国家自然科学基金资助1986国家自然科学基金委员会医学科学部二处2011 年度结题项目汇编二零一二年六月

前言科研结果的总结是研究工作中十分重要的环节。编辑本汇编的目的是为了宣传、展示基金项目研究成果 , 提高基金项目的管理水平 , 加强基金项目承担者的信用管理和同行监督作用 , 也可使受资助单位的科研管理部门能较全面的了解基金资助的本处研究项目的完成情况 , 以完善基金资助项目的管理。本汇编力争较客观、较全面地反映项目的研究进展及所取得的结果 , 提高基金项目管理透明度 , 使其成为评估基金项目绩效的依据之一。汇编收录了 2009 年度医学科学部二处的结题项目 418 项。其中包括国家杰出青年科学基金 6 项 , 重点项目 8 项 , 海外及港澳学者合作研究基金 1 项 , 面上申请项目 229 项 ( 其中小额资助 22 项 )、青年科学基金项目 122 项、地区基金 21 项和国际 ( 地区 ) 合作交流项目7 项。共发表学术论著 1808 篇 , 其中 SCI 刊物发表 982 篇 ; 国内刊物发表 826 篇 ; 获得奖励 41 项 ; 获得专利 38 项 ; 同时在基金项目资助下 , 有 46 名博士后 ,755 名博士生和 1038名硕士生得到了很好的培养和锻炼 , 成为我国相关医学领域基础研究的中坚力量。不过 , 在总结项目成果 , 整理汇编的过程中 , 我们也发现存在一些问题 , 主要体现在结题报告的形式方面 :⑴ 报告正文、基金项目研究成果目录和基金资助项目统计数据表这三者间数据不一致 , 给我们统计工作带来困难 ;⑵ 未按照要求填报数据 , 如有些报告中论文发表统计只有数字 , 没有具体说明 ( 作者 , 论文题目 , 刊物名称 , 发表时间 , 卷期页码 ) 或者书写不规范 ;⑶ 缺少基金资助的标注或标注不规范 ( 与课题不相关文章标注资助等 );⑷ 报告内容填写不全 ;⑸ 附件内容不全如缺少论文复印件和获奖证书复印件等 ;上述这些问题希望能够引起项目负责人和各依托单位科研管理部门的重视 , 共同完善结题报告的撰写和审核工作 , 有效地强化基金项目的规范管理。诚然 , 科研成果的生成转化需要一定的时间 , 仅以结题当年的情况来衡量基金项目的完成情况显然存在局限性 , 在结题当年 , 有一些已投稿或拟投稿的文章待发表 , 我们也会密切关注、追踪这些项目的后续情况 , 期待着将来有更多更好的成果涌现。为了使汇编能够在绩效评估、保持新老基金项目实施的连续性方面发挥作用 , 希望从事医学科研和管理工作者对本汇编提出宝贵的意见和建议 , 以完善我们今后的工作。在本汇编的数据整理过程中 , 医学二处项目主任朱元贵、首都儿科研究所张宝红、复旦大学妇产科医院金莉萍、四川省医学科学院鲁芳、北京大学口腔医院崔念晖、首都医科大学同仁医院周建博、泸州医学院余玲、以及四川大学妇产儿童医院李晋辉付出了辛勤的劳动 ,并给予了许多指导和帮助 , 在此深表感谢。医学科学部二处徐岩英2012 年 6 月 15 日

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培养人才 : 博士后 3 博士 30 硕士 8获奖 :内分泌学及代谢病批准号 :30725037项目负责人 : 宁光所在单位 : 上海交通大学本项目主要进行内分泌代谢疾病分子遗传学及致病机制研究 , 拟寻找参与内分泌肿瘤、遗传性内分泌代谢病疾病发生的致病基因或信号通路 , 以及 2 型糖尿病、肥胖等代谢疾病的遗传及环境易感因素 , 从而为该类疾病诊断及靶向干预提供分子靶点和新思路。我们立足于临床问题 , 从患病人群、动物模型到细胞、分子水平深入展开研究 , 建立从表型到分子机制的研究体系 , 阐明 PAK3 在致 ACTH 分泌性胸腺类癌转移中的参与作用 , 发现POMC 启动子区低甲基化及 SMRT 共抑制子 SUMO 化参与 ACTH 异常分泌及激素抵抗机制 ; 在完善遗传性内分泌代谢病基因诊断技术平台基础上 , 提出该类疾病三类十种分类方法 ; 原创性发 Menin 具有核输出信号域 (NES), 为一新的 Wnt/β-catenin 信号通路调节因子 ,阐释了多发性内分泌腺瘤病 1 型肿瘤发生新机制 ; 首次阐明类固醇激素受体共作用子SRC-3 及 G 蛋白偶联受体 GPR48 等在脂肪肝、肥胖、能量代谢等代谢性疾病中的作用及机制 ; 建立肥胖及糖尿病人群样本库 , 证实若干位点危险等位基因增加肥胖和 2 型糖尿病易感性 ; 证实环境危险物双酚 A 暴露与 2 型糖尿病、肥胖、蛋白尿患病风险显著相关 ; 开展天然药物单体干预 2 型糖尿病研究关键词 : 异位 ACTH 综合征 ; 遗传性内分泌代谢病 ;menin; 类固醇激素受体 ;2 型糖尿病学科代码 :H0730发表论著 :[1] Guang Ning, Yufang Bi, Tiange Wang, Min Xu, Yu Xu, Yun Huang, Xiaoying Li, WeiqingWang, Yuhong Chen, Yaohua Wu, Jianing Hou, Aiyun Song,Yu Liu, Mian Li, Shenghan Lai.Relationship of urinary bisphenol A concentration to risk for prevalent type 2 diabetes inChinese adults. A cross-sectional analysis. Ann Intern Med. 2011; 155: 368-74.[2] Xinran Ma, Lingyan Xu, Shu Wang, Bin Cui, Xiaoying Li, Jiangming Xu, Guang Ning.Deletion of Steroid receptor coactivator-3 gene ameliorate hepatic steatosis. Journal ofHepatology. 2011. 55: 445-452.[3] Xiaoying Li, Yan Lu, Haiyan Sun, Jiqiu Wang, Jun Yang, Huijie Zhang, Nengguang Fan, JiaXu, Jinjing Jiang, Ruya Liu, Dali Li, Mingyao Liu, Guang Ning. G protein-coupled receptor48 upregulates estrogen receptor α expression via cAMP/PKA signaling in the malereproductive tract. Development.2010; 137: 151-157.[4] Mian Li, Min Xu, Yufang Bi, Aiyun Song, Yu Liu, Xiaoying Li, and Guang Ning. Associationbetween Higher Serum Fetuin-A Concentrations and Abnormal Albuminuria in Middle-aged- 7 -

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八届世界泌尿外科视频年会最佳大会论文奖。前期研究成果获得 2006 年度国家科学技术进步二等奖和多项省部级科学技术进步奖。关键词 : 肾上腺 , 腹腔镜学科代码 :H0710发表论著 :[1] 张旭、史涛坪 ; Laparo-endoscopic single site anatomical retroperitoneoscopic adrenalectomyusing conventional instruments: initial experience and short-term outcome. J Urol.[2] 张旭、王保军、马鑫 ; Anatomic Retroperitoneoscopic Adrenalectomy for Selected AdrenalTumors >5 cm: Our Technique and Experience. Urology[3] 张旭、史涛坪 ;Laparoendoscopic single-site retroperitoneoscopic adrenalectomy: amatched-pair comparison with the gold standard. Surg Endosc[4] 张旭、王保军 . Laparoscopic adrenalectomy for beginners without open counterpartexperience: initial results under staged training. Urology[5] 张旭、王保军 .Association of DNA polymorphisms within the CYP11B2/CYP11B1 locus andpostoperative hypertension risk in the patients with aldosterone-producing adenomas.Urology会议报告 : 国际大会 9 分组 4 国内大会 28 分组 13培养人才 : 博士后 6 博士 20 硕士 20获奖 :1. 解剖性后腹腔镜肾上腺切除术的技术和临床应用研究 , 张旭、马鑫、李宏召 ,2008 年度湖北省科学技术进步奖一等奖2. 解剖性后腹腔镜肾上腺切除术的技术和临床应用研究 , 张旭、马鑫、王保军 ,2009 年度教育部科学技术进步奖二等奖眼科学批准号 :30725044项目负责人 : 张清炯所在单位 : 中山大学在国家杰出青年科学基金的资助下 , 我们收集了 3000 多份各种近视及正常对照样本 , 对高度近视致病或易感基因开展了系列深入研究。发现了第一个高度近视常染色体隐性遗传位点 MYP18; 在非综合征性近视家系中验证了综合征性高度近视位点 MYP1 的存在 ; 对定位于 MYP1、MYP11、MYP13、MYP18 的家系进行了全外显子测序 , 发现了一个可能的高度近视新基因 ; 通过全基因组关联分析 (GWAS), 发现一个可能与潮汕人相关的近视易感基因位点 , 合作研究发现了一个新的近视易感基因位点 MYP20, 验证了 3 个已报道的 GWAS 阳性结果。对最常见的线粒体遗传病 Leber 遗传性视神经病变进行了发病风险研究 , 发现发现特定 mtDNA 单倍型类群对该病的发病与否有重要影响 , 为进一步阐明LHON 发病机制奠定基础。同时对常见致盲眼遗传病进行了大样本多基因的系列研究 , 为- 11 -

揭示了我国这类病人的基因突变特点与频谱、基因型与临床表型关系 , 提供了重要的基础数据。在本基金资助下发表 SCI 论文 36 篇 ( 总 SCI IF>96)。部分成果获 2010 年中华医学科技奖三等奖。部分研究成果入选国家自然科学基金委员会 2009 年度代表性成果。关键词 : 近视 ; 基因 ; 易感 ;Leber 遗传性视神经病变 ; 致盲眼遗传病学科代码 :H1206发表论著 :[1] Li L, Xiao X, Li S, Jiao X, Hejtmancik JF, *Zhang Q. Lack of phenotypic effect of triallelicvariation in SPATA7 in a family with Leber congenital amaurosis resulting from CRB1mutations . Mol Vis. 2011;17(12):3326-3332.[2] Wang Q, Gao Y, Wang P, Li S, Jia X, Xiao X, Guo X, *Zhang Q. Replication study ofsignificant single nucleotide polymorphisms associated with myopia from two genome-wideassociation studies. Mol Vis.17(12):3290-3299.[3] Xiao X, Guo X, Jia X, Li S, Wang P, *Zhang Q. A recurrent mutation in GUCY2D associatedwith autosomal dominant cone dystrophy in a China family. Mol Vis.17(12):3271-3278.[4] Gao Y, Wang P, Li S, Xiao X, Jia X, Guo X, *Zhang Q. Common variants in chromosome4q25 are associated with myopia in Chinese adults. Ophthalmic Physiol Opt. 32(1): 68-73.[5] 高阳 , 黎仕强 , 肖学珊 , 郭向明 , * 张清炯 . 早期生长因子 1 和晶状体蛋白 α-A 基因多肽与近视的关联性研究 . 中华眼视光学与视觉科学杂志 . 2011;13(5):332-336.[6] Wang J, Wang P, Gao Y, Li S, Xiao X, *Zhang Q. High myopia is not associated with singlenucleotide polymorphisms in the COL 2A 1 gene in the Chinese population.Mol Med Report.2012;5(1):133-137.[7] Lu B, Jiang D, Wang P, Gao Y, Sun W, Xiao X, Li S, Jia X, Guo X, Zhang Q. ReplicationStudy Supports CTNND2 as a Susceptibility Gene for High Myopia. Invest Ophthalmol VisSci. 2011 Oct 21;52(11):8258-8261.[8] Sun W, Xiao X, Li S, Guo X, Zhang Q.. Mutation analysis of 12 genes in Chinese familieswith congenital cataracts. Mol Vis. 2011;17:2197-2206.[9] Zhang X, Wang P, Li S, Xiao X, Guo X, Zhang Q. Mutation spectrum of PAX6 in Chinesepatients with aniridia. Mol Vis. 2011;17:2139-2147.[10] Xiao X, Li W, Wang P, Li L, Li S, Jia X, Sun W, Guo X, Zhang Q. Cerulean cataract mappedto 12q13 and associated with a novel initiation codon mutation in MIP. Mol Vis.2011;17:2049-2055.[11] Wang P, Li S, Xiao X, Guo X, Zhang Q.KIF21A novel deletion and recurrent mutation inpatients with congenital fibrosis of the extraocular muscles-1 Int J Mol Med. 2011Dec;28(6):973-975.[12] Sun W, Xiao X, Li S, Guo X, Zhang Q. Mutational screening of six genes in Chinese patientswith congenital cataract and microcornea. Mol Vis. 2011;17:1508-1513.[13] Li L, Xiao X, Li S, Jia X, Wang P, Guo X, Jiao X, Zhang Q, Hejtmancik JF. Detection ofVariants in 15 Genes in 87 Unrelated Chinese Patients with Leber Congenital Amaurosis .PLoS One. 2011;6(5):e19458.[14] Yang H, Xiao X, Li S, Mai G, Zhang Q. Novel TSPAN12 mutations in patients with familialexudative vitreoretinopathy and their associated phenotypes. Mol Vis. 2011 Apr29;17:1128-1135.- 12 -

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[32] Ji Y, Zhang AM, Jia X, Zhang YP, Xiao X, Li S, Guo X, Bandelt HJ, Zhang Q, Yao YG.Mitochondrial DNA Haplogroups M7b1 '; 2 and M8a Affect Clinical Expression of LeberHereditary Optic Neuropathy in Chinese Families with the m.11778G -> A Mutation Am JHum Genet. 2008 Dec;83(6):760-768.[33] Fang S, Guo X, Jia X, Xiao X, Li S, Zhang Q. Novel GPR143 mutations and clinicalcharacteristics in six Chinese families with X-linked ocular albinism. Mol Vis.2008;14:1974- 1982.[34] Zhang AM, Jia X, Yao YG, Zhang Q. Co-occurrence of A1555G and G11778A in a Chinesefamily with high penetrance of Leber';s hereditary optic neuropathy. Biochem Biophys ResCommun. 2008 Nov 7;376(1):221-4.[35] Li T, Xiao X, Li S, Xing Y, Guo X, Zhang Q. Evaluation of EGR1 as a candidate gene forhigh myopia Mol Vis. 2008 Jul 15;14:1309-1312.[36] Wang HW, Jia X, Ji Y, Kong QP, Zhang Q, Yao YG, Zhang YP. Strikingly differentpenetrance of LHON in two Chinese families with primary mutation G11778A isindependent of mtDNA haplogroup background and secondary mutation G13708A. MutatRes. 2008 Aug 25;643 (1-2):48-53.会议报告 : 国际大会 2 分组 0 国内大会 5 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 8 硕士 5获奖 :口腔医学批准号 :30725042项目负责人 : 金岩所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学课题组围绕本课题的主要研究内容及预期目标 , 主要开展了以下几方面的研究工作 :分离、培养和鉴定用于牙再生的骨髓间充质干细胞 (BMSC)、表皮干细胞 (ESC)、iPS 细胞 ;对非牙源性细胞 (ESCs、iPSCs、BMDCs) 的成牙能力进行了研究 , 探索优化可行的诱导条件 ; 对牙源性细胞 (DFCs、PDLSCs、GMSCs) 的成牙能力及诱导微环境进行了比较研究 ;发现了一种新型的牙周膜干细胞 ; 通过细胞膜片、细胞聚合体和干细胞复合支架材料等组织工程手段 , 进行牙周、牙髓、生物牙根再生的研究 ; 建立基于牙髓干细胞、牙周膜干细胞的工程化牙周再生方法 ; 同时 , 利用处理后的牙本质与牙囊细胞复合 , 建立了异位与原位的牙根再生技术并获得了生物性牙根的再生。发现了 Wnt 信号通路及 microRNA 在相关牙源性细胞分化和增殖中发挥重要的调控作用 ; 建立骨髓嵌合小鼠并发现骨髓细胞在颌面部迁移归巢的特点。在此研究基础上 , 课题组在 Stem Cells、Biomaterials、JBMR、TissueEngineering、Stem Cell Dev 等权威期刊上发表 SCI 研究论文 23 篇 , 在国际相关研究领域形成影响。申请国家发明专利 2 项。关键词 : 牙齿发育 ; 牙齿再生 ; 间充质干细胞 ; 细胞膜片 ; 分化学科代码 :H1402- 14 -

发表论著 :[1] Guo, WH; He, Y; Zhang, XJ; Lu, W; Wang, CM; Yu, H; Liu, Y; Li, Y; Zhou, YL; Zhou, J;Zhang, MJ; Deng, ZH; Jin, Y. The Use of Dentin Matrix Scaffold and Dental Follicle Cellsfor Dentin Regeneration. Biomaterials. 2009; 30:6708-6723.[2] Han C , Yang Z , Zhou W , Jin F , Song Y , Wang Y , Huo N , Chen L , Qian H , Hou R ,Duan Y , Jin Y. Periapical Follicle Stem Cell: a Promising Candidate forCementum/Periodontal ligament Regeneration and Bio-root Engineering. Stem Cell Dev.2010;19(9):1405-15.[3] Huo N, Tang L, Yang Z, Qian H, Wang Y, Han C, Gu Z, Duan Y, Jin Y. Differentiation ofdermal multipotent cells into odontogenic lineage induced by embryonic and neonatal toothgerm cell-conditioned medium. Stem Cell Dev. 2010;19(1):93-104.[4] Liu N, Shi S, Deng M, Tang L, Zhang G, Liu N, Ding B, Liu W, Liu Y, Shi H, Liu L, Jin Y.High levels of β-Catenin Signaling Reduce Osteogenic Differentiation of Stem Cells inInflammatory Microenvironments through Inhibition of the Noncanonical Wnt Pathway. JBone Miner Res. 2011;26(9):2082-95.[5] Liu Y, Liu W, Hu C, Xue Z, Wang G, Ding B, Luo H, Tang L, Kong X, Chen X, Liu N, DingY, Jin Y. MiR-17 modulates osteogenic differentiation through coherent feed-forward loop inmesenchymal stem cells isolaed from periodontal ligament from patients with periodontitis.Stem Cells. 2011;29(11):1804-16.[6] Zhou J, Shi S, Shi Y, Xie H, Chen L, He Y, Guo W, Wen L, Jin Y. The role of bone marrowderived progenitor cells in the maintenance and regeneration of dental mesenchymal tissues.Journal of Cellular Physiology. 2011;226: 2081–2090.[7] Guo W., Gong K., Shi HG., Zhu GX., He Y., Ding BF., Wen LY., Jin Y. Dental Follicle Cellsand Treated Dentin Matrix Scaffold for Tissue Engineering the Tooth Root. Biomaterials.2012; 33 ( 5 ): 1291-302.[8] Wang L, Shen H, Zheng W, Tang L, Yang Z, Gao Y, Yang Q, Wang C, Duan Y, Jin Y.Characterization of stem cells from alveolar periodontal ligament. Tissue Engineering. 2011;17(7-8): 1015-1026.[9] Zheng W, Wang S, Ma D, Tang L, Duan Y, Jin Y. Loss of proliferation and differentiationcapacity of aged human .Tissue Engineering. Part A. 2009; 15(9):2363-71.[10] Yang Z, Jin F, Zhang X, Ma D, Han C,Huo N, Wang Y, Zhang Y, Lin Z , Jin Y . Tissueengineering of cementum/ periodontal-ligament complex using a novel three-dimensionalpellet cultivation system for human periodontal ligament stem cells. Tissue Engineering. PartC. 2009; 15(4):571-581.[11] Li Y, Jin F, Du Y, Ma Z, Li F, Wu G, Shi J, Zhu X, Yu J, Jin Y.Cementum and PeriodontalLigament Like Tissue Formation Induced with Bioengineered Dentin. Tissue Engineering.2008; 14(10):1731-42.[12] Ma Z, Li S, Song Y, Tang L, Ma D, Liu B, Jin Y. The biological effect of dentinnon-collagenous proteins (DNCPs) on the human periodontal ligament stem cells (HPDLSCs)in vitro and in vivo. Tissue Engineering. 2008; 14(12):2059-68.[13] Zhao Z, Tang L, Deng Z, Wen L, Jin Y. Essential role of ADAM28 in regulating theproliferation and differentiation of human dental papilla mesenchymal cells (hDPMCs).Histochemistry and Cell Biology 2008; 130:1015-1025.[14] Yang ZH, Zhang XJ, Dang NN, Ma Z-F, Xu L, Wu J-J, Sun YJ, Duan Y-Z, Lin Z, Jin Y.- 15 -

Apical tooth germ cell-conditioned medium enhances the differentiation of periodontalligament stem cells into cementum/periodontal ligament-like tissues. J Periodontal Res 2009;44: 199–210.[15] Xu L, Tang L, Jin F, Liu XH, Yu JH, Wu JJ, Yang ZH, Wang YX, Duan YZ, Jin Y. Theapical region of developing tooth root constitutes a complex and maintains the ability togenerate root and periodontium like tissues. J Periodontal Res. 2009; 44:275-282.[16] Ning F, Guo Y, Tang J, Zhou J, Zhang H, Lu W, Gao Y, Wang L, Pei D, Duan Y, Jin Y.Differentiation of mouse embryonic stem cells into dental epithelial-like cells induced byameloblasts serum-free conditioned medium. BBRC, 2010; 394:342–34.[17] Yang ZH, Jin F, Zhang XJ, Liu X, Zhang YF, Liu JQ, Duan YZ, Jin Y. A Novel PossibleStrategy Based on Self-Assembly Approach to Achieve Complete Periodontal Regeneration.Artificial Organs. 2010; 34(7): 603-9.[18] Tang L, Li N, Xie H, Jin Y. Characterization of Mesenchymal Stem Cells from HumanNormal and Hyperplastic Gingiva. Journal of Cellular Physiology. 2011;226(3): 832-42.[19] Wang YX, Ma ZF, Huo N, Tang L, Han C, Duan YZ, Jin Y. Porcine tooth germ cellconditioned medium can induce odontogenic differentiation of human dental pulp stem cells.J Tissue Eng Regen Med.2011;5(5):354-62.[20] Fang J, Tang L, Liu XH, Wen LY, Jin Y. Changes of the unique odontogenic properties of ratapical bud cells under the developing apical complex microenvironment. Int J Oral Sci., 2009;1(1):26-33.[21] Zhang H, Liu S, Zhou Y, Tan J, Che H, Ning F, Zhang X, Xun W, Huo N, Tang L, Deng Z,Jin Y.Natural mineralized scaffolds promote the dentinogenic potential of dental pulp stemcells via MAPK signaling pathway. Tissue Eng Part A. 2012;18(7-8):677-91.[22] Guo W, Chen L, Gong K, Ding B, Duan Y, Jin Y.Heterogeneous dental follicle cells and theregeneration of complex periodontal tissues. Tissue Eng Part A. 2012;18(5-6):459-70.[23] Xu L, Yang Z, Jin F, Duan Y, Jin Y. Characterization of Rat Apical Tissues in Different RootDevelopment Stage. Connect Tissue Res. 2011;52(5):393-400[24] 专著 : 金岩 ( 主编 ), 口腔颌面发育生物学与再生医学 , 人民卫生出版社 ,2010。会议报告 : 国际大会 5 分组 0 国内大会 11 分组 0培养人才 : 博士后 1 博士 12 硕士 7专利 :2 项获奖 :[1] 2009 年军队科技进步一等奖 : 用于战创伤救治的组织工程皮肤的基础与应用研究[2] 2010 年陕西省科学技术奖一等奖 :TGFβs 与间充质干细胞在周围神经损伤和再生中作用的研究- 16 -

医学科学部二处海外及港澳学者合作研究基金渐进性咬合紊乱所致大鼠下颌髁突改建活动中干细胞活动规律的研究批准号 :30928028项目负责人 : 施松涛所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学颞下颌关节紊乱病是口腔颌面部第四大疾病 , 骨关节病是其中最严重的一类。本项目以渐进性咬合紊乱致下颌髁突 OA 样变模型大鼠为研究对象 , 针对髁突软骨与其下方骨髓腔交通广泛、在增殖带和软骨 - 骨交界处有大量未分化细胞的特点 , 通过 Brdu 长程标记、干细胞特异性 marker 的免疫组织化学染色对干细胞进行定位 , 通过注射外源性 GFP 标记的MSC 探讨系统来源干细胞参与下颌髁突 OA 病变修复的情况 , 并通过髁突软骨中细胞的体外实验探讨髁突软骨干细胞存在的可能性。研究结果表明大鼠髁突软骨中不存在干细胞 ,参与髁突软骨损伤修复的干细胞主要来源于血运丰富的双板区和髁突软骨下骨髓腔。当髁突软骨损伤较轻 ( 未突破软骨 - 软骨下骨屏障时 ) 参与修复活动的干细胞主要来自双板区 ;但当软骨病变较重时 ( 突破软骨 - 软骨下骨屏障时 ) 血运更丰富的软骨下骨髓腔将募集大量系统来源的干细胞参与修复活动。本课题初步证实了参与髁突软骨损伤修复的干细胞来源 , 为今后髁突软骨损伤的治疗奠定了重要理论基础。关键词 : 颞下颌关节 ; 骨关节病 ; 咬合 ; 关节软骨 ; 干细胞学科代码 :H1407发表论著 :[1] Li YQ , Xing XH , Wang H , Weng XL , Yu SB , Dong GY. Dose-dependent effects of genistein onbone homeostasis in mandibular subchondral bone of rats. Acta Pharmacol Sin.2012;33(1):66-74.[2] Wang QY, Dai J, Kuang B, Zhang J, Yu SB, Duan YZ, Wang MQ. Osteochondralangiogenesis in rat mandibular condyles with osteoarthritis-like changes. Arch Oral Biol.2012 Jan 10. [Epub ahead of print].会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :专利 :1 项- 17 -

医学科学部二处重点项目重要出生缺陷遗传致病基因的识别及功能研究批准号 :30730097项目负责人 : 张学所在单位 : 中国医学科学院基础医学研究所本项目将以神经管畸形和先天性肢端畸形两种人类最常见的出生缺陷为切入点 , 开展出生缺陷的遗传致病基因研究。具体研究内容包括 :(1) 利用我们已掌握的一个十分珍贵的 X- 连锁神经管畸形 - 脊柱侧弯 - 先天性全身多毛症大家系 , 在前期完成致病基因染色体精细定位和区域内全部基因外显子序列等测序的工作基础上 , 进一步应用 Array CGH 和全基因测序等技术策略 , 开展致病基因定位克隆和功能研究 ;(2) 在我们发现 V 型并指 ( 趾 )畸形致病基因的基础上 , 应用 ChIP-on-chip 技术在基因组水平筛选 HOXD13 下游靶基因 , 开展突变 HOXD13 基因的功能研究。项目的近期目标是发现 " 神经管畸形 - 脊柱侧弯 -先天性全身多毛症 " 这一新型遗传综合征的致病基因 , 揭示 HOXD13 基因 p.Q317R 突变导致 V 型并指 ( 趾 ) 畸形的致病机制 , 取得有重大学术影响和应用前景的标志性成果 , 在国际一流专业学术杂志发表论文 3 篇。关键词 : 出生缺陷 ; 神经管畸形 ; 先天性肢端畸形 ; 致病基因 ;HOXD13学科代码 :H0419发表论著 :[1] Zhu HW, Shang DD, Sun M, Choi SJ, Liu Q, Hao JJ, Figuera L.E., Zhang F, Choy KW, Ao Y,Liu Y, Zhang XL, Yue FZ, Wang MR, Jin L, Patel P.I., Jing T, Zhang X. X-LinkedCongenital Hypertrichosis Syndrome Is Associated with Interchromosomal InsertionsMediated by a Human-Specific Palindrome near SOX3. American Journal of Human Genetics,2011; 88(6): 819-826.[2] Wang BX, Yang W, Wen W, Sun J, Su B, Liu B, Ma DL, Lv D, Wen YR, Qu T, Chen M, SunM, Shen Y, Zhang X. gamma-Secretase Gene Mutations in Familial Acne Inversa. Science,2010; 330: 1065.[3] Lv D, Luo Y, Yang W, Cao L, Wen Y, Zhao X, Sun M, Lo WH, Zhang X. A novel single-basedeletion in ROR2 causes atypical brachydactyly type B1 with cutaneous syndactyly in a largeChinese family. Journal of Human Genetics, 2009; 54(7):422-425.[4] Sun M, Li N, Dong W, Chen ZG, Liu Q, Xu YM, He G, Shi YY, Li X, Hao JJ, Luo Y, ShangDd, Lv D, Ma F, Zhang D, Hua R, Lu CX, Wen YR, Cao LH, Irvine A.D., McLean, W. H. I.,Dong Q, Wang MR, Yu J, He L, Wilson H. Y.Lo, Zhang X. Copy-Number Mutations onChromosome 17q24.2-q24.3 in Congenital Generalized Hypertrichosis Terminalis with orwithout Gingival Hyperplasia. American Journal of Human Genetics, 2009; 84(6): 807-813.[5] Zhang T, Hua R, Xiao W, Burdon KP, Bhattacharya SS, Craig JE, Shang D, Zhao X, MackeyDA, Moore AT, Luo Y, Zhang J, Zhang X. Mutations of the EPHA2 Receptor TyrosineKinase Gene Cause Autosomal Dominant Congenital Cataract. Human Mutation, 2009; 30(5):603-610.- 18 -

[6] Wen, Yaran, Liu, Yang, Xu, Yiming, Zhao, Yiwei, Hua, Rui, Wang, Kaibo, Sun, Miao, Li,Yuanhong, Yang, Sen, Zhang, Xue-Jun, Kruse, Roland, Cichon, Sven, Betz, Regina C.,Noethen, Markus M., van Steensel, Maurice A. M., van Geel, Michel, Steijlen, Peter M., Hohl,Daniel, Huber, Marcel, Dunnill, Giles S., Kennedy, Cameron, Messenger, Andrew, Munro,Colin S., Terrinoni, Alessandro, Hovnanian, Alain, Bodemer, Christine, de Prost, Yves, Paller,Amy S., Irvine, Alan D., Sinclair, Rod, Green, Jack, Shang, Dandan, Liu, Qing, Luo, Yang,Jiang, Li, Chen, Hong-Duo, Lo, Wilson H-Y, *McLean, W. H. Irwin, He, Chun-Di, Zhang,Xue. Loss-of-function mutations of an inhibitory upstream ORF in the human hairlesstranscript cause Marie Unna hereditary hypotrichosis. Nature Genetics, 2009; 41(2): 228-233.[7] Sun, M., Ma, F., Zeng, X., Liu, Q., Zhao, X-L, Wu, F-X, Wu, G-P, Zhang, Z-F, Gu, B., Zhao,Y-F, Tian, S-H, Lin, B., Kong, X-Y, Zhang, X-L, Yang, W., Lo, W. H-Y, Zhang, X.Triphalangeal thumb-polysyndactyly syndrome and syndactyly type IV are caused bygenomic duplications involving the long range, limb-specific SHH enhancer. Journal ofMedical Genetics, 20078; 45(9): 589-595.会议报告 : 国际大会 10 分组 0 国内大会 5 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 20 硕士 0弱视神经机制的 S-U-G 假说研究批准号 :30730099项目负责人 : 赵堪兴所在单位 : 天津医科大学弱视为视觉神经系统发育相关的视功能疾患 , 患病率达 3%, 探索其发病机制具有指导临床治疗和认识大脑机制的双重意义。本研究根据突触可塑性研究的新进展结合对视觉认知过程的新认识以及我们在前期弱视研究中的新发现 , 提出弱视的功能性改变是以突触联系为物质基础的 , 后者的重组过程基于脉冲时间 (Spike-timing) 依赖的可塑性和统一的(Unifying) 突触前 / 后变化 , 这个时间依赖性过程和 " 大范围首先 "(Global-first) 的视觉认知学说综合起来形成我们对弱视的新认识 :S-U-G 假说。我们以棉耳绒猴建立弱视模型 ,运用多焦电生理、细胞外记录、膜片钳全细胞记录、电镜、病理学和分子生物学技术等 ,从多学科交叉的角度 , 围绕 S-U-G 假说 , 对弱视发病过程进行从初始动因到功能和形态结果 , 从宏观的视觉过程到微观的突触可塑性变化和分子事件的整体深入剖析 , 以探讨弱视的发病机理 , 为寻找到合理有效的防治策略提供依据。关键词 : 弱视 ; 神经机制 ; 可塑性 ; 假说 ; 防治学科代码 :H1206发表论著 :[1] 史学锋 , 赵堪兴 , 许丽敏 , 陈霞 , 王婷 . 屈光参差性弱视眼微扫视眼球运动特征的初步观察 . 中华眼科杂志 .2011;47(11):967-971.[2] 张卫鹏 , 史学锋 , 邢咏新 , 赵堪兴 . 发育对大鼠视皮层第 2 和 3 层锥体神经元 AMPA 受体介导的自发兴奋性突触后电流影响的研究 . 中华眼科杂志 . 2009;45(8):736-741.- 19 -

[3] 谢芳 , 史学锋 , 许丽敏 , 张腾月 , 王嘉星 , 宁玉贤 , 赵堪兴 . 猫初级视皮层神经元的双眼整合反应特性研究 . 中华实验眼科杂志 . 2011;29(6):485-488.[4] 史学锋 , 许丽敏 , 王婷 , 赵堪兴 . 屈光不正对微扫视性眼球运动的影响 . 中华实验眼科杂志 .2011;29(6):485-488.[5] 邢咏新 , 赵堪兴 . 大鼠睁眼前初级视皮层 2/3 层锥体神经元突触自身稳态可塑性的变化特征 . 中国病理生理杂志 .2009;06 期 :1192-1196.[6] 许丽敏 , 史学锋 , 谢芳 , 赵堪兴 . 成年大鼠视皮层局部场电位振荡特性的研究 . 眼科新进展 . 2011;08 期 :701-704.[7] 李瑶 , 史学锋 , 张腾月 , 程文博 , 王蕊 , 赵堪兴 . 大鼠视皮层脑片锥体神经元树突膜片钳技术 . 眼科新进展 .2011;07 期 :605-608.[8] 谢芳 , 史学锋 , 许丽敏 , 张腾月 , 王嘉星 , 宁玉贤 , 赵堪兴 . 猫初级视皮层神经元视觉训练相关的方位调制特性可塑性变化研究 . 眼科新进展 . 2011;07 期 :601-604.[9] 解来青 , 史学锋 , 赵堪兴 . 散光性和远视性视网膜离焦对图形视觉诱发电位 P_(100) 潜伏值的影响 . 眼科研究 .2009;07 期 : 611-615.[10] 史学锋 , 王婷 , 许丽敏 , 赵堪兴 . 光学成像模糊对微扫视性眼球运动影响的研究 . 天津医药 . 2011;08 期 :682-684.[11] 张卫鹏 , 史学锋 , 邢咏新 , 赵堪兴 . 发育期大鼠视皮层锥体神经元自发兴奋性突触后电流变化 . 天津医科大学学报 . 2009;02 期 :169-172.[12] 解来青 , 赵堪兴 . 弱视发病的神经突触机制的研究进展 . 中华眼科杂志 .2008;44(11):1045-1049.[13] 谢芳 , 赵堪兴 , 张伟 . 弱视的双眼视损害机制研究方法和进展 . 国际眼科纵览 .2010;34(2):131-135.[14] 贾佳 , 赵堪兴 . 弱视的双眼视损害机制研究方法和进展国际眼科纵览 . 2008;32(5):354-358.[15] 邢咏新 , 赵堪兴 . 突触自身稳态可塑性及其在视觉发育中的作用研究进展国际眼科纵览 .200832(3):145-149.[16] 郝瑞 , 邢咏新 , 赵堪兴 . 单眼形觉剥夺大鼠视皮层 α- 氨基 -3- 羟基 -5- 甲基异恶唑 -4-丙酸受体 GluR2 的表达及其变化对微小兴奋性突触后电流的影响 . 中华眼科杂志 .2008;44 (11): 976-980.[17] 赵堪兴 , 史学锋 . 我国斜视与小儿眼科近五年研究进展 . 中华眼科杂志 .2011;46(10):906-910[18] 任艳红 , 赵堪兴 .γ- 氨基丁酸 A 受体 α1 亚单位在正常发育大鼠视皮层中的表达 . 眼科研究 .2010; 08 期 :703-706.[19] 郝瑞 , 赵堪兴 . 谷氨酸能沉默突触在视觉发育神经元可塑性中的作用 . 眼科研究 . 2010;05期 :471-475[20] 任艳红 , 赵堪兴 .γ- 氨基丁酸能神经回路在视觉系统发育和可塑性研究中的进展 . 国际眼科纵览 . 2008;32(3):167-170.[21] 郝瑞 , 赵堪兴 . 多巴胺在视觉发育中的作用 . 国际眼科纵览 .2009;33(5): 295-298.会议报告 : 国际大会 4 分组 4 国内大会 6 分组 5培养人才 : 博士后 0 博士 11 硕士 9获奖 :- 20 -

线粒体 DNA 突变导致老年性聋的机制和干预的研究批准号 :30730094项目负责人 : 孔维佳所在单位 : 华中科技大学线粒体基因突变与老年性聋发病密切相关。由于缺乏合适的研究模型 , 线粒体导致老年性聋的发病机制仍未阐明 , 迄今没有有效的防治方法。本课题利用本研究小组在国际上首次成功建立的内耳线粒体常见缺失突变 (common deletion,CD) 的大鼠模型 , 采用分子生物学、免疫组化和转基因等技术 , 进一步研究线粒体突变在老年性聋发病中的作用和机制 ,1 发现 CD 缺失量与大鼠听阈改变之间的阈值效应 , 在国际上首次提出 CD 突变引起听力下降的突变阈值 , 证实 CD 在老年性聋发病中起重要作用 ;2 发现 3 个新的缺失突变 ,CD 在各缺失中负荷最高 , 提示 CD 在老年性聋发病中起主导作用 ;3 发现核基因 TFAM 蛋白表达与 CD 缺失成正相关 , 对 CD 有调控作用 ;4 构建了携带 MnSOD 的腺相关病毒 , 进行在体和离体研究 , 发现其均有保护作用 ;5 研究模型大鼠听觉中枢 , 发现其退行性病理改变及初步阐明 CD 在中枢的形成及对老年性聋的作用机制 ;6 发现硫辛酸及饮食限制对大鼠内耳的保护作用。本课题研究结果从分子、蛋白、细胞、组织、整体不同水平上阐明 CD在老年性聋发病中的作用与机制 , 并探讨药物及基因治疗对老年性聋的干预作用和机制 ,为临床预防和治疗老年性聋奠定理论基础关键词 : 线粒体 DNA; 老年性聋 ; 常见缺失突变 ; 核基因 ; 转基因学科代码 :H1303发表论著 :[1] Zhong Y, Hu YJ, Yang Y, Peng W, Sun Y, Chen B, Huang X, Kong WJ. Contribution ofcommon deletion to total deletion burden in mitochondrial DNA from inner ear ofd-galactose-induced aging rats. Mutation Research-Fundamental and Molecular Mechanismsof Mutagenesis. 2011; 712(1-2):11-19.[2] Zhong Y, Hu YJ, Chen B, Peng W, Sun Y, Yang Y, Zhao,XY, Fan GR, Huang X, Kong WJ.Mitochondrial transcription factor A overexpression and base excision repair deficiency in theinner ear of rats with D-galactose-induced aging. FEBS Journal. 2011; 278(14):2500-2510.[3] Chen B, Zhong Y, Peng W, Sun Y, Hu YJ, Yang Y, Kong WJ. Increased mitochondrial DNAdamage and decreased base excision repair in the auditory cortex of D-galactose-inducedaging rats. Molecular Biology Reports. 2011; 38(6):3635-3642.[4] Chen B, Zhong Y, Peng W, Sun Y, *Kong WJ. Age-related changes in the central auditorysystem: comparison of D-galactose induced aging rat and naturally aging rats. Brain Res.2010; 1344:43-53.[5] Peng W, Hu Y, Zhong Y, Chen B, Sun Y, Yang Y, Kong W. Protective roles of α-lipoic acidin rat model of mitochondrial DNA4834bp deletion in inner ear. Journal of HuazhongUniversity of Science and Technology - Medical Science. 2010; 30(4): 514-518.[6] *Kong WJ, Wang DY, Huang X, Ding GF. High dose combination pertussis toxin inducesautoimmune inner ear disease in Sprague-Dawley rats. Acta Oto-Laryngologica. 2011;131(7):692-700.- 21 -

[7] 杨阳 , * 孔维佳 , 胡钰娟 , 钟毅 , 赵学艳 , 彭炜 . 不同病毒载体感染内耳组织的比较研究 .中华医学杂志 . 2009; (89): 1351-1355.[8] 刘波 , 孔维佳 . 直立海绵垫姿势描记在评定正常人和眩晕患者平衡功能中的重测信度研究 . 中国康复医学杂志 . 2008; 23(10): 896-899.[9] 孔维佳 , 刘波 , 冷样名 . 眩晕疾病的个体化综合治疗 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2008;22(04): 145-149.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 11 硕士 3阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征上气道调控机制研究批准号 :30730100项目负责人 : 韩德民所在单位 : 首都医科大学睡眠时上气道扩张肌神经调控异常是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 (OSAHS) 的关键致病因素 , 并与遗传因素有关。已发现 5- 羟色胺转运体和受体编码基因多态性与 OSAHS关联 , 推测有可能通过影响肌张力调控致 OSAHS 发病 , 但无研究证实 ; 并且关联机制不明。本课题组前期研究已掌握评估 OSAHS 各种临床表现型技术 , 包括上气道软、硬结构及被动力学 ; 上气道肌电生理等。本研究在上述基础上 (1) 检测上述基因基因型 , 定量评价OSAHS 表型 , 比较不同程度扩张肌调控障碍的患者和对照组基因型及等位基因频率差异 , 证实基因通过影响扩张肌调控导致 OSAHS。(2) 易感基因型患者扩张肌调控功能可能的受累环节有多个 :1 对低氧 , 高二氧化碳和气道负压负荷反应 ;2 睡眠时相改变对扩张肌代偿功能的影响 ;3 与呼吸驱动力的协调。对易感基因型患者上述环节功能进行检测 ,定位基因在扩张肌调控通路中的作用环节 , 为 OSAHS 新的治疗途径提供理论依据关键词 : 睡眠呼吸暂停 ; 阻塞性 ; 基因 ; 上气道扩张肌 ; 神经调控机制学科代码 :H1302发表论著 :[1] Chen W, Ye J, Han D, Yin G, Wang B, Zhang Y. Association of prepro-orexin polymorphismwith obstructive sleep apnea/hypopnea syndrome. Am J Otolaryngol. 2012; 33(1):31-6.[2] Huang H, Ye JY, Li YR, Wang XY, Zhang YH, Wang JY, Ding X, Li HG, Han DM. PulseTransit Time for Quantifying Inspiratory Effort in Patients with Obstructive Sleep Apnea.ORL 2011; 73:53-60.[3] Chen W, Ye J, Han D. Relationship of body position, upper airway morphology and severityof obstructive sleep apnea/hypopnea syndrome among Chinese. Acta Oto-Laryngologica.2011; 131(2):173-80.[4] Weihu C, Jingying Y, Demin H, Yuhuan Z, Jiangyong W. End-tidal carbon dioxideconcentration monitoring in obstructive sleep apnea patients. Am J Otolaryngol. 2011;32:190-193.- 22 -

[5] Li Y, Ye J, Li T, Lin N, Wang Z, Liang C, Sperry A, Han D. Anatomic Predictors ofRetropalatal Mechanical Loads in Patients with Obstructive Sleep Apnea. Respiration. 2011;82(3):246-53.[6] Yin G, Ye J, Han D. Association of the 5-HT2A receptor gene polymorphisms withobstructive sleep apnea hypopnea syndrome in Chinese Han population. Acta Otolaryngol.2012; 132(2):203-9.[7] 叶京英 ; 李彦如 , 韩德民 . 改良悬雍垂腭咽成形术长期疗效的主观评价 . 中国耳鼻咽喉头颈外科 . 2011; 18(2):90-94.[8] 顼晋昆 , 叶京英 , 韩德民 . 上气道 CT 软组织测量值与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征病情程度的关系 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2010; 45(5):387-392.[9] 李彦如 , 边秋丽 , 叶京英 , 韩德民 . 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者术后第一天睡眠血氧饱和度特点分析 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 46(8):628-631.[10] 叶京英 , 韩德民 , 李彦如 . 快动眼睡眠期相关阻塞性睡眠呼吸暂停综合征人群特征的研究 . 首都医科大学学报 . 2009; 30(6): 746-751.会议报告 : 国际大会 3 分组 2 国内大会 17 分组 12培养人才 : 博士后 0 博士 6 硕士 4获奖 : 国家级科技进步奖二等奖 1正常及移植颌下腺分泌功能调控的研究批准号 :30730102项目负责人 : 俞光岩所在单位 : 北京大学本课题采用 RT-PCR、免疫印迹、免疫荧光和质粒转染等方法 , 首次证实人颌下腺存在功能性辣椒素受体的表达 , 细胞内 Ca2+ 升高和 ERK1/2 磷酸化 , 进而促进 AQP5 表达和转位是激活辣椒素受体调控颌下腺分泌的新途径。通过全面探讨移植早期颌下腺 M- 胆碱受体、α- 和 β- 肾上腺素受体及辣椒素受体的变化规律 , 首次明确局部神经介质不足和相应受体功能改变是导致移植早期颌下腺分泌减少的重要机制 ; 提出以受体为靶点 , 减轻移植颌下腺结构和功能损伤的新思路 , 为临床上促进 " 休眠期 " 移植腺体的分泌 , 预防导管阻塞提供了重要参考。首次分析人移植颌下腺的蛋白质表达谱 , 提出 M- 受体敏感性增加 ,ERK1/2 磷酸化介导的 F-actin 重排是移植颌下腺过量分泌的重要机制 , 制订了安全有效的防治措施 , 创立了部分颌下腺移植的新术式。通过对移植远期唾液 - 泪液的蛋白质组学分析 ,为移植颌下腺分泌液对角结膜表面结构的长期影响提供了重要参考。该研究的结果不仅对全面揭示正常及移植颌下腺的分泌机制有重要的理论意义 , 而且对提高自体颌下腺移植治疗重症角结膜干燥症的疗效具有明显的指导作用。关键词 : 颌下腺 , 移植 , 胆碱受体 , 肾上腺素受体 , 辣椒素受体学科代码 :H1406发表论著 :- 23 -

[1] Xiang B, Zhang Y, Li YM, Gao Y, Gan YH, Wu LL, Yu GY. Phenylephrine protectsautotransplanted rabbit submandibular gland from apoptosis. Biochemical and BiophysicalResearch Communications 2008;377:210-214.[2] Li YM, Zhang Y, Shi L, Xiang B, Cong X, Zhang YY, Wu LL, Yu GY. Isoproterenolimproves secrection of transplanted submandibular glands. J Dent Res. 2009;88(5):477-82.[3] Shi L, Cong X, Zhang Y, Ding C, Ding QW, Fu FY, Wu LL, Yu GY. Carbachol improvessecretion in the early phase after rabbit submandibular gland transplantation. Oral Dis.2010;16(4):351-9..[4] Zhang L, Xu H, Cai ZG, Mao C, Wang Y, Peng X, Zhu ZH, Yu GY. Clinical and anatomicstudy on the ducts of the submandibular and sublingual glands. J Oral Maxillofac Surg.2010;68(3):606-10.[5] Ding QW, Zhang Y, Wang Y, Wang YN, Zhang L, Ding C, Wu LL, Yu GY. FunctionalVanilloid Receptor-1 in Human Submandibular Glands. J Dent Res, 2010;89(7):711-716.[6] Zhang Y, Cong X, Shi L, Xiang B, Li YM, Ding QW, Ding C, *Wu LL, *Yu GY. Activationof transient receptor potential vanilloid subtype 1 increase secretion of the hypofunctional,transplanted submandibular gland. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2010;299:54-62.[7] Chen ZY, Liang QF, Yu GY. Establishment of a rabbit model for keratoconjunctivitis sicca.Cornea. 2011;30(9):1024-9.[8] Xu H, Mao C, Liu JM, Peng X, Zhu ZH, *Yu GY. Microanatomic study of the vascular andduct system of the submandibular gland. J Oral Maxillofac Surg, 2011;69:1103-1107.[9] Ding C, Zhang Y. Peng X, Wang Y, Zhang L, Cong X, Ding QW, Xiang RL, *Wu LL, *YuGY. Proteomic analysis of human transplanted submandibular gland in patients with epiphoraafter transplantation. J. Proteome Res. 2011;10 (5):2206–2215.[10] Chen ZY, Jie Y, Yu GY. Treatment of severe keratoconjunctivitis sicca by parotid ducttransposition after tympanic neurectomy in rabbits. Invest Ophthalmol Vis Sci.2011;52(9):6964-70.[11] Ding Q, Zhang Y, Cong X, Cai Z, Han J, Su Y, Wu LL, Yu GG. Confocal microscopy withdouble immunofluorescence staining reveals the functional transient receptor potentialvanilloid subtype 1 expressed in myoepithelial cells of human submandibular glands.Microsc Res Tech. 2012;75(5):555-60.[12] Ge XY, Yu GY, Fu J, Wu DC, Zhang XX, Wang YX, Li SL. An experimental study of themanagement of severe keratoconjunctivitis sicca with autologous reduced-sizedsubmandibular gland transplantation. Br J Oral Maxillofac Surg. 2011 Nov 1.[13] Cong X, Zhang Y, Shi L, Yang NY, Ding C, Li J, Ding QW, Su YC, Xiang RL, Wu LL, YuGY. Activation of transient receptor potential vanilloid subtype 1 increases expression andpermeability of tight junction in normal and hyposecretory submandibular gland. Lab Invest.2012;92(5):753-68.[14] Song B, Zhang L, Liu XJ, Ding C, Wu LL, Gan YH, Yu GY. Proteomic analysis of secretionfrom human transplanted submandibular gland replacing lacrimal gland with severekeratoconjunctivitis sicca. Biochim Biophys Acta. 2012;1824(4):550-60.[15] 俞光岩 . 提高自体颌下腺移植术的成功率 . 中华口腔医学杂志 , 2010;45:389-390.[16] 俞光岩 . 血管化自体颌下腺移植治疗重症角结膜干燥症指南 . 中华口腔医学杂志 ,2010;45:391-393.[17] 吴立玲 , 俞光岩 . 调控涎腺细胞分泌的受体及其信号转导的研究进展 . 口腔颌面外科杂志 ,- 24 -

2009;19(6):381-384.[18] 俞光岩 . 从颌下腺移植谈创新性思维北京大学学报 ( 医学版 ), 2009;41(3):268-270.会议报告 : 国际大会 10 分组 6 国内大会 8 分组 2培养人才 : 博士后 1 博士 13 硕士 3获奖 :专利 :2 项- 25 -

H04 生殖系统 / 围生医学 / 新生儿面上项目染色体短串联重复序列多态性在葡萄胎受精类型鉴别中的应用研究及其等位基因频率的分布和意义批准号 :30772321项目负责人 : 张小为所在单位 : 北京大学本研究通过病理切片激光显微切割捕获 (Laser capture microdesection, LCM) 分离葡萄胎滋养细胞进行微量 DNA 提取 , 继而用位于 15 条染色体上共 16 个位点短串联重复序列(STR) 等位基因多态性分析 , 成功鉴别了 200 例葡萄胎的遗传物质来源和受精类型。结果表明 : 病理学完全性葡萄胎 122 例 , 部分性葡萄胎 78 例 : 遗传物质均来自男方的遗传学完全性葡萄胎 109 例 (56 例单精子空卵受精葡萄胎 ,53 例双精子空卵受精葡萄胎 ); 遗传物质来自双亲的部分性葡萄胎 91 例 ; 统计结果证实了葡萄胎病理学类型与遗传学分类无关 ;可追踪的 126 例葡萄胎中 86 例为 " 遗传学完全性葡萄胎 ", 恶变 15 例 : 空卵单精子受精的 "纯合性 " 葡萄胎 56 例 , 恶变 11 例 ; 空卵双精子受精的 " 杂合性 " 葡萄胎 30 例 , 恶变 4 例 , 二者间恶变风险无差异 (P>0.05);DNA 来自双亲的单倍体卵子双精子受精的 " 遗传学部分性葡萄胎 "40 例 , 恶变 1 例 , 与遗传学完全性葡萄胎比较 , 恶变风险低 (P

男性不育症是影响人类健康及子孙繁衍的重大疾病 , 其发病率逐年增加。其主要致病原因之一是精原干细胞的再生与分化的异常 , 从而导致精子数量少 , 精子功能不全 , 或者无精子产生。但是详细的调控机制还不清楚。我们及其他实验室发现精原干细胞的再生受 GDNF 信号调控 , 而精原干细胞的分化受 stem cell factor/c-kit) 信号调控。利用体外精原干细胞体系研究 , 我们发现 PI3K/PTEN/AKT 信号传导在精原干细胞的增殖和分化中起关键作用。本项目的研究目标是建立 PTEN 敲除小鼠模型研究男性不育的信号传导调控机理。关键词 : 精原干细胞 ; 信号传导 ; 男性不育 ;PTEN学科代码 :H0424发表论著 :[1]Yu Z, Ji P, Cao J, Zhu S, Li Y, Zheng L, Chen X, Feng L. Dazl promotes germ cell differentiation from embryonic stem cells. J Mol Cell Biol. 2009;1(2):93-103.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :人类 Kenny-Caffey 综合症果蝇模型的建立及致病基因 TBCE 的功能解析批准号 :30871368项目负责人 : 金珊所在单位 : 湖北大学甲状旁腺功能减退 , 神经发育障碍及面部畸形综合症 (Hypoparathyroidism, mental retardation and facial dysmorphism,HRD) 是由于微管伴侣蛋白 E(TBCE) 突变引发的发育异常。小鼠 tbce 突变导致进行性的运动神经元功能失调。为了进一步解析 TBCE 的功能及 HRD 发病机理 , 我们以果蝇为模式系统 , 制备了果蝇 tbce(CG7861) 突变体、单克隆抗体及组织特异性高表达转基因果蝇。通过研究发现 :tbce 完全突变导致果蝇胚胎期致死 ; 在肌肉中特异性敲减或高表达可以导致微管网络的密度增加或受到破坏 ; 在神经系统中改变 TBCE 表达能明显影响神经肌肉突触结构的发育 ; 遗传学分析实验揭示了其与微管剪切蛋白 spastin 的作用是相反的。微管解聚药物诺可唑 (Nocodazole) 处理实验进一步证实它是一种促进微管聚合的蛋白。综上所述 ,tbce 在体内可以促进微管的聚合 , 是正常发育及神经肌肉突触发育和功能所必须的。我们的工作有助于从理论上解析微管在神经发育中的作用。上述研究成果发表于 Development,2009,136:1571-1581。关键词 : 果蝇 ;HRD;spastin; 分子伴侣 E(TBCE);CG7861; 微管伴侣学科代码 :H0419发表论著 :[1] 严镇钧 , 徐玲花 , 曾庆韬 , 金珊 . 双翅目昆虫与脊椎动物内含子丢失和获得的比较分析 .- 27 -

昆虫学报 , 2011; 53(1): 38-46.[2] 金珊 , 曾庆韬 . 稀有的黑檀体基因 (ebony)5’UTR 自发突变导致黑腹果蝇的黑条体突变 .昆虫学报 ,2010; 53(2): 125-130.[3] Shan Jin, Luyuan Pan, Zhihua Liu, Qifu Wang, Zhiheng Xu, Yong Q. Zhang. Drosophila Tubulin-specific chaperone E functions at neuromuscular synapses and is required for microtubule network formation. Development, 2009; 136: 1571-1581.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 4调控 Leydig 干细胞的基因、信号通路及体内分化的研究批准号 :30872569项目负责人 : 董强所在单位 : 四川大学Leydig 细胞是男性合成分泌雄激素的细胞 , 是男性体内睾酮的主要来源 , 其研究在男性发育、男性生殖生理及雄激素替代治疗领域具有重要意义。本研究着眼于人骨髓间充质干细胞向 Leydig 细胞诱导的研究和应用两大方向。在前期工作的基础上 , 本项目通过体外分离、培养人骨髓间充质干细胞 , 成功的建立了人骨髓源 MSCs 细胞系 , 体外诱导试验成功的证实 MSCs 可以分化成为 Leydig 细胞或产类固醇细胞并可以产生睾酮 , 使用流式细胞仪检测其特异抗体 3β-HSD, 并对其标志物进行 PCR 检测 , 后期利用 BALA/C 小鼠动物病理模型对人骨髓间充质干细胞体内向 Leydig 细胞体内定向分化诱导进行研究。上述研究的成果将对应用 Leydig 细胞在临床治疗疾病有重要的指导意义。关键词 :Leydig 干细胞 ; 分化 ; 调控学科代码 :H0426发表论著 :[1]Lei Y, Huang K, Gao C, Lau QC, Pan H, Xie K, Li J, Liu R, Zhang T, Xie N, Nai HS, Wu H, Dong Q, Zhao X, Nice EC, Huang C, Wei Y. Proteomics identification of ITGB3 as a key regulator in reactive oxygen species-induced migration and invasion of colorectal cancer cells. Mol Cell Proteomics. 2011;10(10):M110.005397.会议报告 : 国际大会 2 分组 1 国内大会 6 分组 4培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 5腺苷信号传导与阴茎异常勃起及纤维化机理的研究批准号 :30872570项目负责人 : 袁久洪- 28 -

所在单位 : 四川大学阴茎异常勃起是与性刺激无关或性刺激过后阴茎异常的持续勃起。因其可致阴茎勃起组织损伤从而导致勃起功能障碍 , 所以需紧急处理。因机制不清 , 故目前的治疗效果很差。我们的研究发现腺苷脱胺酶敲除 (ADA-/-) 小鼠表现为阴茎异常勃起。ADA-/- 在小鼠导致腺苷显著增高。腺苷是一种通过细胞膜腺苷受体发挥多种生理效应的核苷。腹腔注射 ADA 可致 ADA-/- 小鼠阴茎异常勃起消退。野生型小鼠腺苷阴茎海绵体注射可致阴茎海绵体压力升高。然而 , 这一作用在腺苷 A2b 受体 (A2bR) 敲除小鼠消失。ADA-/- 小鼠阴茎神经电刺激呈现明显的阴茎异常勃起表现。细胞分子生物学的研究也揭示腺苷通过 A2bR 促进平滑肌细胞松弛并和一氧化氮有协同作用。我们利用 ADA 注射很方便的控制 ADA-/- 小鼠体内的腺苷水平 , 帮助我们更好的理解腺苷在阴茎异常勃起中的作用。我们研制了动物负压助勃器 , 并申请了专利。并探索了负压助勃器治疗勃起功能障碍的分子机制。关键词 : 阴茎异常勃起 , 腺苷 , 信号传导 , 海绵体压力学科代码 :H0415发表论著 :[1]Yuan Jiuhong, Lin Haochen, Li Ping, Zhang Rongzheng, Luo Annie, Berardinelli Francesco, Dai Yutian, Wang Run. Molecular Mechanisms of Vacuum Therapy in Penile Rehabilitation: A Novel Animal. Study European Urology, 2010; 58(5): 773-780.[2]Yuan Jiuhong, Westney O. Lenaine, Ruan Ke-He, Wang Run. A New Strategy, SuperEnzyme Gene Therapy in Penile Rehabilitation. Journal of Sexual Medicine, 2009; 6: 328-333.[3] Feng Qin, Xiao-Ai Wu, Yao Tang, Qiang Huang, Zhang-Jin Zhang, Jiu-Hong Yuan.Meta-analysis of randomized controlled trials to assess the effectiveness and safety offree and easy Wanderer plus, a polyherbal preparation for depressive disorders. Journalof Psychiatric Research, 2011; 45(11): 1518-1524.[4] Qiang Dong, Shi Deng Run Wang, Jiuhong Yuan. In Vitro and In Vivo Animal Models in Priapism Research. Journal of Sexual Medicine, 2011; 8(2): 347-359.[5]Yuan, J., Hoang, A. N., Romero, C. A., Lin, H., Dai, Y.,Wang, R. Vacuum therapy inerectile dysfunction-science and clinical evidence. International Journal of ImpotenceResearch, 2010; 22(4): 211-219.[6]Yuan, Jiuhong, Westney, O. Lenaine, Wang, Run. Design and Application of a New Rat-Specific Vacuum Erectile Device for Penile Rehabilitation Research. Journal of Sexual Medicine, 2009; 6(12): 3247-3253.会议报告 : 国际大会 5 分组 5 国内大会 5 分组 5培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1获奖 :专利 ; 袁久洪 , 秦锋 . 一种动物负压助勃器 . 中国发明专利 ( 专利号 :201120023461.2, 证书号 : 第 1903442 号 , 授权公告日 :2011.8.24)- 29 -

脂肪组织来源的干细胞诱导分化为睾丸间质细胞的研究批准号 :30872571项目负责人 : 邓春华所在单位 : 中山大学随着社会老年化进程 , 影响中老年男性健康的中老年男子雄激素部分缺乏症 ( PADAM) 成为社会迫切需要解决的问题。目前治疗 PADAM 的雄激素替代疗法存在明显缺陷。我们在之前的实验研究中证实睾丸间质细胞移植是治疗 PADAM 的有效方法 , 但是睾丸间质细胞的有限来源限制了对其进行深入研究和临床应用。针对这一问题 , 本项目拟在前期工作的基础上 , 探讨将脂肪组织来源的干细胞 (ADSCs) 诱导分化为睾丸间质细胞。研究工作包括 : 分离培养 ADSCs; 分别进行体外和体内实验 , 诱导 ADSCs 分化为睾丸间质细胞 ; 并将其在 PADAM 动物模型上进行移植实验。以期揭示睾丸间质细胞的分化和分泌功能的机制 , 为 PADAM 的细胞移植治疗找到新方法和实验室依据。关键词 : 脂肪组织来源的干细胞 ; 睾丸间质细胞 ; 细胞移植 ; 中老年男子雄激素部分缺乏症学科代码 :H0424发表论著 :[1]Liu G, Sun X, Dai Y, Zheng F, Wang D, Huang Y, Bian J, Deng C. Chronic administration of sildenafil modified the impaired VEGF system and improved the erectilefunction in rats with diabetic erectile dysfunction. J Sex Med. 2010;7(12):3868-78.[2]Huang Y, Sun X, Liu G, Yao F, Zheng F, Dai Y, Tu X, Xie X, Deng L, Zhang D,Zhang Y, Bian J, Gao Y, Ye Y, Deng C, Zhang Y. Glycosylated serum protein mayimprove our ability to predict endothelial and erectile dysfunction in nonorganic patients. J Sex Med. 2011 Mar;8(3):840-50.[3]Sun XZ, Liu GH, Wang ZQ, Zheng FF, Bian J, Huang YP, Gao Y, Zhang YD, Deng CH. Over-expression of VEGF165 in the adipose tissue-derived stem cells via thelentiviral vector. Chin Med J (Engl). 2011;124(19):3093-7.[4] 高勇 , 孙祥宙 , 邓春华 , 刘贵华 , 黄燕平 , 廖勇彬 . 大鼠脂肪干细胞体外诱导为神经元样细胞的研究 . 中国男科学杂志 . 2009;23(02):4-8.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 6 硕士 1纤维鞘蛋白 FSCB 磷酸化在鼠精子获能和超活化中作用的研究批准号 :30872573项目负责人 : 李彦锋所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学- 30 -

FSCB 蛋白是申请者最近发现的特异性表达于鼠精子尾部纤维鞘表面的新蛋白。本研究是就该新蛋白的生物学特性和在精子获能过程中的作用进行深入探讨。结果进一步的研究已发现 FSCB 在精子获能过程中可被 PKA 磷酸化并发生酪氨酸磷酸化 , 磷酸化程度有明显的时间依赖性 , 且受 PKA 活性的影响。免疫荧光定位发现 FSCB 与 Phospho-(Ser/Thr)PKA 底物的定位分布有明显重叠 , 间接支持 FSCB 蛋白是 PKA 的磷酸化底物之一。精子运动特征检测发现 H-89 可通过抑制 PKA 活性减弱磷酸化而抑制精子运动功能 ,Db-cAMP 通过增强 PKA 活性促进磷酸化而促进精子的运动功能。通过钙超载和钙结合实验表明重组 FSCB 和 FSCB 片段均可与 Ca2+ 结合 , 免疫共沉淀、二维电泳以及 WB 分析表明 FSCB 与 CABYR 可相互偶联 , 共同结合。相关结果已完成了 SCI 论文撰写 , 目前一篇论文已经正式发表于 BMB Report, 另一篇论文 SCI 正处于审稿过程中。另外完成了 2 篇综述 ,3篇中文论著 , 也均在审稿中。关键词 : 精子 ; 获能 ; 超活化 ; 磷酸化 ; 纤维鞘蛋白学科代码 :H0424发表论著 :[1]Liu SL, Ni B, Wang XW, Huo WQ, Zhang J, Tian ZQ, Huang ZM, Tian Y, Tang J,Zheng YH, Jin FS, Li YF. FSCB phosphorylation in mouse spermatozoa capacitation. BMB Rep. 2011;44(8):541-6.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0RNA 激活技术治疗勃起功能障碍的实验研究批准号 :30872574项目负责人 : 刘继红所在单位 : 华中科技大学现已阐明阴茎勃起由 cGMP 浓度增高诱导 , 而 cGMP 在体内可被 5 型磷酸二脂酶 (PDE5) 降解。由于缺乏基因激活手段 , 以往勃起功能障碍 (ED) 的基因治疗研究均是通过相关技术 ( 如 RNAi) 抑制 PDE5 的活性从而减少 cGMP 降解或转入某些相关基因实现。RNA 激活 (RNAa) 是 2006 年发现的一种新的分子现象 , 并已被众多研究证实这一技术比 RNAi 具有更强的效应和持续时间。应用 RNAa 技术直接激活一氧化氮合酶 (NOS), 增加 NO 的供给 , 将能更强地增强阴茎勃起功能。而且研究发现定位于 17 号常染色体上的诱生型NOS(iNOS) 生成 NO 能持续相对较长时间 ( 几小时到几天 )。本研究用病毒载体将 iNOS的激活型 dsRNA 转染培养的阴茎海绵体平滑肌细胞 , 通过 western blot、RTPCR 筛选出有效的激活型 dsRNA, 然后转入 ED 鼠模型 , 并检测其勃起能力 , 进一步研究其机制。关键词 : 勃起功能障碍 ,RNA 激活 , 基因治疗学科代码 :H0415- 31 -

