CN103037860A - 用于治疗炎症性疾病的吡咯烷取代的黄酮 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及如分子式1所示的化合物，

Description

用于治疗炎症性疾病的吡咯烷取代的黄酮
技术领域
本发明涉及如分子式1（如本文所述）所示的化合物、其立体异构体或互变异构体、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂化合物，在治疗炎症性疾病上的用途。
背景技术
炎症在宿主防御和免疫介导性疾病的进展中起着根本性的作用。炎症反应始于通过化学介质（例如细胞因子和前列腺素）和炎症细胞（如白血球）对受伤处（如外伤、局部缺血和异物微粒）和/或对感染（如细菌性或病毒性感染）的反应。其特征表现为组织的血流量增加，然后导致发热、红斑、硬化和疼痛。
在炎症反应中，体液和细胞免疫元素之间存在一个微妙的平衡，使得能消除有害因素并启动修复受损的组织。当这种微妙平衡相互作用遭到破坏时，炎症反应可能会导致对正常组织造成相当大的危害和引发比原始损伤更具危害性的反应。在这种不受控制的炎症反应的情况下，防止损伤组织和器官功能障碍的临床干预是必要的。如风湿性关节炎、骨关节炎、克罗恩病、哮喘、过敏、败血性休克综合征、动脉粥样硬化以及其他临床条件的炎症性肠病等疾病具有慢性炎症的特性。
几种促炎细胞因子，尤其是肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素（IL-1β,IL-6,IL-8），在炎性过程中扮演者重要的角色。IL-1和TNF-α源于单核细胞和巨噬细胞，然后反过来诱导各种基因表达，有助于炎症过程。
风湿性关节炎（RA）是一种自身免疫性疾病。风湿性关节炎是一种慢性、具有系统性且病因不明的关节炎性疾病。在风湿性关节炎（RA）中，正常的薄滑膜关节内衬被炎症性的、高度血管化的，侵入性的纤维胶原酶（fibrocollagenase）组织（血管翳）代替，这会同时破坏软骨和骨头。可能受影响的区域包括手，手腕，颈部，下巴，手肘，膝盖，脚和脚踝关节。在风湿性关节炎中，受到影响的关节软骨的破坏与异常的细胞因子和生长因子的表达相关。
骨关节炎（OA，也称作退化性关节炎，退化性关节疾病）是一种与关节退化有关的最常见的关节炎类型，涉及包括关节软骨和与关节软骨相连的软骨下骨的关节退化。在骨关节炎中，各种各样的潜在力量，遗传，发育，代谢和机械外力，都可以启动导致软骨损失、产生大量润滑关节和缓冲关节的蛋白质基质的流程。随着骨头表面起保护作用的软骨的减少，软骨下骨可能暴露在外并受损，在再生的过程中导致象牙化增殖，稠密化和在中心区域的反应性软骨损失，这一过程被称为骨质象牙化。因为疼痛导致运动量的减少，局部的肌肉可能萎缩，韧带可能会变得松弛。骨关节炎是一种最常见的骨关节炎，而且也是导致慢性残疾的主要原因。
炎症性肠病（IBD）是因失调导致肠道发炎的疾病。该炎症持续很长的一段时间并且经常复发。两种主要的炎症性肠病为克罗恩氏病和溃疡性结肠炎。在当肠道的里外开始发炎红肿导致发展成溃疡时，会出现克罗恩氏病。虽然克罗恩氏病会发生在消化系统的任意角落，但它最常发生在连接结肠的小肠靠下的部分。溃疡性结肠炎是一种病因不明的慢性自身免疫性/炎性疾病，其折磨着大肠，这种疾病影响着世界各地数百万人。已经确认的是：然而，这是一个不正常的免疫反应，包括胃肠道的正常革兰阴性菌的组成部分，增强表达的慢性病灶炎性细胞因子，趋化性细胞因子，内皮细胞粘附分子（ECAMs）和增强白细胞浸润到结肠空隙，在结肠炎的发病机制中发挥了关键作用。该疾病过程温和地或严重地持续复发。最初的病变是一种炎性浸润伴随着在利氏肠腺窝形成脓疡。腺窝的胀大而破裂的合并使得上覆粘膜从它的血液供应中分离出来，导致溃疡。疾病的迹象和症状包括腹部绞痛，下腹部疼痛、直肠出血、频繁而散漫的排放以血液，脓和粘液为主和稀疏的粪便粒子。急性的、严重的或者慢性而持续不断的溃疡性结肠炎可能需要将一个全部结肠切除术。
牛皮癣是一种慢性的，非感染性的影响着皮肤和关节的自身免疫性疾病。通常会导致皮肤出现红鳞状的斑点，这些斑点是由于牛皮癣导致的，也称作斑块牛皮癣。这些斑点就是皮肤发炎和过多皮屑产生的区域。牛皮癣也可能导致关节炎，即被称为牛皮癣关节炎。10%~15%的牛皮癣患者都有牛皮癣关节炎。有许多有效的治疗牛皮癣的治疗方式，但是由于其慢性的自然复发性，牛皮癣是难以治愈的。
肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，一种多效性细胞因子，主要是由巨噬细胞分泌产生，但也可以由其他的细胞可以产生。肿瘤坏死因子--α表现出有益性和病理性。除了自我调节，它同时具有生长刺激作用和生长抑制性。TNF-α的有益功能包括通过调节人体的生理节律维持体内平衡，增强对细菌，病毒，真菌和寄生虫感染免疫响应，通过刺激成纤维细胞增长和，顾名思义，杀死某些肿瘤来更换或重塑受伤组织。TNF-α源于单核细胞和巨噬细胞，然后反过来诱导各种基因表达，有助于各种疾病，如炎症疾病。
虽然TNF-α在先天性和后天免疫反应中具有重要作用，然而不适当地产生的TNF-α会产生病变并导致慢性炎症和组织损伤。TNF-α已经被证明能够在很多慢性炎性疾病的发病机理中起关键作用，如炎症性肠病、风湿性关节炎、青少年类风湿性关节炎、银屑病关节炎、骨关节炎、难治性类风湿性关节炎、慢性非类风湿性关节炎、骨质疏松症/骨吸收、冠心病、血管炎、溃疡性结肠炎、牛皮癣、成人呼吸窘迫综合征、糖尿病、皮肤过敏性疾病延迟类型和阿尔茨海默氏症。
IL-1（白介素1号）是先天性免疫系统中重要组成部分，它控制自适应免疫系统的功能。其所在组织的IL-1和IL-1受体拮抗剂(IL-1ra)之间的平衡影响炎性疾病可能性发展和结构损伤结果。当IL-1的量过多时，炎症和自身免疫性疾病可能发展在关节，肺，胃肠道，中枢神经系统（CNS)或血管中。
细胞粘附分子细胞间粘附分子1（ICAM-1），血管粘附分子1(VCAM-1)，负责补充炎症细胞的选择蛋白，如中性粒细胞，嗜酸细胞，T淋巴细胞，从传播到炎症所在地，补充和留住白细胞在所有慢性炎症性疾病的发病机制其中关键的作用，如风湿性关节炎。
治疗炎性疾病首先使用的就是非甾体抗炎药(NSAIDs)，例如：布洛芬，萘普生用于减轻如疼痛等病症。然而，尽管NSAIDs已经广泛使用，在治疗时间延长时，众所周知，由于NSAIDs会导致胃糜烂，很多人还是无法忍受治疗疾病所需的剂量。此外，非甾体类抗炎药只是治疗炎症性疾病的症状，而不治本。当病人对NSAIDs不能响应时，则使用甲氨蝶呤、金盐、D青霉胺和皮质类固醇等。这些药物也有很强的副作用。
单克隆抗体药物如英夫利昔，依那西普和阿达木单抗等作为抗炎剂是有效的，但是具有用药途径只能在肠外的限制，高成本，过敏反应，激活潜伏结核病，增加癌症和心脏病风险的缺点。
虽然磷酸二酯酶4（PDE4）抑制剂发展为用于治疗哮喘、过敏性皮炎、风湿性关节炎、多发性硬化和克罗恩病，多量的PDE4s非选择性抑制剂会导致复杂的生理反应。PDE4抑制剂的治疗潜在性被剂量限制、呕吐和恶心的副作用阻碍了，如在使用西洛司特(SB 207499,ArifloTM)（Current Opinion in ChemicalBiology,2001,5,432-438）时。
同样的，虽然p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂是潜在消炎药，其副作用包括胃溃疡，肝毒性和肾毒性。例如，研发出来的2-[2(S)-氨基-3-苯丙基氨基]-3-甲基-5-(2-萘基)-6-(4-吡啶基)嘧啶-4(3H)-酮(AMG 548,安进)，由于随机性肝酶升高不是剂量或曝光依赖而被停用。使用p38激酶抑制剂长期治疗后需要建立一个安全影响档案。（Current Medicinal Chemistry,2005,12,2979-2994）。
美国4,900,727号专利揭示了苯并吡喃-4-酮派生物可以作为抗炎药，R.G.Naik等在（Tetrahedron,1988,44(7),2081-2086）介绍了从坚木属红果葱臭木提取出来的具有抗炎作用的苯并吡喃-4-酮派生物。
尽管有许多可用于治疗炎性疾病的治疗方法，仍然有必要继续改善和替代药物治疗炎性疾病。
美国7,271,193号专利，美国US20070015802号申请公布和PCTWO2007148158号申请公布，一起作为整体用作来参照资料，描述了吡咯烷取代黄酮作为CDK抑制剂用于治疗不同类型的癌症的应用。目前发明人已经发现特定的吡咯烷取代黄酮如分子式1的化合物用于治疗炎性疾病。本发明提供一种使用上述的吡咯烷取代黄酮作为新的抗炎药。
发明内容
本发明的一个方面，提供了如分子式1所示的化合物（结构所示下文），其立体异构体，或它的互变异构体或药学上可接受的盐，或其药学上可接受的溶剂化物，在用于治疗的炎症性疾病的用途。
本发明的另一个方面，提供了一种用于治疗炎症性疾病的药物组合物，该组合物包括如分子式1的化合物，它的立体异构体或互变异构体或它的药学上可接受的盐，或其药学上可接受的溶剂化物和至少一种药学上可接受的载体。
本发明还提供了一种治疗炎症性疾病的方法，给予需要治疗的对象一种有效治疗所需量的如分子式1所示的化合物，或它的互变异构体或药学上可接受的盐，或其药学上可接受的溶剂化物。
本发明还涉及到如分子式1所示的化合物，或它的互变异构体或药学上可接受的盐，或其药学上可接受的溶剂化物，在制备一种治疗炎症性疾病的药物上的用途。
本发明的另一个方面，提供了如分子式1所示的化合物（如本文所述），或它的互变异构体或药学上可接受的盐，或其药学上可接受的溶剂化物，在制备一种治疗炎症性疾病的药物上的用途，这些炎症性疾病是被提高了水平的一个或多个炎症细胞因子介导的，所述炎症细胞因子选自肿瘤坏死因子-a(TNF-α)和白细胞介素（IL-1β,IL-6,IL-8），或者所述炎症性疾病是被增加了表现力的一个或者多个细胞粘附分子介导的，所述细胞粘附分子选自细胞间粘附分子1(ICAM-1)，血管-细胞粘附分子1(VCAM-1)和E-选择蛋白或它们的组合。
附图说明
图1显示了体外筛选p38MAP激酶抑制和IκBα降解的免疫印迹分析；
图2A显示了代表性化合物诱导凋亡的滑膜液单个核细胞（SFMC）在贴壁细胞群，所述被代表性化合物是实施例3的化合物；
