HC del SARS CoV-2 para evaluar la patogenia del COVID 19
Desarrollo de IHC CoV-2 del SARS para evaluar la patogenia de COVID-19 y su papel en el síndrome de tormenta de citocinas
Antecedentes de Bio SB
Bio SB Inc. es una empresa de biotecnología que realiza I + D, producción, distribución y comercialización de productos únicos para inmunohistoquímica (IHC), inmunocitoquímica (ICC), inmunofluorescencia (IF), hibridación fluorescente in situ (FISH) e hibridación cromogénica in situ (CISH). tecnologías que cumplen con los más altos estándares internacionales para aplicaciones en el diagnóstico del cáncer y la predicción del tratamiento del cáncer, patología molecular, investigación del cáncer, microbiología, inmunología y genética. BIO SB fabrica y desarrolla productos de acuerdo con las normas FDA cGMP, CE IVD e ISO 13485: 2016.
Utilizando la secuencia publicada del SARS CoV-2, Bio SB ha desarrollado y fabricado las proteínas y péptidos recombinantes de CoV-2 necesarios para generar anticuerpos para identificar el virus, los receptores y las IL mediante inmunohistoquímica e inmunofluorescencia en biopsias FFPE. Además, Bio SB ha desarrollado anticuerpos para identificar los receptores ACE-2 y TMPRSS2 y tiene una gran cantidad de CD (linfocitos B y T, células NK, monocitos, macrófagos) y otros marcadores de factores de respuesta inmune (IL-1a, IL1b e IL-6) y células vasculares con la intención de evaluar el daño patológico causado por la infección por COVID-19 mediante Inmunohistoquímica e Inmunofluorescencia simple y múltiple en biopsias positivas a FFPE COVID-19.
Pandemia de COVID-19
Los primeros informes de la infección viral llamaron la atención a fines de diciembre de 2019 en Wuhan, la capital de Hubei, China. Posteriormente, se reveló que el virus responsable de causar las infecciones era contagioso entre humanos. A principios de enero de 2020, términos como “el nuevo coronavirus” y “el coronavirus de Wuhan eran de uso común. El 11 de febrero de 2020, una designación taxonómica "coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo" (SARS-CoV-2) se convirtió en el medio oficial para referirse a la cepa del virus que anteriormente se denominaba 2019-nCoV y coronavirus de Wuhan. A las pocas horas del mismo día, la OMS rebautizó oficialmente la enfermedad como COVID-191. El SARS-CoV infectó a un total de más de 8.000 personas con 774 muertes en 37 países adicionales en 2003.
Al 24 de mayo de 2020, COVID-19 ha infectado a 5.442.507 personas en todo el mundo y ha matado a 345.036, lo que lo hace más mortal que la pandemia observada con el brote de SARS-CoV en 2003 ( https://www.bloomberg.com/graphics/2020-coronavirus -cases-world-map / ). Aún más grave, el virus COVID-19 podría ser ampliamente transmitido por portadores asintomáticos a otras personas en contacto cercano y algunos de los pacientes seguirán siendo portadores del virus incluso después de recuperarse de la enfermedad.
Síntomas y daño patológico de COVID-19
Los pacientes con SARS-CoV-2 pueden experimentar una diversidad de problemas, desde síntomas leves hasta enfermedades graves. Estos síntomas generalmente aparecen de 2 a 14 días después de la exposición al virus. Los estudios muestran que los pacientes pueden ser más infecciosos en los días anteriores a que comenzaran a mostrar síntomas. Los principales síntomas iniciales del SARS-CoV-2 son escalofríos, dolores musculares, dolor de cabeza, dolor de garganta y pérdida del gusto y el olfato. Al menos el 80 por ciento de las personas que se sabe que están infectadas con SARS-CoV-2 parecen montar una respuesta inmune típica. En una respuesta inmunitaria normal, se liberan varios tipos diferentes de células inmunitarias (linfocitos) y mensajeros químicos en una secuencia intrincada, lo que provoca un estado inflamatorio localizado leve. 6,7
Actualmente tenemos poca información macroscópica y microscópica sobre el daño patológico causado por el SARS-CoV-2. Es probable que las características macroscópicas del SARS-CoV-2 se encuentren en el tórax y pueden incluir pleuresía, pericarditis, consolidación pulmonar y edema pulmonar. El peso pulmonar puede aumentar por encima de lo normal. Cabe señalar que una infección secundaria puede superponerse a la infección viral que puede conducir a una inflamación purulenta típica de las infecciones bacterianas secundarias. Los hallazgos microscópicos son inespecíficos e incluyen edema, hiperplasia de neumocitos, inflamación focal y formación de células gigantes multinucleadas con daño alveolar difuso generalizado con exudados. La inflamación es predominantemente linfocítica y se observan células gigantes multinucleadas junto con neumocitos atípicos grandes, sin que se observen inclusiones virales definitivas. En general,
Síndrome de tormenta de citocinas
La gran mayoría de los pacientes con COVID-19 han tenido un buen pronóstico, pero todavía hay algunos individuos críticos e incluso la muerte.10 La mayoría de estos pacientes críticamente enfermos y muertos no desarrollan manifestaciones clínicas graves en las primeras etapas de la enfermedad. Algunos pacientes solo presentan fiebre leve, tos o dolor muscular. Estas condiciones se deterioran repentinamente en las últimas etapas de la enfermedad o en el proceso de recuperación. El síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA) y la insuficiencia de múltiples órganos ocurren rápidamente, lo que resulta en la muerte en poco tiempo. La tormenta de citocinas se considera una de las principales causas de SDRA y falla orgánica múltiple.
