到约25mg，如果需要增加到约200mg到约1000mg/天，以单剂量或分剂量给药，这取决于患者的总体反应。在一些情况下如本领域技术人员所熟知，需要使用超出此处公开范围的有效成分剂量。此外，临床医师或主治医师将知道如何和何时根据个体患者的反应来中断、调整或终止治疗。
不同的治疗有效量可用于不同的疾病或症状，如本领域技术人员所知悉。类似地，上述剂量和剂量频率方案还包括足以预防、控制、治疗或改善这类病症但不足以导致或足以减轻伴随本发明的化合物的不良反应的量。此外，当给予患者多剂量的本发明的化合物时，不是所有的剂量都必须相同。例如可以增加给予患者的剂量来提高化合物的预防或治疗效果，或者也可减少该剂量来减轻具体患者所经受的一种或多种副作用。
在一个具体的实施方案中，给予患者来预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，或通过抑制PDE4、或通过降低或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状的本发明的组合物或本发明的化合物的剂量为150μg/kg，优选250μg/kg、500μg/kg、1mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、75mg/kg、100mg/kg、125mg/kg、150mg/kg或200mg/kg或以上(基于患者体重)。在另一个实施方案中，给予个体来预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，或通过抑制PDE4、或通过降低或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状的本发明的组合物或本发明的化合物的剂量为单位剂量的0.1mg到20mg、0.1mg到15mg、0.1mg到12mg、0.1mg到10mg、0.1mg到8mg、0.1mg到7mg、0.1mg到5mg、0.1到2.5mg、0.25mg到20mg、0.25到15mg、0.25到12mg、0.25到10mg、0.25到8mg、0.25mg到7mg、0.25mg到5mg、0.5mg到2.5mg、1mg到20mg、1mg到15mg、1mg到12mg、1mg到10mg、1mg到8mg、1mg到7mg、1mg到5mg或1mg到2.5mg。
除本发明的化合物之外，已用于或正用于预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，或通过抑制PDE4、或通过降低或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状的预防性制剂或治疗性制剂的剂量可用于本发明的联合治疗中。优选在本发明联合治疗中使用的剂量低于已用于或正用于预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症或通过抑制PDE4，或通过减轻或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状的剂量。当前用于预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，或通过抑制PDE4、或通过降低或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状的制剂的推荐剂量可获自本领域的任何参考文献，包括但不限于Hardman等编著的Goodman & Gilman′s ThePharmacological Basis Of Basis Of Therapeutics(基本治疗的药理学基础)，第9版，1996年，Mc-Graw-Hill，New York；Physician′s Desk Reference(PDR)，第57版，2003，Medical Economics Co.，Inc.，Montvale，NJ，这些文献通过引用而纳入本文中。
在不同的实施方案中，各治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)的给药时间间隔小于5分钟、小于30分钟，1小时、约1小时、约1小时到约2小时、约2小时到约3小时、约3小时到约4小时、约4小时到约5小时、约5小时到约6小时、约6小时到约7小时、约7小时到约8小时、约8小时到约9小时、约9小时到约10小时、约10小时到约11小时、约11小时到约12小时、约12小时到约18小时、18小时到24小时、24小时到36小时、36小时到48小时、48小时到52小时、52小时到60小时、60小时到72小时、72小时到84小时、84小时到96小时，或96小时到120小时。在优选的实施方案中，两种或多种治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)对相同的观察患者给药。
在某些实施方案中，一种或多种本发明的化合物和一种或多种其它治疗(例如预防性制剂或治疗性制剂)循环施用。循环治疗包括给予第一种治疗(例如第一种预防性制剂或治疗性制剂)一段时间，随后给予第二种治疗(例如第二种预防性制剂或治疗性制剂)一段时间，随后给予第三种治疗(例如第三种预防性制剂或治疗性制剂)一段时间，并重复该给药顺序(即循环)，以降低对制剂中的一种发展成耐药，避免或减轻制剂中的一种的副作用和/或改善治疗的效果。
在某些实施方案中，本发明的相同化合物的可重复给药，给药可间隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2个月、75天、3个月或6个月进行。在其它实施方案中，相同预防性制剂或治疗性制剂可重复给药，给药可间隔至少1天、2天、3天、5天、10天、15天、30天、45天、2个月、75天、3个月或6个月进行。
在一个具体的实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，或通过抑制PDE4、或通过降低或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状的方法，所述方法包括将剂量为至少150μg/kg、优选至少250μg/kg、至少500μg/kg、至少1mg/kg、至少5mg/kg、至少10mg/kg、至少25mg/kg、至少50mg/kg、至少75mg/kg、至少100mg/kg、至少125mg/kg、至少150mg/kg或至少200mg/kg或以上的一种或多种本发明的化合物按每3天一次、优选每4天一次、每5天一次、每6天一次、每7天一次、每8天一次、每10天一次、每2周一次、每3周一次或每月一次给予需要的个体。
本发明提供了预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，或通过抑制PDE4、或通过降低或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状的方法，所述方法包括：(a)将一个或多个剂量的预防或治疗有效量的一种或多种本发明的化合物给予需要的个体；和(b)在给予一定剂量的所述本发明的化合物后，监测所述个体的平均绝对淋巴细胞计数。此外，优选所述一定数量的剂量为一种或多种本发明的化合物的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或12份预防或治疗有效量。
在一个具体的实施方案中，本发明提供了预防、治疗、控制或改善病症(例如特征为或伴随有异常血管生成的病症、增生性病症、炎性病症，或通过抑制PDE4、或通过降低或抑制微管蛋白聚合或稳定性来预防、控制、治疗或改善的病症)或其一种或多种症状的方法，所述方法包括：(a)将剂量为至少150μg/kg、优选至少250μg/kg、至少500μg/kg、至少1mg/kg、至少5mg/kg、至少10mg/kg、至少25mg/kg、至少50mg/kg、至少75mg/kg、至少100mg/kg、至少125mg/kg、至少150mg/kg或至少200mg/kg或更多的一种或多种本发明的化合物给予需要的个体；和(b)当所述个体的平均绝对淋巴细胞计数为至少约500细胞/mm3、优选至少约600cells/mm3、至少约700cells/mm3、至少约750cells/mm3、至少约800cells/mm3、至少约850cells/mm3或至少约900cells/mm3时，将一个或多个后续剂量给予所述个体。
4.5生物学测定法
本发明的药物组合物和化合物的抗癌活性可通过利用任何合适的动物模型来测定，所述动物模型包括但不限于具有肿瘤或注射了恶性细胞的SCID小鼠。用于肺癌的动物模型的实例包括但不限于Zhang&Roth所描述的肺癌动物模型(1994，In Vivo 8(5)：755-69)和p53功能破坏的转基因小鼠模型(参见例如Morris等，1998，J La State Med Soc 150(4)：179-85)。用于乳腺癌的动物模型的实例包括但不限于细胞周期蛋白D1过量表达的转基因小鼠(参见例如Hosokawa等，2001，Transgenic Res 10(5)：471-8)。用于结肠癌的动物模型的实例包括但不限于TCR b和p53双敲除小鼠(参见例如Kado等，2001，CancerRes 61(6)：2395-8)。用于胰腺癌的动物模型的实例包括但不限于Panc02小鼠胰腺癌的转移模型(参见例如Wang等，2001，Int J Pancreatol 29(1)：37-46)和产生皮下胰腺肿瘤的纯合裸鼠(nu-numice)(参见例如Ghaneh等，2001，Gene Ther 8(3)：199-208)。用于非霍奇金淋巴瘤的动物模型的实例包括但不限于严重联合免疫缺陷(″SCID″)小鼠(参见例如Bryant等，2000，Lab Invest 80(4)：553-73)和IgHmu-HOX11转基因小鼠(参见例如Hough等，1998，Proc Natl Acad Sci USA 95(23)：13853-8)。用于食管癌的动物模型的实例包括但不限于人乳头瘤病毒16E7型致癌基因的转基因小鼠(参见例如Herber等，1996，J Virol 70(3)：1873-81)。用于直肠癌的动物模型的实例包括但不限于Apc小鼠模型(参见例如Fodde&Smits，2001，Trends Mol Med 7(8)：369-73和Kuraguchi等，2000，Oncogene 19(50)：5755-63)。
本发明的药物组合物和化合物的抗炎活性可通过各种本领域已知的炎性关节炎实验动物模型来测定，见述于Crofford L.J.和Wilder R.L.，″Arthritis and Autoimmunity in Animals″，in Arthritis and Allied Conditions：A Textbook of Rheumatology，McCarty等(编著)，第30章(Lee和Febiger，1993)。炎性关节炎和自身免疫性风湿疾病的实验动物模型和自发动物模型也可用于评估本发明的药物组合物和化合物的抗炎活性。以下为提供用作实例但不具有限制性的示例性评估。
本领域已知且广泛使用的关节炎或炎性疾病的主要动物模型包括：佐剂诱发关节炎大鼠模型、胶原诱发关节炎大鼠和小鼠模型，以及抗原诱发关节炎大鼠、兔和仓鼠模型，所有模型均见述于Crofford L.J.和Wilder R.L.，″Arthritis and Autoimmunity in Animals″，in Arthritis and Allied Conditions：A Textbook of Rheumatology，McCarty等(编著)，第30章(Lee和Febiger，1993)，此文献通过引用而纳入本文中。
本发明的药物组合物和化合物的抗炎活性可通过角叉菜胶诱发的关节炎大鼠模型来评估。在慢性关节炎或炎症的研究中，角叉菜胶诱发关节炎也已经被用于兔、狗和猪。用定量组织形态评估来确定治疗功效。采用角叉菜胶诱发关节炎模型的方法见述于Hansra P.等的″Carrageenan-Induced Arthritis in the Rat″，Inflammation，24(2)：141-155，(2000)。通常也使用本领域已知和描述的酵母多糖诱发的炎症动物模型。
还可利用Winter C.A.等，″Carrageenan-Induced Edema in Hind Paw ofthe Rat as an Assay for Anti-inflammatory Drugs″Proc.Soc.Exp.BiolMed.111，544-547，(1962)中所述方法的修改方案，通过测量大鼠的角叉菜胶诱发的脚爪水肿的抑制来评估本发明药物组合物和化合物的抗炎活性。该测定已用作大多数NSAID的抗炎活性的首要体内筛选，并被认为可预示对于人的效果。本发明的试验药物组合物或化合物的抗炎活性用试验组相对给予媒介物的对照组的后爪重量增长的抑制百分数来表示。