图2B显示了代表性化合物诱导凋亡的滑膜液单个核细胞（SFMC）在非贴壁细胞群，所述被代表性化合物是实施例3的化合物；
图3显示了代表性化合物，即实施例3的化合物，对有关节炎的（CIA）DBA/1J小鼠后肢总和的关节指数的有效治疗；
图4显示了代表性化合物，即实施例3的化合物，对有关节炎的（CIA）DBA/1J小鼠爪的厚度的有效治疗；
图5显示了代表性化合物，实施例3的化合物与载体（对照）和Enbrel相比，治疗的动物的组织病理学评估。
具体实施方式
在一个实施方式中，本发明涉及如分子式1所示的化合物在治疗炎症性疾病上的用途：
Figure BDA00002307416600061
分子式1
其中，Ar为苯基或杂芳基环，所述的苯基或杂芳基环可不被取代或被1，2或3个相同或不同的取代基取代，所述的取代基选自卤素，硝基，氰基，C1~C4的烷基，一氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，羟基，C1~C4的烷氧基，羧基，C1~C4的烷氧羰基，C1~C4的亚烷基羟基，CONH2，CONR1R2，SO2NR1R2，环烷基，NR1R2和SR3；
其中，R1和R2各自独立地选自H，C1~C4的烷基，C1~C4的烷氧羰基和芳基，或者R1和R2与它们键合的氮原子一起，形成5-元环或6-元环，所述5-元环或6-元环可以选择性地包含至少一个杂环原子；及
R3选自H，C1~C4的烷基和苯基，或者它们的立体异构体或互变异构体，或者它们的药学上可接受的盐或药学上可接受的溶剂化合物。
定义：
出于公开的目的，下面列出的是用于描述本发明的各种术语的定义。这些定义适用于整个说明书和所附的权利要求书（除非它们是在特定情况下另有限定）中的术语，单独或作为更大范围内的组的一部分。它们不应该被解释的字面意义。它们不是一般的定义，仅适用于本申请。
术语“烷基”是指饱和脂肪族基团，包括直链烷基和支链烷基的基团。含1至4个碳原子的烷基残基的例子是：甲基，乙基，正丙基，正丁基，异丙基，异丁基，仲丁基，和叔丁基。
术语“环烷基”指的是约3至7个碳原子的非芳族单环或多环系统。环烷基的例子包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基等。环烷基可以是未取代的或被一个或多个不同的取代基取代的，该一个或多个不同的取代基选自卤素，硝基，氰基，C1-C4-烷基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，羟基，C1-C4-烷氧基，羧基，C1-C4-烷氧羰基，及CONH2。
本文所用的术语“烷氧基”是指如上所定义的具有氧自由基所附的烷基。代表的烷氧基包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，叔-丁氧基等。
术语“卤素”是指氯，溴，氟和碘。
本文所用的术语“杂芳基”是指含有1至3个相同的或不同的杂原子的单环芳族环体系。术语“杂原子”是指氮，氧和硫。杂芳基可以在环上包括，例如，1或2个硫原子，1个或2个氧原子和/或1～3个氮原子。在单环基团中，杂芳基可以是一个3元，4元，5元或6元环。杂芳基包括吡咯，噻吩，恶唑，呋喃，噻唑，吡唑，吡啶等。
在本说明书中，术语“如分子式1所示的化合物”在适当的地方单独使用时，它被当作包括了如分子式1所示的化合物的立体异构体，或者其互变异构体或其药学上可接受的盐，或其药学上可接受的式1的化合物的溶剂化物。
可以理解，“取代”或“取代的”包括隐式的条件是这样的取代是根据允许的价数的取代原子及取代基，以及代表稳定的化合物，这些化合物不容易进行不希望的变换，例如重排，环合，或消除。
术语“药学上可接受的”是指必须与制剂的其它成分相容，并且对其接受者无害的载体，稀释剂，赋形剂，和/或盐。
术语“治疗有效量”是指如分子式1所示的化合物或包含所述化合物的组成，对需要调节或治疗的疾病足以产生积极的变化，但低到足以避免如果有（在合理的利益/风险比）的副作用，在合理的医学判断的范围之内。如分子式1所示的化合物或包含所述化合物的组成的治疗有效量可能随着具体的炎症性疾病，对象（患者）的年龄和身体状况，被治疗/防止的病症的严重程度，治疗持续时间，并行疗法的性质，具体的化合物或组合物，特别是利用药学上可接受的载体，和类似的因素，而改变。
术语“治疗”，“治疗”或“治疗”如本文所用，是指减轻，减缓恶化，衰减或治愈现有的疾病（例如，类风湿关节炎）。
本文所用的术语“对象”是指给动物，优选哺乳动物，最优选人类。
本文所用的术语“炎性病症”是指一种疾病或一个条件，其特征在于由慢性炎症，包括但不限于类风湿性关节炎，骨关节炎，幼年型类风湿关节炎，银屑病关节炎，难治性类风湿关节炎，慢性非类风湿关节炎，骨质疏松症/骨吸收，冠状动脉疾病，动脉粥样硬化，血管炎，溃疡性结肠炎，牛皮癣，Crohn氏病，成人呼吸窘迫综合征，迟发型超敏反应，皮肤疾病，脓毒性休克综合征，和炎性肠疾病。
术语“药学上可接受的盐”是指包括活性的化合物（即如分子式1所示的化合物）的盐，该化合物是与酸或碱制备的，取决于上发现本文所描述的化合物的特定的取代基的化合物的活性化合物。药学上可接受的碱加成盐的实例包括钠，钾，钙，镁，铵或有机碱的盐。药学上可接受的有机碱加成盐的实例包括那些衍生自有机碱如赖氨酸，精氨酸，胍，二乙醇胺等。药学上可接受的酸加成盐的实例包括那些衍生自无机酸，如盐酸，氢溴酸，硝酸，碳酸，碳酸一氢酸（monohydrogencarbonic），磷酸，磷酸一氢酸（monohydrogenphosphoric），二氢磷酸，硫酸，硫酸一氢酸（monohydrogensulfuric），氢碘酸或亚磷酸等，以及衍生的盐有机酸，如乙酸，丙酸，异丁酸，草酸，马来酸，丙二酸，苯甲酸，琥珀酸，辛二酸，富马酸，扁桃酸，邻苯二甲酸，苯磺酸，对甲苯磺酸（p-tolylsulfonic），柠檬酸，酒石酸，甲磺酸，葡糖醛酸或半乳糖醛酸等。
如本文所用的术语“药学上可接受的载体”，是指稀释剂，包封材料或制剂助剂，它是无毒，惰性，固体或半固体。这些可以作为药学上可接受的载体的材料，举例来说，是糖，如乳糖，葡萄糖和蔗糖，淀粉（如玉米淀粉和马铃薯淀粉）；纤维素及其衍生物（如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和纤维素乙酸酯，麦芽，明胶，滑石），以及其他无毒的相容的润滑剂，如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂，释放剂，包衣剂，甜味剂，调味剂和香味剂；根据配方设计师的判断，防腐剂和抗氧化剂也可以存在于该组合物中。
如分子式1所示的化合物可以通过以下文献公开的方法制备：美国7271193号专利，美国20070015802号专利申请和WO2007148158号PCT专利申请，这些通过引用的方式并入本文。以下合成路线1描述的方法能够被用来制备分子式（VIA）的中间体。
Figure BDA00002307416600091
合成路线1
制备分子式Ⅴ的化合物的步骤从分子式II的化合物开始，该制备方法在美国专利4900727中已有描述，在此引入本文作为参考。在冰醋酸中，1-甲基-4-哌啶酮（分子式Ⅲ的化合物）与1,3,5-三甲氧基苯（分子式Ⅱ化合物）反应，得到1-甲基-4-（2,4,6-三甲氧基苯基）-1,2,3,6-四氢吡啶（分子式IV的化合物）。分子式IV的化合物与三氟化硼乙醚，硼氢化钠和四氢呋喃进行反应，得到分子式V的化合物。在上述路线的分子式V的化合物向分子式VIA的化合物的转换过程中，在氧亲核试剂存在的情况下，通过合适的试剂，哌啶环上的羟基官能团可能会被转换为离去基团，例如对甲苯磺酰基，甲磺酰基，三氟甲磺酸或卤化物，这些试剂例如可以为对甲苯磺酰氯，甲磺酰氯，三氟甲磺酸酐或五氯化磷，该氧亲核试剂例如可以为三乙胺，吡啶，碳酸钾或碳酸钠；接下来在氧亲核试剂，例如乙酸钠或乙酸钾，的存在，且在在醇溶剂如异丙醇，乙醇或丙醇的条件下，在通过环收缩形成。上述步骤中出现的环收缩反应可以在黄酮形成之前发生，或在与所需的取代基一起建立黄酮之后发生。
对映体纯的中间体化合物VIA的(-)-反式对映体被用来制备对映体纯的化合物I。通过在过程中使用高的对映体纯度的中间体作为起始化合物，通过上述过程所得到的由分子式I表示的黄酮所取代的(+)-反式对映体也具有相应的高对映体纯度。
从解析的对映体纯的中间体化合物VIA的(-)-反式对映体开始制备对映体纯的由分子式I表示的(+)-反式对映体，或其药学可接受的盐的方法包括以下步骤：
（a）在路易斯酸催化剂的存在下，使用乙酸酐处理解析的对映体纯的中间体化合物VIA的(-)-反式对映体，
Figure BDA00002307416600101
以得到解析的乙酰化的分子式VIIA的化合物。
Figure BDA00002307416600102
（b）在碱和一种溶剂的存在下，使解析的乙酰化的分子式VIIA的化合物与一种分子式为ArCOOH的酸，或分子式为ArCOCl的酰氯，或分子式为(ARCO)2O的酸酐，或分子式为ArCOOCH3的酯反应，其中Ar如上文所定义，得到解析的分子式VIIIA的化合物；
Figure BDA00002307416600111
（c）在合适的溶剂中，使用碱处理解析的分子式VIIIA的化合物，以获得相应的解析的分子式IXA的β-二酮化合物；
Figure BDA00002307416600112
其中Ar如上文所定义。
（d）使用酸，例如盐酸来处理分子式IXA的β-二酮化合物，以得到相应的分子式XA的环化化合物，
（e）使用脱烷基化剂，通过加热到120~180°C使分子式XA的环化化合物脱烷基化，以得到由分子式I表示的(+)-反式对映体，同时，可选的，将该化合物转化成它的药学上可以接受的盐。
上述（a）的步骤中使用的路易斯酸催化剂，可以选自：三氟化硼。Et2O中，氯化锌，氯化铝和氯化钛。
处理步骤（b）中使用的碱可以选自三乙胺，吡啶和DCC-DMAP组合（N，N'-二环己基碳化二亚胺和4-二甲基氨基吡啶的组合）。
本领域技术人员可以了解，分子式VIIIA的化合物到分子式IXA的β-二酮化合物的重排被称作为贝克-文卡塔拉曼重排（Baker-Venkataramanrearrangement，J.Chem.Soc.,1381(1933)and Curr.Sci.,4,214(1933)).
