Milieu de Culture

Milieu de culture
Pour les articles homonymes, voir Milieu et Culture • Une source de potassium et de phosphore :
(homonymie). K2 HPO4
Un milieu de culture est un support qui permet la culture • Une source d'azote et de soufre : (NH4 )2 SO4
• Une source de magnésium : MgCl2
• Une source de calcium : CaCl2
• Une source de fer : on emploie le citrate de
fer (le citrate a pour rôle de maintenir le fer en
solution)
• Une source d'oligo-éléments : sels de Cu, Zn,
Co, Ni, B, Ti
• Une source d'eau, indispensable à toute forme
de vie : on utilise l'eau distillée (stérile)
• Un tampon pH : il permet de maintenir un pH
correct voire optimum : KH2 PO4 par exemple
• En l'absence de l'un de ces composants, les bacté-

de cellules, de bactéries, de levures, de moisissures afin ries ne se développent pas, car elles ne peuvent syn-
de permettre leur étude. En principe, les cellules trouvent thétiser ces produits.
dans ce milieu les composants indispensables pour leur
multiplication en grand nombre, rapidement, mais aus- • C'est l'adjonction de facteur(s) de croissance ap-
si parfois des éléments qui permettront de privilégier un proprié(s) qui permet à des bactéries exigeantes
genre bactérien ou une famille. Ainsi, selon le but de de se développer.
la culture, il est possible de placer les micro-organismes
dans des conditions optimales, ou tout à fait défavorables.
Il se compose d'une base (agar-agar, eau, minéraux...) 2 Milieu de culture empirique
ainsi que d'un indicateur coloré de pH ou de réaction
d'oxydo-réduction pour permettre de formuler des hypo-
thèses sur le genre. Un milieu de culture dit empirique est un milieu dont on
ne connaît pas exactement la composition.
Il existe aussi des bouillons de culture qui possèdent
la même fonction, mais ces milieux ne contiennent pas Ainsi, dans le milieu type cœur-cervelle, il y a de l'eau, de
d'agar-agar, ils sont donc totalement liquides. l'agar-agar, de l'hydrolysat de cœur et de cervelle sans que
l'on en connaisse les aspects qualitatifs et quantitatifs. Il
Cet article détaillera les caractéristiques des milieux de sera donc utilisé uniquement pour la croissance des bac-
culture se rapportant à la microbiologie. téries. Il n'a pas d'effet sélectif.
1 Notion de milieu minimum 3 Milieu de culture sélectif

Un milieu minimum ou milieu défini est un milieu Les milieux de culture dits sélectifs permettent unique-
comportant les éléments chimiques strictement néces- ment la culture de certains genres de micro-organismes.
saires à la croissance bactérienne, sous une forme utili- Pour cela on ajoute des éléments qui inhibent la
sable par des bactéries n'ayant pas d'exigence particulière. croissance des micro-organismes indésirables comme le
chlorure de sodium à forte concentration, le thiosulfate
• Composition d'un milieu minimum : de sodium, le cristal violet ou certains antibiotiques, etc.
• Une source de carbone et d'énergie, générale- Les éléments ajoutés sont sélectionnés selon les carac-
ment le glucose. téristiques du micro-organisme recherché. Ces milieux
1
2 6 MILIEU CHROMOGÈNE (OU DISCRIMINANT)
sont utilisés pour l'analyse d'un prélèvement polybacté- • la gélose MacConkey (MCK), qui différencie la fer-
rien. Ce milieu permet de sélectionner uniquement en mentation du lactose. De plus, cette gélose est sélec-
cas de crible positif : Résistance à un antibiotique, la tive (voir plus haut) dans la mesure ou elle ne permet
prototrophie etc. que la croissance des bacilles GRAM négatif. La gé-
Exemples de milieux sélectifs : lose Drigalski possède les mêmes propriétés.
• la Gélose Chapman (MSA), milieu sélectif des sta-
• milieu S-S : il ne permet la croissance que des phylocoques qui différencie la fermentation du man-
Salmonelles (Shigella s’y développe moins vite : en- nitol permettant une orientation entre autres vers
viron 48 à 72 heures avant d'obtenir une culture ex- Staphylococcus aureus.
ploitable). • la gélose Hektoën, qui différencie la fermentation
de 3 glucides (lactose, saccharose et salicine) ain-
• milieu de Sabouraud : il permet la pousse des si que la production de sulfure d'hydrogène. Cette
mycètes. gélose est sélective des bacilles GRAM négatif,
elle est particulièrement adaptée à la recherche
• gélose Kanamycine - Vancomycine, dite “Kana-
d'entérobactéries pathogènes dans les selles.
Vanco” ou KV : elle empêche la pousse des bacté-
ries à Gram positif (action de la vancomycine) et de • les géloses SS, XLD, DCL, TCBS sont aussi des mi-
la plupart des entérobactéries (action de la Kanamy- lieux différentiels couramment utilisés.
cine). Sur ce milieu, poussent préférentiellement des
bactéries anaérobies strictes.
6 Milieu chromogène (ou discrimi-
nant)
4 Milieu de culture enrichi
Ce milieu peut être sélectif ou non. Son principe re-
Ils contiennent, outre les composants de base, des compose sur la présence d'un ou plusieurs substrat(s) cou-
posants indispensables aux bactéries, que celles-ci ne plé(s) à une molécule chromogène. Lorsque ce substrat
peuvent pas synthétiser. Ce sont des milieux utilisés pour est métabolisé par une enzyme bactérienne spécifique, le
l'obtention des bactéries dites exigeantes et auxotrophes. chromogène associé prend une couleur particulière (il de-
Par exemple : les milieux au sang frais (le sang est riche vient un chromophore)directement lisible sur la colonie.
en nutriments divers) : Gélose au sang frais ou cuit. Les Si l'enzyme n'existe que chez une espèce bactérienne don-
milieux avec du sérum, du jaune d'œuf : Gélose Baird née, l'identification est immédiate.
Parker ou dite BP. Parmi ces milieux, on trouve :
5 Milieu différentiel
Le milieu de culture dit différentiel ou indicateur per-
met de distinguer deux types de microorganismes se
développant dans un même milieu[1] . Ce type de mi-
lieu met en évidence certaines caractéristiques biochi-
miques des microorganismes (principalement l'aptitude
à dégrader un substrat) en présence d'indicateur(s) de
la réaction chimique : des indicateurs colorés de pH ou
d'oxydo-réduction (tel que le rouge neutre, rouge de phé-
nol, l'éosine ou le bleu de méthylène).
On retrouve parmi les milieux différentiels :
culture d'Escherichia coli sur CPS E à partir d'une urine
• les géloses CLED et BCP et qui différencient la dé-