在本发明的一个具体的实施方案中，所使用的实验动物模型为佐剂诱发关节炎大鼠模型，可对比对照组测定体重来确定本发明的药物组合物和化合物的抗炎活性。或者，本发明的药物组合物和化合物的功效可通过测定骨损失的测定法来评估。动物模型例如卵巢切除诱发骨吸收小鼠、大鼠和兔模型为本领域已知用于获得骨形成的动态参数。通过例如Yositake等或Yamamoto等描述的方法，利用显微计算机X射线断层分析和骨组织形态测量分析在体内测定骨体积。Yoshitake等，″Osteopontin-Deficient MiceAre Resistant to Ovariectomy-Induced Bone Resorption，″Proc.Natl.Acad.Sci.96：8156-8160，(1999)；Yamamoto等，″The Integrin Ligand EchistatinPrevents Bone Loss in Ovariectomized Mice and Rats，″Endocrinology139(3)：1411-1419，(1998)，这两文献通过引用而纳入本文中。
此外，用于炎性肠病的动物模型也可用于评估本发明的药物组合物和化合物的功效(Kim等，1992，Scand.J.Gastroentrol.27：529-537；Strober，1985，Dig.Dis.Sci.30(12Suppl)：3S-10S)。溃疡性结炎性肠病和克罗恩氏病为是可以在动物中诱发的人类炎性肠病。可以给动物口服硫酸化多糖包括但不限于支链淀粉、角叉菜、硫酸支链淀粉和硫酸葡聚糖或者化学刺激剂包括但不限于三硝基苯磺酸(TNBS)和醋酸来诱发炎性肠病。
用于哮喘的动物模型也可用于评估本发明的药物组合物和化合物的功效。这类模型的一个实例为鼠过继转移模型，其中接受TH1或TH2的小鼠的空气变应原激发作用导致TH效应细胞迁移到呼吸道，并伴随强烈的嗜中性(TH1)和嗜酸性(TH2)肺粘膜炎症反应(Cohn等，1997，J.Exp.Med.1861737-1747)。
用于银屑病的动物模型也可用于评估本发明的药物组合物和化合物的功效。已研发银屑病的动物模型(参见例如Schon，1999，J.Invest.Dermatol.112：405-410)。
此外，本领域技术人员已知的任何测定法都可用于评估本发明的药物组合物和化合物对此处所公开的病症的预防和/或治疗应用。
本发明的药物组合物和化合物对外周血淋巴细胞计数的影响可通过本领域技术人员已知的标准技术来监测/评估。个体的外周血淋巴细胞计数可通过例如从所述个体获取外周血样品，利用例如Ficoll-Hypaque(Pharmacia)梯度离心将淋巴细胞与外周血的其它组分(例如血浆)分离，并用台盘蓝计数淋巴细胞来测定。可以如下测定个体的外周血T细胞：可通过例如例如Ficoll-Hypaque(Pharmacia)梯度离心将淋巴细胞与外周血的其它组分(例如血浆)分离，用针对T细胞抗原(例如CD3、CD4和CD8)的抗体(与FITC或藻红蛋白结合)标记T细胞，并通过FACS测量T细胞的数目。
本发明的药物组合物和化合物的毒性和/或功效可通过标准药学方法在细胞组织或实验动物中测定，例如测定LD50(半数致死量)和ED50(半数治疗有效量)。毒性和治疗作用的剂量比为治疗指数，它可表示为LD50/ED50比。治疗指数高的本发明的药物组合物和化合物为优选的。尽管可以使用具有毒性副作用的本发明的药物组合物和化合物，应小心设计输送系统，将这类组合物和化合物靶向受影响的组织部位以降低对未受影响的细胞的潜在损害从而减轻副作用。
获自细胞组织测定和动物研究的数据可用于制定本发明的药物组合物和化合物用于人的剂量范围。这类制剂的剂量优选位于包含ED50而毒性很低或没有毒性的流通浓度范围内。取决于所采用的剂型和所用给药途径，所述剂量可在这个范围内变动。对于任何用于本发明方法的制剂，可以一开始从细胞组织测定中估计治疗有效剂量。可以在动物模型中制定剂量来获得包含在细胞组织中测定的IC50(获得最大半数症状抑制的试验化合物浓度)的循环血浆浓度范围。这类信息可用于更精确地测定用于人的剂量。血浆中的水平可通过例如高效液相色谱(HPLC)和放射免疫测定法(RIA)来测定。预防性制剂或治疗性制剂的药代动力学可通过测定参数例如血浆峰值水平(Cmax)、曲线下方面积(AUC，通过将制剂的血浆浓度与时间作图来测定，反映生物可利用率)、化合物的半衰期(t1/2)和最大浓度时间来确定。
预防或治疗增生性病症(例如癌症)的功效可通过例如检测本发明的药物组合物和化合物减轻增生性病症的一种或多种症状、减少癌细胞的增生、减缓癌细胞的扩散或减小肿瘤尺寸的能力来证明。预防或治疗炎性病症的功效可通过例如检测本发明的药物组合物和化合物减轻炎性病症的一种或多种症状、降低T细胞活化、减少T细胞增殖、调节一种或多种细胞因子分布、减少细胞因子的生成，减轻关节、器官或组织的炎症或改善生活质量的能力来证明。炎性疾病活性的变化可通过触痛的和肿胀的关节计数、患者和主治医师对疼痛和疾病活性的总体评分和ESR/CRP来评估。结构型关节损伤的进展可通过手、腕和足的X射线定量记分(Sharp法)来评估。具有炎性病症的人的功能状态的变化可通过健康评定调查表(HAQ)来评估，而生活质量变化用SF-36来评定。
4.6实施例
4.6.1生物学测定法
本发明的化合物可通过以下实施例来测定。普通化学品以及微管蛋白抑制剂Taxol、长春碱和秋水仙碱可获自Sigma(St.Louis，MO)。所有的化合物在进一步被细胞培养液稀释之前溶解于100％DMSO中。除另有说明外，所有样品包括对照物的最终DMSO浓度保持在恒定的0.1％。链霉亲合素包被的钇SPA珠获自Amersham Pharmacia BiotecH(Piscataway，NJ)。[3H]秋水仙碱获自New England Nuclear(Boston，MA)，[3H]紫杉醇和[3H]长春碱获自Morevek Biochemicals(Brea，CA)。纯化的微管蛋白和生物素标记的不含微管结合蛋白的牛脑微管蛋白获自Cytoskeleton，Inc.(Denver，CO)。
人肿瘤细胞系HT29(结肠腺癌，HTB-38)、HT-144(黑素瘤，HTB-63)、HCT 116(直肠癌，CCL-247)、A549(NSCLC，CCL 185)、NIH：OVCAR-3(卵巢腺癌，HTB-161)、PC-3(前列腺癌，CRL-1435)、HCT-15(结肠直肠腺癌，CCL-225)、MCF-7(乳腺癌，HTB-22)、MES-SA(子宫肉瘤，CRL-1976)、MES-SA/MX2(CRL-2274)、MES-SA/Dx5(CRL-1977)获自American TypeCulture Collection(Manassas，VA)。MCF-7/ADR由Signal Research Divisionof Celgene Corporation提供。如ATCC信息表所公布或所述，所有细胞系在37℃，5％CO2的培养基中培养。已经报告了人亲代MCF-7、MES-SA细胞系以及多药物耐受、P-gp 170-过表达的MCF-7/ADR、MES-SA/MX2、MES-SA/Dx5、HCT-15细胞系的详细特征(参见Shan，J.，Mason，J.M.，Yuan，L.，Barcia，M.，Porti，D.，Calabro，A.，Budman，D.，Vinciguerra，V.，和Xu，H.Rab6c，″A new member of the rab gene familv，is involved in drugresistance in MCF7/AdrR cells″，Gene 257：67-75(2000))。HUVEC由Cellular Therapeutic Division of Celgene Corporation提供。通过Ficoll-Hypaque(Pharmacia，Piscataway，NJ)密度离心获得正常供体提供的PBMC。
4.6.1.1细胞增殖测定法
在癌细胞系、HUVEC和人PBMC中通过[3H]胸腺嘧啶核苷掺入测定法来评估细胞增殖。简要地说，在加入化合物之前24小时将细胞接种在96孔微量滴定板上以使它们粘附到板上。每种化合物一式三份进行连续稀释来试验。经过化合物处理后，细胞在37℃下再培养72小时。将[3H]胸腺嘧啶核苷(1μCi于20μl培养基中)在最后6小时的培养时间内加到每个孔中。随后采集细胞利用TopCountMicroplate Scintillation Counter(Packard Instrument Company，Meriden，CT)来检测所掺入的氚。利用GraphPad Prismprogram(San Diego，CA)通过非线性回归分析来计算得到IC50。
4.6.1.2流式细胞测量分析
按照Becton Dickinson(San Jose，CA)的Cycle Test Plus DNA ReagentKit的说明，用试验制剂处理细胞24小时后采集细胞，用碘化丙锭(PI)染色用于细胞周期分析。样品利用FACS Calibur instrument(BectonDickinson，San Jose，CA)来检测。细胞周期分布采用CellQuestTM v3.1acquisition software和ModFitTM v2.0program来分析。
用试验制剂处理细胞48小时，随后采集细胞用于调亡分析。按照前述方法，用PI对FITC-Annexin V binding和DNA进行双染色(参见Zhang，L.H.and Longley，R.E.，″Induction of apoptosis in mouse thymocytes bymicrocolin A and its synthetic analog″，Life Sci，64：1013-1028(1999))。
4.6.1.3微管蛋白聚合或稳定性测定法
利用CytoDYNAMIXTMScreen(Cytoskeleton，Denver，CO)来监测纯化的微管蛋白的聚合或稳定性。这种测定法采用96孔测定板，每个孔内有200μg冻干纯化的微管蛋白。微管蛋白用含有试验化合物的冰冷的180μl聚合或稳定缓冲液(80mM PIPES，1mM MgCl2，1mM EGTA)，或用媒介物对照DMSO来重新恢复。测定在控温微量滴定板阅读器中在37℃下进行。通过在340nm处吸光度的变化对微管蛋白的聚合或稳定性进行分光光监测。利用PowerWaveTM HT微量滴定板阅读器(Bio-Tek Instruments，Highland Park，VT)按1分钟的间隔测量60分钟而得到吸光度。
4.6.1.4免疫荧光显微镜检查
根据前述方法(参见Isbrucker，R.A.，Gunasekera，S.P.，和Longley，R.E，″Structure-activity relationship studies of discodermolide and itssemisynthetic acetylated analogs on microtubule function and cytotoxicity″，Cancer Chemother.Pharmacol.，48：29-36(2001))，通过免疫荧光法检测A549细胞中的α-微管蛋白。简要地说，细胞用试验化合物处理24小时，然后用PBS洗涤。随后将细胞固定并用温PBS缓冲液(含3.7％甲醛和1％Triton-X)渗透30分钟。用PBS将细胞洗涤两次并用1％的小鼠封闭血清的PBS溶液饱和30分钟后，单独用抗α-微管蛋白-FITC抗体(Sigma)染色，或在100μg/ml的碘化丙锭的存在下进行染色。在落射荧光显微镜(NikonInstruments，Melville，NY)下观察细胞并利用Image-ProTM(MediaCybernetics，Silver Spring，MD)的CCD照相机来成象。
4.6.1.5微管蛋白竞争结合SPA测定法
如前述(参见Tahir，S.K.，Kovar，P.，Rosenberg，S.H.，和Ng，S.C.，″Rapidcolchicine competition-binding scintillation proximity assay usingbiotin-labeled tubulin″，Biotechniques，29：156-160(2000))使用生物素标记的微管蛋白、链霉亲合素包被的钇SPA珠和[3H]-标记的配体([3H]秋水仙碱、[3H]紫杉醇或[3H]长春碱)来进行微管蛋白结合的测定。简要地说，结合混合物包括100μl测定缓冲液中的0.08μM[3H]-标记的配体、1mM GTP和0.5μg生物素化的微管蛋白，所述测定缓冲液含80mM PIPES pH 6.9、1mM MgCl2、1mM EGTA和5％甘油。在微管蛋白之前加入试验化合物和[3H]-标记的配体。在37℃下培养2小时后，加入20μl SPA珠(80μg于测定缓冲液中)。在室温下进一步振荡培养30分钟后，使SPA珠沉降45分钟，在TopCountMicroplate Scintillation Counter上进行闪烁计数。
4.6.1.6caspase酶测定法
按照检测试剂盒供应商(R&D systems，Minneapolis，MN)的说明来测定caspase酶的活性。简单地说，在用药物处理后，采集细胞并以250×g离心10分钟。细胞沉淀用裂解缓冲液来裂解。细胞裂解液在冰上培养10分钟，随后以10,000×g离心1分钟。caspase酶活性的酶反应在96孔微量滴定板上进行。将50μl含200μg总蛋白的裂解液、50μl 2×反应缓冲液和5μl caspase酶特异性肽底物(分别结合caspase酶-3、-8、-9的对硝基苯胺的DEVD、IETD或LEHD)混合。该混合物在37℃下培养2小时，随后用微量培养板阅读器读取A405nm。结果表示为经药物处理的细胞与媒介物对照细胞的caspase酶活性的变化倍数。