在步骤（c）所用的碱可以选自：六甲基二硅基锂，六甲基二硅基胺基钠，六甲基二硅基胺基钾，氢化钠和氢化钾。最优选的是锂六甲基二硅。分子式IXA的化合物的脱烷基化过程中的步骤（e）所用的脱烷基化剂可以选自：吡啶盐酸盐，三溴化硼，三氟化硼乙醚化物和三氯化铝。最优选的脱烷基化剂是吡啶盐酸盐。
本发明一个实施例中，分子式1表示的化合物选自以下化合物，其中Ar为苯环，所述的苯环可不被取代或被1，2或3个相同或不同的取代基取代，所述的取代基选自卤素，硝基，氰基，C1～C4的烷基，氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，羟基，C1~C4的烷氧基，羧基和NR1R2，其中R1和R2各自独立地选自：氢，C1~C4的烷基和C1~C4的羰基；或其立体异构体或互变异构体或它们的药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂化物。
本发明另一个实施例中，分子式1表示的化合物选自以下化合物，其中Ar为苯环，所述的苯环可不被取代或被1，2或3个相同或不同的取代基取代，所述的取代基选自卤素，硝基，氰基，C1~C4的烷基，氟甲基，二氟甲基；或其立体异构体或互变异构体或它们的药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂化物。
本发明再一个实施例中，如分子式1所示的化合物选自：
（+）-反式-2-（2-氯-4-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-4-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-甲烷磺酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-4-氰-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（4-溴-2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-4-硝-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2，4-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-噻吩-2-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-（3-硝基苯基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（3-溴-2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（3-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-硝-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-吡咯烷-1-基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（3-溴-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二羟基-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2，3-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-碘-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-异丙氨基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；和
（+）-反式-2-（3-碘-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐。
在本发明的另一个实施例里，如分子式1所示的化合物选自：
（+）-反式-2-（2-氯-4-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-4-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-4-氰-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-4-硝-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2，4-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-（3-硝基苯基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2，3-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-碘-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；和
（+）-反式-2-（2-氯-3-异丙氨基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐。
在一个实施例中，本发明公开了一种治疗炎症性疾病的方法，涉及给予需要治疗的对象一种有效治疗所需量的如分子式1所示的化合物。
根据本发明，所述炎症性疾病是被提高了水平的一个或多个炎症细胞因子介导的，所述炎症细胞因子选自肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素（IL-1β,IL-6,IL-8），或者所述炎症性疾病是被增加了表现力的一个或者多个细胞粘附分子介导的，所述细胞粘附分子选自细胞间粘附分子1(ICAM-1)，血管-细胞粘附分子1(VCAM-1)和E-选择蛋白或它们的组合。
在本发明另一个实施例中，如分子式1所示的化合物为TNF-α的抑制剂，其可用于治疗TNF-α异常活动的相关疾病，这些疾病包括：炎症性肠疾病，类风湿关节炎，幼年型类风湿关节炎，银屑病关节炎，骨关节炎，难治性类风湿关节炎，慢性非-类风湿关节炎，骨质疏松症/骨骨吸收，克罗恩病，动脉粥样硬化，脓毒性休克综合症，冠状动脉心脏疾病，血管炎，溃疡性结肠炎，牛皮癣，成人呼吸窘迫综合征，迟发型超敏反应的皮肤疾患。
在本发明另一个实施例中，如分子式1所示的化合物为IL-1β，IL-6和/或IL-8抑制剂，其可用于治疗IL-1β，IL-6和/或IL-8异常活动的相关疾病，这些疾病包括：类风湿关节炎，骨关节炎和其它自身免疫疾病，如多发性硬化和各种形式的狼疮。
在本发明另一个实施例中，如分子式1所示的化合物为一个或多个细胞的粘附分子如ICAM-1，VCAM-1和E-选择蛋白的表达抑制剂，其可用于治疗与细胞粘附分子的增加表达相关的炎症性疾病。
在本发明的另一个实施例中，提供了一种药物组合物，该组合物包括治疗有效量的分子式1所示的化合物作为有效成分和至少一种药学上可接受的载体。该药物组合物适合用于治疗炎症性疾病。
目前设想，适于治疗一种炎症性疾病的不同药物组合物应含有约1至99％，例如5至70%，或10~30%重量的分子式1所示的化合物，或其药学上可接受的盐。
根据本发明，药物组合物中包含的药学上可接受的载体可从分子式1所示的化合物的给药途径和标准制药实践中选择。
根据本发明，该药物组合物可以口服给药，例如，采用丸剂，片剂，包衣片剂，胶囊剂，颗粒剂或酏剂的形式给药。然而，给药方式也可以经直肠给药，例如以栓剂的形式；或以肠胃外方式给药，例如通过在静脉内，皮下，肌肉注射无菌溶液或悬浮液的形式；或局部给药，例如，在溶液或软膏的形式，或经过皮肤的药膏的形式；或其他方式给药，例如气溶胶或鼻喷雾剂的形式。
制备根据本发明的药物组合物的方法是本领域技术人员所熟悉的，例如，通过常规的混合，溶解，制粒，糖衣丸，磨擦混合，乳化，封装，截留或压片过程。
对于生产丸剂，片剂，包衣片剂和硬明胶胶囊，可以使用，例如，乳糖，玉米淀粉或其衍生物，阿拉伯胶，氧化镁或葡萄糖等。用于软明胶胶囊和栓剂的载体是，例如，脂肪，蜡，天然或硬化油等。用于生产合适溶液，例如可为注射的无菌溶液，或乳剂或糖浆剂，的载体可为，例如，水，生理氯化钠溶液或醇，例如，乙醇，丙醇或甘油，糖溶液，如葡萄糖溶液或甘露糖醇溶液，或已经提到的各种溶剂的混合物。
除了分子式1所示的化合物和其药学上可接受的载体的药物组合物之外还可以包含添加剂，例如，填充剂，抗氧化剂，分散剂，乳化剂，消泡剂，矫味剂，防腐剂，增溶剂或着色剂。
本发明中化合物的给药剂量，是可以覆盖很宽的范围的。每天给药的剂量要被选择，以满足所需的效果。为约1至500mg/m2的本发明的化合物的剂量可以每天给药。如果需要，也可以按照更高或更低的每日剂量给药。选定的剂量水平将取决于多种因素，包括分子式1所示的化合物的活性，给药的途径，给药的时间，所采用的特定的化合物的排泄率，治疗的持续时间，其它药物，化合物和/或组合使用的材料与特定的化合物，患者的年龄、性别、体重、条件、一般健康状况和之前病史，及其他在医学领域众所周知的因素。
本发明还设想出了利用分子式1所示的化合物与其它药学上的活性化合物的组合用途。比如，一种包括分子式1所示的化合物的药物组合物，可以与另一种在治疗炎症性疾病有效的药物活性的化合物一起施用于对象，尤其是人类，这些药物活性的化合物如非甾体抗炎药，硫代苹果酸金钠（GST），氨甲喋呤（MTX），地塞米松（DEX）的药物制剂的形式。
根据本发明，分子式1所示的某些化合物可以存在于未溶剂化的形式以及溶剂化形式，包括水合形式。分子式1的某些化合物可能存在于多晶或非晶的形式。在一般情况下，作为本发明的预期用途的所有的物理形式都是等效的，属于本发明的范围之内。
本领域的技术人员将认识到，分子式1的某些化合物存在立体式（stereocentres）。因此，本发明包括分子式1的所有可能的立体异构体和几何异构体，不仅包括外消旋化合物，还包括光学活性异构体。当期望的分子式1的化合物是作为一个单一的对映体时，它可能通过最终产品的解析，或从任一异构体纯的起始原料或中间体的立体专一性合成方式获得。最终产物，中间体或起始材料的解析，可通过本领域中已知的任何合适的方法获得（Chiral reagentsfor Asymmetric Synthesis by Leo A.Paquette;John Wiley & Sons Ltd(2003)）。此外，当分子式1的化合物的互变异构体是可能的情况下，本发明包括该化合物的所有的互变异构体形式。
可以理解，对本发明的各种实施例的基本上不影响的修改都包括在本发明所公开的范围内。
本发明的化合物可以通过标准有机化学来制备，以下通过实施例来说明。以下实施例被列举来说明本发明的一些特定的化合物的合成，并举例说明的一般过程。下面给出的实施例中，本发明进行详细说明，但不应该被解释为限制本发明的范围。
以下缩写或术语在此处解释：
CD3OD：氘代甲醇
CDCl3：氘代氯仿
DCM：二氯甲烷
DMF：N，N-二甲基甲酰胺
DMSO：二甲亚砜
DMSO-d6：氘代二甲亚砜
EDTA：乙二胺四乙酸
FCS：胎牛血清
HCl：盐酸
NaHCO3：碳酸氢钠
Na2CO3：碳酸钠
NaH：氢化钠
n-BuLi：正丁基锂
NMR核磁共振
PBS：磷酸盐缓冲盐水
THF：四氢呋喃
实施例
实施例1-22对应的化合物被按照以下方法制备，如在美国专利申请US20070015802中公开的，并/或公布的WO2007148158号PCT申请，这两篇文件在此被引入作为参考。
实施例1
（-）-反式-（3-（3-乙酰基-2-羟基-4,6-二甲氧基苯基）-1-甲基吡咯烷-2-基）乙酸甲酯
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例11和WO2007148158号PCT申请的实施例6中公开的方法制备。
实施例2
（+）-反式-2-（2-氯-4-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟基-甲基-1-甲基吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例43中公开的方法制备。
实施例3
（+）-反式-2-（2-氯-4-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-色烯-4-酮盐酸盐
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例44中公开的方法制备。
实施例4
+）-反式-2-（2-氯-4-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例49中公开的方法制备。
实施例5
（+）-反式-2-（2-氯-4-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例50中公开的方法制备。
实施例6
（+）-反式-2-（2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例14和WO2007148158号PCT申请的实施例9中公开的方法制备。
实施例7
（+）-反式-2-（2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例15和WO2007148158号PCT申请的实施例10中公开的方法制备。
实施例8
（+）-反式-2-（2-溴-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例140和WO2007148158号PCT申请的实施例15中公开的方法制备。
实施例9
（+）-反式-2-（2-溴-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例16中公开的方法制备。
实施例10
（+）-反式-2-（2-溴-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮甲磺酸
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例17中公开的方法制备。
实施例11
（+）-反式-2-（2-氯-4-氰基苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例39中公开的方法制备。
实施例12
（+）-反式-2-（2-氯-4-氰基苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例40中公开的方法制备。
实施例13
（+）-反式-2-（4-溴-2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例100和WO2007148158号PCT申请的实施例34中公开的方法制备。
实施例14
（+）-反式-2-（4-溴-2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例35中公开的方法制备。
实施例15
（+）-反式-2-（2-溴-4-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例42中公开的方法制备。
实施例16
（+）-反式-2-（2-溴-4-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例43中公开的方法制备。
实施例17
（+）-反式-2-（2,4-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例30中公开的方法制备。
实施例18
（+）-反式-2-（2,4-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
该化合物根据WO2007148158号PCT申请的实施例31中公开的方法制备。
实施例19
（+）-反式-2-（2-氯-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例27中公开的方法制备。
实施例20
（+）-反式-2-（2-氯-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例28中公开的方法制备。
实施例21
（+）-反式-1,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-噻吩-2-基-苯并吡喃-4-酮
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例68中公开的方法制备。
实施例22
（+）-反式-1,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-噻吩-2-基-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
该化合物根据美国专利申请US20070015802的实施例69中公开的方法制备。
实施例23
（+）-反式-3-硝基-苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（1.42g,8.49mmol）将3-硝基苯甲酸（1.42g，8.49mmol）被转化为它的酰氯。将三乙胺（1.586ml，11.38mmol）加入到实施例1的化合物（2.0g，5.69mmol）在干燥的DCM（20mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
产率：2.6g（61.25%）。
实施例24
（+）-反式-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-2-（3-硝基-苯基）-苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，5.32ml，12.48mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（2.63ml，12.48mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例23化合物（2.5g，4.97mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状2.2g反式-乙酸3-{2-羟基-4,6-二甲氧基-3-[3-（3-硝基-苯基）-3-氧代-丙酰基]-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯。该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：1.15g(52.51%);1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.81(t,1H),8.45(d,1H),8.35(d,1H),7.58(t,1H),6.76(s,1H),6.47(s,1H),4.50(m,1H),4.01(s,3H),4.02(s,3H),3.81(dd,1H),3.41(m,2H),2.90(m,2H),2.55(s,3H),2.19(m,2H);MS(ES+):m/z 441(M+1).