发表论著 :[1] 袁慧星 , 饶可 , 宋国颖 , 王涛 , 詹鹰 , 刘继红 . 小激活 RNA 介导的大鼠肝细胞株 BRL 中诱导型一氧化氮合酶上调表达的研究 . 中华实验外科杂志 , 2010; 27(12): 1915-1916.[2] 袁慧星 , 王涛 , 饶可 , 李明超 , 李路 , 詹鹰 , 刘继红 . 大鼠诱导型一氧化氮合酶短发夹环RNA 质粒的构建及鉴定 . 临床泌尿外科杂志 , 2010; 25(12): 942-944.[3] 袁慧星 , 王涛 , 饶可 , 李明超 , 李路 , 刘继红 , 叶章群 . 靶向大鼠诱导型一氧化氮合酶基因的 shRNA 重组腺病毒载体的构建及鉴定 . 中华实验外科杂志 , 2011; 28(1): 133-135.[4] Wang T, Wan Z H, Liu JH, Chen MY, Chen RB, Yang WM, Ye ZQ. Age-related changes in kallikreins-kinins system in rat corpus cavernosum International. Journal of Andrology, 2011; 34(1): 33-40.[5] Chen Ruibao,Wang, Tao, Rao, Ke, Yang, Jun, Zhang, Shilin, Wang, Shaogang, Liu, Jihong, Ye, Zhangqun .Up-regulation of VEGF by Small Activator RNA in Human Corpus Cavernosum Smooth Muscle Cells. Journal of Sexual Medicine, 2011; 8(10): 2773-2780.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2人精子表面电压依赖性阴离子通道的基础和临床研究批准号 :30872575项目负责人 : 王增军所在单位 : 南京医科大学本研究运用基因克隆和原核表达技术体外表达出 VDAC 重组蛋白 , 为研究 VDAC 与人类精子表面其他蛋白之间的相互作用提供了基础 ; 运用蛋白印迹法及免疫荧光法发现 VDAC 蛋白在人类睾丸生精过程中合成 , 以膜蛋白形式存在于成熟精子的鞭毛和颈部 , 系统阐述了 VDAC 蛋白在人类精子中的存在、表达和定位特点 , 为进一步的功能学研究提供了依据。将特异性的 VDAC 抗体与活力正常的成熟人类精子体外共孵育培养 , 运用流式细胞技术检测出精子胞浆中 Ca2+ 浓度降低 , 提示精子膜中的 VDAC 蛋白参与或介导了顶体反应中 Ca2+ 的跨膜转运和交换 , 初步探讨了 VDAC 在人类精子中的生物学功能。运用实时荧光定量 PCR 法检测不同活力人类精子中 VDAC 的信使核糖核酸 (mRNA) 的表达 , 发现活力低下精子中 VDAC2 的 mRNA 表达丰度明显比活力正常精子为高 , 而 VDAC1 和 VDAC3的 mRNA 表达丰度在不同活力精子中没有明显差异 , 揭示了 VDAC 基因转录和蛋白表达过程中的异常可能是某些伴有弱精子症的男性不育患者的病因之一 , 体现了对人类精子中 VDAC 进行基础研究的临床和实用价值。关键词 : 电压依赖性阴离子通道 ; 精子 ; 钙离子 ; 核糖核酸 ; 男性不育学科代码 :H0424发表论著 :[1]Liu B, Wang Z, Zhang W, Wang X.. Expression and localization of voltage-depende- 32 -

nt anion channels (VDAC) in human spermatozoa. Biochem Biophys Res Commun. 2009 ;378(3):366-70.[2]Liu B, Wang P, Wang Z, Jia Y, Niu X, Wang W, Zhang W. Analysis and difference of voltage-dependent anion channel mRNA in ejaculated spermatozoa from normozoospermic fertile donors and infertile patients with idiopathic asthenozoospermia. J AssistReprod Genet. 2010;27(12):719-24.[3]Liu B, Wang P, Wang Z, Zhang W. The use of anti-VDAC2 antibody for the combined assessment of human sperm acrosome integrity and ionophore A23187-induced acrosome reaction. PLoS One. 2011;6(2):e16985.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2勃起神经递质血管活性肠多肽的雄激素调控研究批准号 :30872576项目负责人 : 沈周俊所在单位 : 上海交通大学雄激素对正常阴茎勃起起关键作用。但临床发现 ,20%-45% 的去势病人勃起功能正常 , 表明人体可能存在一条在低雄激素水平时起主要作用的勃起信号通路。已知勃起神经递质血管活性肠多肽 (VIP) 在阴茎海绵体中表达不依赖雄激素。本课题进一步研究 VIP 调控勃起的作用与雄激素的关系并发现 :1 去势大鼠勃起功能下降 (0.360±0.105 vs 0.686±0.093, P

同种异体阴茎移植的动物实验研究批准号 :30872577项目负责人 : 胡卫列所在单位 : 广州军区广州总医院阴茎为男性的重要外生殖器官 , 主要具有排尿和性交双重功能。战伤、创伤、外伤以及某些疾病如阴茎癌均可造成阴茎完全或部分缺损 , 严重导致尿流改道和丧失性交功能 ,给患者精神和生活上造成巨大的创伤。因此阴茎缺损的修复日益受到患者和医生的高度重视 , 随着移植免疫学、组织配型技术、免疫抑制剂的进展 , 以及同种异体肢体移植的长期存活和自体阴茎再植高存活率等令人鼓舞的结果出现 , 为同种异体阴茎移植奠定了坚实的基础。由于身体其它组织不能替代阴茎独有的可勃起的海绵体组织 , 因此 , 同种异体阴茎移植有可能成为理想的治疗方法之一。本研究从动物实验出发 , 对同种异体阴茎移植从免疫、病理、生化、排尿和勃起等多方面进行系列研究 , 试图获得同种异体阴茎移植的长期存活和站立排尿 , 最终达到恢复性交功能。关键词 : 阴茎 ; 移植 ; 免疫学科代码 :H0428发表论著 :[1] 赵永斌 , 胡卫列 , 杨槐 , 张利朝 , 吕军 , 邓志雄 . 阴茎离断伤显微外科再植术 5 例 . 中国男科学杂志 . 2009;23(7):30-32.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0获奖 :[1] 奖励 : 胡卫列 . 同种异体阴茎移植的临床研究 . 广东省人民政府 , 2009 年广东省科学技术奖励 ( 二等奖 , 排名第 1, 奖励日期 :2009.7)批准号 :30872705项目负责人 : 袁正伟所在单位 : 中国医科大学干细胞移植在胚胎组织内的迁移、分化规律及其对隐性脊椎裂的治疗效果研究随着产前诊断技术的不断发展 , 越来越多的神经管畸形可以在产前早期诊断 , 但是目前尚无良好干预治疗方法。在前期研究发现先天性脊椎裂胎鼠的脊髓神经元存在明显发育异常的基础上 , 提出干细胞移植创建的新治疗思路。本课题成功建立胎仔外科、显微外科和显微注射相结合的干细胞移植技术 , 将 GFP 标记的 MSCs 分别移植到 16 天、17 天和 18天脊椎裂胎鼠的病变脊髓处 , 发现绿色荧光标记的干细胞可以在病变的脊髓内存活 , 并可分化为神经干细胞标志物、胶质细胞、神经元等不同神经细胞 ,EGF 和 FGF8 在干细胞迁移- 34 -

中起重要的作用。同时发现移植 MSCs 在局部脊髓组织内不仅自身表达神经营养因子 , 而且可以诱导周围组织细胞表达这些神经营养因子 , 凋亡细胞明显减少。利用逆向神经示踪方法发现移植的 MSCs 与椎旁肌肉建立了突触联系。关于先天性脊椎裂胚胎发生机制研究方面 , 发现先天性脊椎裂胎鼠腰骶段脊髓的神经上皮组织中细胞凋亡明显增加 , 细胞增殖明显减少。利用双向电泳和质谱方法发现 13 种新的与先天性脊椎裂发生相关的差异表达蛋白质 , 这些蛋白质参与细胞凋亡发生和内质网应激反应 , 这些新发现对神经管畸形发生机制的探索提供了新的线索。关键词 : 先天性脊椎裂 ; 间充质干细胞 ; 宫内细胞移植 ; 神经元学科代码 :H0426发表论著 :[1]Guan K, Li H, Fan Y, Wang W, Yuan Z. Defective development of sensory neuronsinnervating the levator ani muscle in fetal rats with anorectal malformation. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol. 2009;85(7):583-7.[2] Fan Y, Wang L, Zhou F, Zhang Y, Li H, Shan L, Yuan Z. Comparative proteomics of spinal cords of rat fetuses with spina bifida aperta. J Proteomics. 2011;75(2):668-76.[3]Wang LL, Fan Y, Zhou FH, Li H, Zhang Y, Miao JN, Gu H, Huang TC, Yuan ZW. Semaphorin 3A expression in the colon of Hirschsprung disease. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol. 2011;91(9):842-7.[4]Li H, Gao F, Ma L, Jiang J, Miao J, Jiang M, Fan Y, Wang L, Wu D, Liu B, Wang W, Lui VC, Yuan Z. Therapeutic potential of in utero mesenchymal stem cell (MSCs) transplantation in rat fetuses with spina bifida aperta. J Cell Mol Med. 2011 Oct 18. doi: 10.1111/j.1582-4934.2011.01470.x.[5]Shan L, Fan Y, Li H, Liu W, Gu H, Zhou F, Yuan Z. Proteomic analysis of amniotic fluid of pregnant rats with spina bifida aperta. J Proteomics. 2012 ;75(4):1181-9.[6]Wang LL, Zhang Y, Fan Y, Li H, Zhou FH, Miao JN, Gu H, Huang TC, Yuan ZW. SEMA3A rs7804122 polymorphism is associated with Hirschsprung disease in theNortheastern region of China. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol. 2012;94(2):91-5.[7] 顾卉 , 佟宇鑫 , 刘彤 , 李妍 , 李丹妮 , 袁正伟 . hLMO3 基因真核表达载体的构建及蛋白的表达和定位 . 解剖科学进展 . 2011;4:347-350.[8] 王莉莉 , 范洋 , 张一 , 周凤华 , 李慧 , 吴迪 , 苗佳宁 , 黄天楚 , 袁正伟 . 先天性巨结肠的SEMA3A 基因单核苷酸多态性分析 . 中华胃肠外科杂志 . 2011;14(6):469-470.[9] 顾卉 , 佟宇鑫 , 刘彤 , 袁正伟 . GST-LMO1 融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达 . 中国医科大学学报 . 2011;40(11):961-963.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 5 硕士 2批准号 :30872706DNA 甲基化在 DEHP 诱发隐睾过程中的调控及干预研究- 35 -

项目负责人 : 魏光辉所在单位 : 重庆医科大学目的 : 研究 DNA 甲基化修饰与 DEHP 诱发隐睾的相关性 , 为生物制药靶位选择及临床有效干预隐睾发生 , 提高我国人口素质 , 提供科学依据。方法 : 将 DEHP 在胎鼠性腺发育的关键时期作用于孕鼠和相应 Leydig 细胞 , 利用 MSAP 和 HPLC 法分别检测胎鼠睾丸组织和 Leydig 细胞基因组甲基化水平 ;MS-PCR 检测 INSL3 的基因甲基化程度 ;qPCR 检测 DNMTs 和 INSL3 表达水平。结果 : 正常对照组和玉米油组睾丸及睾丸引带发育正常 ,DEHP 组睾丸下降不足 , 睾丸引带发育不良。DEHP 实验组小鼠基因 DNA 甲基化的水平高于正常组小鼠基因 DNA 甲基化水平 ; 三种主要的 DNA 甲基化转移酶在 DEHP 实验组表达均较对照组高 ;DEHP 实验组睾丸组织 INSL3 的表达量较正常对照组和玉米油组低。结论 : 环境内分泌干扰物 DEHP 通过影响三种甲基化转移酶的表达而导致基因组 DNA甲基化水平升高和 INSL3 基因 CpG 异常甲基化 , 从而抑制睾丸下降过程中包括关键因子 (INSL3) 的表达 , 导致隐睾的发生。DNA 甲基化等表观遗传调控在隐睾的发生、发展中具有重要的作用 , 表观遗传修饰异常可能是 DEHP 诱发隐睾的分子机制之一关键词 : 隐睾 ;DEHP;DNA 甲基化 ; 表观遗传调控学科代码 :H0415发表论著 :[1] Wu S, Zhu J, Li Y, Lin T, Gan L, Yuan X, Xiong J, Liu X, Xu M, Zhao D, Ma C,Li X, Wei G. Dynamic Epigenetic Changes Involved in Testicular Toxicity Induced by Di-2-(Ethylhexyl) Phthalate in Mice. Basic Clin Pharmacol Toxicol, 2010; 106(2):118-123.[2] Wu S, Zhu J, Li Y, Lin T, Gan L, Yuan X, Xiong J, Liu X, Xu M, Zhao D, Ma C,Li X, Wei G. Dynamic Effect of Di-2-(ethylhexyl) phthalate on Testicular Toxicity:Epigenetic Changes and its Impacts on Gene Expression. Int J Toxicol, 2010; 29(2):193-200.[3] 吴盛德 , 李娅莎 , 朱静 , 甘立强 , 袁心刚 , 徐明灯 , 魏光辉 . DEHP 诱导的隐睾鼠胰岛素样因子 3 基因 CpG 岛甲基化状态研究 . 中华小儿外科杂志 . 2009; 30(11):782-784.[4] 吴盛德 , 朱静 , 李娅莎 , 甘立强 , 袁心刚 , 徐明灯 , 魏光辉 . 胰岛素样因子 3 在邻苯二甲酸二 (2- 乙基 ) 己酯诱导隐睾发生过程中的表达分析 . 第四军医大学学报 . 2009; 30(19):1868-1871.[5] 吴盛德 , 朱静 , 李娅莎 , 甘立强 , 袁心刚 , 徐明灯 , 魏光辉 . 邻苯二甲酸二 (2- 乙己基 ) 酯致小鼠睾丸基因组 DNA 甲基化水平变化分析 . 中华男科学杂志 . 2009; 15(10):876-881.[6] 吴盛德 , 朱静 , 李娅莎 , 甘立强 , 袁心刚 , 徐明灯 , 魏光辉 . 邻苯二甲酸二 (2- 乙基己基 )酯致胎鼠隐睾发生过程中胰岛素样因子 3 的表达分析 . 生殖与避孕 .2009;29(8):502-507.[7] 吴盛德 , 魏光辉 . 邻苯二甲酸酯与儿童健康 . 中国当代儿科杂志 . 2009; 11(11):949-952.[8] 吴盛德 , 魏光辉 , 朱静 , 李娅莎 , 甘立强 , 袁心刚 , 徐明灯 , 陈柏林 . 隐睾发生过程中 DNA 甲基化状态变化和甲基化转移酶表达的实验研究 . 临床小儿外科杂志 . 2010; 9(1):21-23.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 4 分组 4- 36 -

培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 4获奖 :[1 ] 奖励 : 儿童生殖发育畸形及生殖损伤的临床及基础研究 . 魏光辉 , 何大维 , 李旭良 , 林涛 , 龚以榜 , 宋晓峰 , 朱静 , 刘俊宏 , 刘星 , 张德迎 , 吴盛德 . 科技进步奖二等奖 ,2010-J-2-12-001.雌激素非基因组机制对子宫腺肌病平滑肌细胞钙通路调节的研究批准号 :30872744项目负责人 : 段华所在单位 : 首都医科大学子宫腺肌病 (ADS) 是严重危害育龄妇女健康的常见疾病。研究表明 , 子宫内膜 - 肌层交界区 (EMI) 平滑肌的异常收缩是腺肌病发病的病理生理基础 , 细胞内游离钙与子宫收缩功能密切相关。作为雌激素依赖性疾病 , 雌激素对钙通路的调节在腺肌病子宫收缩异常中的作用不清 , 成为制约对腺肌病发生发展机制研究的瓶颈。本课题提出 :" 雌激素通过由 α-雌激素受体 (ERα) 介导的非基因组机制对子宫腺肌病 EMI 平滑肌细胞内游离钙的调节 , 从而调控子宫的异常收缩 , 是子宫腺肌病发病及引起各种临床表现的关键环节 " 的论点。课题以临床切除的腺肌病子宫标本为研究对象 , 具体通过对 EMI 平滑肌细胞膜上 ERα 的检测、雌激素对 EMI 平滑肌细胞内游离钙调节发挥效应的细胞膜作用模式 , 以及对钙调节的作用环节等研究 , 初步探讨腺肌病子宫异常收缩的病理生理机制 , 为临床预防子宫腺肌病、探求保留子宫及生育功能的治疗方法提供新的研究思路。关键词 : 子宫腺肌病 ; 雌激素 ; 非基因组机制 ; 子宫内膜基层交界区 ; 细胞内游离钙学科代码 :H0406发表论著 :[1] 张颖 , 段华 . 子宫内膜 - 肌层交界区的生理功能与相关疾病 . 中华妇产科杂志 , 2009; 44(11):876-878.[2] 王珺 , 段华 .miRNA 在妇科恶性肿瘤发病机制中的研究进展 . 现代妇产科进展 , 2010; 19(11):62-64.[3] 王珺 , 段华 . 雌激素非基因组效应对细胞内钙离子调节的研究进展 . 中华妇产科杂志 , 2010; 45(9):15-17.[4] 王珺 , 张恒辉 . 段华雌激素受体 -alpha 在子宫腺肌病子宫内膜肌层交界区中的表达 . 中华医学杂志 , 2010; 90(27):14-17.[5] 王文莉 , 段华 . 子宫腺肌病 PGP9.5、NGF 的表达及其与痛经的关系 . 首都医科大学学报 ,2012; 33(1):68-72.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 5- 37 -

雌二醇对更年期大鼠内脏脂肪及慢性低度炎症作用的研究批准号 :30872745项目负责人 : 阮祥燕所在单位 : 首都医科大学旨在研究雌二醇对更年期大鼠内脏脂肪和慢性低度炎症的作用及机制。选取 90 只 5月龄大鼠 ( 青年组 ), 随机抽取 55 只行卵巢去势 ,15 只行假手术 , 另外 20 只做对照 ; 选取 70 只 15 月龄自然更年期大鼠 ( 更年期组 ), 通过阴道脱落细胞检查及血激素 (FSH、E2) 水平测定 , 确定更年期模型建立成功后 , 将青年期去势组及自然更年期组随机分为对照组及实验组。实验组进行连续雌激素灌胃给药 , 青年组、更年期对照组采用等量生理盐水灌胃 , 干预 12 周后对血 FSH、E2、GLU、ISN、TCH、TG、HDL、LDL、CRP、hs-CRP、IL-6、IL-10、内皮素 -1、MCP-1、TNF-α、瘦素、脂联素进行测定 , 免疫印迹法测定核因子 -κB(NF-κB)p65 基因蛋白表达 , 测量内脏脂肪湿重。对上述指标进行分析。结果 :1. 雌二醇能够降低更年期大鼠内脏脂肪 , 不增加更年期大鼠体重 2. 雌二醇可以升高更年期大鼠 HDL, 降低 LDL 水平 3. 雌二醇能够降低自然更年期大鼠胰岛素抵抗 4. 更年期大鼠内脏脂肪与慢性低度炎症状态密切相关 , 而补充雌二醇可以改善因内脏脂肪增加引起的慢性炎症状态。关键词 : 雌二醇 ; 更年期大鼠 ; 内脏脂肪 ; 脂肪因子 ; 慢性低度炎症 ;学科代码 :H0404发表论著 :[1] Ruan Xiangyan,Jin Jing, Hua Lin, Liu Yulan, Wang Juan, Liu Shunyu. The prevalenceof metabolic syndrome in Chinese postmenopausal women and the optimum body composition indices to predict it. Menopause, 2010; 17(30: 566-570[2] 陈静 , 阮祥燕 . 65 例育龄妇女卵巢储备功能下降的临床研究分析 . 医学综述 , 2011; 17(8):1253-1255.[3] 陈静 , 阮祥燕 . 卵巢早衰的研究进展 . 医学综述 , 2010; 16(18):2727-2729.[4] 杨树琳 , 阮祥燕 . 绝经妇女心血管疾病发病风险相关因素的研究进展 . 医学综述 , 2010;16(14):2159-2162.[5] 梁秀兰 , 阮祥燕 , 蒋辉 , 王迎 . SD 大鼠绝经模型建立的研究 . 医学综述 , 2010; 9:1414-1416.[6] 梁秀兰 , 阮祥燕 . 绝经妇女体脂改变与相关的慢性疾病 . 中国组织工程研究与临床康复 ,2009; 13(46):1-5.会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3子宫腺肌症子宫内膜生长极向与平滑肌离子通道关系的研究批准号 :30872747- 38 -

项目负责人 : 金力所在单位 : 中国医学科学院子宫腺肌症 ( 腺肌症 ) 为子宫内膜向子宫内肌层内的良性侵入 , 伴随着平滑肌增生。根据子宫内膜异位发生的在位内膜源泉理论 , 本研究从离子通道的改变探索腺肌症子宫平滑肌的离子通道改变与子宫内膜生长极向发生改变的相互关系。我们认为子宫腺肌症患者离子通道的改变 , 会导致子宫收缩异常 , 产生子宫平滑肌痉挛性收缩 , 如果子宫平滑肌收缩频率 / 节律的异常 , 反复发作即子宫长期挛缩 , 则会导致子宫螺旋动脉缺血 , 从而使子宫内膜呈长期慢性缺血 / 缺氧状态 , 内膜基底层损伤致使内膜基底层细胞生长极向发生异常 , 导致子宫腺肌症 . 该研究从离子通道角度探讨子宫腺肌症的发生机制 , 目前国内外尚无有关报道 , 该研究结果将有助于对该病的预防以及新的治疗药物的开发开辟新的思路 .关键词 : 子宫腺肌症 ; 离子通道 ; 子宫内膜生长极向学科代码 :H0406发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2ERs/PPARγ 交叉对话介导植物雌激素对骨形成作用的分子机制研究批准号 :30872756项目负责人 : 张绍芬所在单位 : 复旦大学异黄酮可防治绝经后骨质疏松症 , 但具体的作用机制未阐明。我们利用受体拮抗剂处理成骨细胞细胞系 hFOB 及 MC3T3-E1, 研究发现 , 大豆苷原可促进成骨细胞增殖、分化和矿化 , 其作用具有剂量依赖性的双相作用特点 , 低剂量时主要通过作用于 ERs 促进成骨细胞增殖和分化 , 对 PPARγ 的作用不明显 ; 高剂量时主要通过作用于 PPARγ 抑制成骨细胞增殖和分化 , 同时也可通过作用于 ERs 产生一定促进成骨细胞增殖的作用。结合去势大鼠模型的研究结果 , 提示 :ERs 和 PPARγ 之间存在此消彼涨的交叉对话关系 , 可能参予介导大豆苷原防治去势大鼠骨质疏松症的量效作用。此外 , 大豆苷原增加成骨细胞核受体共调节因子 SRC-1 蛋白水平 , 提高 SRC-1/NcoR 比值 , 该过程依赖 ERβ 参与。SRC-1 的增加和 SRC-1/NcoR 比值提高将有利于大豆苷原的雌激素样活性 , 并可能是其促进成骨细胞分化的机制之一。我们的研究提出植物雌激素对骨形成作用的核受体机制 , 为植物雌激素防治绝经后骨质疏松症的有效性提供进一步的依据 , 并为开发新型的防治药物提供新策略。关键词 : 大豆苷原 ; 骨形成 ; 成骨细胞 ; 雌激素受体 ; 过氧化物酶体增殖物激活受体 γ学科代码 :H0404发表论著 :[1] 邹世恩 , 张绍芬 , 张锐 , 张婧 . 雌激素受体和过氧化物酶增殖子激活受体 -γ 交叉对话对大- 39 -

豆苷原骨保护的作用 . 中华医学杂志 , 2009; 89(42):2972-2975[2] 王立芳 , 王金凤 , 金蔚芳 , 王洪复 , 张绍芬 , 高建军 . 大豆苷原对成骨细胞 MC3T3-E1 甾体激素受体辅激活因子 1 表达的调节作用及其机制 . 中西医结合学报 , 2011; 9(11):1248-1253[3] 包蕾 , 邹世恩 , 张绍芬 . 雌激素受体和过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 介导大豆苷原对骨形成的量效作用 . 中西医结合学报 , 2011; 9(2):165-172.[4] 李琦 , 张绍芬 , 张国福 , 邹世恩 , 曹远奎 , 许琳 . 绝经后早期妇女体脂分布与雄激素水平的相关性 . 中华妇产科杂志 , 2011; 46(5):372-373[5] 王立芳 , 徐小雅 , 周轶 , 王金凤 , 金蔚芳 , 王洪复 , 张绍芬 , 高建军 . 大豆苷原对成骨细胞ER 和 PPARγ 表达的调节作用及雌激素的影响 . 复旦学报 ( 医学版 ), 2012; 39(1):1-6.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2子宫内膜异位症自然史及复发起源的分子遗传学推断批准号 :30872759项目负责人 : 郭孙伟所在单位 : 复旦大学目的 : 探寻卵巢型子宫内膜异位症与卵巢子宫内膜样癌疾病之间的关联 , 探索子宫内膜异位症初发病灶及复发病灶之间的关联。方法 : 用亚硫酸氢盐测序法 (bisulfite sequencing PCR, BSP) 分别对卵巢型子宫内膜异位症患者的在位及异位病灶 , 卵巢子宫内膜样癌患者的的癌灶组织、癌周组织以及远离癌灶的异位内膜样组织 , 内异症患者的初发病灶 , 复发病灶等目的 DNA 区域进行甲基化程度检测 , 用聚类分析和基因进化树的方法对甲基化测序结果进行统计分析。结果 : 经过对甲基化数据的统计分析后 , 结果初步显示 , 部分卵巢型子宫内膜异位症病灶和部分卵巢子宫内膜样癌的病灶组织细胞享有共同的的基因起源 ,提示其发病可能来源于异位内膜。但是 , 由于测序结果较为不一 , 经过多次测序仍未得到完全一致的结果 , 所以可能还要进行验证。在意识到技术困难的同时 , 我们还对研究作了一些调整 , 在腺肌症关联的痛经及可能的药物干预 , 内异症复发的生物标记物识别 , 内异症及腺肌症表观遗传学等方面也做了研究 , 取得了一些很好的结果 , 也得到了国际同行的赞许。这些结果 , 对内异症病原学的认识 , 以及对腺肌症的治疗干预 , 有了更进一步的深入。关键词 : 子宫内膜异位症 , 卵巢癌 , 起源 , 表观遗传学 , 进化树学科代码 :H0406发表论著 :[1] Guo SW. Recurrence of endometriosis and its control. Human Reproduction Update, 2009; 15(4):441-461.- 40 -

[2] Guo SW, Olive DL, Bulun SE, D’Hooghe TM. A call for more transparency of registered clinical trials on endometriosis. Human Reproduction,2009; 24(6):1247-1254.[3] Liu XS, Liu MH, Hua KQ, Li B, Guo SW. Sexuality following laparoscopic peritoneal vaginoplasty in women with Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome. Journal of Minimally Invasive Gynecology, 2009; 16(6):720-729.[4] Nie JC, Liu XS, Guo SW. Immunoreactivity of Progesterone Receptor Isoform B (PR-B), Nuclear Factor-κB (NF-κB) and IκBα in Adenomyosis. Fertility and Sterility, 2009; 92(3):886-889.[5] Nie JC, Liu XS, Guo SW. Immunoreactivity of Oxytocin Receptor (OTR) and Transient Receptor Potential Vanilloid Type 1 (TRPV1) and Its Correlation with Dysmenorrhea in Adenomyosis. American Journal of Obstetrics and Gynecology, 2009; 202(4):346.e1-8.[6] Lu Y, Nie JC, Liu XS, Zheng Y, Guo SW. Tricostatin A, A Histone Deacetylase Inhibitor, Reduces Inflammation and Hyperalgesia in Experimentally Induced Endometriosis in Mice. Human Reproduction, 2010; 25(4):1014-1025.[7] Ma S, Liu XS, Geng J-G, Guo SW. Increased SLIT Immunoreactivity as A Biomarkerfor Recurrence in Endometrial Carcinoma. American Journal of Obstetrics and Gynecology, 2009; 202(1):68.e1-e11.[8] Shen F, Liu XS, Geng J-G, Guo SW. Increased immunoreactivity to SLIT/ROBO1 inovarian endometriomas and as a constituent biomarker for recurrence.American Journalof Pathology, 2009; 175(2):479-488[9] Guo SW. Epigenetics of endometriosis. Molecular Human Reproduction, 2009; 15(10):587-607.[10]Guo SW, Simsa P, Kyama CM, Mihályi A, Fülöp V, D’Hooghe TM. Reassessing theevidence for the link between dioxin and endometriosis: from molecular biology to clinical epidemiology. Molecular Human Reproduction, 2009; 15(10):609-624.[11]Lu Y, Nie JC, Liu XS, Guo SW. Reduced Expression and Concomitant Promoter Hypermethylation of HOXA10 in Endometrium from Women Wearing Intrauterine Devices(IUDs). Fertility and Sterility, 2009; 94(5):1583-1588.[12]Wu Y, Starzinski-Powitz A, Guo SW. Constitutive and TNFα-Stimulated Activation ofNuclear Factor κB (NF-κB) in Immortalized Endometriotic Cells and Their Suppression by Trichostatin A (TSA). Gynecol Obstet Invest, 2010; 70(1):23-33.[13]Liu XS, Yuan L, Guo SW. Valproic Acid as a Therapy for Adenomyosis: A Comparative Case Series. Reprod Sci, 2010; 17(10):904-912.[14]Nie J, Liu XS, Guo SW. Promoter Hypermethylation of Progesterone Receptor IsoformB (PR-B) in Adenomyosis and Its Rectification by a Histone Deacetylase Inhibitor and a Demethylation Agent Reprod Sci, 2010; 17(11):995-1005.[15]Zhao T, Liu XS, Zhen XC, Guo SW. Levo-Tetrahydropalmatine (l-THP) Retards theGrowth of Ectopic Endometrial Implants and Alleviates Generalized Hyperalgesia in Experimentally Induced Endometriosis in Rats. Reprod. Sci., 2010; 18(1):28-45.[16]Guo SW, Liu M, Shen F, Liu XS. Use of mifepristone to treat endometriosis: areview of clinical trials and trial-like studies conducted in China. Women’sHealth (Lond Engl), 2011; 7(1):51-70.- 41 -

[17]Nie J, Liu XS, Zheng, Y, Geng J, Guo SW. Increased Immunoreactivity to SLIT/ROBO1 and Its Correlation with Severity of Dysmenorrhea in Adenomyosis. Fertil Steril, 2011;95(3):1164-1167.[18]He W, Liu XS, Zheng, Y, Geng J, Guo SW. Generalized Hyperalgesia in Women withEndometriosis And Its Resolution Following a Successful Surgery. Reprod Sci.,2010;17(12):1099-1111.[19]Liu X, Nie J, Guo SW. Elevated immunoreactivity to tissue factor and its association with dysmenorrhea severity and the amount of menses in adenomyosis. Hum Reprod, 011; 26(2):337-345.[20]Lu Y, Sun Q, Zheng Y, Liu X, Geng JG, Guo SW. The role of nuclear factor-kappa-B p50 subunit in the development of endometriosis. Front Biosci (Elite Ed), 2011 3:591-603.会议报告 : 国际大会 5 分组 3 国内大会 5 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 9 硕士 7调节性 NK 细胞与妊娠免疫耐受机理批准号 :30872761项目负责人 : 林羿所在单位 : 上海交通大学自然杀伤性细胞 (NK 细胞 ) 是生理状态下妊娠早期子宫内淋巴细胞的优势亚群 , 妊娠中、晚期逐渐减少。NK 细胞缺陷的小鼠自发性流产率显著高于正常小鼠 , 提示子宫 NK细胞对于妊娠成功可能具有重要意义。近年研究注意到子宫调节性 NK 细胞十分重要 , 但是尚未发现其特征性标志分子 , 对其迁移规律和功能也所知甚少。本课题组近年在小鼠模型中已经发现存在 CD49b+CD25+Foxp3+ 的 NK 细胞亚群 , 并且缺少这种细胞的孕鼠妊娠失败率较高。本项目采用流式细胞术、磁珠亲和细胞分选术和荧光示踪等技术 , 系统地研究子宫 NK 细胞的细胞因子、趋化因子及其受体表达情况 , 研究 CD49b+CD25+Foxp3+ 细胞亚群的相对数量和迁移规律 , 分析其表达转化生长因子 -β 和白细胞介素 -10 等细胞因子的情况。我们发现过继转输这些细胞能预防 NK 细胞缺陷小鼠发生自发性流产 , 提示这些细胞在母 - 胎免疫耐受机制中可能发挥关键作用。在所发表的期刊文章中 , 我们对详细机理进行了阐述和讨论。关键词 : 动物模型 ; 免疫调节 ; 免疫耐受 ; 妊娠学科代码 :H0427发表论著 :[1]Wang W, Lin Y, Zeng S, Li DJ. Improvement of fertility with adoptive CD25+ natural killer cell transfer in subfertile non-obese diabetic mice. Reprod Biomed Online. 2009;18(1):95-103.[2]Lin Y, Wang W, Jin H, Zhong Y, Di J, Zeng S, Saito S. Comparison of murine thymic stromal lymphopoietin- and polyinosinic polycytidylic acid-mediated placental den- 42 -

dritic cell activation. J Reprod Immunol. 2009;79(2):119-28.[3]Lin Y, Wang H, Wang W, Zeng S, Zhong Y, Li DJ. Prevention of embryo loss in non-obese diabetic mice using adoptive ITGA2(+)ISG20(+) natural killer-cell transfer.Reproduction. 2009;137(6):943-55.[4]Lin Y, Ren L, Wang W, Di J, Zeng S, Saito S. Effect of TLR3 and TLR7 activation in uterine NK cells from non-obese diabetic (NOD) mice. J Reprod Immunol. 2009;82(1):12-23.[5]Li C, Wang W, Wang H, Zhong Y, Di J, Lin Y. Proteomic analysis of proteins differentially expressed in uterine lymphocytes obtained from wild-type and NOD mice. JCell Biochem. 2009;108(2):447-57.[6]Lin Y, Nakashima A, Shima T, Zhou X, Saito S. Toll-like receptor signaling in uterine natural killer cells--role in embryonic loss. J Reprod Immunol. 2009;83(1-2):95-100.[7]Sun Y, Wang W, Shan B, Di J, Chen L, Ren L, Li W, Li DJ, Lin Y. FTY720-induced conversion of conventional Foxp3- CD4+ T cells to Foxp3+ regulatory T cells inNOD mice. Am J Reprod Immunol. 2011;66(5):349-62.[8]Yin G, Li C, Shan B, Wang W, Chen H, Zhong Y, Di J, Lin Q, Lin Y. Insufficientperoxiredoxin-2 expression in uterine NK cells obtained from a murine model of abortion. J Cell Biochem. 2011;112(3):773-813.[9]Lin Y, Li C, Shan B, Wang W, Saito S, Xu J, Di J, Zhong Y, Li DJ. Reduced stathmin-1 expression in natural killer cells associated with spontaneous abortion. Am J Pathol. 2011;178(2):506-14.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 6获奖 :[1] 获奖 : 林其德 , 林羿 , 赵爱民 , 汪希鹏 , 邱丽华 , 刘芳荪 , 狄文 , 洪燕 , 张羽 , 殷广洁 . 免疫型复发性流产发病机制、诊断和治疗研究 . 国家人口和计划生育委员会 , 国家人口和计划生育优秀科技成果奖 ( 一等奖 , 奖励时间 :2011.6).LH/LHR 调控 “ 种植窗 ” 时期人子宫内膜对胚胎接受性的作用机理批准号 :30872762项目负责人 : 李洁所在单位 : 中山大学本项目已按申请计划书采用胶内荧光差异电泳技术 (DIGE) 为主的蛋白质组学技术完成人正常生育和反复种植失败妇女 " 种植窗 " 时期子宫内膜蛋白质表达谱 \ 建立数据库和蛋白质的功能聚类分析比较 , 并通过签定 \ 比较分析初步筛选出代表子宫内膜 " 种植窗 " 时期的标志物 StAR\Anninex IV 和反复种植失败妇女 6 个差异表达蛋白质 . 首次报道了月经周期和 “ 种植窗 ” 时期在体子宫内膜组织差异蛋白质 Anneix IV、STAR 和 TRAF3 的定位及定量表达与反复种植失败的关系。采用子宫内膜癌 R95-2 细胞系体外培养模型进行 hCG 干预实验代替 GnRH-a/-A 在体子宫内膜实验探讨 LH/hCG-R 高度饱和与过度抑制状态对潜在标志- 43 -

物表达的调控 , 首次提示 LH/HCG-R 直接参与子宫内膜局部与胚胎种植相关大分子物质表达的调控作用 ( 如 : 对 STAR 正向表达 )。丰富了正常生育与胚胎反复种植失败的病理生理知识 , 为临床选择治疗方向、药物和评估效果提供了强有力的实验依据。关键词 :LH/HCG-R, 子宫内膜 ,StAR, TRAF3, 蛋白质组学学科代码 :H0426发表论著 :[1] 于文娟 , 李洁 , 谭真 , 刘群 . 子宫内膜组织膜联蛋白 Ⅳ 在月经周期中的变化 . 中国实用妇科与产科杂志 . 2008;24(12):913-915.[2] 夏婷婷 , 李洁 , 徐慧灵 , 于文娟 , 王东 . 体外受精 - 胚胎移植中反复种植失败妇女血清催产素水平初步分析 . 中华临床医师杂志 ( 电子版 ). 2009;3(12):1953-1956.[3] 徐慧灵 , 李洁 , 欧建平 , 钟依平 . 生长激素在体外受精 - 胚胎移植卵巢反应不良患者中的应用 . 中华临床医师杂志 ( 电子版 ). 2009;3(11):33-40.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 4人类生精相关基因 SPATA12 的表达调控机制研究批准号 :30872763项目负责人 : 李丹所在单位 : 湖南大学根据研究计划 , 本项目从转录调控、基因组学、蛋白质相互作用、信号转导等不同的角度 , 深入、系统地研究了精子发生相关新基因 SPATA12 的功能。主要研究成果包括 :(1) 完成了 SPATA12 基因启动子核心序列的克隆与转录活性分析 , 确定了转录因子 AP-1对 SPATA12 启动子转录活性的调控 , 发现 AP-1 和 Smad3/4 结合位点的共同存在是 SPATA12 应答 TGF-β1 信号的重要因素。同时发现 SPATA12 的表达通过 HSF 因子受温度等环境因素的调控。(2) 从整体水平上探讨了 SPATA12 参与生殖细胞发育调控的基因 / 蛋白群和关键靶通路 , 并证实 SPATA12 可能通过 Wnt/β-catenin 途径发挥抑制因子作用。(3) 筛选确定了 2 个与 SPATA12 交互作用的蛋白 : 普遍性转录因子 TFIIA 和染色质重塑因子 CHD2,发现 SPATA12 可能在 DNA 损伤修复过程中起作用。(4) 提出并证实了精子发生相关基因SPATA12 可能也是一个抑癌基因的新设想。这些研究成果为丰富 SPATA12 基因的功能和阐明精子发生的分子机制做出了有意义的探索。关键词 :SPATA12, 精子发生 , 转录调控 ,DNA 损伤 , 抑癌基因学科代码 :H0419发表论著 :[1] Yang, Lifang, Zeng, Weizhong, Li, Dan, Zhou, Rui Inhibition of cell proliferation, migration and invasion by DNAzyme targeting MMP-9 in A549 cells. Oncology Reports,- 44 -

2009; 22(1): 121-126.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 4TRAIL/DR5 信号传导通路在低氧诱导精母细胞凋亡中的作用及机制批准号 :30872764项目负责人 : 廖卫公所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学高原低氧对多种动物和人的精子发生过程有抑制作用 , 造成精子生成减少 , 其机制还不清楚。我们从凋亡的角度探讨了生殖细胞凋亡在低氧抑制精子发生中的作用 , 探讨了 TRAIL/DR5 途径在低氧诱导精母细胞凋亡中的作用及其机制。通过研究我们发现低氧能诱导精母细胞凋亡 , 造成精母细胞数量减少 , 提示我们精母细胞凋亡是高原低氧抑制精子发生的重要机制。通过研究我们还发现低氧能促进 TRAIL/DR5 途径诱导 GC-2spd 细胞凋亡的作用 , 提示 TRAIL/DR5 途径在低氧诱导精母细胞凋亡中具有重要作用。这种作用与低氧抑制抗凋亡蛋白 c-Flip 表达和促进凋亡蛋白 TRAIL 表达有关。通过以上研究 , 我们揭示了低氧抑制精子发生的一个重要机制 , 通过作用于 TRAIL/DR5 途径诱导精母细胞凋亡。为进一步研究防治高原低氧对男性生殖功能的损伤的措施打下了基础。同时该研究还提示我们在临床上运用 TRAIL 治疗肿瘤时 , 应注意防范其对男性精子发生的损伤。关键词 : 低氧 ; 凋亡 ;TRAIL;DR5;c-Flip学科代码 :H0425发表论著 :[1]Liao W, Cai M, Chen J, Huang J, Liu F, Jiang C, Gao Y. Hypobaric hypoxia causesdeleterious effects on spermatogenesis in rats. Reproduction. 2010;139(6):1031-8.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0配子特异性膜蛋白 SP3111 在受精及早胚发育中的作用批准号 :30872765项目负责人 : 施惠娟所在单位 : 上海市计划生育科学研究所SP3111 是本实验室首次在精子细胞中发现的四次跨膜基因家族新成员 , 现又证实是雌雄性配子细胞特异表达的蛋白。体外授精实验发现抗 SP3111 抗体作用精子后 , 有 60% 以- 45 -

上的 1 细胞受精卵发生异常卵裂 , 正常受精率大大降低。本课题通过 RNA 干扰方法 , 结合精原干细胞转染 / 卵胞浆内单精子注射 (ICSI) 技术 , 建立了转 ssp311 基因 RNA 干扰小鼠模型 , 使得 F1 代 sp3111 基因的体内干扰效率达到 30% 以上 , 该转基因小鼠的体内 RNA 干扰效率能稳定传代至第 5 代。借助已建立的 sp3111 RNA 干扰小鼠模型 , 我们发现小鼠精子 sp3111 基因敲低表达 30% 后 , 雄性小鼠与野生雌性小鼠自然交配后的产仔率显著降低 ; 小鼠成熟精子的活动率虽然没有显著变化 , 但体外受精率却显著降低 , 动物模型得到的结果与抗 SP3111 抗体封闭精子后的体外受精率降低的结果完全一致。通过本项目研究 , 我们建立了转基因 RNA 干扰小鼠模型的技术平台 , 并且通过转 sp3111 基因 RNA 干扰动物模型 , 发现抑制 sp3111 基因的表达不会影响精子的发生和成熟 , 但会干扰精子与卵子的正常受精并导致胚胎异常卵裂。关键词 :SP3111, 转基因 RNA 干扰小鼠 , 体外受精学科代码 :H0417发表论著 :[1] Wei li Shi, Ting yan Shi, Zhe yu Chen, Ju fang Lin, Xiao feng Jia, Jian Wang, Huijuan Shi. Generation of sp3111 transgenic RNAi mice via permanent integration of small hairpin RNAs in repopulating spermatogonial cells in vivo. Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2010;42(2):116-121.[2] 宋丽伟 , 史庭燕 , 林菊芳 , 李翀 , 袁瑶 , 欧伶 , 施惠 . 低浓度 NaOH 对 ICSI 前小鼠精子DNA 完整性的影响 . 实验动物与比较医学 , 2010;30(2):82-86.[3] 贾晓峰、周密、林菊芳、时伟丽 , 张晓东 , 施惠娟 . 生殖细胞特异表达蛋白 sp3111 在受精及早期胚胎发育中的作用 . 中华男科学杂志 , 2010; 16(1):14-19.[4] 林菊芳 , 贾晓峰 , 宋丽伟 , 周宇荀 , 赵健 , 施惠娟 . 重组表达 SOD 对野生小鼠精子的冷冻保护作用 . 实验动物与比较医学 ,2010; 30(2):100-104.[5] Zhi hong Niu, Xue feng Huang, Xiao feng Jia, Jufen Zheng, Yao Yuan, Ting yan Shi,Hua Diao, He guo Yu, Fei Sun, Hui qing zhang, Hui juan Shi, Yun Feng. A spermviability test using SYBR-14/propidium iodide flow cytometry as a tool for rapid screening of primary ciliary dyskinesia patients and for choosing sperm sources for intracytoplasmic sperm injection. Fertility & Stertility, 2011; 95(1):389-92.[6] 华叶 , 贾晓峰 , 华敏敏 , 袁瑶 , 范立强 , 施惠娟 . sp3111 RNAi 转基因小鼠模型的评价以及 sp3111 下调表达对受精及早胚发育的影响 . 实验动物与比较医学 , 2011;31(2):83-86.[7] 王会 , 刘玉林 , 徐彦 , 王鹏 , 施惠娟 , 冯云 . 中国人群 AZFc 微缺失区域序列标签位点的探讨 . 中华男科学杂志 , 2011; 17(5):391-395.[8] Qing Wu, Guo wu Chen, Tao fei Yan, Hui Wang, Yu ling Liu, Zheng Li , Shi weiDuan, Fei Sun, Yun Feng, Hui juan Shi. Prevalent false positives of azoospermia factor a (AZFa) microdeletions contributed by single nucleotide polymorphism rs72609647in the sY84 screening of male infertility. Ascian Journal of Andrology, 2011; 13:877-880.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 6- 46 -

获奖 :[1] 专利 : 水凝胶型睾丸透皮给药贴剂 . 施惠娟 , 汪济荃 , 李元春 , 田孝才 , 蒋俶 , 郭卫红 , 袁瑶 , 王鹏 , 徐彦 . 实用新型专利 ZL 201120145095.8, 中国。NF-kB 信号通路在月经发生早期过程中作用机制的研究批准号 :30872766项目负责人 : 贺斌所在单位 : 国家人口计生委科学技术研究所月经是性激素调控周期中子宫内膜增殖分化后孕酮在周期末撤退而引发的。在孕酮撤退和金属基质蛋白酶作用下导致子宫内膜崩解脱落之间的级联反应通路远未明确。本项目以小鼠月经模型为基础 , 结合小鼠和人子宫内膜间质细胞原代培养 , 研究在活体水平月经发生初期各时间点 NF-κB 信号通路的关键信号转导分子在蛋白质水平表达定位变化和信号通路的状态 ; 在细胞水平和组织水平以早期事件成员趋化因子 / 细胞因子和 MMP 为靶标研究 NF-κB 信号转导通路及其网络活化途径 , 分析其在月经发生早期过程中的作用 , 并将早期事件和最终作用因子建立联系。主要研究结果显示孕酮撤退后早期 NF-κB 信号通路激活 , 参与直接调节 COX2 及其下游有关细胞因子 , 并直接参与调节对组织崩解有直接作用的 MMP9, 是月经发生过程中的重要调节通路。该项目研究揭示了 NFkB 信号通路及其下游分子在月经发生早期关键环节的分子机制及其网络的调控机制 , 可以充实月经出血机制网络信号通路 , 为月经机制的深入研究提供新的途径方法 , 使我们在月经机制的研究方面能有所领先和突破 , 为相关临床疾患的治疗提供理论基础和新的治疗思路。关键词 : 子宫 ; 核转录因子 -KappaB; 环氧合酶 -2; 金属基质蛋白酶 , 细胞因子学科代码 :H0404发表论著 :[1] Yong Guo, *Bin He, Xiangbo Xu, Jiedong Wang. Comprehensive analysis of leukocytes, vascularization and matrix metalloproteinases in human menstrual xenograft model.PLoS One,2011; 6(2):6840-6849.[2] 曹惠子 , 徐祥波 , 陈西华 , 王介东 , * 贺斌 . 利用假孕小鼠建立小鼠行经模型的研究 . 生殖医学杂志 , 2010; 19(1):35-39.[3] 高宇 , 贺斌 , 徐祥波 , 王介东 . 孕酮维持下的小鼠子宫蜕膜化内膜的变化 . 生殖医学杂志 ,2010; 19(3):245-249.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 3- 47 -

批准号 :30872767项目负责人 : 张松英所在单位 : 浙江大学S100P 在胚胎植入中的作用与分子机制研究本项目在前期实验发现钙结合蛋白 S100P 在人种植窗期子宫内膜特异性高表达的基础上 , 对 S100P 在胚胎植入中的作用及其分子机制展开研究。关于 S100P 的作用机制 , 通过转染 S100P SiRNA 干扰片段和 S100P 高表达载体调节不同容受状态子宫内膜上皮细胞 S100P 的表达 , 研究表明 S100P 表达量升高后可以促进子宫内膜上皮细胞在体外的增殖、迁徙、侵袭能力 , 且显著降低细胞的自然凋亡水平。S100P 升高后 , 细胞表面多配体受体 RAGE 的表达量明显升高 , 其下游信号通路 MAPK 途径的重要成员 ERK、JNK、P38 的磷酸化均增强 ; 此外 ,NF-KB 和 PI3K 磷酸化也显著增加。说明 MAPK、NF-KB 以及 PI3K-AKT途径等信号通路在 S100P 表达量升高后整体活化 , 是参与 S100P 作用重要的潜在信号通路 , 其中 S100P 与 RAGE 结合后的 PI3K-AKT 途径及 MAPK 途径的 JNK 磷酸化增强目前尚未见报道。关于 S100P 在母胎层面的功能研究 , 结果表明 S100P 不仅可以增强人子宫内膜上皮细胞对囊胚的黏附能力 , 同时对人滋养细胞的增殖与迁移也具有促进作用 , 提示 S100P 可能通过上述两个方面参与胚胎植入过程。关键词 :S100P; 胚胎植入 ; 种植窗学科代码 :H0417发表论著 :[1] Xiao Mei Tong, Xiao Na Lin, Tao Song, Liu Liu, Song ying Zhang. Calcium-bindingprotein S100P is highly expressed during the implantation window in human endometrium. Fertil Steril, 2010; 94(4): 1510-1518.[2] Zhou Feng, Lin Xiao na, Tong Xiao mei, Li Chao, Liu Liu, Jin Xiao ying, Zhu Haiyan, Zhang Song ying. A frozen-thawed embryo transfer program improves the embryoutilization rate. Chinese Medical Joural, 2009; 122(17): 1974-1978.[3] Hongfei Jiang, Hang Hu, Xiaomei Tong, Qiuhong Jiang, Haiyan Zhu, Songying Zhang Calcium binding protein S100P and cancer:mechanisms and clinical relevance. J Cancer Res Clin Oncol, 2012; 138(1): 1-9, DOI: 10.1007/s00432-011-1062-5.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 4环孢素 A 调控人滋养细胞生物学功能的信号转导机制批准号 :30872768项目负责人 : 李大金所在单位 : 复旦大学- 48 -

滋养细胞生长及侵袭性在胎盘形成中至关重要。滋养细胞增殖与侵入不足 , 蜕膜螺旋动脉形成不良是自然流产、子痫前期、胎儿宫内生长受限等疾患发生的主要原因。我们研究发现 , 环孢素 (CsA) 除对母体宿主具有选择性免疫抑制外 , 还对胚胎来源滋养细胞增殖与侵袭有升调节作用 ( 专利号 ZL02112422.1)。进一步应用特异性信号通路关键激酶 / 磷酸酶抑制剂或转录因子抑制剂及 RNAi 技术 , 研究 CsA 调控滋养细胞增殖、凋亡及侵袭能力信号通路及其下游转录因子的影响 ;Western blot 分析 ERK1/2 磷酸化水平以及核内 c-Jun、cfos、p65、p50表达 ;IONO+PMA 刺激 CsA 或 CsA 类似物作用下滋养细胞增殖与侵袭能力变化 ;JAR 细胞内转染 pNFAT-GFP, 荧光显微镜观察 NFAT 核浆分布 , 以解析 CsA 调控滋养细胞增殖与侵袭的细胞内信号转导途径以及转录调控机制 ; 为妊娠期滋养细胞功能障碍性疾患防治提供新策略。关键词 : 环孢素 ; 滋养细胞 ; 妊娠疾患学科代码 :H0420发表论著 :[1] Li MQ, Hou XF, Shao J, Tang CL, Li DJ. The DSC-expressed KAI1/CD82 controls the invasiveness of trophoblast cells via integrinβ1/MAPK/Erk1/2 signaling pathway inhuman first-trimester pregnancy. Biol Reprod, 2010; 82:968-979.[2] Zhao HB, Wang C, Li RX, Tang CL, Li MQ, Du MR, Hou XF, Li DJ. E-cadherin,as a negative regulator of invasive behavior of human trophoblast cells, is down-regulated by Cyclosporin A via epidermal growth factor/extracellular signal-regulated protein kinase signaling pathway. Biol Reprod, 2010; 83(3):370-376.[3] 李明清 , 杜美蓉 , 周雯慧 , 李大金 . 环孢素 A 对人母 - 胎界面 IL-10 和 IFN- 细胞因子格局的调节作用 . 现代免疫学 , 2011;31(2):121-125.[4] 侯晓帆 , 谢可鸣 , 李明清 , 李大金 . 环孢素 A 对人滋养细胞内膜 nm23-H1 表达的调控作用 . 中国病理生理杂志 , 2009; 25(3):493-496.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 3凋亡相关调控基因在早期胚胎发育中作用机制的研究批准号 :30872769项目负责人 : 李红所在单位 : 南方医科大学细胞凋亡是着床前胚胎细胞死亡的主要方式 , 也是导致胚胎发育停滞和 IVF-ET 失败的主要原因。细胞凋亡的机制十分复杂 , 至今仍未完全明确。目前研究认为 , 抗凋亡分子和促凋亡分子在调节胚胎发育和胚胎细胞凋亡方面起关键性作用 , 其相互间的平衡决定胚胎细胞的命运。其中 ,Bcl-2 家族和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 ( 半胱天冬酶 ,Caspase) 家族是早期胚胎中表达的两大主要细胞凋亡调控基因。抗凋亡人工干预胚胎措施可能成为促进早期胚胎发育、提高胚胎质量和 IVF 成功率的新途径。本课题拟以小鼠早期胚胎为- 49 -

研究对象 , 在体外胚胎培养基中加入 1- 磷酸鞘氨醇 (S1P)、Caspase 广谱抑制剂 (CAI) 和干细胞因子 (SCF), 分析上述抗凋亡因子对胚胎早期发育的影响 , 探讨其对 C2- 神经酰胺(CED) 或过氧化氢 (H2O2) 诱导胚胎细胞凋亡的抑制作用 , 并通过深入探讨 1- 磷酸鞘氨醇抑制 CED 在诱导小鼠早期胚胎细胞凋亡的可能机制 , 研究结果显示抗凋亡因子能够提高小鼠早期胚胎的质量 , 为将来建立一种有效稳定安全的多因素协同抗凋亡干预促胚胎发育方法并最终将其应用于人类辅助生殖技术上提供一定的理论和实验依据。关键词 : 细胞凋亡 ; 抗凋亡因子 ;1- 磷酸鞘氨醇 ;C2- 神经氨酸 ; 着床前胚胎学科代码 :H0417发表论著 :[1] 李红 , 曾卫森 , 罗琛 , 邢福祺 . Bax/Bak 在抑制人颗粒细胞凋亡中的作用 . 南方医科大学学报 , 2009; 12; 2367-2370.[2] Leining Chen, Song Quan, Hong Li, Cuihua Chen, Fuqi Xing, Yanhong Yu. A comparison of endometrial and subendometrial vascularity assessed by three-dimensional ultrasonography and power Doppler angiography between healthy fertile women and women with unexplained primary recurrent miscarriage. Fertility and Sterility, 2011; 95(3):1127-1129.[3] Yu Ming, Qiu Zhuolin, Li Hong, Zeng Weisen, Chen Leining, Li Qiuhua, Quan Song.Association between cell apoptosis and the quality of early mouse embryos. 南方医科大学学报 , 2011; 31(3);409-413.[4] 陈雷宁 , 李红 , 陈翠华 , 裘毓雯 , 陈思梅 , 罗琛 , 邱卓琳 , 邢福祺 , 全松 . 3-DU-PDA 评价不明原因习惯性流产围着床期子宫内膜血管化状态 . 中国实用妇科与产科杂志 , 2010; 26(10); 781-783.[5] 余敏 , 陈雷宁 , 李秋华 , 李红 , 全松 . 体重对个体化控制性超排卵下 ART 结局的影响 . 中国现代医学杂志 , 2010;20(05):753-758.[6] 李秋华 , 全松 , 陈雷宁 , 李红 , 高瑞花 , 倪郝 , 余敏 , 陈思梅 , 罗琛 . 160 例重复体外受精 -胚胎移植周期临床结局分析 . 南方医科大学学报 , 2010; 2:236-239.[7] 陈雷宁 , 李红 , 裘毓雯 , 陈翠华 , 罗琛 , 李秋华 , 胡茂兰 , 余敏 , 杨杰 , 邢福祺 , 陈思梅 ,陈士岭 , 陈薪 , 钟梅 , 全松 , 余艳红 . 优良胚胎移植后早期妊娠不同结局中 3DU-PDA 参数的比较 . 中国实用妇科与产科杂志 , 2009;10(06):781-783.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2microRNA-30a 和 microRNA-30e 调控 Bub1 基因影响小鼠早期胚胎发育的机制研究批准号 :30872770项目负责人 : 施琼所在单位 : 重庆医科大学- 50 -

胚胎细胞的正常分裂是胚胎发育过程中的关键环节。关卡蛋白 Bub1 表达下调可导致细胞分裂中染色体异常 , 进而影响细胞增殖和胚胎发育 , 但该过程中 Bub1 表达的调控机理尚不清楚。新近发现 microRNA(miRNA) 是真核细胞中一大类参与基因转录后调控的非编码小分子 RNA, 与胚胎发育、干细胞分化等有关。生物信息学分析 ,Bub1 可能是 miRNA-30a、30e、494、467a、467e、450a-3p、466a-3p 和 297b 的靶蛋白。前期实验证实 , 在自然流产胚胎中 Bub1 蛋白表达水平明显低于正常组织中 , 而其 mRNA 水平却无明显变化 ,提示有可能存在 miRNA 这种转录后调控机制。本课题成功证实了 ⑴Bub1 是 miR-450a-3p 的靶基因 ,(2) 体外试验 , 利用 miRNA 模拟体探讨 Bub1 蛋白对小鼠成纤维细胞增值、凋亡和周期的影响。⑵ 体内试验 , 受精卵微注射 miR-450a-3p 模拟体 , 通过下调 Bub1 表达 , 观察其对受精卵分裂和增殖的影响。本课题阐明了 miRNAs 可能在转录后水平参与了靶基因 Bub1 的调控 , 最终影响胚胎细胞分裂的机制 , 可为临床提高妊娠质量和防治胚胎发育异常导致的早期自然流产奠定基础。关键词 :microRNAs;Bub1; 胚胎发育 ; 细胞分裂学科代码 :H0417发表论著 :[1] Qiong Shi, Min Hu, Min Luo, Qiang Liu, Fengbing Jiang, Yan Zhang, SujiaWang, Chen Yan, and YaguangWeng. Reduced expression of Mad2 and Bub1 proteins is associated with spontaneous miscarriages. Mol. Hum. Reprod., 2011; 17 (1): 14-21.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 4BRG1/H2AX 调节精子 DNA 损伤受精后修复的机制研究批准号 :30872772项目负责人 : 李忠香所在单位 : 浙江省医学科学院成熟精子的 DNA 损伤必须依赖卵细胞来源的相关蛋白完成受精后修复 ,Brg1 蛋白参与体细胞 DNA 损伤修复 , 但是卵细胞来源的 Brg1 蛋白是否参与受精后精子 DNA 损伤修复还不清楚。本研究成功建立了小鼠精子 DNA 损伤的细胞外修复体系 , 并且发现经过该体系孵育后精子 DNA 损伤能完全修复 , 而去除修复体系中 Brg1 蛋白则阻碍精子 DNA 损伤修复 ; 此外 , 利用免疫荧光双标记和免疫共沉淀技术发现精子 DNA 损伤修复过程中 Brg1/H2AX 形成共定位和蛋白复合体。进一步研究还发现 , 抑制 ATM 活性能够影响 Brg1 在精子 DNA 损伤位点结合以及精子 DNA 损伤修复。上述研究结果表明 , 卵细胞来源 Brg1 可能参与精子 DNA 损伤的受精后修复 , 该修复过程依赖 ATM 酶的激活 , 并且依赖 Brg1/H2AX 复合体的形成。在本项目支持下 , 目前已经发表 SCI 论文 2 篇 , 正在撰写论文 1 篇 , 培养硕士研究生 1 名。关键词 : 精子 ;DNA 损伤 ;DNA 修复 ;H2AX;BRG1- 51 -

学科代码 :H0424发表论著 :[1]Yu J, Chen Z, Zhang T, Li Z, Ni Y, Li Z. Association of genetic variants in CFTRgene, IVS8 c.1210-12T[5_9] and c.1210-35_1210-12GT[8_12], with spermatogenetic failure: case-control study and meta-analysis. Mol Hum Reprod. 2011;17(9):594-603.[2]Yu J, Chen Z, Ni Y, Li Z. CFTR mutations in men with congenital bilateral absenceof the vas deferens (CBAVD): a systemic review and meta-analysis. Hum Reprod.2012;27(1):25-35.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1HtrA1 对妊娠期高血压疾病胎盘滋养细胞功能影响的研究批准号 :30872773项目负责人 : 苟文丽所在单位 : 西安交通大学妊娠期高血压疾病 ( 简称 : 妊高病 ) 居孕产妇死因第二位 , 迄今病因不清。既往研究发现本病与胎盘浅着床 , 滋养细胞侵袭能力下降相关 ; 己证实 HtrA1 基因参与调节滋养细胞侵袭能力 , 但具体机制尚不清楚。我们前期研究发现妊高病患者胎盘组织 HtrA1 高表达 ,且与病情严重程度正相关。推测 HtrA1 参与本病的发生、发展。在前期研究的基础上 , 本课题组应用基因重组技术及 SiRNA 技术构建 HtrA1 重组腺相关病毒载体 , 将其导入正常妊娠和妊高病患者胎盘滋养细胞 , 采用激光共聚焦技术、蛋白组学等方法 , 观察滋养细胞形态及功能变化 , 探讨 HtrA1 对妊高病及正常妊娠滋养细胞功能的调节作用及可能机制 ; 采用实时荧光定量 PCR、Western-blot 等方法检测 HtrA1 在正常妊娠与妊高病胎盘组织表达之差异 , 分析 HtrA1 与妊高病分类及预后的关系。首次将 HtrA1 引入妊高病发病机制研究 ,为病因学研究提供新的理论依据 ; 为治疗提供新靶点。关键词 : 妊娠期高血压疾病 ;HtrA1; 滋养细胞 ; 侵袭学科代码 :H0420发表论著 :[1] 宗璐 , 苟文丽 , 郭娜 . HtrA1 和 TGF-β1 在妊娠期高血压病患者胎盘中的表达 . 西安交通大学学报 ( 医学版 ),2011; 32(3): 355-360.[2] 李扬 , 苟文丽 . HtrA1 生物学功能及与早发型重度子痫前期的相关性 . 中国妇幼健康研究 ,2008; 2(19):102-104.[3] 郭娜 , 苟文丽 , 宗璐 . HtrA1 在妊娠期高血压病患者胎盘组织中的表达 . 中国妇幼健康研究 ,2008; 2(19):104-106.[4] 赵莉娜 , 宗璐 , 苟文丽 . HtrA1 与妊娠期高血压疾病 . 现代妇产妇产科进展 ,2010; 19(11):868-870.- 52 -