4.6.1.7细胞周期调节蛋白的免疫印迹分析
用本发明的化合物或0.1％DMSO处理癌细胞24小时。细胞经胰蛋白酶消化并在微量离心机中旋转沉降6秒钟，随后立即在0.1ml裂解缓冲液中裂解，所述裂解缓冲液含10mM Tris-HCl pH 8.0、10mM EDTA、150mM NaCl、1％NP-40、0.5％SDS、1mM DTT、1mM Na3VO4，外加完全蛋白酶抑制剂混合物(Roche Applied Science，Indianapolis，IN)。随后通过QiashredderTM(Qiagen，Valencia，CA)旋转1分钟并在干冰中冷冻。样品用3×SDS样品缓冲液(New England Biolabs，Beverly，MA)稀释并煮沸5分钟。将约30μl该混合物加载到甘氨酸聚丙烯酰胺凝胶(Invitrogen，Carlsbad，CA)的每个泳道中，电泳然后转移到PVDF膜(Invitrogen)上。PVDF膜在室温下用含0.05％吐温-20和5％脱脂奶粉的PBS封闭1小时，随后在4℃下加入抗MPM-2(Upstate Biotechnology，Lake Placid，NY)、Bcl-2、Cdc2、p53、p21或Cdc25C(Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)的抗体过夜。膜经过洗涤并用HRPO偶联的抗兔或抗小鼠IgG(SantaCruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)(1∶10,00稀释)在室温下孵育60分钟，洗涤3次，随后用ECL Plus chemiluminescent detection system(AmershamBiosciences，Piscataway，NJ)显影。
4.6.1.8PBMC培养物和TNF-α的ELISA检测
在Ficoll-Hypaque上通过密度离心制备PBMC。将PBMC以1×106/ml重新悬浮在完全RPMI-1640培养基/10％胎牛血清中，在24孔板中含有或不含化合物(0.1-100μM)的情况下，在37℃、5％CO2培养24小时用LPS(1μg/ml；Eschericllia coli serotype 0127：B8；Sigma)刺激。收集不含细胞的上清夜并分成等分试样在-70℃下存储直至用ELISA测定。用R&DSystems(Minneapolis，MN)提供的检测方法和试剂测定上清液中的TNF-α。
4.6.1.9PDE4检测
按照前述方法(参见Marriott，J.B.，Westby，M.，Cookson，S.，Guckian，M.，Goodbourn，S.，Muller，G.，Shire，M.G.，Stirling，D.，and Dalgleish，A.G.，″CC-3052：A water-soluble analog of thalidomide and potent inhibitor ofactivation-induced TNF-alpha production″，J.Immunol.，161：4236-4243(1998))从U937细胞中纯化PDE。简要地说，细胞(1×109)用PBS洗涤并在冷的均化缓冲液(20mM Tris-HCl，pH 7.1，3mM 2-巯基乙醇(2-mercaptoenthanol)，1mM MgCl2，0.1mM EGTA，1μM PMSF，1μg/ml亮肽素)中裂解。经均化后，通过离心收集上清液并加载到经均化缓冲液平衡的Sephacryl S-200柱上。PDE在均化缓冲液中洗脱，合并咯利普兰敏感的节段并分成等分存储。用Di Santo和Heaslip所描述的方法(DiSanto，M.E.and Heaslip，R.J.，″Identification and stabilization of large molecularweight PDE-IVs from U937″，Biochem.Biophys.Res.Commun.，197：1126-1131(1993))并在不同浓度的化合物、50mM Tris-HCl，pH 7.5、5mMMgCl2和1μM cAMP(其1％为[3H]cAMP)的存在下测定PDE活性。预先确定所用提取液的量以确保反应处于线性范围内并消耗小于15％的总底物。反应在30℃下进行30分钟并通过沸腾2分钟而终止。随后将样品骤冷并在30℃下用蛇毒(1mg/ml)处理15分钟。未使用的底物通过加入200μlAG1-X8 resin(Bio-Rad，Richmond，CA)15分钟来脱去除。随后将样品以3000rpm旋转5分钟，取50μl水相用于计数。每个数据点加倍处理，活性表示为对照物的百分数。IC50通过三个独立实验的剂量-反应曲线来确定。
4.6.1.10人肿瘤异种移植模型
CB 17SCID小鼠(鼠龄6-8周，雌性)在无菌条件下的微型隔离笼中饲养。给小鼠皮下注射悬浮于无菌PBS的HCT-116(结肠癌)细胞(2×106细胞/小鼠)。在第6天，用数字卡尺测量所有小鼠的肿瘤，并用公式W2×L/2[W＝宽度(短轴)；L＝长度(长轴)]计算肿瘤体积。合并肿瘤大小为75-125mm3的小鼠并随机分布到各个罩内。随后在小鼠耳朵上进行标记，并将各个笼随机指定为处理组。第7天，测量肿瘤并记作为初始体积，随后给小鼠腹腔注射媒介对照物(比例为1∶9∶10的N-甲基-2-吡咯烷酮∶PEG400∶盐水)、CC-5079(5和25mg/kg)或阳性对照物CamptosarTM(10mg/kg)。在指定的时间间隔测量肿瘤尺寸。
4.6.1.11细胞粘附实验
将HUVECs接种于24孔培养板上培养2天来形成连续的单层细胞。将癌细胞或癌细胞系(例如LS-180人结肠腺癌细胞)用5μM钙黄绿素-AM标记30分钟。将钙黄绿素-AM标记的LS-180细胞加到HUVEC培养物的每个孔中并在37℃下培养10分钟。随后加入TNF-α(80ng/ml)，将培养物再培养110分钟。用PBS洗涤除去未粘附的细胞。通过设置为485/20nm处激发和530/25nm处发射的荧光板阅读器来测量每个孔中粘附的LS-180细胞的荧光强度。
4.6.1.12细胞迁移和侵袭的检测
通过基于BD BioCoast Angiogenesis System(BD Biosciences，Bedford，MA)的检测法来测定细胞的迁移和侵袭。插件的荧光阻断膜为3微米孔径的PET过滤器，该过滤器已用BD Matrigel basement matrix(用于侵袭检测)涂布或不用Matrigel matrix(用于迁移检测)涂布。将不含血清的培养基中的HUVEC(250μl/well)加到上腔室，将本发明的化合物加到含有作为化学吸引剂的VEGF的培养基(750μl/well)的底孔中。随后将细胞在37℃下培养22小时。培养结束后，将细胞用钙黄绿素AM染色来进行荧光测量。
4.6.1.13血管生成的检测
由经过训练的医务人员采集的新鲜人脐带来测定本发明的化合物对血管生成的作用。将脐带在约3小时内直接送到实验室，将脐带和血管腔用冷的基础营养培养基冲洗。利用机械方法、钳子和小型手术剪在无菌环境中从脐带中分离动脉。清除血管的连结组织，并沿横向切下1mm长度的血管环。将血管环置于50ml锥形底试管内的EGM-2培养基(CloneticsCorp)中并在4℃下送到Celgene corporation。将6孔组织培养板用250μlMatrigel被覆并使其在37℃、5％CO2下胶凝30-45分钟。将血管环用EGM-W培养基冲洗并置于Matrigel涂被的空上，用另外的250μl Matrigel覆盖并使其在37℃下胶凝30-45分钟。将血管在4ml EGM-2中培养24小时以使组织适应新环境。培养24小时后，各血管环用0.1％DMSO作为对照物处理，或用不同浓度的本发明的化合物处理。培养基每周更换两次，总计3周。本发明的化合物的作用与用DMSO处理的血管环进行比较。结果用image-proplus软件进行分析。
4.6.2本发明的示例化合物的合成
4.6.2.1(E/Z)3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙烯腈
在-78℃下向5-溴-2，3-二氢-苯并呋喃(1.0g，5.0mmol)的THF(10mL)溶液中加入正丁基锂的己烷(1.8mL，2.5N，4.5mmol)溶液，并保持20分钟。在-78℃下向混合物中加入3-乙氧基-4，N-二甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺(1.1g，4.6mmol)的THF(10mL)溶液。30分钟后，将异丙醇(1mL)和水(10mL)加到混合物中，移走冷却浴。混合物在室温下搅拌20分钟。混合物用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)萃取。水层用乙酸乙酯(50mL)萃取。合并的有机层用HCl(1N，50mL)、水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂，得到2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲酮的油状物(1.23g，92％产率)。油状物未经进一步纯化用于下一步中。
向搅拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.3mL，8.2mmol)的THF(15mL)溶液中滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，8.3mL，8.3mmol)。混合物在室温下搅拌40分钟。将2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲酮(1.23g，4.1mmol)的无水THF(15mL)溶液加到混合物中。混合物回流过夜。将溶液倒入冰水(20mL)中。水层用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用水(50mL)、碳酸氢钠(50mL，饱和)、盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥。除去溶剂，色谱(硅胶)纯化得到(E/Z)3-(2，3-二氢-苯并呋喃-5-基)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙烯腈的固体混合物(1.1g，83％产率)：mp，49-51℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.40-1.47(2t，6H，2CH3)，3.16-3.27(m，4H，2CH2)，3.89-3.92(2s，6H，2CH3)，3.98-4.12(2q，4H，2CH2)，4.58-4.66(m，4H，2CH2)，5.49-5.50(2s，2H，2CH)，6.73-7.33(m，12H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.68，29.30，29.39，55.96，56.02，64.50，71.78，71.89，91.11，91.31，109.16，109.27，110.96，112.95，114.18，122.14，123.04，125.45，126.62，127.37，127.72，129.48，129.53，129.87，130.57，131.77，132.22，147.88，148.08，150.77，151.32，161.82，162.51，162.84，162.93；分析计算C20H19NO3：C，74.75；H，5.95；N，4.36。实测值：C，74.40；H，5.95；N，4.22。
4.6.2.2 3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-丙烯腈
在-78℃下向7-溴-4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪(0.9g，3.9mmol)的THF(10mL)溶液中加入正丁基锂(1.3mL，2.5N，3.3mmol)。10分钟后，在-78℃下将溶液加到3，5-二甲氧基-苯甲酰氯(650mg，3.2mmol)的THF(10mL)溶液中。1小时后，移走冷却浴，混合物升到室温。向混合物中加入异丙醇(2mL)、水(30mL)和乙酸乙酯(50mL)。水层用乙酸乙酯(50mL)萃取。合并的有机层用碳酸氢钠(50mL，饱和)、盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥。除去溶剂，色谱(硅胶)纯化，得到黄色固体的(3，5-二甲氧基-苯基)-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-甲酮(320mg，30％产率)：1HNMR(CDCl3)δ2.86(s，3H，CH3)，3.42(t，J＝5Hz，2H，CH2)，3.82(s，6H，2CH3)，4.27(t，J＝4Hz，2H，CH2)，6.60-6.64(m，2H，Ar)，6.85(d，J＝2Hz，2H，Ar)，7.36(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.43(dd，J＝2，9Hz，1H，Ar)。
