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大肠杆菌的M13单链噬菌体DNA.ppt课件简介:
（一）生物结构外形呈丝状由外壳包装蛋白和正链DNA组成；不裂解宿主细胞，但抑制其生长。DNA全长6407个核苷酸约有10个基因大肠杆菌的M13单链噬菌体DNAM13噬菌体体载M13是一含（种单链+）DNA（ssDNA）的大杆菌噬菌体，其基因丝状肠大小组为6.4kb。体主要用这类载来得大量的获单链DNA片段，主要用定来测DNA序列（sanger法）、基因的定点突双脱氧究、源变研异双链DNA的分析等。在M13基因中，除组基因隔间区（ISregion）外，其他均制和装所为复组必需的基因。外源DNA入插IS，区可不影响M13活，因而野生型动M13的改造主要在IS中行。区进M13噬菌体的特点感染Ecoli后，在宿主胞形成细内会双链的制型复DNA（replicationformDNA,RFDNA）。可以象粒质DNA那样在体外行化和操作。进纯无是论RFDNA或ssDNA都能染转E.coli的F+或F-细胞。噬菌体粒的大小是受其颗DNA的大小制的，一点约这正好与λ噬菌体相反，所以M13噬菌体不存在包装限制并的。问题M13噬菌体生产单双链DNA的机制1、以（+）链DNA摸板，合成互（－），为补链该双链称制型复DNA（RFDNA）。2、RFDNA在宿主胞能快速增殖，可增加到每胞细内个细约200拷。个贝3、特的单链异DNA合蛋白结合在（结+）上，而阻链从了其互，即（－）的合成，，胞就不断补链链这样细会断的合成（+）链DNA。4、游离出的（来+）链DNA先与基因V的物形成编码产特的异DNA-蛋白合物，然后移到寄主胞膜，同质复转细基因时V的蛋白（质从+）DNA上落下，余下的链脱来M13（+）链DNA是其感染的寄主胞的胞膜溢出则从细细的程中，被外蛋白过壳包装成病毒粒颗的。M13DNA载体的构建入一段插lacDNA片段，即有带-半乳糖酶基...
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