实施例25
（+）-反式-1,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-（3-硝基苯基）-苯并吡喃-4-酮
实施例24的化合物（0.5g，1.13mmol）和吡啶盐酸盐（1.2g，10.38mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.250g（53.53%）；1H NMR(CDCl3,300MHz):δ12.44(s,1H),8.86(s,1H),8.38(d,1H),8.15(d,1H),7.72(t,1H),6.67(s,1H),6.31(s,1H),4.39(dd,1H),4.07(dd,1H),3.86(m,1H),3.33(m,2H),2.85(m,1H),2.66(s,3H),2.56(m,1H),2.01(m,1H);MS(ES+):m/z  413(M+1).
实施例26
（+）-反式-5-1,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-（3-硝基苯基）-色烯-4-酮盐酸盐
实施例25的化合物（0.225g，0.545mmol）悬浮于甲醇（2ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.225g（92.21%）；1H NMR(DMSO-d6,300MHz):δ12.87(s,1H),11.63(s,1H),8.81(s,1H),8.55(d,1H),8.42(d,1H),7.85(t,1H),7.22(s,1H),6.47(s,1H),4.15(m,1H),3.69(m,5H),2.92(s,3H),2.42(m,1H),2.22(m,1H).
MS(ES+):m/z 413(M+1)（与游离碱对应）
实施例27
（+）-反式-3-溴-2-氯-苯甲酸2-乙酰基-6-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.99ml，11.3mmol）将3-溴-2-氯-苯甲酸（2.0g，8.53mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（1.586ml，11.38mmol）加入到实施例1的化合物（2.0g，5.69mmol）在干燥的DCM（20mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
产率：3.0g（66.99%）
实施例28
（+）-反式-2-（3-溴-2-氯-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，5.54ml，13.10mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（2.764ml，13.10mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例27化合物（3.0g，5.27mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状2.4g,4.21mmol乙酸3-{3-[3-（3-溴-2-氯-苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4,6-二甲氧基-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.423g(15.74%);1H NMR(CDCl3,300MHz):δ7.81(dd,1H),7.62(dd,1H),7.34(dd,1H),6.46(s,1H),6.43(s,1H),4.27(m,1H),4.02(s,6H),3.85(m,2H),3.74(m,2H),3.01(m,1H),2.87(s,3H),2.48(m,1H),2.26(m,1H);MS(ES+):m/z 509(M+1).
实施例29
（+）-反式-2-（3-溴-2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例28的化合物（0.280g，0.550mmol）和吡啶盐酸盐（0.780g，6.74mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.125g(47.34%);1H NMR(CD3OD,300MHz):δ7.92(dd,1H),7.67(dd,1H),7.40(t,1H),6.32(s,1H),6.13(s,1H),3.93(m,1H),3.74(dd,1H),3.61(dd,1H),3.44(m,1H),3.27(m,1H),3.07(m,1H),2.71(s,3H),2.20(m,2H);MS(ES+):m/z 480.
实施例30
（+）-反式-2-（3-溴-2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
实施例29的化合物（0.120g，0.24mmol）悬浮于甲醇（2ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.120g（93.02%）
实施例31
（+）-反式-3-氯-苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.81ml，10.9mmol）将3-氯苯甲酸（1.15g，7.39mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（3.85ml，27.7mmol）加入到实施例1的化合物（2.0g，5.69mmol）在干燥的DCM（15mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（5.0mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
产率：3.8g（100%）
实施例32
（+）-反式-2-（3-氯-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，8.2ml，19.25mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（4.06ml，19.9mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例31化合物（3.8g，7.75mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状2.7g乙酸3-{3-[3-（3-氯-苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4-1,6-二甲氧基-苯基}1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.565g（16.95%）；1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.02(d,1H),7.82(d,1H),7.42(t,2H),6.6(s,1H),6.42(s,1H),4.32(m,1H),3.97(s,3H),3.95(s,3H),3.78(d,1H),3.25(m,2H),2.75(m,2H),2.55(m,2H),2.40(s,3H);MS(ES+):m/z431.1(M+1).
实施例33
（+）-反式-2-（3-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例32的化合物（0.565g，1.31mmol）和吡啶盐酸盐（1.2g，10.38mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率:0.150g(19.96%);1H NMR(CD3OD,300MHz):δ7.83(d,1H),7.71(d,1H),7.49(d,1H),7.43(t,1H),6.53(s,1H),6.28(s,1H),4.31(m,1H),4.05(d,1H),3.82(m,1H),3.31(m,2H),2.85(m,3H),2.66(s,3H);2.53(m,1H),
2.01(m,1H);MS(ES+):m/z 402.1(M+1).
实施例34
（+）-反式-2-（3-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-色烯-4-酮盐酸盐
实施例33的化合物（0.140g，0.349mmol）悬浮于甲醇（2ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.100g（65.40%）
实施例35
（+）-反式-2-氯-3-硝基-苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.83ml，9.9.45mmol）将2-氯-3-硝基-苯甲酸（1.5g，7.44mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（2.80ml，20.19mmol）加入到实施例1的化合物（2.0g，5.69mmol）在干燥的DCM（15mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（5.0mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
粗产率：3.8g
实施例36
（+）-反式-2-（2-氯-3-硝基-苯基）-8-（2-（羟甲基）-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，8.2ml，19.25mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（4.02ml，19.25mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例35的化合物（3.8g，7.11mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状2.5g乙酸3-{3-[3-（2-氯-3-硝基-苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4,6-二甲氧基-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率:0.90g(26.59%);1H NMR(CDCl3,300MHz):δ7.93(dd,1H),7.87(dd,1H),7.54(t,1H),6.48(s,1H),6.43(s,1H),4.11(m,1H),3.978(s,3H),3.94(s,3H),3.63(m,1H),3.29(m,2H),2.65(m,1H),2.47(m,2H),2.29(s,3H),2.01(m,1H);MS(ES+):m/z 475.1(M+1).
实施例37
（+）-反式-2-（2-氯-3-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例36的化合物（0.900g，1.88mmol）和吡啶盐酸盐（0.600g，5.1mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率:0.300g(35.6%);1H NMR(DMSO-d6,300MHz):δ8.26(dd,1H),8.07(dd 1H),7.77(t,1H),6.56(s,1H),6.11(s,1H),3.72(m,1H),3.47(d,2H),2.86(m,2H),2.71(m,1H),2.41(s,3H),2.11(m,1H);2.79(m,1H);
MS(ES+):m/z 447.1(M+1);MS(ES-):m/z 445.1(M-1).
实施例38
（+）-反式-2-（2-氯-3-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-色烯-4-酮盐酸盐
实施例37的化合物（0.250g，0.560mmol）悬浮于甲醇（2ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.200g（74.01%）
实施例39
（+）-反式-2-氯-3-三氟甲基-苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（4.6ml，50.7mmol）将2-氯-3-三氟甲基-苯甲酸（10.0g，44.5mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（7.2ml，52.0mmol）加入到实施例1的化合物（13.6g，38.70mmol）在干燥的DCM（60mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10.0mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
粗产率：25.0g
实施例40
（+）-反式-2-（2-氯-3-三氟甲基-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，4.2ml，9.8mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（2.06ml，9.8mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例39化合物（2.2g，3.9mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状2.0g乙酸3-{3-[3-（2-氯-3-三氟甲基-苯基）-3-氧代-丙酰基]-2-羟基-4,6-二甲氧基-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率:0.560g(28.89%);1H NMR(MeOD,300MHz):δ8.05(d,1H),7.99(d,1H),7.72(dd,1H),6.74(s,1H),6.41(s,1H),4.04(s,3H),4.01(s,3H),3.86(m,1H),3.53(m,2H),3.33(m,1H),2.99(t,1H),2.75(t,1H),2.36(s,3H),2.08(m,2H).
实施例41
（+）-反式-2-（2-氯-3-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例40的化合物（0.560g，1.12mmol）和吡啶盐酸盐（0.700g，6.05mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率:0.100g(18.96%);1H NMR(CD3OD,300MHz):δ8.04(d,1H),7.98(dd,1H),7.70(t,1H),6.37(s 1H),6.14(s,1H),3.93(m,1H),3.72(d,1H),3.62(d,1H),3.33(m,1H),2.68(s,3H),2.62(m,2H);2.19(m,2H);MS(ES-):m/z 468(M-1).
实施例42
（+）-反式-2-（2-氯-3-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-色烯-4-酮盐酸盐
实施例41的化合物（0.090g，0.192mmol）悬浮于甲醇（1.5ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.085g（87.58%）
实施例43
（+）-反式-2-氯-3-甲基-苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.893ml，10.0mmol）将2-氯-3-甲基-苯甲酸（1.4g，8.3mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（1.37ml，9.6mmol）加入到实施例1的化合物（2.26g，6.4mmol）在干燥的DCM（15mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
粗产率：3.0g
实施例44
（+）-反式-2-（2-氯-3-甲基-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-苯并吡喃-4-酮
NaH（0.840g，29.7mmol）悬浮在无水DMF（15mL）中，然后滴加实施例43（3.0g，5.95mmol）溶解于15ml无水DMF的溶液。反应混合物在室温在氮气氛下搅拌2小时。将反应混合物用甲醇（1.0毫升）淬灭。加入氯化铵溶液，然后使用DCM（3×20毫升）萃取，在减压下除去溶剂，得到氨基甲酸3-{3-[3-（2-氯-3-甲基-苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4,6-二甲氧基-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯（2.5g，5.6mmol），该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率:1.5g(56.9%);1H NMR(CDCl3,300MHz):δ7.37(dd,1H),7.24(t,1H),6.39(s,1H),6.10(s,2H),3.92(s,3H),3.84(m,1H),3.76(s,6H),3.55(d,1H),3.33(m,1H),3.19(m,1H),2.69(m,1H),2.58(m,2H),2.37(s,3H),2.20(m,1H);MS(ES+):m/z 444.2(M+1).
实施例45
（+）-反式-2-（2-氯-3-甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例44的化合物（1.0g，2.25mmol）和吡啶盐酸盐（3.0g，25.95mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.300g(32.12%);1H NMR(DMSO-d6300MHz):δ7.58(d,1H),7.56(d1H),7.41(t,1H),6.41(s,1H),6.13(s,1H),3.71(m,1H),3.40(m,2H),2.79(m,2H),2.40(m,1H),2.41(s,3H),2.39(m,3H),2.10(m,1H),1.78(m,1H);MS(ES+):m/z 416(M+1).