向搅拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(0.64mL，4.0mmol)的THF(10mL)溶液中滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，4.1mL，4.1mmol)。混合物在室温下搅拌40分钟。将(3，5-二甲氧基-苯基)-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-甲酮(640mg，2.0mmol)的无水THF溶液(8mL)加到混合物中。混合物回流过夜。将溶液倒入冰水(20mL)中。水层用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用水(50mL)、碳酸氢钠(50mL，饱和)、盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥。除去溶剂，色谱(硅胶)纯化，得到黄色固体的(E/Z)3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-丙烯腈的混合物(370mg，55％产率)：mp，119-121℃；1H NMR(DMSO-d6)δ2.88(s，3H，CH3)，2.92(s，3H，CH3)，3.20-3.36(m，4H，2CH2)，3.74(s，6H，2CH3)，4.17-4.25(m，4H，2CH2)，5.92(s，1H，CH)，6.09(s，1H，CH)，6.41-6.45(m，4H，Ar)，6.60-6.66(m，3H，Ar)，6.72-6.77(m，4H，Ar)，6.83-6.87(m，1H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ37.76，37.85，47.97，55.35，55.38，63.99，64.14，90.83，92.74，100.64，101.60，106.98，107.12，111.22，111.27，114.29，116.09，118.82，122.54，123.38，124.85，125.32，138.33，138.93，139.56，141.15，142.74，143.11，160.26，160.28，161.13，161.33；分析计算C20H20N2O3：C，71.41；H，5.99；N，8.33。实测值：C，71.37；H，5.84；N，8.30。
4.6.2.3(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-丙烯腈
Figure A20058003770401161
在-78℃下向7-溴-4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪(1.8g，7.9mmol)的THF(15mL)溶液中加入正丁基锂的己烷(2.6mL，2.5N，6.5mmol)溶液，并保持10分钟。在-78℃下向混合物中加入3-乙氧基-4，N-二甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺(1.4g，6.0mmol)的THF(10mL)溶液。30分钟后，将异丙醇(2mL)和水(30mL)加到混合物中，移走冷却浴。混合物在室温下搅拌20分钟。混合物用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)萃取。水层用乙酸乙酯(50mL)萃取。合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂，色谱(硅胶)纯化，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-甲酮的油状物(1.7g，87％产率)：1HNMR(CDCl3)δ1.47(t，J＝7Hz，3H，CH3)，3.00(s，3H，CH3)，3.41(t，J＝4Hz，2H，CH2)，3.94(s，3H，CH3)，4.15(q，J＝7Hz，2H，CH2)，4.28(t，J＝5Hz，2H，CH2)，6.64(d，J＝8Hz，1H，Ar)，6.88(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.31-7.41(m，4H，Ar)。
向搅拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.7mL，10.8mmol)的THF(20mL)溶液中滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，11mL，11mmol)。混合物在室温下搅拌40分钟。将(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-甲酮(1.7g，5.2mmol)的无水THF(10mL)溶液加到混合物中。混合物回流过夜。将溶液倒入冰水(20mL)中。水层用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用水(50mL)、碳酸氢钠(50mL，饱和)、盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥。除去溶剂，色谱(硅胶)纯化，得到(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(4-甲基-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-7-基)-丙烯腈的固体混合物(1.2g，66％产率)：mp，99-101℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.31(t，J＝7Hz，6H，2CH3)，2.88(s，3H，CH3)，2.92(s，3H，CH3)，3.30-3.35(m，4H，2CH2)，3.79(s，3H，CH3)，3.82(s，3H，CH3)，3.96-4.04(2q，4H，2CH2)，4.18-4.26(m，4H，2CH2)，5.86(s，1H，CH)，5.94(s，1H，CH)，6.63-7.07(m，12H，Ar)；13CNMR(DMSO-d6)δ14.60，14.63，37.79，37.88，47.99，55.48，55.54，63.81，64.02，64.18，89.99，90.67，111.24，111.32，111.48，112.71，113.92，114.76，116.28，119.26，119.33，122.23，122.33，122.74，123.38，125.33，126.29，129.63，131.25，138.17，138.82，142.79，143.11，147.31，147.68，149.91，150.84，161.40；分析计算C21H22N2O3：C，71.98；H，6.33；N，7.99。实测值：C，71.67；H，6.15；N，7.88。
4.6.2.4(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-丙烯腈
Figure A20058003770401181
在-78℃下向4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(1.5g，6.5mmol)的THF(15mL)溶液中加入正丁基锂的己烷(2.5mL，2.5N，6.3mmol)溶液，并保持20分钟。在-78℃下向混合物中加入1-甲基-1H-苯并三唑-5-甲醛(1.0g，6.0mmol)的THF(5mL)浆。18小时后，将异丙醇(2mL)和水(10mL)加到混合物中，移走冷却浴。混合物在室温下搅拌20分钟。混合物用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)萃取。水层用乙酸乙酯(50mL)萃取。合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，用MgSO4干燥。除去溶剂，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-甲醇的油状物(2g)。油状物未经进一步纯化用于下一步中。
将上述(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-甲醇和MnO2(2.5g，29mmol)在二氯甲烷(40mL)中的混合物在室温下搅拌18h。加入更多MnO2(1.5g)，并保持过夜。悬浮液通过硅藻土滤板过滤。除去溶剂，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-甲酮的灰白色固体(1.12g，58％产率，2步)：1HNMR(CDCl3)δ1.49(t，J＝7Hz，3H，CH3)，3.97(s，3H，CH3)，4.17(q，J＝7Hz，2H，CH2)，4.36(s，3H，CH3)，6.91(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.40(dd，J＝2，8Hz，1H，Ar)，7.50(d，J＝2Hz，1H，Ar)，7.62(d，J＝8Hz，1H，Ar)，8.04(dd，J＝2，9Hz，1H，Ar)，8.44-8.45(m，1H，Ar)。
向搅拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.2mL，7.6mmol)的THF(12mL)溶液中滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，7.6mL，7.6mmol)。混合物在室温下搅拌40分钟。将(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-甲酮(1.12g，3.6mmol)加到混合物中。混合物回流过夜。将溶液倒入冰水(20mL)中。混合物用醚(20mL)搅拌，得到悬浮液。过滤，得到(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-苯并三唑-5-基)-丙烯腈的灰白色固体混合物(1.16g，96％产率)(异构体比率1∶0.7)：mp，180-182℃；[少量异构体]1HNMR(DMSO-d6)δ1.30(t，J＝7Hz，6H，2CH3)，3.78(s，3H，CH3)，[3.84(s，CH3)]，3.92-4.02(m，2H，CH2)，[4.32(s，CH3)]，4.37(s，3H，CH3)，[6.29(s，CH)]，6.39(s，1H，CH)，6.71(dd，J＝2，8Hz，1H，Ar)，6.92-6.99(m，2.3H，Ar)，7.08-7.11(m，1.6H，Ar)，7.43(dd，J＝2，9Hz，1H，Ar)，[7.51(dd，Ar)]，[7.88(d，Ar)]，7.96(d，J＝9Hz，1H，Ar)，[8.04(s，Ar)]，8.11(s，1H，Ar)；13CNMR(DMSO-d6)δ14.59，34.55，55.56，63.82，63.87，94.63，95.16，110.88，111.04，111.41，111.65，111.93，113.79，118.54，119.51，119.99，122.37，122.47，127.55，128.24，129.30，130.19，133.17，133.73，134.18，134.61，144.88，145.11，147.52，147.95，150.37，151.24，161.03，151.29；分析计算C19H18N4O2+0.4H2O：C，66.81；H，5.55；N，16.40。实测值：C，66.79；H，5.32；N，16.28。
4.6.2.5(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-喹啉-6-基-丙烯腈
Figure A20058003770401201
在-78℃下向4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(1.74g，7.5mmol)的THF(15mL)溶液中加入正丁基锂的己烷溶液(3.0mL，2.5N，7.5mmol)，并保持20分钟。在-78℃下向混合物中加入喹啉-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(1.55g，7.2mmol)的THF(10mL)溶液。2小时后，将异丙醇(2mL)和水(50mL)加到混合物中，移走冷却浴。混合物在室温下搅拌20分钟。除去溶剂，残余物用醚(20mL)搅拌。过滤，得到黄色固体的(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-喹啉-6-基-甲酮(1.5g)。固体未经进一步纯化用于下一步中。
