脂肪干细胞
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图1｜脂肪间充质干细胞的成骨和成脂诱导分化(×100)
结果：成骨诱导分化后细胞逐渐由长梭形变为多角形，碱性磷酸酶染色后可见黑色或棕黑色颗粒，提示碱性磷酸酶活性较高，见图1A；茜素红染色后可见细胞内钙化结节呈橘红色，见图1B，证实脂肪间充质干细胞已成功向成骨方向诱导分化。成脂诱导分化后细胞形态逐渐由长梭形变短并膨胀、呈短梭形。细胞内可见大量被染成鲜红色的脂滴，见图1C，证实脂肪间充质干细胞已成功向成脂方向诱导分化。
图3｜系统性硬化症小鼠模型的建立及脂肪间充质干细胞治疗
结果：正常对照组小鼠背部皮肤光滑，见图3A；博莱霉素组背部皮肤坚硬，有溃疡和皱褶，见图3B；脂肪间充质干细胞治疗组小鼠病变部位皮肤恢复平滑，见图3C；PBS对照组小鼠背部皮肤仍然坚硬并存在皱褶，见图3D。
图5｜小鼠皮肤及肺组织病理形态分析(苏木精-伊红染色，×100)
结果：冰冻切片通过苏木精-伊红染色发现博莱霉素组小鼠皮肤真皮层增厚，炎症细胞浸润，皮肤附属器减少；经过脂肪间充质干细胞治疗后，小鼠皮肤真皮层变薄，皮肤附属器增多。博莱霉素组和PBS组小鼠肺泡萎缩、塌陷、囊性变化，并伴有炎性细胞浸润；经过脂肪间充质干细胞治疗后，炎性细胞浸润减少，肺泡数量增加。脂肪间充质干细胞治疗组与正常对照组之间无显著差异，博莱霉素组与PBS对照组之间无显著差异，见图5。
图6｜小鼠皮肤及肺组织Masson染色(×100)
结果：正常对照组小鼠皮肤组织，胶原纤维很少；博莱霉素组皮肤中胶原纤维大量聚积，平行于表皮的胶原纤维束增加，并延伸至博莱霉素组的皮肤组织深处；脂肪间充质干细胞治疗组胶原纤维数量减少，PBS对照组胶原纤维仍然很多。博莱霉素组肺间质和肺泡广泛纤维化，脂肪间充质干细胞治疗组小鼠肺组织胶原纤维数量减少，见图6。
图7｜免疫荧光法检测小鼠皮肤中胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ及CD31的表达(×100)
图9｜免疫荧光法检测小鼠肺组织中胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ及CD31的表达(×100)
CD31的表达主要定位于细胞膜，而胶原Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ的表达则主要位于皮肤和肺组织的细胞外基质中。正常对照组和脂肪间充质干细胞治疗组皮肤及肺组织中的胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ蛋白水平均显著低于博莱霉素组；脂肪间充质干细胞治疗组和正常对照组之间以及博莱霉素和PBS对照组之间皮肤和肺组织中胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ蛋白水平差异均无显著性意义(P > 0.05)。正常对照组和脂肪间充质干细胞治疗组皮肤组织中CD31蛋白水平显著高于博莱霉素组和PBS对照组；脂肪间充质干细胞治疗组和正常对照组之间以及博莱霉素和PBS治疗组之间皮肤组织中CD31蛋白水平差异无显著性意义(P > 0.05)。肺组织中CD31蛋白的表达水平在正常对照组、脂肪间充质干细胞组、博莱霉素组及PBS组中均差异均无显著性意义(P > 0.05)，见图7-10。
引用本文：张晶莹, 孙晓林, 耿立霞. 脂肪间充质干细胞治疗系统性硬化症模型小鼠的机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(13): 2011-2017.