实施例46
（+）-反式-2-（2-氯-3-甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
实施例45的化合物（0.300g，0.72mmol）悬浮于甲醇（1.5ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.250g（76.9%）
实施例47
（+）-反式-2-氯-3-吡咯烷-1-基-苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.79ml，10.7mmol）将2-氯-3-三氟甲基-苯甲酸（1.6g，7.15mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（1.13ml，8.5mmol）加入到实施例1的化合物（2.0g，5.6mmol）在干燥的DCM（15mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10.0mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
粗产率：3.5g（84.87%）
实施例48
（+）-反式-（2-氯-3-吡咯烷-1-基-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，6.85ml，15.6mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（3.36ml，15.6mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例47化合物（3.5g，6.4mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状4.0g乙酸3-{3-[3-（2-氯-3-吡咯烷-1-基-苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4,6-二甲氧基-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率:0.650g(22.96%);1H NMR(CDCl3,300MHz):7.23(d,1H),7.03(dd,2H),6.46(s,1H),6.36(s,1H),4.02(s,3H),3.97(s,3H),3.91(dd,2H),3.8(dd,2H),3.63(m,1H),3.40(m,4H),3.05(dd,2H),2.82(m,1H),2.62(dd,1H),2.46(m,2H),2.24(s,3H),1.96(m,1H);MS(ES+):m/z 499.2(M+1).
实施例49
（+）-反式-2-（2-氯-3-吡咯烷-1-基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例48的化合物（0.650g，1.30mmol）和吡啶盐酸盐（1.5g，12.90mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.075g(12.0%);1H NMR(CD3OD,300MHz):δ7.32(d,1H),7.10(d,1H),7.09(d,1H),6.98(s,1H),6.62(s,1H),4.97(m,1H),4.25(m,1H),3.90(t,2H),3.34(s,2H),2.90(m,2H),2.50(s,3H),2.10(s,4H),1.33(s,4H);
MS(ES+):m/z 471.2(M+1).
实施例50
（+）-反式-2-（2-氯-3-吡咯烷-1-基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
实施例49的化合物（0.075g，0.159mmol）悬浮于甲醇（1ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.070g（86.92%）
实施例51
（+）-反式-3-溴苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.76ml，8.8mmol）将3-溴苯甲酸（1.37g，6.8mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（4.04ml，28mmol）加入到实施例1的化合物（2.0g，5.69mmol）在干燥的DCM（20mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10.0mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
粗产率：4.6g
实施例52
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，9.18ml，21.5mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（4.51ml，21.4mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例51化合物（4.6g，8.6mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状5.0g乙酸3-{3-[3-（3-溴-苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4，6-二甲氧基-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率:1.4g(35.3%);1H NMR(CDCl3,300MHz):δ9.21(d,1H),8.90(d,1H),8.70(d,1H),8.48(t,1H),7.72(s,1H),7.53(s,1H)5.65(m,1H),4.14(s,3H),4.09(s,3H),4.69(m,2H),4.33(m,2H),4.18(m,2H),3.88(s,3H),3.36(m,2H);
MS(ES+):m/z 474.0(M+1).
实施例53
（+）-反式-2-（3-溴-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二羟基-苯并吡喃-4-酮
实施例52的化合物（1.40g，3.04mmol）和吡啶盐酸盐（2.0g，17.30mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.540g(39.4%);1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.04(t,1H),7.78(d,1H),7.65(d,1H),7.39(,m,1H),6.56(s,1H),6.30(s,1H),4.32(dd,1H),4.03(dd,1H),3.84(dd,1H),3.32(m,2H),2.91(m,1H),2.68(s,3H),2.55(m,2H),MS(ES+):m/z 447.68(M+1).
实施例54
（+）-反式-2-（3-溴-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二羟基-色烯-4-酮盐酸盐
实施例53的化合物（0.540g，1.2099mmol）悬浮于甲醇（2ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.500g（85.64%）
实施例55
（+）-反式-2,3-二氯苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.76ml，8.87mmol）将2,3-二氯苯甲酸（1.3g，6.82mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（4.04ml，28mmol）加入到实施例1的化合物（2.0g，5.69mmol）在干燥的DCM（20mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10.0mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
粗产率：4.35g
实施例56
（+）-反式-2-（2,3-二氯-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5-6,7-二甲氧基苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，8.15ml，19.1mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（4.0ml，19.1mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例55化合物（4.35g，8.29mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状4.5g乙酸3-{3-[3-（2,3-二氯-苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4-2,6-二甲氧基-苯基}1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.670(25.47%);1H NMR(CD3OD,300MHz):δ8.77(d,1H),8.66(d,1H),8.55(t,1H),7.51(s,1H),7.56(s,1H),5.37(m,2H),5.13(s,3H),5.11(s,3H),4.95(m,1H),4.83(dd,3H),4.70(m,2H),3.37(d,1H),3.84(s,3H),3.47(m,2H);MS(ES+):m/z 464.1(M+1).
实施例57
（+）-反式-2-（2,3-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例56的化合物（0.670g，1.44mmol）和吡啶盐酸盐（2.0g，17.30mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.310g(49.34%);1H NMR(DMSO-d6,300MHz):δ77.78(d,1H),7.71(d,1H),7.49(m,1H),6.52(s,1H),6.38(s,1H),4.21(m,1H),3.87(m,2H),3.68(m,1H),3.60(dd,1H),3.37(m,1H),2.97(s,3H),2.51(m,1H),2.27(m,1H);
MS(ES-):m/z 434.1(M-1).
实施例58
（+）-反式-2-（2,3-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
实施例57的化合物（0.310g，0.714mmol）悬浮于甲醇（1.5ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.300g（89.11%）
实施例59
（+）-反式-2-氯-3-碘-苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.76ml，8.8mmol）将2-氯-3-碘-苯甲酸（1.92g，6.8mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（4.04ml，28mmol）加入到实施例1的化合物（2.0g，5.69mmol）在干燥的DCM（20mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10.0mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
粗产率：5.2g
实施例60
（+）-反式-2-（2-氯-3-碘代-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，9.01ml，21.0mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（4.44ml，21.0mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例59化合物（5.2g，8.4mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状4.8g乙酸3-{3-[3-（2-氯-3-碘苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4，6-二甲氧基-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.430g(9.15%);1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.04(d,1H),7.63(d,1H),7.14(t,1H),6.40(s,1H),6.47(s,1H),4.19(m,1H),4.02(s,3H),4.01(s,3H),3.89(d,1H),3.50(m,2H),2.95(m,2H),2.56(s,3H),2.25(m,2H).
实施例61
（+）-反式-2-（2-氯-3-碘代-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例60的化合物（0.430g，0.77mmol）和吡啶盐酸盐（2.0g，17.30mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.120g(29.4%);1H NMR(CD3OD,300MHz):δ8.15(d,1H),7.68(d,1H),7.23(t,1H),6.30(s,1H),6.15(s,1H),3.94(m,1H),3.78(d,2H),3.41(m,2H),3.05(m,1H),2.71(s,3H),2.20(m,2H);MS(ES+):m/z 528.0(M+1);MS(ES-):m/z 526.02(M-1).
实施例62
（+）-反式-2-（2-氯-3-碘代-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
实施例61的化合物（0.120g，0.227mmol）悬浮于甲醇（1ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.115g（89.90%）
实施例63
（+）-反式-2-氯-3-异丙基氨基-苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.80ml，9.0mmol）将2-氯-3-异丙基氨基-苯甲酸（1.8g，8.19mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（1.87ml，18.5mmol）加入到实施例1的化合物（2.4g，6.8mmol）在干燥的DCM（20mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10.0mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
粗产率：3.0g
实施例64
（+）-反式-2-（2-氯-3-异丙基氨基-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，5.85ml，13.7mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（2.87ml，13.7mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例63化合物（3.0g，5.4mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状3.0g乙酸3-{3-[3-（2-氯-3-异丙基氨基-苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4,6-二甲氧基-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：1.0g(37.5%);1H NMR(CDCl3,300MHz):δ7.50(d,1H),7.67(d,1H),6.40(s,1H),6.10(s,1H),5.95(s,1H),3.94(m,1H),3.87(s,3H),3.89(s,3H),3.56(m,2H),3.43(m,1H),3.23(m,2H),2.75(m,2H),2.57(s,3H);2.46(s,3H),2.44(s,3H);MS(ES+):m/z 487.2(M+1).
实施例65
（+）-反式-2-（2-氯-3-异丙基氨基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例64的化合物（0.900g，1.98mmol）和吡啶盐酸盐（2.0g，17.30mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.070g(8.08%);1H NMR(CD3OD,300MHz):δ7.73(d,1H),7.05(d,1H),6.91(d,1H),6.58(s,1H),6.37(s,1H),7.72(d,1H),7.05(d,1H),6.93(d,1H),6.58(s,1H),6.37(s,1H),4.39(m,1H),4.15(m,1H),3.98(m,1H),3.58(m,1H),2.65(m,2H),3.50(m,2H),2.37(m,1H),3.03(s,3H),1.30-1.28(d,6H);
MS(ES+):m/z 459.2(M+1);MS(ES-):m/z 457.2(M-1).
实施例66
（+）-反式-2-（2-氯-3-异丙基氨基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸
实施例65的化合物（0.070g，0.153mmol）悬浮于甲醇（1ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.065g（85.91%）
实施例67
（+）-反式-3-碘-苯甲酸2-（2-乙酰氧基甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-6-乙酰基-3,5-二甲氧基苯基酯
使用草酰氯（0.98ml，7.37mmol）将3-碘苯甲酸（1.83g，7.37mmol）转化为它的酰氯。将三乙胺（1.52ml，11.06mmol）加入到实施例1的化合物（2.0g，5.69mmol）在干燥的DCM（20mL）的溶液中。溶解在干燥的DCM（10.0mL）中的酰氯溶液逐滴加入其中，在25℃下搅拌反应2小时。将反应混合物倒入碎冰中，用饱和碳酸钠溶液（pH=10）中，用氯仿（3×200ml）萃取碱化，并将溶剂在减压下除去，得到粘稠的油状标题化合物。
粗产率：4.6g
实施例68
（+）-反式-2-（3-碘苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二甲氧基-苯并吡喃-4-酮
保持在0℃下在氮气气氛下，向n-BuLi（在己烷中的15％的溶液，8.4ml，19.77mmol）的THF（30mL）溶液中，滴加六甲基二硅氮烷（4.14ml，19.77mmol），并搅拌15分钟。往其中滴加实施例67化合物（4.6g，7.9mmol）的THF（30mL）溶液，并保持温度为0℃。滴加完毕后，将反应物加热至室温，并搅拌2.5小时。将反应混合物用稀HCl酸化，并用10％碳酸氢钠碱化至pH为8-9。用氯仿（3×75毫升）萃取水层。用水（50mL），盐水（50mL）洗涤有机层，并用无水硫酸钠干燥。将有机层在减压下浓缩，并在真空下干燥，得到油状5.0g乙酸3-{3-[3-（3-碘苯基）-3-氧代丙酰基]-2-羟基-4,6-二甲氧基-苯基}-1-甲基-吡咯烷-2-基甲基酯，该生成物被溶解在浓HCl（60mL）中，并搅拌3小时以进行环化。3小时后，将反应混合物用固体碳酸氢钠碱化，至pH为8-9。用氯仿（50×3mL）萃取水层，并与水（25ml）和盐水（25ml）洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩并真空干燥。残留物通过柱层析纯化，用3%甲醇的氯仿溶液和0.01%的氨水作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.6g(14.5%);1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.39(d,1H),7.97(d,1H),7.85(d,1H),7.25(t,1H),6.65(d,1H),6.48(s,1H),4.46(m,1H),4.10(s,3H),4.07(s,3H),3.94(d,1H),3.47(m,2H),2.95(m,2H),2.60(s,3H),2.23(m,2H).