会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 5微电场对促进胎盘血管新生作用及滋养细胞功能的研究批准号 :30872774项目负责人 : 白怀所在单位 : 四川大学微电场能介导多种细胞定向运动 , 且能诱导血皮内皮细胞血管新生活性。我们推测微电场也能促进胎盘滋养细胞功能、且与血管新生活性的增加有关。本研究探讨了微电场促进滋养细胞定向迁移、内皮细胞对滋养细胞迁移 / 侵袭力的影响及相关的分子机制 , 以及微电场促进内皮细胞血管新生的机制。研究发现 , 微电场可诱导滋养细胞向正极定向迁移及增加其迁移速度、上调与细胞迁移相关分子 MMP-2 及磷酸化 FAK 的表达 , 抑制 FAK 活性则抑制滋养细胞在电场中的迁移活性 ; 电场刺激的内皮细胞培养上清 , 可促进缺氧环境滋养细胞的迁移 / 侵袭力及 MMP-2 和 FAK 的表达或活性 ; 微电场促进内皮细胞 VEGF 和 IL-8及其受体的表达 / 活化、以及胞内 MAPK 和 AKT 信号通路的活化。这些结果提示 : 微电场可促进滋养细胞的迁移 / 侵袭功能 , 其机制与 FAK 信号通路的活化及 MMP-2 表达增加有关 ; 微电场通过上调内皮细胞活性因子的表达可促进滋养细胞的迁移 / 侵袭功能 ; 微电场促进内皮细胞血管新生与表达增加的 VEGF 和 IL-8 及其受体相关信号通路的活化有关。本研究不仅对探讨微电场改善滋养细胞相关的胎盘功能具有理论意义 , 而且对应用微电场防治胎盘缺血性疾病有应用价值。关键词 : 微电场 ; 胎盘 ; 血管新生 ; 滋养细胞 ; 血管内皮细胞学科代码 :H0418发表论著 :[1] Huai Bai, John V. Forrester, Min Zhao. DC electric stimulation upregulates angiogenicfactors in endothelial cells through activation of VEGF receptors. Cytokine, 2011;55(1):110-115.[2] 罗薛峰 , 黄燚 , 范平 , 彭冰 , 刘瑞 , 白怀 . 体外培养滋养细胞受电场作用后迁移行为及形态的变化 . 四川大学学报 ( 医学版 ), 2010; 41(5); 771-774.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0微小 RNA-155 调控子痫前期胎盘血管形成的机制研究批准号 :30872775项目负责人 : 胡娅莉所在单位 : 南京大学- 53 -

胎盘血管发育不良是子痫前期 (PE) 重要病生理变化之一 , 本研究旨在探讨 miR-155,CYR61 在调控滋养细胞和子宫蜕膜自然杀伤细胞中的生物学作用 , 揭示炎症信号 - 转录后调控 - 细胞因子 - 细胞共同参与 PE 胎盘血管形成异常的分子途径。我们首次证实 :(1) 重度 PE病人胎盘中 miR-155 表达显著升高 , 伴随 CYR61mRNA 和蛋白水平显著下调 , 两者呈明显负相关 ;(2)miR-155 通过 CYR61 mRNA 的 3′UTR 抑制 CYR61 翻译 , 靶向下调 CYR61 表达 ;(3)CYR61 可以与人早孕期子宫蜕膜 dNK 细胞表面整合素 αvβ3 受体结合 , 激活 PI3K/Akt 信号途径促进 VEGF-C 分泌和胎盘血管形成 ;(4) 发现 PE 患者胎盘中核受体 Nur77 表达下降 ,Nur77 介导 CYR61 信号通路。(5)miR-155 显著抑制人早孕绒毛外滋养细胞株细胞迁移并促进合体化 , 与 syncytin1 和 CD81 分子相关。(6)LPS 介导的 AP1/NF-kB 炎症通路可上调 miR-155 的表达。(7) 利用自己构建的 sFlt-1 和和 sEng 病毒载体成功建立 PE样孕小鼠模型。关键词 : 子痫前期 ; 胎盘血管发育 ; 炎症通路 ; miR-155; CYR61学科代码 :H0418发表论著 :[1] Yanqing Zhang, Zhenyu Diao, Li Su, MD, Haixiang Sun, Ruotian Li, Hengmi Cui, Yali Hu. MicroRNA-155 contributes to preeclampsia by down-regulating CYR61. Am JObstet Gynecol,2010;202(5): 466.e1–466.e7.[2] Yimin Dai, Zhenyu Diao, Haixiang Sun, Ruotian Li, Zhihua Qiu, Yali Hu. MicroRNA-155 is involved in the remodelling of human-trophoblast-derived HTR-8/SVneo cells induced by lipopolysaccharides. Human Reproduction, 2011; 26 (7): 1882-1891.[3] Xindong Zhang, Lijun Ding, Zhenyu Diao, Guijun Yan, Haixiang Sun, Yali Hu. CYR61 modulates the vascular endothelial growth factor C expression of decidual NK cellsvia PI3K ⁄ AKT pathway. Am J Reprod Immunol, 2012; 67(3):216-223.[4] 苏莉 , 刁振宇 , 胡娅莉 , 张艳青 , 王志群富含半胱氨酸蛋白 61 多克隆抗体的制备及其在子痫前期胎盘检测中的作用现代生物医学进展杂志 , 2009 10:1816-1819.[5] 唐洁 , 胡娅莉 , 刁振宇 , 孙海翔 , 颜桂军 , 陈林君 , 张艳青 . 腺病毒介导的小鼠可溶性 endoglin 和可溶性血管内皮生长因子受体 -1 重组蛋白构建和功能初步鉴定 . 中华围产医学杂志 , 2009; 12(6): 56-67.[6] 王志群 , 苏莉 , 刁振宇 , 周建军 , 戴毅敏 , 张艳青 , 胡娅莉重度子痫前期和正常妊娠胎盘中微小 RNA -155 及富含半胱氨酸蛋白 61 的差异表达 . 中华围产医学杂志 , 2010; 5: 403-407.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 3批准号 :30872776项目负责人 : 邹丽Netrin-1 在胎盘血管形成中的分子机制研究所在单位 : 华中科技大学- 54 -

在妊娠过程中 , 胎盘血管承担着胎儿全部的血供需求 , 是母体与胎儿进行物质交换的唯一途径。胎盘血管的良好发育直接影响妊娠结局 , 其发育主要依赖于血管的延长及分支。血管和神经系统在解剖结构上常伴行到同一远隔靶位 , 并且在生长方式和功能上具有惊人的相似性 , 提示它们在发育过程中可能受到某些共同信号分子的调控。神经轴突导向因子 Netrin-1 不仅存在于神经系统 , 也在血管系统中表达。体外研究显示 Netrin-1 能参与新生血管的形成 , 并有促进和抑制双重作用 , 其作用因靶位受体而异。我们通过一系列的细胞和分子生物学技术研究发现 : 在体内唯一无神经分布而富含血管的胎盘组织中检测到 Netrin-1 及相关受体 UNC5B 和 neogenin 的存在 , 提示 Netrin-1 可能参与胎盘血管的生长发育。另外 , 我们通过分离人绒毛滋养细胞、脐静脉内皮细胞、胎盘微血管内皮细胞和内皮祖细胞 , 从体内和体外干扰 Netrin-1 及其相关受体 , 结果显示 Nertin-1 具有促进胎盘血管的生长发育的作用。我们的研究为探索胎盘血管发育开辟了新的途径 , 并为增加胎盘血供和治疗胎盘血管发育不良相关疾病提供了新的理论依据和基础。关键词 :Netrin-1; 胎盘 ; 血管发育 ; 神经因子学科代码 :H0418发表论著 :[1] Xie H., Zou L., Zhu J., Yang Y. Effects of netrin-1 and netrin-1 knockdown on human umbilical vein endothelial cells and angiogenesis of rat placenta. Placenta, 2011; 32(8): 546-553.[2] Qian-hua W, Shao-ping Z, Jian-wen Z, Yun Y, Li Z. Reduced expression of netrin-1 is associated with fetal growth restriction. Mol Cell Biochem, 2011; 350(1): 81-87.[3] Yang Y, Zou L, Wang Y, Xu KS, Zhang JX,, Zhang JH. Axon guidance cue Netrin-1 has dual function in angiogenesis. Cancer Biol Ther, 2007; 6(5): 743-748.[4] Wang F., Wang Y., Zhang L., Zou L. Gene modification with integrin-linked kinase improves function of endothelial progenitor cells in pre-eclampsia in vitro. Journal of Cellular Biochemistry, 2011; 112(11); 3103-3111.[5] Wang Q., Zhu J., Zou L., Yang Y. Role of axonal guidance factor netrin-1 in humanplacental vascular growth. Journal of Huazhong University of Science and Technology- Medical Science, 2011; 31(2): 246-250.[6] Zhong S., Zou L., Zhao Y., Hu B., Xie H. Effect of different concentrations of neogenin on proliferation, apoptosis and related proliferative factors in human trophoblasts. Journal of Huazhong University of Science and Technology - Medical Science, 2010; 30(4): 500-504.[7] Zou L., Zhong S., Zhao Y., Zhu J., Chen L. Evaluation of "j"-shaped uterine incision during caesarean section in patients with placenta previa: A retrospective study. Journal of Huazhong University of Science and Technology - Medical Science, 2010; 30(2): 212-216.[8] 谢涵 , 邹丽 , 朱剑文 , 杨昀 , 钟少平 , 王乾华 . 轴突导向因子 netrin-1 基因沉默对胎盘血管生成影响的体内外实验研 . 中华妇产科杂志 , 2011; 46(5):59-62.[9] 王乾华 , 朱剑文 , 钟少平 , 胡彬 , 王莹 , 邹丽 . Netrin-1 在 HeLa 细胞的表达及对 HeLa 细胞功能的影响 . 现代妇产科进展 , 2011; 1;:42-44.[10] 王乾华 , 朱剑文 , 钟少平 , 邹丽 . 轴突导向因子 -1 在血管生成模型中的作用研究 . 中国综合临床 , 2010;26(12):57-60.- 55 -

[11] 王乾华 , 朱剑文 , 钟少平 , 邹丽 . UNC5B 在人早孕胎盘微血管内皮细胞中的表达及意义中国妇幼保健 , 2010; 36: 5454-5456.[12] 胡彬 , 钟少平 , 邹丽 . Neogenin 诱导滋养细胞凋亡及其机制的探讨 . 华中科技大学学报( 医学版 ), 2010; 5: 628-631.[13] 钟少平 , 赵茵 , 胡彬 , 谢涵 , 王乾华 , 王莹 , 邹丽 . Neogenin 对人滋养细胞 RGMa、DAPK、Neogenin mRNA 表达及细胞凋亡的影响 . 现代妇产科进展 , 2010; 3: 185-188.[14] 邹丽 , 钟少平 , 赵茵 , 胡彬 , 谢涵 , 王乾华 , 王莹 . VEGF 在母胎界面的表达及血管新生在子痫前期发病中的作用研究 . 中国妇幼保健 , 2010; 2: 227-229.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 6 硕士 3TFPI-2 基因在子痫前期发病机制中的作用批准号 :30872777项目负责人 : 李笑天所在单位 : 复旦大学本项目从组织、细胞以及基因剔除动物模型三个层面研究 TFPI-2 在子痫前期发病机制中的作用。应用 ELISA 和免疫组化方法分析母儿血清和胎盘中 TFPI-2 的表达变化 , 发现子痫前期孕妇血清 TFPI-2 水平降低减少 , 胎盘表达增加 ; 采用转染技术调控滋养细胞株中TFPI-2 表达研究对滋养细胞生物学功能的影响 , 发现 TFPI-2 表达抑制滋养细胞增殖和侵袭能力 , 促进其凋亡 , 对分化能力无明显影响 ; 运用基因剔除方法成功建立条件性 TFPI-2 敲除小鼠 , 选用 iNOS 和 ApoE 敲除小鼠 , 发现 APOE 可能具有降低血压和蛋白尿的作用 ,iNOS 具有减少蛋白尿的作用 , 两者对滋养细胞形态维持有作用 , 对血脂无明显影响。本项目在临床水平发现 TFPI-2 在子痫前期中异常表达 , 在细胞水平分析 TFPI-2 对滋养细胞功能的调控 , 并从动物水平阐明 TFPI-2 在子痫前期发病机制中的作用。关键词 : 组织因子途径抑制物 -2; 子痫前期 ; 滋养细胞 ; 基因敲除学科代码 :H0420发表论著 :[1] Yu Xiong, Shu-Feng Zhou, Rong Zhou, Dan Yang, Zheng-Fang Xu, Yi-Ting, Lou, Qing-Sang Guo, Rong Hu, Ting Peng, Duan Ma, Xiao-Tian Li. Alternations of maternaland cord plasma hemostasis in preeclampsia before and after delivery. Hypertension in pregnancy, 2011; 30(3): 347-358.[2] Huan Liang, Duan Ma, Shu-Feng Zhou, Xiao-Tian Li. Knowledge and use of folic acid for birth defect prevention among women of childbearing age in Shanghai, China:A prospective cross-sectional study. Med Sci Monit, 2011; 17(12): 87-92.[3] Qiongjie Zhou, Yu Xiong, Yan Chen, Yingying Du, Jin Zhang, Jingui Mu, Qisang Guo, Huijun Wang, Duan Ma, Xiaotian Li. Effects of tissue factor pathway inhibitor-2 expression on biological behavior of BeWo and JEG-3 cell lines. Clinical and Applied- 56 -

Thrombosis/Hemostasis, 2011; 12: 1-8.[4] Xiong Yu, Zhou Qiongjie, Jiang Fanglin, Zhou Shufeng, Lou Yiting, Guo Qisang, Liang Wang, Kong Desheng, Ma Duan, Li Xiaotian. Changes of plasma and placental tissue factor pathway inhibitor -2 in women with preeclampsia and normal pregnancy.Thrombosis Research, 2010; 125(6): 317-322.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 6HIF-1 对缺氧缺血脑白质损伤未成熟新生大鼠 Olig-1 的调控和脑功能保护和修复的研究批准号 :30872778项目负责人 : 崔红所在单位 : 首都医科大学HIF1α 和 Olig1 cDNA 的制备及重组腺病毒载体 (Ad-HIF1α 和 Ad-Olig1) 的构建、扩增、纯化及测定 ; 在体大鼠脑白质损伤模型的建立 , 并进行 Ad-HIF1α 和 Ad-Olig1 基因腺病毒载体的脑室定位注射 ; 离体脑片培养氧糖剥夺模型及 Ad-HIF1α 和 Ad-Olig1 基因腺病毒载体转染 ; 各时间点、各组脑片培养 , 培养后的冰冻切片 , 利用免疫组化和原位杂交双标记技术进行染色分析脑片 , 并进行免疫组化的定量分析 ; 各个时间点的 Western blot 检测、实时定量 PCR 的检测 ; 各个时间点的电镜检测实验 ; 应用 EMSA 的方法证实 HIF1α 基因可以与 Olig1 蛋白相互结合 , 提示 Olig1 是 HIF1α 的下游基因 ; 探讨了 Olig1 对 Olig2 表达的影响 ; 探讨了缺氧新生大鼠脑组织中 Sox10 蛋白的表达 ; 探索了 miR-182 和 miR-200b-Fbxw11 和 Rac1 基因 -Wnt 信号通路在早产儿脑损伤中可能的作用。证实了当初的假设 : 缺氧缺血造成未成熟大鼠脑白质损伤时 , 缺氧缺血等因素诱导脑组织 HIF1 的表达上调 ,HIF1 再进一步诱导和调节 Olig1 的表达 , 并促进少突胶质细胞恢复和髓鞘修复功能。关键词 : 脑白质损伤 ; 缺氧诱导因子 -1; 少突胶质细胞系基因 -1; 脑片培养 ; 早产儿学科代码 :H0422发表论著 :[1]Yang LJ, Cui H, Yang AJ, Jiang WX. oligodendrocyte transcription factor 1 overexpression promotes oligodendrocyte transcription factor 2 expression in the brain of neonatal rats exposed to hypoxia. Neural Regeneration Res. 2011; 6(34):2713-2717.[2]Cui H, Yang JL, Huang DZ, Zhang WD, Han WJ, Yao YQ, Jiang WX. Detection ofOlig-1 Using Double Staining of In Situ Hybridization and Immunohistochemistry in Oxygen Glucose Deprived Organotypic Rat Brain Slices. Neural Regeneration Res.2010; 5(21):1639-1643.[3] 崔红 , 郑杨 , 杨丽君 , 杨丽娟 , 韩伟娟 . 缺氧缺血性脑损伤新生儿血清硫化氢动态变化的研究 . 中国新生儿科杂志 . 2011; 26(5):331-332.[4] 杨爱君 , 杨丽君 , 崔红 , 蒋文星 , 梁元晶 . 缺氧新生大鼠脑组织中 S0X10 蛋白的表达 .- 57 -

实用儿科临床杂志 . 2011;26(12):908-910.[5] 杨丽君 , 崔红 , 姚艳青 , 蒋文星 . 大鼠脑低氧处理后的髓鞘变化 . 首都医科大学学报 . 2010;31(6):756-759.[6] 杨丽君 , 崔红 , 杨爱君 , 黄德庄 , 崔雁 , 魏田力 . 大鼠全脑脑片培养及缺氧缺糖模型的建立 . 实验动物与比较医学 . 2009;29(5):283-285.[7] 杨丽君 , 韩伟娟 , 崔红 , 黄德庄 . 原位杂交和免疫组化双标记技术在大鼠全脑脑片培养中的应用 . 首都医科大学学报 . 2009;30(6):817-820.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 10准种异质性与 CD209、CD209L 多态性在 HBV 宫内感染中的作用及机制研究批准号 :30872780项目负责人 : 李俊男所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学HBV 宫内感染是目前形成慢性 HBV 感染的主要途径和原因 , 宫内感染机制仍未阐明。本项目组在上一个基金 (30400479) 研究中发现 CD209 及 CD209L 与 HBV 宫内感染有关 ,CD209L 可能是胎盘上 HBV 的一个新受体。结合二者的基因多态性与 HIV 感染易感性有关以及 HBV 的准种异质性特征 , 推测 HBV 准种异质性与 CD209 及 CD209L 的基因多态性在宫内感染中起作用。我们拟用 CSGE 检测孕妇、婴儿不同时点的 HBV 基因组全序列准种的异质性。采用多重 PCR 和巢式 PCR 扩增 - 测序检测两个候选基因的 SNP, 进一步在核心家系中进行 TDT 测试 , 以确定遗传标记位点是否与疾病位点连锁 ; 另一方面对阳性关联位点两侧基因组 DNA 区域进行 LD 作图 , 以确定关联的染色体区域。将 HBV 准种异质性与遗传易感性结合起来 , 探讨其在宫内感染中的作用及机制 , 为 HBV 宫内感染的防治提供新的思路 , 而且可能为宫内干预提供效的新靶标。关键词 : 宫内感染 ; 准种 ; 异质性 ;CD209;CD209L学科代码 :H0419发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1高氧致肺损伤早产鼠肺泡 Ⅱ 型上皮细胞 AQP1 及 ENaC 的转运机制研究批准号 :30872781- 58 -

项目负责人 : 富建华所在单位 : 中国医科大学为研究经肺上皮钠水转运在高氧肺损伤早期肺水肿阶段的作用及其机制 , 本项目在建立高氧致肺损伤模型基础上 , 分别以原代培养的肺泡 Ⅱ 型上皮细胞 (ATⅡ) 及 A549 细胞株为研究对象 , 应用流式细胞术、RNA 干扰、Real-time PCR、Western-blot、全细胞膜片钳等分子生物学检测技术 , 发现随高氧暴露时间的延长 , 水通道蛋白 -1(AQP1) 基因及蛋白的表达水平逐渐下降 , 采用 siRNA 转染技术沉默 AQP1 基因 , 证实 AQP1 是细胞内外水转运的重要蛋白 , 但暴露于高氧后 , 与空气组比较 ,A549 细胞体积及细胞渗透性水通透并没有差异 , 表明 AQP1 并不是导致水转运障碍的唯一机制 ; 同样在高氧致 CLD 早期的肺水肿阶段 , 钠通道蛋白 (ENaC) 的 α、β- 及 γ 亚基基因及蛋白 , 特别是 β- 及 γ 蛋白 , 仅在高氧暴露初期表达稍降低 , 继之显著增加 , 进一步应用全细胞膜片钳记录全细胞基础钠电流 , 发现不论是 amiloride 敏感性钠电流 , 还是非敏感钠电流均增加。上述研究表明 , 在高氧肺水肿的阶段 , 并没有明显的钠水主动转运障碍 , 特别钠通道的转运功能 , 不但没有减少 , 反而代偿性的增强 , 提示经肺上皮的钠水主动转运障碍并非高氧肺水肿关键机制。关键词 : 肺上皮细胞 ; 主动转运 ; 水通道蛋白 ; 钠通道蛋白 ; 高氧学科代码 :H0422发表论著 :[1] 张慧 , 富建华 , 薛辛东 . 组蛋白 H2AX 在高氧致肺损伤新生大鼠肺组织的表达 . 解剖科学进展 . 2011;3:211-214+218.[2] 富建华 , 杨海萍 , 潘丽 , 薛辛东 , 高红 .TGF-β1 影响肺成纤维细胞结缔组织生长因子基因表达的研究 . 中国当代儿科杂志 . 2011;1:36-39.[3] 孙艳丽 , 富建华 , 薛辛东 , 于晓岩 . 高体积分数氧致慢性肺疾病新生鼠肺组织骨形态发生蛋白 -7 的动态表达及意义 . 实用儿科临床杂志 .2010;24:1884-1886.[4] 张秋月 , 富建华 , 薛辛东 . 新生鼠肺泡 Ⅱ 型上皮细胞分离培养与鉴定 . 中国新生儿科杂志 . 2010;6:339-341.[5] 于晓岩 , 孙艳丽 , 胡瑜 , 富建华 . 高氧诱导新生鼠肺纤维化中 CDK2 及 P27 的表达和意义 . 中国医科大学学报 . 2010;10:798-802, 2010/[6] 岳晓红 , 富建华 , 薛辛东 . 高氧致慢性肺疾病早产大鼠 P16 基因启动子区甲基化 . 中华围产医学杂志 . 2011;14(8):463-469.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 2应用 aCGH 技术进行胎儿畸形产前遗传学诊断的研究批准号 :30872782项目负责人 : 许争峰所在单位 : 南京医科大学- 59 -

胎儿畸形成因复杂 , 染色体异常为主要原因之一。常用的产前遗传学诊断技术如染色体分析、FISH、多重荧光定量 PCR 等 , 或费时费力、分辨率低 , 或受到所用探针或所选择位点的局限。近年发展的 aCGH 技术具有全基因组、高分辨率、快速等优势 , 但能否用于临床实践尚需探索。研究发现 :1)Array 技术无需进行细胞培养 , 对标本 DNA 直接检测 ,因而适用于各种类型标本检测 ;2) 检测过程只需三天 , 具有快速检测的优点 ;3) 具有全基因组高分辨率扫描的优点 , 且分辨率高达 100k, 并且明显提高了亚显微结构的染色体异常 ;4) 对额外标记染色体、衍生染色体、异倍体、多倍体核型及其嵌合型的检测 , 准确率100%;5) 可发现常规染色体核型分析不能发现的基因组微缺失和微重复等 , 异常发现率增加 13.95%;6) 对明确畸形的病因和探讨发病机理极有帮助。这些结果为开展 Array 的临床实践提供了有价值的理论与实验基础 , 为遗传咨询和优生提供了信息。关键词 : 微阵列 - 比较基因组杂交 ; 基因芯片 ; 胎儿畸形 ; 产前诊断学科代码 :H0419发表论著 :[1] Hu, Ping, Ji, Xiuqing, Yang, Chi, Zhang, Jingjing, Lin, Ying, Cheng, Jian, Ma, Dingyuan, Cao, Li, Yi, Long, Xu, Zhengfeng. 22q11.2 microduplication in a family with recurrent fetal congenital heart disease. European Journal of Medical Genetics, 2011; 54(4): 433-436.[2] 胡平 , 王艳 , 季修庆 , 林颖 , 李璃 , 周小燕 , 成建 , 马定远 , 曹荔 , 许争峰 . 微阵列比较基因组杂交技术检测先天性心脏畸形胎儿的隐藏基因组拷贝数变异 . 中华医学遗传学杂志 ,2011; 28(2): 133-136.[3] 马定远 , 胡平 , 张菁菁 , 易龙 , 季修庆 , 杨驰 , 成建 , 李璃 , 林颖 , 许争峰 . 应胎多重连接依赖探针扩增技术快速检测胎儿染色体非整倍体异常 . 中华医学遗传学杂志 , 2011; 28(5):543-547.[4] 王艳 , 胡平 , 季修庆 , 林颖 , 李璃 , 张菁菁 , 周小燕 , 成建 , 马定远 , 曹荔 , 许争峰 . 一例 1q25.1-q31.3 缺失智力低下患儿的分子细胞遗传学诊断 . 临床检验杂志 , 2011; 29(3):237-238.[5] 林颖 , 胡平 , 季修庆 , 孙瑞红 , 周小燕 , 孟露露 , 王艳 , 罗春玉 , 蒋涛 , 许争峰 . 22q 11.2微重复伴先天性心脏缺损的产前分子遗传学诊断 . 临床检验杂志 , 2011; 29(2):103-105.[6] Jing Xu, Zhibin Hu, ZhengFeng Xu, Haiyong Gu, Long Yi, Hailong Cao, Jiaping Chen, Tian Tian, Jie Liang, Ying Lin, Wanshan Qiu, Hongxia Ma, Hongbing Shen, Yijiang Chen. Functional variant in microRNA-196a2 contributes to the susceptibility of congenital heart disease in a Chinese population. Human Mutation, 2009; 30(8): 1231-1236.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 4 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 4批准号 :30872801一氧化氮与高原新生儿低氧适应机制的研究- 60 -

项目负责人 : 孙波所在单位 : 复旦大学1. 研究高原 ( 拉萨 )、半高原 ( 昆明 )、平原 ( 淮安 )( 氧浓度依次 14%、18%、21%)新生儿生后一周内生理及呼出气一氧化氮 (FeNO) 变化规律。发现 :1) 拉萨新生儿脉搏氧饱和度 (SpO2) 显著降低、FeNO 显著增高 ;2) 拉萨藏族新生儿经皮氧饱和度 (TcpO2)、FeNO 明显高于拉萨出生汉族新生儿 , 随日龄增加 TcpO2 下降、FeNO 上升 ;3) 早产儿生后早期 TcpO2 高于足月儿 , 随日龄增加 TcpO2 呈下降趋势 , 足月儿则呈上升趋势 ; 两组新生儿 FeNO 呈相同变化趋势。提示 NO 对新生儿低氧适应有重要作用 , 为临床吸入一氧化氮(iNO) 治疗提供理论支持。2. 对低氧性呼吸衰竭 (HRF) 机械通气新生儿研究发现 , 机械通气早期 HRF 患儿 FeNO 高于正常新生儿 ,SpO2/FiO2 可代替 PaO2/FiO2 反映患儿氧合功能 , 随氧合改善患儿 FeNO 水平接近于同日龄正常新生儿。3. 比较不同海拔地区新生儿显示 , 拉萨较昆明、淮安新生儿脐血清总一氧化氮合酶 (NOS) 活性明显增高 , 红细胞亚硝基血红蛋白 (SNOHb) 降低 , 提示循环 NO 与新生儿低氧适应相关。4. 拉萨新生儿低氧诱导因子 -1α(HIF- 1α) 表达水平降低。关键词 : 一氧化氮 ; 高原 ; 低氧 ; 新生儿学科代码 :H0422发表论著 :[1]Wang YF, Liu CQ, Gao XR, Yang CY, Shan RB, Zhuang DY, Chen DM, Ni LM,Wang H, Xia SW, Chen C, Sun B. Effects of inhaled nitric oxide in neonatal hypoxemic respiratory failure from a multicenter controlled trial. Chin Med J (Engl). 2011;124(8):1156-63.[2]Li-juan Liu, Xi-rong Gao, Pan-pan Wu, Li-ling Qian, Chao Chen, Bo Sun. Exhaled nitric oxide in neonates with or without hypoxemic respiratory failure. World J Emergency Med.2011;2(3):195-200.[3] 刘丽娟 , 高喜荣 , 吴盼盼 , 钱莉玲 , 陈超 , 孙波 . 低氧性呼吸衰竭新生儿呼出气一氧化氮的测定 . 中华急诊医学杂志 . 2011;20(8):856-860.会议报告 : 国际大会 4 分组 1 国内大会 16 分组 8培养人才 : 博士后 0 博士 9 硕士 3- 61 -

H04 生殖系统 / 围生医学 / 新生儿青年科学基金项目糖尿病性勃起功能障碍阴茎海绵体线粒体氧化应激损伤与保护机制研究批准号 :30801143项目负责人 : 陈赟所在单位 : 南京大学方法 : 大剂量 STZ 腹腔注射建立糖尿病大鼠模型 , 随机分为糖尿病组和多个抗氧化治疗组并设正常对照组 ; 治疗 8 周后用电刺激各组大鼠勃起神经测定海绵体内压评价勃起功能 ; 测定阴茎海绵体组织中超氧化物氧化酶 (SOD) 活性 , 丙二醛 (MDA) 含量 ;AGEs含量 ; 观察阴茎海绵体线粒体结构变化 ; 检测海绵体平滑肌细胞和内皮细胞 ; 检测线粒体膜电位。结果 : 糖尿病组大鼠较正常对照组 , 最大海绵体内压 (ICP) 显著降低 ,MDA 含量显著增高 ,SOD 活性显著下降 ,AGEs 显著增多 ; 与糖尿病组比较 , 抗氧化剂可显著提高 ICP, 显著提高 SOD 活性 , 降低其 MDA、AGEs 含量。糖尿组大鼠阴茎组织中胶原纤维含量明显减少 , 排列紊乱 , 平滑肌减少变薄 , 出现断裂 , 内皮细胞和平滑肌细胞减少 ; 并且组织中细胞线粒体数目减少 , 出现病理性退变并伴随线粒体膜电位降低 , 而治疗组大鼠阴茎组织结构可见明显改善 , 线粒体膜电位升高。结论 : 糖尿病大鼠阴茎海绵体存在氧化应激损伤 , 抗氧化剂通过保护阴茎海绵体线粒体的途径减轻氧化应激 , 改善勃起组织结构 , 从而提高勃起功能 ; 氧化应激是 DED 发病机制的一个重要补充 , 抗氧化剂的使用为 DED 的治疗提供了一个新思路。关键词 : 氧化应激 ; 线粒体 ; 左旋精氨酸 ; 勃起功能障碍 ; 糖尿病学科代码 :H0415发表论著 :[1] Yun Chen, Shouxi Cui, Haocheng Lin, Zhipeng Xu, Weidong Zhu, Liang Shi, Rong Yang, Run Wang, Yutian Dai. Losartan improves erectile dysfunction in diabetic patients:a clinical trial. Translational Andrology and Urology, 2012; doi:10.3978/j.issn.2223-4683.2012.s068.[2] Yun CHEN, Xiaoxin LI, Haocheng LIN, Xuefeng Qiu, Jing GAO, Yutian DAI, Run WANG. The effects of long-term administration of tadalafil on STZ-induced diabetic ratswith erectile dysfunction via a local antioxidative mechanism. Asian Journal of andrology, 2012; Apr 16. doi: 10.1038/aja.2012.22. [Epub ahead of print][3] Xuefeng Qiu, Haocheng Lin, Chao Sun, Wen Yu, Xiaoxin Li, Yun Chen, Run Wang,Yutian Dai. Neurotrophic effect of bone marrow mesenchymal stem cells for erectiledysfunction in diabetic rats. International Journal of Andrology, 2012; DOI: 10.1111/j.1365-2605.2012.01250.x[4] Xue-Feng Qiu, Xiao-Xin Li, Yun Chen, Hao-Cheng Lin, Wen Yu, Run Wang, Yu-Tian Dai. Mobilisation of endothelial progenitor cells: one of the possible mechanisms involved in the chronic administration of melatonin preventing erectile dysfunction in dia- 62 -

etic rats. Asian Journal of andrology, 2012;14(3):481-486.[5] 李小鑫 , 邱雪峰 , 余文 , 朱伟东 , 陈赟 , 戴玉田 . 糖尿病大鼠阴茎海绵体线粒体氧化应激损伤与保护 . 北京大学学报 ( 医学版 ), 2011; 43(2): 189-193.[6] 李小鑫 , 邱雪峰 , 方春钱 , 朱伟东 , 高静 , 陈赟 , 戴玉田 . 左旋精氨酸对糖尿病大鼠阴茎海绵体氧化应激损伤的保护作用 . 中国男科学杂志 , 2010; 24(6): 16-20.[7] 张赢予 , 方眷钱 , 陈赟 , 苏兆亮 , 张国辉 , 高静 . 还原型谷胱甘肽对糖尿病心肌病大鼠心肌线粒体功能的影响 . 中国生物制品学杂志 , 2010; 23(4): 358-360.[8] 陈赟 , 徐志鹏 , 朱伟东 , 孙超 , 戴玉田 . 选择不同剂量他达拉非治疗 ED 的临床标准初步探索 . 中华男科学杂志 , 2010; 9: 861-863.[9] 李小鑫 , 陈赟 , 戴玉田 . 氧化应激与糖尿病性勃起功能障碍 . 中华男科学杂志 , 12: 1128-1132.[10] 姚乐申 , 李燕 , 陈赟 , 戴玉田 . 还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠阴茎海绵体氧化损伤的影响 . 中国男科学杂志 , 2009; 10:5-9.[11] 朱伟东 , 陈赟 , 徐志鹏 , 姚乐申 , 石亮 . 老年性勃起功能障碍的临床特点 . 实用老年医学 , 2009; 2:108-110.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 3用精浆新分子标志物 cell-free RNA 建立 NOA精浆 “ 分子病理类型 ” 的研究批准号 :30801144项目负责人 : 李红钢所在单位 : 华中科技大学本课题按课题计划任务书目标执行 , 完成了研究内容 , 主要结果 :1 通过芯片表达谱检测 , 结合数据库分析 , 得到能在精浆 cell-free RNA 中检测到的睾丸、附睾特异性基因。其中 , 在唯支持细胞综合症与生精阻滞中差异基因 97 个 , 在生精阻滞与生精功能低下中差异基因 11 个。2 选取部分 , 基因在 NOA 个体中进一步比较 , 筛出了在完全唯支持细胞综合症与非完全唯支持细胞综合症间、唯支持细胞综合症与生精阻滞间、生精阻滞与生精功能低下间有鉴别意义指标 ( 各为 4 个、7 个、3 个 )。这些基因可作为不同睾丸病理类型的分子病理类型 , 且精浆 cell-free RNA 具有无创性和代表性好的特点 , 所以 , 是进一步进行应用研究的主要指标。本课题增加了部分紧密相关的研究内容 :1 将筛出的部分基因初步用于解决临床男性不育的诊断问题。目前有较好结果的是预测非梗阻性无精子症患者睾丸生精细胞的存在 ,以及辅助诊断梗阻性无精子症 , 所选出指标在这两个方面应用的准确率分别为 100% 和 89.7% 。2 精浆 cell-free RNA 的基本特性 , 如稳定性、完整性、存在形式等是本课题研究结果可靠的一个前提 , 也是其应用的前提 , 所以 , 我们增加了这些内容。关键词 : 游离核酸 ; 无精子症 ; 男性不育学科代码 :H0424- 63 -

发表论著 :[1]Li H, Wu C, Gu X, Xiong C. A novel application of cell-free seminal mRNA: non-invasive identification of the presence of germ cells or complete obstruction in menwith azoospermia. Hum Reprod. 2012;27(4):991-7.[2]Huang S, Li H, Ding X, Xiong C. Presence and characterization of cell-free seminalRNA in healthy individuals: implications for noninvasive disease diagnosis and gene expression studies of the male reproductive system. Clin Chem. 2009;55(11):1967-76.[3]Li HG, Huang SY, Zhou H, Liao AH, Xiong CL. Quick recovery and characterization of cell-free DNA in seminal plasma of normozoospermia and azoospermia: implications for non-invasive genetic utilities. Asian J Androl. 2009;11(6):703-9.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2隐匿阴茎动物模型的建立及其对阴茎海绵体结构与功能的影响批准号 :30801145项目负责人 : 夏樾所在单位 : 武汉大学隐匿阴茎是指各种原因所致的阴茎藏匿于耻骨联合下软组织中 , 外观见阴茎短小。其发病率逐年增加 , 尤以亚裔人发病为多。分类与诊断在临床工作中较为混乱 , 发病机制尚不明确 , 治疗方式亦多样化 , 存在诸如 : 手术还是非手术治疗、何种手术方式、何时手术治疗等问题。影响临床治疗的关键问题是尚不明确阴茎包埋对阴茎海绵体结构与功能有无影响。本研究 : 建立隐匿阴茎大鼠动物模型。通过检测反映阴茎结构与功能的各项指标 : 不同时段模型大鼠的阴茎海绵体与体重的质量比、阴茎海绵体组织学与超微结构的变化、海绵体细胞凋亡、雄激素受体的改变、NOS 活性与 NOS I 的表达水平、cGMP 浓度的改变、平滑肌自由基代谢情况、平滑肌细胞舒张性的变化 , 以及阴茎海绵体压力的变化 , 与解除阴茎包埋大鼠及睾丸切除大鼠阴茎海绵体的上述指标相比较 , 分析阴茎包埋对阴茎海绵体结构与功能的影响。为隐匿阴茎患者选择外科治疗时机与治疗方式提供实验依据。关键词 : 隐匿阴茎 ; 动物模型 ; 阴茎海绵体 ; 结构与功能学科代码 :H0410发表论著 :[1] Cheng F, Yu WM, Xia Y, Zhang XB, Yang SX, Ge MH. Effects of buried penis onthe structure and function of corpus cavernosum in a rat model. Chin Med J (Engl), 2010; 123(13): 1736-1740.[2] 谢勇军 , 程帆 , 夏樾 , 张孝斌 , 余伟民 , 阮远 . 阴茎包埋对海绵体形态结构的影响 . 中华男科学杂志 , 2010; 16(4): 310-313.[3] 夏樾 , 谢勇军 , 程帆 , 张孝斌 , 余伟民 , 阮远 , 袁友光 . 阴茎包埋对大鼠阴茎海绵体缝隙- 64 -

连接蛋白 43 表达的影响 . 武汉大学学报 ( 医学版 ), 2010; 31(3): 301-303.[4] 余伟民 , 程帆 , 夏樾 , 张孝斌 , 刘修恒 , 葛名欢 . 阴茎包埋对海绵体内勃起通路的影响 .中华实验外科杂志 , 2009; 26(4): 509-510.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2阴茎海绵体 ICC 自发兴奋性及介导神经兴奋传导机制的研究批准号 :30801146项目负责人 : 鄢俊安所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学Cajal 间质细胞 (interstitial cells of cajal, ICCs) 广泛存在于胃肠道、胆囊、子宫、膀胱、尿道等组织内。在对胃肠道 ICCs 研究表明 :ICCs 分布于平滑肌细胞和 ( 或 ) 神经末梢附近 , 其重要功能是包括 : 产生自发兴奋和慢波电位 , 作为 SMCs 活动的起搏细胞 , 介导神经与 SMCs 之间的信号传递。最近的研究认为 ICCs 作为神经递质 NO 的重要靶细胞 , 介导NO/cGMP 信号通路和调节平滑肌舒缩活动。目前海绵体 ICCs 的形态学和功能学研究尚处于初始阶段 , 是否它参与 NO/cGMP 信号通路 , 或通过其他方式调节海绵体平滑肌活动尚未证实。我们通过一系列实验证实 :1、豚鼠阴茎海绵体内存在 ICCs 细胞 , 其形态及分布类似胃肠道 ICCs;2、首次呈现阴茎海绵体 ICCs 超微结构 ;3、阴茎海绵 ICCs 与周围的平滑肌细胞形成缝隙连接 , 并与神经末梢毗邻 ;4、阴茎海绵体 ICCs 上表达 sGCα1、sGCβ1、nNOS,ICCs 作为 NO 的靶细胞 , 可能参与 NO/cGMP 通路 , 调节海绵体平滑肌活动。关键词 :Cajal 间质细胞 , 阴茎海绵体 , 超微结构 , 一氧化氮 , 平滑肌细胞。学科代码 :H0415发表论著 :[1] Junan Yan, Weihua Fu. Ultrastructural features and possible functional role of kit-positive interstitial cells in the guinea-pig corpus cavernosum. Int J Impot Res, 2011;23(4):173-179.[2] 付卫华 , 鄢俊安 . 成年大鼠阴茎海绵体 cajal 间质细胞的分离、培养与鉴定 . 现代生物医学进展 , 2010; 10(16):3004-3006.[3] 付卫华 , 鄢俊安 . 参与阴茎勃起的外周递质信号通路及其与 ED 发生的关系 . 重庆医学 ,2010; 39(20):2787-2789.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0获奖 :[1] 专利 : 鄢俊安 , 李为民 , 沈文清 . 专用于实验动物阴茎勃起观察装置 . 实用新型专利 , 2010.- 65 -

[2] 专利 : 鄢俊安 , 李为民 , 沈文清 . 一种玻璃微电解加液接头 . 实用新型专利 , 2011.批准号 :30801147项目负责人 : 蒲小勇所在单位 : 广东省人民医院hIGF-1 基因治疗老龄大鼠勃起功能障碍的研究勃起功能障碍 (ED) 严重影响患者及其伴侣的生活 , 目前勃起功能障碍的治疗主要是 PDE5 抑制剂 , 但对部分患者治疗效果欠佳或存在一定并发症 , 因此 , 急需探索一种新的治疗方法。基因治疗是近年来新兴的一种治疗方法 , 由于阴茎特殊的解剖结构、功能及其外置等特点 , 适宜进行基因治疗。人胰岛素样生长因子 -1(hIGF-1) 在其他血管组织即可促进新生血管的形成 , 又在血管损伤修复中起重要作用 , 同时参与 NO/sGC/cGMP 信号传导通路 ,导致血管扩张。因此 , 本课题探讨 hIGF-1 治疗老龄大鼠 ED 的价值。首先在前期研究基础之上进一步探讨不同剂量和不同时间 hIGF-1 质粒提高老龄大鼠勃起功能的效果和时效 ; 再探索 hIGF-1 治疗 ED 可能的分子机制 , 为 hIGF-1 基因治疗 ED 提供理论依据 , 同时为临床开发基因治疗药物奠定基础。关键词 : 勃起功能障碍 ; 人胰岛素样生长因子 1; 基因治疗 ; 大鼠学科代码 :H0419发表论著 :[1] Xiao-Yong Pu,Xiang-Guang Zheng, Yan Zhang, Heng-Jun Xiao, Zhan-Ping Xu, Jiu-Ming Liu, Huai-Peng Wang, An-Ming Wen, Xiang-Xue Zhou, Yi-Long Wu. Higher Expression of mRNA and Protein of IGFBP-3 in old rat penile tissues implication for ED.Journal of Sexual Medicine, 2011; 8(1): 2181-2190.[2] 蒲小勇 , 闻安民 , 郑祥光 , 刘久敏 , 周香雪 , 徐战平 , 王怀鹏 , 张仁礼 , 肖恒军 , 司徒杰 .胰岛素样生长因子 1 基因治疗提高老龄大鼠 eNOS mRNA 和蛋白的表达 . 中华医学杂志 ,2012; 92(2): 128-130.[3] 蒲小勇 , 闻安民 , 郑祥光 , 刘久敏 , 王怀鹏 , 徐战平 , 周香雪 , 肖恒军 , 司徒杰 . IGF-1基因治疗提高老龄大鼠阴茎海绵体平滑肌密度的研究 . 中国男科学 , 2011; 25(10): 3-7.[4] 蒲小勇 , 王怀鹏生长因子与勃起功能障碍的基因治疗 . 中华男科学杂志 , 2011; 06: 553-557.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 5 分组 5培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0批准号 :30801230项目负责人 : 王玉东β 雌激素受体介导脱氢表雄酮替代治疗的选择性机制- 66 -

所在单位 : 上海交通大学取围绝经期妇女的骨及内膜组织并培养成骨细胞 (OB) 和内膜上皮细胞 (ECC), 分别分析脱氢表雄酮 (DHEA) 对骨和内膜组织 / 细胞的雌激素受体 (ER) 亚型、雌二醇生成、芳香化酶活性及二种细胞生物学活性的调节 ; 比较 DHEA 与雌二醇对 ER 亚型亲和力的差异 , 明确 DHEA 在骨组织局部是直接作用于 OB 优势表达的 ERβ 亚型。用 RNAi 技术建立ERβ 亚型沉默表达的人成骨细胞系 (hMG63), 用 ERβ 真核表达载体 pCDNA3-ERβ 转染人内膜癌细胞系 (EEC-1), 分别在 ERβ 缺失及高表达时 , 分析 DHEA 与雌二醇对 pERK1/2(MAPK 途径中的调控激酶 )、PAX2(ERα 介导子宫内膜过度增生及致癌途径中关键的下游分子 ) 的表达及对 hMG63、EEC-1 生物学活性的不同影响。明确是由 ERβ 介导 DHEA 对MAPK 途径的激活 , 产生 OB 和 ECC 不同的生物学作用 , 阐明 DHEA 作为激素替代治疗而避免内膜癌发生的作用机制。关键词 : 脱氢表雄酮 ;β 雌激素受体 ; 替代治疗 ; 选择性学科代码 :H0404发表论著 :[1] 孙旭妍 , 陶敏芳 , 程薇薇 , * 王玉东 . β 雌激素受体沉寂表达载体的构建及表达 . 中国医药生物技术 .2010;5(5):353-356.[2] 王玉东 , 郎虓 , 陶敏芳 , 陶敏芳 . ERβ 介导脱氢表雄酮对成骨细胞的选择性作用 . 中华妇产科杂志 .2011,46(9):674~677[3] Yudong Wang, Weiwei Qiao, Xianzhe Zhao, Minfang Tao. Quantitative assessment ofthe influence of hematopoietically expressed homeobox variant (rs1111875) on type 2diabetes risk. Molecular Genetics and Metabolism.2011; 102(2)194–199.[4] YuDong Wang, Kemi Cui, Hong Zhao, DaJin Li, WenJun Wang, Ying Zhu. Bushen Ningxin Decoction pharmacological serum promotes the proliferation and suppresses the apoptosis of murine osteoblasts through MAPK pathway. Journal of Ethnopharmacology.2009; 122(2):221–226.[5] Ling Wang, Qun Hao, Yu-Dong Wang, Wen-Jun Wang, Da-Jin Li. Protective effectsof dehydroepiandrosterone on atherosclerosis in ovariectomized rabbits via alleviating inflammatory injury in endothelialcells cells. Atherosclerosis. 2011; 214(1): 47–57.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2Wnt 通路在子宫内膜细胞分化及内膜异位症发生中的作用批准号 :30801231项目负责人 : 李长东所在单位 : 首都医科大学- 67 -

研究认为 , 干细胞的异常分化可能是某些疾病的发病基础。如子宫内膜异位症的发生 , 内膜异位病灶可能是子宫内膜干细胞在局部异常增生 , 增殖分化为子宫内膜细胞所致。间充质干细胞 (msenchymal stem cell,MSC) 是组织工程中的重要种子细胞 , 具有多向分化潜能 ,Wnt 信号通路与细胞的发育分化密切相关 , 对正常和肿瘤细胞生长都至关重要。我们前期已经建立了间充质干细胞特异性诱导分化为子宫内膜细胞的体外培养体系 ,并发现了在分化过程中与 Wnt 通路相关蛋白的差异表达 , 表明 Wnt 通路在其中发挥作用。本课题目的是深入分析子宫内膜细胞分化过程中 Wnt 通路变化 , 及改变 Wnt 通路对内膜细胞分化的影响 , 探讨其在调控作用机理 , 有利于建立稳定的子宫内膜细胞诱导体系。并进一步研究 Wnt 通路对子宫内膜异位症动物模型的影响 , 探讨间充质干细胞在子宫内膜相关性疾病 , 尤其是子宫内膜异位症发病中的作用 , 为治疗提供靶点。关键词 : 间充质干细胞 ; 子宫内膜细胞 ;Wnt 信号通路 ; 子宫内膜异位症学科代码 :H0406发表论著 :[1] 李长东 , 张为远 , 苑春丽 , 韩丽英 . 体外特异微环境诱导人胎盘间充质干细胞分化成子宫平滑肌细胞的研究 . 中华医学杂志 ,2008;88(45):3200-3204.[2] 苑春莉 , 盛辉 , 李长东 , 韩丽英 , 李荷莲 . 基质金属蛋白酶 2 及其抑制剂在子宫内膜异位症中的表达 . 中国老年学杂志 , 2009; 28(3): 263-264.[3] 刘芸 , 成九梅 , 夏雪 , 段华 , 郭银树 , 王金娟 , 李长东 . 左炔诺孕酮宫内缓释系统治疗子宫腺肌病的疗效 . 中国妇幼保健 , 2010; 25(7): 891-893.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1应用纳米表面控制技术建立子宫内膜异位症体外培养细胞模型及子宫内膜迁移和侵袭机制的研究批准号 :30801233项目负责人 : 戴毅所在单位 : 中国医学科学院子宫内膜异位症是妇科十分重要的常见疾病 , 病因不明 , 治疗不满意。模型的建立是研究内异症发病机制和治疗的重要手段。本研究在国内外首次应用纳米表面控制技术建立内异症体外多种细胞共培养的模型 , 并在模型中实现了多种细胞的精确的有序生长的控制和精确的微观生物学行为的测量。主要研究内容 :(1) 建立内膜基质细胞 (ESCs) 与腹膜间皮细胞 (HPMC) 共培养模型 , 实现了在微纳米级别上两种细胞在同一表面粘附及作用的有序控制 ; 并首次在细胞学水平对内异症组和对照组 ESCs 和 HPMC 相互作用的微观生物学行为进行实时观察及测量 , 发现 ESCs 具有对 HPMC 的侵袭能力 , 内异症患者腹膜抗侵袭能力的下降可能是内异症发病机制中重要的一环。为进一步研究内异症患者腹膜超微结构的差异在内异症发病中的作用提供依据。(2) 建立 ESCs 与脐带内皮细胞共培养模型 ,- 68 -

通过实现内异症组和对照组内膜基质细胞与脐带内皮细胞三组细胞的共培养 , 明确了子宫内膜基质细胞对脐带静脉血管内皮细胞的生长有诱导作用 ; 内异症组的诱导作用强于对照组 , 并在该模型中进行了药物干预研究。研究结果显示本模型稳定、操作性强 , 能够实现多细胞共培养的精确控制和实时观察 , 值得推广。关键词 : 子宫内膜异位症 ; 自组装单层膜 ; 纳米 ; 细胞模型 ; 细胞相互作用学科代码 :H0406发表论著 :[1] DAI Yi, SHEN Keng, LANG Jing-he, HUANG Hui-fang, PAN Ling-ya, WU Ming, YANG Jia-xin, ZHONG Ding-rong. Primary sarcoma of the ovary: clinicopathological characteristics, prognostic factors and evaluation of therapy. Chinese Medical Journal (English Version), 2011; 124(9): 1316-1321.[2] DAI Yi, LENG Jinhua, LANG Jinghe, LI Xiaoyan, ZHANG Junji. Anatomical distribution of pelvic deep infiltrating endometriosis and its relationship with pain symptoms.Chinese Medical Journal (English Version),2012;125(2):209-213.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 0组蛋白乙酰化对 MSCs 微环境适应性的调控作用及机制批准号 :30801234项目负责人 : 王延洲所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学组蛋白乙酰化修饰可能参与微环境诱导下的干细胞定向分化。本研究通过 bMSCs 与 SMCs 接触共培养模拟体内环境 , 建立了诱导分化模型 , 在该模型的基础上研究组蛋白乙酰化对 BMSCs 分化能力的影响。研究表明 :1) MSCs 经过诱导分化后 , 平滑肌标志基因启动子区均存在明显的乙酰化程度的增加 , 直接的证明了 BMSCs 向 BSMCs 分化时平滑肌标志性基因启动子区发生了高的乙酰化 , 这种乙酰化修饰使三种基因的构型发生松解 , 被募集的转录因子得以与启动子相结合 , 从而完成后续的目的 DNA 转录以实现 BMSCs 向平滑肌的分化。2) 相同的共培养时间下 , 丁酸钠可明显的提高 BMSCs 平滑肌标志性蛋白 calponin 的表达 , 并缩短其分化的进程。PCR 检测发现 , 含有丁酸钠的共培养体系 , 可以明显的增强间充质干细胞中 α-SMΑ,calponin,SM-MHC 三种平滑肌标志性基因表达 , 有效的提高间充质干细胞向平滑肌分化的效率。本研究深入探索组蛋白修饰在骨髓间充质干细胞分化过程中的调控机制 , 为 BMSCs 移植治疗压力性尿失禁的研究奠定基础。关键词 : 组蛋白 ; 乙酰化修饰 ; 间充质干细胞 ; 平滑肌学科代码 :H0407发表论著 :- 69 -

[1] 刘晓芳 , 王延洲 , 徐惠成 , 梁志清 . 微环境对骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞定向分化的影响 . 细胞生物学杂志 , 2009; 5;621-624.[2] 杨婧 , 徐惠成 , 王延洲 , 梁志清 . 丁酸钠对大鼠骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化的影响 . 第三军医大学学报 , 2011; 10: 1016-1019.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3孤儿核受体 NR4A1 在卵巢甾体激素代谢和胰岛素通路中的作用机制 -PCOS 发病机制初探批准号 :30801236项目负责人 : 刁飞扬所在单位 : 南京医科大学目的 : 探讨孤核受体 NR4A1 在卵巢内雄激素代谢和胰岛素代谢通路中的作用机制。方法 : 构建 NR4A1 超表达和 siRNA 腺病毒 , 利用小鼠体外整体卵泡培养和颗粒细胞原代培养系统 , 研究 NR4A1 对雄激素合成相关酶的调控机制及对胰岛素信号通路中糖脂代谢的调控机制。结果 :1) 在卵泡膜细胞内 ,NR4A1 可以通过 cAMP 信号传导通路调控雄激素合成相关酶 StAR 等的表达 , 进而促进睾酮的合成。但高浓度的睾酮反而抑制 NR4A1 的表达 ;2) 在颗粒细胞内 , 胰岛素刺激后 ,NR4A1 出现即时、迅速的上调 , 通过调控 IRS-1/PI3K/AKT 信号通路的磷酸化 , 促进胰岛素作用下 GLUT4 细胞膜转位过程和细胞对葡萄糖的摄取效率。3) 在颗粒细胞内 ,NR4A1 对脂肪代谢相关调控因子 (Adipo-R2,UCP2,CD36等 ) 具有正向调节作用 , 可与胰岛素或胰岛素增敏剂协同调控脂肪代谢。结论 : 我们既往研究发现 NR4A1 在多囊卵巢综合征 (PCOS) 患者卵巢内表达下调 , 根据本课题研究机制我们推测 NR4A1 的表达下调 , 影响了甾体激素和胰岛素代谢通路中的某些环节 , 导致卵巢局部胰岛素抵抗 , 是 PCOS 患者卵泡发育停滞的可能发病机制之一。关键词 :NR4A1, 卵巢 , 雄激素合成 , 胰岛素抵抗 , 多囊卵巢综合征学科代码 :H0404发表论著 :[1] 董丽 , 刁飞扬 , 薛凯 , 李梅 , 江帆 , 崔毓桂 , 刘嘉茵 . NR4A1 对小鼠卵巢颗粒细胞脂肪代谢相关调控因子的调节作用 . 生殖医学杂志 , 2011; 20(3): 216-222.[2] 李梅 , 刁飞扬 , 薛凯 , 凌静 , 丁卫 , 蔡令波 , 崔毓桂 , 刘嘉茵 . 核受体 NR4A1 在卵巢卵泡膜细胞内调节雄激素的生成 . 国际生殖健康 / 计划生育杂志 , 2011; 30(2): 88-94.[3] 刁飞扬 , 王媁 , 丁卫 , 冒韵东 , 刘嘉茵 . 促性腺激素释放素拮抗剂联合人重组促黄体激素对卵巢功能减退患者妊娠结局的影响 . 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ), 2011; 10: 1425-1429.[4] 刘金娟 , 马翔 , 刁飞扬 , 李梅 , 薛凯 , 崔毓桂 , 刘嘉茵 . 小鼠 HSP27 基因腺病毒表达载体的构建与鉴定 . 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ), 2009; 7: 944-948.[5] 刘金娟 , 崔毓桂 , 刘嘉茵 . 热休克蛋白 27 在调控细胞凋亡过程中的作用 . 医学综述 , 200- 70 -

9; 13: 1921-1923.[6] 刘金娟 , 崔毓桂 , 马翔 , 刘嘉茵 . 小鼠 Hsp27 基因 siRNA 重组腺病毒载体的构建与鉴定 . 标记免疫分析与临床 , 2010; 2: 94-98.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 3应用比较基因组杂交技术行胚胎植入前非整倍体诊断批准号 :30801237项目负责人 : 颜军昊所在单位 : 山东大学针对体外受精 - 胚胎移植的过程中 , 高育龄妇女的胚胎种植率低 , 流产率高的现象 ,我们开展了一系列遗传相关性和免疫学相关性研究 , 建立了比较基因组杂交对流产标本诊断和单个淋巴细胞及胚胎卵裂球诊断技术、对辅助生殖技术过程妊娠的患者进行了孕期检查和出生缺陷追踪工作、利用已有病例资料开展了复发性自然流产与大 Y 染色体多态性的相关性研究、开展了流产与血管内皮生长因子基因多态性的相关性研究、分析了病例收集过程中的染色体多态性患者体外受精 - 胚胎移植 (IVF/ICSI) 后结果。通过研究对胚胎遗传性和免疫学因素导致的胚胎种植率低和流产率高的病因学有了进一步认识 , 为后续研究奠定了基础。关键词 : 比较基因组杂交 ; 体外受精胚胎移植 ; 复发性流产 ; 出生缺陷 ; 染色体多态性学科代码 :H0419发表论著 :[1] S. Liu, Y. Li, X. Gao, J. H. Yan, Z. J. Chen Changes in the distribution of mitochondria before and after in vitro maturation of human oocytes and the effect of in vitromaturation on mitochondria distribution. Fertil Steril, 2010; 93(5); 1550-1555.[2] 范玲玲 , 颜军昊 , 李媛 , 高芹 , 陈子江 . 大 Y 染色体对常规体外受精 - 胚胎移植结局的影响 .山东大学学报 ( 医学版 ), 2010; 48(4):15-17.[3] J. Yan, G. Huang, Y. Sun, X. Zhao, S. Chen, S. Zou, Z. J. Chen Birth defects afterassisted reproductive technologies in China: analysis of 15,405 offspring in seven centers (2004 to 2008). Fertil Steril, 2011; 95(1):458-460.[4] J. Yan, L. Fan, Y. Zhao, L. You, L. Wang, H. Zhao,, Z. J. Chen DYZ1 copy number variation, Y chromosome polymorphism and early recurrent spontaneous abortion/early embryo growth arrest. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol, 2011; 159(2): 371-374.[5] X. Xing, J. Yan, Y. Zhao, L. You, Y. Bian, Z. J. Chen Association of vascular endothelial growth factor gene polymorphisms with recurrent spontaneous abortion in Chinese Han women. Am J Reprod Immunol, 2011; 65(5):521-525.[6] J. Yan, Y. Li, Y. Shi, H. L. Feng, S. Gao, Z. J. Chen Assessment of sex chromosomes of human embryos arising from monopronucleus zygotes in in vitro fertilization andintracytoplasmic sperm injection cycles of Chinese women. Gynecol Obstet Invest, 20- 71 -

10; 69(1):20-23.[7] X. Gao, J. Yan, Y. Shen, M. Li, S. Ma, J. Wang, Q., Z. J. Chen Human fetal trophonema matrix and uterine endometrium support better human embryonic stem cell growth and neural differentiation than mouse embryonic fibroblasts. Cell Reprogram, 2010;12(3); 295-303.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0子宫内膜干细胞的分离、鉴定和特性研究批准号 :30801238项目负责人 : 杨新园所在单位 : 西安交通大学子宫内膜组织中存在一群具有强大自我更新及分化能力的干细胞 , 可分裂增殖及时补充脱落的终末分化细胞 , 使正常子宫内膜始终保持更新及再生能力。本项目旨在应用磁珠分选法分离培养人子宫内膜干细胞 , 观察细胞形态 , 研究其生物学特性。实验中分离得到的子宫内膜上皮和基质细胞易于贴壁 , 生长良好 , 通过克隆培养进一步纯化上皮和基质干细胞。将上皮干细胞进行三维立体培养 ; 同时流式细胞仪检测基质干细胞表面标记 ; 对基质干细胞的多向分化潜能进行研究 : 成功诱导其向脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞分化。结果表明通过体外分离培养可得到具有自我更新和多向分化潜能的子宫内膜干细胞。在细胞水平上研究子宫内膜干细胞的各种生物学特性 , 即可消除复杂的影响因素 , 又可模拟细微的激素改变 , 易于增进子宫内膜疾病等的基础研究 , 对于合理有效的治疗具有重要意义。此外 , 间充质干细胞具有明显的可塑性 , 也易于培养、扩增及外源基因的导入和表达 , 其遗传背景相当稳定 , 这些特性使得其在细胞替代治疗、基因治疗等方面的应用前景相当广阔 , 无疑使子宫内膜干细胞成为组织工程中颇具优势的种子细胞。关键词 : 子宫内膜 ; 干细胞 ; 细胞培养学科代码 :H0430发表论著 :[1]Yang XY, Wang W, Wang YL, Chen W, Li X. Gradientdecrease in telomerase and its RNA in progressivepassage of humanendometrialstromalstemcells. Journal of Medical Colleges of PLA. 2011; 26:254–263.[2] 杨新园 , 王伟 , 陈葳 , 李旭 . 子宫内膜基质干细胞的成骨及成软骨诱导分化研究 . 南方医科大学学报 . 2011;9:1488-1492.[3] 杨新园 , 陈葳 , 李旭 . 子宫内膜基质干细胞培养方法的比较研究 . 山西医科大学学报 . 2011;8:624-628.[4] 杨新园 , 李旭 , 陈葳 . 子宫内膜基质干细胞的体外成骨诱导和成脂诱导分化 . 西安交通大学学报 ( 医学版 ). 2012;1:95-98.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0- 72 -

培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0表遗传学调控单卵裂球定向发育为内细胞团细胞与人类胚胎干细胞系的建立批准号 :30801239项目负责人 : 麦庆云所在单位 : 中山大学为了给出生试管婴儿提供相同遗传背景的人类胚胎干细胞 , 避免干细胞移植免疫排斥 , 可在保全胎胎进一步发育潜能前提下活检单卵裂球细胞建立人类胚胎干细胞系。但如何诱导单卵裂球细胞向全能内细胞团细胞发育 ? 组蛋白精氨酸甲基化被证实调控了小鼠胚胎各卵裂球细胞发育方向。本研究将通过免疫荧光定量检测不同发育方向人类单卵裂球细胞内 H3R26me、H3R17me、H3R2me 与 H4R3me, 阐明不同精氨酸甲基化与卵裂球细胞发育方向的关系。进一步通过构建组蛋白精氨酸甲基转移酶表达载体 , 转入已发生极化的单卵裂球细胞体内诱导其向内细胞团细胞发育并建立人类胚胎干细胞系。该项目的完成将为阐明表遗传学调控人类胚胎发育提供科学依据 , 并利用表遗传学方法调控卵裂球细胞发育方向建立单卵裂球细胞来源人类胚胎干细胞系。本课题的完成将为表遗传学调控人类胚胎发育提供证据 , 同时为人类胚胎干细胞建系提供新途径。关键词 : 人类胚胎干细胞建系 ; 单卵裂球细胞 ; 组蛋白甲基化学科代码 :H0417发表论著 :[1] 麦庆云 , 邓捷 , 彭文林 , 庄广伦 , 周灿权 . 携带 &alpha- 地中海贫血基因人胚胎干细胞系的建立 . 中山大学学报 ( 医学科学版 ), 2009; 05;551-555.[2] 杨刚 , 麦庆云 , 李涛 , 周灿权 . 人体外受精低质量胚胎单卵裂球发育潜能研究 . 中华临床医师杂志 ( 电子版 ), 2011; 05(9):45-47.[3] Xiuyun Mai, Qingyun Mai, Tao Li, Canquan Zhou. Dynamic expression patterns of imprinted genes in human embryonic stem cells following prolonged passaging and differentiation. J Assist Reprod Genet., 2011; 28(4): 315-323.[4] Li Tao, Mai Qingyun, Gao Jun, Zhou Canquan. Cryopreservation of Human Embryonic Stem Cells with a New Bulk Vitrification. Method Biology of Reproduction, 2010;82(5):848-853.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2趋化因子 CXCL12 及其受体 CXCR4 在人早孕期母 - 胎界面形成中的作用批准号 :30801240- 73 -