El síndrome de tormenta de citocinas (CSS) se caracteriza por síntomas y signos sistémicos derivados de una respuesta inflamatoria masiva e incontrolada causada por una desregulación de citocinas pro y antiinflamatoria. Se sabe que los virus, como el herpes y el Epstein-Barr, desencadenan el CSS, al igual que la influenza H5N1. La literatura actual indica que el SARS-CoV-2 desencadena el CSS y se ha atribuido a la característica de síntomas graves de los pacientes críticos. El CSS en estos pacientes a menudo es fatal, como fue el caso en los brotes anteriores de SARS y MERS.
Las primeras citocinas liberadas son la interleucina 1β (IL-1β) y el factor de necrosis tumoral α (TNF-α), que atraen una variedad de glóbulos blancos (WBC) circulantes al sitio de la infección, incluidos neutrófilos, monocitos, macrófagos y células asesinas (NK). Esta respuesta, junto con las sustancias químicas antipatogénicas liberadas por estas células (es decir, el complemento), comprenden la respuesta inmune innata. Estas células atacan directamente al patógeno invasor y también liberan citocinas adicionales, entre las que destacan la interleucina-1 y la 6 (IL-6). La IL-6 es esencial para invocar la respuesta inmune adaptativa, que llama a las células T, células B y células T auxiliares (Th) al sitio de la infección. IL-6 también estimula un mayor reclutamiento, proliferación y activación de macrófagos.
Es el médico de la UCI quien tiene más probabilidades de presenciar una de las manifestaciones más letales de la respuesta inmunológica anormal, el síndrome de tormenta de citocinas (CSS). Algunos también se refieren a esta respuesta como síndrome de liberación de citocinas (SRC). El CSS se caracteriza por la activación y expansión continuas de las poblaciones de macrófagos y linfocitos, que secretan grandes cantidades de citocinas, lo que provoca la tormenta de citocinas. Esta liberación masiva de citocinas es similar a la enfermedad de linfohistiocitosis hemofagocítica (HLH), un síndrome caracterizado por una activación inicial no controlada y persistente de linfocitos T citotóxicos y células NK.
Las manifestaciones clínicas y de laboratorio de HLH incluyen fiebre, agrandamiento del hígado y / o bazo, disfunción neurológica, coagulopatía, disfunción hepática, citopenias (es decir, niveles bajos de eritrocitos, leucocitos y / o plaquetas), hipertrigliceridemia, hiperferritinemia, hemofagocitosis y eventualmente disminución Actividad de las células NK a medida que el sistema inmunológico se paraliza progresivamente. La HLH puede ser familiar (HLH primaria) o secundaria a otro proceso patológico (sHLH), como la enfermedad reumática, en la que se denomina síndrome de activación de macrófagos (MAS, caracterizado por ferritina elevada).
Esta activación induce a los monocitos inflamatorios a expresar en gran medida IL-6, iniciando un efecto de cascada localizado y luego sistémico que da como resultado una hiperproducción de IL-6, que acelera el proceso inflamatorio. Debido a que la IL-6 también aumenta la permeabilidad vascular, los niveles excesivos hacen que los vasos sanguíneos tengan muchas fugas. Esto, junto con los factores de coagulación liberados por las células endoteliales vasculares, estimula la cascada de la coagulación, lo que da como resultado microtrombosis (coágulos diminutos), que conduce a la isquemia y muerte de los tejidos del riñón, los intestinos, el corazón, el hígado, el cerebro y las extremidades.
Cuando ocurre una infección, el sistema inmunológico responde liberando docenas de citocinas pro y antiinflamatorias. Se hipotetiza que la interleucina -6 (IL-6) es un componente clave de la respuesta de las citocinas. Las secuencias son descripciones generales muy simplificadas que ilustran la respuesta inmune desregulada que resulta en CSS.