实施例69
（+）-反式-2-（3-碘苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮
实施例68的化合物（0.4g，0.70mmol）和吡啶盐酸盐（0.327g，2.83mmol）的混合物加热至180℃反应2.5小时。用甲醇（60mL）稀释该反应混合物，并用固体碳酸钠碱化至pH为10。将反应混合物过滤，并用甲醇洗涤。将有机层浓缩，残余物用柱层析纯化，使用0.01%的氨和4.5%甲醇的氯仿溶液作为洗脱剂，得到标题化合物。
产率：0.15g(42.97%);1H NMR(CD3OD,300MHz):δ8.38(d,1H),8.02(d,1H),7.94(d,1H),733(t,1H),6.65(s,1H),6.15(s,1H),4.25(m,1H),3.75(d,2H),3.42(m,2H),3.33(m,1H),2.80(s,3H),2.35(m,2H);MS(ES+):m/z 494.21(M+1).
实施例70
（+）-反式-2-（3-碘苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
实施例69的化合物（0.050g，0.101mmol）悬浮于甲醇（1ml）中，用HCl的乙醚溶液处理，蒸发有机溶剂，得到标题的盐。
产率：0.045g（84.14%）
化合物的生物筛选：
分子式1所述的化合物用以抑制炎性细胞因子及/或细胞粘附分子的表现的功效可以通过在本领域中公知的一些药理测定确定，该炎性细胞因子包括肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素（IL-1β,IL-6,IL-8）；该细胞粘附分子包括细胞间粘附分子1(ICAM-1)，血管-细胞粘附分子1(VCAM-1)和E-选择蛋白。下述举例的药理实验是对分子式1所示的化合物和/或它们的盐进行的。
实验：
实施例71
在体外筛选以确定TNF-α，IL-1β，IL-6和IL-8的抑制剂
通过脂多糖（LPS）在人外周血单核细胞（HPBMCs）的细胞因子的产生的测定如参考，Physiol.Res.2003,52,593-598，其公开的内容被引入本文作为实验的参考。
从健康供体的血液收集到钾EDTA真空容器管（BD真空容器）。使用密度梯度离心法在Histopaque-1077溶液（Sigma）中，分离PBMC。分离的PBMC悬浮于RPMI 1640（Rosewell Park Memorial Institute）培养基(Sigma-Aldrich FineChemicals,USA)，该培养基包括10％的胎牛血清（FBS）（JRH，USA），100U/mL青霉素（Sigma Chemical Co.St Louis,MO,USA）和100μg/mL链霉素（SigmaChemical Co.St Louis,MO）。细胞浓度被调整为1×106cells/ml。通过台盼蓝染色排除确定的生存能力统一至Ly≥98%。将细胞悬浮液（100μL）添加到96孔培养板的孔中。细胞接种后，在培养基中，79μL培养基和1μL的各种浓度的试验化合物（分子式1的化合物）（终浓度0.001，0.003，0.005，0.01，0.025，0.03，0.05，0.1，0.25，0.3和1μM）溶解在DMSO（二甲亚砜，Sigma,MO,USA）加入到细胞中。DMSO的最终浓度被调节至0.5%。媒介（0.5%DMSO）被作为对照。咯利普兰（300μM），PDE4-选择性抑制剂（Piramal Life Sciences Limited(PLSL)的药物化学部合成）被用来作为一个标准的TNF-α抑制剂，而SB 203580（p38丝裂原活化蛋白（MAP）激酶的抑制剂）（10μM）（Sigma）被用来作为一个标准的IL-1β，IL-6和IL-8抑制剂。在37℃下，5％CO2气氛中，将培养板温育30分钟。最后，每孔20μL（10μg/ml）的LPS（Escherchia coli 0127:B8,Sigma ChemicalCo.,St.Louis,MO）被加入到温育板的孔内，至最终浓度为1μg/ml。在37℃下，5％CO2气氛中，将培养板温育5小时。为了评估分子式1所示的化合物的细胞毒性效应，在5小时保温后，使用MTS试剂（3-（4,5-二甲基吡啶-2-基）-5-（3-羧基甲氧基苯基）-2-（4-磺酰基）-2H-四唑鎓）来进行细胞活力试验。收集上清液并使用ELISA按照制造商（OptiEIA ELISA sets,BD Biosciences,Pharmingen）的描述测定IL-1β，IL-6及IL-8。使用GraphPad软件（棱镜3.03）通过非线性回归法计算出的50％抑制浓度（IC50）值。
下面的表1和1A显示了上述实验的结果。
表1：抑制TNF-α的IC50值
Figure BDA00002307416600461
表1A：代表性化合物，实施例3的化合物的IC50值，作为LPS诱导的从hPBMCs释放的TNF-α，IL-1β，IL-6及IL-8的抑制剂
Figure BDA00002307416600472
基于上述数据可以看出，实施例3的化合物，即一个有代表性的如分子式1所示的化合物，通过LPS刺激的新鲜分离的人外周血单核细胞，有效地阻止了炎性细胞因子（TNF-α，IL-1β，IL-6和IL-8）的表达。
实施例72
通过体外筛选方法确定释放TNF-α的抑制剂
滑膜组织设置
由类风湿关节炎患者膝关节置换术获得的滑膜细胞中的细胞因子，按照参考（Lancet，1989,29，244-247）中描述的方法测定，其公开的内容被引入本文作为实验的参考。
在37℃孵育3小时，5％CO2的气氛下，在RPMI（Roswell Park MemorialInstitute medium）培养基中，滑膜组织被消化，该培养基包含青霉素-G（100U/mL），链霉素（100μg/mL），两性霉素B（50ng/mL）（GIBCO），1.33mg/mL胶原酶I型（Worthington Biochemical Corporation,New Jersey,USA），含0.5μg/mL的DNA酶I型（SIGMA）和8.33U/mL的肝素（Biological E.Limited,India）。消化的组织通过一个膜（网眼大小为70微米）（SIGMA公司），然后过滤，将细胞洗涤3次，悬浮于完全培养基（补充了5％FCS和5％人血清的RPMI）。将细胞浓度调整至1×106cells/mL。通过台盼蓝染色排除确定的生存能力统一至Ly≥98%。将细胞悬浮液（100μL）添加到96孔培养板的孔中。细胞接种后，在培养基中，100μL培养基和1μL的各种浓度的试验化合物（实施例3的化合物）（终浓度0.001，0.003，0.01，0.03，0.1，0.3，1和3μM）溶解在DMSO（二甲亚砜，Sigma,MO,USA）加入到细胞中。DMSO的最终浓度被调节至0.5％。媒介（0.5%DMSO）被作为对照。SB 203580（20μM）被用来作为标准。在37℃下，5％CO2气氛中，将培养板温育30分钟。培养板离心（2,500rpm，10分钟），收集上清液，并贮存于70℃。清液中的TNF-α，白细胞介素-1β（IL-1β），白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素8（IL-8）的量通过使用由制造商（OptiEIA ELISAsets,BD BioSciences Pharmingen）推荐的ELISA协议来检测。使用GraphPad软件（棱镜3.03）通过非线性回归法计算出的50％抑制浓度（IC50）值。
下面的表2显示了上述实验的结果。
表2：代表性化合物，实施例3的化合物的IC50值，作为从新鲜分离的RA病人细胞自发释放的TNF-α，IL-1β，IL-6及IL-8的抑制剂
Figure BDA00002307416600481
Figure BDA00002307416600491
基于上述数据可以看出，实施例3的化合物，即一个有代表性的如分子式1所示的化合物，通过LPS刺激的新鲜分离的人外周血单核细胞，有效地阻止了促炎细胞因子（TNF-α，IL-1β，IL-6和IL-8）在新鲜分离的滑膜细胞的表达。
实施例73
体外筛选，以确定粘附分子的表达的抑制剂
本测试时根据参考（Transplantation,1997,63(5),759-764）来设计的，其公开的内容被引入本文作为实验的参考。
人脐静脉内皮细胞（HUVEC）从Cascade Biologics（美国俄勒冈州）得到。细胞培养在M-200培养基（Cascade Biologics）辅以低血清生长补充剂（LSGS）（Cascade Biologics），青霉素G（100U/ml），链霉素（100μg/mL）和两性霉素B（50ng/mL）（GIBCO）中。汇合了人脐静脉内皮细胞的涂覆纤连蛋白的96孔板中的板使用溶解于DMSO（二甲基亚砜，Sigma公司，USA）的不同浓度的实施例3的化合物（终浓度0.003，0.005，0.01，0.025，0.05，0.1，0.3和1μM）进行预处理。DMSO的最终浓度被调节至0.5%。媒介（0.5%DMSO）被作为对照。BAY 11-7082（细胞因子诱导的IκB-α的磷酸化抑制剂）（0.5和1μM）（Calbiochem公司）被使用作为一个标准的内皮细胞粘附分子（ECAMs）表达抑制剂。在37℃下，5％CO2气氛中，将培养板温育30分钟。使用TNF-α（1ng/ml）(R&D Systems(Minneapolis,MN))在37°C在5％二氧化碳的气氛中刺激4小时后，收获上清液并测定ICAM-1（细胞间粘附分子）的表达，而VCAM-1（血管细胞粘附分子）和E-选择蛋白的表达在6个小时的刺激后进行评估。为了评估化合物的细胞毒性效应，使用MTS试剂（3-（4,5-二甲基吡啶-2-基）-5-（3-羧基甲氧基苯基）-2-（4-磺酰基）-2H-四唑鎓）来进行细胞活力试验。为了定量测量细胞表面表达ICAM-1，VCAM-1和E-选择蛋白的量，ELISA测定法被执行，使用抗-ICAM-1（克隆BBIG-I1），抗VCAM-1（克隆BBIG-V1），抗E-选择素（克隆BBIG-E4）的抗体，小鼠IgG1同种型对照（克隆11711.11）和二次抗体（抗小鼠IgG-HRP抗体），这些抗体是从R&D Systems(Minneapolis,MN,USA)采购的。使用GraphPad软件（棱镜3.03）通过非线性回归法计算出的50％抑制浓度（IC50）值。
上述研究的结果如表3所示
表3：代表性化合物，实施例3的化合物的IC50值，作为TNF-α诱导的在人脐静脉内皮细胞的细胞表面表达ICAM-1，VCAM-1和E-选择蛋白的抑制剂
Figure BDA00002307416600501
基于表3数据可以看出，实施例3的化合物，即一个有代表性的如分子式1所示的化合物，有效地阻止了在TNF-α诱导的在人脐静脉内皮细胞的内皮细胞粘附分子ICAM-1，VCAM-1和E-选择蛋白的表达。
实施例74
在p38MAP激酶抑制和IκBα降解的体外筛选
用于识别抑制剂的p38促分裂原活化蛋白（MAP）激酶的方法根据参考（Journal of Lipid Research,1999,40,1911-1919）来设计，其公开的内容被引入本文作为实验的参考。
IκBα降解的方法根据参考（The Journal of Immunology,1999,103,6800-6809）来设计，其公开的内容被引入本文作为实验的参考。
材料
从美国典型培养物保藏中心（ATCC）得到的人Jurkat T细胞培养在RPMI培养基（Rosewell Park Memorial Institute）中，补充有10％胎牛血清（FBS），青霉素-G（100U/mL），链霉素（100μg/mL），在37℃下，在95％空气，5％二氧化碳的潮湿气氛。培养基每2-3天换液，并在收获前维持24小时。RPMI培养基，胎牛血清，CellLytic，抗β-肌动蛋白，原钒酸钠和茴香霉素均购自Sigma-Aldrich公司（美国）。TNF-α购自R&D Systems(USA)。完整的蛋白酶抑制剂的鸡尾酒从Roche购买。
方法
Jurkat细胞与媒介或实施例3（0.1μM）的化合物在37℃，CO2培养箱中预孵育1小时。对MAPK实验来说，将细胞用茴香霉素（10μg/mL）刺激30分钟。SB 203580（20μM）被用来作为标准。为了研究有关的IκBα降解和IκBα（磷酸化），用0.1nM的TNF-α刺激细胞0，5，15，30，60和90分钟。收获细胞，迅速用冰冷的PBS洗涤，并用冷的CellLytic缓冲液配合完整的蛋白酶抑制剂鸡尾酒和原钒酸钠进行裂解。通过在在4℃（20分钟），15000rpm下离心分离后得到蛋白提取物。对所产生的部分提取物，使用考加蛋白检测试剂（Pierce）,按照制造商的说明，分析其蛋白质含量。
蛋白质印迹
初级抗体如下：
p38MAPK，磷酸化p38MAPK，IκBα及磷酸化IκBα从Calbiochem(USA)购买。抗β-肌动蛋白从Sigma（USA）购买。