项目负责人 : 周雯慧所在单位 : 武汉大学精细的母 - 胎对话和母 - 胎免疫调节是维持正常妊娠的关键因素。母 - 胎对话在细胞分子水平上表现为胎儿来源的滋养细胞与母体来源的细胞通过它们产生的各种细胞因子、生长因子、激素等相互作用。近年来趋化因子及其受体在母 - 胎对话中的作用逐渐引起大家的重视。本研究以独特的趋化因子配体受体对 CXCL12/CXCR4 为切入点 , 旨在分析它们在人早孕期滋养细胞和蜕膜基质细胞的表达特征及生物学效应 ; 并通过建立体外共培养模型 ,解析 CXCL12/CXCR4 在滋养细胞与蜕膜基质细胞对话中的调节作用。试图以趋化因子为出发点 , 解析滋养细胞与蜕膜基质细胞经由趋化因子受体介导的相互联络关系 , 以进一步拓展母 - 胎免疫调节机理 , 进而为一些免疫相关病理妊娠的临床防治提供理论依据。关键词 : 蜕膜基质细胞 ; 滋养细胞 ; 趋化因子 ; 趋化因子受体 ; 母 - 胎免疫调节学科代码 :H0417发表论著 :[1] Liang Ren,Yong-Qiao Liu,Wen-Hui Zhou,Yuan-Zhen Zhang. Trophoblast-derived chemokine CXCL12 promotes CXCR4 expression and invasion of huamn first-trimester pregnancy decidual stromal cells. Human Reproduction, 2011; 27(2):366-347.[2] 周雯慧 , 胡卫东 , 吴洲清 , 郑新民 , 汪必成 . 趋化因子轴 CXCL16/CXCR6 在人前列腺癌转移中的作用 . 中华医学杂志 , 2010;90(14);947-951.[3] 周雯慧 , 胡卫东 , 徐闻博 . 趋化因子及其受体 CXCL16/CXCR6 体外促前列腺癌增殖、侵袭作用 . 武汉大学学报 ( 医学版 ), 2010; 04: 479-482.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2去唾液酸糖蛋白受体 (ASGP-R) 介导乙肝病毒感染人精子的早期机制批准号 :30801241项目负责人 : 孙平楠所在单位 : 汕头大学本项目发现 , 乙肝病毒能够整合到人精子染色体上 , 病毒吸附精子的过程与精子表面的一种异源低聚物的内吞受体 , 去唾液酸糖蛋白受体 (asialoglycoprotein receptor, ASGP-R)相关。在项目资金的支持下 , 课题组检测了 ASGP-R 蛋白在人及大鼠睾丸组织中的表达。通过 Western Blot、Real time PCR、原位杂交、双重染色等技术 , 研究发现 ASGP-R 受体表达在人睾丸组织的间质细胞和支持细胞当中 , 而不表达在生殖细胞上。在大鼠当中则表达在间质细胞及精子当中。本研究显示 ASGP-R 在人鼠组织中具有不同的表达分布模式。我们首次提出 , 在 HBV 侵入人睾丸组织的过程中 , 病毒可能以 ASGP-R 为受体侵入人支持细胞 , 再通过未知的受体感染人生殖细胞。同时在项目支持下 , 课题组用 FITC 标记了 ASGP-R 的天然配体蛋白 ASF, 建立了酵母表面展示技术平台 , 建立了与 ASGP-R 受体结合的- 74 -

绿茶阿拉伯半乳聚糖的傅立叶红外检测方法 , 为利用肝脏特异性受体 ASGP-R 实现 HBV 的表达调控获得材料和技术支持。课题探讨 HBV 经 ASGP-R 感染人精子的早期机制 , 将为治疗和控制 HBV 传播提供科学依据。关键词 : 去唾液酸糖蛋白受体 ; 乙肝病毒 ; 睾丸学科代码 :H0424发表论著 :[1]Zhou XL, Sun PN, Bucheli P, Huang TH, Wang D. FT-IR methodology for quality control of arabinogalactan protein (AGP) extracted from green tea (Camellia sinensis ).Agric Food Chem. 2009;57(12):5121-8.[2]Zhou XL, Sun PN, Huang TH, Xie QD, Kang XJ, Liu LM. Effects of hepatitis B virus S protein on human sperm function. Hum Reprod. 2009;24(7):1575-83.[3]Sun PN, Zhang XC, Chen YS, Zang XN. Application of the yeast-surface-display system for orally administered salmon calcitonin and safety assessment. Biotechnol Prog.2010;26(4):968-74.[4]Sun PN, Zhang XC, Chen YS, Zang XN. Application of the yeast-surface-display system for orally administered salmon calcitonin and safety assessment. Biotechnol Prog.2010;26(4):968-74.[5] 孙平楠 , 周小玲 , 王正祥 . 信号肽生物信息学分析在 Neurospora crassa phyA 基因鉴定中的应用 . 南方医科大学学报 . 2009;6:1098-1101.[6] 孙平楠 , 周小玲 , 黄天华 , 谢庆东 , 陈惠芳 , 康祥锦 . FITC 标记无唾液酸胎球蛋白对人精子去唾液酸糖蛋白受体的定位 . 癌变畸变突变 . 2009;2:132-134.[7] 孙平楠 , 康祥锦 , 陈惠芳 , 黄天华 . 乙肝表面 S 蛋白与人精子相互作用的初步研究 . 汕头大学医学院学报 . 2009;1:7-9.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2孕妇血浆中游离胎儿 RNA 在先天性脊椎裂中表达规律和胚胎早期无创诊断新方法研究批准号 :30801242项目负责人 : 李慧所在单位 : 中国医科大学先天性脊椎裂是常见的小儿先天畸形 , 发生率为 1‰。由于发生机制不清楚 , 病理改变复杂 , 治疗效果较差 , 探索先天性脊椎裂的胚胎早期诊断方法 , 是畸形早期治疗和预防的非常重要前提条件。本课题从三个方面进行了先天性脊椎裂胚胎早期无创诊断标志物的筛查。1)、利用血清 microRNA 差异表达芯片及定量 PCR 验证 , 筛查出脊椎裂孕妇血清中7 种差异表达的 miRNA, 通过 ROC 曲线 , 得到这些 miRNA 的总体 AUC 值为 0.803;2)、- 75 -

利用 ITRAQ 蛋白定量比较脊椎裂孕妇血清与正常孕妇血清的差异表达蛋白 , 经过 ELISA 验证后 , 发现 6 种差异表达的蛋白有统计学意义。其中血清 ceruloplasmin 在脊椎裂孕妇血清中表达明显升高 , 有较好的敏感性和特异性 , 其 AUC 值为 0.979;3)、利用双向电泳联合质谱的方法研究脊椎裂大鼠模型羊水中的标志物 , 发现除 AFP 之外的 4 种新的标志物。我们的研究提示了多种潜在的脊椎裂胚胎早期无创诊断标志物 , 在进一步的研究中我们将对这些结果进行大样本验证 , 从而提供更准确的脊椎裂胚胎早期血清学诊断依据。关键词 : 先天性脊椎裂 ; 胚胎早期诊断 ; 血清小 RNA 芯片 ;iTRAQ 蛋白定量 ; 双向电泳学科代码 :H0419发表论著 :[1] Shan Liping, Fan Yang, Li Hui, Liu Wei,Zhou Fenghua, Yuan Zhengwei. Proteomicanalysis of amniotic fluid of pregnant rats with spina bifida aperta. Journal of Proteomics, 2012; 75(4): 1181-1189.[2] Fan Yang, Wang Lili, ZhangYi, Li Hui, Shan Liping, Yuan Zhengwei. Comparative proteomics of spinal cords of rat fetuses with spina bifida aperta. Journal of Proteomics,2011; 75(2): 668-676.[3] 顾卉 , 佟宇鑫 , 刘彤 , 李慧 , 袁正伟 . GST-LMO1 融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达 . 中国医科大学学报 , 2011; 40(11): 961-964.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0氧化应激诱发的内质网应激和泛素 - 蛋白酶体通路在早期妊娠丢失病理发生中的作用机制批准号 :30801243项目负责人 : 刘爱霞所在单位 : 浙江大学已证实 EPL 母胎界面存在氧化应激 , 研究提示氧化应激可通过引起 ER stress, 导致细胞凋亡。本研究在此基础上以人正常早孕蜕膜细胞及 EPL 蜕膜细胞作为研究对象 , 以 H2O2/MG132 等作为处理因素 , 建立体外细胞模型 , 模拟 EPL 母胎界面的高氧状态 , 从而为研究蜕膜细胞在氧化应激作用后细胞代偿或发生凋亡的机制。结果发现 ,EPL 蜕膜细胞存在氧化应激现象 , 细胞中 GRP78 及 VCP 蛋白表达下降 ,Ub 表达水平明显增加 , 与内质网相关凋亡蛋白 Caspase-4/12 被激活 , 细胞内质网微结构改变。正常蜕膜细胞模型经 H2O2/MG132 处理后 , 细胞活力明显下降 ,GRP 78 水平增加 ,且呈剂量依赖效应。经抗氧化剂处理后 , 上述现象得到纠正。而在 EPL 蜕膜细胞中 , 经上述处理后 , 细胞活力下降更明显 , 但未见 GRP78 上调现象。采用 siRAN 技术干扰细胞内 VCP 表达 , 细胞活力下降 , 细胞凋亡增加。结论 :EPL 蜕膜细胞中存在氧化应激诱导的内质网应激反应和 UPR 功能紊乱 , 从而细胞修复损伤的能力下降 , 细胞出现凋亡 , 最终导致 EPL 的发生和发展。- 76 -

关键词 : 早期妊娠丢失 ; 蜕膜细胞 ; 内质网 ; 氧化应激学科代码 :H0420发表论著 :[1] Liu AX, He WH, Yin LJ, Lv PP, Zhang Y, Sheng JZ, Leung PC, Huang HF. Sustained endoplasmic reticulum stress as a cofactor of oxidative stress in decidual cells from patients with early pregnancy loss. J Clin Endocrinol Metab, 2011; 96(3): 493-497.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1TLR4 调控 CD4+T 细胞介导获得性免疫在早产儿脑白质损伤中的作用批准号 :30801244项目负责人 : 王来栓所在单位 : 复旦大学LPS 介导宫内感染引起早产儿脑白质损伤机制还不十分清楚。本研究以 CNS 小胶质细胞 (MG) 为中心 , 以 TLR-4-/- 鼠为模型 , 探讨固有免疫和获得性免疫脑白质损伤机制。得出以下主要结果 1 MG 发育和分布与 OPCs 发生时间窗高度一致 : 自孕中期 ( 孕 10 d) 开始呈现胎龄依赖的表达显著增加 , 孕晚期表达最高 , 主要分布在脑室周围白质区域。LPS 诱导宫内感染后出现剂量依赖 TLR-4 蛋白显著升高和 CD68+ MG 高表达及 O4+OPCs 的低表达和显著的髓鞘 (MBP) 生成障碍。同时出现 IL-2 和 TNF-α 水平呈剂量依赖的显著增加和SOD 水平呈显著降低趋势 , 正反两方面证据证实 MG 活化是 OPCs 受损的物质基础。在此基础上 , 通过上调或下调 TLR-4 表达 , 发现 TLR-4 对 MG 活化和共同免疫刺激因子 MCH II和 CD4+T 细胞增殖分化及 Th1/Th2 极化方向的正向调控作用 , 阐明 TLR-4 在 T 细胞获得性免疫中的关键作用和 TLR-4 介导 MG 活化在固有免疫和获得性免疫中发挥桥梁作用 , 并由此提出由 Th1/Th2 偏移向 TLR4-Th1 偏移的新的早产儿脑白质损伤模式 , 为后续研究打下了坚实的基础。关键词 : 脂多糖 ;Toll 样受体 ; 小胶质细胞 ; 固有免疫 ; 获得性免疫学科代码 :H0422发表论著 :[1] 王来栓 , Henrik Hagberg, Carina Mallard, 俞惠民 . 围生期宫内感染与早产儿脑损伤的相关问题 . 中国循证儿科杂志 , 2009; 4(4): 321-324.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1- 77 -

MAPK 信号转导通路对高氧 CLD 早产鼠 LF 增殖调控机制的研究批准号 :30801245项目负责人 : 刘雪雁所在单位 : 中国医科大学本研究采用高氧诱导新生鼠慢性肺疾病 (CLD) 模型及体外培养肺成纤维细胞 (LF),应用 PCR、蛋白印迹、流式细胞分析等多种分子生物学和细胞生物学技术 , 研究 :1)CLD发生中 LF 细胞周期状态、生长曲线和细胞分裂特点 , 及其增殖、转化状态和迁移能力 ;2)MAPK(ERK1/2、JNK 和 p38) 基因和蛋白在高氧 CLD 发生发展中肺组织及原代 LF 中的动态表达 ;3) 分别予 ERK1/2、JNK 和 p38 的激活剂和 / 或抑制剂对 LF 干预后的细胞生物学行为改变。发现 :1) 高氧使过多的细胞越过了 G1/S 控制点由 G1 期进入 S 期而致 LF 过度增殖 ;2) 高氧可诱导肺组织和 LF 的 MAPK(ERK1/2、JNK 和 p38) 蛋白磷酸化活化 ,但基因水平无改变 ;3)ERK1/2 激动剂 EGF 可以促进 LF 增殖、转化和迁移 , 而 ERK1/2、JNK 和 p38 抑制剂能够使 LF 增殖受抑 ,ERK1/2 的抑制剂亦可抑制 LF 的转化和迁移。因此 ,MAPK 信号转导通路可能是调控 LF 细胞周期的主控因素之一 , 因高氧诱导的 MAPK信号转导通路异常激活 , 使 LF 细胞周期调控紊乱 , 可能是高氧 CLD 新生鼠 LF 过度增殖而发生肺纤维化的重要机制之一。关键词 : 丝裂原活化蛋白激酶 ; 慢性肺疾病 ; 肺成纤维细胞学科代码 :H0422发表论著 :[1] 胡瑜 , 刘雪雁 , 富建华 , 薛辛东 . 细胞外信号调节激酶 1/2 在慢性肺疾病新生大鼠肺成纤维细胞中的研究 . 中华急诊医学杂志 ,2012; 21(1): 33-37.[2] 胡瑜 , 刘雪雁 , 富建华 , 薛辛东 . 高氧致慢性肺疾病新生大鼠肺组织中 ERK1/2 变化的研究 . 中国当代儿科杂 , ,2011; 07: 581-585.[3] 胡瑜 , 刘雪雁 , 张慧 , 富建华 , 薛辛东 . Bax/Bcl-2 在高体积分数氧致新生大鼠慢性肺疾病肺组织及成纤维细胞中的动态变化 . 实用儿科临床杂志 ,2011; 08: 589-592.[4] 胡瑜 , 刘雪雁 , 富建华 , 薛辛东 . 高氧对新生 CLD 鼠肺成纤维细胞增殖和 Ⅰ 型胶原合成的影响 . 中国医科大学学报 ,2010; 07: 515-517.[5] 胡瑜 , 薛辛东 , 刘雪雁 . 丝裂原活化蛋白激酶与早产儿慢性肺疾病 . 国际儿科学杂志 , 2010; 37(3): 326-328.[6] 陈宁 , 张丹 , 单丽沈 , 刘雪雁 , 尚云晓 , 薛辛东 . Losartan 对高氧致慢性肺疾病新生大鼠肺纤维化的干预作用 . 中国医科大学学报 , 2010; 08: 603-606.[7] 许巍 , 佟玉静 , 刘雪雁 , 薛辛东 . 新生大鼠高氧肺损伤后 Ⅱ 型肺泡上皮细胞变化的研究 .中国医科大学学报 , 2009; 08: 561-564.[8] 刘雪雁 , 张昊 , 王婉奕 , 王华 , 刘春峰 , 冯国和 . 手足口病合并神经系统受累 23 例临床分析 . 中国危重病急救医学 , 2010; 22(4): 246-247.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0- 78 -

培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 3滋养细胞侵袭抑制基因甲基化状态异常与子痫前期 / 子痫发病的关系研究批准号 :30801247项目负责人 : 易萍所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学子痫前期 / 子痫是导致孕产妇及新生儿死亡的主要原因。目前公认滋养细胞侵袭力下降致胎盘浅着床是该疾病发生的关键环节。我们提出子痫前期 / 子痫发病与滋养细胞中侵袭抑制基因表遗传学异常有关的假说。遂本项目利用甲基化谱芯片和基因表达谱芯片技术分别检测正常与子痫前期 / 子痫胎盘组织的基因甲基化状态和表达差异 , 重点观察 E- 钙粘蛋白、TIMP-3 等侵袭抑制基因 ; 并利用荧光定量 RT-PCR 和亚硫酸氢盐修饰后测序法对正常胎盘和子痫前期 / 子痫胎盘组织中的基因表达和甲基化状态进行验证。结果发现侵袭抑制基因 ( 如 E-CAD 、TIMP3) 在正常胎盘与子痫前期 / 子痫胎盘表达有差异 , 早孕与晚孕胎盘表达有明显差异 , 发现其机制与甲基化状态无关 , 但可能与其它表遗传学机制如组蛋白修饰有关。关键词 : 子痫前期 ;DNA 甲基化 ; 滋养细胞 ; 侵袭 ; 侵袭抑制基因学科代码 :H0420发表论著 :[1] 韩新美 , 韩健 , 杨博萍 , 俞丽丽 , 周元国 , 易萍 , 李力 . 妊娠期大鼠胎盘组织中 Rho/ROCK 蛋白动态变化特点 . 第三军医大学学报 , 2011; 33(09): 900-904.[2] 颜耀华 , 李力 , 易萍 . 促进滋养细胞侵袭因素的研究进展 . 中国妇幼健康研究 ,2011; 22(6):846-850.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1共表达 gB 及靶向 BAK SiRNA 的新型疫苗在动物模型上抗 CMV 胎仔感染的研究批准号 :30801248项目负责人 : 刘继晓所在单位 : 天津市中心妇产科医院CMV 宫内感染严重影响妊娠结局、降低出生质量 , 采用 DNA 疫苗诱导抗 HCMV 免疫治疗是一种有希望的治疗方案。然而 DNA 疫苗较大的缺陷是其免疫强度不够 , 因为进入体内后只有很少 DNA 分子能被树突状细胞摄取。由此出发 , 在前期研究基础上 , 结合近期- 79 -

国际上的最新研究进展 , 第一 , 本项目设计了一种新颖的 DNA 疫苗 , 构建了共表达 CMVgB 蛋白及靶向 BAKsiRNA 的重组质粒载体 pgB-U6BAK, 建立靶向抗原递呈细胞激活表达 gB 的重组 DNA 疫苗 , 发现 pgB-U6BAK 转染后树突状细胞凋亡减少 , 增强诱导 gB 特异性免疫应答的能力 ; 第二 , 免疫接种小鼠 ,pgB-U6BAK 核酸疫苗可诱导机体较强的免疫反应 ,大大增强了核酸疫苗的体内免疫效果 ; 第三 , 进一步研究了该疫苗降低宫内传播率及胎鼠感染的作用 , 同时探讨其免疫效应机制。关键词 : 巨细胞病毒 ; 宫内感染 ;DNA 疫苗学科代码 :H0419发表论著 :[1] 刘继晓 . 靶向抗原递呈细胞激活 gB 的重组质粒的构建及其对树突状细胞凋亡的影响 .实用医学杂志 , 2011;13: 2306-2309.[2] 刘继晓 , 闻良珍 . 金叶败毒颗粒抑制人巨细胞病毒 vMIA 蛋白表达及作用的实验研究 .中国妇幼保健 , 2011; 13: 2018-2021.[3] 侯卫萍 , 刘继晓 . 96 例子痫前期患者的凝血指标及妊娠结局 . 中国妇幼保健 , 2010; 34;4982-4984.[4] 孙茜 , 刘继晓 . PCOS 患者血清视黄醇结合蛋白 -4 水平与胰岛素抵抗的关系 . 中国妇幼保健 , 2010; 14: 1901-1902.[5] 刘元萍 , 刘继晓 . 张云山子宫内膜异位症的药物治疗新进展 . 实用医学杂志 , 2010; 04:537-538.[6] 刘元萍 , 刘继晓 . 子宫内膜异位症保守手术后延续用药的临床观察 . 中国妇幼保健 , 2010; 04: 569-570.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0未成熟脑 TLR-4 信号通路介导宫内感染后脑白质损伤批准号 :30801253项目负责人 : 袁天明所在单位 : 浙江大学Toll-like 受体 4(TLR-4) 信号可能参与宫内感染 / 炎症后未成熟脑脑白质损伤的机制。本项目通过建立宫内感染大鼠模型 , 研究未成熟脑脑白质损伤的发生及研究感染 / 炎症对未成熟星形细胞增殖和胶质化的影响和 TLR-4/NF-κB 信号是否参与这一过程 ; 而且探讨 TP-EGCG 对感染 / 炎症后未成熟星形细胞增殖和胶质化行为的作用及是否影响 TLR-4/NF-κB 信号等。结果表明宫内感染 / 炎症后未成熟脑 GFAP 表达呈一定的时空性 , 表明宫内感染 / 炎症可能改变未成熟脑星形细胞的功能。不同的感染 / 炎症条件下对未成熟星形细胞的增殖活性影响是不同的 ,LPS 刺激后星形细胞细胞因子 (TNF-α、IL-1β、MIP-1α、MIP-1β、IL-10 等 ) 存在短暂的表达增加现象 , 且不同的感染 / 炎症条件下 TLR-4/NF-κB 信号的表达特点是不同的。TP-EGCG 对 LPS 刺激 3 天后的星形细胞增殖能力有一定的改变 , 但对 TLR-4 mRNA- 80 -

及细胞因子的表达变化影响不明显 , 而且 TP-EGCG 对感染 / 炎症时星形细胞 NF-κBp65 mRNA 表达抑制有改善作用。本研究从炎症信号角度进一步说明宫内感染 / 炎症后未成熟脑脑白质损伤的机制。关键词 : 宫内感染 ; 炎症 ; 脑白质损伤 ;toll 样受体 -4; 茶多酚学科代码 :H0422发表论著 :[1]Zhan CY, Yuan TM, Sun Y, Yu HM.Early gestational intrauterine infection induces postnatal lung inflammation and arrests lung development in a rat model. J Matern Fetal Neonatal Med. 2011;24(2):213-22.[2]Yuan TM, Sun Y, Zhan CY, Yu HM. Intrauterine infection/inflammation and perinatalbrain damage: role of glial cells and Toll-like receptor signaling. J Neuroimmunol.2010;229(1-2):16-25.[3]Shen Y, Yu HM, Yuan TM, Gu WZ, Wu YD. Erythropoietin attenuates white matterdamage, proinflammatory cytokine and chemokine induction in developing rat brain after intra-uterine infection. Neuropathology. 2009;29(5):528-35.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0- 81 -

H04 生殖系统 / 围生医学 / 新生儿地区科学基金项目FSH 和 SCF 睾丸缓释剂对非梗阻性无精症生精功能影响的实验研究批准号 :30760250项目负责人 : 邱学德所在单位 : 昆明医学院非梗阻性无精症 (NOA) 者睾丸内无单精子卵胞浆内注射 (ICSI) 所需的精子 , 目前尚无有效疗法。若能促进 NOA 者体内残存的生殖细胞生成精子 , 则其可借 ICSI 获得生育机会。通过建立 NOA 动物实验模型 , 观察不同用药方式给予 FSH 和 SCF 缓释微球能否促进模型睾丸内残留的生殖细胞增殖。实验中做了以下探索 :(1) 用复乳 - 溶剂挥发法制作 FSH 和 SCF 聚乳酸微球并测定药代动力学特点 ;(2) 探索制作较理想的 Wistar 大鼠 NOA模型的方法 ;(3) 按 FSH 和 SCF 微球代谢特点通过微球肌肉和睾丸组织注射 , 以及 FSH和 SCF 原药直接肌注的方式给予动物模型 , 统计学分析比较不同给药方法间结果的差异 ,分析比较不同给药方法的结果与个对照组间结果的差异。经过反复探索后得到以下启示 :(1) 获得的 FSH 和 SCF 微球 , 体内持续释放时间约 17 天 ;(2) 白消安 15mg/kg 单次腹腔注射可成功制作 Wistar 大鼠 NOA 模型 ;(3) 不同途径给予模型 FSH 和 SCF, 均可促进其生精功能的恢复 , 但以肌肉注射 FSH 和 SCF 缓释微球的途径效果最佳。我们认为 :FSH 和 SCF 缓释微球肌注 , 可促进 NOA 模型生精功能的的恢复 , 值得深入研究。关键词 : 非梗阻性无精症 ; 动物模型 ;FSH 微球 ;SCF 微球 ; 生精功能学科代码 :H0424发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 4枸杞多糖对精原干细胞增殖、分化及移植的影响批准号 :30860282项目负责人 : 马良宏所在单位 : 宁夏医科大学枸杞多糖 (LBP) 具有防辐射、抗氧化及缺氧、保护生殖系统等功能。LBP 联合精原干细胞 (SSCs) 移植为男性不育的治疗开辟新的方法 , 尤其对生精功能阻滞的无精子症患者具有独特的临床应用价值。我们在前期对 SSCs 分离、纯化及移植研究的基础上 , 拟建立 Sertoli 细胞饲养层 , 体外模拟 SSCs 增殖与分化的微环境 , 采用 LBP 或 LBP 联合细胞因子促进 SSCs 体外增殖与分化。建立化疗致不育动物模型 , 利用显微注射技术将 SSCs移植到受者曲细精管内 , 采用 LBP 或 LBP 联合细胞因子修复体内已破坏的生殖内分泌网络调控系统 , 促进 SSCs 体内增殖与分化。在冷冻保存液的配方中加入 LBP, 观察 SSCs- 82 -

移植的效果 , 优化冷冻保存方法。研究内容 :1LBP 对 SSCs 体外增殖与诱导分化的影响 ;2 通过 SSCs 移植 , 观测 LBP 对 SSCs 体内增殖与分化的影响 ;3 优化 SSCs 的冷冻保存液配方 ;4LBP 促生精功能恢复机制的探寻。关键词 : 枸杞多糖 ; 精原干细胞 ; 增殖 ; 分化 ; 移植学科代码 :H0424发表论著 :[1] 马良宏 , 邱志军 , 闫圣男 , 冯立新 , 王燕蓉 , 李培军 , 陈福宝 . 枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响 . 中国组织工程研究与临床康复 .2011;15(23):4277-4281.[2] 马良宏 , 丁强 , 冯立新 , 李培军 , 陈福宝 . 精原干细胞冷冻保存后再移植的生精功能 .中国组织工程研究与临床康复 . 2010;14(31): 5767-5772.[3] 马良宏 , 丁强 , 冯立新 , 李培军 , 陈福宝 . 精原干细胞移植后的体内迁移、增殖和分化 .中国组织工程研究与临床康复 .2010;32:5976-5982.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 1 博士 0 硕士 2胎儿淋巴细胞在妊娠期肝内胆汁淤积症发病过程中的作用批准号 :30860305项目负责人 : 谭宗建所在单位 : 贵州省人民医院目的 : 研究胎儿淋巴细胞在妊娠期肝内胆汁淤积症 (ICP) 发病过程中的作用。方法 :检测孕早期、中期和晚期母亲肝酶、胆酸和雌孕激素变化的情况 ; 并采用流式细胞和 PCR短链重复分析法等方法检测 ICP 患者体内胎儿淋巴细胞嵌合情况 , 并检测 IFN-γ、IL-2、IL-4 和 IL-10 的在 ICP 患者皮肤、胎盘等处的表达情况 ; 同时将胎鼠脾脏淋巴细胞注入孕鼠体内以建立 ICP 动物模型 , 并以注射雌激素的孕鼠作为阳性对照、注射生理盐水的孕鼠作为阴性对照 , 比较三者在肝脏酶学、胆酸及免疫状态等方面的变化。结果 : 孕晚期 CG 水平显著高于早孕和中孕期。孕晚期 AST 和 ALT 显著低于早孕和中孕期 ; 晚孕组雌、孕激素显著高于中孕和早孕组。实验组孕鼠出现部分胎鼠死亡 ,ALT、AST 和胆酸升高 ; 阳性对照组有类似变化 , 阴性对照则没有 ; 实验组有显著的 Th1>Th2 免疫反应 , 阳性对照和阴性对照则没有。结论 : 孕中晚期孕妇存在不同程度的胆汁淤积 ,ICP 的发生可能是在孕妇一定程度胆汁淤积的情况下受某些因素诱导而发生。胎鼠淋巴细胞可在孕鼠身上诱导典型的 ICP 模型 , 可能是 ICP 小鼠模型的主要效应细胞。关键词 : 肝内胆汁淤积综合症 ;Th1/Th2 免疫 ; 胎儿淋巴细胞 ; 移植物抗宿主病学科代码 :H0420发表论著 :- 83 -

会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3H05 泌尿系统面上项目CTGF-ILK 通路在介导糖尿病肾病早期足细胞表型改变中的作用及意义探讨批准号 :30870953项目负责人 : 刘必成所在单位 : 东南大学糖尿病肾病 (DN) 是糖尿病常见的严重并发症 , 探讨其早期发病机制具有重要临床意义。本研究成功建立了自发性高血压大鼠 2 型糖尿病早期肾损害模型 , 并应用足细胞培养技术 , 首次发现 CTGF-ILK 在促进足细胞表型改变中发挥重要的作用 , 而血管紧张素 II 受体拮抗剂通过下调 ILK 表达可显著抑制足细胞表型改变。作为本研究的延伸 , 我们率先观察了糖尿病背景下内皮细胞的表型改变 , 发现糖尿病大鼠心肌血管内皮细胞、人主动脉内皮细胞发生了转分化损伤。而 AngII 可能介导了这种内皮细胞损伤的发生 , 上述研究进一步阐明了 DN 微量白蛋白尿形成机制 , 为 DN 早期防治提供了新颖的理论依据。此外 , 我们还探讨了单核细胞对肾小管上皮细胞间充质转分化的影响及其分子机制 , 发现单核细胞浸润可以通过 NF-kB 信号通路上调 ICAM-1 从而诱导小管上皮细胞转分化 , 进一步阐明了影响 DN进展的分子机制。结合上述理论发现 , 我们对临床糖尿病肾病患者开展了转化医学研究 ,成功建立并初步探讨了尿液 mRNA 检测技术在评估 DN 进展中的应用价值 , 发现足细胞相关mRNA、细胞转分化相关 mRNA 与 DN 发展密切相关 , 此为未来研究 DN 早期无创诊断生物标志物提供了重要实验依据。关键词 :CTGF;ILK; 糖尿病肾病 ; 足细胞 ; 表型改变学科代码 :H0510发表论著 :[1]Tang R, Li Q, Lv L, Dai H, Zheng M, Ma K, Liu B. Angiotensin II mediates thehigh-glucose-induced endothelial-to-mesenchymal transition in human aorticendothelial cells. Cardiovasc Diabetol. 2010;9:31.[2]Liu BC, LüLL. Novel biomarkers for progression of chronic kidney disease. ChinMed J (Engl). 2010;123(13):1789-92.[3]Tang RN, Lv LL, Zhang JD, Dai HY, Li Q, Zheng M, Ni J, Ma KL, Liu BC. Effectsof angiotensin II receptor blocker on myocardial endothelial-to-mesenchymaltransition in diabetic rats. Int J Cardiol. 2011.[4]Li Q, Liu BC, Lv LL, Ma KL, Zhang XL, Phillips AO. Monocytes induce proximaltubular epithelial-mesenchymal transition through NF-kappa B dependentupregulation of ICAM-1. J Cell Biochem. 2011;112(6):1585-92.[5]Zheng M, Lv LL, Ni J, Ni HF, Li Q, Ma KL, Liu BC. Urinary podocyte-associated- 84 -

mRNA profile in various stages of diabetic nephropathy. PLoS One.2011;6(5):e20431.[6]Dai HY, Zheng M, Tang RN, Ni J, Ma KL, Li Q, Liu BC. Effects of angiotensinreceptor blocker on phenotypic alterations of podocytes in early diabeticnephropathy. Am J Med Sci. 2011;341(3):207-14.[ 7 ] Zhang JD, Liu BC. Angiotensin II, a missing node in new pathogenicglomerulotubular feedback loop. Med Hypotheses. 2011;77(4):595-7.[8]Zheng M, Lv LL, Cao YH, Zhang JD, Wu M, Ma KL, Phillips AO, Liu BC. UrinarymRNA markers of epithelial-mesenchymal transition correlate with progressionof diabetic nephropathy. Clin Endocrinol (Oxf). 2012;76(5):657-64.[9]Dai HY, Zheng M, Lv LL, Tang RN, Ma KL, Liu D, Wu M, Liu BC. The roles of connectivetissue growth factor and integrin-linked kinase in high glucose-inducedphenotypic alterations of podocytes. J Cell Biochem. 2012;113(1):293-301.[9] 戴厚永 , 汤日宁 , 马坤岭 , 郑敏 , 倪杰 , 李青 , 张晓良 , 刘必成 . 应用自发性高血压大鼠建立 2 型糖尿病早期肾损害模型 . 中华肾脏病杂志 . 2010;26(1):48-51.[10] 戴厚永 , 郑敏 , 汤日宁 , 马坤岭 , 倪杰 , 李青 , 刘必成 . 厄贝沙坦对早期糖尿病肾病大鼠足细胞损伤及整合素连接激酶的影响 . 中国病理生理杂志 . 2010;11:2175-2179.[11] 许莉敏 , 刘必成 . 结缔组织生长因子对足细胞相关蛋白表达的影响 . 肾脏病与透析肾移植杂志 . 2010;3:212-218.[12] 汤日宁 , 戴厚永 , 李青 , 吕林莉 , 张建东 , 马坤岭 , 刘必成 . 血管紧张素 Ⅱ 介导高糖诱导的人主动脉内皮细胞转分化 . 中国糖尿病杂志 . 2011; 19(5):361-365.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 7 硕士 2获奖 :[1] 获奖 : 刘必成 . 肾脏纤维化诊治基础及临床研究 . 中华人民共和国教育部 , 2010 年度教育部科学技术进步奖 ( 二等奖 , 排名第一 ,2010.1)CD2 相关蛋白在足细胞损伤和肾小球硬化中的作用研究批准号 :30871001项目负责人 : 潘晓霞所在单位 : 上海交通大学在筛查了 82 例散发性 FSGS 患者的 CD2AP 基因突变的基础上 , 选取 2 号外显子160G>A(V54I) 的杂合突变作为研究对象 , 通过定点突变、质粒转染小鼠足细胞来研究 V54I突变对 CD2AP 蛋白结构、细胞分布及其它足细胞相关蛋白的影响。结果显示 V54I 突变型CD2AP 对足细胞内 nephrin、podocin 及 synaptopodin 的蛋白表达无明显影响 ,nephrin 及podocin 的 mRNA 水平亦无明显影响 , 但 synaptopodin 的 mRNA 水平在突变型 CD2AP 转染组较野生型 CD2AP 转染组明显下降 (p

的、点块状浓聚 , 尤以核周明显 ; 突变型 CD2AP 过表达使足细胞内 actin 骨架纤维塌陷 , 但未如野生型出现点块状浓聚 , 而仅在胞膜上表达。细胞分裂中期时 , 转染野生型 CD2AP 足细胞内 F-acin 纤维丝环细胞浓聚呈粗纤维状 , 而突变型 CD2AP 转染足细胞内 F-actin 纤维分布完全不同 , 多分布于胞浆内 , 部分区域出现浓聚 , 数量较分裂间期增多。关键词 : 足细胞 ;CD2 相关蛋白 ; 突变学科代码 :H0509发表论著 :[1] 赵彩霞 , 潘晓霞 , 冯晓蓓 , 隆琦 , 王伟铭 , 王朝晖 , 陈楠 . CD2AP 突变对肾小球足细胞骨架蛋白 F-actin 分布的影响 . 上海交通大学报 ( 医学版 ). 2010;30(7): 747-751.[2] 赵彩霞 , 任红 , 王朝晖 , 张文 , 陈晓农 , 沈平雁 , 郝翠兰 , 陈楠 , 潘晓霞 . 膜性肾病伴乙肝病毒感染的病理学改变 . 临床与实验病理学杂志 . 2010;26(5): 543-547.会议报告 : 国际大会 4 分组 4 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1囊泡型 H+-ATPase 的 B1 亚基在其囊泡靶向转运至细胞顶膜的分子机制研究批准号 :30871005项目负责人 : 杨琼琼所在单位 : 中山大学囊泡型 H+-ATPase(V-ATPase) 是调节真核细胞中细胞器及细胞内外 pH 的关键质子泵。其囊泡转运障碍会导致肾小管酸中毒、神经性耳聋、骨质硬化症和肿瘤等许多严重疾病 ,但其调控机制尚不清楚。本课题就是在我们已经建立的稳定表达 B1 亚基突变融合蛋白的IMCD 细胞模型 ( 研究 V-ATPase 靶向转运到细胞顶膜的理想模型 ), 在 B1 亚基突变体的基础上通过基因突变和切除技术等分子生物学技术、合成 B1 和 B2 亚基 C 末端小片段肽进行蛋白质竞争抑制实验等分别证实了以下结果 :(1)B1 亚基 , 而不是 B2 亚基 , 是介导 V-ATPase靶向转运到 IMCD 细胞顶膜的关键亚基 ;(2) 调控细胞酸化后 B1 亚基靶向细胞顶膜的结构可能位于 C 末端 20 个氨基酸系列 , 特别是 DTAL 结构域 ;(3)DTAL 结构域 T 位点磷酸化在介导 B1 亚基靶向细胞顶膜起着关键的调控作用。这一研究的结果为阐明 V-ATPase 胞内靶向转运的分子机制及其 V-ATPase 囊泡转运障碍相关疾病的机制提供一定的理论依据 , 并为将来研发防治新药提供一种新的治疗靶位。关键词 :V-ATPase B1 亚基 ; 基因突变 ; 囊泡靶向转运 ; 肾脏内髓集合管细胞学科代码 :H0507发表论著 :[1]Yang Q, Li R, Zhong Z, Mao H, Fan J, Lin J, Yang X, Wang X, Li Z, Yu X. Is cystatinC a better marker than creatinine for evaluating residual renal function inpatients on continuous ambulatory peritoneal dialysis? Nephrol Dial Transplant.2011;26(10):3358-65.- 86 -

[2]Cao X, Yang Q, Qin J, Zhao S, Li X, Fan J, Chen W, Zhou Y, Mao H, Yu X. V-ATPasepromotes transforming growth factor-β-induced epithelial-mesenchymaltransition of rat proximal tubular epithelial cells. Am J Physiol Renal Physiol.2012;302(9):F1121-32.[3] 曹雪芹 , 赵世莉 , 覃静 , 李晓艳 , 范瑾瑾 , 毛海萍 , 杨琼琼 , 余学清 . 囊泡型H+-ATP 酶 B 亚基在转化生长因子 β1 致肾小管上皮细胞转分化中的变化及其意义 .中华肾脏病杂志 . 2011; 27(6):448-453.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 4细胞连接组成蛋白 PAR3 在肾小管上皮细胞转分化中的作用及其机制研究批准号 :30871033项目负责人 : 聂静所在单位 : 中山大学上皮细胞转分化 (EMT) 是肾间质纤维化的重要机制之一 ,EMT 的始动环节是细胞间连接的破坏。但是 EMT 过程中细胞间连接破坏的分子机制目前尚不清楚。申请者在前期工作中发现 , 在 TGF-beta 1 诱导的大鼠近端小管上皮细胞 (NRK52E) 转分化过程中 , 参与组成紧密连接的信号蛋白 PAR3 的表达呈时间和浓度依赖模式降低 ; 过表达 PAR3 可以延缓 EMT的进程。本研究拟在前期工作的基础上 , 采用免疫印迹、实时荧光定量 PCR,GST pull downassay, 免疫荧光染色等方法检测 PAR3 相关分子 PAR6、aPKC 和 Rac 的表达、分布以及活性在 EMT 过程中的变化 ; 通过建立稳定表达 PAR3 的细胞株观察过表达 PAR3 对上述分子的影响 , 以阐明过表达 PAR3 延缓 EMT 的分子机制 , 为确立 PAR3 对 EMT 的保护作用提供理论依据 ;同时 , 本研究的结果将有助于拓展关于 EMT 过程中细胞连接破坏的分子机制的认识关键词 : 上皮细胞转分化 , 细胞连接 ,PAR3, TGF-beta学科代码 :H0518发表论著 :[ 1 ] Shen SL, Qiu FH, Dayarathna TK, Wu J, Kuang M, Li SS, Peng BG, Nie J.Identification of Dermcidin as a novel binding protein of Nck1 andcharacterization of its role in promoting cell migration. Biochim Biophys Acta.2011;1812(6):703-10.[2]Zhu F, Li T, Qiu F, Fan J, Zhou Q, Ding X, Nie J, Yu X. Preventive effect ofNotch signaling inhibition by a gamma-secretase inhibitor on peritonealdialysis fluid-induced peritoneal fibrosis in rats. Am J Pathol.2010;176(2):650-9.[3]Zhou Q, Fan J, Ding X, Peng W, Yu X, Chen Y, Nie J. TGF-{beta}-induced MiR-491-5pexpression promotes Par-3 degradation in rat proximal tubular epithelial cells.J Biol Chem. 2010;285(51):40019-27.[4]Ding X, Zhu F, Li T, Zhou Q, Hou FF, Nie J. Numb protects renal proximal tubular- 87 -

cells from puromycin aminonucleoside-induced apoptosis through inhibitingNotch signaling pathway. Int J Biol Sci. 2011;7(3):269-78.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0肾淋巴循环障碍致肾小管间质损伤的机制研究批准号 :30871163项目负责人 : 关广聚所在单位 : 山东大学用结扎肾淋巴管的方法建立肾淋巴循环障碍大鼠模型 , 在前期研究基础上 , 观察不同时间点肾淋巴循环障碍后大鼠肾脏微淋巴管结构变化 , 用多功能图像分析系统测量有关数据对其做定量分析 , 为研究病理状态下肾脏大分子物质运输及淋巴形成机制提供实验依据。利用荧光定量 PCR、WESTERN BLOT、免疫组化等技术对肾小管上皮转分化 , 肾小管上皮细胞凋亡的相关指标进行监测 , 并与大鼠肾功能及组织结构的改变进行相关性分析。以明确肾淋巴循环障碍诱导的肾小管上皮细胞凋亡及转分化的分子机制及影响因素 , 为临床寻找有效防治手段提供实验依据 , 为临床越来越多的不明原因的慢性肾损伤寻找新的原发致病因素 , 并可为肾移植时淋巴管的重建提供实验依据。关键词 : 肾脏 ; 淋巴循环 ; 凋亡 ; 上皮细胞转分化 ; 肾损害学科代码 :H0518发表论著 :[1] 柳刚 , 孙玫 , 李德祥 , 张桃艳 , 关广聚 , 陈兵 , 李学刚 . 肾淋巴管结扎对单肾切除大鼠的肾损害作用 . 中国病理生理杂志 . 2009; 9:1768-1774.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 7 硕士 2新型抗凝剂枸橼酸双乙酯代谢过程、抗凝机制与钙转运关系批准号 :30871164项目负责人 : 桂保松所在单位 : 西安交通大学高危出血肾衰竭患者的血液净化抗凝一直是临床上非常棘手的难题。以枸橼酸钠作为局部抗凝剂时容易出现低钙血症、容量负荷增加、碱中毒等不足 , 并需要及时补充钙剂。基于我们前期的研究 , 新型抗凝剂枸橼酸衍生物枸橼酸双乙酯在家兔体外可产生抗凝效果 , 进入体内后可以和钙离子较快解离 , 避免了使用枸橼酸钠作为抗凝剂时出现的并发症。本项目拟采用原子光谱联用技术、核素标记技术、激光共聚焦、膜片钳和动物模型等- 88 -

多种手段 , 从分子、细胞、以及器官水平 , 系统探讨枸橼酸双乙酯代谢过程、抗凝机制和钙转运规律 , 为开发和应用新型抗凝剂用于血液净化提供重要的理论和实验依据 , 从而可能解决高危出血患者血液净化抗凝难题 , 具有广泛的临床应用前景。关键词 : 枸橼酸双乙酯 ; 抗凝剂 ; 高危出血 ; 血液净化学科代码 :H0507发表论著 :[1]Yan Ou, Bin Chen, Xiu-Qiong Yao, Bao-Song Gui, Jin Tan, Jian-Ming Ouyang.Synthesis and characterization and anticoagulation character of a new kind ofanticoagulant diethyl citrate. Asian J. Chem. 2011.12.11 accepted;ID: No.12665/2011.[2]Bin Chen, Yan Ou, Hua Peng, Bao-Song Gui, Xiu-Qiong Yao, Jian-Ming Ouyang.Thermodynamic features of diethyl citrate calcium complexes and factorsaffecting the complex stability. Asian J Chem. 2012.12.1 accepted;ID: No.12668/2011.[ 3 ] Zhao Chen,Bin Chen,Xiu-Qiong Yao,Bao-Song Gui ,Yan Ou.Jian-Ming Ouyang.Anticoagulation of Diethyl Citrate and its Comparison with Sodium Citrate inan Animal Model. Blood Purif. 2012;33:30–36.[4] 陈斌 , 鲁鹏 , 欧阳健明 , 桂保松 . 常见抗凝剂的不足与新型抗凝剂的设计 . 广东医学 .2010;22:2995-2996.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2RhoA/ Rock 信号通路在糖尿病肾病早期肾小管间质病变的发生发展的机制研究批准号 :30871165项目负责人 : 付平所在单位 : 四川大学微量白蛋白尿是临床诊断 DN 的早期主要指标之一 , 也是公认的加速肾小管间质病变进展的独立危险因素。本研究以 Rock-1 基因敲除小鼠建立 STZ 诱导的糖尿病肾病早期模型 , 并设立对照组 , 分别采用免疫组化、Western blot、免疫沉淀、Real time-PCR 等方法检测各组鼠肾近端小管 megalin/cubilin、TGF-β 1、IL-1b 以及细胞外基质 COL-1 的表达变化 , 比较各组鼠肾近端小管对白蛋白的重吸收能力 ; 并应用 Rock 的化学抑制剂 Y-27632,观察 Rock 基因敲除和其化学抑制剂对早期糖尿病肾病微量白蛋白尿的影响。结果发现 :DN早期与微量白蛋白尿密切相关的 megalin/cubilin 表达变化和与肾小管间质纤维化密切相关。并与 RhoA/ Rock 信号通路密切相关。证实了 RhoA/ Rock 信号通路和 megalin/cubilin与糖尿病肾病早期微量白蛋白尿和肾小管间质病变的发生发展中的重要作用。关键词 : 糖尿病肾病 ; 微量白蛋白尿 ; 肾小管间质病变 ;megalin/cubilin; RhoA/Rock- 89 -

信号通路学科代码 :H0510发表论著 :[1]Zhou L, Liu F, Huang XR, Liu F, Chen H, Chung AC, Shi J, Wei L, Lan HY, Fu P.Amelioration of albuminuria in ROCK1 knockout mice with streptozotocin-induceddiabetic kidney disease. Am J Nephrol. 2011;34(5):468-75.[2]Liu F, Gou R, Huang J, Fu P, Chen F, Fan WX, Huang YQ, Zang L, Wu M, Qiu HY,Wei DP. Effect of anaphylatoxin C3a, C5a on the tubularepithelial-myofibroblast transdifferentiation in vitro. Chin Med J (Engl).2011;124(23):4039-45.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 1 博士 1 硕士 5激素抵抗型原发性肾病综合征早期预警和诊断的生物学标志物批准号 :30871166项目负责人 : 余学清所在单位 : 中山大学原发性肾病综合征 (INS) 患者的预后与其对糖皮质激素治疗的反应性密切相关。揭示激素抵抗的发生机制 , 寻找早期预示激素疗效的生物标志物 , 对于提高 INS 患者治疗效果具有重要意义。病理类型对 INS 患者的激素疗效及预后有重要的预示作用 , 因此本项目首先分析了 INS 患者血清、尿液的多肽谱 , 建立了有效区分不同病理类型的肽段谱模型 , 获得较好的敏感性及特异性。鉴于同一种病理类型肾病患者依然存在对激素治疗反应的较大差异 , 我们进一步分析了不同激素疗效患者血清差异蛋白谱 , 发现激素抵抗患者血清中haptoglobin(Hp) 蛋白水平明显高于激素敏感患者及正常对照 , 有望成为潜在的早期预警激素抵抗的生物标志物。同时 , 我们在体外实验中观察到 Hp 蛋白可明显抑制地塞米松所诱导的抗炎介质脂皮素 -1mRNA 的表达。这提示 Hp 可能抑制激素的作用。进一步我们从激素作用信号通路的各个环节探讨了 Hp 抑制激素作用的具体机制。表面等离子共振 (SPR) 技术证实了 Hp 蛋白能与地塞米松结合 , 进而减少游离激素的浓度 , 使激素信号通路下游的激素受体转录活性受到明显抑制 , 最终干扰了激素上调表达抗炎介质的效应。关键词 : 肾病综合征 ; 激素抵抗 ; 生物标志物 ; 蛋白质组学学科代码 :H0509发表论著 :会议报告 : 国际大会 3 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 4- 90 -

脂筏蛋白 caveolin-1 在 AngⅡ 诱导足细胞 nephrin磷酸化改变中的作用及分子机制批准号 :30871167项目负责人 : 丁国华所在单位 : 武汉大学Nephrin 是足细胞裂隙膜重要的结构和信号分子 , 参与血管紧张素 Ⅱ(AngⅡ) 诱导的足细胞损伤 , 其表达和 / 或磷酸化水平改变与蛋白尿密切相关 , 但 AngⅡ 引起 nephrin 改变的分子机制仍不清楚。本项目旨在评价 AngⅡ 对足细胞 nephrin 磷酸化改变的影响 , 并在脂筏平台研究 caveolin-1 在 AngⅡ 诱导 nephrin 磷酸化改变中的作用及分子机制。本项目研究发现 nephrin、caveolin-1 共定位于脂筏结构 caveolae,AngⅡ 刺激后 nephrin 磷酸化水平显著降低 , 同时 caveolin-1 磷酸化水平明显增加 ( 但其总蛋白水平无明显变化 ),AT1由非脂筏层向脂筏层移动 , 并与 nephrin、caveolin-1 形成复合体 ; 利用重组质粒(pEGFPC3-cav-1) 上调足细胞 caveolin-1 表达 , 可以明显加重 AngⅡ 诱导的 nephrin 磷酸化下调及足细胞损伤 , 而用 caveolin-1 siRNA 下调 caveolin-1, 可以明显抑制 AngⅡ 诱导的 nephrin 去磷酸化效应。结论 :AngⅡ 以 caveolin-1 依赖的方式诱导 nephrin 磷酸化水平下调及足细胞损伤。关键词 : 足细胞 ;Nephrin;caveolin-1; 血管紧张素 Ⅱ; 信号转导学科代码 :H0518发表论著 :[1]Chen C, Liang W, Jia J, van Goor H, Singhal PC, Ding G. Aldosterone inducesapoptosis in rat podocytes: role of PI3-K/Akt and p38MAPK signaling pathways.Nephron Exp Nephrol. 2009;113(1):e26-34.[2]Liang W, Chen C, Shi J, Ren Z, Hu F, van Goor H, Singhal PC, Ding G. Disparateeffects of eplerenone, amlodipine and telmisartan on podocyte injury inaldosterone-infused rats. Nephrol Dial Transplant. 2011;26(3):789-99.[3]Ren Z, Liang W, Chen C, Yang H, Singhal PC, Ding G. Angiotensin II induces nephrindephosphorylation and podocyte injury: role of caveolin-1. Cell Signal.2012;24(2):443-50.[4] 黄云芳 , 梁伟 , 丁国华 , 杨红霞 . ACE2 在早期糖尿病大鼠肾脏的表达及意义 . 临床肾脏病杂志 . 2009;9(1):32-34.[5] 余碧影 , 梁伟 , 李珍 , 杨红霞 , 丁国华 . 替米沙坦对高血压大鼠肾脏保护作用和足细胞 Podocalyxin 表达的影响 . 武汉大学学报 ( 医学版 ). 2009 ; 5 期 :587-589+594+702.[6] 易家志 , 梁伟 , 丁国华 , 杨红霞 . 依普利酮对醛固酮输注大鼠肾脏肾素受体表达的影响 . 中国药师 . 2009; 10:1348-1350.[7] 梁伟 , 余碧影 , 丁国华 , 李珍 , 杨红霞 . 舒洛地特对糖尿病高血压大鼠足细胞podocalyxin 表达的影响 . 中华肾脏病杂志 . 2009;25(7):497-502.[8] 王健 , 梁伟 , 陈铖 , 任志龙 , 丁国华 . 血管紧张素 Ⅱ 输注诱导肾小球 ILK 表达改变和肾小球损伤 . 临床肾脏病杂志 . 2010;10(7).324-326.[9] 高召 , 梁伟 , 丁国华 . 替米沙坦对糖尿病大鼠肾脏肾素受体表达的影响 . 中国药师 .- 91 -

2010;4:459-462.[10] 胡凤琪 , 丁国华 , 梁伟 , 余碧影 , 杨红霞 . 舒洛地特对糖尿病高血压大鼠肾脏单核细胞趋化蛋白 1 表达的影响 . 临床肾脏病杂志 . 2010;10(4):178-180.[11] 高召 , 任志龙 , 丁国华 , 梁伟 , 杨红霞 . 糖尿病大鼠肾脏肾素及其受体表达改变 .重庆医学 . 2010;12:1481-1483+1633.[12] 陈铖 , 丁国华 , 易家志 , 朱玲 . 贝那普利对阿霉素肾病大鼠肾脏保护作用的研究 .中国药师 . 2010;9:1223-1225.[13] 陈铖 , 梁伟 , 丁国华 , 易家志 . 舒洛地特对老龄糖尿病大鼠足细胞的保护作用 . 医药导报 .2010; 10:1258-1261.[14] 任志龙 , 梁伟 , 丁国华 , 胡凤琪 , 彭建平 . 重组质粒 pEGFP-C3-caveolin-1 构建及在小鼠足细胞中的表达 . 武汉大学学报 ( 医学版 ). 2:191-195+283.[15] 周敏 , 任志龙 , 梁伟 , 陈铖 , 丁国华 . 小凹蛋白 -1 在血管紧张素 Ⅱ 输注大鼠模型肾小球中表达及意义 . 临床肾脏病杂志 . 2011;11(9): 425-428.[16] 牛伟静 , 胡凤琪 , 任志龙 , 丁国华 . 血管紧张素 Ⅱ 输注对肾小管管周毛细血管密度和肾小管缺氧的影响 . 临床肾脏病杂志 . 2011;11(8):367-369.[17] 武丽娟 , 张静静 , 胡凤琪 , 梁伟 , 陈铖 , 丁国华 . 替米沙坦对糖尿病大鼠肾脏缺氧诱导因子 1α 表达的影响 . 临床肾脏病杂志 . 2011;11(4):177-180.[18] 任志龙 , 梁伟 , 丁国华 , 胡凤琪 , 杨红霞 . 醛固酮对肾小球系膜细胞凋亡的影响 . 中华肾脏病杂志 . 2011;27(11):838-843.[19] 梁伟 , 韦中平 , 任志龙 , 胡凤琪 , 陈铖 , 丁国华 . nephrin 通过 PI3K-Akt 途径抑制血管紧张素 Ⅱ 诱导的足细胞凋亡 . 中华肾脏病杂志 . 2011;27(10):746-751会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 5 硕士 9获奖 :[1] 奖励 : 丁国华 , 梁伟 , 陈铖 , 贾俊亚 , 朱吉莉 , 赖小希 , 杨红霞 , 任志龙 , 胡凤琪 ,石明 , 程晖 , 王瑞 , 杨定平 , 刘红燕 , 杜鹃 . 肾小球足细胞损伤机制及诊治策略研究 . 2011年湖北省科技进步奖 ( 一等奖 , 奖励日期 :2011 年 ).分解尿毒症毒素的基因工程菌的质粒修饰及功能研究批准号 :30871168项目负责人 : 蒋云生所在单位 : 中南大学将固氮斯氏假单胞菌肌酐水解酶基因克隆至乳酸菌 L.laetisNZ9000。酶活性较原始菌提高近 3 倍 ; 较原构建质粒 pMG36e 一 cr 提高近 6 倍。产朊假丝酵母菌的尿酸酶基因克隆至乳酸菌 L.laetisNZ9000, 利用乳酸菌 NICE 系统修饰构建的尿酸氧化酶质粒经转化的乳酸基因工程菌 Llactis 一 PNZ8048 一 UA, 酶活性较原始菌提高 3、5 倍 ; 较原构建质粒- 92 -

L.laetis 一 pMG36e 一 UA 提高 6、6 倍。尿酸酶与肌酐水解酶双基因克隆所构建的基因工程菌喂饲 (5/6 肾切除 ) 实验性肾衰大鼠 4 周。分解尿酸、肌酐和硫酸吲哚酚前后差值分别为41.96umol/L, 46.23umol/L 和 1.43ug/ml. 均有非常显著性差异 P《0.001。并保留乳酸菌原有功能如抗酸抗胃蛋白酶、抗胰蛋白酶、抑菌作用、肠粘膜粘附及降血脂功能。其遗传稳定性可保持 10 代。两株基因工程乳酸菌构建成功。为研制安全有效的分解尿酸治疗高尿酸血症和分解多种尿毒素治疗慢性肾衰两种生物制剂奠定了基础。关键词 : 基因重组 ; 细菌 ; 乳酸杆菌 ; 慢性肾衰 ; 酶学科代码 :H0511发表论著 :[1] 贺丽娟 , 蒋哲峰 , 蒋云生 , 熊文 , 焦闻文 . 乳酸菌对肠粘膜通透性及中小分尿毒素清除的影响 . 中国血液净化 . 2008;7(2):78-80.[2] 熊文 , 蒋哲峰 , 蒋云生 , 贺丽娟 . 双歧杆菌与乳酸杆菌在肾衰大鼠胃肠道不同部位的定植及其对小分子毒素的分解 . 中南大学学报 ( 医学版 ). 2009;34(1): 35-39.[3] 程新 , 张彦新 , 周桂凤 , 蒋云生 . 产肌酐水解酶基因工程菌的构建 . 生物医学工程研究 . 2009;4:299-302.[4] 程新 , 张彦新 , 杨波 , 刘栋 , 陈刚 , 蒋云生 . 产尿酸氧化酶基因工程菌的构建 . 中南药学 . 2009;7(6):401-404.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 4转化生长因子 -β1 诱导腹膜间皮细胞转分化的分子机制批准号 :30871169项目负责人 : 刘伏友所在单位 : 中南大学长期接受腹膜透析的患者可出现腹膜透析效能降低 , 主要表现为腹膜超滤衰竭(UFF), 其原因尚不完全清楚 , 已知 TGF-β 1 在其中起关键作用。最近研究发现 , 腹膜间皮细胞转分化 (EMT) 是 UFF 的始动与可逆阶段 , 因此也是进行干预治疗的最佳环节 , 但 EMT的分子机制尚不明确。本课题采用腺病毒 /TGF-β 1 诱导的腹膜 EMT 动物模型和体外培养的大鼠腹膜间皮细胞 , 使用 Realtime PCR、Western blot、免疫共沉淀、激光扫描显微镜等方法 , 通过观察 E3 泛素连接酶 Arkadia、Smurf2 与 Smad7 结合降解在其中的调节作用 , 深入研究 TGF-β 1 诱导腹膜间皮细胞 EMT 的调控机制。此外 , 使用 miRNA 检测技术 , 分析 miRNA192 对 TGF-β 1 诱导的腹膜间皮细胞 EMT 的调节机制 , 为阻断与逆转TGF-β 1 诱导的腹膜间皮细胞 EMT 提供新的理论基础与治疗靶点。关键词 : 腹膜间皮细胞 ; 转分化 ;Arkadia;microRNA学科代码 :H0516发表论著 :- 93 -

[1] 刘蔚 , 夏运成 , 凌光辉 , 袁曙光 , 彭佑铭 , 孙林 , 刘伏友 . 活性氧簇与高糖腹透液所致腹膜纤维化 . 中国中西医结合肾病杂志 . 2009;10(8):735-737.[2] 邹莎琳 , 凌光辉 , 夏运成 , 袁曙光 , 彭佑铭 , 孙林 , 刘伏友 . EMT 在腹膜纤维化中的作用及意义 . 中国中西医结合肾病杂志 . 2009;10(7): 645-648.[3] 凌光辉 , 朱雪婧 , 夏运成 , 刘伏友 , 彭佑铭 , 段绍斌 , 刘虹 , 刘映红 , 孙林 . 葡萄糖PDS 对单层人腹膜间皮跨细胞电阻及迁移修复能力的影响 . 中南大学学报 ( 医学版 ).2009;34(5):418-424.[4] 周循 , 凌光辉 , 邹莎琳 , 段绍斌 , 肖力 , 孙林 , 刘伏友 . 腹膜透析流出液中人腹膜间皮细胞的培养及转分化特征 . 中国现代医学杂志 . 2010;17:2634-2642.会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 3 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1腺苷 A2A 受体对肾小球免疫炎症反应和肾小球硬化的调控机理研究批准号 :30871170项目负责人 : 申海鹰所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学肾间质纤维化是肾脏疾病进展到终末期肾功能衰竭的最终共同通道。目前肾间质纤维化的治疗没有特效方法。现有的理论认为 , 肾小管上皮细胞向间充质细胞转化 (EMT) 在肾间质纤维化的病理过程中 , 发挥了最重要的作用。肾小管上皮细胞在多种前纤维化细胞因子 (TGF-β 1、CTGF、IL-13) 刺激下 , 向间充质细胞转化 , 细胞表型改变 , 表现为表达 α -平滑肌肌动蛋白 (α -SMA) 的肌成纤维细胞 (MF) 。MF 大量生成细胞外基质 , 导致肾间质纤维化的发生。而单核巨噬细胞分泌的 TGF-β 1 是诱导 EMT 发生的最重要因子。我们前期关于腺苷 A2AR 与肾小球肾炎的实验表明 , 激活腺苷 A2AR 可以显著抑制大鼠肾小球肾炎模型中单核巨噬细胞的聚集。那么激活腺苷 A2AR 导致的单核巨噬细胞聚集减少 , 能否继而抑制 TGFβ1 诱导的 EMT 的发生 , 减少细胞外基质的产生 , 从而减缓或抑制肾间质纤维化的进程。基于以上预实验结果及理论基础 , 我们使用 A2AR 敲除小鼠 , 建立了两种小鼠肾纤维化模型 ,通过药理学实验 , 证实了 , 激活 A2AR 可以明显减轻肾间质纤维化程度 , 其机制可能为激活A2AR 抑制了单核巨噬细胞的聚集 , 继而抑制 TGF-β 1 诱导的 EMT 的发生。关键词 : 肾间质纤维化 ; 单核细胞 ; 腺苷 A2A 受体 ; 敲除学科代码 :H0509发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0血液净化局部枸橼酸抗凝对血液单个核细胞钙瞬态及炎症反应的影响机制批准号 :30871171- 94 -

项目负责人 : 孙雪峰所在单位 : 中国人民解放军总医院在本项研究中 , 我们首先建立了血液单个核细胞分离技术平台 , 并应用激光共聚焦显微镜技术建立了动态、即时检测细胞胞浆和线粒体钙离子浓度的技术平台。其次主要研究了不同强度和时间的低钙环境、以及不同复钙浓度对血液单个核细胞胞浆和线粒体钙浓度的影响 ; 并发现低钙环境与复钙可上调血液单个核细胞的肿瘤坏死因子 -α 、白细胞介素-6、白细胞介素 -10 的 mRNA 和蛋白质表达 , 而线粒体钙通道抑制剂可显著抑制这一效果 ;进而通过前瞻性随机对照临床研究 , 证实以枸橼酸作为抗凝剂实施 CRRT, 有可能通过影响血液单个核细胞胞浆和线粒体的钙离子浓度 , 促进炎症因子表达 , 从而证实了项目申请时提出的假说。在完成项目主要任务基础上 , 从临床需求出发 , 完成了 " 普通肝素抗凝合理剂量的研究 " 和 " 阿加曲班在伴有出血倾向的间断性静脉静脉血液滤过 (IVVH) 患者的有效性和安全性研究 "。本项研究共计发表论文 13 篇 , 其中国际著名专业期刊 Nephrol DialTransplant 1 篇 , 中华医学杂志 3 篇 , 中华肾脏病杂志 2 篇 ; 合计 SCI 收录 2 篇 ,EI 收录2 篇。在全国性学术会议做特邀专题报告 8 次。培养博士研究生 2 名 , 硕士研究生 3 名。全面完成项目任务。关键词 : 枸橼酸 ; 抗凝治疗 ; 血液净化 ; 炎症因子学科代码 :H0516发表论著 :[1]Sun X, Chen Y, Xiao Q, Wang Y, Zhou J, Ma Z, Xiang J, Chen X.. Effects of argatrobanas an anticoagulant for intermittent veno-venous hemofiltration (IVVH) inpatients at high risk of bleeding. Nephrol Dial Transplant. 2011 ;26(9):2954-9.[2]Zhang D, Sun XF, Ma ZF, Zhu HY, Wang YD, Chen XM. Effects of high-fluxhemodialysis on plasma adrenomedullin and sustained hypotension in elderlyhemodialysis patients. Chin Med J (Engl). 2011;124(6):907-10.[3] 张莉 , 孙雪峰 , 张冬 , 马志芳 , 茅玉梅 , 魏日胞 , 陈香美 . 不同抗凝剂对血液透析过程凝血状态的影响 . 中华肾脏病杂志 . 2009;25(5):335-340.[4] 孙雪峰 , 肖青 , 王禹 , 郝丽荣 , 林洪丽 , 张智敏 , 李冀军 , 陈香美 . 七个血液净化中心842 例血液透析患者抗凝方法的流行病学调查及分析 . 中华医学杂志 . 2009;89(9):577-581.[5] 张莉 , 孙雪峰 , 黄静 , 张金萍 , 魏日胞 , 陈香美 . 达肝素钠治疗肾病综合征高凝状态 .中华肾脏病杂志 . 2009;25(7):561-562.[6] 肖青 , 孙雪峰 , 张冬 , 马志芳 , 吴明歌 , 王慧 , 陈香美 . 血液透析患者肝素和低分子量肝素的合理剂量 . 中华医学杂志 . 2010;90(3):187-191.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 8 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 3CIP4 剪接突变体在肾小管上皮细胞转分化的作用及机制研究批准号 :30871172- 95 -