gradation du lactose, ainsi que la dénomination in- • CPS E : milieu non sélectif adapté au diagnos-
directe d'e.coli qui sont des entérobactéries hyper- tic des infections urinaires. Il permet la mise en
résistantes. évidence de l'activité bêta-glucuronidase présente
chez Escherichia coli (colonies roses-bordeaux) res-
• la Gélose Éosine Bleu de Méthylène (EMB), qui ponsable de 80 % des cystites en France (40% à
différencie la fermentation du lactose de celle du l’hôpital) ; la mise en évidence de l'activité bêta-
saccharose glucosidase chez les entérocoques (colonies bleues
3
•
culture de KESC sur CPS E à partir d'une urine
culture d'Enterococcus faecalis sur CPS E à partir d'une urine
turquoise) et certaines entérobactéries (Klebsiella,

Enterobacter, Serratia et Citrobacter), (colonies
vertes-bleues). Le milieu permet aussi une orien-
tation vers Proteus grâce à la mise en évidence de
l'activité Tryptophane désaminase (colonies entou-
rées d'une zone de précipitation brune).
• SM2 : milieu sélectif des bactéries à Gram négatif

qui permet la mise en évidence de Salmonella dans
les selles grâce à la révélation d'une activité estérase
que spécifique des salmonelles.
• CAN2 : milieu sélectif des levures qui permet la culture de Proteus sur CPS E à partir d'une urine
mise en évidence de Candida albicans par la mise
en évidence de l'activité hexosaminidase.
• Portail de la microbiologie
• autres milieux chromogènes : SAID pour Staphylo-
coccus aureus, MRSA pour la recherche des SARM,
ESBL pour la recherche des BLSE, STRB pour la
recherche des streptocoques du groupe B...
7 Voir aussi
• Liste de milieux de culture
• Agar-agar
• Facteur de croissance
Peptone
• Milieu chromogène
8 Notes et références
[1] (en) Washington JA, Baron’s Medical Microbiology
(Baron S et al., eds.), Galveston, Univ of Texas Medi-
cal Branch, 1996, 4e éd., relié (ISBN 978-0-9631172-1-2,
LCCN 95050499, lire en ligne), « Principles of Diagno-
sis »
4 9 SOURCES, CONTRIBUTEURS ET LICENCES DU TEXTE ET DE L’IMAGE
9 Sources, contributeurs et licences du texte et de l’image

9.1 Texte
• Milieu de culture Source : https://fr.wikipedia.org/wiki/Milieu_de_culture?oldid=118626711 Contributeurs : Ukuk, Cleduc, Yves1953,
Hbbk, Jef-Infojef, PieRRoMaN, Pixeltoo, Erasmus, Piku, Alpha.prim, Raziel~frwiki, David Berardan, Mandrak, YurikBot, Kostia, Lo-
veless, KoS, Pautard, Elapied, Mzelle Laure, Aeleftherios, Liquid-aim-bot, Chaoborus, JAnDbot, Quentin Durand, Sebleouf, Salebot,
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• En l'absence de l'un de ces composants, les bacté-

1 Notion de milieu minimum 3 Milieu de culture sélectif

• les géloses CLED et BCP et qui diﬀérencient la dé-

turquoise) et certaines entérobactéries (Klebsiella,

• SM2 : milieu sélectif des bactéries à Gram négatif

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