在所有的实验中，等量的蛋白（10μg）被加载在SDS/12.5％聚丙烯酰胺电泳凝胶上，并在一种缓冲溶液（24.9mM的Tris碱，250mM的甘氨酸，0.1％SDS（十二烷基硫酸钠））中，以150V的电压解析2小时。电泳后，将蛋白质从凝胶，在25V，45分钟从转移缓冲液（47.9mM的Tris碱，38.6mM甘氨酸，0.037％SDS，20％甲醇，pH值9.2-9.4）中转移到硝酸纤维素膜（Sigma-Aldrich公司）。在室温下1小时15分钟内，印迹被阻止在含有5％脱脂牛奶（Santa CruzBiotechnology公司）的Tris缓冲盐水（TBS）（20mM的Tris碱，0.9％的NaCl，pH为7.4）中，并与第一抗体一起温育，该第一抗体是在超级块的封闭缓冲液在TBS封闭液（Pierce）在4°C温和地摇晃过夜制备的。对膜进行洗涤，然后用辣根过氧化物酶（HRP）-缀合的第二抗体探测。采用化学发光过氧化物酶底物（Sigma-Aldrich公司）和柯达影像站对键进行显影。在50℃，使用溶出缓冲液（50mM的Tris-HCl，pH为6.8，1％SDS和β-巯基乙醇的100mM）将印迹剥离20分钟，然后洗涤，使用持家蛋白（housekeeping protein）β-肌动蛋白作为负荷控制的主要抗体重新探测。
本研究的结果如图1中所示。
基于上述实验的结果可以看出，实施例3的化合物，即分子式1的具有代表性的化合物，能够阻止TNF-α诱导的IkBα的磷酸化和降解，但不是p38MAP激酶的抑制剂。
实施例75
在体外筛选：PDE4抑制
从美国典型培养物保藏中心获得的人组织细胞淋巴瘤细胞（U937）生长在塑料瓶中，该塑料瓶中含有RPMI 1640培养基（RPMI，Gibco BRL，UK），补充有10％热灭活的小牛胎血清（FBS），青霉素（100U/ml）和链霉素（100μg/ml）在37℃，在95％空气，5％二氧化碳的潮湿气氛。培养基每2-3天换液，并在收获前维持24小时。RPMI培养基，胎牛血清，沙丁胺醇购自Sigma-Aldrich公司（美国）。咯利普兰在Piramal Life Sciences Limited的药物化学系合成。
方法
在所有的实验中，培养基通过离心（216×g每5分钟）移除，细胞悬浮于具有如下组成（mmol）的Krebs-Ringer-Henseleit缓冲液：氯化钠（NaCl），118;氯化钾（KCl），4.6；碳酸氢钠（NaHCO3），24.9；磷酸二氢钾（KH2PO4），1；D-葡萄糖，11.1；氯化钙（CaCl2），1；氯化镁（MgCl2），1.1；4-（2-羟乙基）-1-哌嗪乙磺酸，5，（pH=7.4）。为了引出PDE4的活性，490μL等分试样的细胞（1.02×106cell/mL）在37℃下95％空气的潮湿气氛中与溶剂和不同浓度的实施例3的化合物（1，3和10μM）进行预孵育，然后使用沙丁胺醇（1μM）刺激7分钟。咯利普兰作为标准（0.3，1和3μM）使用。沙丁胺醇溶解在去离子水中，实施例3的化合物和咯利普兰溶解在二甲亚砜（DMSO）中，且DMSO的最终浓度不超过0.5%。cAMP测定是根据制造商的说明，用Bridge-It cAMP Designer荧光试验(Mediomics LLC,USA)在96孔，黑色，平面底板上进行。荧光测量是通过Polarstar Optima(BMG Labtech-Germany)进行的。
数据分析
相对荧光使用以下的公式计算：其中：
RF=相对荧光
Fo荧光强度的空白或缓冲控制
F=荧光cAMP或样品
RF(Fo-F)/Fo
数据被转换成如表4所示的RF值。使用给定标准的RF值绘制标准曲线，试验化合物对应的cAMP值采用标准方法确定。
表4：代表性化合物，实施例3的化合物，对PDE4抑制的效果的研究
Figure BDA00002307416600531
从上述表4中给出的结果可以看出，实施例3的化合物，即分子式1的有代表性的化合物，不是PDE4的抑制剂。
实施例76
滑膜液单个核细胞（SFMC）的细胞凋亡的诱导：
根据参考（Arthritis and Rheumatism,Vol.52,No.1,January 2005）设计实验，其公开的内容引入本文作为参考。
收集正在进行膝关节吸入（knee aspiration）的类风湿关节炎患者的滑液。滑液被收集在真空采血管后进行处理2小时。使用Ficoll-泛影葡胺溶液（Sigma）和密度梯度离心法分离SFMC。分离的SFMC被悬浮于RPMI1640（Rosewell ParkMemorial Institute）培养基(Sigma-Aldrich Fine Chemicals,USA)，该培养基包含20％小牛血清（FBS）（JRH，USA），100U/ml青霉素（Sigma Chemical Co.StLouis,MO）和100μg/mL链霉素（Sigma Chemical Co.St Louis,MO）。细胞浓度被调整为1×106cells/ml。通过台盼蓝染色排除确定的生存能力统一至Ly≥98%。将4mL这种细胞悬浮液添加到96孔培养板的孔中。SFMC被培育3~4小时。除去非粘附细胞，并在6孔培养板中分别培养。往贴壁细胞中加入新鲜的培养基。在潮湿气氛中，在37℃下在5％CO2中培养24小时后，非粘附细胞被除去，并与前几天的样本汇集。这些细胞接种于密度为2×106cells/well的板。贴壁的细胞群体被重新供给新鲜的完全培养基。细胞接种后，粘附以及非粘附细胞群体，用溶解在DMSO(Sigma,MO,USA)中的5μM和10μM的实施例3的化合物进行处理。DMSO的最终浓度被调节至0.5%。在37℃下，5％CO2气氛中，将培养板温育24小时。处理后的细胞被收获，使用Annexin-V/Propidium碘（AV/PI）染色，以检查是否有诱导细胞凋亡。
收获和细胞染色
细胞被收集在15毫升的试管。轻轻地刮取脱落的贴壁细胞。使用PBS清洗后，将细胞沉淀重新悬浮在1×结合缓冲液（BD Pharmingen Cat#51-66121E）中。细胞计数被调整为1×106cells/ml。100μL的这种细胞悬浮液被转移到FACS管中，依次加入5μL的膜联蛋白-V，5μL50μg/mL的碘化丙啶。该悬浮液被放置在黑暗中培育15~20分钟。体积通过加入结合缓冲液加到400μL。使用流式细胞仪完成获得。
研究结果在图2A及图2B中被描述
结论：
实施例3的化合物诱导了贴壁及非贴壁细胞的细胞凋亡，这些细胞是取自类风湿关节炎患者的滑液中分离的单核细胞的细胞群。
实施例77
抗关节炎活性：
实施例3的化合物，分子式1的有代表性的化合物的抗关节炎潜力的通过使用两个不同的模型在体内评价。
1.在Balb/c小鼠中LPS诱导的TNF-α释放。
2.小鼠中胶原诱导的关节炎
A)在Balb/c小鼠中LPS诱导的TNF-α释放
测定按照参考设计，Physiol.Res.2003,52,593-598，其公开的内容被引入本文作为实验的参考。
规则：
Balb/c小鼠（原国家营养研究所，海得拉巴，印度采购），重量在18-22克之间，不论雌雄，口服给药实施例3的化合物，剂量分别为12.5，50，75，100mg/g。所有悬浮液在0.5％CMC中新鲜配制。一个小时后，溶解在无菌无热原盐水中的LPS（1mg/kg）（Escherchia coli,serotype 0127:B8,Sigma Chemical Co.,St.Louis,MO）被腹膜内给药给对照组、标准治疗组（咯利普兰，30mg/kg,p.o.）及测试组（实施例3的化合物），阴性对照组只给生理盐水。
从麻醉小鼠收集血液样品，用肝素作为抗凝血剂（25IU每个样品）1.5小时后，LPS刺激。他们经过在10000rpm下离心10分钟后，血浆样品的TNF-α的水平按照制造商(OptiEIA ELISA sets,BD BioSciences Pharmingen)的描述通过ELISA进行分析。
TNF-α释放的抑制百分比，通过比较与对照组的各治疗组的TNF-α水平计算。
研究结果显示在下表5中。
表5：实施例3的化合物在Balb/c小鼠的LPS刺激的TNF-α释放的抑制百分比
  实施例3的化合物mg/kg   TNF-α释放的抑制百分比
  100   92.61±3.5
  75   77.34±8.61
  50   82.01±4.88
  25   66.8±11.47
  12.5   53.22±12.49
从上述表5中所给出的数据可以看出，实施例3的化合物，即分子式1的具有代表性的化合物，能够抑制LPS诱导的TNF-α在Balb/c小鼠中以剂量依赖性的方式释放。
B）对小鼠胶原诱导的关节炎
本测试时根据参考（J.Exp.Med.,1985,162,637-646）来设计的，其公开的内容被引入本文作为实验的参考。
规则：
年龄8~10周的雄性DBA/1J小鼠（从Jackson Laboratories,USA得到），在尾根部皮内注射乳液从而免疫，该乳液等效于200μg的的II型胶原蛋白，在弗氏完全佐剂。21天后，再用相同乳液给一个加强针。一组初次接受试验的小鼠作为参照。
从第23天到第56天，使用关节指数和爪的厚度作为参数，每天检查一次小鼠的类风湿关节炎的迹象。关节指数评分采用下列标准进行：
前肢：范围0-3
0：没有发红或肿胀
1：发红但不肿胀
2：发红，爪子肿胀
3：发红，爪子严重肿胀
后肢：范围0-5
0：没有发红或肿胀
1：发红，爪子轻微肿胀
2：发红，爪子中度肿胀和/或至少一个脚趾肿胀
3：发红，爪子中度/严重肿胀，踝关节肿胀和/或一个或多个脚趾肿胀
4：发红，爪子，脚趾和踝关节严重肿胀，关节僵硬
5：发红，爪子，脚趾和踝关节严重肿胀，关节僵硬，脚趾角度改变
后肢得分最低2的小鼠被引导到该研究中。
小鼠随机分为各种研究组，然后口服给药的溶剂（0.5％CMC，1mL/kg），试验化合物（实施例3的化合物，50mL/kg，每日两次）和标准化合物（Enbrel，3mL/kg，皮下注射，每天一次）。每组至少有8至小鼠。化合物的剂量施加至23天。
以下的参数被每天观察和记载。
1.体重
2.关节指数
3.使用无张力钳测量的爪厚度（mm）
4.任何与动物状况相关的重要的观察。
在最后一天（施药的24天），给药的一个小时后，将动物处死，抽出血液，收集的血浆进行药物水平分析。此外，所有的动物的四肢被保存用于做组织病理学评估。
所有结果以图形方式在图3（关节指数对应治疗天数）及图4（爪厚对应治疗天数）中所示。本研究的过程中获得的数据（关节指数和爪厚度）通过施加的Mann-Whitney U检验进行统计评价。
Enbrel的处理的小鼠表现出，疾病的严重程度显着减少，根据关节指数和爪厚度。
实施例3的化合物，即分子式1所示的有代表性的化合物，也表现出该疾病朝向减轻（ameriolation）的趋势。
病理分析：
小鼠被进行人道的安乐死，从每个动物收获后爪，固定在10％中性缓冲福尔马林在5％的甲酸，脱钙，石蜡包埋。切片（μm）使用苏木精和曙红或藏红O染色和显微镜评估。根据细胞浸润，骨侵蚀和软骨损伤的参数，组织病理变化进行评分如下：轻度（=1分），中度（=2分）或重度（=3分）。软骨消耗被视觉显示，通过减少染色蛋白多糖基质的藏红O。溶剂治疗组相比，平均总得分。在组织学评分的情况下，采用Kruskal-Wallis分析，其次是唐恩的多重比较测试，以评估统计两组间的差异。p值<0.05被认为是显着的。组织学评估显示，关节的炎症，软骨损伤和骨的破坏减少了。
这个实验的结果，如在图5中所示，表明：实施例3的化合物，分子式1的具有代表性的化合物，具有潜在的抗关节炎作用。
应指出的是，在本说明书和所附的权利要求书所用的，单数形式“一”，“一个”，和“该”包括复数对象，除非内容明确另有规定。因此，例如，参考到组合物，该组合物含有“化合物”包括两种或更多种化合物的混合物。还应当注意的是，通常使用的术语“或”包括“和/或”，除非内容清楚地否定指示。
在本说明书中的所有出版物和专利申请是本发明涉及的技术领域的普通技术人员的水平。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (16)

1.一种如分子式1所示的用于治疗炎症性疾病的化合物，
Figure FDA00002307416500011
分子式1
其中，Ar为苯基或杂芳基环，所述的苯基或杂芳基环可不被取代或被1，2或3个相同或不同的取代基取代，所述的取代基选自卤素，硝基，氰基，C1～C4的烷基，一氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，羟基，C1~C4的烷氧基，羧基，C1~C4的烷氧羰基，C1~C4的亚烷基羟基，CONH2，CONR1R2，SO2NR1R2，环烷基，NR1R2和SR3；
其中，R1和R2各自独立地选自H，C1~C4的烷基，C1~C4的烷氧羰基和芳基，或者R1和R2与它们键合的氮原子一起，形成5-元环或6-元环，所述5-元环或6-元环可以选择性地包含至少一个杂环原子；及
R3选自H，C1~C4的烷基和苯基，或者它们的立体异构体或互变异构体，或者它们的药学上可接受的盐或药学上可接受的溶剂化合物。
2.如权利要求1所述的用于治疗炎症性疾病的化合物，其特征在于，所述的Ar为苯环，其中苯环可不被取代或被1，2或3个相同或不同的取代基取代，所述取代基选自卤素，硝基，氰基，C1~C4的烷基，一氟甲基，二氟甲基，三氟甲基，羟基，C1~C4的烷氧基，羧基和NR1R2；其中R1和R2各自独立地选自H，C1~C4的烷基和C1~C4的烷氧羰基，或者它们的立体异构体或互变异构体，或者它们的药学上可接受的盐或药学上可接受的溶剂化合物。