项目负责人 : 徐钢所在单位 : 华中科技大学Cdc42 结合蛋白 4(CIP4) 是一种膜结合蛋白 , 在肿瘤细胞的侵袭中发挥重要的作用。上皮细胞向间充质细胞转分化 (EMT) 是肿瘤侵袭迁移过程中的一个重要生物学现象。而在肾脏中 ,EMT 被认为是肾间质纤维化的主要原因。因此 , 本实验旨在研究 CIP4 在肾小管上皮细胞转分化过程中的作用及可能机制。我们采用大鼠 5/6 肾切除法建立肾纤维化模型 ,模型组大鼠肌酐、尿素氮显著升高 , 肾间质中形成大量条索状纤维结构 ; 免疫印迹及免疫组化结果提示模型组肾小管中 CIP4 表达明显升高。TGF-β 1 刺激 72h 后 ,HK2 细胞形态变长变梭 ;E-cadherin 表达减少 ,α -SMA 表达则明显增加。细胞膜上呈极性分布的 CIP4 随TGF-β 1 刺激时间延长表达逐渐升高并向核内转移。同时我们还发现高表达 CIP4 可促进EMT, 低表达 CIP4 可部分逆转 TGF-β 1 诱导的 EMT。免疫共沉淀结果表明 TGF-β 1 增强 CIP4和 β -catenin 相互作用 , 高表达 CIP4 可促进 β -catenin 酪氨酸 654 位点磷酸化。上述结果表明 CIP4 可能通过影响 β -catenin 磷酸化 , 参与肾小管 EMT, 促进肾间质纤维化。为临床治疗肾间质纤维化提供新的靶点关键词 :CIP4, EMT, TGF-β 1,β -catinen学科代码 :H0511发表论著 :[1]Ge S, Zeng R, Luo Y, Liu L, Wei H, Zhang J, Zhou H, Xu G. Role of protein kinaseC in advanced glycation end products-induced epithelial-mesenchymaltransition in renal proximal tubular epithelial cells. J Huazhong Univ SciTechnolog Med Sci. 2009;29(3):281-5.[2]Zhou Q, Zeng R, Xu C, Liu L, Chen L, Kou P, Pei G, Bai S, Zhang Y, Li C, RongS, Han M, Xu G. Erbin inhibits TGF-β1-induced EMT in renal tubular epithelialcells through an ERK-dependent pathway. J Mol Med (Berl). 2011 Nov 25.[3]Zeng R, Han M, Luo Y, Li C, Pei G, Liao W, Bai S, Ge S, Liu X, Xu G. Role ofSema4C in TGF-β1-induced mitogen-activated protein kinase activation andepithelial-mesenchymal transition in renal tubular epithelial cells. NephrolDial Transplant. 2011;26(4):1149-56.[4] 位红兰 , 曾锐 , 刘林 , 张娟 , 罗昀 , 葛树旺 , 徐钢 . 高表达 PTEN 抑制 TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化 . 华中科技大学学报 ( 医学版 ). 2009;38(6):721-724.[4] 位红兰 , 曾锐 , 张娟 , 罗昀 , 刘林 , 徐钢 . 肾间质纤维化中 DJ-1 抑制抗纤维化因子PTEN 的表达 . 中华肾脏病杂志 . 2009;25(10):782-787.[5] 白寿军 , 张亚敏 , 周巧丹 , 曾锐 , 李彩霞 , 裴广畅 , 许楚瓯 , 葛树旺 , 周欢 , 徐钢 ,刘晓城 . CIP4 在肾间质纤维化中的表达及作用 . 中华肾脏病杂志 . 2010;26(6):453-459.[7] 白寿军 , 张亚敏 , 曾锐 , 许楚瓯 , 刘丽丽 , 周巧丹 , 李彩霞 , 裴广畅 , 葛树旺 , 徐钢 ,刘晓城 . CIP4 对转化生长因子 β1 诱导的人肾小管上皮细胞 - 间充质转分化的影响 .中华肾脏病杂志 . 2011;27(4):282-287.[8] 周巧丹 , 寇沛 , 许楚瓯 , 曾锐 , 白寿军 , 裴广畅 , 张亚敏 , 韩敏 , 刘丽丽 , 徐钢 .Erbin 在肾间质纤维化中的表达和作用 . 中华肾脏病杂志 . 2011;27(5):351-359.- 96 -

会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2蛋白激酶 C-α 在尿浓缩功能中的作用机制研究批准号 :30871173项目负责人 : 姚丽君所在单位 : 华中科技大学既往研究表明 , 蛋白激酶 C(PKC)-α 参与调节肾脏尿浓缩功能 , 其发挥作用的主要场所为内髓集合管上皮细胞 (IMCD)。水通道蛋白 2(AQP2) 与尿素转运蛋白 A(UTA, 包括 A1-3)是肾脏 IMCD 中参与调节水和尿素转运的两种主要转运蛋白 , 它们中任何一种功能缺失都导致小鼠尿浓缩功能异常。本研究通过使用 PKC-α siRNA 质粒尾静脉注射以及脂质体转染的方法构建了 PKC-α 基因敲低小鼠以及稳定转染 AQP2 以及 UTA1 的 IMCD3 细胞。采用 RT-PCR、Western Blot、激光共聚焦显微技术以及免疫共沉淀技术 , 检测 PKC-α 与 AQP2 以及 UTA1/A3 的相互关系。本研究发现 ,PKC-α 通过影响细胞骨架蛋白的聚合状态参与调节 AQP2的转运 ,PKC-α 的活性状态影响 PKC-α 与 UTA 以及 AQP2 的相互作用。此外 , 采用本实验室自己制备的 UTA1 抗体以及免疫印迹技术 , 本研究发现高渗可诱导小鼠 mIMCD3 细胞株表达UTA2 蛋白 , 因此本研究结果拓宽了 mIMCD3 细胞株的使用范围 , 有助于进一步完善尿浓缩调节机制 , 从而为寻找有效的尿崩症治疗新靶点提供理论依据。关键词 : 蛋白激酶 C-α ; 尿浓缩 ; 水通道蛋白 2; 尿素转运蛋白学科代码 :H0507发表论著 :[1]Jin W, Yao X, Wang T, Ji Q, Li Y, Yang X, Yao L. Effects of hyperosmolalityon expression of urea transporter A2 and aquaporin 2 in mouse medullarycollecting duct cells. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 2012;32(1):59-64.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 2 博士 1 硕士 5HIF-1α 和 2α 在肾脏晚期缺血预适应中的作用及相关功能基因的研究批准号 :30871176项目负责人 : 丁小强所在单位 : 复旦大学低氧诱导因子 (HIF) 在细胞氧自稳调节中起关键作用 , 主要有 HIF-1α 和 HIF-2α 两种亚型 , 在肾脏的分布和调控基因不同 , 对肾病进展的作用可能亦有不同。本课题首先建立了肾脏晚期 IPC 小鼠模型 , 观察 IPC 后不同时间 HIF-1α 、HIF-2α 及下游基因 VEGF 和GLUT-1 在肾小管间质分布、表达和活化情况 , 研究它们在肾脏晚期 IPC 中各自的作用。结- 97 -

果发现 , 晚期 IPC 可以通过诱导 HIF-1α 、HIF-2α 高表达增加小管细胞的耐缺氧能力 , 且二者在缺血再灌注后表达趋势类似 , 在肾组织的细胞分布不同 ;HIF 对晚期 IPC 的保护作用可能通过调控 VEGF 和 GLUT-1 实现的。接着 , 我们在体外采用 siRNA 技术分别抑制 HIF-1α和 HIF-2α 表达 , 观察其在低氧状态下对 HK-2 的作用和机制。结果发现 ,HK-2 细胞中GLUT-1 和 VEGF 的表达和 HIF-1α 、HIF-2α 的表达呈同步变化 , 分别 siRNA HIF-1α 或 HIF-2α 均可下调 VEGF 和 GLUT-1 的表达从而加重低氧性损伤。总之 ,IPC 通过同时诱导 HIF-1α 、HIF-2α 高表达减轻缺氧所致的肾损伤 , 其机制与同时促进 VEGF 和 GLUT-1 表达有关。关键词 :HIF-1α ;HIF-2α ; 晚期缺血预适应 ; 肾脏学科代码 :H0511发表论著 :[1]Jiang S, Chen Y, Zou J, Xu X, Zhang X, Liu C, Fang Y, Ding X. Diverse effectsof ischemic pretreatments on the long-term renal damage induced byischemia-reperfusion. Am J Nephrol. 2009;30(5):440-9.[2] 陈越 , 蒋素华 , 朱加明 , 钟一红 , 傅辰生 , 刘红 , 方艺 , 丁小强 . 小分子 RNA 干扰沉默缺氧诱导因子 1α 加重缺氧状态肾小管上皮细胞的生长抑制和坏死 . 中华肾脏病杂志 . 2010;26(7):530-536.[3] 俞小芳 , 丁小强 , 朱加明 , 方艺 , 邹建洲 , 许讯辉 , 蒋素华 . 5/6 肾切除大鼠低氧诱导因子 1α 和 2α 在肾内的表达和定位 . 中华肾脏病杂志 . 2010;26(9):689-695.[4] 蒋素华 , 邹建洲 , 刘红 , 任丽 , 许迅辉 , 陈越 , 丁小强 . 通过短时间预缺血改变肾小管上皮细胞命运诱导肾脏缺血耐受 . 中华肾脏病杂志 . 2011;27(3):198-202.[5] 徐夏莲 , 蒋素华 , 许迅辉 , 刘红 , 丁小强 . 晚期缺血预适应促进低氧诱导因子的表达 , 减轻肾脏缺血再灌注损伤 . 中国病理生理杂志 . 2011;27(2):320-325.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1RGC-32 参与 TGF-β1 诱导肾小管上皮向间充质细胞转化的分子调控机制批准号 :30871177项目负责人 : 黄文彦所在单位 : 复旦大学肾小管上皮 - 间充质细胞转化 (EMT) 在肾间质纤维化发生发展中发挥重要作用 ,TGF-β1 为 EMT 最重要的诱导因子 , 但其确切的分子调控机制尚远不清楚。晚近我们的工作提示Response Gene to Complement 32(RGC-32) 为 TGF-β 1 信号激活通路下游关键的转录调控因子 , 但其参与调控 EMT 的分子机制不详。本研究在体外培养正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E) 基础上 ,(1) 利用基因克隆 , 基因转染 , 凝胶电泳迁移分析 (EMSA), 染色体免疫共沉淀等技术 , 明确 TGF-β 1 诱导 EMT 过程中 , 与 TGF-β 1 相关的 RGC-32 基因启动子及其调控元件。(2) 利用阻断已知 TGF-β 1 下游信号通路 , 过表达和抑制 RGC-32 等手段 , 初步了解 RGC-32 参与调控 EMT 可能的信号通路以及信号通路间的串话调节。从而为阐明 TGF-β 1介导 EMT 的分子机制提供理论依据。- 98 -

关键词 : 肾间质纤维化 ; EMT; RGC-32; 基因调控 ; 信号转导学科代码 :H0503发表论著 :[1]Huang WY, Li ZG, Rus H, Wang X, Jose PA, Chen SY. RGC-32 mediates transforminggrowth factor-beta-induced epithelial-mesenchymal transition in human renalproximal tubular cells. J Biol Chem. 2009;284(14):9426-32.[2]Huang WY, Xie W, Guo X, Li F, Jose PA, Chen SY. Smad2 and PEA3 cooperativelyregulate transcription of response gene to complement 32 in TGF-β-inducedsmooth muscle cell differentiation of neural crest cells. Am J Physiol CellPhysiol. 2011;301(2):C499-506.[3]Niu XL, Kuang XY, Zhang ZG, Liu XG, Zhao ZH, Zhang X, Xu H, Huang WY. Expressionof response gene to complement-32 in renal tissue of children withimmunoglobulin A nephropathy. Scand J Urol Nephrol. 2011;45(5):371-6.[4] 钮小玲 , 匡新宇 , 张志刚 , 刘学光 , 赵仲华 , 张欣 , 徐虹 , 黄文彦 . RGC-32 在儿童 IgA肾病肾组织中的表达及意义 . 中华肾脏病杂志 . 2011; 27(7):479-483.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 4多囊蛋白 1 相关蛋白的筛选和作用研究批准号 :30871178项目负责人 : 郁胜强所在单位 : 中国人民解放军第二军医大学常染色体显性多囊肾病是一种最常见的单基因遗传性肾病 , 占肾衰竭病因的第 4 位。虽然 I 型多囊肾病基因 (pkd1) 已克隆 10 余年 , 但囊肿形成机制尚未完全阐明。本项目申请者成功建立了 I 型多囊肾病基因敲入小鼠模型 , 前期研究发现纯合子小鼠肾脏囊肿形成 , 且囊肿仅发生于肾远端小管和集合管。为进一步研究多囊蛋白 1 在囊肿形成中的作用 , 本项目饲养了多囊肾病基因敲入小鼠野生型和纯合子小鼠 , 抽提制备其肾脏蛋白质 ,应用蛋白质二维电泳及质谱分析 , 鉴定出囊肿形成相关差异表达蛋白 , 并进行了初步的验证。通过本研究的开展 , 找到若干个参与囊肿形成的差异表达蛋白 , 为下一步研究囊肿形成机制开阔思路 , 为发现治疗新靶标奠定实验基础。关键词 : 多囊肾病 ; 基因敲入小鼠模型 ; 多囊蛋白 1; 发病机制 ; 蛋白质差异表达学科代码 :H0502发表论著 :[1]Li Y, Santoso NG, Yu S, Woodward OM, Qian F, Guggino WB. Polycystin-1 interactswith inositol 1,4,5-trisphosphate receptor to modulate intracellular Ca2+signaling with implications for polycystic kidney disease. J Biol Chem.- 99 -

2009;284(52):36431-41.[2]Owen M. Woodward, Yun Li, Shengqiang Yu, Patrick Greenwell, Claas Wodarczyk,Alessandra Boletta, William B. Guggino, Feng Qian. Identification of aPolycystin-1 Cleavage Product, P100, That Regulates Store Operated Ca2+ Entrythrough Interactions with STIM1. PLOS One. 2010;5(8):e12305.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0候选 microRNA 反义链干预肾间质纤维化进展的实验研究批准号 :30871179项目负责人 : 苏震所在单位 : 温州医学院肾间质纤维化 (RIF) 是终末期肾病的共同通路。RIF 发病机制尚未完全阐明 , 临床上缺乏有效治疗。目前研究 RIF 多集中于阻断致纤维化因子的转录或表达。但是 , 细胞功能改变也与转录后基因表达的调控相关。近年来发现的 MicroRNA(miRNA) 是基因转录后表达的调控因子。寻找与 RIF 相关的特异 miRNA 及其靶 mRNA 来干预 RIF 很可能是新的突破口。本项目采用茎环 RT-PCR、原位杂交、高通量测序和生物信息学等技术来寻找 5/6 肾切除大鼠和单侧输尿管梗阻 (UUO) 大鼠肾组织及体外培养的大鼠肾小管间质固有细胞中特异 miRNA及其靶 mRNA。使用化学合成的 miRNA mimics 和 inhibitors 来调节肾小管间质固有细胞miRNA 表达 , 验证其效应。用 Sensor Reporter 方法来鉴定候选 miRNA 的靶基因。用超声微泡介导 miRNA 的方法把候选的 miRNA 输入 UUO 小鼠 , 观察候选 miRNA 干预 RIF 的效应。结果发现 8 条 miRNA 与 RIF 密切相关 , 其中 ,miR-29 具有抗纤维化作用 , 首次证实了 Tpm 是miR-29 的靶基因 , 为 miR-29 作为治疗 RIF 的新药提供实验基础。关键词 : 肾间质纤维化 ;microRNA学科代码 :H0503发表论著 :[1]Tu WT, Su Z, Shan YS. An original non-traumatic maneuver for repositioningmigrated peritoneal dialysis catheters. Perit Dial Int. 2009;29(3):325-9.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 8脂氧素 A4 拮抗 CTGF 所致肾小管 EMT 机制中 ILK 途径的研究批准号 :30871180项目负责人 : 吴升华- 100 -

所在单位 : 南京医科大学我们以往的研究发现脂氧素 A4(LXA4) 抑制结缔组织生长因子 (CTGF) 所致的肺成纤维细胞增殖和系膜细胞合成趋化因子。本研究方向为探讨 LXA4 是否调节 CTGF 所致的肾小管上皮细胞向间质细胞转换 (EMT), 并探讨其作用机制。在本课题研究中我们发现 , 应用 LXA4预处理 HK-2 细胞可抑制 CTGF 但不是 TGF-β 1 所致的形态学上成纤维细胞样改变和 α -SMA表达。LXA4 可增加 CTGF 但不是 TGF-β 1 所致的 E- 钙粘蛋白和 ZO-1 表达减少。LXA4 抑制CTGF 所致的 ILK 的表达和活性、Ras 活化、ERK1/2、PI3-K 和 Akt 活化。但是 ,LXA4 不影响 TGF-β 1 所致的 ILK 表达、Smad-2/3 磷酸化、Smad-2 与 Smad-4 的结合和核转位。总之结论为 ,LXA4 抑制 CTGF, 但不是 TGF-β 1, 所致的肾小管上皮细胞 EMT, 是通过下调 CTGF 诱导的 ILK、Ras/MEK/ERK1/2 和 PI3-K/Akt 途径而实现的。对 LXA4 调节 CTGF 所致 EMT 的机制的阐明 , 将为应用 LXA4 类似物治疗肾脏纤维化提供理论和实验依据。关键词 : 脂氧素 A4; 结缔组织生长因子 ; 转化生长因子 ; 整合素连接激酶 ; 上皮细胞向间质细胞转换学科代码 :H0518发表论著 :[1]Wu SH, Zhang YM, Tao HX, Dong L. Lipoxin A(4) inhibits transition of epithelialto mesenchymal cells in proximal tubules. Am J Nephrol. 2010;32(2):122-36.[2] 张永梅 , 吴升华 , 陆超 . 脂氧素 A4 抑制结缔组织生长因子诱导的人肾小管上皮细胞转分化 . 中华肾脏病杂志 . 2009;25(10):809-810.[3] 张永梅 , 吴升华 , 陆超 , 任伟 , 陶慧娴 . 脂氧素 A_4 拮抗 CTGF 所致的人肾小管上皮细胞转分化 . 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ). 2009;29(07):925-929.[4] 陶慧娴 , 吴升华 . 脂氧素 A_4 抑制结缔组织生长因子诱导的肾小管上皮细胞表达整合素连接激酶 . 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ). 2010;30(05):586-590.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3在致肾脏纤维化中血管紧张素 II 1 型受体胞内信号通路乙酰化对基质降解作用的研究批准号 :30871181项目负责人 : 余晨所在单位 : 同济大学肾素 - 血管紧张素系统过度激活是促进肾脏纤维化的因素之一。经典观点认为激活AngII-AT1R-JAK2/STAT3 磷酸化使胞外基质 (ECM) 合成增加。我们的前期研究提出该信号通路也同时发生乙酰化。本课题主要研究 AngII-AT1R-JAK2/STAT3 乙酰化与磷酸化的关系 , 以及其与肾间质纤维化的关系。在 NRK-52E 及 NRK-49F 细胞给予 Ang II 刺激后 , 观察ECM 合成及细胞增殖情况。分别给予 p300/CBP 抑制剂、SIRT1 激动剂、JAK2 抑制剂后观察STAT3 乙酰化、磷酸化及 ECM 合成、细胞增殖的改变。结果表明 ,Ang II 能增加胞浆 P300- 101 -

蛋白 , 使 AT1R 受体发生乙酰化、促进细胞增殖及 ECM 合成。抑制 p300/CBP 可以降低 STAT3Lys685 乙酰化及 Tyr705 磷酸化 , 抑制细胞增殖及 ECM 合成 ; 激活 SIRT1 抑制 STAT3 Lys685乙酰化及细胞增殖 ; 抑制 JAK2 能抑制 Tyr705 磷酸化及细胞增殖 , 但不影响 STAT3 Lys685乙酰化。本研究提示 AngII- AT1R -JAK2/STAT3 乙酰化参与肾间质纤维化的进程 , 干预乙酰化可能是临床治疗的新靶点。关键词 :Ang II; 乙酰化 ; 磷酸化 ;STAT3; 肾脏纤维化学科代码 :H0503发表论著 :[1]Zhou L, Xue H, Wang Z, Ni J, Yao T, Huang Y, Yu C, Lu L. Angiotensin-(1-7)attenuates high glucose-induced proximal tubular epithelial-to-mesenchymaltransition via inhibiting ERK1/2 and p38 phosphorylation. Life Sci. 2012;90(11-12):454-62.[2] 余莹 , 李长明 , 周沛然 , 傅兰君 , Lance Dworkin, 余晨 . 坎地沙坦在炎症过程中抑制氧化应激反应机制的研究 . 同济大学学报 ( 医学版 ). 2010;31(3): 59-63.[3] 齐华林 , 刘峰 , 王俊 , 余晨 , 严海东 . 连续性肾脏替代治疗剂量对急性肾衰竭患者预后影响的荟萃分析 . 中华肾脏病杂志 . 2010;26(12):880-886.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2终末期肾病患者肠道菌群变化在微炎症状态中的地位批准号 :30872457项目负责人 : 蒋红利所在单位 : 西安交通大学目的 : 旨在探讨尿毒症大鼠和 ESRD 病人血中是否有细菌且细菌是否来源于肠道 , 肠道细菌移位是否促进了 ESRD 时微炎症状态的发生。内容 :1. 尿毒症大鼠 21 例 , 假手术组 20 例。2. 慢性肾衰血透组 22 人 , 慢肾衰非透析组 30 人 , 健康对照组 10 人。采用 16SrDNA 焦磷酸测序法检测所有受试大鼠和人粪便、血细菌 DNA 和血透病人透析液细菌 DNA, 检测受试者静脉血高敏 C 反应蛋白 (hs-CRP)、白介素6(IL-6)、血内毒素含量。描述尿毒症大鼠及 ESRD 病人肠道菌群分布特征分析并进行菌群不同组间 ( 血液组之间、肠道组之间、血液和肠道组间 ) 相似性、差异性分析 ; 分析组间炎症因子、内毒素差异。结果 : 病例组部分患者发现细菌且血细菌全部能在肠道中找到相同菌门和几乎全部菌属。病例组血 hs-CRP、IL-6 值均高于对照组 , 组内血细菌 DNA 阳性亚组和细菌 DNA 阴性亚组有统计学差异。病例组血细菌 DNA 阳性大鼠和病人的血细菌基因组 DNA 浓度和炎症因子CRP、IL-6 变化均呈正相关。结论 : 尿毒症时发生肠道菌群移位 , 并促进了微炎症状态的发生。科学意义 : 通过改变 ESRD 时的肠道菌群或抑制肠道菌群移位 , 可减轻微炎症状态。- 102 -

关键词 : 终末期肾病 ; 微炎症状态 ; 菌群失调学科代码 :H0511发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0MICA 基因及其抗体在肾移植排斥反应中的作用机制与干预策略研究批准号 :30872530项目负责人 : 侯建全所在单位 : 苏州大学近年的研究表明 , 主要组织相容性一类相关链 A 基因 (MHC Class 1 Chain-related A,MICA) 在无 HLA 基因致敏性肾移植排斥反应中具有重要的免疫作用 , 但哪些 MICA 基因亚性和MICA 抗体类型在免疫排斥中居于主导地位尚待阐明。本课题拟通过检测 MICA 基因亚型和 MICA 抗体类型 , 结合临床病例研究 , 确定在免疫排斥反应中起关键作用的 MICA 抗体类型和基因亚型并测序鉴定 ; 同时 , 在酵母表达体系表达相应的 MICA 抗原肽 , 进而制备并纯化抗 MICA 多克隆抗体 ; 利用 MICA 抗体构建预存 MICA的大鼠动物模型 , 通过体内研究 MICA 抗体在移植排斥中的作用 ; 分析免疫抑制剂雷帕霉素和硫唑嘌呤对大鼠肾移植后产生 MICA 抗体的影响 , 制定合理有效的降低体内 MICA 抗体产生的治疗方案 , 并体外分析免疫抑制剂发挥作用的可能途径。本项目旨在为建立一套适合于临床的 MICA 的实验诊断、随访和治疗体系奠定基础。关键词 : 肾移植 ; 排斥反应 ; 主要组织相容性一类相关链 A 基因 ; 免疫抑制剂 ; 治疗学科代码 :H0512发表论著 :[1]He J, Li Y, Bao X, Qiu Q, Yuan X, Xu C, Shen J, Hou J. Common and well-documented(CWD) alleles of human leukocyte antigen-A, -B, -C, -DRB1, and -DQB1 loci forthe Chinese Han population do not quite correlate with the ASHI CWD alleles.Hum Immunol. 2012;73(1):61-6.[2] 袁晓妮 , 何军 , 侯建全 , 王乾 , 李强 , 鲍晓晶 , 邱桥成 , 李扬 , 王云炎 , 温端改 . 抗人类白细胞抗原与抗组织相容性 Ⅰ 类相关链 A 位点特异性抗体对移植肾功能的监测价值 . 中华实验外科杂志 . 2009;10(26):1266-1268.[3] 何军 , 侯建全 , 袁晓妮 , 温端改 , 鲍晓晶 , 邱桥成 , 王乾 , 钟键 , 李强 . 组织相容性Ⅰ 类相关链 A 位点基因多态性在预判肾移植物排斥中的意义 . 中华细胞与干细胞移植杂志 . 2009;10(2):12-17.[4] 钟键 , 侯建全 , 何军 , 王乾 , 袁晓妮 , 温端改 . 组织相容性 Ⅰ 类相关链 A 位点基因抗体与慢性移植肾功能减退的相关性研究 . 中华泌尿外科杂志 . 2009;30(3):163-166.[5] 王云炎 , 侯建全 , 何军 , 袁晓妮 , 张江磊 , 温端改 . 主要组织相容性复合体 -I 类相关- 103 -

链 A 抗原刺激内皮细胞增殖及其分泌功能的变化 . 中华实验外科杂志 . 2010;27(6):22-25.[6] 侯建全 , 何军 , 袁晓妮 , 王乾 , 王云炎 , 李强 , 张江磊 , 李琛 , 鲍晓晶 , 邱桥成 , 李扬 ,温端改 . 抗 HLA 和 MICA 抗体的表达对移植肾功能和急性排斥反应的预示作用 . 中华器官移植杂志 . 2010;31(6):343-347.[7] 王云炎 , 侯建全 , 何军 , 袁晓妮 , 邱桥成 , 温端改 . 外源性抗原诱导内皮细胞增殖及其 MICA 分子的表达 . 中华泌尿外科杂志 .2010;31(3):72-74.[8] 李琛 , 侯建全 , 何军 , 张光波 , 袁晓妮 , 魏雪栋 . 肾移植患者血清中可溶性 B7-H3 水平的变化及其临床意义 . 中华实验外科杂志 . 2011;28(5):805-808.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 5获奖 :[1] 奖励 : 侯建全 . 动态分析抗 MICA 和抗 HLA 特异性抗体在判断肾移植物功能中的意义 .江苏省卫生厅 , 江苏省卫生厅新技术引进奖 ( 一等奖 , 奖励日期 :2009.12)[2] 侯建全 . 免疫磁珠流式液相芯片技术在移植免疫中的应用 . 江苏省卫生厅 , 江苏省卫生厅新技术引进奖 ( 二等奖 , 奖励日期 :2008.12)肾小管细胞膜磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻对草酸钙结石粘附性的影响及其机制批准号 :30872563项目负责人 : 安瑞华所在单位 : 哈尔滨医科大学目的 : 肾小管上皮细胞膜内层的磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻是诱导草酸钙肾结石形成的重要因素。但 PS 外翻的机制尚不清楚。本课题拟研究这一重要现象的发生机制方法 : 培养肾小管上皮细胞系细胞 ,Annexin V 染色流式细胞仪和激光共聚焦检测 PS外翻。利用荧光基团 NBD 标记的 PS 探针 NBD-PS 标记细胞膜 , 通过测量膜磷脂的运动变化判断磷脂翻转酶类的活性。real-time PCR 和 western blot 检测磷脂爬行酶表达情况。激光共聚焦显微镜观察细胞内钙浓度变化情况。相差显微镜观察一水草酸钙与肾小管细胞的粘附。结果 : 草酸和草酸钙都能引起肾小管细胞膜 PS 外翻 , 且二者引起的 PS 外翻都是由于PS 的内向运动的减弱同时外向运动的增强。草酸显著抑制了氨基磷脂易位酶 (APLT) 的活性 , 对细胞内钙浓度无影响。草酸钙能使细胞内钙浓度上升 , 上调并激活磷脂爬行酶(PLSCR1)。肾小管细胞表达 PS 之后可以显著提高与一水草酸钙 (COM) 的粘附性。结论 : 草酸引发 PS 外翻的原因主要是 APLT 活性减弱。而 PLSCR1 则可能参与了草酸钙引发的 PS 外翻。本实验为肾结石的发生机制提供了新的思路。关键词 : 磷脂酰丝氨酸 ; 草酸 ; 一水草酸钙 ; 肾小管上皮细胞 ; 肾结石学科代码 :H0506发表论著 :- 104 -

[1]Yu SL, Gan XG, Huang JM, Cao Y, Wang YQ, Pan SH, Ma LY, Teng YQ, An RH. Oxalateimpairs aminophospholipid translocase activity in renal epithelial cells viaoxidative stress: implications for calcium oxalate urolithiasis. J Urol.2011;186(3):1114-20.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2表达产甲酸草酸杆菌草酸分解基因的肝干细胞移植治疗高草酸尿症的实验研究批准号 :30872564项目负责人 : 叶章群所在单位 : 华中科技大学高草酸尿症是泌尿系结石最重要的发病因素之一 , 也可导致草酸沉积症、肾钙质沉着等代谢紊乱 , 严重高草酸尿如原发性高草酸尿常引起青少年期的终末期肾功能衰竭和死亡。迄今对于内源性高草酸尿尤其是原发性高草酸尿的病因治疗尚缺乏有效手段。本研究采用上一个国家自然科学基金研究中已成功克隆构建的表达产甲酸草酸杆菌草酸分解基因frc 和 oxc 及重组真核表达载体 , 分别构建相应的慢病毒过表达载体 , 同时酶消化法联合机械分离法原代分离培养的胚胎来源肝干细胞 , 慢病毒转染筛选后使肝干细胞获得草酸分解功能。并利用肝干细胞移植技术 , 将转基因肝干细胞移植入特发性高草酸尿大鼠体内 , 了解对高草酸尿的治疗作用。本研究的实施 , 不仅对严重威胁生命的原发性高草酸尿的治疗探索了全新途径 , 对于临床上更多见的特发性草酸钙结石的病因治疗亦有重要的实用价值。关键词 : 高草酸血症 ; 产甲酸草酸杆菌 ; 慢病毒载体 ; 肝干细胞 ; 草酸分解基因学科代码 :H0506发表论著 :[1] 杨欢 , 陈志强 , 叶章群 , 王博涵 , Yussupbayeva, Aliya, 姚炜敏 , 夏丁 , 余虓 , 刘冠琳 , 孔德波 , 姚林方 . 产甲酸草酸杆菌 FRC 基因慢病毒表达载体构建及鉴定 . 中华泌尿外科杂志 . 2011;32(2): 141-142.[2] 杨欢 , 叶章群 , 陈志强 , 王博涵 , 刘冠林 , 余虓 , 郭辉 , 夏丁 . 大鼠胚胎来源肝干细胞分离纯化方法的比较 . 中华实验外科杂志 . 2010;27(12):1922-1924.[3] 杨欢 , 叶章群 , 陈志强 , 王博涵 , 姚炜敏 . 稳定表达绿色荧光的大鼠胚胎来源肝干细胞研究 . 中国组织工程研究与临床康复 . 2010;14(23):4295-4298.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 6 硕士 1- 105 -

内脏高敏感性与逼尿肌不稳定发生的关系研究批准号 :30872565项目负责人 : 徐祗顺所在单位 : 山东大学膀胱逼尿肌过度活动被发现与肠易激综合征有协同发生的倾向 , 内脏神经是联系膀胱和消化道两种平滑肌器官的纽带 , 系统性的内脏高敏感性可能是二者共同的发病基础。基于上述假设 , 我们试图对内脏高敏感性与 DO 的发生之间的关系作进一步的研究。结果发现 (1)DO 发生时有膀胱水平的内脏高敏感参与 ;(2)DO 发生时不存在脊髓水平的内脏神经高敏感性及其伴发的其他平滑肌器官的过度活动 ;(3) 内脏高敏感动物模型存在膀胱 DO的发生 , 并有膀胱和脊髓水平内脏高敏感的存在。本课题所取得的研究成果表明系统性的内脏高敏感性参与了膀胱 DO 发生 , 这将使我们以一个崭新的角度即整体的观念理解 DO 发生。关键词 : 逼尿肌过度活动 ; 膀胱 ; 内脏高敏感 ; 脊髓学科代码 :H0514发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2获奖 :[1] 专利 : 张念昭马林陈军徐祗顺 . 大鼠尿流动力学检测控制笼 . 中国发明专利 ( 专利号 :ZL201020684832.7, 证书号 : 第 1886321 号 , 授权公告日 :2011.8.10)T 型钙通道及其亚型在膀胱起搏细胞 (ICC) 兴奋调控中的作用及机制研究批准号 :30872566项目负责人 : 李龙坤所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学逼尿肌兴奋性异常可致多种功能性疾病。针对目前经典的神经机制学说和神经受体药物临床疗效不佳 , 有关膀胱的肌源性兴奋研究有较重要意义。在前期研究中 , 我们成功分离出膀胱 ICC 细胞 , 检测到其自动除极电流 , 证实此电流还可以通过细胞间连接传导 , 并影响全膀胱 , 表明 ICC 细胞可能是膀胱起搏系统的核心。我们还发现 T 型钙通道是影响膀胱兴奋性的主要通道之一 , 但 T 型钙通道在膀胱 ICC 细胞中的作用尚未见报道。我们前期实验还证实膀胱 ICC 细胞中存在 T 型钙通道 , 提示其可能是兴奋调控的重要环节。本项目拟对比膀胱 ICC 细胞中 T 型钙通道各亚型的表达和对兴奋调控作用的差异 , 以及单细胞牵张负荷、T型钙通道阻断对 ICC 细胞兴奋的影响 , 并以 T 通道各亚型质粒正义转染正常膀胱 ICC 细胞 ,以及反义阻断不稳定膀胱 ICC 细胞 , 系统阐明 T 型钙通道及其亚型在膀胱 ICC 细胞兴奋调控中的作用和机制 , 为探讨膀胱兴奋性和逼尿肌不稳定的治疗提供全新的思路。关键词 :T 型钙通道亚型 ;ICC 细胞 ; 膀胱 ; 兴奋调控 ; 尿动力学- 106 -

学科代码 :H0515发表论著 :[1]Wang Y, Fang Q, Lu Y, Song B, Li W, Li L. Effects of mechanical stretch oninterstitial cells of Cajal in guinea pig bladder. J Surg Res.2010;164(1):e213-9.[2]Min Y, He P, Wang Q, Jin X, Song B, Li L. The effects of the c-kit blocker glivecon the contractile response of urinary bladder. J Surg Res. 2011;171(2):e193-9.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 05- 羟色胺类物质改善脊髓损伤排尿障碍的实验研究批准号 :30872568项目负责人 : 谷宝军所在单位 : 上海交通大学下尿路正常的储尿和排尿功能依赖于膀胱、尿道及尿道外括约肌的协同作用。逼尿肌- 括约肌失协调导致的排尿障碍是骶髓以上水平脊髓损伤最常见的下尿路病变 , 也可能发生于脑血管意外、多发性硬化症、以及糖尿病神经病变等疾病。研究通过动物实验证实了 5-羟色胺类物质对脊髓损伤及糖尿病导致的逼尿肌括约肌失协调有明确改善作用 , 并且筛选出了 5- 羟色胺受体中 5-HT1A 和 5-HT7 亚型的激动剂可以作用于脊髓中控制膀胱传出神经的骶髓副交感神经核以及控制尿道外扩约肌运动神经的 Onuf's 核内受体 , 从而改善排尿期膀胱逼尿肌和尿道括约肌的协调功能。即提高排尿效率、减少膀胱残余尿 , 从而降低膀胱内压、保护肾脏功能。为开发利用 5- 羟色胺类新药治疗改善逼尿肌 - 括约肌失协调提供了理论基础和动物实验证据。关键词 : 脊髓损伤 ; 糖尿病 ; 排尿障碍 ; 尿道括约肌 ;5- 羟色胺。学科代码 :H0515发表论著 :[1] 谷宝军 , 刘峰 , Zhongguang YANG, 司捷旻 , 徐月敏 . K 一 2 阿片受体激动剂诱发大鼠膀胱括约肌和尿道外括约肌失协调 . 临床泌尿外科杂志 . 2009; 24(8): 624-626.[2] 程曙杰 , 吴刚 , 曹海兵 , 谷宝军 . 脑室内注射 5- 羟色胺受体激动剂对正常清醒大鼠排尿反射的影响 . 中国新药与临床杂志 . 2011; 30(3): 203-207.[3] 曹海兵 , 吴刚 , 程曙杰 , 谷宝军 . 5-HT1A 受体激动剂改善脊髓损伤大鼠排尿功能障碍的实验研究 . 中华泌尿外科杂志 . 2011; 32(12): 850-853.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5- 107 -

靶向 IGF-BP3 短发夹 RNA 治疗糖尿病大鼠勃起功能障碍的研究批准号 :30872572项目负责人 : 王行环所在单位 : 武汉大学IGFBP-3 在糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体中表达增高 , 本课题基于我们的前期研究结果 , 结合 RNA 干扰技术 , 设想通过沉默 IGFBP-3 这一影响血管扩张的重要基因 , 能够提高糖尿病大鼠的勃起功能。首先筛选出针对大鼠 IGFBP-3 的最佳 shRNA 靶序列 , 构建质粒 shIGFBP-3, 在体外用 IGFBP-3 靶向的 shRNA 干扰原代培养的阴茎海绵体平滑肌细胞(corpus cavernosum smooth muscle cell, CCSMC), 观察其沉默效率 , 筛选出高效特异的 RNA 干扰片段 ; 再行阴茎海绵体注射 shRNA, 观察对阴茎海绵体勃起功能的影响 , 为临床开发 ED 基因治疗药物提供前期的研究基础。结果显示 : 糖尿病大鼠阴茎海绵体注射 shRNAIGFBP-3 shRNA 可改善究其勃起功能 , 且 IGFBP-3 mRNA 和蛋白的表达均明显降低 , 究其原因可能与阴茎海绵体平滑肌密度和阴茎海绵体组织中 cGMP 含量的升高有关。关键词 :IGFBP-3, 勃起功能障碍 , 糖尿病 , RNA 干扰技术学科代码 :H0510发表论著 :[1]Yang ZH, Wang XH, Wang HP, Hu LQ. Effects of TRPM8 on the proliferation andmotility of prostate cancer PC-3 cells. Asian J Androl. 2009;11(2):157-65.[2]Yang ZH, Wang XH, Wang HP, Hu LQ, Zheng XM, Li SW. Capsaicin mediates cell deathin bladder cancer T24 cells through reactive oxygen species production andmitochondrial depolarization. Urology. 2010;75(3):735-41.[3]Yang Z, Wang X, Zhu G, Zhou Z, Wang Y, Chen D, Meng Z. Effect of surgicalcastration on expression of TRPM8 in urogenital tract of male rats. Mol BiolRep. 2012;39(4):4797-802.[4]Zhou ZY, Yang ZH, Wang XH, Cao H, Chen D, Wang YZ, Zhou HH, Peng M, Liu QL,Wan SP. Increased expression of insulin-like growth factor-binding protein-3is implicated in erectile dysfunction in two-kidney one-clip hypertensive ratsafter propranolol treatment. Asian J Androl. 2011;13(6):851-5.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 1ILT3、ILT4 基因诱导的未成熟树突状细胞在肾脏移植免疫耐受的作用和机制研究批准号 :30872578项目负责人 : 田普训所在单位 : 西安交通大学- 108 -

本研究首先成功构建携带人 ILT3 基因慢病毒载体 ; 建立全新的耐受性 DCs 基因修饰方案 , 即首先利用慢病毒载体感染 DCs 的前体细胞造血干 / 祖细胞 , 经筛选及扩增后 , 培养出表达特定分子的 DCs。此方法由于不会使 DCs 接触病毒载体 , 不会诱发 DCs 成熟 , 特别适合培养表达特定基因的未成熟 DCs 或耐受性 DCs, 采用这种方法成功培养出高纯度的高表达人ILT3 分子的耐受性 DCs。并且这种 ILT3high DCs 在促成熟剂 LPS 存在的培养环境下 , 通过抑致 NF-κ B 信号传导途径 , 降低共刺激分子表达及改变细胞因子分泌谱 , 维持 DCs 未成熟表型 ; 在功能方面 ,ILT3high DCs 具有在体内、体外诱导产生 Tregs 的能力 , 这些 Tregs表达 Foxp3 水平较高 , 且这些 Tregs 在功能上具有明确的免疫抑制能力 ; 成功建立免疫系统人源化 NOD/SCID 小鼠模型 ; 并在此免疫模型的基础上进行异体皮肤移植 , 移植前过继一定数量的供体来源的 ILT3high DCs 可明显的延长移植物存活的时间 , 减轻针对移植物的排斥反应。为完善 DCs 在移植免疫中的作用提供有价值的基础平台 , 并为临床应用 DCs 诱导特异性免疫耐受做出有益的探索。关键词 : 免疫球蛋白样转录体 3, 树突状细胞 , 调节性 T 细胞 , 免疫系统人源化小鼠学科代码 :H0512发表论著 :[1]Jia L, Tian P, Ding C. Immunoregulatory effects of indoleamine 2, 3-dioxygenasein transplantation. Transpl Immunol. 2009;21(1):18-22.[2]Ding C, Tian PX, Xue W, Ding X, Yan H, Pan X, Feng X, Xiang H, Hou J, Tian X.Efficacy of Cordyceps sinensis in long term treatment of renal transplantpatients. Front Biosci (Elite Ed). 2011;3:301-7.[3]Ge G, Tian P, Liu H, Zheng J, Fan X, Ding C, Jin Z, Luo X, Xue W. Inductionof CD4+ CD25+ Foxp3+ T regulatory cells by dendritic cells derived from ILT3lentivirus-transduced human CD34+ cells. Transpl Immunol. 2012 ;26(1):19-26.[4] 葛冠群 , 田普训 , 贾利宁 , 丁晨光 , 靳占奎 , 薛武军 , 丁小明 . 携带人 ILT-3 基因重组慢病毒载体的构建与鉴定 . 细胞与分子免疫学杂志 . 2010; 26(12):1306-1307.[5] 贾利宁 , 田普训 , 薛武军 , 丁小明 , 潘晓鸣 , 项和立 , 靳占奎 . 免疫球蛋白样转录物3 和 4 在肾移植受者树突状细胞中表达的意义 . 中华器官移植杂志 . 2010;31(8):478-480.[6] 靳占奎 , 田普训 , 薛武军 , 丁小明 , 潘晓明 , 丁晨光 , 贾利宁 , 葛冠群 , 郝军军 . 联合检测血清 HLA-G5 和 sCD30 水平对评价肾移植受者免疫状态的价值 . 中华医学杂志 .2010; 90(36):2528-2531.[7] 丁晨光 , 田普训 , 燕航 , 薛武军 , 葛冠群 , 靳占奎 , 李杨 . 雷帕霉素对人外周血 T 淋巴细胞上 BTLA 表达的影响 . 细胞与分子免疫学杂志 . 2011; 27(7):751-753.会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 4 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 4获奖 :[1] 奖励 : 田普训 . 陕西省人民政府科学技术奖 . 陕西省科技厅 , 省部级 , ( 一等奖 , 奖励时间 :2009.3)- 109 -

供肾源性补体 C3 对肾移植的免疫调节研究批准号 :30872579项目负责人 : 林涛所在单位 : 四川大学供肾源性的补体 C3 是肾移植后控制排斥反应的关键成分。肾脏中的过客细胞和实质细胞均能合成 C3, 究竟哪种细胞合成的 C3 参与了免疫调节尚不清楚。我们采用骨髓移植建立了" 嵌合 "B6 小鼠 , 这些小鼠只有 APC (APC C3+/+ 组 ) 或只有实质细胞能合成 C3 (APC C3-/-组 )。此后将它们的肾脏移植给 MHC 全错配的 BALB/c 小鼠 , 以接受 B6 骨髓移植同基因移植的 B6 移植给 BALB/c 作为对照。结果发现 APC C3-/- 组的存活时间 (MST=31.38 天 ) 要显著长于其他 2 组 (APC C3+/+ 组 MST=16 天 ; 对照 MST=8.75 ), 表明 APC 源性的 C3 是调控排斥反应的关键。其对排斥反应的抑制并非成熟 DC 的迁移受损 , 而是因为 C3-/- 的 DC 对同种反应性 T 细胞的刺激作用弱于对照 , 且可诱导 CD4 细胞发生 Th2 免疫偏移 , 并增加CD4+CD25+foxp3+ 调节性 T 细胞的生成。APC C3+/+、kidney C3-/- 组移植后 15 天次级淋巴组织中成熟 DC 的数量要少于其他 2 组 , 但肾脏中 Toll 样受体信号传递蛋白 MyD88 和 Trif的 mRNA 较其他 2 组显著上调 , 其机制尚待进一步研究。关键词 : 补体 ; 肾移植 ; 移植免疫 ;Toll 样受体学科代码 :H0512发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2口服 MHC 肽诱导的受体 Treg 源性 exosome 干预肾移植排斥反应的机制研究批准号 :30872580项目负责人 : 黄赤兵所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学排斥反应是移植物失功的主要原因 , 研究显示通过口服耐受机制可内源性诱导抗原特异性 Treg 细胞产生 , 抑制排斥反应 , 减轻移植物损伤 , 但其抗原特异性远端作用机制不明了。我们前期研究表明 , 体外诱导扩增移植抗原特异性 Treg 细胞的培养上清具有抗原特异性免疫抑制功能 , 提示可能蕴含着 Treg 细胞远端抗原特异性调节免疫反应的新机制。目前肿瘤和 DC 细胞分泌的 exosome 已被证实具有抗原特异性免疫调控作用。为探讨 Treg源性 exosome 的抗原特异性免疫抑制功能及相应分子机制 , 本研究拟通过口服供体 MHC 肽诱导受体大鼠内源性产生抗原特异性 Treg 细胞并收集纯化其分泌的 exosome, 然后以过继转移方法通过大鼠肾移植模型和混合淋巴细胞培养等试验在体内外证实 exosome 的生物学功能 , 最后通过蛋白质组学技术探讨 Treg 源性 exosome 的特异性免疫抑制功能的分子基础 , 为应用口服耐受机制治疗排斥反应奠定基础。结果提示体内 exosomes 能延长移植肾存- 110 -

活 , 体外试验提示 exosomes 能抑制 T 细胞增殖。结果暗示 Tregs 源性 exosomes 为 Tregs的一个远端调节机制。关键词 : 肾移植 ; 口服耐受 ; 调节性 T 细胞 ; 外泌体 ; 蛋白质组学学科代码 :H0512发表论著 :[1] 余雪松 , 黄赤兵 , 邹升安 , 范明齐 , 王平贤 , 冯嘉瑜 , 肖亚 . 口服脾细胞对大鼠肾移植后的影响 . 中国组织工程研究与临床康复 . 2011;15(53):9934-9937.[2] 余雪松 , 黄赤兵 , 张艮甫 , 孙帧 . 内支架法在大鼠肾移植模型中的应用 . 局解手术学杂志 . 2011;20(6):595-597.[3] 余雪松 , 黄赤兵 , 范明齐 , 王平贤 , 冯嘉瑜 , 肖亚 . 口服 MHC 肽与 CTB 交联物对大鼠移植肾存活的影响 . 重庆医学 . 2012;41(01):4-7.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 3CORM-3 抑制树突状细胞 TLRs 信号转导的机制及其在肾移植排斥中作用的实验研究批准号 :30872581项目负责人 : 朱有华所在单位 : 中国人民解放军第二军医大学本课题探讨了 CORM-3 对树突状细胞生物学特性和功能的影响以及其对抗移植排斥反应的作用和机制。使用 CORM-3 处理小鼠骨髓来源 DC 和基于小鼠肾移植模型获取的肾固有DC。结果显示 :CORM-3 可显著抑制 DC 表面 TLR4、CD80、CD86 表达 , 显著抑制 LPS 刺激后TNF-α 的分泌和 p38、NF-κ B 的活化 , 降低 DC 刺激 T 细胞增殖能力。但当 TLR4 缺陷之后 ,CORM-3 抑制 DC TNF-α 表达作用不再存在。基于已建立的小鼠肾移植模型的体内实验显示 ,经 CORM-3 处理的供肾可明显延长移植肾存活时间 , 降低移植后血清肌酐水平 , 减轻肾脏病理损伤。此外 ,CORM-3 处理供肾 rDC 移植后 CD80 和 CD86 的表达较对照组降低。因此 ,CORM-3 能够抑制 DC 的活化和成熟 , 改善移植肾预后 , 本课题的研究结果为今后抗移植排斥研究提供新的思路 , 也为新型器官保存液的研发指出了新的方向。关键词 : 肾固有树突状细胞 ; 一氧化碳 ; 排斥反应 ; 肾移植学科代码 :H0512发表论著 :[1]Yuan Q, Hong S, Han S, Zeng L, Liu F, Ding G, Kang Y, Mao J, Cai M, Zhu Y, WangQX. Preconditioning with physiological levels of ethanol protect kidneyagainst ischemia/reperfusion injury by modulating oxidative stress. PLoS One.2011;6(10):e25811.- 111 -

会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 5 硕士 1代谢因子 PPAR 对良性前列腺增生发生的影响及机制批准号 :30872589项目负责人 : 金杰所在单位 : 北京大学良性前列腺增生 (BPH) 是老年男性常见疾病 , 严重影响患者的生活质量 , 但发病机制尚不明确。新近临床研究表明 , 代谢因素在 BPH 的发病中起重要作用。过氧化物酶体增殖物激活受体 (PPAR) 是参与代谢疾病的重要因子 , 并在前列腺组织中表达 , 参与调控前列腺细胞的增殖分化。本课题通过体外实验 , 证实 PPARγ 激动剂能显著抑制前列腺上皮细胞系的增殖 , 促进其凋亡 , 这一过程可能是通过线粒体膜电位去极化 , 提高 Caspase3 活性并下调凋亡相关蛋白 Bcl-2 的表达来实现的。进一步通过体内实验 , 发现 PPARγ 激动剂可以诱导自发性 BPH 大鼠的增生前列腺上皮发生萎缩 , 并诱导前列腺细胞凋亡 , 进一步证实 PPARγ 可通过促进前列腺上皮细胞凋亡而影响前列腺增生。关键词 : 良性前列腺增生 ; 代谢 ;PPARγ ; 增殖 ; 凋亡学科代码 :H0513发表论著 :[1] 郑兰斌 , 赵亚元 , 虞巍 , 郭辉 , 金杰 . 过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 激动剂对前列腺上皮细胞作用的研究 . 中华泌尿外科杂志 . 2010;31(1):52-55.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1雌激素激活基底细胞中的干 / 祖细胞诱导前列腺间质增生作用机制的研究批准号 :30872592项目负责人 : 张琚所在单位 : 南开大学根据前期工作中发现的雌二醇可明显促进体外培养的前列腺增生上皮细胞系 BPH-1表达干 / 祖细胞相关角蛋白 K5 和 K14 的表型 ; 与人正常前列腺组织相比 , 前列腺增生组织基底层细胞中 K5 和 K14 的表达明显增加 ; 雌 / 雄激素诱导去势大鼠前列腺间质增生早期 , 即给药第 1-5 天 , 大多基底细胞呈雌激素受体和 PCNA 以及 SMemb 强染色 , 并在临近基底层的间质中出现 ER 和 PCNA 强染色的细胞克隆等重要的实验结果。提出雌激素激活前列腺基底层中的干 / 祖细胞是前列腺间质增生的初期事件的研究假说。本项目将提供雌激素激活前列腺基底层中干 / 祖细胞是前列腺间质增生早期事件的实验依据 ; 雌激素效应诱导瞬时增强细胞 (TAC) 增殖增加的主要类型 ( 以细胞角蛋白为标志 ,K5,8,15,17,19); 这些- 112 -

TAC 分泌的活性因子促进间质细胞去分化进而激活间质中干 / 祖细胞以及间质细胞可塑性在BPH 发生发展中的作用机制。并阐明雌二醇在前列腺中的生成机制以及抗雌药物雷洛昔芬对雌 / 雄激素诱导的前列腺间质增生的防治作用。关键词 : 干细胞 ; 雌激素 ; 前列腺增生 ; 瞬时增强细胞学科代码 :H0513发表论著 :[1]Zhou Y, Xiao XQ, Chen LF, Yang R, Shi JD, Du XL, Klocker H, Park I, Lee C, ZhangJ. Proliferation and phenotypic changes of stromal cells in response to varyingestrogen/androgen levels in castrated rats. Asian J Androl. 2009;11(4):451-9.[2]Zhang Z, Wang L, Mei M, Zhu Y, Du X, Lee C, Park I, Zhang J, Shi J. Both nongenomicand genomic effects are involved in estradiol's enhancing the phenotype ofsmooth muscle cells in cultured prostate stromal cells. Prostate.2010;70(3):317-32.[3]Yang R, Ma YX, Chen LF, Zhou Y, Yang ZP, Zhu Y, Du XL, Shi JD, Ma HS, ZhangJ. Antagonism of estrogen-mediated cell proliferation by raloxifene inprevention of ageing-related prostatic hyperplasia. Asian J Androl.2010;12(5):735-43.[4]Miao L, Shi J, Wang CY, Zhu Y, Du X, Jiao H, Mo Z, Klocker H, Lee C, Zhang J.Estrogen receptor-related receptor alpha mediates up-regulation of aromataseexpression by prostaglandin E2 in prostate stromal cells. Mol Endocrinol.2010;24(6):1175-86.[5]Yu L, Wang CY, Shi J, Miao L, Du X, Mayer D, Zhang J. Estrogens promote invasionof prostate cancer cells in a paracrine manner through up-regulation of matrixmetalloproteinase 2 in prostatic stromal cells. Endocrinology.2011;152(3):773-81.[6] 苗琳 , 周颖 , 石建党 , 杜小玲 , 焦鸿丽 , 张琚 . 雌二醇通过 TGFβ1 促进前列腺间质细胞 MMP-2 的表达 . 中国生物化学与分子生物学报 . 2009;25(08):712-718.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 2获奖 :[1] 专利 : 张琚 , 石建党 , 杨睿 , 杜小玲 , 马洪顺 , 杨占坡 . 雷洛昔芬类化合物在制备防治良性前列腺增生症药物中的应用 . 中国发明专利 ( 专利号 :CN200810152333.0, 授权公告日 :2008.10.15)应力刺激对组织工程膀胱细胞生长及材料结构优化构建作用的实验研究批准号 :30872593项目负责人 : 王坤杰所在单位 : 四川大学- 113 -

探索构建组织工程膀胱一直是泌尿界研究的焦点 , 但目前仍旧缺乏有效地整合各种种子细胞与支架材料的方法。来自血管及骨材料的研究结果表明 : 要促进细胞的充分分化和促进细胞与基质的有机结合 , 适当的应力刺激十分重要。目前泌尿系统组织工程的大多数研究尚未注意和重视到生物应力的重要作用。本研究拟探索生物应力刺激下膀胱生物材料中各型种子细胞分化和功能成熟及材料组织结构优化的特点 , 找寻有利于细胞功能分化成熟和组织结构合理化的应力特征参数和施加方案 , 并就应力与膀胱平滑肌细胞生物学效应的具体机制进行初步探索。为此 , 本研究成功构建两套仿膀胱应力刺激培养系统 , 同时培养出可以用于膀胱组织工程的三种种子细胞、制备出两种支架材料 , 并良好的完成细胞与基质复合 , 从而摸索出能够促进种子细胞生长的压力参数。在此基础上 , 首次证实周期性流体压力促进膀胱平滑肌细胞增殖 , 并发现了部分关键应力诱导膀胱平滑肌细胞增殖的信号转导途径如 PI3K/SGK1、Rac1-MAPK、Integrin-FAK 等信号通路。本项目研究结果为体外构功能化组织工程膀胱奠定了基础 , 并为泌尿系疾病如 BOO、OAB 提供了新的治疗靶点 , 对建立安全膀胱有重要意义。关键词 : 应力 ; 组织工程 ; 膀胱 ; 生物反应器学科代码 :H0514发表论著 :.[1]Wei X, Li DB, Xu F, Wang Y, Zhu YC, Li H, Wang KJ. A novel bioreactor to simulateurinary bladder mechanical properties and compliance for bladder functionaltissue engineering. Chin Med J (Engl). 2011;124(4):568-73.[2]Jiang X, Wang K, Ding M, Li J, Tan H, Wang Z, Fu Q. Quantitative grafting ofpeptide onto the nontoxic biodegradable waterborne polyurethanes to fabricatepeptide modified scaffold for soft tissue engineering. J Mater Sci Mater Med.2011;22(4):819-27.[3]Xu F, Wang Y, Jiang X, Tan H, Li H, Wang KJ. Effects of different biomaterials:comparing the bladder smooth muscle cells on waterborne polyurethane orpoly-lactic-co-glycolic acid membranes. Kaohsiung J Med Sci. 2012;28(1):10-5.[4] 杨进 , 王坤杰 , 李虹 . 人源脂肪干细胞向膀胱平滑肌细胞诱导分化的试验研究 . 四川解剖学杂志 . 2011;19(2):1-6.[5] 邬韬 , 陈林 , 王彦 , 魏鑫 , 王坤杰 . 不同应力施加方式对膀胱平滑肌细胞影响的比较研究 . 四川大学学报 ( 医学版 ). 2011; 6:846-849.[6] 杨进 , 王坤杰 , 李虹 . 应用脂肪干细胞复合膀胱去细胞基质修复 SD 大鼠膀胱缺损研究 .中国科技论文在线精品论文 . 2011;4(23):2150-2159.[7] 韩振伟 , 王坤杰 , 陈林 , 韦堂墙 , 罗德毅 , 李胜富 . 静水压对人膀胱平滑肌细胞游离钙离子浓度及香草型瞬时受体电位表达的影响 . 中国修复重建外科杂志 . 2012;26(4):457-460.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 5 硕士 4获奖 :[1] 奖励 : 李虹 , 谭洪 , 王坤杰 . 基于泌尿系组织修复与重建的基础研究及临床创新与运用 .2010 年四川省科技进步奖 ( 一等奖 , 奖励时间 :2010 年 )- 114 -

抗菌肽 LL37 增强组织工程化尿道血管化及抗感染能力的研究批准号 :30872594项目负责人 : 杨嗣星所在单位 : 武汉大学采用组织工程化尿道修复尿道缺损的实验研究进展较快 , 但其临床应用受限的主要原因是组织工程化尿道的血管化及抗感染能力较差。如何加快组织工程化尿道的血管生成以及如何增强组织工程化尿道植入体内后的抗感染能力 , 仍为制约组织工程化尿道临床应用的难题。我们前期实验已初步证明抗菌肽 LL37 可加速组织工程化尿道的血管生成和提高抗感染能力。本研究以狗天然尿道细胞外基质为支架 , 将转染 LL37 基因的内皮祖细胞种植于该基质上 , 使其在此基质上持续高效分泌 LL37; 再将自体尿路上皮细胞和平滑肌细胞种植于基质的内外表面 , 体外培养 2-4 天。通过体外抑菌圈试验和宿主皮下移植检测微循环指标 , 定量评价转基因内皮祖细胞分泌的 LL37 抗感染和促血管化能力 , 进一步将基因增强的新型组织工程化尿道植入修复长段尿道缺损 , 探讨抗菌肽在增强组织工程尿道抗感染和促进血管生成的有效性 , 为临床功能性组织工程化尿道的制备提供技术支持和理论指导。关键词 : 抗菌肽 ;LL37; 尿道 ; 组织工程学科代码 :H0503发表论著 :[1] 萧安格 , 赵凯亮 , 杨嗣星 , 李永伟 , 廖文彪 , 孟令超 . 内皮祖细胞在膀胱细胞外基质上的生长及分化 . 中国组织工程研究与临床康复 . 2011; 15(47): 8797-8800.[2] 杨嗣星 , 赵凯亮 , 李永伟 , 宋超 , 廖文彪 , 孟令超 . 尿道脱细胞基质和内皮祖细胞的生物相容性 . 中华实验外科杂志 . 2011; 28(12): 2098-2100.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 5邻苯二甲酸二丁酯致大鼠尿道下裂的蛋白质组学研究批准号 :30872596项目负责人 : 张炜所在单位 : 南京医科大学利用已建立的 DBP 诱导的大鼠尿道下裂模型 , 应用蛋白质组学平台 , 对尿道下裂仔鼠的阴茎标本进行二维电泳及质谱分析 , 筛选出与尿道下裂发生相关的关键蛋白 ; 应用生物信息学手段对这些蛋白进行分析 , 探讨其可能参与的细胞过程和分子功能 , 并建立它们之间的相互作用网络 ; 筛选出在以上功能网络中发挥关键作用的蛋白质 , 运用分子生物学及细胞- 115 -

生物学手段对它们进行功能研究。研究结果可获得参与尿道下裂形成相关的大通量的蛋白信息 , 可深入阐明 DBP 致尿道下裂的分子机制 , 为环境内分泌干扰物致人类出生缺陷的防治提供新的线索。关键词 : 邻苯二甲酸二丁酯 ; 尿道下裂 ; 蛋白质组学学科代码 :H0501发表论著 :[1]Zhang LF, Qin C, Wei YF, Wang Y, Chang JK, Mi YY, Ma L, Jiang JT, Feng NH, WangZJ, Zhang W. Differential expression of the Wnt/β -catenin pathway in thegenital tubercle (GT) of fetal male rat following maternal exposure todi-n-butyl phthalate (DBP). Syst Biol Reprod Med. 2011 Oct;57(5):244-50.[2] 常俊锴 , 魏云飞 , 冯宁翰 , 张炜 . 半乳糖凝集素 -3 在邻苯二甲酸二丁酯致大鼠尿道下裂发生中的表达 . 中华实验外科杂志 . 2010; 27(8):1153-1155.[3] 常俊锴 , 张炜 , 沈百欣 , 魏云飞 , 张力峰 , 王勇 , 冯宁翰 . 尿道下裂仔鼠阴茎蛋白质组学分析及膜联蛋白 A3 的表达变化研究 . 中华男科学杂志 . 2010; 16(10):877-882.[4] 常俊锴 , 张炜 . 环境内分泌干扰物对尿道下裂发生的影响 . 国际泌尿系统杂志 . 2010;30(2) :206-210.[5] 魏云飞 , 常俊锴 , 冯宁翰 , 张炜 . Lamin B1 在邻苯二甲酸二丁酯致大鼠尿道下裂发生中的表达变化 . 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ). 2010; 30(7):928-931.[6] 何海兵 , 苏建堂 , 魏云飞 , 张炜 , 秦超 , 常俊锴 , 宋宁宏 . 邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露仔鼠阴茎组织乳酸脱氢酶 B 差异表达 . 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ). 2010;30(3):362-365.[7] 张力峰 , 王勇 , 常俊锴 , 魏俊峰 , 魏云飞 , 秦超 , 冯宁翰 , 张炜 . Wnt/β -catenin 与NF-kB 信号通路在邻苯二甲酸二丁酯诱导雄性大鼠发生尿道下裂中的表达 . 南京医科大学学报 ( 自然科学版 ). 2010; 30(11):1533-1536.[8] 王勇 , 张力峰 , 张炜 . 转录激活因子 3 在糖皮质激素与邻苯二甲酸二丁酯联合作用致大鼠尿道下裂发生中的表达变化 . 中华实验外科杂志 . 2011; 28(5):778-780.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 4 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 7线粒体功能障碍在肾小球足细胞早期损伤中作用的研究批准号 :30872803项目负责人 : 张爱华所在单位 : 南京医科大学足细胞在慢性肾脏病蛋白尿产生及发展过程中发挥重要作用 , 但足细胞损伤的机制尚不清楚。本研究首先制备醛固酮灌注小鼠肾损伤模型 , 动态观察蛋白尿、足细胞超微病理损伤以及线粒体功能 ( 包括线粒体 DNA 拷贝数、线粒体膜电位以及酶复合体 I), 以明确线粒体功能障碍与蛋白尿及足细胞损伤的关系。研究结果表明 , 醛固酮灌注后 1-3 天肾组织出现线粒体功能障碍 , 而 5 天后肾脏超微病理检查显示足细胞足突融合 , 并出现蛋白尿 , 提示线粒体功能障碍是足细胞损伤的早期事件。体外培养足细胞 , 应用醛固酮刺激 2-8h, 足- 116 -