向搅拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.5mL，9.5mmol)的THF(15mL)溶液滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，9.5mL，9.5mmol)。混合物在室温下搅拌40分钟。将(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-喹啉-6-基-甲酮(1.46g，4.8mmol)加到混合物中。混合物回流过夜。将溶液倒入冰水(50mL)中。水层用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用水(50mL)、碳酸氢钠(50mL，饱和)、盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥。除去溶剂，色谱(硅胶)纯化，得到(E/Z)3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-喹啉-6-基-丙烯腈的灰白色固体混合物(1.25g，79％产率)：mp，114-116℃；1HNMR(DMSO-d6)δ1.30(t，J＝7Hz，6H，2CH3)，3.79(s，3H，CH3)，3.85(s，CH3)，3.93-4.00(2q，4H，2CH2)，6.33(s，1H，CH)，6.45(s，1H，CH)，6.74(d，J＝8Hz，1H，Ar)，6.95-7.13(m，5H，Ar)，7.54-7.67(m，3H，Ar)，7.78(d，J＝9Hz，1H，Ar)，7.95(s，1H，Ar)，8.03-8.14(m，3H，Ar)，8.40(d，J＝8Hz，1H，Ar)，8.48(d，J＝8Hz，1H，Ar)，8.94-9.00(m，2H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.55，14.58，55.54，55.59，63.82，63.89，94.74，95.84，111.49，111.69，111.93，113.83，118.44，118.47，122.19，122.23，122.45，122.54，127.45，127.54，128.91，128.99，129.12，129.19，129.27，129.93，130.08，135.39，136.38，136.53，136.88，147.56，147.74，148.02，148.20，150.43，151.31，151.67，151.83，160.84，160.96；分析计算C21H18N2O2+0.1H2O：C，75.93；H，5.52；N，8.43。实测值：C，75.92；H，5.48；N，8.41。
4.6.2.6(E/Z)3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-喹啉-6-基-丙烯腈
Figure A20058003770401211
在-78℃下向1-溴-3，5-二甲氧基-苯(2.7g，12mmol)的THF(20mL)溶液中加入正丁基锂的己烷溶液(4.5mL，2.5N，11mmol)，并保持20分钟。在-78℃下向混合物中加入喹啉-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(2.2g，10mmol)。2小时后，将水(30mL)加到混合物中，移走冷却浴。混合物在室温下搅拌20分钟。混合物用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用碳酸氢钠(50mL，饱和)、盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥。除去溶剂，在醚中形成浆料，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-喹啉-6-基-甲酮的白色固体(1.48g，50％粗产物产率)。样品未经纯化用于下一步中。1HNMR(CDCl3)δ3.84(s，6H，2CH3)，6.70-6.73(m，1H，Ar)，6.97(d，J＝2Hz，1H，Ar)，7.49(dd，J＝4，8Hz，1H，Ar)，8.17-8.28(m，4H，Ar)，9.02-9.04(m，1H，Ar)。
向搅拌的冰浴中的氰基甲基膦酸二乙酯(1.6mL，10mmol)的THF(10mL)溶液中滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，10mL，10mmol)。混合物在室温下搅拌40分钟。将(3，5-二甲氧基-苯基)-喹啉-6-基-甲酮(1.48g，5mmol)的THF(10mL)溶液加到混合物中。混合物回流2小时。将溶液倒入冰水(30mL)中。水层用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用水(50mL)、碳酸氢钠(50mL，饱和)、盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥。除去溶剂，色谱(硅胶)纯化，得到(E/Z)3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-喹啉-6-基-丙烯腈的灰白色固体混合物(1.46g，92％产率)(根据HNMR，异构体比率是1∶1)：mp：142-144℃；1H NMR(DMSO-d6)δ3.72(s，6H，2CH3)，3.77(s，6H，2CH3)，6.50-6.65(m，6H，Ar，2CH)，6.64-6.70(m，2H，Ar)，7.53-7.69(m，3H，Ar)，7.81-7.85(m，1H，Ar)，7.92(d，J＝1Hz，1H，Ar)，8.03-8.14(m，3H，Ar)，8.38-8.50(m，2H，Ar)，8.93-9.01(m，2H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ97.49，97.65，101.33，102.17，106.66，107.27，117.85，117.98，122.26，127.44，127.49，128.35，128.92，129.18，129.26，129.89，134.96，135.44，136.59，136.95，138.79，139.63，147.75，148.21，151.79，151.92，160.53，160.74，160.87；分析计算C20H16N2O2+0.1H2O：C，75.50；H，5.13；N，8.80。实测值：C，75.33；H，5.34；N，8.77。
4.6.2.7(E/Z)-3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-丙烯腈
Figure A20058003770401231
向搅拌的1H-吲哚-6-羧酸(5.65g，35.1mmol)的55mL THF悬浮液中加入1，1′-羰基二咪唑(6.25g，38.6mmol)。悬浮液在室温下搅拌2小时，然后在冰浴中加入盐酸O，N-二甲基-羟基胺(4.10g，42.1mmol)。混合物在室温下搅拌过夜。混合物用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的乙酸乙酯萃取液用盐水(50mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，浓缩为油状物，用快速柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺的油状物(5.54g，77％产率)：1HNMR(CDCl3)δ3.39(s，3H，NCH3)，3.58(s，3H，OCH3)，6.55-6.57(m，1H，Ar)，7.29-7.84(m，4H，Ar)，8.85(brs，1H，NH)。产物未经纯化用于下一步中。
将1-溴-3，5-二甲氧基苯(12.86g，59.3mmol)的THF(60mL)溶液冷却到-78℃，抽真空并用氮气重新填充10次。向该澄清溶液中缓慢加入正丁基锂(23.7mL，59.3mmol)并搅拌30分钟。在-78℃下加入1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(5.50g，26.9mmol)在THF(40mL)中的混合物并搅拌3小时。混合物用异丙醇(12.5mL，162mmol)和加入的水(40mL)终止。用醚(3×50mL)萃取，用水(2×50mL)洗涤，干燥，浓缩为油状物，用快速柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮的油状物(3.70g，49％产率)。产物未经纯化用于下一步中。
在0℃下将氢氧化钾(0.21g，3.7mmol)加到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮(0.69g，2.5mmol)的DMF(7mL)混合物中，然后加入碘甲烷(0.2mL，2.7mmol)并在0℃下搅拌2小时。混合物用醚(15mL)稀释，用盐水(2×10mL)洗涤。有机相用MgSO4干燥，用快速柱色谱(EtOAc/己烷)浓缩、纯化，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-甲酮的灰白色固体(0.54g，75％产率)：1H NMR(DMSO-d6)δ3.80(s，6H，2OCH3)，3.85(s，3H，NCH3)，6.55(d，J＝3Hz，1H，Ar)，6.78(t，J＝2Hz，1H，Ar)，6.83(d，J＝2Hz，2H，Ar)，7.47(d，J＝2Hz，1H，Ar)，7.61(d，J＝3Hz，1H，Ar)，7.68(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.90(brs，1H，Ar)。产物未经纯化用于下一步中。
向在冰浴中冷却的氰基甲基膦酸二乙酯(0.55mL，3.5mmol)的无水THF(8mL)溶液中加入双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，3.5mL，3.5mmol)，并在室温下搅拌40分钟，然后加入(3，5-二甲氧基-苯基)-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-甲酮(0.52g，1.8mmol)的THF(10mL)溶液，回流过夜。将溶液倒入冰水(10mL)中，用CH2Cl2(2×50mL)萃取，用水(30mL)洗涤，用MgSO4干燥，真空过滤、浓缩为油状物，通过快速柱色谱法(乙酸乙酯/己烷)进行纯化，得到(E/Z)-3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-丙烯腈的浅黄色固体(0.53g，94％产率)：mp，117-119℃；1HNMR(DMSO-d6)δ3.72-3.80(ms，9H，2OCH3和NCH3)，6.27和6.32(2s，1H，CH)，6.46-6.51(m，3H，Ar)，6.62-6.67(m，1H，Ar)，6.95-6.99(m，1H，Ar)，7.47-7.65(m，3H，Ar)；13C NMR(CDCl3)δ32.5，55.3，93.7，95.3，100.6，101.0，101.9，106.8，107.3，109.9，110.8，118.5，118.6，119.4，120.2，129.1，129.6，129.8，130.4，131.8，132.5，135.7，136.1，139.7，141.0，160.3，163.0。分析计算C20H18N2O2：C，75.45；H，5.70；N，8.80。实测值：C，75.31；H，5.77；N，8.66。
4.6.2.8(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1H-吲哚-6-基)-丙烯腈
Figure A20058003770401251
向搅拌的1H-吲哚-6-羧酸(2.68g，16.6mmol)的THF(25mL)褐色溶液中加入CDI(2.97g，18.3mmol)，并在室温下搅拌2小时。混合物冷却到0℃，加入盐酸O，N-二甲基-羟基胺(1.95g，20.0mmol)，在室温下搅拌过夜。将水(50mL)加到反应物中，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并有机相，用盐水(100mL)洗涤，用MgSO4干燥，真空浓缩，得到1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺的油状物(3.87g，114％粗产物产率)：1H NMR(CDCl3)δ3.40(s，3H，NCH3)，3.59(s，3H，OCH3)，6.57-6.59(m，1H，Ar)，7.31-7.33(m，1H，Ar)，7.46-7.50(m，1H，Ar)，7.64(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.84(s，1H，Ar)，8.60(brs，1H，NH)。产物未经纯化用于下一步中。