3.如权利要求1或2所述的用于治疗炎症性疾病的化合物，其特征在于，所述如分子式1所示的化合物选自：
（+）-反式-2-（2-氯-4-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-4-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-甲烷磺酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-4-氰-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（4-溴-2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-4-硝-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2，4-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-噻吩-2-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-（3-硝基苯基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（3-溴-2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（3-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-硝-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-吡咯烷-1-基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（3-溴-苯基）-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-5,7-二羟基-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2，3-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-碘-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-异丙氨基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；和
（+）-反式-2-（3-碘-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐。
4.如权利要求1或2所述的用于治疗炎症性疾病的化合物，其特征在于，所述如分子式1所示的化合物选自：
（+）-反式-2-（2-氯-4-三氟甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-4-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-4-氰-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-溴-4-硝-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2，4-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-5-氟-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-2-（3-硝基苯基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-硝基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-甲基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2，3-二氯-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；
（+）-反式-2-（2-氯-3-碘-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐；和
（+）-反式-2-（2-氯-3-异丙氨基-苯基）-5,7-二羟基-8-（2-羟甲基-1-甲基-吡咯烷-3-基）-苯并吡喃-4-酮-盐酸盐。
5.如权利要求1~4任意一项所述的用于治疗炎症性疾病的化合物，其特征在于，所述炎症性疾病是被提高了水平的一个或多个炎症细胞因子介导的，所述炎症细胞因子选自肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素（IL-1β,IL-6,IL-8），或者所述炎症性疾病是被增加了表现力的一个或者多个细胞粘附分子介导的，所述细胞粘附分子选自细胞间粘附分子1(ICAM-1)，血管-细胞粘附分子1(VCAM-1)和E-选择蛋白或它们的组合。
6.如权利要求1~5任意一项所述的用于治疗炎症性疾病的化合物，其特征在于，所述炎症性疾病选自类风湿性关节炎，骨关节炎，青少年类风湿性关节炎，银屑病关节炎，骨关节炎，难治性类风湿性关节炎，慢性非类风湿关节炎，骨质酥松症，冠心病，动脉粥样硬化，血管炎，溃疡性结肠炎，银屑病，克罗恩病，成人呼吸窘迫综合症、在皮肤失调迟发型超敏反应，感染性休克和炎症性肠病。
7.如权利要求1~4任意一项所述的如分子式1所示的化合物在制备一种治疗炎症性疾病的药物上的用途。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述炎症性疾病是被提高了水平的一个或多个炎症细胞因子介导的，所述炎症细胞因子选自肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素（IL-1β,IL-6,IL-8），或者所述炎症性疾病是被增加了表现力的一个或者多个细胞粘附分子介导的，所述细胞粘附分子选自细胞间粘附分子1(ICAM-1)，血管-细胞粘附分子1(VCAM-1)和E-选择蛋白或它们的组合。
9.如权利要求7或8所述的用途，其特征在于，所述炎症性疾病选自类风湿性关节炎，骨关节炎，青少年类风湿性关节炎，银屑病关节炎，骨关节炎，难治性类风湿性关节炎，慢性非类风湿关节炎，骨质酥松症，冠心病，动脉粥样硬化，血管炎，溃疡性结肠炎，银屑病，克罗恩病，成人呼吸窘迫综合症、在皮肤失调迟发型超敏反应，感染性休克和炎症性肠病。
10.一种治疗炎症性疾病的方法，包括：给予需要治疗的对象一种有效治疗所需量的如权利要求1~4任意一项所述的如分子式1所示的化合物。
11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述炎症性疾病是被提高了水平的一个或多个炎症细胞因子介导的，所述炎症细胞因子选自肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素（IL-1β,IL-6,IL-8），或者所述炎症性疾病是被增加了表现力的一个或者多个细胞粘附分子介导的，所述细胞粘附分子选自细胞间粘附分子1(ICAM-1)，血管-细胞粘附分子1(VCAM-1)和E-选择蛋白或它们的组合。
12.如权利要求10或11所述的方法，其特征在于，所述炎症性疾病选自类风湿性关节炎，骨关节炎，青少年类风湿性关节炎，银屑病关节炎，骨关节炎，难治性类风湿性关节炎，慢性非类风湿关节炎，骨质酥松症，冠心病，动脉粥样硬化，血管炎，溃疡性结肠炎，银屑病，克罗恩病，成人呼吸窘迫综合症、在皮肤失调迟发型超敏反应，感染性休克和炎症性肠病。
13.一种药物组合物，包括有效治疗所需量的如权利要求1~4中任一项所述的如分子式1所示的化合物和至少一种药学上可接受的载体，该药物组合物适用于治疗炎症性疾病。
14.一种药物组合物，包括有效治疗所需量的如权利要求1~4任意一项所述的如分子式1所示的化合物，和至少一种进一步药学上的活性物质以及至少一种药学上可接受的载体，该药物组合物适用于治疗炎症性疾病。
15.如权利要求13或14所述的药物组合物，其特征在于，所述炎症性疾病是被提高了水平的一个或多个炎症细胞因子介导的，所述炎症细胞因子选自肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素（IL-1β,IL-6,IL-8），或者所述炎症性疾病是被增加了表现力的一个或者多个细胞粘附分子介导的，所述细胞粘附分子选自细胞间粘附分子1(ICAM-1)，血管-细胞粘附分子1(VCAM-1)和E-选择蛋白或它们的组合。
16.如权利要求13~15任意一项所述的药物组合物，其特征在于，所述炎症性疾病选自类风湿性关节炎，骨关节炎，青少年类风湿性关节炎，银屑病关节炎，骨关节炎，难治性类风湿性关节炎，慢性非类风湿关节炎，骨质酥松症，冠心病，动脉粥样硬化，血管炎，溃疡性结肠炎，银屑病，克罗恩病，成人呼吸窘迫综合症、在皮肤失调迟发型超敏反应，感染性休克和炎症性肠病。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107827726A (zh) * 2017-11-28 2018-03-23 辽宁中医药大学 马齿苋中化合物Oleracone E及其提取分离方法

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102584764B (zh) * 2011-12-19 2014-07-16 清华大学深圳研究生院 2′-氯-4′-硝基黄酮及其衍生物以及它们的制备与应用
US11007174B2 (en) 2013-07-12 2021-05-18 Piramal Enterprises Limited Pharmaceutical combination for the treatment of melanoma

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1668613A (zh) * 2002-07-08 2005-09-14 尼古拉斯·皮拉马尔印度有限公司 作为细胞周期蛋白依赖型激酶抑制剂的黄酮衍生物
CN101472888A (zh) * 2006-06-21 2009-07-01 皮拉玛生命科学有限公司 用于治疗增殖性病变的光学纯的黄酮衍生物及其制备方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IN164232B (zh) 1986-04-11 1989-02-04 Hoechst India
US7271193B2 (en) 2002-07-08 2007-09-18 Nicholas Piramal India, Ltd. Inhibitors of cyclin-dependent kinases and their use
US7884127B2 (en) 2002-07-08 2011-02-08 Pirimal Life Sciences Ltd. Inhibitors of cyclin dependent kinases and their use

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1668613A (zh) * 2002-07-08 2005-09-14 尼古拉斯·皮拉马尔印度有限公司 作为细胞周期蛋白依赖型激酶抑制剂的黄酮衍生物
CN101472888A (zh) * 2006-06-21 2009-07-01 皮拉玛生命科学有限公司 用于治疗增殖性病变的光学纯的黄酮衍生物及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ADRIANO G ROSSI1等: "Cyclin-dependent kinase inhibitors enhance the resolution of inflammation by promoting inflammatory cell apoptosis", 《NATURE MEDICINE》 *
SETH RAKOFF-NAHOUM: "Why Cancer and Inflammation?", 《YALE JOURNAL OF BIOLOGY AND MEDICINE》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107827726A (zh) * 2017-11-28 2018-03-23 辽宁中医药大学 马齿苋中化合物Oleracone E及其提取分离方法
CN107827726B (zh) * 2017-11-28 2020-09-15 辽宁中医药大学 马齿苋中化合物Oleracone E及其提取分离方法

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