细胞出现线粒体功能障碍 , 而 12h 后才出现足细胞损伤。我们进一步检测线粒体功能障碍能否直接介导足细胞损伤。应用低浓度的溴化乙锭降低 mtDNA 拷贝数 , 敲低线粒体转录因子 A (TFAM) 或 PGC-1α , 可诱导线粒体功能障碍 , 并直接介导足细胞损伤 , 表明线粒体功能障碍是足细胞损伤的始发因素。过表达 TFAM、PGC-1α 或 PPARγ 以及 PPARγ 激动剂罗格列酮或 SIRT1 激动剂白藜芦醇可通过阻断线粒体功能障碍减轻足细胞损伤。罗格列酮、白藜芦醇以及 PGC-1α 转基因小鼠均可减轻醛固酮诱导的足细胞损伤和蛋白尿。关键词 : 足细胞 ; 线粒体功能障碍 ; 醛固酮 ;PGC-1α ;SIRT1学科代码 :H0509发表论著 :[1]Feng Q, Huang S, Zhang A, Chen Q, Guo X, Chen R, Yang T. Y-box protein 1 stimulatesmesangial cell proliferation via activation of ERK1/2. Nephron Exp Nephrol.2009;113(1):e16-25.[ 2 ] Huang S, Zhang A, Ding G, Chen R. Aldosterone-induced mesangial cellproliferation is mediated by EGF receptor transactivation. Am J Physiol RenalPhysiol. 2009;296(6):F1323-33.[3]Ding GX, Zhang AH, Huang SM, Pan XQ, Chen RH. SP600125, an inhibitor of c-JunNH2-terminal kinase, blocks expression of angiotensin II-induced monocytechemoattractant protein-1 in human mesangial cells. World J Pediatr.2010;6(2):169-76.[4]Zhu C, Zhang A, Huang S, Ding G, Pan X, Chen R. Interleukin-13 inhibitscytokines synthesis by blocking nuclear factor-B and c-Jun N-terminalkinase in human mesangial cells. J Biomed Res. 2010;24(4):308-316.[5]Yuan Y, Zhang A, Huang S, Ding G, Chen R. A PPARgamma agonist inhibitsaldosterone-induced mesangial cell proliferation by blocking ROS-dependentEGFR intracellular signaling. Am J Physiol Renal Physiol.2011 ;300(2):F393-402.[6]Zhu C, Huang S, Ding G, Yuan Y, Chen Q, Pan X, Chen R, Zhang A. Protective effectsof Huang Qi Huai granules on adriamycin nephrosis in rats. Pediatr Nephrol.2011;26(6):905-13.[7]Zhu C, Huang S, Yuan Y, Ding G, Chen R, Liu B, Yang T, Zhang A. Mitochondrialdysfunction mediates aldosterone-induced podocyte damage: a therapeutictarget of PPARγ. Am J Pathol. 2011;178(5):2020-31.[8] 相虹 , 黄松明 , 冯泉城 , 袁杨刚 , 张爱华 . 尿酸活化 ERK1/2 信号通路刺激大鼠肾小球系膜细胞增生 . 中华肾脏病杂志 .2010;26(12):892-897.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2获奖 :[1] 获奖 : 张爱华、黄松明、丁桂霞、鲍华英、陈颖、赵非、韩媛 . 肾脏纤维化的细胞分子机制及其干预研究 . 江苏省科技进步奖 ( 三等奖 ,2010 年 )[2] 专利 : 黄松明 , 张爱华 , 朱春华 , 陆正鑫 . 槐杞黄颗粒复方制剂在治疗肾病中的应用 . 中- 117 -

国发明专利 ( 专利号 :200910181580.8, 授权公告日 :2010.1.13)H05 泌尿系统青年科学基金高糖影响肾小球内皮细胞通透性和损伤细胞紧密连接的机制探讨批准号 :30800408项目负责人 : 彭晖所在单位 : 中山大学肾小球高滤过导致蛋白尿是糖尿病肾病尚未明了的重要发病机制之一。本项目拟采用大鼠肾小球内皮细胞为研究对、象 , 通过跨内皮细胞电阻抗试验、细胞旁漏出试验、电镜、质粒转染、免疫沉淀、免疫印迹、Pull-down assay、激光共聚焦免疫荧光、凝胶酶谱法和实时定量 PCR 等技术观察 :1) 急性和慢性高糖环境对肾小球内皮细胞通透性的影响 ,及对细胞紧密连接和基质金属蛋白酶 (MMP) 的影响 ;2)Rho GTPase 信号 (Rac1 和 / 或 RhoA)激活在高糖导致的上述改变中的作用 ;3) 逆转高糖环境可否修复肾小球内皮细胞的上述损伤 ;4) 抑制 Rac1 和 / 或 RhoA 信号、抑制 MMPs 活性可否逆转高糖的上述损伤作用。本研究如获资助 , 将有助于了解糖尿病引起内皮细胞通透性增高的机制和信号通路 , 可进一步深入了解糖尿病肾病蛋白尿的发病机制 , 为其防治提供新的靶点。关键词 : 高糖 ; 细胞通透性 ; 紧密连接 ; 基质金属蛋白酶 ; 小 Rho GTPase学科代码 :H0510发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2钙通道阻滞剂减轻膜性肾病足细胞损伤的分子机制研究批准号 :30800521项目负责人 : 冯哲所在单位 : 中国人民解放军总医院特发性膜性肾病是成人肾病综合征的常见病因 , 目前临床治疗方案存在较大争议且药物治疗时间长、敏感度不一、副作用多 , 其发病机制和治疗手段的研究是急需要解决的重要问题。大量研究提示膜性肾病引起的大量蛋白尿与足细胞损伤、缺失、融合关系密切 ,而细胞内质网应激反应是引起足细胞损伤的关键。为了明确内质网应激引起膜性肾病足细胞损伤导致蛋白尿的机制 , 探索其干预措施 , 用被动海曼肾炎模型和培养的足细胞为研究对象 , 明确线粒体钙离子同道调控因子 - - NHE-1 蛋白通过细胞内自噬反应 , 对内质网应激反应的调控机制 , 进而减轻内质网应激损伤过程 , 增强内质网应激补偿反应 , 减少足细胞- 118 -

损伤 , 从而达到减轻膜性肾病临床蛋白尿的目的。有助于阐明膜性肾病的发病机制 , 指导临床治疗药物的选择。关键词 : 膜性肾病 ; 内质网应激 ; 自噬反应 ; 钠氢交换蛋白 -1学科代码 :H0509发表论著 :[1]Feng Z, Wei RB, Hong Q, Cui SY, Chen XM. Grape seed extract enhances eNOS expressionand NO production through regulating calcium-mediated AKT phosphorylation inH2O2-treated endothelium. Cell Biol Int. 2010 ;34(10):1055-61.[2] 洪权 , 肖博晗 , 魏日胞 , 汪杨 , 刘晓峦 , 冯哲 , 陈香美 . 葡萄籽提取物对缺血再灌注导致衰老大鼠肾小管上皮细胞凋亡的保护作用 . 中国老年学杂志 . 2009;29(9):1049-1052.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2花生四烯酸乙醇胺在 Dahl 大鼠高盐负荷时的代谢特点批准号 :30800522项目负责人 : 程李涛所在单位 : 北京大学容量扩张是透析病人高血压的最主要发病因素 , 但约 20% 的病人容量扩张后血压可维持正常。研究发现这是因为总外周阻力下降所致 , 并推测这是机体内一种重要的代偿反应 , 但其背后的机制不清楚。在与此相似的 Dahl 盐抵抗大鼠模型中 , 近年发现瞬时受体电位香草酸亚型 1(TRPV1) 在容量扩张时激活 , 导致外周血管舒张和血压下降 , 发挥代偿作用。花生四烯酸乙醇胺 (AEA) 是 TRPV1 的内源性配体和完全激动剂 , 二者结合后启动降压效应。有研究发现 AEA 参与败血症休克时的血压调节 , 但对于 AEA 在容量扩张时的血压调节目前仍无研究报道。我们的预实验发现 ,AEA 可能在容量扩张但血压可维持正常这一现象中发挥重要作用。因此 , 本研究拟探讨 Dahl 盐抵抗大鼠和 Dahl 盐敏感大鼠在容量扩张时的AEA 代谢特点。关键词 : 花生四烯酸乙醇胺 ; 盐抵抗 ; 盐敏感 ; 瞬时受体电位香草酸亚型 1; 高血压学科代码 :H0510发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0血管生长素 2 在糖尿病肾病发生中的作用和相关机制研究- 119 -

批准号 :30800523项目负责人 : 王玉梅所在单位 : 华中科技大学肾小球内皮细胞损伤和病理性血管新生是参与糖尿病肾病发生的早期始动因素 , 但具体机制未明。Angiopoietin 2(Ang2) 是近年来发现的致血管内皮损伤及病理性血管新生的重要因子 , 可能参与了糖尿病肾病的发生与发展。本研究通过体外和体内实验观察了高糖及糖尿病环境下 Ang2 的表达 , 结果发现 ,(1) 高糖可诱导肾小球内皮细胞 Ang2 mRNA 表达 , 高糖环境可引起肾小球内皮细胞 Ang/Tie2、VEGFmRNA 表达的改变 , 并呈时间依赖性。(2)Ang2 可促进肾小球内皮细胞的增殖 , 高糖可促进肾小球内皮细胞的迁移。(3)Ang 2mRNA 在糖尿病肾病小鼠肾组织早期明显升高。(4)Ang-2 在 DN 患者中表达升高 , 且在 DN正常白蛋白尿期已明显升高 , 较尿微量白蛋白更敏感的反映 DN 肾损伤。其升高与炎症因子呈正相关 , 可能是糖尿病肾病早期临床诊断指标及启动临床治疗切点的生物学指标之一。关键词 : 糖尿病肾病 ; 血管生长素 2; 内皮细胞 ; 新生血管学科代码 :H0510发表论著 :[1]Li H,Deng X,Li Z,Luo C,Liu J, Wang Y. Variation of serum monocyte chemoattractantprotein-1 in patients with diabetes and metabolic syndrome. J Huazhong Univ SciTechnolog Med Sci. 2011;31(3):312-6.[2] 王玉梅 , 黎慧清 , 李贞琼 , 罗长青 , 刘建社 . 罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏 IL-6、IL-8、TNF-α 表达的影响 . 华中科技大学学报 ( 医学版 ).2010;39(6):802-805.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 4清除病理性 Th1 细胞减轻新月体肾小球肾炎批准号 :30800524项目负责人 : 袁劲所在单位 : 华中科技大学Tim-3 是一种细胞表面分子标记物 , 主要表达于 Th1 细胞 ,Th17 细胞、巨噬细胞、DC细胞和 NK 细胞。Galectin-9 作为 Tim-3 的配体参与多种生物学过程 , 如细胞粘附、细胞增殖和凋亡。由于抗肾小球基底膜 (GBM) 肾炎主要是由 Th1 和 Th17 细胞介导 , 且 galectin-9能通过与 Tim-3 结合调节 Th1 和 Th17 免疫反应。因此我们假设 galectin-9 能够调节抗 GBM肾炎的免疫反应并改善其病理损害过程。本研究表明 ,galectin-9 能够通过不同的机制改善小鼠抗 GBM 肾炎。首先 ,galectin-9 能抑制全身和肾脏局部的 Th1 和 Th17 细胞的分化并同时能诱导 Th2 细胞的增加 ; 其次 ,galectin-9 能同时降低外周血和肾脏局部炎症因子IFN-γ 和 IL-17A 的表达水平 ; 另外 , 由于 galectin-9 的作用肾脏内的炎症因子表达水平亦随之有不同程度的改变。我们进一步发现 ,galectin-9 能诱导 CD4+ T 细胞的凋亡并能使免- 120 -

疫平衡发生偏离。因此 , 我们得出结论 galectin-9 能通过抑制 Th1 和 Th17 细胞产生并促进Th2 细胞表达来改善抗 GBM 肾炎。关键词 :Tim-3;galectin-9;Th1;Th17; 抗肾小球基底膜肾炎学科代码 :H0509发表论著 :[1] 袁劲 , 吴轲 , 陈忠华 . 体外分化的 CD4+CD25+ 调节性 T 细胞可减轻小鼠皮肤移植急性排斥反应 . 华中科技大学学报 ( 医学版 ). 2010;39(6):733-737.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0BVR 调控缺氧肾小管上皮细胞转分化的机制及干预研究批准号 :30800525项目负责人 : 曾锐所在单位 : 华中科技大学缺氧诱导肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化 (EMT) 是肾小管间质纤维化的一个关键过程 , 在该过程中胆绿素还原酶 (BVR) 对 PI3K/Akt 信号通路的激活参与了缺氧肾小管 EMT的发生发展 , 但是 BVR 活化 PI3K、Akt 的机制和肾小管缺氧的机理还不清楚。本项目研究发现 , 肾间质小血管网毁损是肾小管上皮细胞缺氧的主要原因 ,BVR 的表达分布与肾小血管丧失密切相关 , 肾小管上皮细胞 HIF-1α 分布与 BVR 一致 , 但是缺氧诱导的活性氧不影响BVR 的表达水平。体外免疫共沉淀实验证实 , 随缺氧肾小管上皮细胞 BVR 表达增加 , 与其结合的磷酸化 Akt 也相应增加。以上结果表明缺氧时肾小管上皮细胞内 HIF-1α 是 BVR 增加的原因 , 增加的 BVR 可以结合并激活 Akt, 最终参与肾间质纤维化。另外 , 我们还发现 BVR 参与肾间质巨噬细胞活化状态的调节。因此 , 针对 HIF-1α -BVR-Akt 信号通路干预 , 将为肾纤维化分子治疗提供新靶点。关键词 : 胆绿素还原酶 (BVR);PI3K;Akt学科代码 :H0510发表论著 :[1]Zeng R, Han M, Luo Y, Li C, Pei G, Liao W, Bai S, Ge S, Liu X, Xu G. Role ofSema4C in TGF-β 1-induced mitogen-activated protein kinase activation andepithelial-mesenchymal transition in renal tubular epithelial cells. NephrolDial Transplant. 2011; 26(4):1149-56.[2]Zhou Q, Zeng R, Xu C, Liu L, Chen L, Kou P, Pei G, Bai S, Zhang Y, Li C, RongS, Han M, Xu G. Erbin inhibits TGF-β 1-induced EMT in renal tubular epithelialcells through an ERK-dependent pathway. J Mol Med (Berl). 2011/11/25.[3] 周逸婵 , 裴广畅 , 李彩霞 , 张南 , 白寿军 , 韩敏 , 曾锐 , 徐钢 . 胆绿素还原酶在大鼠纤维化肾脏中的分布及其与肾血管毁损的关系 . 中国现代医学杂志 . 2011;29:- 121 -

3595-3598.[4] 周巧丹 , 寇沛 , 许楚瓯 , 曾锐 , 白寿军 , 裴广畅 , 张亚敏 , 韩敏 , 刘丽丽 , 徐钢 .Erbin 在肾间质纤维化中的表达和作用 . 中华肾脏病杂志 . 2011;27(5):351-356.[5] 白寿军 , 张亚敏 , 周巧丹 , 曾锐 , 李彩霞 , 裴广畅 , 许楚瓯 , 葛树旺 , 周欢 , 徐钢 ,刘晓城 . CIP4 在肾间质纤维化中的表达及作用 . 中华肾脏病杂志 . 2010 ;26(6):453-459.[6] 位红兰 , 曾锐 , 张娟 , 罗昀 , 刘林 , 徐钢 . 肾间质纤维化中 DJ-1 抑制抗纤维化因子 PTEN的表达 . 中华肾脏病杂志 . 2009; 25(10):782-787.[7] 位红兰 , 曾锐 , 刘林 , 张娟 , 罗昀 , 葛树旺 , 徐钢 . 高表达 PTEN 抑制 TGF-β 1 诱导的肾小管上皮细胞转分化 . 华中科技大学学报 ( 医学版 ). 2009;6:721-724.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2高级蛋白氧化产物在血管钙化中的作用及其机制批准号 :30800526项目负责人 : 游怀舟所在单位 : 复旦大学CKDⅤ 期患者普遍存在高 AOPP 血症和血管钙化 , 血浆 AOPP 水平与血管钙化密切相关。AOPP 直接作用能使 HASMC 向成骨细胞分化 , 促进 HASMC 钙化。AOPP 可能通过增加细胞内的氧化水平 , 和激活 ERK 通路促进平滑肌细胞向成骨细胞分化和促进钙化。阿霉素肾病时同样存在氧化应激亢进 ,eNOS 表达上调 , 尿 N03- / N02- 排泄增加。黄芪水提物能减轻蛋白尿 , 其机制可能是通过直接抑制阿霉素大鼠肾组织 eNOS 的过度表达 , 减少 NO 合成 , 以及提高抗氧化物酶活性 , 抑制自由基对肾组织的氧化损伤。AKI 患者的 CRP/ 前白蛋白水平较健康对照和维持性血透患者明显升高。Cox 回归分析显示 CRP/ 前白蛋白是独立于年龄、性别、败血症和 SOFA 评分的死亡危险因素。CRP/ 前白蛋白水平可成为除 SOFA 评分以外的预计 AKI 患者预后的新指标。SGA 评分是 AKI 患者全因死亡的独立危险因素。经年龄、性别、败血症和 APACHII 评分校正后 ,3- 硝基酪氨酸和巯基仍是 AKI 患者 90 天死亡的独立危险因素。关键词 : 氧化应激 ; 高级蛋白氧化产物 ; 血管钙化 ; 急性肾损伤 ; 预后 ;学科代码 :H0511发表论著 :[1]Fang L, You H, Chen B, Xu Z, Gao L, Liu J, Xie Q, Zhou Y, Gu Y, Lin S, DingF. Mannitol is an independent risk factor of acute kidney injury after cerebraltrauma: a case-control study. Ren Fail. 2010; 32(6):673-9.[2]You H, Lu Y, Gui D, Peng A, Chen J, Gu Y. Aqueous extract of Astragali Radixameliorates proteinuria in adriamycin nephropathy rats through inhibition ofoxidative stress and endothelial nitric oxide synthase. J Ethnopharmacol.- 122 -

2011;134(1):176-82.[3]Xie Q, Zhou Y, Xu Z, Yang Y, Kuang D, You H, Ma S, Hao C, Gu Y, Lin S, DingF. The ratio of CRP to prealbumin levels predict mortality in patients withhospital-acquired acute kidney injury. BMC Nephrol. 2011 ;12:30.[4] 杨妍姣 , 谢琼虹 , 许钟烨 , 匡鼎伟 , 刘骏峰 , 游怀舟 , 周莹 , 赖凌云 , 郑寅 , 顾勇 ,郝传明 , 林善锬 , 丁峰 . 危重病评分系统预测急性肾损伤患者预后优于 RIFLE 分级 .中国血液净化 . 2010; 7:364-367.[5] 周莹 , 谢琼虹 , 刘骏峰 , 许钟烨 , 匡鼎伟 , 游怀舟 , 赖凌云 , 顾勇 , 郝传明 , 林善锬 ,丁峰 , H.David Humes. 选择性粒细胞吸附装置治疗重症急性肾损伤的研究 . 中国血液净化 . 2011; 11: 602-605.[6] 周莹 , 顾惠芳 , 谢琼虹 , 许钟烨 , 马帅 , 游怀舟 , 匡鼎伟 , 顾勇 , 郝传明 , 林善锬 ,丁峰 . 主观综合性营养评估预测急性肾损伤患者的预后 . 中华肾脏病杂志 . 2011;27(8):567-571.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 5 分组 5培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 3炎症对半乳糖基转移酶伴侣蛋白调控在 IgA 肾病糖基化异常中的作用批准号 :30800527项目负责人 : 秦伟所在单位 : 四川大学IgAN 的关键发病机制为 IgA 糖基化缺陷。外源性因素可逆性抑制淋巴细胞 Cosmc 表达是 IgA 糖基化异常机制之一。IgAN 患者反复感染和微炎症状态与 IgAN 反复发作和进展密切相关。因此我们推测炎症状态下细胞因子的调控影响是 Cosmc 基因表达异常并导致 IgA 分子糖基化异常的重要机制。本研究进一步以外源性调控物质 (5- 杂氮胞苷 , 霉酚酸酯 , 黄芪 )在体外对 IgA 肾病外周血和扁桃体淋巴细胞进行干预试验 , 确证 Comsc 在炎症状态下对 IgA分子糖基化具有关键作用。研究发现 ,IgA 肾病患者外周血淋巴细胞和扁桃体淋巴细胞中Cosmc 基因的表达明显低于正常对照 , 而且在受到 LPS 刺激后 ,Cosmc 基因的表达会进一步降低 , 并导致 IgA 分子的 O- 糖基化异常显著加重。我们还应用 siRNA 技术干扰正常人外周血淋巴细胞 Cosmc 的表达 , 实验结果发现沉默 Cosmc 基因表达后 , 细胞在受到 LPS 刺激后分泌的 IgA 分子糖基化异常明显较正常对照严重。通过以上实验我们从正反两个角度证实了Comsc 在 IgAN 肾病 IgA 分子糖基化异常中的关键作用 , 验证了外源性因素对 Cosmc 的表达调控是 IgAN 糖基化异常的分子生物学基础。关键词 :IgA 肾病 , 糖基化 ,Cosmc学科代码 :H0505发表论著 :[1]Xie LS, Qin W, Fan JM, Huang J, Xie XS, Li Z. The role of C1GALT1C1 inlipopolysaccharide-induced IgA1 aberrant O-glycosylation in IgA nephropathy.Clin Invest Med. 2010 Feb 1;33(1):E5-13.- 123 -

[2]Xie LS, Huang J, Qin W, Fan JM. Immunoglobulin A1 protease: a new therapeuticcandidate for immunoglobulin A nephropathy. Nephrology . 2010;15(5):584-6.[3] 秦伟 , 钟翔 , 樊均明 , 刘先蓉 , 李孜 , 马行一 . 甲基化修饰对 IgA 肾病外周血 B 淋巴细胞 Cosmc 基因表达的调节作用 . 四川大学学报 ( 医学版 ). 2011;6:762-765.会议报告 : 国际大会 4 分组 4 国内大会 5 分组 4培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2巨噬细胞特异表达共刺激分子 VSIG4 诱导肾间质浸润 T 细胞无能的机制研究批准号 :30800528项目负责人 : 王沂芹所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学巨噬细胞浸润与肾小管间质损害密切相关。然而这一观点正面临挑战 : 巨噬细胞不再只是肾脏炎症损伤的首要因素 , 它还具有保护和调节作用。探讨其中机制可能将肾脏病的治疗带到一个新的领域。VSIG4 是新近鉴定的特异表达于巨噬细胞并对 T 细胞具有调节作用的共刺激分子。我们前期研究发现 VSIG4 特异表达于间质浸润的巨噬细胞 , 并且主要表达于间质损伤轻的区域。据此我们推测巨噬细胞通过特异表达 VSIG4 诱导 T 细胞无能而抑制肾小管间质损害的病理过程。本研究拟使用 VSIG4 基因敲除小鼠建立肾小管肾炎模型 , 分析VSIG4 基因敲除后肾小管间质损伤的变化程度及 T 细胞的功能状况 , 明确 VSIG4 对肾间质损害的调节作用及其对 T 细胞功能影响 ; 体外使用共培养技术 , 探讨巨噬细胞表达的 VSIG4与 T 细胞之间的作用机制。本研究将首次探讨巨噬细胞特异表达 VSIG4 在肾间质损害中的作用 , 为将来设计更为有效的治疗性靶向药物提供理论指导。关键词 : 巨噬细胞 ; 共刺激分子 VSIG4;T 细胞 ; 肾小管间质损害 ;肾小管间质性肾炎模型学科代码 :H0505发表论著 :[1] 李燕 , 王沂芹 , 李鸣 , 张莹 , 李芙蓉 , 王梓华 , 齐伟 , 袁发焕 . 巨噬细胞特异表达共刺激分子 VSIG4 对实验性肾间质纤维化的影响 . 细胞与分子免疫学杂志 . 2010;26(6):522-524.[1] 李鸣 ; 王沂芹 ; 李燕 ; 陶光利 ; 庞琪 ; 袁发焕 . B7 家族共刺激分子 VSIG4 在巨噬细胞/T 细胞共培养模型中的作用 . 第三军医大学学报 . 2011;33(22): 2335-2339.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2Ang1-7 受体 Mas 在糖尿病肾小球硬化中作用的研究- 124 -

批准号 :30800529项目负责人 : 贾俊亚所在单位 : 天津医科大学通过体内、外研究 , 基本确定了成年小鼠肾小球存在 Mas 表达 , 但表达量较少且弥散 , 分布于内皮细胞、系膜细胞及足细胞 , 以足细胞为主。糖尿病小鼠肾小球 Mas 表达量较对照组明显下降。Ang1-7 灌注使糖尿病小鼠肾小球 FN、PAI-1 等分子表达下调 ,Mas 拮抗剂 A779 可阻断 Ang1-7 的作用 ; 糖尿病小鼠肾小球存在明显的 Wnt/β -catenin 信号激活 ,后者与 nephrin 减少、蛋白尿密切相关 ,Ang1-7 可部分阻断 Wnt/β -catenin 激活 , 这一作用是通过 Mas 介导的。体外研究发现 ,Ang II 可使高糖状态下系膜细胞磷酸化 Akt 明显增加 ,NF-κ B 核结合活性升高 ;Ang1-7 可部分阻断 Ang II 的作用 ; 单独加入 Ang1-7 对高糖效应也有部分阻断作用 , 后者能被 A779 抑制但不能被 losrtan 或 PD123319 所抑制 , 提示Ang1-7 对系膜细胞的作用需要通过受体 Mas 介导。新生小鼠肾小球 Mas 表达量较成年小鼠丰富 , 但随鼠龄增长而减少 , 提示 ACE2-ANG1-7-Mas 轴参与了肾小球出生后发育阶段 RAS的调节。关键词 :Mas; 血管紧张素 1-7; 糖尿病 ; 肾小球硬化学科代码 :H0510发表论著 :[1] 江建青 , 林珊 , 郑振峰 , 徐鹏程 , 贾俊亚 , 毕军 . 各期慢性肾脏病患者骨代谢生化指标与骨密度的相关性 . 中华肾脏病杂志 . 2009;25(8):619-623.[2] 薛杨 , 林珊 , 贾俊亚 , 韦丽 , 商文雅 . IgA 肾病患者肾组织 TNF-α 表达与疾病活动性的关系 . 广东医学 . 2010;19:2555-2557.[3] 佟智颖 , 林珊 , 贾俊亚 , 韦丽 , 王希倩 , 商文雅 . 糖尿病肾病患者尿单核细胞趋化蛋白 1 水平变化及其意义 . 中国糖尿病杂志 . 2010;18(11):840-842.[4] 林珊 , 佟智颖 , 贾俊亚 , 韦丽 , 王希倩 , 商文雅 . 糖尿病肾病患者肾小管上皮细胞NF-κB 及炎性介质表达的临床病理意义 . 中华肾脏病杂志 . 2010;26(1):15-19.[5] 闫铁昆 , 林珊 , 贾俊亚 , 李研凭 , 商文雅 , 韦丽 . 尿毒症患者桡动脉组织学改变及其与动脉血管僵硬度的关系 . 中华内科杂志 . 2010;49(7):577-581.[6] 闫铁昆 , 林珊 , 贾俊亚 , 商文雅 , 韦丽 . 尿毒症患者桡动脉盐皮质激素受体表达与血管钙化的关系 . 中华肾脏病杂志 . 2010;26(3):181-186.[7] 薛杨 , 林珊 , 贾俊亚 , 闫铁昆 . 糖尿病肾病尿毒症患者血管钙化其及危险因素分析 .吉林大学学报 ( 医学版 ). 5:946-951.[8] 祝再然 , 林珊 , 贾俊亚 , 闫铁昆 , 姚瑶 , 袁鲁晓 , 商文雅 , 韦丽 , 薛杨 . 长期接受不同饮食磷水平的慢性肾衰竭大鼠骨组织形态学特征改变 . 北京医学 . 2011;2:167-169.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 4 分组 4培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3- 125 -

NG2 蛋白多糖在早期糖尿病肾病毛细血管增生中的作用批准号 :30800532项目负责人 : 熊京所在单位 : 华中科技大学炎症反应是导致系膜细胞增殖的重要原因。本研究中 , 我们调查了 NG2 蛋白多糖在肾小球系膜细胞中的表达及其在系膜细胞炎症反应中的作用。LPS 注射复制大鼠肾小球炎性损伤模型 ,PAS 染色显示明显的系膜增生和炎性细胞浸润等。筛目法从肾组织中分离肾小球 ,real-time PCR 和 ELISA 结果显示 LPS 注射的大鼠肾小球 NG2, 促炎症因子 TNF-α 和IL-1 表达明显增加。体外培养大鼠系膜细胞 , 我们亦发现 LPS 激活的系膜细胞 NG2 表达明显升高 ;LPS 可诱导系膜细胞和培养上清液中 TNF-α 和 IL-1 的上调以及系膜细胞数目的明显增加 , 提示 NG2 可能参与了 LPS 诱导的炎症反应。用基因干扰的方法我们对此进行了论证。结果显示 , 系膜细胞转染 NG2 shRNA 敲低 NG2 基因后 ,LPS 诱导的促炎因子表达的上调明显被抑制 , 系膜细胞增生明显改善 , 系膜细胞凋亡增加。结论 :NG2 蛋白多糖可能参与了炎性反应诱导的肾小球损伤的过程 , 该理论基础为系膜增生疾病提供了新的治疗靶点。关键词 :NG2 蛋白多糖 ; 系膜细胞 ; 增殖 ; 炎症学科代码 :H0510发表论著 :[1] 熊京 , 汪洋 , 刘建社 , 朱忠华 . NG2 蛋白多糖促进肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质积聚 . 中华肾脏病杂志 . 2010; 26(1):43-47.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1Transient Receptor Potential 通道 A1 在膀胱过度活动症发病机制中的作用批准号 :30801141项目负责人 : 都书琪所在单位 : 中国医科大学Transient receptor potential 通道 A1(TRPA1) 是哺乳动物体内候选的机械敏感性受体 , 并可能参与疼痛反应以及低温的感觉传导。我们制作了大鼠的膀胱出口梗阻 (BOO)模型和膀胱炎症模型 , 以研究膀胱不稳定状态下的排尿情况。我们采集膀胱粘膜层、肌层和脊髓后根神经节 (DRG), 利用 geNorm 和 NormFinder 等软件 , 筛选出不同条件下稳定表达的管家基因不是常用的 GAPDH 和 β -actin, 而是 YWHAZ 和 HPRT, 以用于实时定量 PCR 的准确定量。在 BOO 模型中 ,TRPA1 的表达在粘膜层和 DRG 中升高 , 但是缺乏统计学意义 ; 在膀胱炎症模型中 ,TRPA1 的表达在粘膜层和 DRG 中升高 , 并且有统计学意义。然后我们研究了机械敏感性受体的拮抗剂对排尿反射的影响。膀胱内灌注非特异性拮抗剂 GsMTx-4 可以明显延长大鼠的排尿间隔 ; 蛛网膜下腔注射 TRPA1 特异性拮抗剂 HC-030031 可以减轻炎症大- 126 -

鼠膀胱的非排尿性收缩的频率和幅度。提示大鼠的正常排尿反射需要机械敏感性分子的参与 ,TRPA1 有可能参与膀胱过度活动症及炎症状态时的排尿反射调节 , 是可能的治疗靶点。关键词 :Transient receptor potential 通道 A1; 机械敏感性受体 ; 排尿反射 ; 管家基因 ; 膀胱过度活动症学科代码 :H0515发表论著 :[1] 都书琪 , 吴伟力 , 张骞 , 孔垂泽 . 瞬时受体电位蛋白通道 A1 在大鼠炎症性膀胱感觉通路中不同部位的表达变化 . 中国医科大学学报 .2011;9:769-771+776.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 3间质细胞介导 OAB 膀胱感觉信号传递的调控作用及分子机制研究批准号 :30801142项目负责人 : 刘飞所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学膀胱过度活动症 (OAB) 是常见的排尿功能障碍性疾病 ,ATP 介导的膀胱感觉信号异常是引发 OAB 的重要因素。间质细胞 (ICC) 与膀胱感觉信号传递密切相关 , 但 ICC 在 OAB 中的调控作用尚未阐明。我们前期发现与膀胱感觉神经末梢密切接触的 ICC 表达 ATP 受体P2X3, 且 OAB 大鼠膀胱 ICC 中 P2X3 受体表达明显增高。本项目利用形态学、全细胞膜片钳和感觉神经电生理等技术观察到 , 与对照组相比 ,OAB 组膀胱 ICC 内 P2X3 受体蛋白及 mRNA表达显著增高 , 离体培养的 ICC 中内向电流幅度显著升高 , 上述变化呈时间依赖性。同时OAB 组膀胱感觉神经纤维放电频率显著增高 , 脊髓 DRG 神经元信号分子表达明显增强。膀胱灌注 ICC 拮抗剂后 OAB 膀胱不稳定性收缩频率较灌注前显著降低 , 脊髓 DRG 神经元信号分子表达减少。近年来研究发现超极化激活环化核苷酸门控阳离子通道 (HCN 通道 ) 与细胞兴奋性调节密切相关 , 我们进而对正常人膀胱 ICC 内 HCN 通道不同亚型表达进行研究 , 结果显示正常人膀胱 ICC 内有 HCN1,2,3 及 4 亚型的表达 , 其中 HCN4 表达量最高。后续实验中我们将观察 HCN4 在 OAB 膀胱 ICC 中的表达及电生理特性。关键词 : 间质细胞 ; 感觉信号 ;P2X3 受体 ; 膀胱过度活动症学科代码 :H0514发表论著 :[1]Liu F, Yao L, Yuan J, Liu H, Yang X, Qin W, Wu G, Yang L, Wang H, TakahashiN, Yamaguchi O. Protective effects of inosine on urinary bladder function inrats with partial bladder outlet obstruction. Urology. 2009 Jun;73(6):1417-22.[ 2 ] Liu F, Takahashi N, Yamaguchi O. Expression of P2X3 purinoceptors insuburothelial myofibroblasts of the normal human urinary bladder. Int J Urol.- 127 -

2009;16(6):570-5.[3]Yao L, Liu F, Sun L, Wu H, Guo C, Liang S, Liu L, Liu N, Han Z, Zhang H, WuK, Fan D. Upregulation of PPARgamma in tissue with gastric carcinoma. Hybridoma(Larchmt). 2010 ; 9(4):341-3.[4]Yao L, Liu F, Hong L, Sun L, Liang S, Wu K, Fan D. The function and mechanismof COX-2 in angiogenesis of gastric cancer cells. J Exp Clin Cancer Res.2011;30:13.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0颗粒酶 B/ 补体 C4d 靶向磁共振鉴别大鼠移植肾排斥的实验研究批准号 :30801148项目负责人 : 韩飞所在单位 : 浙江大学移植肾急性排斥是影响移植肾长期预后的重要原因 , 但临床上缺乏有效的无创性动态监测与诊断手段。颗粒酶 B、补体 C4d 分别作为体内细胞免疫与体液免疫反应激活的标志和产物 , 对移植肾急性排斥具有重要的诊断意义。本研究将利用抗大鼠颗粒酶 B 单克隆抗体与抗大鼠 C4d 单克隆抗体分别制备以颗粒酶 B 或 C4d 为靶向的磁共振对比剂 , 对急性排斥、急性肾小管坏死及对照组肾移植模型大鼠进行移植肾磁共振成像 , 观察并比较上述对比剂对 3 组移植肾的磁共振增强效果 , 评价该靶向磁共振技术对移植肾急性排斥的诊断敏感性与特异性 , 以及对大鼠体内细胞免疫、体液免疫激活程度的反映效果 , 验证其作为无创、有效的移植肾排斥诊断方法及体内免疫活化状态的检测手段的可行性。关键词 : 肾脏移植 ; 急性排斥反应 ; 颗粒酶 B; 补体 C4d; 磁共振学科代码 :H0512发表论著 :[1]Han F, Lv R, Jin J, Wu J, Chen Y, Wang H, Chen J. Pre-transplant serumconcentrations of anti-endothelial cell antibody in panel reactive antibodynegative renal recipients and its impact on acute rejection. Clin Chem LabMed. 2009;47(10):1265-9.[2]Han F, Wu J, Huang H, Zhang X, He Q, Wang Y, Wang S, Wang H, Chen J. Conversionfrom cyclosporine to sirolimus in chronic renal allograft dysfunction: a 4-yearprospective study. Exp Clin Transplant. 2011;9(1):42-9.[3] 韩飞 , 吕蓉 , 金娟 , 吴建永 , 陈莹 , 王慧萍 , 陈江华 . 肾移植受者术前血清抗血管内皮细胞抗体与急性排斥反应的关系 . 中华肾脏病杂志 . 2009;25(12):550-554.[4] 谢易 , 刘广义 , 韩飞 , 姜虹 , 茅幼英 , 王慧萍 , 赵杰 , 金娟 , 陈江华 . 靶向造影剂 (Gd-DTPA-Granzyme B) 的制备 . 浙江大学学报 ( 医学版 ). 2010 ;39(03) :290-295.- 128 -

会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2雌 / 雄激素比例失调与前列腺细胞增殖及凋亡的关系批准号 :30801153项目负责人 : 程蓓所在单位 : 武汉大学虽然前列腺增生症 (BPH) 发生的内分泌失衡 ( 雌 / 雄激素比例失调 ) 理论已被比较普遍接受 , 但雌 / 雄激素比例失衡到底如何影响前列腺组织 ? 相关研究仍有争议。本项目首次全面检测了不同年龄大鼠前列腺组织局部雌雄激素浓度和 ER 亚型的表达 , 发现雌 / 雄激素比例变化与 ERα /ERβ 比值变化存在相关性。青春期前前列腺组织细胞内 ERα 表达量逐渐增加 , 雌激素通过其介导的促增殖效应刺激前列腺的早期发育 ; 青春期后 , 升高的雄激素诱导前列腺细胞高表达 ERβ , 雌激素促增殖效应减弱 ; 老年以后雄激素水平逐渐下降 , 前列腺细胞 ERβ 下调 ,ERα 表达量又逐渐增加 , 雌激素的促增殖作用恢复并成为导致前列腺慢性增生的重要因素。体外模拟青壮年和老年大鼠体内的激素环境 , 利用 RNA 干扰技术 ,发现雌激素通过 ERα /IGF1 通路 , 诱导 Cyclin D1 蛋白表达上调 , 进而促进前列腺基质细胞增殖 , 提示 ERα 优势表达在雌激素促前列腺细胞增殖中发挥重要作用。本研究首次揭示了在男性个体发育的不同阶段及不同年龄 , 雌激素对前列腺组织细胞表现出促进增殖或诱导凋亡的双重效应 , 其促增殖作用是通过 ERα /IGF1 通路介导的 , 为解释 BPH 的发病机制和治疗靶点提供依据。关键词 : 雌激素 ; 雌激素受体 ; 前列腺增生 ; 雄激素学科代码 :H0513发表论著 :[1]Zhou D, Li S, Wang X, Cheng B, Ding X. Estrogen receptor alpha is essentialfor the proliferation of prostatic smooth muscle cells stimulated by17β -estradiol and insulin-like growth factor 1. Cell Biochem Funct.2011;29(2):120-5.[2] 周大为 , 李世文 , 王行环 , 程蓓 , 丁协刚 . 雌二醇通过雌激素受体 α 介导调控 Cyclin D1在小鼠前列腺平滑肌细胞中的表达 . 中华实验外科杂志 . 2011;28(1):130-132.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2批准号 :30801154项目负责人 : 梁军号飞秒脉冲激光与尿路上皮组织的相互作用研究- 129 -

所在单位 : 上海交通大学尿路狭窄是泌尿外科临床常见的一种病症 , 目前主要的治疗主要方式之一是腔镜下狭窄内切开术 , 其优点是创伤小 , 患者易于接受 , 而缺点是复发率高。复发的主要原因是各种内切开工具在切割狭窄时产生的附损伤 , 刺激纤维组织增生 , 最终导致狭窄复发。飞秒激光在切割组织时产生的附损伤及其轻微 , 已经成功运用于角膜手术等需要精细切割的场合。但由于飞秒激光在液体环境中和普通石英光纤中难以有效传播 , 因此一直无法运用于泌尿外科腔镜手术中。本课题利用大鼠膀胱组织作为替代模型 , 并模拟腔镜手术的液体环境 , 着重研究在液体环境下飞秒激光与尿路组织的相互作用规律。研究发现 , 选择适合的灌注液体 , 可使飞秒激光在液体环境下仍然保持精细的切割特性 , 主要问题是活体组织在切割中产生的出血和气泡形成这两个主要现象 , 对切割精细程度和速度有一定影响 , 但可通过一些简单措施加以克服。同时还发现 , 灌注液的热传导作用对激光的切割效率有一定的影响 , 但其程度在一定的灌注速度范围内是无显著性差异的。最后 , 活体组织采用飞秒激光切割后 , 切割后即刻、愈合中的肉芽组织和疤痕均优于对照激光 ( 钬激光 ) 的切割效果 , 推测运用飞秒激光对于尿路狭窄的治疗效果 , 将得到大大提高。关键词 : 飞秒脉冲激光 ; 尿路狭窄 ; 腔镜手术 ; 激光 - 组织相互作用学科代码 :H0503发表论著 :[1]Liang JH, Kang J, Pan YL, Zhang L, Qi J. Ex vivo evaluation of femtosecond pulselaser incision of urinary tract tissue in a liquid environment: implicationsfor endoscopic treatment of benign ureteral strictures. Lasers Surg Med.2011;43(6):516-21.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2从离子通道蛋白 TRPC6 角度探讨突变 podocin 致足细胞损伤的分子机制批准号 :30801250项目负责人 : 范青锋所在单位 : 北京大学本课题从 TRPC6 的角度探索了两种不同突变 podocin V165X 和 R168H 引起足细胞损伤的分子机制。结果 : 与 V165X 相比 ,R168H 引起的足细胞损伤更为严重。在 TRPC6 过表达足细胞 ,OAG 刺激后胞内游离 Ca2+ 浓度 ([Ca2+]Fi) 以及 Ca2+ 通道电流水平增加 ; 细胞骨架排列紊乱 ;nephrin 和 synaptopodin 表达降低 ,RhoA 活性增加。R168H 的分布发生了明显改变 , 与内质网标记物 calreticulin 共定位 ; 而 V165X 仍然分布在胞膜。V165X 和 R168H 均能引起 TRPC6 表达量以及 [Ca2+]Fi 的增加 ; 但敲低 TRPC6 仅能抑制 V165X 引起的足细胞损伤和 [Ca2+]Fi 增加。在表达 R168H 的足细胞 , 内质网标记物 Bip?grp78, p-PERK 和caspase-12 的表达增加。在表达 V165X 或 R168H 足细胞 ,ERK 信号通路发生不同程度的的活化。结论 :TRPC6 表达增加的确能够增加足细胞 Ca2+ 通道开放 , 胞内 [Ca2+]Fi 增加而导致细胞损伤。两种不同突变 podocin 通过完全不同的分子机制引起足细胞损伤。- 130 -

关键词 : 突变 podocin; 离子通道蛋白 TRPC6; 足细胞 ; 足细胞损伤 ; 蛋白尿学科代码 :H0518发表论著 :[1]Fan Q, Zhang H, Ding J, Liu S, Miao J, Xing Y, Yu Z, Guan N. R168H and V165Xmutant podocin might induce different degrees of podocyte injury via differentmolecular mechanisms. Genes Cells. 2009;14(9):1079-90.[2]Jiang L, Ding J, Tsai H, Li L, Feng Q, Miao J, Fan Q. Over-expressing transientreceptor potential cation channel 6 in podocytes induces cytoskeletonrearrangement through increases of intracellular Ca2+ and RhoA activation. ExpBiol Med (Maywood). 2011;236(2):184-93.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0X 连锁 Alport 综合征女性的表观遗传学研究批准号 :30801252项目负责人 : 张宏文所在单位 : 北京大学Alport 综合征是最常见的遗传性肾脏疾病 , 临床主要表现为血尿和进行性肾功能减退 ,X 连锁显性遗传 (XLAS) 为主要遗传方式 , 现已明确编码 IV 型胶原 a5 链的基因 COL4A5为致病基因。女性 XLAS 患者临床表型差异很大 , 轻者仅表现为镜下血尿 , 重者可有慢性肾衰竭。本课题组前期研究显示女性患者临床表型的复杂性不能被 COL4A5 基因突变类型和位置所解释 , 但与 COL4A5 基因突变 mRNA 的表达量相关 , 提示可能和 X 染色体失活有关 , 但确切机制不清。基于 DNA 序列不变而基因功能发生明显改变的表观遗传学调控的理论基础 ,本研究采用基于男性激素受体基因的限制性酶切 PCR 检测不同组织中 X 染色体失活情况 , 采用甲基化特异性 PCR 检测 DNA 甲基化 , 从表观遗传学角度探讨女性临床表型差异的可能机制 , 结果显示女性 XLAS 患者蛋白尿程度与外周血而不是皮肤成纤维细胞组织中 X 染色体失活相关 , 且 X 染色体失活存在组织特异性而无年龄特异性 , 提示也许只有肾脏组织中 X 染色体失活方式才可能和 XLAS 女性患者临床表型相关。我们将在后续研究中探讨 XLAS 女性患者临床表型和其肾组织 X 染色体失活、COL4A5 启动子甲基化的关系。关键词 :Alport 综合征 ; 女性 ;X 染色体失活 ; 表观遗传学学科代码 :H0502发表论著 :[1]Zhang HW, Ding J, Wang F. Age and tissue specific variation of X-inactivationratios in X-linked Alport syndrome females. Pediatric Health, Medicine andTerapeutics. 2010;1:1-6.[2]Zhang H, Ding J, Wang F, Zhao D. Mutation detection of COL4An gene based on- 131 -

mRNA of peripheral blood lymphocytes and prenatal diagnosis of Alport syndromein China. Nephrology (Carlton). 2011;16(4):377-80.[3]Zhang H, Ding J, Wang F, Yu L. Attitudes toward genetic diagnosis and prenataldiagnosis of X-linked Alport syndrome in China. Nephrology (Carlton).2012;17(4):398-401.[4] 张宏文 , 丁洁 . X 连锁 Alport 综合征女性患者临床表型差异的可能机制 . 临床儿科杂志 . 2011;29(2):189-191.[5] 张宏文 , 王芳 , 丁洁 . 年龄和组织类型对 X 连锁 Alport 综合征女性患者 X 染色体失活方式的影响 . 中国循证儿科杂志 . 2011;6(6):401-405.[6] 张宏文 , 王芳 , 杨慧霞 , 丁洁 , 赵丹 , 卜定芳 . 不同遗传型 Alport 综合征的产前基因诊断 . 中华儿科杂志 . 2011;49(6):477-479.[7] 张宏文 , 丁洁 , 王芳 . X 连锁显性遗传 Alport 综合征女性患者临床表型与不同组织 X染色体失活方式的关系 . 实用儿科临床杂志 . 2010;25(5):320-323.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0H05 泌尿系统地区科学基金项目长期腹膜透析中腹膜功能衰退的机制和防治研究批准号 :30860110项目负责人 : 钟爱民所在单位 : 江西省人民医院在长期腹膜透析治疗中 , 由于腹膜功能的衰退而导致长期腹透治疗失败已成为困扰腹透患者及其研究者的一个重要难题。近年来的研究描述了长期腹膜透析中腹膜结构的改变包括间皮细胞的脱落、间皮下大量细胞外基质堆积、间质纤维化、腹膜新生血管增生与血管硬化等 , 继而在功能上表现为毒素清除和超滤能力的下降。尿毒症本身、反复的腹膜炎、腹透液的生理不相容性是导致腹膜结构和功能改变的主要因素 , 但引起这些腹膜结构和功能变化的机制目前尚不完全清楚。为探讨长期腹膜透析时腹膜结构和功能改变的分子生物学机制 , 本实验中 , 我们利用尿毒症大鼠腹膜透析模型 , 观察腹膜的结构和功能改变 , 检测与腹膜血管增生和间质纤维化密切相关的细胞因子 ( 血管生成素、血管内皮生长因子、转化生长因子等 ), 并双向观察糖基化终末产物 (AGEs) 对腹膜的损害和 AGEs 抑制剂- 吡哆胺对腹膜结构和功能的保护效果 , 旨在为临床防治长期腹膜透析时腹膜结构和功能改变探讨一条新途径。关键词 : 腹膜透析 ; 腹膜功能 ; 血管生成素 ; 吡哆胺学科代码 :H0516发表论著 :[1] 施敏 , 庄薇 , 钟爱民 . 尿毒症大鼠腹透模型的建立 . 江西医学院学报 . 2009;- 132 -

49(10):25-26.[2] 施敏 , 陈红 , 钟爱民 , 庄薇 , 李贇 . 长期腹膜透析对尿毒症大鼠腹膜结构的影响 . 山东医药 . 2010;50(29),:10-12.[3] 庄薇 , 陈红 , 施敏 , 钟爱民 . 血管生成素及其受体在腹膜透析腹膜组织中的表达 . 临床与实验病理学杂志 . 2011;27(8):852-855.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5纳米微粒介导的晶体 - 细胞反应在肾乳头钙化形成中的相关性研究批准号 :30860280项目负责人 : 邓耀良所在单位 : 广西医科大学本研究采用现代腔内技术、细胞培养技术和电镜技术 , 在同步收集的草酸钙肾结石患者肾乳头钙化斑周围活检组织、肾结石和肾盂尿液标本中 , 检测出钙化性纳米微粒 (CNP)的存在 , 这些标本来源的 CNP 的形态在无血清的培养环境中具有多形性。利用分离和培养出的 CNP 进行体外细胞培养研究和动物模型体内研究 , 发现人肾小管上皮细胞具有吸附、吞噬 CNP 的能力。CNP 可以引起人肾小管上皮细胞氧化应激损伤。CNP 诱导晶体形成的作用机理可能与细胞内的氧化应激损伤作用有关。NADPH 氧化酶参与了 CNP 引起人肾小管上皮细胞活性氧的产生。小鼠肾结石模型研究初步证实 ,CNP 可导致小鼠肾脏钙化 , 结合体外研究分析 , 可能通过肾小管上皮细胞、巨噬细胞等内吞转移等方式 , 诱导异质成核形成肾乳头钙化 , 最后导致结石形成。研究结果初步验证了我们的假设 :CNP 介导的晶体 - 细胞反应是肾乳头钙化形成和发展的关键因素。但由于缺乏特异性的分子生物学标记物 , 本研究未能验证 CNP 的生物性 , 也未能建立起稳定的动物模型。这是我们进一步研究的方向。关键词 :Randall 斑 ; 钙化性纳米微粒 ; 巨噬细胞 ; 细胞因子 ; 炎症反应学科代码 :H0506发表论著 :[1] 陶芝伟 , 邓耀良 , 黎承杨 . 利用电镜技术对尿路钙化性纳米微粒的初步观察 . 广西医科大学学报 . 2009;26(6):837-839.[2] 孟冬冬 , 邓耀良 , 黎承杨 . 钙化性纳米微粒与人肾小管上皮细胞相互作用的实验研究 .中华泌尿外科杂志 . 2011;32(11):754-757.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 2 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3高糖环境下逼尿肌中 SCF/c-kit 信号变化及其对膀胱 Cajal 样间质细胞的影响- 133 -

批准号 :30860281项目负责人 : 王勤章所在单位 : 石河子大学摘要 : 逼尿肌中 ICC(Interstitial cells of Cajal) 是膀胱自发兴奋的起源及神经调控枢纽 , 它在糖尿病膀胱病变 (Diabetic cystopathy,DCP) 发病中可能扮演重要角色。在实验中 , 我们首先成功制作了 DCP 动物模型 , 发现体内高糖环境可以导致 ICCc-kit 基因转录和蛋白翻译下调 , 影响 ICC 表型维持 , 引起 ICC 数量减少进而导致膀胱逼尿肌收缩功能障碍 ; 在体外 , 通过体外高糖环境下培养逼尿肌 ICC, 发现高糖环境可以引起 ICC 形态和超微结构改变 , 兴奋性及 c-kit 基因转录和蛋白翻译下调。证实了体内、体外高糖环境通过下调 SCF/c-kit 信号引起逼尿肌 ICC 减少 , 进而影响膀胱功能。在 SCF 刺激和 / 或 SCL 基因转入后 , 高糖环境子下培养的 ICC 表型 , 兴奋性和 c-kit 转绿和翻译都发生了一定的逆转 ,针对 SCF/c-kit 信号的治疗为治疗 DCP 提供了新的思路。关键词 : 糖尿病 ; 膀胱功能障碍 ;Cajal 样间质细胞 ;c-kit;SCF;学科代码 :H0510发表论著 :[1] 朱国栋 , 纪世琪 , 丁国富 , 王勤章 . 豚鼠膀胱 Cajal 样间质细胞肌层分布及相关功能分析 . 农垦医学 . 2009;1:1-3.[2] 范勇洪 , 丁国富 , 王勤章 , 李云飞 , 蔡志强 . 高糖环境对豚鼠膀胱 ICCs 细胞形态及电生理的影响 . 现代生物医学进展 . 2009;20:3858-3860.[3] 蔡志强 , 王勤章 , 丁国富 , 李云飞 , 范勇洪 . 豚鼠膀胱 Cajal 样细胞在高糖环境中的形态学变化 . 现代生物医学进展 . 2009; 22:4248-4250.[4] 范勇洪 , 丁国富 , 王勤章 , 李云飞 , 蔡志强 . 高糖环境对豚鼠膀胱 ICCs 细胞超微结构的影响 . 现代生物医学进展 . 2009;23:4422-4424.[5] 王勤章 , 纪世琪 , 朱国栋 , 李云飞 , 蔡志强 , 李应龙 , 王江平 , 丁国富 . 糖尿病豚鼠膀胱 Cajal 样间质细胞形态学变化及意义 . 临床与实验病理学杂志 .2009; 6:631-634.[6] 周建民 , 丁国富 , 王勤章 , 刘新军 , 刘永国 . 人 SCL 基因 pDC315-EGFP 真核表达载体的构建及意义 . 山东医药 . 2010;51:7-9.[7] 李云飞 , 丁国富 , 蔡志强 , 范勇洪 , 王勤章 . 豚鼠糖尿病性膀胱病逼尿肌中 c-kitmRNA 和蛋白的表达变化及意义 . 中国病理生理杂志 . 2010; 2: 345-348.[8] 蔡志强 , 丁国富 , 李云飞 , 范勇洪 , 王勤章 . 体外 Cajal 样细胞 c-kit 基因 mRNA 在高糖环境下表达变化及意义 . 农垦医学 . 2010; 1:1-4.[9] 王勤章 , 李云飞 , 丁国富 , 范勇洪 , 蔡志强 . 豚鼠膀胱 Cajal 样间质细胞类型及其与钙离子振荡特性的关系 . 中华泌尿外科学杂志 . 2010; 9: 614-617.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 9- 134 -

H07 内分泌系统 / 代谢和营养支持面上项目胰腺 GnRH 旁分泌调节胰岛激素分泌的研究批准号 :30870948项目负责人 : 姬秋和所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学促性腺激素释放激素 (GnRH) 在胰腺外分泌部存在表达 , 而其受体则位于胰岛细胞 ,提示胰腺外分泌可能通过 GnRH 及其受体对胰岛激素的分泌具有调节作用。本研究通过体内和体外实验观察了高糖和高脂条件下胰腺 GnRH 及其受体与胰岛功能之间的关系。结果发现 :(1)GnRH mRNA 在高脂和 GK 糖尿病大鼠空、回、结肠道表达同胰高血糖素原 (PG)mRNA皆呈正相关性。多元逐步回归分析显示 GnRH mRNA 对餐后 180 分钟血糖影响最大 ;(2)高脂妊娠大鼠的胰腺 GnRH 表达增加 , 同时其胰岛素抵抗较高脂大鼠和正常妊娠大鼠加重 ;(3) 老龄大鼠胰腺 GnRH mRNA 表达水平下降 , 且与血糖、胰岛素及胰岛素分泌指数呈负相关 ;(4) 胰腺纤维化早期阶段导致胰岛素早期分泌功能下降 , 胰岛素抵抗增加 , 同时 GnRH受体表达降低 , 胰腺 GnRHR 与糖负荷 15 分钟时血清胰岛素呈正相关 , 与 Bcl-2/Bax 呈负相关。这些研究结果提示 , 肠道系统和胰腺表达的 GnRH 可能通过旁分泌途径与 GLP-1 相互作用调节胰岛功能。关键词 :GnRH; 胰腺外分泌 ; 胰岛激素分泌 ; 旁分泌学科代码 :H0713发表论著 :[1] Hou, Rongrong, Zhang, Jing, Yin, Tao, Cao, Hongwei, Zhang, Nanyan, Li, Xiaomiao, Wang, Li,Xing, Ying, Li, Deqiang, Ji, Qiuhe. Upregulation of PTEN by peroxynitrite contributes tocytokine-induced apoptosis in pancreatic beta-cells. Apoptosis, 15(8), pp 877-886, 2010/8[2] Wang, Li, Cao, Hongwei, Jiang, Ning, Zhang, Nanyan, Zhang, Jing, Hou, Rongrong, Chen,Changsheng, Wang, Yingmei, Li, Xiaomiao, Li, Deqiang, Ji, Qiuhe. Differential expression ofgonadotropin-releasing hormone (GnRH) in pancreas during rat pregnancy. Endocrine, 36(3),pp 538-545, 2009/12(SCIE).(SCI 收录 )[3] Wang, Li, Wu, Jing, Cao, Hongwei, Chen, Rong, Zhang, Nanyan, Fu, Jianfang, Gao, Bin,Zhang, Jing, Hou, Rongrong, Tang, Chaowu, Ji, Qiuhe. The Correlation between IntestinalGonadotropin-Releasing Hormone (GnRH) and Proglucagon in Hyperlipidemic Rats andGoto-Kakizaki (GK) Rats. Endocrine Pathology, 20(4), pp 227-234, 2009/12(SCIE).(SCI 收录 )[4] 叶晓莉 , 付建芳 , 曹宏伟 , 王立会 , 刘涛 , 姬秋和 . 胰腺纤维化进程中大鼠胰腺 GnRH 及GnRHR、Bcl-2 及 Bax、胰岛 beta; 细胞功能的变化 . 解放军医学杂志 , 35(08), pp 923-928,2010/8/1( 中国知网 ).[5] 王立会王莉曹宏伟叶晓莉刑影高彬姬秋和 . 不同月龄大鼠胰腺促性腺激素释放激素的表达变化及其与糖代谢的关系 . 中国糖尿病病杂志 , 18(11), pp 863-865会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 2- 135 -

获奖 :组蛋白翻译后修饰对糖尿病视网膜病变的影响批准号 :30870949项目负责人 : 郑凌所在单位 : 武汉大学糖尿病视网膜病变是导致成年人视弱和失明的主要原因 , 其发病机理尚不清楚。申请人的前期工作发现 , 在链脲佐菌素 (STZ) 诱导的糖尿病大鼠视网膜中 , 组蛋白乙酰化水平异常。针对这一现象 , 本研究拟采用高糖处理的视网膜细胞和链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型 , 运用蛋白质印迹反应、蛋白质质谱鉴定 , 蛋白质 /DNA 和 PCR 芯片组、染色质免疫沉淀、组织染色以及免疫荧光染色等检测手段 , 1) 进一步研究糖尿病对多种组蛋白翻译后修饰 , 例如乙酰化、甲基化和磷酸化的影响 ;2) 阐明组蛋白异常乙酰化修饰对糖尿病视网膜病变中炎症基因的调控作用 ;3) 使用药物特异性地抑制组蛋白乙酰转移酶 (HAT), 研究抑制组蛋白乙酰化对糖尿病引发的视网膜神经、血管细胞的凋亡和退变的影响。本项目所计划研究的组蛋白翻译后修饰对糖尿病视网膜病变的影响 , 对深入了解糖尿病视网膜病变的分子机理 , 指导设计有效治疗糖尿病视网膜病变的新型药物有着重要的理论意义。关键词 : 糖尿病视网膜病变 ; 组蛋白乙酰化 ; 翻译后修饰 ; 质谱学 ; 芯片组学科代码 :H0713发表论著 :[1] Zheng L*, Liu S., Sun M., Chang J., Chance M.R., Kern T. S. Pharmacologic interventiontargeting glycolytic-related pathways protects against retinal injury due to ischemia andreperfusion. Proteomics, 2009,9(7): 1869-82[2] Zheng L, TS. Kern. Role of nitric oxide, superoxide, peroxynitrite and poly(ADP-ribose)polymerase in diabetic retinopathy. Frontiers in Bioscience, 2009, 14: 3974-87.[3] Zhou Y, Li JS, Zhang X, Wu YJ, Huang K, Zheng L. Low-dose ursolic acid inhibits earlylesions in diabetic nephropathy. Int J Mol Med. 2010,26(4):565-70.[4] Zhang X, Cheng B, Gong H, Li C, Chen H, Zheng L, Huang K.Porcine islet amyloidpolypeptide fragments are refractory to amyloid formation .FEBS Letters. 585 (2011)71–77[5] Chen H, Zheng C, Zhang X, Li J, Li J, Zheng L, Huang K..Apelin alleviatesdiabetes-associated endoplasmic reticulum stress in the pancreas of Akita mice. Peptides.2011 Aug;32(8):1634-9[6] Wang L, Li C, Guo H, Kern TS, Huang K, Zheng L. Curcumin inhibits neuronal and vasculardegeneration in retina after ischemia and reperfusion injury. PLoS One. 2011;6(8):e23194.Epub 2011 Aug 9.[7] Cheng B, Liu X, Gong H, Huang L, Chen H, Zhang X, Li C, Yang M, Ma B, Jiao L, Zheng L,Huang K..Coffee Components Inhibit Amyloid Formation of Human Islet AmyloidPolypeptide in Vitro: Possible Link between Coffee Consumption and Diabetes Mellitus. JAgric Food Chem. 2011 Dec 28;59(24):13147-55. Epub 2011 Nov 21.[8] Li J, Huang J, Li JS, Chen H, Huang K, Zheng L. Accumulation of endoplasmic reticulumstress and lipogenesis in the liver through generational effects of high fat diets . J Hepatol.- 136 -

2012 Apr;56(4):900-7. Epub 2011 Dec 13.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 5获奖 :雄激素治疗烧伤引起的骨骼肌蛋白高分解代谢的信号转导机制研究批准号 :30870951项目负责人 : 柴家科所在单位 : 中国人民解放军总医院该项目系统地研究了雄激素治疗严重烧伤引起的骨骼肌蛋白高分解代谢的可能机制。体内实验 , 在严重烧伤大鼠模型中 , 应用雄激素治疗 , 可在一定程度上拮抗严重烧伤导致的体重下降、骨骼肌萎缩、蛋白高代谢及血糖升高 ; 其机制可能是雄激素上调骨骼肌中与蛋白合成代谢相关的 Erk、mTOR、Akt、p70S6K 分子基因表达、蛋白活化 , 并拮抗与蛋白降解增强相关的骨骼肌特异泛素连接酶 MuRF1 和 MAFbx 基因水平的改变 ; 此外雄激素可拮抗严重烧伤导致的骨骼肌中 IGF-1 及胰岛素敏感的葡萄糖和氨基酸转运因子 SAT2 、Glut3 表达的下调。体外实验 , 雄激素一方面通过上调增殖细胞核抗原 PCNA 的表达 , 加快细胞周期进程 , 促进骨骼肌卫星细胞的增殖 , 进而导致骨骼肌细胞核数的增加 ; 另一方面通过上调IGF-1/PI3K/Akt-mTOR 信号途径分子的基因及蛋白水平的表达 , 促进骨骼肌蛋白合成代谢 , 拮抗严重烧伤引起的骨骼肌蛋白高分解。体内体外实验表明 , 雄激素可通过改变IGF-1/PI3K/Akt-mTOR 通路的活化状态 , 促进骨骼肌细胞增殖、葡萄糖和氨基酸转运 , 促进蛋白合成代谢 , 可在一定程度上治疗严重烧伤引起的骨骼肌蛋白高代谢。关键词 : 雄激素睾酮 , 烧伤 , 蛋白代谢 ,IGF-1/PI3K/AKT-mTOR, 骨骼肌学科代码 :H0730发表论著 :[1] Yin, Hui-Nan, Chai, Jia-Ke, Yu, Yong-Ming, Shen, Chuan-An, Wu, Yan-Qiu, Yao, Yong-Ming,Liu, Hui, Liang, Li-Ming, Tompkins, Ronald G., Sheng, Zhi-Yong. Regulation of SignalingPathways Downstream of IGF-I/Insulin by Androgen in Skeletal Muscle ofGlucocorticoid-Treated Rats. Journal of Trauma-Injury Infection and Critical Care, 66(4), pp1083-1090,[2] Deng, Hu-ping, Chai, Jia-ke. The effects and mechanisms of insulin on systemic inflammatoryresponse and immune cells in severe trauma, burn injury, and sepsis. InternationalImmunopharmacology, 9(11), pp 1251-1259,[3] Ma L, Chai JK, et al. Testosterone regulating glucose metabolism and protein turnover insevere burn rat skeletal muscle is dependent upon Erk and mTOR. Molecular and CellularEndocrinology. Accepted.[4] 马丽 , 柴家科 , 申传安等 . 胰岛素对烫伤血清诱导骨骼肌成肌细胞凋亡的调控作用 . 中- 137 -

