La espectrofotometría es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en el principio de que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para ello se emplea un espectrofotómetro, equipo en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de luz absorbida por la misma.

Es decir, la espectrofotometría hace referencia a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en función de la longitud de onda. Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomoléculas, entre otras) y estado de agregación (sólido, líquido, gas).

Principios de la espectrofotometría

La espectrofotometría se basa en el principio de que cada componente de la solución tiene su patrón de absorción de luz característico. Comparando la longitud de onda y la intensidad del máximo de absorción de luz de una muestra frente a soluciones estándar o de concentraciones conocidas, es posible determinar la identidad y la concentración de componentes disueltos en la muestra (solución problema).

La espectrofotometría mide la cantidad de longitudes de onda discretas de luz UV o visible que son absorbidas o transmitidas a través de una muestra en comparación con una muestra de referencia o en blanco. Esta propiedad está influenciada por la composición de la muestra, potencialmente proporcionando información sobre lo que hay en la muestra y en qué concentración. 

Aplicaciones de la espectrofotometría

La espectrofotometría es un método analítico de laboratorio que posee innumerables aplicaciones y ventajas tales como: es una técnica rápida, precisa, versátil, fácil de usar y de bajo costo. Los espectrofotómetros instrumentos claves en la espectrofotometría son equipos de gran precisión y versatilidad por lo que se consideran dispositivos indispensables en todo laboratorio.

La espectrofotometría se emplea en diversas aplicaciones, tales como: análisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un laboratorio de investigación, estandarización de colores de diversos materiales, como plásticos y pinturas, detección de niveles de contaminación en aire y agua, y determinación de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos. Es de gran utilidad actualmente en aplicaciones en distintas áreas de la ciencia que van desde el análisis de un cultivo bacteriano, identificación de fármacos y las comprobaciones y cuantificación de la pureza del ácido nucleico, hasta el control de calidad en la industria de bebidas y la investigación química.

¿Qué es un espectrofotómetro?

Un espectrofotómetro es un equipo de laboratorio que se emplea para medir la absorbancia de una muestra, en función de la longitud de onda de una radiación electromagnética, y de esta manera conocer la concentración de las sustancias en una solución.

La importancia de este equipo radica en que es empleado actualmente en los laboratorios con el fin principal de diagnosticar, tomando en cuenta las propiedades de la luz y la interacción con otras sustancias. En general, este equipo está compuesto por 4 partes principales: una fuente, un monocromador, un divisor del haz, un área de muestra y un detector. También posee elementos ópticos como lentes o espejos, que transmiten la luz a lo largo de todo el equipo.

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