将搅拌的4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(6.52g，23.7mmol)和无水THF(20mL)混合物冷却到-78℃，抽空并用氮气重新填充10次。向该澄清溶液中缓慢加入正丁基锂(9.5mL，23.7mmol)并搅拌20分钟。在-78℃下加入1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(2.20g，10.8mmol)的无水THF(25mL)混合物，搅拌1小时。混合物用异丙醇(4.9mL，65mmol)和水(15mL)猝灭。混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机相用水(2×50mL)洗涤，用MgSO4干燥，浓缩，得到油状物，用快速柱色谱(乙酸乙酯，己烷)纯化，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮的油状物(2.30g)。产物未经纯化用于下一步中。
在0℃下向氰基甲基膦酸二乙酯(3.6mL，23mmol)的无水THF(28mL)溶液中加入双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，23mL，23mmol)，并在室温下搅拌30分钟，然后加入(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮(2.27g，HPLC纯度70％，7.68mmol)的THF(15mL)溶液，回流过夜。将反应混合物倒入水(80mL)中，用CH2Cl2(2×80mL)萃取。合并的有机相用盐水(80mL)洗涤，用MgSO4干燥，用快速柱色谱(乙酸乙酯，己烷)纯化，得到(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1H-吲哚-6-基)-丙烯腈的浅黄色固体(0.72g，30％产率)：mp，132-134℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.27-1.33(2t，3H，CH2CH3)，3.70(s，1.9H，一种异构体的OCH3)，3.79(s，1.25H，另一种异构体的OCH3)，3.94-4.04(2q，2H，CH2CH3)，6.11和6.12(2s，1H，两种异构体的CH)，6.48-7.64(m，8H，Ar)，11.26和11.33(2brs，1H，两种异构体的-NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.58，55.54，63.80，92.17，92.32，101.34，101.39，111.32，111.50，112.54，112.66，112.83，114.02，118.96，119.06，119.15，119.79，120.06，120.30，122.40，127.42，128.04，128.72，129.35，129.75，130.08，131.00，131.40，135.25，135.50，147.36，147.69，150.03，150.90，163.02，163.10；分析计算C20H18N2O2+0.09EtOAc乙酸乙酯：C，74.73；H，5.87；N，8.21。实测值：C，74.94；H，5.78；N，8.58。
4.6.2.9(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-丙烯腈
向搅拌的1H-吲哚-6-羧酸(2.68g，16.6mmol)的THF(25mL)褐色溶液中加入CDI(2.97g，18.3mmol)，并在室温下搅拌2小时。混合物冷却到0℃，加入盐酸O，N-二甲基-羟基胺(1.95g，20.0mmol)，在室温下搅拌过夜。将水(50mL)加到反应物中，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用MgSO4干燥，真空浓缩，得到1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺的油状物(3.87g，114％粗产物产率)：1H NMR(CDCl3)δ3.40(s，3H，NCH3)，3.59(s，3H，OCH3)，6.57-6.59(m，1H，Ar)，7.31-7.33(m，1H，Ar)，7.46-7.50(m，1H，Ar)，7.64(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.84(s，1H，Ar)，8.60(brs，1H，NH)。产物未经纯化用于下一步中。
将搅拌的4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(6.52g，23.7mmol)和无水THF(20mL)混合物冷却到-78℃，抽真空并用氮气重新填充10次。向该澄清溶液中缓慢加入正丁基锂(9.5mL，23.7mmol)并搅拌20分钟。在-78℃下加入1H-吲哚-6-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(2.20g，10.8mmol)的无水THF(25mL)混合物，搅拌1小时。混合物用异丙醇(4.9mL，65mmol)和水(15mL)猝灭。混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机相用水(2×50mL)洗涤，用MgSO4干燥，浓缩，得到油状物，用快速柱色谱(乙酸乙酯，己烷)纯化，得到(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮的油状物(2.30g)。产物未经纯化用于下一步中。
在0℃下向氰基甲基膦酸二乙酯(3.6mL，23mmol)的无水THF(28mL)溶液中加入双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，23mL，23mmol)，并在室温下搅拌30分钟，然后加入(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-(1H-吲哚-6-基)-甲酮(2.27g，HPLC纯度70％，7.68mmol)的THF(15mL)溶液，回流过夜。将反应混合物倒入水(80mL)中，用CH2Cl2(2×80mL)萃取。合并的有机相用盐水(80mL)洗涤，用MgSO4干燥，用快速柱色谱(乙酸乙酯，己烷)纯化，得到(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1H-吲哚-6-基)-丙烯腈的浅黄色固体(0.72g，30％产率)：mp，132-134℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.27-1.33(2t，3H，CH2CH3)，3.70(s，1.9H，一种异构体的OCH3)，3.79(s，1.25H，另一种异构体的OCH3)，3.94-4.04(2q，2H，CH2CH3)，6.11和6.12(2s，1H，两种异构体的CH)，6.48-7.64(m，8H，Ar)，11.26和11.33(2brs，1H，两种异构体的-NH)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.58，55.54，63.80，92.17，92.32，101.34，101.39，111.32，111.50，112.54，112.66，112.83，114.02，118.96，119.06，119.15，119.79，120.06，120.30，122.40，127.42，128.04，128.72，129.35，129.75，130.08，131.00，131.40，135.25，135.50，147.36，147.69，150.03，150.90，163.02，163.10；分析计算C20H18N2O2+0.09乙酸乙酯：C，74.73；H，5.87；N，8.21。实测值：C，74.94；H，5.78；N，8.58。
在0℃下向(E/Z)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1H-吲哚-6-基)-丙烯腈(0.15g，0.49mmol)的DMF(2mL)溶液中加入氢氧化钾(0.04g，0.73mmol)并搅拌8分钟，然后加入碘甲烷(0.03mL，0.53mmol)。混合物在0℃下搅拌3小时，然后用乙醚(10mL)稀释，用盐水(2×15mL)洗涤，用MgSO4干燥，浓缩为油状物，用快速柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到E/Z-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(1-甲基-1H-吲哚-6-基)-丙烯腈的泡沫状固体(0.15g，93％产率)：mp，130-132℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.27-1.33(2t，3H，CH2CH3)，3.78-3.84(ms，6H，OCH3和NCH3)，3.93-4.03(2q，2H，CH2CH3)，6.14和6.19(2s，1H，CH)，6.46-7.65(m，8H，Ar)；13CNMR(DMSO-d6)δ14.6，14.6，32.5，55.5，55.5，63.7，63.8，92.4，92.8，100.6，110.3，110.9，111.3，111.5，112.4，114.0，119.0，119.1，119.8，120.2，120.4，122.4，122.6，129.0，129.7，129.9，130.0，131.2，131.3，131.6，132.3，135.8，136.1，147.3，147.7，150.2，151.0，163.0，163.2；分析计算C21H20N2O2：C，75.88；H，6.06；N，8.43。实测值：C，75.53；H，6.09；N，8.33。
4.6.2.10(E/Z)-3-苯并呋喃-5-基-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙烯腈
Figure A20058003770401291
将搅拌的4-溴-2-乙氧基-1-甲氧基-苯(1.74g，7.5mmol)和干THF(15mL)的混合物冷却到-78℃，抽空并用氮气重新填充10次。向该澄清溶液中缓慢加入正丁基锂(3.0mL，7.5mmol)并搅拌20分钟。在-78℃下加入苯并呋喃-5-甲醛(1.0g，6.8mmol)的干THF(10mL)混合物，搅拌1小时。混合物用异丙醇(3.1mL，41mmol)和加入的水(10mL)猝灭。混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机相用水(2×50mL)洗涤，用MgSO4干燥，浓缩，得到苯并呋喃-5-基-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲醇的油状物(2.36g，115％产率)。产物未经纯化用于下一步中。
在室温下向搅拌的苯并呋喃-5-基-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲醇(2.36g粗产物，6.8mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液中加入活化的MnO2粉末(6.0g，69mmol)，并在每3-5小时加入2-3当量的MnO2直到HPLC显示原料消失。黑色悬浮液通过硅藻土滤板过滤，真空浓缩，得到苯并呋喃-5-基-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲酮的灰白色固体(2.25g，111％粗产率)。产物未经纯化用于下一步中。