华烧伤杂志 ,2011,27(5):353-357[5] 褚万立 , 柴家科 , 冯永强等 . 内质网应激在严重烧伤大鼠心肌凋亡中的作用 . 中国修复重建外科杂志 ,2012, 接收[6] 褚万立 , 柴家科 , 冯永强等 . 严重烧伤大鼠肝脏内质网应激相关蛋白的表达改变 . 中华医学杂志 ,2012, 接收会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 1 博士 4 硕士 0获奖 :KIAA1199 基因在糖尿病血管病变中的作用研究批准号 :30870954项目负责人 : 陈凤玲所在单位 : 上海交通大学糖尿病大血管病变 ( 动脉粥样硬化 ) 是糖尿病患者致死、致残的主要原因。KIAA1199基因是近来发现的一个新基因 , 其功能不明。我们先前的研究发现 KIAA1199 基因在糖尿病猕猴及 2 型糖尿病患者的主动脉中的表达下降 ; 同时吡格列酮和胰岛素能够明显上调KIAA1199 基因在人主动脉平滑肌细胞的表达 ; 乙酰化的低密度脂蛋白和葡萄糖则抑制其表达。最近的文献报道 ,KIAA1199 可能是 WNT 信号途径的靶基因。WNT 信号途径参与细胞增殖、分化等调控。因此 , 我们设想 KIAA1199 基因可能通过影响血管平滑肌的增殖或凋亡来参与糖尿病大血管并发症的发生。本研究将应用慢病毒载体系统体外过表达 KIAA1199 和基因干扰技术下调其表达 , 并结合血管平滑肌细胞特异性 KIAA1199 转基因动物模型 , 观察KIAA1199 基因在血管平滑肌细胞增殖和凋亡及糖尿病大血管并发症发生中的作用 , 并明确其作用的分子机理。关键词 : 糖尿病大血管病变 ; 血管平滑肌细胞 ;KIAA1199; 转基因学科代码 :H0713发表论著 :[1] Liu XY, Shi JH, Du WH, Fan YP, Hu XL, Zhang CC, Xu HB, Miao YJ, Zhou HY,Xiang P, Chen FL. Glucocorticoids decrease body weight and food intake and inhibitappetite regulatory peptide expression in the hypothalamus of rats. Exp Ther Med.2011, 292:977-984.[2] Shi JH, Du WH, Liu XY, Fan YP, Hu XL, Zhou HY, Xu HB, Zhang XM, Xiang P, ChenFL.Glucocorticoids decrease serum adiponectin level and WAT adiponectin mRNAexpression in rats.Steroids,2010 Dec;75(12):853-8[3] 刘晓燕 , 严士敏 , 龚慧 , 赵秀丽 , 陈凤玲。小檗碱对 THP-1 巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出的影响 [J]。上海交通大学学报 ( 医学版 )2009,29(12):1415-1418.[4] 刘晓燕 , 严士敏 , 赵秀丽 , 郁红 , 陈凤玲。葡萄糖抑制 THP-1 巨噬细胞载脂蛋- 138 -

白 E 的表达 [J]。蚌埠医学院学报 2009,34(11):953-955。[5] Chen FL, Yang ZH, Wang XC, Liu Y, Yang YH, Li XL, Liang WC, Zhou WB, Hu RM.Adipophilin affects the expression of TNF-α, MCP-1, and IL-6 in THP-1macrophages. Mol Cell Biochem. 2010, 337(1-2):193-199.[6] 陈凤玲 , 杨志红 , 王宣春 , 刘瑜 , 周闻白 , 宋晓艳 , 沈烨 , 牟波 , 胡仁明。亲脂素增加血管平滑肌细胞的脂质集聚 [J]. 中华内分泌代谢杂志 2009,25(3):308-311.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 6获奖 :小鼠脂蛋白脂酶基因缺陷在 1 型糖尿病肾病中的作用及其机制研究批准号 :30870992项目负责人 : 黄薇所在单位 : 北京大学糖尿病肾病 (DN) 是糖尿病最严重的并发症之一 , 它的发生发展极具遗传易感性。近来发现人脂蛋白脂酶 (LPL) 基因多态性引起的低 LPL 活性 , 高血浆甘油三脂 (TG) 水平同2 型 DN 的发展呈正相关关系 , 而其与 1 型 DN 的关系则争论很多。为了阐明 LPL 基因表达水平在 1 型 DN 中的作用 , 本项目将利用 LPL 基因缺陷杂合子小鼠模拟人体 LPL 基因多态性中LPL 的低表达水平 , 制备成单侧肾切的 1 型 DN 模型 , 研究 LPL 基因缺陷对 1 型 DN 进展的影响及其可能的作用机制。研究结果表明 , LPL 基因缺陷导致 1 型糖尿病小鼠血浆 TG 水平及血压的升高 , 促进早期白蛋白尿的形成 ; 在肾切的基础上 ,LPL 基因缺陷使肾小球表面积增大、基质增生、足突受损 , 进一步加重 DN 的损害。快速蛋白液相色谱 (FPLC) 显示 ,VLDL-TG 明显增加 , 而HDL-C 则下降。机制研究表明在糖尿病的情况下 ,LPL 基因缺陷可能通过激活与 TG 合成相关的转录因子 SREBP-1c 以及 PKCβ -NOX4 氧化途径和纤维化相关因子 PAI-1 的表达 , 导致体内脂质代谢异常和氧化应激水平增强 , 最终促进 1 型 DN 的进展。本研究提示在 LPL 基因多态性低表达的 DN 患者 , 应及早预防和治疗。关键词 : 高甘油三脂血症 ; 脂蛋白脂酶 ; 糖尿病肾病 ; 基因敲除小鼠学科代码 :H0713发表论著 :[1] 周晓琳 , 王兆红 , 王宇辉 , 沈蔷 , 管又飞 , 刘国庆 , * 黄薇 . 脂蛋白酯酶基因缺陷加重小鼠 1 型糖尿病肾病的早期进展 .Chin J Diabetes, 20(1), pp 61-64, 2012/1/20.[2] 周晓琳 , 王兆红 , 王宇辉 , 沈蔷 , 管又飞 , 刘国庆 , * 黄薇 . 脂蛋白脂酶基因缺陷促进小鼠 1 型糖尿病肾病的进展及其机制研究 . 中国病理生理杂志 , 26(10), p 2060,2010/10.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1- 139 -

培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1获奖 :应用 LPL 和 SRB1 基因缺陷小鼠研究 ApoA5 降低甘油三酯的机制批准号 :30870994项目负责人 : 刘国庆所在单位 : 北京大学本课题系根据我们发现的载脂蛋白 AV(ApoAV) 可经由非脂蛋白酯酶 (LPL) 途经降低血浆甘油三酯的现象 , 提出了 ApoAV 可能通过与肝脏的 SRB1 相互作用从而清除血浆乳糜微粒 (CM) 的假说。体外培养的 SRB1 缺陷小鼠原代肝细胞高表达 ApoAV 后 , 摄取 CM 的功能较正常肝细胞降低 , 表明 SRB1 有可能在体内参与 ApoAV 介导的 CM 清除。但在体内实验中 ,SRB1-LPL 双基因缺陷和 LPL 单基因缺陷小鼠比较却没有明显的 CM 代谢延缓现象 , 表明 SRB1可能不是 ApoAV 介导 CM 清除的主要因素。随后国外研究发现了 ApoAV 介导 CM 清除的作用可能是通过 GPIHBP1 实现的 , 便拟以 RNAi 技术来体内抑制 GPIHBP1 表达进行验证。但预实验中发现 RNAi 并不能有效抑制 GPIHBP1 的表达 , 因此 , 引进了 GPIHBP1 基因敲除小鼠 , 拟通过在体内高表达 ApoAV 后 , 与 LPL 基因缺陷小鼠高表达 ApoAV 进行 CM 代谢比较 , 从而明确ApoAV 是否通过 GPIHBP1, 而非 LPL 介导 CM 清除。在开展上述课题过程中 , 同时发现了巨噬细胞中的 LPL 能够在严重高甘油三酯血症情况下 , 起到清除血浆 CM 的作用。关键词 : 转基因小鼠 ; 高脂血症 ; 脂蛋白酯酶 ; 载脂蛋白 AV; 乳糜微粒学科代码 :H0719发表论著 :[1] Ding Y, Zhang L, Wang Y, Huang W, Tang Y, Bai L, Ross CJ, Hayden MR, LiuG.Amelioration of Hypertriglyceridemia with Hypo-alpha-cholesterolemia in LPL Deficient Miceby Hematopoietic Cell-Derived LPL. PLoS One. 2011;6(9):e25620.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 7 分组 4培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1获奖 :ATP 合成酶在胰岛 β 细胞功能障碍中的作用研究批准号 :30870995项目负责人 : 杨吉春所在单位 : 北京大学本课题在前期发现亮氨酸能调高胰岛 β 细胞 ATP 合成酶 β 亚基表达 , 增加细胞 ATP 含- 140 -

量并改善 2 型糖尿病患者胰岛功能障碍的基础上 , 进一步研究 ATP 合成酶在不同代谢分子刺激下胰岛素分泌 , 及 β 细胞功能障碍与凋亡过程中的作用。研究内容一 , 以原代培养胰岛及β 细胞系为研究对象 , 观察腺病毒过表达及 RNAi 敲减 ATP 合成酶 α 与 β 亚基 (ATPα /β )表达对不同代谢分子短时间刺激下细胞 ATP 含量及胰岛素分泌的影响 ; 研究内容二 , 观察过表达及敲减 ATPα /β 表达对长时间游离脂肪酸及高糖暴露下 β 细胞胰岛素分泌及细胞凋亡的影响 , 评估 ATP 合成酶对诱导性 β 细胞功能障碍及凋亡的保护作用 ; 研究内容三 , 检测 2 型糖尿病胰岛细胞内 ATPα /β 表达水平并观察过表达 ATPα /β 是否能改善胰岛功能障碍。本课题的展开将从调控 β 细胞 ATP 合成酶核心亚基表达以改善甚至逆转胰岛功能障碍并阻止细胞凋亡这一新的角度为防治糖尿病提供重要信息。关键词 : 胰岛素分泌机制 ;β 细胞功能障碍 ;ATP 合成酶 ;PPAR-gamma学科代码 :H0713发表论著 :[1] Yang Jichun, Zhou Yunfeng and Guan Youfei .PPARγ as a therapeutic target in diabeticnephropathy and other renal diseases. Curr Opin Nephrol Hypertens. 2012, 21:97-105.[2] Wang Chunjiong, Guan Youfei, Yang Jichun* Cytokines in the progression of panceatic betacell dysfunction. Int J Endocrinol. 2010;2010:515136.[3] Yang Jichun*, Chi Yujing, Brant R. Burkhardt, Guan Youfei and Bryan Wolf. Leucinemetabolism in regulation of insulin secretion from panceatic beta cells. Nutrition Review.2010, 68: 270-279.[4] Yang Jichun*, Wang Chunjiong, Li jing et al PANDER binds to the liver cell membrane andinhibits insulin signaling in HepG2 cells. FEBS Letters. 2009, 583: 3009-3015.[5] Li Jing, Zhu Sen, Zhang Yuan, Chi Yujing, Tang Jianguo, Yang Jichun* Human leptindimerization during refolding is predominantly mediated by Cys146-Cys146 intermoleculardisulfide bond. Chin J of Biochem and Mol Biology 2009, 25: 333-338.[6] Li Jing, Zhang Dongjuan, Zhang Yuan, Huang Wei, Tang Jianguo and Yang Jichun* Tyr61Aromatic Side Chain is Critical for Spatial Structure Formation of Leptin. Chin J of Biochemand Mol Biology. 2009, 25: 235-241.[7] 迟毓婧李晶管又飞杨吉春 *. PI3K-Akt 信号传导通路对糖代谢的调控作用 . 中国生物化学与分子生物学报 2010, 26(10):879-885.[8] 周艳兰迟毓婧管又飞杨吉春 * 脂肪细胞因子与脂肪细胞发育分化 . 中国生物化学与分子生物学报 2011, 27(3):212-217.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 3获奖 :脂肪因子 Chemerin 在骨骼肌胰岛素抵抗发生中的作用及其机制批准号 :30871002项目负责人 : 沈伟利- 141 -

所在单位 : 上海交通大学线粒体功能障碍可能是导致 2 型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗发生的重要原因 , 多种脂肪因子参与其中的调控。Chemerin 是新近发现的脂肪因子 , 我们在高游离脂肪酸诱导的C2C12 骨骼肌胰岛素抵抗的细胞模型中发现 ,Chemerin 受体 ( CMKLR1) 的表达与骨骼肌线粒体功能密切相关 , 提出 Chemerin 可能参与调控骨骼肌胰岛素抵抗。本项目拟从细胞和动物的整体水平上阐明 1)Chemerin 对骨骼肌细胞糖脂代谢的影响 ; 2) Chemerin 通过调节骨骼肌线粒体的功能和生成而影响骨骼肌细胞的糖脂代谢 ;3)Chemerin-CMKLR1 通路与骨骼肌胰岛素信号通路的交互关系 ;4) 在整体动物模型上 , 观察给予外源性脂肪因子 Chemerin负荷情况下 , 胰岛素抵抗和糖、脂代谢的改变。以进一步阐明 Chemerin- 线粒体 - 胰岛素抵抗之间的关系 , 为确立胰岛素抵抗治疗的药物靶点开辟新的视角。关键词 : 骨骼肌 ; 胰岛素抵抗 ; 线粒体 ; Chemerin.学科代码 :H0712发表论著 :[1]. Shen W, Hao J, Feng Z, Tian C, Chen W, Packer L, Shi X, Zang W, Liu J. Lipoamide or lipoicacid stimulates mitochondrial biogenesis in 3T3-L1 adipocytes via the endothelial NOsynthase-cGMP-protein kinase G signalling pathway. Br J Pharmacol. 2011; 162(5):1213-1224.[2]. Hao J*, Shen W*, Sun L, Long J, Sharman E, Shi X, Liu J. Mitochondrial dysfunction in theliver of the type 2 diabetic Goto–Kakizaki rats: Improvement by a combination of nutrients. Brit JNutr 2011; 106 (5):648-55. (* 共同作者 )[3]. Liu J, Shen W, Zhao B, Wang Y, Wertz K, Weber P, Zhang P. Targeting mitochondrialbiogenesis for preventing and treating insulin resistance in diabetes and obesity: Hope fromnatural mitochondrial nutrients. Adv Drug Deliv Rev. 2009; 61(14):1343-52.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0批准号 :30871027项目负责人 : 陆林Rho 促 RKIP 磷酸化在糖尿病猪冠状动脉雷帕霉素支架术后所在单位 : 上海交通大学再狭窄发生中的作用和机制研究糖尿病冠脉雷帕霉素支架术后支架内再狭窄 (ISR) 的发病机制现仍不清楚。本研究用2D-DIGE 和质谱技术在糖尿病猪冠脉 ISR 血管段平滑肌组织中 , 发现与细胞增殖、应激有关的 12 种蛋白表达较非 ISR 组织升高 , 其上游 Rho 成员 (RhoA、Rac1、Cdc42) 表达和磷酸化erk 在 ISR 组织中显著升高。大鼠平滑肌细胞在含 PKC 抑制剂培养液中 , RhoA 高表达促进Raf-1 激酶抑制蛋白 (RKIP) 及 erk 磷酸化 , 该效应被 RhoA 抑制剂减弱。高表达 RhoA 的细胞增殖快于对照 , 导入 RKIP 磷酸化突变体 (153V) 后则抑制细胞生长。结合文献提示 RhoA促 RKIP 磷酸化使其丧失对 Raf-1/Mek/erk 通路的抑制可能是糖尿病 ISR 的一个新机制。后续研究将用 RhoA 突变体进一步验证 RhoA 促 RKIP 磷酸化现象 , 探讨磷酸化方式为直接或间接 ,RKIP 磷酸化后是否释放 Raf-1, 以期阐明该机制与糖尿病 ISR 的关系。- 142 -

关键词 : 糖尿病 ; 支架内再狭窄 ;RhoA;RKIP学科代码 :H0713发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 2 博士 2 硕士 2获奖 :21 羟化酶缺陷症基因突变的功能学研究批准号 :30871182项目负责人 : 蒋玲所在单位 : 山东大学本课题受国家自然科学基金 ( 项目编号 30871182 ) 资助 , 收集了三个 21- 羟化酶缺陷症家系 , 运用分子遗传学方法对这些家系进行了基因突变位点分析 , 并检测了新发现的突变对酶活性的影响。在所研究病例中 ,CYP21 基因序列分析共检测到 6 种突变类型 , 其中外显子 10 第 459 位密码子 CCC→CAC, 导致 Pro→His, 即 P459H, 此种突变目前国内外尚未见有相同突变类型的报道 ; 外显子 10 第 483 位密码子处存在杂合突变 :CGG→TGG, 导致编码该处的氨基酸 Arg→Trp, 即 R483W, 此种突变类型为罕见突变 , 目前国外仅见一例报道。我们利用 PCR-ACRS 研究方法证实 100 例正常成年汉族人均没有携带 P459H 变异 , 从而排除了该位点基因多态的可能。P459H 点突变首次在中国人 21-OHD 患者中发现。功能学研究显示 P459H 和 R483W 都显著降低了 2l 一羟化酶对孕酮的羟基化的催化活性 , 这在国际上均为首次报道。关键词 :21- 羟化酶缺乏症 ; 基因突变 ;P459H;R483W; 酶活性学科代码 :H0710发表论著 :[1] Jiang L, Song LL, Wang H, Wang JL, Wang PP, Zhou HB, Zhang XL..Identification andfunctional characterization of a novel mutation P459H and a rare mutation R483W in theCYP21A2 gene in two Chinese patients with Simple Virilizing form of congenital adrenalhyperplasia. J Endocrinol Invest. 2011 Jul 12. [Epub ahead of print][2] 蒋玲 .21- 羟化酶基因新突变 P459H 和 R483W 的功能学研究 . 中华内分泌代谢杂志 ,25(2), pp 150-151, 2009/4.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3获奖 :Th17 细胞参与自身免疫甲状腺病发生机理的研究- 143 -

批准号 :30871185项目负责人 : 张进安所在单位 : 西安交通大学20 年前有关 Th1、Th2 细胞的划分极大地丰富了人们对防御免疫和自身免疫的认识 ,一致认为类风湿性关节炎、多发性硬化症、炎症性肠病和桥本甲状腺炎等多种自身免疫性疾病主要由 Th1 细胞介导 , 而在系统性红斑狼疮、Graves 病等的发生中 Th2 细胞似乎起主要作用。近 5 年来新型免疫细胞 Th17 细胞的发现 , 对免疫反应尤其是自身免疫反应的Th1/Th2 模式提出了质疑和挑战。越来越多资料证实 Th17 细胞参与了多种自身免疫病的发生。Th17 细胞已成为自身免疫甲状腺病发生机理研究中不可回避的领域。因此 , 我们拟从动物模型和人体病理组织等途径 , 开展 Th17 细胞在自身免疫甲状腺病中的研究。研究发现 , 桥本甲状腺炎患者甲状腺组织及外周血中 IL-17mRNA 表达量明显升高 , 甲状腺组织中IL-17、IL-23p19 蛋白表达量明显升高 ; 与 Graves 病患者相比 , 桥本甲状腺炎患者体内IL-17 升高更为显著 ; 甲状腺炎小鼠模型中同样检测到高表达的 IL-17。Graves 病患者体内IL-17 表达量升高 , 但与对照组相比 , 差异不具有统计学意义。提示 Th17 细胞参与了自身免疫甲状腺疾病、尤其是桥本甲状腺炎的发生。关键词 :Th17 细胞 ; 桥本甲状腺炎 ;Graves 病学科代码 :H0707发表论著 :[1] Yang, Jing, Qin, Qiu, Yan, Ni, Zhu, Yuan-feng, Li, Cui, Yang, Xiang-ju, Wang, Xuan, Pandey,Madhu, Hou, Peng, *Zhang, Jin-anCD40 C/T(-1) and CTLA-4 A/G(49) SNPs are associatedwith autoimmune thyroid diseases in the Chinese population. ENDOCRINE, 41(1), pp111-115,2012/2(SCIE).[2] 刘琳 , 张进安 . Th17 细胞在自身免疫性疾病中的研究进展 . 国际生物制品学杂志 , 32(2),pp 92-96, 2009( 万方 ).[3] 王荣 , 张健 , 秦秋 , 刘琳 , 杨婧 , 闫妮 , 杨香菊 , 王璇 , 张进安 . Foxp3 在自身免疫性甲状腺病患者外周血和病变组织中的表达 . 西安交通大学学报 ( 医学版 ), 01 期 , pp56-60,2011/9( 中国知网 ).[4] 郁海燕 , 张进安 , 张利华 , 冯斌 , 王兴 , 任引刚下调 CXCR4 基因对甲状腺癌细胞 SW579增殖和侵袭能力的影响 . 山西医科大学学报 , 11 期 , pp 942-946,2010/11/26( 中国知网 ).会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 7获奖 :脂肪型微核糖核酸在 II 型糖尿病发生发展中的作用及防治价值研究批准号 :30871186项目负责人 : 欧和生- 144 -

所在单位 : 南华大学微核糖核酸 (microRNAs) 对疾病相关性基因表达有重要的调节作用。为探讨特异性microRNAs 在 II 型糖尿病发生发展中的作用 , 本项目在脂肪细胞分化体系中进行特异性脂肪型 micorRNA 的鉴定分析 , 并建立特异性 microRNA 为遗传背景的糖尿病动物模型。主要工作包括 : 微点阵法筛选脂肪分化型 microRNAs, 确定了某些与脂肪细胞分化密切相关的microRNAs, 如 miR-21, miR-24 和 miR-145; 构建其高表达质粒和细胞克隆 , 分析其对脂肪细胞分化的影响及脂肪细胞分化特异性基因 [ 如脂联素、脂肪性脂肪酸结合蛋白 (FABP4)、过氧化物酶体增殖物活化受体 γ (PPAR γ )] 的调节作用 ; 用转基因技术建立 microRNAs 高表达小鼠遗传系 , 并进行糖尿病病理特征如高血糖分检测分析 , 发现 miR-24 转基因小鼠的血糖浓度明显增高。该项目的完成进一步明确了某些功能型微核糖核酸糖尿病相关性基因的调节及其在疾病发生发展中的作用 ; 初步建立以特异性微核糖核酸为遗传背景的新型动物模型 , 为糖尿病的治疗和预防开拓新途径。关键词 : 微核糖核酸 ; 糖尿病 ; 基因表达 ; 动物模型 ; 胰岛素抵抗学科代码 :H0713发表论著 :[1] 欧和生 .microRNAs 对脂肪细胞分化相关因子的作用及预测 . 现代生物医学进展 ,10(5),pp972-974, 春季 2010[2] 欧和生 .microRNAs 与心血管疾病 . 生命科学 ,22(8), pp788-792, 秋季 2010[3] Ling HY, Ou HS, Feng SD, Zhang XY, Tuo QH, Chen LX, Zhu BY, Gao ZP, Tang CK, YinWD, Zhang L, Liao DF.Changes in microRNA profile and effects of mir-320 ininsulin-resistance 3T3-L1 adipocytes. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2009 May 19. [Epubahead of print][4] 欧和生 .microRNAs 在心血管疾病中作用的研究进展 . 国际病理科学与临床杂志 , 29(5),pp 451-455, 秋季 2009[5] 欧和生 . 微小 RNA 与肿瘤 . 国际肿瘤学杂志 , 36(10), pp 4-7, 冬季 2009[6] 欧和生 . 转录因子对内皮型一氧化氮合酶表达的调节作用 . 中国动脉硬化杂志 , 17(2),pp 159-162, 春季 2009[7] 欧和生 .microRNA 及其在心血管疾病中的作用研究进展 . 中国医药生物技术 , 4(1), pp40-42, 春季 2009[8] 欧和生 .Mir-24 对 3T3-L1 脂肪细胞分化及脂肪型脂肪酸结合蛋白表达的调节作用 . 中国药理学通报 ,26(4), pp483-487, 夏季 2010[9] 欧和生 . 内含子源性 microRNA 对内皮型一氧化氮合酶表达及血管内皮细胞增殖的作用 .Progress in Biochemistry and Biophysics,37(7),pp747-753, 夏季 2010[10] Yan L, Hao H, Elton TS, Liu Z, Ou H.Intronic microRNA suppresses endothelial nitric oxidesyntahse expression and endothelial cell proliferation via inhibition of stat3 signaling. MolCell Biochem. 2011 Nov;357(1-2):9-19.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 4 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 9获奖 :- 145 -

胰腺外分泌调节胰岛内分泌功能及其细胞信号传导系统的探索批准号 :30871187项目负责人 : 杨金奎所在单位 : 首都医科大学传统观念认为胰腺内、外分泌系统在组织学和功能上各自独立。但新近研究发现 : 胰腺导管与胰岛之间在组织学上存在紧密联系 ; 外分泌功能不足的病人发生糖尿病的风险增加。课题组研究发现外分泌因子 HCO3- 对胰岛素分泌有剂量依赖新调节作用。我们研究了囊性纤维化跨膜通道调节因子 (CFTR) 通过外碳酸氢根离子 (HCO-3) 介导的胰岛 β - 细胞分泌胰岛素 , 发现高 HCO3- 浓度导致 MIN6 细胞的胰岛素分泌显着减少 , 呈剂量依赖的相关性 ,而细胞存活率没有显着差异。 CFTR 的 mRNA 和 CFTR 蛋白在 MIN6β 细胞表达 ,CFTR 的主要是位于细胞膜。 CFTR 的 mRNA 表达水平呈与细胞外的 HCO3- 的治疗浓度正相关。在 25mM 的HCO3-,CFTR 的抑制剂 -CFTRinh-172 促进胰岛素分泌。结果表明 HCO3- 的负调节胰岛素分泌是 CFTR 介导的。新近 , 我们通过模片钳技术分析 CFTR 对细胞内 HCO3- 离子的影响及 pH 值变化 , 进一步研究其对胰岛细胞功能的作用。调节胰腺导管细胞分泌功能可能成为糖尿病药物治疗新的靶点。关键词 : 胰岛素 ;Na+-HCO3- 共同转运体 ; 胰腺导管上皮细胞学科代码 :H0713发表论著 :[1] Liu, C., Lv, X. H., Li, H. X, Cao, X., Zhang, F., Wang, L., Yu, M., *Yang, J. .Angiotensin-(1-7)suppresses oxidative stress and improves glucose uptake via Mas receptor in adipocytes. ActaDiabetologica, 48(12), pp 1-6,[2] *Yang, Jin-Kui, Zhou, Jian-Bo, Xin, Zhong, Zhao, Lei, Yu, Mei, Feng, Jian-Ping, Yang, Hui,Ma, Ya-Hong. Interactions Among Related Genes of Renin-Angiotensin System AssociatedWith Type 2 Diabetes Diabetes Care, 33(10), pp 2271-2273,[3] Ding, Yi-Lei, Wang, Yu-Hui, Huang, Wei, Liu, George, Ross, Colin, Hayden, Michael R.,Yang, Jin-Kui Glucose intolerance and decreased early insulin response in mice with severehypertriglyceridemia Experimental Biology and Medicine, 235(1), pp 40-46,[4] *Yang, Jin-Kui, Liu, Wei, Shi, Jing, Li, Yi-Bing An Association Between SubclinicalHypothyroidism and Sight-Threatening Diabetic Retinopathy in Type 2 Diabetic PatientsDiabetes Care, 33(5), pp 1018-1020,[5] Fang, H. J., *Yang, J. K. Tissue-specific Pattern of Angiotensin-converting Enzyme 2Expression in Rat Pancreas. Journal of International Medical Research, 38(2), pp 558-569,MAR-APR[6] M. J. Niu, *J. K. Yang, S. S. Lin, X. J. Ji, L. M. Guo. Loss of angiotensin-converting enzyme 2leads to impaired glucose homeostasis in mice Endocrine, 34(1355-008X (Print)13),pp56-61, 2008会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 6 硕士 6- 146 -

获奖 :新的炎症转录因子 LITAF 在肥胖诱导的胰岛素抵抗中的作用批准号 :30871188项目负责人 : 徐焱成所在单位 : 武汉大学LITAF(LPS-induced TNF-α Factor,LPS 诱导的 TNF-α 因子 ) 是独立于 NF-κ B 之外的一种新的炎症通路转录因子 . 根据这样几个证据 1) 已知炎症在肥胖引起的胰岛素抵抗中发挥重要介导作用 ;2) 脂肪酸作用于巨噬细胞的受体 TLR4 同样也是 LITAF 通路的细胞膜受体 ;3)LITAF 磷酸化后激活转录的下游炎症因子包括 TNFα ,IL6 等可以独立引起胰岛素抵抗 ,MCP-1 可以促进巨噬细胞的游走加重全身炎症反应 , 我们推测 , 通过阻断 LITAF 可以减轻肥胖诱导的胰岛素抵抗。目前在国内外还未有针对 LITAF 在糖尿病发生机制中作用的研究。我们通过在不同的肥胖程度伴不同胰岛素抵抗程度的人体上观察 LITAF 的活性 , 在细胞和动物在体水平上通过 RNA 干扰的方法阻断 LITAF 研究其对于胰岛素信号通路的作用 , 对于进一步阐明 2 型糖尿病发生机制 , 寻找新的药物靶位提供思路和线索。关键词 :LITAF; 肥胖 ; 胰岛素抵抗 ;2 型糖尿病学科代码 :H0716发表论著 :[1] Ji ZZ, Dai Z, Xu YC. A new tumor necrosis factor (TNF)-alpha regulator,lipopolysaccharides-induced TNF-alpha factor, is associated with obesity and insulinresistance. Chin Med J (Engl). 2011 Jan;124(2):177-82.[2] Huang Y, Liu J, Xu Y, Dai Z, Alves MH.Knockdown of LITAF expression in human THP-1macrophage cells can reduce insulin resistance in HepG2 cells. J Huazhong Univ SciTechnolog Med Sci. 2012 Feb;32(1):53-8.[3] Ji Z, Dai Z, Huang Y, Martins HA, Xu Y.Association of SUMO4 Met55Val variation withincreased insulin resistance in newly diagnosed type 2 diabetes in a Chinese population. JHuazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 2011 Jun;31(3):306-11.[4] 代喆 , 徐焱成 , 季振中 , 牛力 . 氧化应激对脂肪细胞脂联素、瘦素、抵抗素和内脏脂肪素表达的影响 . 中华糖尿病杂志 . 2009 年 1 期[5] 季振中 , 代喆 , 徐焱成 . 类泛素样修饰蛋白 4 M55V 基因多态性与 2 型糖尿病及其相关因素的分析 2010 年 02 卷 05 期 .会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 0SH2B1 蛋白通过胰岛素 /IGF 信号通路介导胰岛 β 细胞增殖及血糖稳定机制研究- 147 -

批准号 :30871189项目负责人 : 段朝军所在单位 : 中南大学胰岛 β 细胞功能的探讨是 2 型糖尿病领域的研究热点之一。为了确定 SH2B1 作为胰岛素样生长因子受体内源性增强子通过 IGFlR-IRS2-PI3K 信号通路参与 IGF-1 促胰岛 β 细胞生长维持胰岛 β 细胞生存和对抗高血脂等因素诱导 β 细胞凋亡 , 维持血糖稳定。以小鼠胰岛素瘤细胞系 Min 6 和 SH2B1 基因敲除小鼠为研究对象 , 比较敲除小鼠、杂合子及野生型小鼠血糖、血清胰岛素等生理学指标和小鼠胰岛 β 细胞生长和凋亡率以及胰岛素 / 胰岛素样生长因子信号传导通路生长和凋亡相关分子表达的变化 , 结果为 :⑴ SH2B1 基因缺失导致小鼠胰岛增生和胰岛素代偿性表达增加并发展为高血糖、胰岛素抵抗及糖尿病。⑵SH2B1 基因缺失削弱 IGF 促进 β 细胞生长增殖、增加 FAA 等诱导 β 细胞凋亡 ;⑶SH2B1 的 SH2 结构域通过 IGFlR-IRS2-PI3K/Akt 信号通路参与上述过程。⑷ 移植野生型胰岛 SH2B1-/- 小鼠高血糖、高血脂症等症状得到缓解。本研究不仅有助于揭示糖尿病发生的机制 , 而且能为研发控制糖尿病及其相关疾病新药提供靶分子。关键词 :SH2B1;β 细胞 ; 糖尿病 ; 胰岛素 /IGF 信号通路 ; 凋亡学科代码 :H0713发表论著 :[1] * 段朝军 , 汤参娥 , 廖岚 , 李萃 , 苏涛 , 陈主初 .SH2B1 调控 JAK2/IRS2 在肥胖症发病中的分子机制 . 中南大学学报 ( 医学版 ), 35(03), pp 209-214,[2] 谢群 , 苏涛 , * 段朝军 . 彩色多普勒检测糖尿病视网膜病变血流动力学变化及临床价值 .实用预防医学 , 16(01), pp 1-2, 2009.[3] * 段朝军 , 陈主初 . 磷酸化蛋白质组学方法在信号网络解析中的应用 . 国际病理科学与临床杂志 , 28(06), pp 465-470,[4] 谢群 , 汤参娥 , 苏涛 , 张欣 , * 段朝军 . 胆囊收缩素刺激小鼠胰腺腺泡肽链的延伸及其分子机制 . 中南大学学报 ( 医学版 ), 34(12), pp 1202-1208,[5] * 段朝军 , 李萃 , 汤参娥 , 吴静 , 唐发清 , 陈主初 , 肖志强 .SH2-Bβ 调控 JAK2/STAT3在肥胖症发病中的分子机制 . 中华内分泌代谢杂志 ,, 25(1), pp 90-91,[6] 黄大毛 , 李建国 , 陈宇 , 王巍巍 , 吴尚辉 , 段朝军 , 唐发清 .SH2-B 对结肠癌 HT-29 细胞增殖的影响 . 中国普通外科杂志 , 19(07), pp 768-773,[7] Duan, Chaojun, Cao, Yanna, Deng, Xiyun, Wang, Weiwei, Yang, Wenli, Liu, Xianghua, Chen,Zhuchu, Pati, Shibani, Kozar, Rosemary A., Gonzalez, Ernest A., Wade, Charles E.,Holcomb, John B., *Ko, Tien C. Increased transforming growth factor β contributes todeterioration of refrigerated fresh frozen plasma's effects in vitro on endothelial cells.Shock.2011 Jul;36(1):54-9..[8] 张春芳 , 谭潭 , 李建国 , 马虹英 , 陈主初 , * 段朝军 . 冷藏对新鲜冰冻血浆诱导内皮细胞迁移的影响及其分子机制研究 . 生物化学与生物物理进展 , 06 期 , pp 528-535,会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 4获奖 :- 148 -

神经酰胺在糖尿病血管内皮细胞功能紊乱中的机制研究批准号 :30871190项目负责人 : 雷闽湘所在单位 : 中南大学糖尿病血管并发症是糖尿病致死致残的主要原因 , 目前发病机制未完全阐明。内皮细胞结构、功能紊乱是促进糖尿病血管病变发生发展的关键。内皮细胞功能紊乱的最初特点是 NO 生物活性的改变。神经酰胺是脂质第二信使 , 广泛参与了细胞信号通路的调节 , 已发现神经酰胺可在多个水平上阻断胰岛素信号转导的 IRS-1/PI3K/PKB, 血管内皮细胞是胰岛素靶组织 , 并存在着独特的胰岛素信号转导通路 IRS-1/PI3K/PKB/eNOS, 最终导致 eNOS 的活化及 NO 产生。神经酰胺是否影响内皮细胞功能目前尚无文献报道 , 我们的初步研究已发现高糖使内皮细胞神经酰胺产生增多导致内皮细胞凋亡增加 , 游离脂肪酸所致的血管内皮细胞功能紊乱与神经酰胺对血管内皮细胞信号通路的抑制有关。因此我们将进一步研究糖代谢紊乱状态神经酰胺与血管内皮细胞功能的关系 , 减少神经酰胺积聚能否改善内皮细胞功能。其目的是为糖尿病血管并发症的防治提供新的治疗靶点。关键词 : 神经酰胺 ; 糖尿病 ; 血管内皮细胞 ;NO; 信号通路学科代码 :H0713发表论著 :[1] Li Chun, Zhou Junlin, Wang Aimin, Li Niansheng, Chen Benmei, *Lei Minxiang. Inhibition ofceramide synthesis reverses endothelial dysfunction and atherosclerosis instreptozotocin-induced diabetic rats. Diabetes Research and Clinical Practice, 93(1), pp 77-85会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2获奖 :胰岛素对血管平滑肌细胞向成骨细胞分化的影响及作用机理研究批准号 :30871191项目负责人 : 刘幼硕所在单位 : 中南大学动脉钙化是独立预测糖尿病心血管事件、截肢及死亡的重要因子 , 血管平滑肌细胞向成骨细胞分化是其重要细胞学基础。本课题首次在自发钙化血管平滑肌细胞 (CVSMCs) 观察到超生理剂量的胰岛素通过诱导 CVSMCs RANKL 表达 , 促进其向成骨细胞分化和钙化 ; 首次证明 RANKL 是胰岛素诱导 CVSMCs 向成骨细胞分化和钙化的下游调节物。动态观察了 OPG 基因敲除 - 高胰岛素血症小鼠大血管壁类骨形成过程及表达 RANKL 和钙化的变化 , 确定胰岛素通过 ERK 1/2/ RANKL 途径促进 CVSMCs 成骨分化加速动脉中膜钙化。还首次发现 preptin- 149 -

可促进人成骨细胞增殖和分化 , 并呈剂量和时间依赖方式调节人成骨细胞结缔组织生长因子 (CTGF) 表达 ; 首次证明 preptin 通过 ERK/ CTGF 细胞通路调节骨合成代谢 , 首次提出preptin 是新的骨代谢调节因子。研究结果为阐明糖尿病动脉钙化发病机理及防治提供了新途径 , 深化了对胰岛素抵抗 - 骨代谢的关联。相关成果包括 SCI 2 篇 ,SCIE1 篇 , 中华系列 2 篇 , 学术会议 3 次 , 培养硕士生毕业 2 名 , 博士生在读 2 名 , 获第 23 届赛克勒中国医师年度奖提名。关键词 : 胰岛素 ; 血管平滑肌细胞 ; 动脉钙化 ;RANKL;preptin学科代码 :H0713发表论著 :[1] Yuan LQ, Zhu JH, Wang HW, Liang QH, Xie H, Wu XP, Zhou H, Cui RR, Sheng ZF, ZhouHD, Zhu X, Liu GY, *Liu YS( 刘幼硕 ), *Liao EY. RANKL is a downstream mediator forinsulin-induced osteoblastic differentiation of vascular smooth muscle cells. PLoS One, 6(12),pp 1-8,[2] Liu YS ( 刘幼硕 ), Lu Y, Liu W, Xie H, Luo XH, Wu XP, *Yuan LQ, *Liao EY. Connectivetissue growth factor is a downstream mediator for preptin-induced proliferation anddifferentiation in human osteoblasts. Amino Acids (IF: 4.106), 38 卷 , pp 763-769[3] 朱佳花 , 刘幼硕 , 袁凌青 , 詹俊鲲 , 汪化文 , 廖二元 . Preptin 对人成骨细胞增殖和分化的影响及机制研究 . 中华内分泌代谢杂志 , 26(9), pp 784-787[4] 汪化文 , 刘幼硕 , 詹俊鲲 , 谢辉 , 伍贤平 , 袁凌青 , 廖二元 .Preptin 对成骨细胞结缔组织生长因子表达的影响及其机制研究 . 中华内分泌代谢杂志 , 26(11), pp 978-980,会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2获奖 :人尿酸盐转运体 (hURAT1) 与原发性高尿酸血症遗传易感性研究批准号 :30871192项目负责人 : 李长贵所在单位 : 青岛大学人尿酸盐转运蛋白 1(hURAT1) 是维持血尿酸水平的关键离子通道 , 是导致原发性高尿酸血症的重要侯选基因。课题组前期研究发现 :1.hURAT1 基因启动子区 -87C/T SNP、第三内含子区 +11G>A SNP 与原发性高尿酸血症相关 ;2.hURAT1 基因 5’UTR 区存在 +262C/T和 +292C/G 点突变 , 该点突变是否与原发性高尿酸血症有关尚不清楚。本课题对上述问题进行了深入研究 , 结果显示 :(1)hURAT1 基因启动子区 -87 C/T SNP 与山东汉族男性痛风发病密切相关 , 但与女性痛风无关。体外功能研究显示 : 该 SNP 位点可导致基因转录活性改变 , 转录活性改变可能由 GR 转录因子通过 CREB 介导完成。(2)hURAT1 基因 5’UTR 区存在 +262C/T 和 +292C/G 两处点突变 , 但体外研究显示 : 上述突变未导致基因转录活性产生差异 , 提示该点突变可能与原发性高尿酸血症无关。(3) 体外功能研究证实 :hURAT1 基因第- 150 -

三内含子 +11G>A SNP 影响 hURAT1 mRNA 可变剪接过程 , 第五外显子编码基因完全缺失 , 产生 hURAT1 剪接异构体 , 影响尿酸的重吸收过程 , 继而引发原发性高尿酸血症。关键词 : 原发性痛风 ; 原发性高尿酸血症 ; 突变 ; 单核苷酸多态性学科代码 :H0722发表论著 :[1] 李长贵 . 原发性高尿酸血症患者发生痛风的前瞻性研究中华内分泌代谢杂志 , 7 期 ,pp553-556[2] Wang B, Meng D, Wang J, Jia Z, Zhoub S, Liu S, Chu N, Han L, Zhang K, Ma X, LiC.Positive Correlation Between Beta-3-Adrenergic Receptor (ADRB3) Gene and Gout in aChinese Male Population. J Rheumatol. 2011 Apr;38(4):738-40. Epub 2011 Feb 1.[3] 李长贵 . 高尿酸血症防治中应关注的几个关键问题 ( 述评 ) 中华内分泌代谢杂志 , 7 期 , pp543-547[4] 李长贵 . 山东沿海地区女性临床特点的研究中华内分泌代谢杂志 , 11 期 , pp 44-46[5] 李长贵 . 山东沿海居民高尿酸血症及痛风五年随访研究中华内分泌代谢杂志 , 7 期 , pp548-552[6] 邢儒伶 , 孟冬梅 , 任伟 , 李长贵 . 建立痛风性肾病并发慢性肾功能衰竭动物模型方法的探讨中国中西医结合杂志 , 10 期 , pp 1409-1413[7] 周玉娇 , 孟冬梅 , 韩琳 , 李长贵 , 苗志敏 . 青岛地区男性痛风患者代谢综合征患病情况调查山东医药 , 09 期 , pp 66-67[8] 张琨 , 韩琳 , 李长贵 . 青岛地区人群高尿酸血症与代谢综合征各组分间的关系山东医药 ,05 期 , pp 67-68[9] 于清 , 李长贵 , 韩琳 . 痛风患者肾结石发病情况及其影响因素分析山东医药 , 05 期 , pp71-72[10] 李长贵 .SLC 22A 12 基因第 8 外显子和内含子多态与中国汉族人原发性高尿酸血症关联研究 . 中华医学遗传学杂志 , 27 期 , pp 659-663[11] 李长贵 .hURAT1 基因多态性与中国汉族人群高尿酸血症相性研究 . 中华内科杂志 ,49(11) 期 , pp 925-929[12] Li, Changgui, Han, Lin, Levin, Albert M., Song, Huaidong, Yan, Shengli, Wang, Yao, Wang,Yunlong, Meng, Dongmei, Iv, Sensen, Ji, Yan, Xu, Xiaochen, Liu, Xianxian, Wang,Yangang,Zhou, Li, Miao, Zhimin, Mi, Qing-ShengMultiple single nucleotide polymorphismsin the human urate transporter 1 (hURAT1) gene are associated with hyperuricaemia in HanChinese. Journal of Medical Genetics, 47(3), pp204-210[13] Wang, Binbin, Miao, Zhimin, Liu, Shiguo, Wang, Jing, Zhou, Shiyi, Han, Lin, Meng,Dongmei, Wang, Yunlong, Li, Changgui, Ma, Xu.Genetic analysis of ABCG2 gene C421Apolymorphism with gout disease in Chinese Han male population. Human Genetics, 127(2),pp 245-246,[14] Miao, Zhimin, Yan, Shengli, Wang, Jing, Wang, Bei, Li, Yujun, Xing, Xiaoming, Yuan,Ying, Meng, Dongmei, Wang, Luan, Gu, Jianguo, Zhang, Shu, Li, Changgui, Wang,Cong-Yi.Insulin resistance acts as an independent risk factor exacerbating high-purine dietinduced renal injury and knee joint gouty lesions Inflammation Research, 58(10), pp659-668,[15] Miao, Zhi-Min, Zhao, Shi-Hua, Yan, Sheng-Li, Li, Chang-Gui, Wang, Yan-Gang, Meng,- 151 -

Dong-Mei, Zhou, Li, Mi, Qing-Sheng. NALP3 inflammasome functional polymorphisms andgout susceptibility. Cell Cycle, 8(1), pp 27-30,[16] Miao, Zhimin, Li, Changgui, Chen, Ying, Zhao, Shihua, Wang, Yangang, Wang, Zhongchao,Chen, Xinyan, Xu, Feng, Wang, Fang, Sun, Ruixia, Hu, Jianxia, Song, Wei, Yan, Shengli,Wang, Cong-Yi .Dietary and lifestyle changes associated with high prevalence ofhyperuricemia and gout in the Shandong coastal cities of Eastern China. Journal ofRheumatology, 35(9), pp 1859-1864,会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 5 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 23瘦素诱导 Th17 细胞分化的分子机制及在 EAT 疾病发生中的作用批准号 :30871193项目负责人 : 王胜军所在单位 : 江苏大学瘦素 (leptin) 是由白色脂肪细胞合成并分泌的肽类激素 , 是一种调节机体能量平衡的主要激素 , 研究发现瘦素对免疫细胞具有重要的调控作用。(1) 发现 Th17 细胞表达瘦素受体 (Ob-Rb), 瘦素促进可 Th17 细胞百分比明显增加 , 其特异性转录因子 RORγ t 也明显增高 ; 瘦素可通过促进 ERK 蛋白磷酸化途径促进 Th17 细胞的分化。(2) 给与瘦素处理后可促进小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎 (EAT) 的发生 , 并且明显增加小鼠体内 Th17 细胞的比例和 IL-17 水平 ; 在造模的同时给与抗瘦素抗体的处理 , 可减轻 EAT 的发生 , 同时 Th17 细胞比例明显下降。(3) 发现桥本甲状腺炎 (HT) 患者外周血中 Th17 细胞比例及相关因子明显增加 ,Th17 细胞与 Tg-Ab 水平呈正相关 ;HT 患者 CD4+T 细胞分泌瘦素的水平明显增强 , 并与 Th17 细胞呈正相关 ,HT 患者局部甲状腺组织中明显表达瘦素、IL17 和 RORγ tmRNA, 在体外培养体系中加入抗瘦素抗体处理后 , 可明显降低 Th17 细胞的比例。(4) 自身免疫性甲状腺疾病 (AITD) 患者体内滤泡辅助性 T 淋巴细胞 (Tfh) 细胞明显增加 , 并且其增加与自身抗体产生及疾病发展密切相关。关键词 : 瘦素 ;Th17 细胞 ; 甲状腺炎 ;Tfh 细胞学科代码 :H0709发表论著 :[1] Shi, Y., Wang, H., Su, Z., Chen, J., Xue, Y., Wang, S*., Xue, Y., He, Z., Yang, H., Zhou, C.,Kong, F., Liu, Y., Yang, P., Lu, L., Shao, Q., Huang, X., Xu, H. Differentiation Imbalance ofTh1/Th17 in Peripheral Blood Mononuclear Cells Might Contribute to Pathogenesis ofHashimoto's Thyroiditis. Scandinavian Journal of Immunology, 72(3), pp 250-255,[2] Chenlu Zhu, Jie Ma, Yingzhao Liu, Jia Tong, Jie Tian, Jianguo Chen, Xinyi Tang, Huaxi Xu,Liwei Lu, Shengjun Wang* Increased frequency of follicular helper T cells in patients withautoimmune thyroid disease. J Clin Endocrinol Metab. 2011 Dec 21. [Epub ahead of print]PMID: 22188745[3] Shengjun Wang*, Ye Shi, Min Yang, Jie Ma, Jie Tian, Jianguo Chen, Chaoming Mao, ZhijunJiao, King-Hung Ko, Samuel Essien Baidoo, Huaxi Xu, Zichun Hua, Liwei Lu. GITRL- 152 -

exacerbates collagen-induced arthritis via enhancing the expansion of Th17 cells. Am JPathol. 2011 Dec 31. [Epub ahead of print] PMID: 22214837[4] Cui, Dawei, Wang, Shengjun*, Chen, Yu, Tong, Jia, Ma, Jie, Tang, Li, Yang, Xianzhi, Shi, Ye,Tian, Jie, Lu, Liwei, Xu, Huaxi. An isoleucine-zipper motif enhances costimulation of humansoluble trimeric GITR ligand. Cellular & Molecular Immunology, 7(4), pp 316-322,[5] Chen, Deyu, Hu, Qin, Mao, Chaoming, Jiao, Zhijun, Wang, Shengjun, Yu, Lichao, Xu, Ying,Dai, Dongfang, Yin, Lijia, Xu, Huaxi. Increased IL-17-producing CD4(+) T cells in patientswith esophageal cancer. Cellular Immunology, 272(2), pp 166-174[6] Tian, Jie, Ma, Jie, Wang, Shengjun*, Yan, Jun, Chen, Jianguo, Tong, Jia, Wu, Chaoyang, Liu,Yingzhao, Ma, Bin, Mao, Chaoming, Jiao, Zhijun, Shao, Qixiang, Lu, Liwei, Xu, Huaxi.Increased expression of mGITRL on D2SC/1 cells by particulate beta-glucan impairs thesuppressive effect of CD4(+)CD25(+) regulatory T cells and enhances the effector T cellproliferation. Cellular Immunology, 270(2), pp 183-187[7] Ma, Jie, Wang, Shengjun*, Ma, Bin, Mao, Chaoming, Tong, Jia, Yang, Min, Wu, Chaoyang,Jiao, Zhijun, Lu, Liwei, Xu, Huaxi. Dendritic cells engineered to express GITRL enhancetherapeutic immunity in murine Lewis lung carcinoma. Cancer Letters, 301(2), pp 142-150[8] Yang, P., Qiu, G., Wang, S., Su, Z., Chen, J., Wang, S., Kong, F., Lu, L., Ezaki, T., Xu, H.Themutations of Th1 cell-specific T-box transcription factor may be associated with apredominant Th2 phenotype in gastric cancers. International Journal of Immunogenetics,37(2), pp 111-115,[9] Wu, C., Wang, S., Wang, F., Chen, Q., Peng, S., Zhang, Y., Qian, J., Jin, J., Xu, H. Increasedfrequencies of T helper type 17 cells in the peripheral blood of patients with acute myeloidleukaemia. Clinical and Experimental Immunology, 158(2), pp 199-204,[10] Jianguo Chen, Jia Tong, Haibing Liu, Yingzhao Liu, Zhaoliang Su, Shengjun Wang*, Yan Shi,Dong Zheng, Siamak Sandoghchian, Jianzhong Geng, Huaxi Xu. Increased Frequency ofTh17 Cells in the Peripheral Blood of Children Infected With Enterovirus 71. Journal ofMedical Virology. DOI 10.1002/jmv.23254[11] Wang Kaiwen, Su Zhaoliang, Zhao Yinxia, Sandoghchian Shotorbani Siamak, Jiao, Zhijun,Xue Yuan, Yang Heng , Zheng Dong , Liu Yanfang, Shen Pei, Wang Shengjun*, ShaoQixiang, Huang Xinxiang, Lu Liwei , Xu Huaxi. Changes and signiWcance of IL-25 inchicken collagen II-induced experimental arthritis (CIA). Rheumatol Int.. DOI10.1007/s00296-011-1955-2[12] 王海生 , 王胜军 , 崔大伟 , 陈建国 , 柳迎昭 , 杨先知 , 史烨 , 田洁 , 仝佳 , 许化溪 .人 RORγtm RNA 实时荧光定量 PCR 检测方法的建立及初步应用 . 江苏大学学报 ( 医学版 ), 19(05), pp 405-408,[13] 马斌 , 田洁 , 刘艳 , 刘青玲 , 马洁 , 汤新逸 , 魏衍财 , 吴彩云 , 柳迎昭 , 许化溪 , 陈永昌 , 王胜军 ; 实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠体内 Th17 细胞检测的意义 . 江苏大学学报 ( 医学版 ), 21(4), pp 319-321[14] 汤新逸 , 王胜军 . IL-17+ γδT 细胞细胞与分子免疫学杂志 , 27(7), pp817-820, 2011/7/15( 万方 ).[15] 王海生 , 王胜军 , 崔大伟 , 陈建国 , 柳迎昭 , 杨先知 , 史烨 , 仝佳 , 许化溪 . Graves病患者外周血单个核细胞 GITR mRNA 表达水平的变化和意义 . 临床检验杂志 , 27(04),pp 276-279, 2009/7/15( 中国知网 ).[16] 石燕 , 王胜军 , 陈建国 , 薛渊 , 何志强 , 周成林 , 郑东 , 杨恒 , 李雅贞 , 仝佳 , 苏兆- 153 -

亮 , 邵启祥 , 许化溪 . 类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白 1RORγt 和白细胞介素 -17 表达水平的检测及临床意义 . 中华风湿病学杂志 ; :-, 14(3), pp 147-150,2010/3/1( 万方医学库 ).[17] 何志强 , 王胜军 , 薛渊 , 石燕 , 柳迎照 , 仝佳 , 陈建国 , 邵启祥 , 许化溪 . Hlx 修饰的树突状细胞系 (DC2.4/mHlx) 的建立 . 细胞与分子免疫学杂志 , 26(03), pp 285-289,2010/3/18( 中国知网 ).[18] 何志强 , 薛渊 , 石燕 , 杨恒 , 赵银霞 , 王楷文 , 周成林 , 王胜军 , 邵启祥 , 焦志军 ,许化溪 . 远红荧光蛋白 HcRed 基因的原核和真核表达及鉴定 . 江苏大学学报 ( 医学版 ),20(01), pp 17-20, 2010/1/30( 中国知网 ).[19] 薛渊 , 王胜军 , 何志强 , 石燕 , 周成林 , 马洁 , 仝佳 . T-bet 基因 shRNA 真核表达载体的构建及其功能的初步研究 . 细胞与分子免疫学杂志 , 26(05), pp 453-455,2010/5/18( 中国知网 ).[20] 马洁 , 田洁 , 刘青玲 , 刘艳 , 杨先知 , 许化溪 , 王胜军 . Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统表达小鼠 GITRL 蛋白并鉴定 . 细胞与分子免疫学杂志 , 27(4), pp 405-407,2011/4/15( 万方 ).[21] 周成林 , 苏兆亮 , 朱金连 , 何志强 , 王胜军 , 李平 , 许化溪 . 转录因子 Hlx 修饰树突状细胞系 DC2.4 的功能研究 . 细胞与分子免疫学杂志 , 03 期 , pp 274-277, 2011/3/18( 中国知网 ).[22] 田洁 , 王胜军 , 许化溪 . Th9 细胞 : 一种新型效应性 CD4~+ T 细胞亚群 . 细胞与分子免疫学杂志 , 09 期 , pp 853-855, 2009/9/18( 中国知网 ).[23] 马洁 , 王胜军 , 毛朝明 , 杨敏 , 王锁英 , 许小朋 , 邱谷风 , 胡正军 , 姜旭淦 , 邵启祥 ,丁庆 , 许化溪 . 小鼠 GITRL 融合蛋白的表达、纯化及免疫原性的研究 . 中国免疫学杂志 ,25(08), pp 675-678, 2009/8/8( 中国知网 )会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 9获奖 :罗格列酮刺激摄食和引起肥胖的分子内分泌机制批准号 :30871194项目负责人 : 张炜真所在单位 : 北京大学几乎所有 2 型糖尿病治疗药物均有增加摄食、引起肥胖的副作用。目前对这些药物这一副作用的分子内分泌机制尚不清楚。最新研究表明罗格列酮具有调节饥饿激素 ghrelin表达的作用 , 强烈提示 ghrelin 在罗格列酮引起的摄食增多和肥胖中的重要作用。本研究应用新建立的胃粘膜 ghrelin 细胞培养模型以及正常或糖尿病 db/db 小鼠 , 对罗格列酮调节 ghrelin mRNA 和蛋白表达的作用从体外和体内进行全面而深入的探讨。同时利用多种分子生物学技术如基因过表达、基因干扰、转基因动物和基因敲除等 , 探讨罗格列酮调节ghrelin 表达的机制。此外使用中和抗体和 ghrelin 受体拮抗剂阻断 ghrelin 的生物学效应 , 探讨 ghrelin 在罗格列酮刺激摄食、引起肥胖中的作用。本研究将可阐明 2 型糖尿病治- 154 -

疗药物罗格列酮调节摄食和肥胖的内分泌学机制 , 为今后筛选控制摄食、防治肥胖的药物提供依据。关键词 :Ghrelin; 罗格列酮 ;2 型糖尿病 ; 摄食学科代码 :H0716发表论著 :[1] Xu G, Wang Z, Li Y, Li Z, Tang H, Zhao J, Xiang X, Ding L, Ma L, Yuan F, Fei J, Wang W,Wang N, Guan Y, Tang C, Mulholland MW, Zhang W. Ghrelin contributes to derangements ofglucose metabolism induced by rapamycin in mice. Diabetologia. 2012 Jun;55(6):1813-23.[2] Li Z, Xu G, Li Y, Zhao J, Mulholland MW, Zhang W. mTOR-dependent Modulation of GastricNesfatin-1/NUCB2. Cell Physiol Biochem. 2012;29(3-4):493-500.[3] Xiang X, Zhao J, Xu G, Li Y, Zhang W. mTOR and the differentiation of mesenchymal stemcells. Acta Biochim Biophys Sin. 2011;43:501-10.[4] Xu G, Li Y, Zhang W. Gastric mammalian target of rapamycin signaling, hormone productionand energy metabolism. World J Gastrointest Pathophysiol 2011; 2(6): 1-5.[5] Xu, Geyang, Li, Yin, An, Wenjiao, Zhao, Jing, Xiang, Xinxin, Ding, Li, Li, Ziru, Guan, Youfei,Wang, Xian, Tang, Chaoshu, Zhu, Yi, Wang, Nanping, Li, Xiaoying, Mulholland, Michael,Zhang, Weizhen. Regulation of gastric hormones by systemic rapamycin. Peptides, 31(12), pp2185-2192,[6] An, Wenjiao, Li, Yin, Xu, Geyang, Zhao, Jing, Xiang, Xinxin, Ding, Li, Li, Jing, Guan,Youfei, Wang, Xian, Tang, Chaosu, Li, Xiaoying, Mulholland, Michael, Zhang,Weizhen.Modulation of Ghrelin O-Acyltransferase Expression in Pancreatic Islets. CellularPhysiology and Biochemistry. 26(4-5), pp 707-716,[7] Xu, Geyang, Li, Yin, An, Wenjiao, Li, Shenduo, Guan, Youfei, Wang, Nanping, Tang,Chaoshu, Wang, Xian, Zhu, Yi, Li, Xiaoying, Mulholland, Michael W., Zhang, Weizhen.Gastric Mammalian Target of Rapamycin Signaling Regulates Ghrelin Production and FoodIntake .Endocrinology, 150(8), pp 3637-3644,[8] Yin, Xuefeng, Li, Yin, Xu, Geyang, An, Wenjiao, Zhang, Weizhen. Ghrelin fluctuation, whatdetermines its production? Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 41(3), pp 188-197,[9] Zhang, Weizhen, Majumder, Arundhati, Wu, Xiaobin, Mulholland, Michael W. Regulation offood intake and body weight by recombinant proghrelin. American Journal ofPhysiology-Endocrinology and Metabolism, 297(6), pp E1269-E1275,[10] 相新新 , 赵晶 , 李茵 , 张炜真 . 脂肪干细胞定向分化的影响因素 . 生理科学进展 2010,41(5): 341-6.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 7 硕士 0获奖 :西红花苷改善内皮细胞氧化应激与线粒体功能及 sirt1-PGC1a 通路的关系批准号 :30871196- 155 -

项目负责人 : 高鑫所在单位 : 复旦大学本研究证明中药复方清活 1 号中分离的有效单体之一川芎嗪 (TMP) 对离体大鼠主动脉环具有内皮依赖和非依赖的舒张功能。并通过棕榈酸诱导的骨骼肌细胞模型 (C2C12 细胞 )和高糖诱导的内皮细胞 (bEnd.3 细胞和原代培养的脐静脉内皮细胞 ) 模型 , 探索其改善内皮功能的机制。结果表明 TMP 通过上调 PGC- 1α -Nrf-1-Tfam 通路 , 降低 ROS 生成、改善线粒体功能 , 并在在高糖诱导的内皮细胞中证明了 TMP 改善线粒体生成作用主要通过上调Sirt1 表达和活性而实现 ; 用顺磁共振 (EPR) 检测证明清活 Ⅰ 号具有呈剂量依赖的抗氧化活性 , 该复方活性高于其组成的各个组分。在高糖诱导的内皮细胞模型上证明该复方的抗氧化应激作用是通过减少超氧阴离子实现的。关键词 : 川芎嗪、氧化应激、线粒体、内皮细胞 C1C12 细胞学科代码 :H0713发表论著 :[1] Gao X, Zhao XL, Zhu YH, Li XM, Xu Q, Lin HD, Wang MW. Tetramethylpyrazine protectspalmitate-induced oxidative damage and mitochondrial dysfunction in C2C12 myotubes. LifeSci. 2011 Apr 25;88(17-18):803-9.[2] Xu Q, Zhang B, Li XM, Gao X.Antioxidant effects of Traditional Chinese Medicine formulaQing Huo Yi Hao on high glucose-induced endothelial cells as a superoxide anion scavenger.Acta Pharmacol Sin. 2012 Apr;33(4):496-502.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0获奖 :2 型糖尿病胰岛早期纤维化形成机制及药物干预研究批准号 :30871198项目负责人 : 黄勤所在单位 : 中国人民解放军第二军医大学糖尿病已成为全球范围内迅速增长的流行性疾病 , 近年研究发现胰岛纤维化在 2 型糖尿病确诊前就已发生 , 我们的前期研究也提示了此现象的存在。尽管胰岛早期纤维化很有可能在 2 型糖尿病发病中起重要作用 , 但其发生机制不清。故本项目在预实验基础上从动物实验和细胞实验两方面开展了相关研究 , 证实胰岛纤维化在 2 型糖尿病确诊前就已发生 , 并在糖尿病发病中起重要作用 ;TGF-β 、Smads 及 CTGF 通路在胰岛早期纤维化形成中发挥重要作用 , 其结果促进了胶原的合成及沉积 , 最终导致纤维化的形成 ;PTEN 的低表达可能与纤维化形成有关 , 可以作为新的抗纤维化因子 ; 二氮嗪通过此通路对早期纤维化的形成有抑制作用。结合国外和我们的其他研究 , 本项目还针对药物与抗胰岛纤维化作用及机制开展了研究 , 观察发现 2- 甲氧基雌二醇也具有抗胰岛纤维化的作用 , 其机制可能与调- 156 -

节胰岛 β 细胞 MMP1/TIMP1 的表达 , 减少细胞内胶原含量有关。研究结果有助于阐明胰岛早期纤维化的形成机制 , 为寻找能在早期就阻断胰岛纤维化发生 , 继而阻止或延缓 2 型糖尿病发生发展的药物提供了理论依据 , 也为早期有效防治糖尿病提供了新思路。关键词 : 早期纤维化 ; 胰岛 ; 信号转导 ;2 型糖尿病 ; 二氮嗪学科代码 :H0713发表论著 :[1] Min H, Ghatnekar GS, Ghatnekar AV, You X, Bu M, Guo X, Bu S, Shen B, HuangQ.2-Methoxyestradiol induced bax phosphorylation is essential for non-proliferation andapoptosis in human retinoblastoma cells. Mol Carcinogen, Epub 2011, Jul 17[2] Huang Q, Guo Z, Yu Y, Ghatnekar GS, Ghatnekar AV, Bu M, Guo X, Liu S, Wang F, FengZ, Bu S. Diazoxide inhibits aortic endothelial cell apoptosis in diabetic rats via activation ofERK. Acta Diabetol, Epub 2011, May 3[3] 马荣炜 , 邹大进 , 王奇金 , 丁长花 , 王鸿燕 , 高从容 , 李慧 , 冯正康 , 鲁瑾 , 徐茂锦 , 黄勤 . 复方丹参滴丸对 2 型糖尿病患者颈动脉内中膜的影响 . 中国中西医结合杂志 , 2010,30(8):833-837会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 2获奖 :组织特异性 Visfatin 基因表达抑制的体内代谢组学研究批准号 :30871199项目负责人 : 李伶所在单位 : 重庆医科大学2 型糖尿病和胰岛素抵抗 (IR) 的发生是遗传和环境因素共同作用的结果 , 构建能较好展现 IR 临床特征的动物模型是研究其发病机制的重要工具。Visfatin 是新发现的由内脏脂肪细胞分泌的一种脂肪细胞因子 , 它与以前在淋巴细胞中发现的一种称为前 B 细胞克隆增强因子 (PBEF) 的免疫蛋白同属一种物质。Visfatin 具有类胰岛素活性 , 能与胰岛素受体结合 , 能促进脂肪组织的积聚 , 激活胰岛素信号转导通路 , 可降低血糖水平 , 其作用呈剂量依赖性。本研究首先采用组织特异性 RNAi 技术构建 Visfatin RNAi 腺病毒表达载体作为实现 Visfatin 定向表达缺陷的手段 , 再将该腺病毒载体转入高脂喂养的 ApoE 基因剔除小鼠体内 , 打造一个双基因表达缺陷和高脂喂养共同诱导的。建立了国内外公认的评价胰岛素抵抗的金标准 - - 扩展高胰岛素 - 正葡萄糖钳夹技术 , 探讨模型小鼠胰岛素敏感性的变化。并进一步研究了模型小鼠体内糖、脂代谢和胰岛素信号系统的变化 , 以及一些与 IR 和代谢相关的细胞因子表达的改变。关键词 :visfatin; 胰岛素抵抗 ;2 型糖尿病学科代码 :H0712发表论著 :- 157 -