在0℃下向氰基甲基膦酸二乙酯(2.2mL，13.7mmol)的无水THF(30mL)溶液中加入双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.0M THF溶液，13.7mL，13.7mmol)，并在室温下搅拌30分钟，然后加入苯并呋喃-5-基-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-甲酮(2.23g，6.8mmol)的THF(25mL)溶液，回流2小时。将反应混合物倒入水(20mL)中，用CH2Cl2(2×50mL)萃取。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，用MgSO4干燥，用快速柱色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到(E/Z)-3-苯并呋喃-5-基-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙烯腈的浅黄色固体(1.79g，82％产率)：mp，95-97℃；1H NMR(DMSO-d6)δ1.31(t，J＝7Hz，3H，CH2CH3)，3.79和3.84(2s，3H，OCH3)，3.93-4.04(2q，2H，CH2CH3)，6.15和6.28(2s，1H，CH)，6.71-8.11(m，8H，Ar)；13C NMR(DMSO-d6)δ14.5，14.6，55.5，55.6，63.8，93.7，93.9，107.0，107.1，111.4，111.4，111.6，112.0，113.8，118.7，118.7，122.0，122.4，122.5，125.0，125.6，127.4，127.4，129.7，130.7，132.2，133.6，147.1，147.3，147.4，147.8，150.3，151.1，154.6，155.3，161.8，162.1。分析计算C20H17NO3：C，75.22；H，5.37；N，4.39。实测值：C，75.20；H，5.30；N，4.41。
4.6.2.113-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-丙烯腈(E和Z异构体)
在烘箱干燥的配备回流冷凝管、滴液漏斗和磁力搅拌器的三颈烧瓶中制备格氏试剂。将3，5-二甲氧基-溴苯(2.0g，9.0mmol)的THF(10mL)溶液加到镁条(0.2g，9.0mmol)的THF(5mL)溶液与一小块碘的混合物中。得到的混合物回流约3小时，然后冷却至室温约30分钟。随后将(3，5-二甲氧基苯基)溴化镁在0℃下缓慢加到搅拌的1，2-二甲氧基-1H-苯并咪唑-5-甲醛(1.3g，7.5mmol)的THF(10mL)溶液中。加毕，将溶液在室温下搅拌约1小时。混合物冷却到0℃并用饱和NH4Cl溶液(40mL)猝灭。水层用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤并干燥(MgSO4)。除去溶剂，粗产物在己烷中形成浆料，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲醇(2.1g，91％)的灰白色固体：1H NMR(CDCl3)δ7.66(s，1H)，7.24-7.20(dd，J＝1，8Hz，1H)，7.17(d，J＝8Hz，1H)，6.56(d，J＝2Hz，2H)，6.31(t，J＝2Hz，1H)，5.84(s，1H)，3.72(s，6H)，3.63(s，3H)，3.55(b，1H)，2.52(s，3H)。
将(3，5-二甲氧基-苯基)-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲醇(2.1g，6.7mmol)和MnO2(2.9g，33.6mmol)的CH2Cl2(300mL)悬浮液在室温下搅拌17小时。混合物通过硅藻土过滤，除去溶剂。粗产物与乙醚形成浆料，得到(3，5-二甲氧基-苯基)-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲酮(2.0g，99％)的灰白色固体：1H NMR(DMSO-d6)δ7.90(s，1H)，7.71-7.62(m，2H)，6.80(s，3H)，3.80(s，3H)，3.35(s，3H)，2.58(s，3H)；13C NMR(DMSO-d6)δ195.28，160.17，154.83，141.54，140.27，139.15，130.15，123.50，120.73，109.70，107.19，103.62，55.47，29.96，13.52。
3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-丙烯腈(E和Z异构体)通过采用类似于制备3-(3-氨基-4-甲氧基-苯基)-3-(3，4-二甲氧基-苯基)-丙烯腈(E和Z异构体)的方法，用(3，5-二甲氧基-苯基)-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-甲酮(2.0g，6.4mmol)，双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(7.7mL，7.7mmol)和氰基甲基磷酸二乙酯(1.4g，7.7mmol)制备。粗产物用快速柱色谱法(硅胶，CH2Cl2∶CH3OH为95∶5)纯化，得到白色固体的3-(3，5-二甲氧基-苯基)-3-(1，2-二甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-丙烯腈(1.1g，50％)的异构体混合物：mp 199-201℃；1H NMR(CDCl3)δ7.69(m，3H)，6.56-6.42(m，3H)，5.70(5.74)(s，1H)，3.77(s，3H)，3.73(3.74)(s，6H)，2.61(s，3H)；13C NMR(CDCl3)δ163.76，160.63(160.60)，153.22(153.54)，142.35(142.57)，141.69(139.43)，137.04(137.38)，130.69(132.54)，123.74(122.64)，120.81(119.54)，118.23(118.09)，108.84(108.80)，107.02(107.72)，102.08(102.02)，94.32(93.47)，55.42(55.41)，30.05(30.00)，13.88；分析计算C20H19N3O2+0.2H2O：C，71.28；H，5.80；N，12.47。实测值：C，71.18；H，5.86；N，12.42。
等同声明：
本发明不受此处所述的具体实施方案的范畴的限制。实际上，对本领域技术人员来说除此处所述之外的本发明的各种修改将将是显而易见的。这类修改在附加权利要求书的范畴内。
此处所引用的各出版物，其公开的内容通过引用而纳入本文中。

Claims (30)

1.具有下式的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物：
Figure A2005800377040002C1
其中：
X为取代或未取代的咪唑、取代或未取代的吡啶、取代或未取代的吡咯烷、取代或未取代的噻吩、取代或未取代的吲哚、取代或未取代的2，3-二氢苯并呋喃、取代或未取代的3，4-二氢-2H-苯并(b)(1，4)噁嗪、取代或未取代的1H-苯并(d)(1，2，3)三唑、取代或未取代的喹啉、取代或未取代的苯并呋喃、取代或未取代的苯并(d)噁唑-2(3H)酮或取代或未取代的嘧啶；
R1和R2各自独立地为-H、-CN、卤素、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、-NHC(O)R9、-NHC(O)OR9、-COOH、-C(O)-低级烷基、-C(O)O-低级烷基、-C(O)-N(R9)2、取代或未取代的芳基、或取代或未取代的杂环；
Ra和Rb各自独立地为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
R3为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2，或者R3与Ra或R4一起形成-O-C(R16R17)O-、-O-(C(R16R17))2-O-或-O-(C(R16R17))3-O-；
R4为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
R5为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
每个R9独立地为-H、取代或未取代的低级烷基、或取代或未取代的环烷基；
每个R10独立地为取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的低级羟烷基、或R10和其所连接的氮原子形成取代或未取代的杂环、或适当情况下R10为-H；
R16和R17各自独立地为-H或卤素；和
其中当：
(1)X为吡啶、取代的吡啶、吡咯烷、咪唑、萘或噻吩；
(2)Ra和Rb是H；和
(3)R4为氢、硝基、氰基、三氟甲基、乙氧羰基、甲氧羰基、丙氧羰基、乙酰基、氨基甲酰基、乙酰氧基、羧基、羟基、氨基、低级烷基、低级亚烷基甲基、低级烷氧基、或卤素时，
如果R3或R5之一为H，则另一个不为-O-C1-10烷基、-O-C1-10单环烷基、-O-C1-10多环烷基、-O-C1-10苯并环烷基、-C0-3-C1-10烷基、-C0-3-C1-10单环烷基、-C0-3-C1-10多环烷基、-C0-3-C1-10苯并环烷基、-CH＝C1-10烷基、-CH＝C1-10单环烷基或-CH＝C1-10双环烷基。
2.具有下式的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或水合物：
Figure A2005800377040004C1
其中：
X为取代或未取代的吲哚、取代或未取代的2，3-二氢苯并呋喃、取代或未取代的3，4-二氢-2H-苯并(b)(1，4)噁嗪、取代或未取代的1H-苯并(d)(1，2，3)三唑、取代或未取代的喹啉、取代或未取代的苯并呋喃、取代或未取代的苯并(d)噁唑-2(3H)酮或取代或未取代的嘧啶；
R1和R2各自独立地为-H、-CN、卤素、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、-NHC(O)R9、-NHC(O)OR9、-COOH、-C(O)-低级烷基、-C(O)O-低级烷基、-C(O)-N(R9)2、取代或未取代的芳基、或取代或未取代的杂环；
Ra和Rb各自独立地为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
R3为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2，或者R3与Ra或R4一起形成-O-C(R16R17)O-、-O-(C(R16R17))2-O-或-O-(C(R16R17))3-O-；
R4为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
R5为-H、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的烷氧基、卤素、氰基、-NO2、-OH、-OPO(OH)2、-N(R9)2、-OC(O)-R10、-OC(O)-R10-N(R10)2、-OC(O)-R10-NH2、-C(O)N(R10)2、-NHC(O)-R10、-NHS(O)2-R10、-S(O)2-R10、-OS(O)2-R10、-S(O)2-NH2、-S(O)2-N(R10)2、-OS(O)2-NH2、-OS(O)2-N(R10)2、-NHC(O)O-R10、-NHC(O)NH-R10、-NHC(O)N(R10)2、-NHC(O)NHSO2-R10、-NHC(O)-R10-N(R10)2、-NHC(O)CH(R10)(N(R9)2)或-NHC(O)-R10-NH2；
每个R9独立地为-H、取代或未取代的低级烷基、或取代或未取代的环烷基；
每个R10独立地为取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的低级羟烷基，或者R10和其所连接的氮原子形成取代或未取代的杂环，或者在适当情况下R10为-H；和
R16和R17各自独立地为-H或卤素。
3.具有下述结构的化合物或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物：
Figure A2005800377040007C1
4.权利要求1、2或3的化合物，其中所述化合物为E异构体。
5.权利要求1、2或3的化合物，其中所述化合物为Z异构体。
6.药物组合物，该药物组合物包含权利要求1或2的化合物和药学上可接受的载体。
7.权利要求6的药物组合物，其中所述组合物适于肠胃外、经皮、粘膜、鼻、颊、直肠、舌下或口服给予个体。
8.抑制血管生成的方法，所述方法包括将有效量的权利要求1或2的化合物给予需要的个体。
9.抑制或降低细胞中微管蛋白聚合或微管蛋白稳定性的方法，所述方法包括将细胞与权利要求1或2的化合物接触。
10.权利要求9的方法，其中所述细胞为癌细胞。
11.抑制细胞中PDE4活性的方法，所述方法包括将细胞与权利要求1或2的化合物接触。
12.抑制或降低细胞中微管蛋白聚合或微管蛋白稳定性并抑制细胞中PDE4活性的方法，所述方法包括将细胞与权利要求1或2的化合物接触。
13.抑制或降低细胞中微管蛋白聚合或微管蛋白稳定性并抑制细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活性的方法，所述方法包括将细胞与权利要求1或2的化合物接触。
14.治疗或改善炎性病症的方法，所述方法包括将有效量的权利要求1或2的化合物给予需要的个体。
15.权利要求14的方法，其中所述炎性病症是哮喘、变应性病症、以1型介导的炎症为特征的炎性病症、以2型介导的炎症为特征的炎性病症、纤维化疾病、肺纤维化、银屑病、多发性硬化、系统性红斑狼疮、慢性梗阻性肺病(COPD)、脑炎、炎性肠病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎性病、缺血性再灌注损伤、痛风、白塞氏病、脓毒性休克、未分化脊椎关节病、未分化关节病、关节炎、类风湿性关节炎(少年和成人)、骨关节炎、牛皮癣关节炎、炎性骨质溶解、脓毒症、脑膜炎和慢性病毒或细菌感染导致的慢性炎症。
16.治疗或改善癌症的方法，所述方法包括将有效量的权利要求1或2的化合物给予需要的个体。
17.抑制癌细胞增殖的方法，所述方法包括将癌细胞与有效量的权利要求1或2的化合物接触。
18.抑制对多种药物具有耐药性的癌细胞增殖的方法，所述方法包括将对多种药物具有耐药性的癌细胞与有效量的权利要求1或2的化合物接触。
19.靶向、阻断或破坏肿瘤血管系统的功能的方法，所述方法包括将肿瘤与有效量的权利要求1或2的化合物接触。
20.靶向、阻断或破坏肿瘤血管内皮的方法，所述方法包括将肿瘤与有效量的权利要求1或2的化合物接触。
21.靶向、阻断或破坏肿瘤血管系统的功能并抑制肿瘤内血管生成的方法，所述方法包括将肿瘤与有效量的权利要求1或2的化合物接触。
22.治疗或改善中枢神经系统病症的方法，所述方法包括将有效量的权利要求1或2的化合物给予需要的个体。
23.权利要求22的方法，其中所述中枢神经系统病症为帕金森氏病、运动徐缓、肌体强直、帕金森氏病样震颤、帕金森氏病样步态障碍、运动冻结(motion freezing)、抑郁症、长期记忆缺失、鲁宾斯坦-泰比综合征(RTS)、痴呆、睡眠障碍、姿势不稳、运动功能减退症、炎症、突触核蛋白异常、多系统萎缩、纹状体黑质变性、橄榄体脑桥小脑萎缩、Shy-Drager综合征、具有帕金森氏特征的运动神经元疾病、路易小体痴呆、Tau病理病症、进行性核上性麻痹、皮质基底核变性、额颞叶型痴呆、淀粉状蛋白病变病症、轻度认知机能障碍、阿尔茨海默病、具有帕金森氏神经机能障碍的阿尔茨海默病、可具有帕金森氏病特征的遗传病症、Wilson氏病、Hallervorden-Spatz疾病、Chediak-Hagashi疾病、SCA-3脊髓小脑性共济失调、X-连锁肌张力障碍帕金森氏综合征、亨廷顿病、朊病毒病、运动过度症、舞蹈病、颤搐、张力障碍性震颤、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)、中枢神经系统创伤或肌阵挛。
24.治疗或改善难以治愈的癌症的方法，所述方法包括将有效量的权利要求1或2的化合物给予需要的个体。
25.权利要求24的方法，其中所述化合物为E异构体。
26.权利要求24的方法，其中所述化合物为Z异构体。
27.权利要求24的方法，其中所述癌症用秋水仙碱、紫杉烷类药物(taxane)或长春碱难以治愈。
28.权利要求权利要求16或24的方法，所述方法还包括将有效量的一种或多种其它抗癌剂给予所述个体。
29.权利要求28的方法，其中所述至少一种抗癌剂为紫杉醇、紫杉萜(taxotere)、顺铂、卡铂、奥沙利铂、多柔比星、吉西他滨、卡培他滨、5-氟尿嘧啶、依托泊苷、环磷酰胺、长春新碱、长春碱、托泊替康或伊立替康。
30.权利要求28的方法，其中所述至少一种抗癌剂为抗血管生成剂、血管靶向制剂、免疫调节剂或抗炎剂。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109851601A (zh) * 2019-03-29 2019-06-07 吉首大学 一种含氰基苯并呋喃的合成方法和用途
CN113527400A (zh) * 2013-04-17 2021-10-22 萨奇治疗股份有限公司 19-去甲c3,3-二取代的c21-n-吡唑基类固醇及其使用方法

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006028963A2 (en) * 2004-09-03 2006-03-16 Celgene Corporation Substituted heterocyclic compounds and uses thereof
JP2009539774A (ja) * 2006-06-03 2009-11-19 サイリーン ファーマシューティカルズ インコーポレーティッド 薬物の投与方法
CN100586932C (zh) * 2007-01-26 2010-02-03 中国医学科学院医药生物技术研究所 抗肿瘤化合物及其制备方法
US8349846B2 (en) * 2008-01-11 2013-01-08 Glenmark Pharmaceuticals, S.A. Fused pyrimidine derivatives as TRPV3 modulators
US8119647B2 (en) * 2008-04-23 2012-02-21 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Fused pyrimidineone compounds as TRPV3 modulators
WO2011112988A1 (en) * 2010-03-11 2011-09-15 Oxigene, Inc. Ophthalmic formulations
DE202011108135U1 (de) 2011-11-11 2012-02-06 Metso Paper, Inc. Vorrichtung zur Entlüftung eines auf eine Faserbahn aufzutragenden Beschichtungsmedium
EP2961746B1 (en) 2013-02-28 2018-01-03 Bristol-Myers Squibb Company Phenylpyrazole derivatives as potent rock1 and rock2 inhibitors
TW201444798A (zh) 2013-02-28 2014-12-01 必治妥美雅史谷比公司 作爲強效ｒｏｃｋ１及ｒｏｃｋ２抑制劑之苯基吡唑衍生物
CA2923075C (en) 2013-09-12 2022-07-26 Alios Biopharma, Inc. Aza-pyridone compounds and uses thereof
EA036776B1 (ru) 2015-03-11 2020-12-21 Янссен Байофарма, Инк. Соединения азапиридона и способы их применения
US10767164B2 (en) 2017-03-30 2020-09-08 The Research Foundation For The State University Of New York Microenvironments for self-assembly of islet organoids from stem cells differentiation
CN107149005B (zh) * 2017-04-18 2021-05-04 安徽农业大学 一种红茶菌戊聚糖奶片的制备方法
CN115286562B (zh) * 2022-08-18 2024-02-23 青海大学 含有富电子的芳杂环或芳胺类化合物的苯甲酰化方法

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE208999C (zh)
US3094533A (en) * 1961-10-13 1963-06-18 Pfizer & Co C 3-pyridyl-acrylonitriles
US4420479A (en) 1982-04-08 1983-12-13 Eli Lilly And Company Olefinic benzimidazoles, formulations, and antiviral methods
US4492708A (en) * 1982-09-27 1985-01-08 Eli Lilly And Company Antiviral benzimidazoles
JPS58188868A (ja) 1983-04-08 1983-11-04 イ−ライ・リリ−・アンド・カンパニ− オレフイン系ベンズイミダゾ−ル類
DE3525623A1 (de) * 1985-07-18 1987-01-22 Celamerck Gmbh & Co Kg Fungizid wirksame acrylsaeureamide
JPH0830063B2 (ja) * 1986-11-18 1996-03-27 富山化学工業株式会社 新規なイミダゾ−ル誘導体およびその塩
ES2059467T3 (es) 1987-10-21 1994-11-16 Du Pont Merck Pharma Derivados de aminometil-oxooxazolidinil-etenilbenceno utiles como agentes antibacterianos.
US5006435A (en) * 1988-10-05 1991-04-09 Fuji Xerox Co., Ltd. Electrophotographic photosensitive member with additive in charge generating layer
JPH0566591A (ja) 1991-09-10 1993-03-19 Canon Inc 電子写真感光体、該電子写真感光体を備えた電子写真装置並びにフアクシミリ
DE4220983A1 (de) * 1992-06-26 1994-01-05 Bayer Ag Imidazolyl-substituierte Phenylpropion- und -zimtsäurederivate
WO1994008975A1 (en) * 1992-10-16 1994-04-28 Nippon Soda Co., Ltd. Pyrimidine derivative
US5591776A (en) 1994-06-24 1997-01-07 Euro-Celtique, S.A. Pheynl or benzyl-substituted rolipram-based compounds for and method of inhibiting phosphodiesterase IV
US6429221B1 (en) * 1994-12-30 2002-08-06 Celgene Corporation Substituted imides
US5728844A (en) * 1995-08-29 1998-03-17 Celgene Corporation Immunotherapeutic agents
US5728845A (en) * 1995-08-29 1998-03-17 Celgene Corporation Immunotherapeutic nitriles
DE69739181D1 (de) * 1996-08-12 2009-02-05 Celgene Corp Neue immunotherapeutische Mittel und deren Verwendung in der Reduzierung von Cytokinenspiegel
AU4849199A (en) 1998-07-01 2000-01-24 Celgro Fungal growth inhibitors
US6667316B1 (en) * 1999-11-12 2003-12-23 Celgene Corporation Pharmaceutically active isoindoline derivatives
US6518287B2 (en) * 2000-09-20 2003-02-11 Schering Corporation Substituted imidazoles as dual histamine H1 and H3 agonists or antagonists
CN1802353A (zh) * 2002-12-30 2006-07-12 细胞基因公司 氟烷氧基取代的1,3－二氢－异吲哚化合物及其药物用途
WO2006028963A2 (en) * 2004-09-03 2006-03-16 Celgene Corporation Substituted heterocyclic compounds and uses thereof

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113527400A (zh) * 2013-04-17 2021-10-22 萨奇治疗股份有限公司 19-去甲c3,3-二取代的c21-n-吡唑基类固醇及其使用方法
CN109851601A (zh) * 2019-03-29 2019-06-07 吉首大学 一种含氰基苯并呋喃的合成方法和用途

Also Published As

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