[1] Qin Sun, Ling Li, Renzhe Li, Mengliu Yang, Hua Liu, Michael J. Nowicki, Haihong Zong, JunXu, Gangyi Yang. Overexpression of Visfatin/PBEF/Nampt Alters Whole-body InsulinSensitivity and Lipid Profile in Rats.Ann Med. 2009, 41: 311-320[2] Ling L, Gangyi Y, Shaochuan S, Mengliu Y, Hua L , Boden G. The adipose triglyceride lipase,adiponectin and visfatin are downregulated by tumor necrosis factor-α (TNF-α) in vivo.Cytokine. 2009, 45:12-19[3] Bin S, Gangy Y, Mengliu Y, Hua L, Guenther B, Ling L. Effects of high-fat diet on theexpression of genes related to lipid metabolism and cytokines in apoE-null mice.[4] Mengliu Y, Gangyi Y, Jing D, Ying L, Haihong Z, Hua L, Guenther B, Ling L. ElevatedPlasma Levels of Chemerin in Newly DiagnosedType 2 Diabetes Mellitus WithHypertension. J Invest Med. 2010 Oct;58(7):883-6.[5] Mengliu Y, Jin D, Hua L, Ling L, Gangyi Y. Effects of Short-term continuous subcutaneousinsulin infusion on fasting plasma fibroblast growth factor-21 levels in patients with newlydiagnosed type 2 diabetes mellitus.[6] Yan P, Li L, Yang M, Liu D, Liu H, Boden G, Yang G. Effects of the long-acting humanglucagon-Like peptide-1 analog liraglutide on plasma omentin-1 levels in patients with type 2diabetes mellitus. Diabetes Res Clin Pr. 2011,92:368-374[7] Zhang L, Li L, Yang M, Liu H, Yang G. Elevated circulating vaspin levels were decreased byrosiglitazone therapy in T2DM patients with poor glycemic control on metformin alone.Cytokine. 2011; 56: 399-402[8] Li L, Miao Z, Liu R, Yang M, Liu H, Yang G. Liraglutide PreventsHypoadiponectinemia-Induced Insulin Resistance and Alterations of Gene ExpressionInvolved in Glucose and Lipid Metabolism. Mol Med. 2011; 17: 1168-1178.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 3获奖 :内源性神经酰胺靶向运输对脂毒性抑制前胰岛素原基因表达的功能分析批准号 :30871200项目负责人 : 郭军所在单位 : 南京医科大学本项目首先研究了脂毒性神经酰胺分解代谢障碍对胰岛 β 细胞功能的影响。发现神经酰胺酶和鞘磷脂合酶活性的抑制能显著诱导胞内神经酰胺积累 , 导致胰岛素原基因表达障碍。作为脂溶性信使 , 神经酰胺代谢有严格的亚细胞定位 , 需要载体定向转运。内质网从头合成的神经酰胺 , 需要 CERT 靶向运输 , 才能在高尔基体内被鞘磷脂合酶转化清除。研究发现 : 反应低脂刺激 ,CERT 基因沉默也能诱导神经酰胺积累和胰岛素原基因表达障碍 , 类似于高尔基体内鞘磷脂合酶催化的神经酰胺代谢 , 发挥非代谢酶依赖调控。同时 , 高浓度饱和脂酸能诱导 CERT 依赖 PKD 的磷酸化及功能下调 , 抑制神经酰胺转运 , 这种抑制作用可能与 CERT 聚合和 PI4K 对 CERT 调节作用无关。- 158 -

代谢酶和 CERT 依赖的神经酰胺积累能通过抑制 PDX-1 核转位、下调 MafA 表达及促进C/EBPβ 增加 , 调节胰岛素原基因转录。这种调节是通过抑制 PDX-1 和 MafA 与胰岛素原基因启动子的结合和促进 C/EBPβ 的结合 , 降低其启动子活性实现的。而 C/EBPβ 的功能下调能明显减弱神经酰胺诱导的胰岛素原基因表达抑制。此研究揭示了脂毒性诱发 Ⅱ 型糖尿病的分子机制 , 能为设计和研制治疗药物提供新的策略。关键词 : 脂毒性 ; 神经酰胺 ; 代谢酶 ; 靶向运输 ; 胰岛素原基因学科代码 :H0713发表论著 :[1] Guo, Jun, Zhu, Jian Xi, Deng, Xia Heng, Hu, Xiao Han, Zhao, Jie, Sun, Yu Jie, *Han, Xiao.Palmitate-Induced Inhibition of Insulin Gene Expression in Rat Islet beta-Cells Involves theCeramide Transport Protein. Cellular Physiology and Biochemistry, 26(4-5), pp 717-728[2] Guo, Jun, Qian, YingYing, Xi, XiaoXue, Hu, XiaoHan, Zhu, JianXi, Han, Xiao. Blockage ofceramide metabolism exacerbates palmitate inhibition of pro-insulin gene expression inpancreatic beta-cells. Molecular and Cellular Biochemistry, 338(1-2), pp 283-290,[3] Tian, He-Ping, Huang, Bao-Sheng, Zhao, Jie, Hu, Xiao-Han, Guo, Jun, Li, Li-Xin.Non-receptor tyrosine kinase Src is required for ischemia-stimulated neuronal cellproliferation via Raf/ERK/CREB activation in the dentate gyrus. BMC Neurosci. 2009 Nov27;10:139.[4] Hu, Xiaohan, Wu, Xiangyang, Xu, Jiali, Zhou, Jin, Han, Xiao, Guo, Jun. Src kinaseup-regulates the ERK cascade through inactivation of protein phosphatase 2A followingcerebral ischemia. BMC Neuroscience, 2009 Jul 14;10:74.[5] Cao Qiang, Qian Min, Wang XieFeng, Wu HuiWen, Zhu XueJiang, Wang YingWei, Guo Jun.Negative feedback regulation of Raf/MEK/ERK cascade in a rat model of cerebral ischemicpreconditioning. Neurochem Res, 36(1), pp 153-162会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 4获奖 :UCP2 蛋白介导糖尿病肾小球足细胞损伤的分子机制批准号 :30871201项目负责人 : 杨俊伟所在单位 : 南京医科大学糖尿病肾病是糖尿病最常见的微血管并发症。足细胞在糖尿病肾病发病机理中发挥了关键作用。以线粒体为中心的能量代谢是细胞存活并发挥其正常生物学功能的基础 , 本课题从细胞线粒体能量代谢角度 , 着重探讨糖尿病造成的足细胞损伤过程中线粒体能量代谢的变化及其调节的分子机制。通过建立糖尿病小鼠动物模型 , 观察肾小球足细胞数目的变化与解偶联蛋白 2(UCP2) 基因和蛋白表达的关系及其与肾组织形态改变和肾功能变化的关- 159 -

系 ; 应用 "RNA 干扰 " 技术 , 降低 / 抑制足细胞线粒体 UCP2 的表达 , 观察能否拮抗高糖导致的足细胞损伤 , 同时 , 探讨 UCP2 蛋白参与高糖导致足细胞损伤的作用机制。本课题的研究成果不仅能够丰富人们对糖尿病肾病发病机理的认识 , 而且也可为设计全新的防治由糖尿病肾损害而导致进行性肾功能衰竭治疗方案提供理论基础。关键词 : 解偶联蛋白 , 线粒体 , 小鼠 , 足细胞 , 糖尿病肾病。学科代码 :H0713发表论著 :[1] Bu X, Zhou Y, Zhang H, Qiu W, Chen L, Cao H, Fang L, Wen P, Tan R, Yang J. Systemicadministration of naked plasmid encoding HGF attenuates puromycinaminonucleoside-induced damage of murine glomerular podocytes Am J Physiol RenalPhysiol. 2011 Oct;301(4):F784-92.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :Amylin 在糖尿病血管内皮屏障功能损伤中的作用和机制研究批准号 :30871202项目负责人 : 彭艾所在单位 : 同济大学在确定了测定细胞通透性的方法后 , 我们观察了 amylin 和高糖对内皮细胞囊泡结构的作用。结果发现 amylin 与高糖均促进内皮细胞囊泡转运的协同作用。但是体内 2 型糖尿病动物实验证实 amylin 并没有诱导内皮细胞通透性的增高。但意外的是高磷和低磷却显著损伤内皮细胞的功能。为此 , 我们系统地研究了高磷和低磷显著损伤血管内皮细胞功能的损伤特点及其关键信号传导分子通路。结果发现 : 无论高磷或低磷均减低内皮细胞 eNOS 的表达和 NO 的水平。其机制与细胞内低钙、蛋白酶激酶 C b2(PKCb2) 增加、减低细胞存活和增加细胞凋亡数有关。高磷与 Akt/p-Akt, Bcl-xl/Bax 比值 , NF-kB-p65 and p-Erk 的增加有关 ; 低磷的作用与增加 Akt/p-Akt、Bcl-xl/Bax 比值和 p-Mek、p38、p-p38 表达激活有关。我们的研究为解释临床上解释慢性肾衰竭患者高血磷与高发病的心血管事件和损伤提供了重要的实验室依据。关键词 :amylin; 内皮细胞 ; 高血磷 ; 信号通路学科代码 :H0713发表论著 :[1] Ai Peng, Tianfu Wu., Caihong Zeng, et al. Adverse Effects of Simulated Hyper- andHypo-Phosphatemia on Endothelial Cell Function and Viability. PLoS ONE2011;6(8):e23268.[2] Ai Peng, Ting Ye Dinesh Rakheja et al. The green tea polyphenol -epigallocatechin-3-gallate- 160 -

ameliorates experimental immune-mediated glomerulonephritis. Kidney Int.2011;80(6):601-11会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2批准号 :30871203项目负责人 : 毕宇芳ACTH 依赖性库欣综合征的糖皮质激素抵抗机制及干预治疗所在单位 : 上海交通大学近年认为糖皮质激素抵抗在 ACTH 依赖性库欣综合征的发病中起重要作用。本课题组初步研究发现生理情况下糖皮质激素负反馈调控需要 SMRT 分子 , 以及在 ACTH 依赖性库欣综合征中糖皮质激素抵抗与 SUMO 化的 SMRT 可能相关。课题组在此主要发现基础上 , 以 SMRT及 SUMO 化的 SMRT 功能研究为线索 , 以分泌 ACTH 的胸腺类癌、垂体瘤及 DMS-79、AtT20 细胞为模型 , 在细胞和动物水平分析 SMRT 以及 SUMO 化水平上调和下调后生物学效应 , 通过研究胸腺类癌所致异位 ACTH 综合征患者的 SMRT 异常表达 , 阐明了 SMRT 在糖皮质激素负反馈调控中的生理作用及库欣综合征中糖皮质激素抵抗的机制 , 分析了引起 ACTH 依赖性库欣综合征的肿瘤组织中 SMRT 的 SUMO 化水平与临床表型的联系 , 探讨了 SUMO 化的 SMRT 作为 ACTH依赖性库欣综合征治疗中的价值及可行性 , 为 ACTH 依赖性库欣综合征的治疗提供新的思路和方向。研究结果在《Endocrine Related Cancer》、《Endocrinology》、《Endocrine》发表 SCI 论文 3 篇 , 培养博士研究生 2 名。关键词 : 库欣综合征 ;ACTH; 糖皮质激素 ;SUMO;SMRT学科代码 :H0708发表论著 :[1] Bi YF, Liu RX, Ye L, Fang H, Li X, Wang W, Zhang J, Wang KK, Jiang L, Su T,Chen ZY,Ning G. Gene expression profiles of thymic neuroendocrine tumors (carcinoids) with ectopicACTH syndrome reveal novel molecular mechanism. 于 Endocrine-Related Cancer(2009:16,1273–1282)[2] Jingjing Jiang, Na Li, Xiaolin Wang, Yan Lu, Yufang Bi, Weiqing Wang, Xiaoying Li, GuangNing. Resistance and Thyroid Hormone Receptors Involved in the Pathogenesis of TumoralCortisol Resistance. Endocrinology (2010:151, 3697–3705),[3] Rui-xin Liu, Wei-qing Wang, Lei Ye, Yu-fang Bi, Hai Fang, Bin Cui, Wei-wei Zhou, MengDai, Ji Zhang and Xiao-ying Li, Guang Ning. p21-Activated kinase 3 is overexpressed inthymic neuroendocrine tumors (carcinoids) with ectopic ACTH syndrome and participates incell migration. Endocrine (2010:38, 38–47),[4] 宁光如何提高我国对内分泌肿瘤的临床诊治和研究水平 . 中华内分泌代谢杂志。2009;25(5):475-477会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0- 161 -

培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 0色素上皮源因子在氧化应激导致的胰岛 β 细胞损伤中作用机制及意义批准号 :30871204项目负责人 : 陈海冰所在单位 : 上海交通大学氧化应激是胰岛 β 细胞功能损伤发病机制中的研究热点。色素上皮源因子 (PEDF) 是一个重要的内源性抗氧化应激因子。本课题阐明胰岛以及胰岛细胞 PEDF 表达水平低于其他内脏组织 , 提示其自身的抗氧化应激功能薄弱 ; 高糖情况下 , 胰岛 β 细胞氧化应激增强 ,PEDF 表达水平降低与凋亡显著正相关 , 分泌胰岛素功能受损 ; 采用基因重组技术在胰岛 β细胞中过表达 PEDF 后 , 高糖抚育下 ROS 生成显著降低 , 伴随凋亡减少 , 胰岛素分泌水平显著高于为未处理组。机制研究发现 :PEDF 可抑制高糖诱导的氧化应激的关键致病分子 PARP所导致的 ROS 生成的作用 , 通过上调 p38MAPK 的磷酸化水平来减少胰岛 B 细胞的凋亡 ; 此外PEDF 还通过 PPARγ 对 UCP-2 的抑制作用来影响线粒体膜电位及线粒体 ROS 的生成 , 揭示了PEDF 对胰岛细胞的保护作用。关键词 :PEDF; 胰岛 β 细胞 ;p38MAPK;PARP; 解耦联蛋白 -2学科代码 :H0713发表论著 :[1] Zheng Z, Chen H, Wang H, Ke B, Zheng B, Li Q, Li P, Su L, Gu Q, Xu X. Improvement ofretinal vascular injury in diabetic rats by statins is associated with the inhibition ofmitochondrial ROS pathway mediated by PGC-1α. Diabetes. 2010 Sep;59(9):2315-25.[2] Chen H, Zheng Z, Li R, Lu J, Bao Y, Ying X, Zeng R, Jia W. Urinary pigmentepithelium-derived factor as a marker of diabetic nephropathy. Am J Nephrol. 2010;32(1):47-56.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2获奖 :BNIP3 在 2 型糖尿病胰岛 β 细胞线粒体途径凋亡调节作用的研究批准号 :30871205项目负责人 : 罗敏所在单位 : 上海交通大学以不同糖脂浓度干预原代 SD 大鼠胰岛、MIN6 和 INS-1 细胞株 , 利用定量 PCR 和免疫印迹技术检测 Bnip3 以及线粒体相关蛋白的表达 , 应用荧光染色和流式细胞技术检测线粒体功能的改变 ; 构建 Bnip3 过表达和抑制表达细胞模型 , 检测 Bnip3 对线粒体功能的影响。- 162 -

结果发现高糖协同高脂作用均可上调 Bnip3 表达 ,INS-1 细胞实验可见同时伴随促凋亡蛋白Bax 升高、抗凋亡蛋白 Bcl-2 减少 , 细胞早期凋亡增多、增殖抑制 , 线粒体通透性转换孔道(mPTP) 活性增强 , 膜电位下降 ; 过表达 Bnip3 可增强 mPTP 活性 , 降低线粒体膜内外电势差 ; 抑制 Bnip3 表达可降低高糖作用下 mPTP 活性 , 提高细胞的存活率 ; 过表达和抑制表达Bnip3 后未见其对 Bax、Bcl-2 等其他 Bcl-2 家族分子有明显调控作用。在糖脂毒性介导的胰岛 β 细胞凋亡细胞模型中 ,Bnip3 发挥双向调节 mPTP 作用并影响线粒体膜电位的变化 ,可能是 Bnip3 参与调节胰岛 β 细胞凋亡的机制之一 ;Bnip3 对 INS-1 细胞在线粒体膜电位、mPTP 开放方面的调节作用不依赖于 Bax、Bcl-2。关键词 :Bnip3; 糖尿病 ; 糖脂毒性 ; 凋亡 ; 线粒体膜电位学科代码 :H0713发表论著 :[1] 赵海燕、钱镭、傅雪莲、林帆、张宏利、王晓、李果、罗敏 . 高糖对胰岛 β 细胞增殖活力、分泌功能及内质网应激相关分子表达的影响 . 上海交通大学学报 ( 医学版 ),2009,29(5):487-491[2] 林帆、罗敏、林苗 . 肥胖大鼠足细胞 Nephrin、Podocin、Podoplanin 的表达 . 福建医科大学学报 ,2009,43(4):283-287[3] 林帆、钱镭、林苗、王晓、罗敏 . 高脂饮食诱导肥胖大鼠模型的实验研究 . 福建医药杂志 ,2009,31(6):1-3[4] 林帆、张宏利、王晓、罗敏 . 检测线粒体通透性转换孔道评价胰岛 β 细胞线粒体功能 .福建医科大学学报 ,2011,45(2):83-87会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1获奖 :骨生成诱导因子 (OIF) 对肾上腺类固醇激素合成的影响及其机制批准号 :30871206项目负责人 : 马勤耘所在单位 : 上海交通大学骨生成诱导因子 (Osteoinductive factor, OIF) 是一种分泌蛋白 , 属小亮氨酸富集蛋白家族。我们研究了 OIF 在下丘脑 - 垂体 - 肾上腺轴 (HPAA) 中的分布及功能。研究表明OIF 主要表达在垂体的促肾上腺皮质激素细胞中 , 在肾上腺 ,OIF 主要表达于肾上腺皮质的束状带和网状带中。糖皮质激素上调垂体促肾上腺皮质激素细胞 OIF, 而烫伤和低血糖应激及腹腔注射促肾上腺皮质激素 (ACTH) 下调肾上腺 OIF 表达水平。这些结果提示 OIF 参与了 HPAA 的调节和机体对于应激的反应。进一步我们观察到 OIF 腹腔注射原核表达的 OIF 蛋白后 , 血清中皮质酮增高 , 而 OIF 敲除鼠 HE 染色发现肾上腺皮质脂滴增多 , 且皮质酮分泌的昼夜节律发生改变。在垂体 ,OIF 调节 ACTH 分泌和促肾上腺皮质激素释放激素受体的表达 , 这些研究明确了 OIF 在 HPAA 中的作用 , 证实了在应激中 OIF 和 HPAA 相互协调 , 平衡 ,- 163 -

共同参与了机体对应激的反应。关键词 : 骨生成诱导因子 ; 下丘脑 - 垂体 - 肾上腺轴 ; 促肾上腺皮质激素 ; 糖皮质激素 ;应激学科代码 :H0710发表论著 :[1] Qin-Yun Ma, Chun-Lin Zuo, Jun-Hua Ma, Huai-Dong Song. Glucocorticoid up-regulatesmimecan expression in corticotroph cells. Molecular and Cellular Endocrinology 321 (2010)239–244.[2] Qin-Yun Ma, Xiao-Na Zhang, He Jiang, Huai-Dong Song. Mimecan in pituitary corticotrophcells may regulate ACTH secretion and the HPAA. Molecular and Cellular Endocrinology341 (2011) 71–77[3] Xiao Na Zhang, Li Qiong Xue, Huai-Dong Song, Qin-Yun Ma.The mechanism of mimecantranscription induced by glucocorticoid in pituitary corticotroph cells. Mol Cell Biochem(2012) 360:321–328[4] Zhiquan Wang, Liqiong Xue, Cuicui Guo *, Qin-Yun Ma. Stevioside ameliorates high-fat dietinduced insulin resistance and adipose tissue inflammation through down-regulating NF-κBpathway. Biochem Biophys Res Commun. 2012 Jan 27 ;417(4):1280-5. Epub 2012 Jan 3会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0获奖 :叉头盒转录因子 3 基因 (FOXP3 基因 ) 对大鼠同种异体胰岛细胞移植的影响批准号 :30871207项目负责人 : 李永翔所在单位 : 安徽医科大学成人胰岛移植是治愈 1 型糖尿病及严重 2 型糖尿病的重要方法 , 然而由于免疫排斥反应及抗免疫排斥药物损伤等影响 , 移植的远期疗效并不理想。寻找一种能够下调免疫排斥反应、减少移植胰岛凋亡 , 延长移植物存活时间的方法 , 成为当前胰岛移植领域亟待解决的课题。近期的研究表明 FOXP3 基因的编码产物 scurfin, 介导 CD4+CD25+ Treg 的发育、外周表达及功能维持。CD4+CD25+ Treg 不仅具有抑制急性排斥反应同时也具有抑制慢性排斥反应、延长移植物存活时间的作用。为此 , 本研究拟采用腺病毒载体作为有效的基因转移载体 , 将 FOXP3 基因导入大鼠单核细胞 , 通过体外培养和体内移植的研究 , 了解FOXP3 基因对 CD4+T 细胞的影响、FOXP3 阳性 T 细胞和胰岛联合门静脉内移植能否减少免疫排斥反应、延长移植物存活时间 , 提出了一种合理的免疫耐受诱导方案。关键词 : 糖尿病 ; 胰岛移植 ; 免疫耐受 ; 叉头盒转录因子 3 基因学科代码 :H0704- 164 -

发表论著 :[1] 陈春 , 李永翔 ; 携带 Foxp3 基因慢病毒载体的构建 ; 山东医药 , 26 期 , pp 29-31,[2] 黄洋 , 李永翔 ; Construction and Expression of Lentiviral Vector Containing Foxp3gene in rat CD4+CD25+Tcells. Transplant Proceeding(sci 录用 )[3] 吕承刚 , 李永翔 ;CD4+CD25+ 调节性 T 细胞在胃肠道恶性肿瘤患者的表达及意义 ; 安徽医科大学学报[4] 黄洋 , 李永翔 ; 大鼠 CD4+CD25-T 细胞的 FOXP3 基因转染及其表达 ; 中国组织工程研究与临床康复。会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 4获奖 :亮氨酸缺乏时 GCN2 依赖的体内脂肪代谢调控机制的研究批准号 :30871208项目负责人 : 郭非凡所在单位 : 中国科学院上海生命科学研究院必需氨基酸亮氨酸缺乏除了可引起蛋白质代谢的改变 , 我们最近研究发现 , 它也会引起脂肪代谢的改变 , 表现在肝脏脂肪合成的抑制和脂肪组织的快速动员。我们的研究进一步证明 , 这种变化的调节依赖于 eIF2α 激酶 GCN2, 但具体机制不清。为阐明该机制 , 本研究拟采用分子和细胞生物学及实验动物学等研究技术 , 利用 Gcn2 基因敲除小鼠及细胞模型 , 从分子、细胞和机体等不同层次来分析亮氨酸缺乏时 GCN2 依赖的肝脂肪合成抑制和腹腔内脂肪动员的调控机制。阐明该机制具有重要的理论与实践意义 , 一方面可以加深对营养不良引起的代谢适应性改变和脂肪肝及肥胖发病机制的理解 ; 另一方面还可为治疗脂肪肝及肥胖提供重要的新思路 , 如 : 特殊饮食 ( 亮氨酸缺乏饮食 ) 的应用、药物靶点的发掘和新药的开发。本研究将为肥胖和脂肪肝的预防和治疗带来重大突破。关键词 : 亮氨酸缺乏 ;GCN2; 脂肪肝 ; 肥胖 ;SREBP-1c学科代码 :H0716发表论著 :1). Du Y, Meng Q, Zhang Q, Guo F*. Isoleucine or valine deprivation stimulates fat loss viaincreasing energy expenditure and regulating lipid metabolism in WAT. Amino Acids. 2011Oct 21. DOI: 10.1007/s00726-011-1123-82). Cheng Y#, Zhang Q #, Meng Q, Xia T, Huang Z, Wang C, Liu B, Chen S, Xiao F, Du Y, andGuo F*. Leucine deprivation stimulates fat loss via increasing corticotrophin releasinghormone (CRH) expression in the hypothalamus and activating sympathetic nervous system(SNS). Molecular Endocrinology. 2011, 25:1624-16353).Li H, Meng Q, Xiao F, Chen S, Yu J, Wang C, and Guo F*. ATF4 deficiency protects micefrom high-carbohydrate diet-induced liver steatosis. Biochemical Journal. 2011, 438:- 165 -

283-2894). Xiao F, Huang Z, Li H, Yu J, Wang C, Chen S, Meng Q, Cheng Y, Gao X, Li J, Liu Y, andGuo F*. Leucine Deprivation Increases Hepatic Insulin Sensitivity Via GCN2/mTOR/S6K1and AMPK Pathways. Diabetes. 2011, 60: 746-7565). Cheng Y*, Meng Q* (co-author), Wang C, Li H, Huang Z, Chen S, Xiao F, Guo F*.Leucinedeprivation decreases fat mass by stimulation of lipolysis in WAT and upregulationof UCP1 in BAT. Diabetes. 2010, 59: 17-256). Wang C,Huang Z, Du Y, Cheng Y, Chen S and Guo F*. ATF4 regulates lipid metabolism andthermogenesis. Cell Research. 2010, 20:174–184会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 2 博士 9 硕士 0获奖 :线粒体 tRNAGly 基因 T10003C 突变与母系遗传糖尿病表型及发病机理研究批准号 :30871362项目负责人 : 吕建新所在单位 : 温州医学院本课题建立了携带线粒体 T10003C 突变的淋巴细胞永生细胞系 , 为研究该基因突变和线粒体功能提供了可共享资源。我们在课题研究中 , 利用血小板线粒体完成了突变线粒体 /正常线粒体与 ρ 0 细胞 (Hela S3) 融合的两株细胞系。在此基础上 , 进行了 T10003C 突变对线粒体功能和细胞表型影响的研究。在永生细胞系中 , 我们发现该突变使得细胞 ATP 产生减少 ,ROS 产生增加 , 线粒体膜电位减小 , 携带突变线粒体的细胞株更容易发生细胞凋亡。在融合细胞细胞系研究中 , 我们建立了通过荧光定量 PCR 方法检测线粒体 tRNA 含量的技术 , 发现携带突变的细胞中 tRNAGly 的表达量显著降低 , 但是线粒体的拷贝数并无显著变化 , 线粒体蛋白的合成量也未受到显著影响 , 但携带突变的细胞中线粒体膜电位水平降低 ,ATP 合成有下降趋势 ,ROS 产生增多。我们通过基因表达芯片分析 ,T10003C 突变融合细胞与正常细胞相比 , 有 153 个基因出现显著表达差异 , 通过 GO 和 KEGG 分析 , 发现差异基因主要集中在与代谢相关信号通路中。我们通过本课题的研究 , 证实了 T10003C 突变可以影响线粒体的功能 , 并导致细胞质内信号通路发生改变 , 说明了细胞核 - 线粒体的互作效应关键词 : 线粒体突变 , 融合细胞 , 基因芯片 ,tRNA学科代码 :H0711NADPH 氧化酶在阿片受体激动剂预处理介导正常及糖尿病鼠心脏缺血再灌注损伤保护中的作用及机制批准号 :30872447项目负责人 : 夏正远- 166 -

所在单位 : 武汉大学糖尿病患者体内活性氧自由基产生增加 , 且其心脏对缺血 / 再灌注损伤 (IRI) 的耐受性降低。缺血或药物 ( 如阿片受体激动剂 ) 预处理可增加心脏对缺血损伤的耐受性 , 其机制涉及 NADPH 氧化酶的激活 , 但糖尿病心脏对预处理敏感性降低或丧失 , 其机制尚不清楚。我们发现 , 糖尿病鼠心脏蛋白激酶 C-beta2 及 NADPH 氧化酶表达增加 , 伴随活性氧自由基的增加。本项目通过建立大鼠 STZ 诱导糖尿病模型 , 及以遭受 IRI 的大鼠在体、离体心脏及培养的心肌细胞为研究对象 , 探讨 NADPH 氧化酶在阿片受体激动剂预处理正常及糖尿病鼠心脏IRI 中的作用及机制 , 并观察抗氧化治疗对糖尿病心脏对预处理敏感性的影响 , 进而研究具有阿片受体激动作用的麻醉剂 Remifentanil 对糖尿病心脏 IRI 的保护作用。该科题研究发现 , 抗氧化剂 N- 乙酰半光氨酸可减少糖尿病心脏中蛋白激酶 C-beta2 及 NADPH 氧化酶表达及活性 , 从而恢复了糖尿病心脏对 Remifentanil 预处理的敏感性 , 其机制与调节 IRI 后肿瘤坏死因子水平有关。该发为糖尿病心脏 IRI 的防治提供了理论依据及新的治疗途径。关键词 : 糖尿病 ; 心肌缺血再灌注损伤 ;Remifentanil 预处理学科代码 :H0713发表论著 :[1] Wang, Fang, Liu, Hui-min, Irwin, Michael G., Xia, Zhong-yuan, Huang, Zhiyong, Ouyang,Jingping, Xia, Zhengyuan. Role of protein kinase C beta(2) activation in TNF-alpha-inducedhuman vascular endothelial cell apoptosis. Canadian Journal of Physiology andPharmacology, 87(3), pp 221-229,[2] Huimin Liu, Kexuan Liu, Minghua Cheng, Yanan Liu, Shaoqing Lei, Michael L Irwin,*Zhengyuan Xia. Bosentan Affects 15-F2t-Isoprostane Adverse Effects on Postischemic RatHearts. Journal of Surgical Research, 168, pp 18-26,[3] Zhiyong Huang, Xingwu Zhong, Michael G. Irwin, Shangyi Ji, Gordon T. Wong, ZhongyuanXia, Barry A FINEGAN, *Zhenyuan Xia. Synergy of isoflurane preconditioning and propofolpostconditioning reduces myocardial reperfusion injury in patients. Clinical Science, 121, pp57-69,[4] Shaoqing Lei, Yanan Liu, Huimin Liu, Zhongyuan Xia, Michael G Irwin, Zhengyuan Xia.N-acetylcysteine inhibits NADPH oxidase activation and attenuates lipid peroxidation in theheart, lung,liver and kidney in streptozotocin-induced diabetic rats. Yonsei Med J. 2012Mar;53(2):294-303.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 0获奖 :GIRE- 胰岛素腺病毒载体转染的骨髓间充质胰岛工程干细胞对批准号 :30872483糖尿病大鼠的治疗研究- 167 -

项目负责人 : 宋土生所在单位 : 西安交通大学糖尿病是严重危害人类生命健康的常见病和多发病。传统的胰岛素注射治疗以及后来建立的胰岛移植以及单纯的干细胞治疗技术均存在一定的缺陷。因此 , 亟待探索一条安全、有效的新型治疗途径。本项目拟合成、构建 3 串联糖反应元件 (GIRE3) 调控的胰岛素基因表达载体 , 并以此转染大鼠骨髓间充质干细胞 , 检测胰岛素的表达及其与糖含量的关系 ; 然后将之输入链脲佐菌素所致的糖尿病大鼠 , 观察糖尿病症状的改善情况。目前 , 已按计划完成嵌合体启动子 (GlRE)3BP-1、真核表达载体 p(GIRE)3BP-1 insulin 的构建 , 此载体能在纯化的大鼠骨髓间充质干细胞中表达 , 其表达量受糖含量变化影响。制备了糖尿病大鼠模型 , 并回输了含胰岛素表达载体的干细胞 , 进行了相关指标的检测。为寻求糖尿病基因治疗新途径进行了基础性研究 , 为进一步研究、探索糖尿病新的治疗方法奠定了实验基础。关键词 : 糖尿病 ; 基因治疗 , 骨髓干细胞 ; 胰岛素 ; 葡萄糖反应原件学科代码 :H0704发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5获奖 :骨髓间充质干细胞向肝脏星状细胞定向分化的构建及其在诱导同种异体胰岛细胞移植免疫耐受中的作用批准号 :30872484项目负责人 : 尹震宇所在单位 : 厦门大学我们通过实验发现肝脏的免疫耐受特点与肝脏星状细胞免疫功能相关。在本课题中我们进一步从不同的角度证明肝脏星状细胞在激活后有极强的细胞免疫抑制作用 ; 将自体的肝脏星状细胞与同种异体的胰岛细胞共同移植后 , 在胰岛移植细胞周围形成多层具有抑制免疫、保护移植胰岛的生物膜 , 可以有效延长胰岛移植细胞成活时间。因为临床上肝脏星状细胞获取困难。本实验构建动物骨髓间充质干细胞向肝脏星状细胞定向分化培养的不同方法的探索 , 分析定向分化后的骨髓间充质干细胞的免疫抑制特点与其细胞表面免疫分子表达的相关性 ; 将定向分化后的细胞与同种异体胰岛细胞共同移植 , 探索了骨髓间充质干细胞定向分化为类肝脏星状细胞后诱导胰岛细胞免疫耐受的可能性及其机理。实验证实定向分化的骨髓间充质干细胞具有肝脏星状细胞相关的功能和免疫抑制特点 , 采用定向分化的细胞可以延长共同移植的同种异体胰岛细胞的成活时间 , 这种可以抑制移植术后的排斥反应的现象与定向分化的骨髓间充质干细胞分化为类肝星状细胞的功能是相关的。本实验- 168 -

将为解决临床胰岛细胞移植后 , 因排斥反应与抗排斥反应 ( 免疫抑制剂性 ) 造成同种异体胰岛移植细胞功能逐渐丧失的难题提供新的可行的研究方向和思路。关键词 : 肝脏星状细胞 ; 骨髓间充质干细胞 ; 胰岛移植 ; 免疫耐受 ; 定向分化学科代码 :H0704发表论著 :[1] Zhigang Deng, Jianyin Zhou, Zhenyu Yin*, Youyuan Peng, Fuqiang Wang,Xiaomin Wang.Continuous Regional Arterial Infusion Therapy via Drug Delivery Catheter for Severe AcutePancreatitis with Abdominal Compartment Syndrome. World Journal of Gastroenterology,2011; 17(44): 4911–4916[2] Ding F, Yin Z, Wang HR; Ubiquitination in Rho signaling. Curr Top Med Chem,2011Dec;11(23):2879-87,PMID21824110[3] Zhao W, Zhang L, Yin Z*, Su W, Ren G, Zhou C, You J, Fan J, Wang X. Activated hepaticstellate cells promote hepatocellular carcinoma development in immunocompetent mice. Int JCancer,2011 Dec 1;129(11):2651-61.[4] Deng Z, Yin Z*, Chen S, Peng Y, Wang F, Wang X. Metastatic splenic fetoprotein-producingadenocarcinoma: Report of a case. Surg Today,2011 Jun;41(6):854-8[5] Yin ZY*, Li N, Wang XM, Ni XD, Jiang F, Li YS and Li JS.Immunological protection of livergraft on simultaneous transplanted small bowel in pigs. Hepatobiliary and PancreaticDiseases International.2009; 8(4):363-369[6] 尹震宇 , 王付强 , 彭友缘 . 超声乳化吸引刀联答超声刀在腹腔镜肝肿瘤切除术中的应用 .中华肝胆外科杂志。2011;17(12):1012-1014.[7] 殷莉波 , 赵文秀 , 尹震宇 , 杨中萌 , 张琼 , 王效民 . 体内外人脂肪间充质干细胞向肝样细胞分化的实验研究 . 中华肝胆外科杂志 . 2011;17(4):322-327.[8] 彭友缘严武蔡晓坤尹震宇 *. PNP-CD 融合自杀基因系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究 . 中华肝胆外科杂志 2010,16(8):624-627[9] 尹震宇 , 王效民 , 蒋国平 , 吕丽娜 , 钱诗光 . 小鼠自体肝脏星状细胞联合同种异体胰岛细胞移植延长移植物存活时间的研究 . 中华器官移植杂志 2009;30(2):94-96[10] 尹震宇 , 王效民 , 李宁 , 李幼生 , 倪小冬 , 蒋峰 , 黎介寿 . 辅助性肝肠联合移植术后排斥反应的监测 . 中华胃肠外科杂志 2009;12(4):23-26会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2获奖 :胰岛移植配合促进胰岛 β 细胞再生对减少供体数量提高移植效果的研究批准号 :30872528项目负责人 : 田伯乐所在单位 : 四川大学- 169 -

胰岛移植是彻底治愈糖尿病最有希望的方法 , 随着新型免疫抑制方案的应用 , 胰岛移植远期疗效不断提高 , 遗憾的是目前一个受体往往需要 2-3 个供体的胰岛才能满足需要 ,人体器官的供应还远远不能满足移植的需要。近年来 , 一系列研究提供了胰岛 B 细胞再生的证据 , 其中胰高血糖素样肽 -1(GLP-1) 及其类似物因具有促进胰岛 B 细胞再生 , 抑制 B细胞凋亡、促进前体 / 干细胞向胰岛内分泌细胞转化等功能 , 而备受瞩目。因此本课题设想 , 在胰岛移植时减少所移植胰岛的数量 , 同时应用 GLP-1 刺激 B 细胞再生 , 提高 B 细胞功能 , 以达到与移植正常胰岛数量同样或更好的疗效。课题组首先确定了治愈糖尿病裸鼠的边缘胰岛数量 , 再研究了少量胰岛在肾被膜下聚集移植和分散移植的疗效差异。最后按确定的边缘数量 , 将胰岛按不同的数量级聚集地移植到肾被膜下。移植后对各个数量胰岛移植受体随机分为治疗组和对照组 , 治疗组辅以 GLP-1 最具代表性的类似物 Exendin-4 溶液腹腔注射治疗 , 对照组术后生理盐水腹腔注射治疗。通过对术后随机血糖监测 , 我们发现 ,配合 Exendin-4 治疗可以减少治愈糖尿病裸鼠的胰岛移植数量。该研究结果为缓解器官短缺提供了新的思路。关键词 : 糖尿病 ; 胰岛移植 ; Exendin-4;学科代码 :H0704发表论著 :[1] Zhang, Yi, *Tian, Bo-Le. Pancreas anatomy and surgical procedure for pancreatectomy inrhesus monkeys. Journal of Medical Primatology, 40(6), pp 376-382, 2011/12(SCIE).[2] *Lu, Yanrong,, Tian, Bole, Cheng, Jingqiu. Mesenchymal stem cells protect islets fromhypoxia/reoxygenation-induced injury. Cell Biochemistry and Function, 28(8), pp 637-643,2010/12(SCIE).[3] 曾力 , 田伯乐 , 陆燕蓉 . 骨髓间充质干细胞对大鼠到小鼠胰岛移植的保护作用 . 华西医学 , 05 期 , pp 641-645, 2011/5/30( 中国知网 ).会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1获奖 :C3G-SOD 双靶点阻遏 ROS 多环节改善 PINF 的实验研究批准号 :30872531项目负责人 : 吴育连所在单位 : 浙江大学亲体器官移植可缓解供体紧缺、减少排斥。亲体胰岛移植发展限制的主要原因是胰岛获取及移植后原发性移植物无功能 -PINF。我们新近发现 C3G 可通过抑制 ROS 氧化损伤而明显改善供体鼠胰岛功能 ; 但通过单一 C3G 竞争结合自由基可能还不足有效清除 ROS 对供体胰岛的损伤 , 同时结合 ROS 酶解激活可能对 C3G 有互补协同作用。本项目首次设想 : 在对杨梅来源的 C3G 进行定量分析纯化基础上 , 利用 C3G 在体内外预处理供体、移植物 , 研究其对胰岛功能及分离纯化产量的影响 ; 同时体外构建稳定表达 SOD 基因的供体胰岛 , 应- 170 -

用 C3G 竞争结合自由基及 SOD 对内源性 ROS 的酶解清除作用 , 在已建立的临界剂量胰岛移植模型上 , 通过研究 C3G 和 SOD 基因转染技术阻遏 ROS 不同靶点和 PINF 发生的不同环节的作用及其协同效应 , 探讨其提高胰岛产量和活力及预防 PINF 的效率 , 以达到减少移植供受体比例和移植成本的目标 , 为推动亲体胰岛移植奠定实验基础。关键词 : 胰岛移植物功能 ;ROS;C3G;SOD学科代码 :H0704发表论著 :[1] Zhang B, Kang M, Xie Q, Xu B, Sun C, Chen K, Wu Y. Anthocyanins from Chinese bayberryextract protect β cells from oxidative stress-mediated injury via HO-1 upregulation.Journal of Agricultural and Food Chemistry, 59(2), pp 537-545, 2011/1/26.[2] Sun C, Zhang B, Zhang J, Xu C, Wu Y, Li X, Chen K. Cyanidin-3-Glucoside-Rich Extractfrom Chinese bayberry fruit protects pancreatic b Cells and ameliorates hyperglycemia instreptozotocin-induced diabetic mice. Journal of Medicinal Food.[3] Zhang B, Jiang B, Chen Y, Huang H, Xie Q, Kang M,, Zhang H, Zhai C, Wu Y. Detection ofviability of transplanted beta cells labeled with a novel contrast agent–polyvinylpyrrolidone‐coated superparamagnetic iron oxide nanoparticles bymagnetic resonance imaging. Contrast Media and Molecular Imaging.[4] Dong X, Zhang B, Kang MX, Chen Y, Guo QQ, Wu YL. Analysis of pancreatic fistulaaccording to the International Study Group on Pancreatic Fistula classification scheme for294 patients who underwent pancreaticoduodenectomy in a single center. Pancreas, 40(2), pp222-228, 2011.[5] Guo, Qingqu, Kang, Muxing, Zhang, Bo, Chen, Ying, Dong, Xin, Wu, Yulian. Elevated levelsof CA 19-9 and CEA in pancreatic cancer-associated diabetes. Journal of Cancer Researchand Clinical Oncology, 136(11), pp 1627-1631, 2010/11(SCIE)[6] Zhang, Bo, Gao, Shunliang, Chen, Ying, Wu, Yulian. Primary Yolk Sac Tumor Arising in thePancreas with Hepatic Metastasis: a Case Report. Korean Journal of Radiology, 11(4), pp472-475, JUL-AUG 2010/8(SCIE).[7] Huang, Hai, Dong, Xin, Kang, Mu Xing, Xu, Bin, Chen, Ying, Zhang, Bo, Chen, Jian, Xie,Qiu Ping, Wu, Yu Lian , Novel Blood Biomarkers of Pancreatic Cancer-Associated DiabetesMellitus Identified by Peripheral Blood-Based Gene Expression Profiles. American Journalof Gastroenterology, 105(7), pp 1661-1669, 2010/7(SCIE).[8] Zhang, Bo, Xie, Qiu-ping, Gao, Shun-liang, Fu, Yan-biao, Wu, Yu-lian. Pancreaticsomatostatinoma with obscure inhibitory syndrome and mixed pathological pattern. Journalof Zhejiang University-Science B, 11(1), pp 22-26, 2010/1(SCIE)[9] Guo, Qingqu, Chen, Ying, Zhang, Bo, Kang, Muxing, Xie, Qiuping, Wu, Yulian. Potentiationof the effect of gemcitabine by emodin in pancreatic cancer is associated with survivininhibition. Biochemical Pharmacology, 77(11), pp 1674-1683, 2009/6/1(SCIE)会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 0- 171 -

siRNA 特异性阻抑 Dkk-1 调控 Wnt 信号通路抑制糖皮质激素诱发骨质疏松的研究批准号 :30872631项目负责人 : 廉永云所在单位 : 四川大学长期应用糖皮质激素 (GCs) 可诱发糖皮质激素性骨质疏松症 (GIOP), 主要是由于成骨细胞数量和功能降低所致。经典 Wnt 信号通路是促进成骨细胞增殖、分化和成熟的关键通路。GCs 通过上调胞外蛋白 Dikkopf-1(Dkk-1), 抑制 Wnt 糖蛋白与 Frizzel 受体和LRP5/LRP6 协同受体复合物的形成 , 对 Wnt 信号通路起负面调节作用。本研究探索了地塞米松对成骨细胞 Wnt 信号通路相关基因转录水平的影响 , 并采用 RNA 干扰技术 , 构建 Dkk-1siRNA 慢病毒载体 , 转染 GCs 作用下的成骨细胞 , 特异性阻抑 Dkk-1 基因的表达 , 激活 Wnt信号传导通路 , 促进成骨细胞的增殖分化 , 从而为发现新型药物作用靶点 , 开发 GIOP 新药 , 提供实验依据。另外 , 我们还研究了抗 DKK-1 中和性抗体对脂肪细胞分化的影响。关键词 : 糖皮质激素 ; 骨质疏松 ;Dkk-1;Wnt 信号通路 ;siRNA学科代码 :H0726发表论著 :[1] 廉永运 .Wnt 信号通路抑制因子 DKK-1 在骨质疏松发生中的研究进展 . 中国骨质疏松杂志 (CA 收录 ), 16(5), pp 365-368,[2] * 康鹏德 .Wnt 信号转导通路与糖皮质激素性骨质疏松 . 中国矫形外科杂志 , 19(17), pp1445-1447,[3] 廉永云 .Dkk-1 蛋白的研究现状、进展及临床意义 . 医学与哲学 ( 临床决策论坛版 ).会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :I 型神经纤维瘤骨骼系统并发症的分子遗传学机理研究批准号 :30872632项目负责人 : 余希杰所在单位 : 四川大学I 型神经纤维瘤 (Neurofibromatosis type 1, NF1) 是最常见的常染色体显性遗传病。50%NF1 病人有骨骼并发症 , 包括骨质疏松症、先天性脊柱侧弯及胫骨假关节等。目前骨骼并发症发病机理仍不清 , 治疗效果极差。申请者的前期研究表明 NF1 基因直接调控成骨 /破骨细胞的增殖及分化 , 并可能在骨发育及骨代谢的不同细胞发挥不同的调控作用。现有的动物模型受限于单一细胞或骨发育的某一特定阶段 , 不能全方位、多步骤模拟 NF1 基因- 172 -

的调控作用。申请者拟利用胚胎干细胞发育的全能性 , 建立由 Nf1 基因敲除的胚胎干细胞分化为成骨 / 破骨细胞的生物学模型。预实验表明 Nf1 基因敲除的胚胎干细胞分化来的成骨细胞成骨能力减弱。申请者拟在此基础上研究 NF1 基因调控成骨 / 破骨细胞的信号通路及靶向基因 , 并正向 / 负向调控异常的信号通路 , 结合临床研究揭示 NF1 骨异常的分子遗传学机理。关键词 :I 型神经纤维瘤 ; 胚胎干细胞 ; 成骨细胞 ; 破骨细胞 ; 靶向治疗学科代码 :H0726发表论著 :[1] Junrong Ma, Mi Li, Janet Hock, *Xijie Yu. Hyperactivation of mTOR Critically RegulatesAbnormal Osteoclastogensis in Neurofibromatosis Type 1..Journal of Orthopaedic Research,30(1), pp 144-152,[2] Tian Xia, Yanhua Liang, Junrong Ma, Mi Li, Meng Gong, *Xijie Yu. Loss-of-function ofSHARPIN causes an osteopenic phenotype in mice. Endocrine, 39(11), pp 104-112,[3] CHEN Xiang, TIAN Hao-ming, PEI Fu-xing, *Xijie Yu. Bone Functions as a Novel EndocrineOrgan. Chinese Medical Journal (english)[4] 周明亮 , 李谧 , * 余希杰 ; miRNA 对成骨细胞分化成熟的调控及临床意义 . 中国修复重建外科杂志 .会议报告 : 国际大会 2 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :基于 CT 微结构的三维非线性有限元分析对骨质疏松性髋部骨折的预测批准号 :30872633项目负责人 : 汪爱媛所在单位 : 中国人民解放军总医院骨的微观结构在骨质疏松性骨折中的作用得到广泛证实 ,CT 图像数据既能反应皮质骨的几何特征 , 又能反应松质骨的结构分布 , 其对骨折的预测能力日益得到重视。本研究以骨质疏松老年人股骨近端样本为主要研究对象 , 通过不同应力分区内松质骨样本 CT 图像的显微结构和力学性能的相关分析 , 获得骨质疏松样本基于 CT 的微观结构与力学性能参数的相关经验公式 ; 成功构建基于显微 CT 的骨组织内三维变形场测量系统 , 为微观结构与力学关系测量建立最直接的分析手段 ; 建立基于 CT 骨小梁微结构信息的三维非线性有限元模型 , 进行断裂强度预测 ; 同时以临床骨质疏松骨折老年人及未骨折老年人的 CT 影像数据为两组研究对象 , 建立有限元模型 , 并进行对比分析 , 优化算法和模型 , 确立均值法灰度取样模型 , 给出了股骨上端安全因子及骨折最大载荷 ; 这一结果可为老年骨质疏松性髋部骨折危险性的预测提供新的依据和手段。关键词 : 骨质疏松 ; 骨折 ; 非线性有限元 ; 预测 ; 计算机断层图像- 173 -

学科代码 :H0726发表论著 :[1] 孟昊业 , 马沁巍 , * 汪爱媛 , 马少鹏 , 彭江 , 许文静 , 卢世璧 . 基于显微 CT 的骨内微观三维变形场测量系统的研究 . 医用生物力学[2] Liu, Fei, Liu, Xin, Wang, Daifa, Zhang, Bin, *Bai, Jing. A Parallel Excitation BasedFluorescence Molecular Tomography System for Whole-Body Simultaneous Imaging ofSmall Animals. Annals of Biomedical Engineering, 38(11), pp 3440-3448[3] *Liu, Xin, Wang, Daifa, Liu, Fei, Bai, Jing. Principal component analysis of dynamicfluorescence diffuse optical tomography images. Optics Express, 18(6), pp 6300-6314.[4] LI Mingze, Zhang Yonghong, *Bai Jing. In Vivo Diffuse Optical Tomography andFluorescence Molecular Tomography. Journal of Healthcare Engineering, 1(3), pp 477-508,[5] Guo, Xiaolian, Liu, Xin, Wang, Xin, Tian, Feng, Liu, Fei, Zhang, Bin, Hu, Guangshu, *Bai,Jing. A Combined Fluorescence and Microcomputed Tomography System for Small AnimalImaging. IEEE Transactions on Biomedical Engineering, 57(12), pp 2876-2883,[6] Zhu, Xinjian, Zhang, Pengfei, Shao, Jinhua, Cheng, Yuanzhi, Zhang, Yun, *Bai, Jing. Asnake-based method for segmentation of intravascular ultrasound images and its in vivovalidation .Ultrasonics, 51(2), pp 181-189,[7] *Liu, Shuangquan, Zhang, Bin, Wang, Xin, Li, Lin, Chen, Yan, Liu, Xin, Liu, Fei, Shan,Baoci, Bai, Jing. A Dual Modality System for Simultaneous Fluorescence and PositronEmission Tomography Imaging of Small Animals. IEEE Transactions on Nuclear Science,58(1), pp 51-57[8] Wang, Daifa, Liu, Xin, Liu, Fei, *Bai, Jing. Full-Angle Fluorescence Diffuse OpticalTomography With Spatially Coded Parallel Excitation. IEEE Transactions on InformationTechnology in Biomedicine, 14(6), pp 1346-1354.[9] 刘欣 , 刘飞 , 汪待发 , 白净 .In vivo whole-body imaging of optical agent dynamics using fullangle fluorescence diffuse optical tomography. Chinese Optics Letters, 12, pp 1156-1159.会议报告 : 国际大会 4 分组 4 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :增食欲素受体 1 调控胰岛 β 细胞功能缺陷的研究批准号 :30872724项目负责人 : 赵玉岩所在单位 : 中国医科大学胰岛功能缺陷与胰岛素抵抗 (IR) 为 2 型糖尿病发病的两个决定因素 , 但胰岛功能缺陷的病因及其与 IR 的关系尚不清楚。本研究在构建 SD 鼠 IR 动物模型、首次从 IR 鼠胰岛中鉴定出差异表达基因 - - 增食欲素受体 1(OX1R) 的基础上 , 拟建立 " 高表达 " 或 " 沉默 "OX1R基因的胰岛 β 细胞株 , 研究 OX1R 基因对胰岛 β 细胞分泌、凋亡及 P38 MAPK、SAPK/JNK 信号- 174 -

通路的影响 ; 采用 cDNA 芯片初步筛选 OX1R 可能调控的下游基因 ; 应用酵母双杂交技术 , 从IR 鼠胰岛 cDNA 文库中寻找与 OX1R 相互作用的蛋白分子 ; 采用 GST 融合蛋白 pull-down 技术、免疫共沉淀技术验证蛋白质的相互作用 , 以期探讨 OX1R 及其涉及的信号通路在胰岛 β细胞凋亡、功能缺陷过程中的作用机制 , 为胰岛功能缺陷发生机制和基因干涉工程的研究提供新的干预靶点。关键词 : 增食欲素受体 1; 胰岛 β 细胞 ; 凋亡 ; 信号通路 ; 基因功能学科代码 :H0713发表论著 :[1] Zhao YY, Guo L, Zhao XJ, Liu H, Lei T, Ma DJ, Gao XY. Transcriptional activation ofinsulin-like growth factor binding protein 6 by 17ß-estradiol in SaOS-2 cells. Exp Mol Med,2009,41(7): 478-486.[2] Hongwei Chai; Lei Guo*; Xiantao Wang; Yuping Fu; Junlin Guan; Lili Tan; Ling Ren; KeYang. Antibacterial effect of 317L stainless steel contained copper in prevention ofimplant-related infection in vitro and in vivo. J Mater Sci Mater Med. 2011Nov;22(11):2525-35.[3] Hongwei Chai, Lei Guo*, Xiantao Wang, Xiaoyu Gao, Kui Liu, Yuping Fu, Junlin Guan, LiliTan, Ke Yang. In vitro and in vivo evaluations on osteogenesis and biodegradability of abeta-tricalcium phosphate coated magnesium alloy. J Biomed Mater Res A. 2011 Nov 1. doi:10.1002/ jbm.a.33267[4] 赵玉岩 , 马冬杰 , 田雷 , 郑德禄 , 杜瑞伶 . 营养性肥胖大鼠下丘脑增食欲素 A 基因的表达及其意义 . 中华老年医学杂志 2011, 30(8):684-686[5] 王露 , 赵玉岩 , 马冬杰 , 田雷 , 郑德禄 , 杜瑞伶 . 增食欲素受体 1 在营养性肥胖大鼠肾上腺皮质中的表达及意义 . 中国医科大学学报 , 2011, 40(1):1-4. ISSN: 0258-4646[6] 田雷 , 赵玉岩 , 王露 , 马东杰 . 增食欲素受体 1 在营养性肥胖型大鼠胰腺组织中的表达研究 . 中华医学杂志 , 2011, 91(6): 409-411. ISSN:0376-2491[7] 王露 , 赵玉岩 . 增食欲素调节下丘脑一垂体一肾上腺轴的研究进展 . 国际内分泌代谢杂志 , 2010, 30(4): 22-24.[8] 赵玉红 ; 吴丽霞 ; 关心 ; 王伟 ; 赵玉岩 . 血清增食欲素 A 与脂代谢相关性分析 .中国公共卫生 2011,27(11): 1502-1503.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 6获奖 :糖化终末产物损害胰岛 β 细胞的分子机制和干预研究批准号 :30872727项目负责人 : 苏青所在单位 : 上海交通大学- 175 -

胰岛 β 细胞功能进行性减退是 2 型糖尿病突出的病理生理基础 , 其机制尚未完全阐明。研究显示 , 糖化终末产物 (AGEs) 可诱发 β 细胞发生氧化应激 , 诱导 β 细胞凋亡 , 并降低胰岛素分泌。并进一步探讨线粒体途径和 NADPH 氧化酶途径在 AGEs 诱发的 β 细胞氧化应激中的作用及相互关系 ;AGEs 诱导 β 细胞凋亡的分子机制 ; 以及线粒体靶向抗氧化剂和NADPH 氧化酶抑制剂等对 AGEs 诱导的 β 细胞损伤可能的保护作用。这些研究不仅有助于加深对 AGEs 和 β 细胞关系的认识 , 而且为 β 细胞保护开辟新的思路。关键词 : 糖尿病 ; 糖化终末产物 ; 胰岛 ;beta 细胞学科代码 :H0713发表论著 :[1]. Ge QM, Dong Y, Su Q. Effects of glucose and advanced glycation end products on oxidativestress in MIN6 cells. Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 2010 9;56 Suppl:OL1231-8.[2]. Ge QM, Dong Y, Zhang HM, Su Q. Effects of intermittent high glucose on oxidative stress inendothelial cells. Acta Diabetologica. 2010 47(Suppl 1):97-103.[3]. 杜世春 , 林宁 , 葛勤敏 , 简尉霞 , 董艳 , 苏青 . 糖化终末产物对 MIN6 细胞活力及活性氧 (ROS) 水平的影响 . 中华内分泌代谢杂志 2011;27(2):152-154.[4]. 林宁 , 万晓玉 , 陈雪茹 , 苏青 , 董艳 . 糖化终末产物对 INS-1 细胞基质金素蛋白酶 2 表达的影响 . 中华内分泌代谢杂志 2011;27(4):328-331.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2获奖 :胞吐蛋白与 L 型钙通道相互作用对 L 型钙通道在 β 细胞膜分布的作用及其生理学和病理学意义的研究批准号 :30971175项目负责人 : 杨绍年所在单位 : 天津医科大学β 细胞 L 型钙通道的适度活动对维持 β 细胞存活和生理功能起关键性作用。研究 β细胞 L 型钙通道对深入认识胰岛素分泌和 2 型糖尿病发病机理具有极重要的意义。人们对整个 β 细胞 L 型钙通道活动性调节的研究付出了巨大的努力 , 但对 L 型钙通道在 β 细胞膜的分布、局部 β 细胞膜 L 型钙通道活动性的生理作用及 L 型钙通道在 β 细胞膜分布异常的病理学意义的研究尚未开始。本项目将研究胞吐蛋白 syntaxin 1、SNAP-25 和 VAMP-2 与 L型钙通道相互作用对 L 型钙通道在 β 细胞膜分布的作用及其生理学意义 , 还将研究这些胞吐蛋白表达明显降低的 GK 大鼠 β 细胞 L 型钙通道分布和活动性及 GK 大鼠 β 细胞存活能力 , 评价恢复这些胞吐蛋白表达和胰岛素治疗对 GK 大鼠 β 细胞 L 型钙通道分布和功能及GK 大鼠 β 细胞存活能力的影响。本项目旨在揭示一种全新的 L 型钙通道调节方式及其生理学意义 , 提出一种新的 2 型糖尿病发病理论或学说 , 为治疗 2 型糖尿病奠定新的理论基- 176 -

础。关键词 :β 细胞 ; 钙通道 ; 胞吐蛋白 ; 胰岛素分泌 ; 糖尿病学科代码 :H0713发表论著 :[1] Cui, Xiuli, Yang, Guang, Pan, Minglin, Zhang, Xiao-Nan, *Yang, Shao-Nian. Akt SignalsUpstream of L-Type Calcium Channels to Optimize Insulin Secretion. PANCREAS, 41(1),pp 15-21,[2] Pan, Minglin, Yang, Guang, Cui, Xiuli, *Yang, Shao-Nian. Subthreshold alpha(2)-AdrenergicActivation Counteracts Glucagon-Like Peptide-1 Potentiation of Glucose-Stimulated InsulinSecretion (vol 2011, 604989, 2011) .Experimental Diabetes Research, 2011(604989), pp 1-7会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1获奖 :载脂蛋白 A5 修饰高密度脂蛋白减轻动脉粥样硬化的作用及机制研究批准号 :30971126项目负责人 : 曲伸所在单位 : 复旦大学动脉粥样硬化的病理基础是脂蛋白的氧化应激和血管壁的损伤 , 导致胆固醇在动脉壁内的异常沉积和转运障碍。高密度脂蛋白 (HDL) 具有抗炎和促进胆固醇逆转运的双重作用 , 而HDL 的组成和功能主要由其所含的载脂蛋白修饰。载脂蛋白 A5 是新发现的存在于 HDL 的载脂蛋白。我们前期研究发现它可以改变 LDL 和 HDL 组分和颗粒大小 , 对 HDL 具有修饰作用 , 细胞学研究发现它可以减少脂蛋白在吞噬细胞内的聚集并抑制泡沫细胞的形成。基于前期研究结果 , 我们推测其具有抗动脉粥样硬化作用。本研究拟在动脉粥样硬化鼠模型中一步验证载脂蛋白 A5 的功能并探讨其作用机制 , 证实载脂蛋白 A5 抗动脉粥样硬化的主要机制是 :1) 修饰 HDL 组分增加胆固醇的逆转运。2) 作为一种可交换蛋白 , 载脂蛋白 A5 可独立作用于血管壁及吞噬细胞起到阻止泡沫细胞形成和减少细胞炎性应激的作用。期望本研究可为动脉粥样硬化的治疗提供新的作用靶点。关键词 : 载脂蛋白 A5, 动脉粥样硬化 , 胆固醇学科代码 :H0719发表论著 :[1] 曲伸 . 核转录因子 Foxo1 与糖脂代谢 . 国际内分泌代谢杂志 , 30(4), pp 264-266,[2] Liu, Qing, Bengmark, Stig, Qu, Shen. The role of hepatic fat accumulation in pathogenesis- 177 -

of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) Lipids in Health and Disease, 9, p42,会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 5获奖 :H07 内分泌系统 / 代谢和营养支持青年科学基金项目PIMCE 效应引起的线粒体功能障碍在 2 型糖尿病中的作用及机制研究批准号 :30800409项目负责人 : 张华所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学本项目对线粒体功能障碍在 2 型糖尿病中的作用与机制进行了研究。我们发现 :(1)在原代培养的人肾系膜细胞 (human mesangial cell, HM) 中 , 线粒体功能 ( 例如线粒体膜电位的减低、丙酮酸脱氢酶活性、细胞色素 C 氧化酶活性 ) 的降低 , 与高浓度葡萄糖引起的热休克蛋白 (HSP)90β 1 表达及其介导的 PIMCE 的下降相关。利用细胞转染技术上调 HSP90β 1 线粒体蛋白表达水平 , 可以显著抑制高糖引起的线粒体功能降低。(2) 在糖尿病模型db/db 小鼠中 , 糖尿病肾病的发展与褪黑素在抗霉素 A 敏感位点诱导的 ROS 生成减弱及线粒体复合体 Ⅲ(MC-3) 活性减弱有关。糖尿病的 db/db 小鼠与非糖尿病的 db/m 小鼠进行比较 ,两者肾脏线粒体的 MC-3 蛋白表达水平基本一致 , 然而线粒体复合体 I (MC-1) 的蛋白表达水平存在糖尿病 db/db 小鼠中却显著性的增加。这种对线粒体复合体的差异性调节可能改变了肾脏线粒体中电子传递链的平衡 , 过度的生成了 ROS。该研究提供了引起线粒体功能障碍的可能机制 , 这种机制可能参与了糖尿病肾病的病理发生机制。关键词 : 糖尿病肾病 ; 线粒体 ; 热休克蛋白 ; 线粒体复合物学科代码 :H0713发表论著 :[1] Zhang H, Zhang HM, Wu LP, Tan DX, Kamat A, Li YQ, Katz MS, Abboud HE, Reiter RJ,Zhang BX. Impaired mitochondrial complex III and melatonin responsive reactive oxygen speciesgeneration in kidney mitochondria of db/db mice. J. Pineal Res., 2011,51(3), pp 338-344[2] 张华 , 吴利平 , 沈敏 , 孟华 , 宁晓萱 , 王晓明 . 如何提高八年制医学生老年病学教学 .西北医学教育 , 04 期 , pp 728-730,[3] 张华 , 吴利平 , 孟华 , 高建苑 , 王晓明 . 关于提高老年病学教学质量的体会与思考 . 西北医学教育 , 03 期 , pp 597-599.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1- 178 -

培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0糖基化终末产物对 tTG 的影响及其在糖尿病肾病发病中的作用批准号 :30800423项目负责人 : 于晓艳所在单位 : 吉林大学在糖尿病持续高血糖状态下 , 糖基化终末产物 (AGEs) 形成明显增加 , 即使血糖恢复正常 ,AGEs 也持续存在并对机体产生危害。动物和人类糖尿病肾脏的 AGEs 含量明显升高 ,可从促进合成和减少降解两方面引起细胞外基质 (ECM) 积聚 , 在糖尿病肾病的发病机制中起重要作用。组织型转谷氨酰胺酶 ( tTG ) 可使 ECM 蛋白被修饰而抵抗蛋白酶的降解。糖尿病状态下 , 肾脏 tTG 表达和活性增加并且与增加的 ECM 呈正相关 , 但至于 tTG 的改变是否与AGEs 有关 , 如果有关 , 其在糖尿病肾病发生中的作用 , 是本项目的研究主要研究目标。在本项目中我们利用整体动物研究分析糖尿病及非糖尿病状态下 tTG 与 AGEs 的关系 , 利用体外对肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞的研究探讨 tTG 与 AGEs 二者之间的可能分子机制。为糖尿病肾病的发病机制提供理论基础。关键词 : 糖基化终末产物 ; 糖尿病肾病 ; 组织型转谷氨酰胺酶 ; 细胞外基质学科代码 :H0713发表论著 :[1] 刘辉 , 于晓艳 , 孙波 , 李相军 , 任立群 , 李才 , 邹颖刚 , 李佳 . 糖基化终末产物对大鼠肾小管上皮细胞组织型转谷氨酰胺酶 mRNA 表达的影响 . 中国生物制品学杂志 ,2010,06 期 , pp 569-572[2] 刘辉 , 于晓艳 , 魏海峰 , 石艳 , 苗春生 , 李才 , 邹颖刚 . PPAR-γ 激活对糖基化终末产物引起的大鼠肾系膜细胞 TGF-β 及 CTGF mRNA 表达的影响 . 中国老年学杂志 ,2010,08期 , pp 1062-1064.[3] 邹颖刚 , 刘辉 , 苏青 , 魏海峰 , 于晓艳 . 银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾脏组织型转谷氨酰胺酶表达的影响 . 中国实验诊断学 ,2011,07 期 , pp 1054-1056.[4] 刘辉 , 李凤 , 苏青 , 于晓艳 . 银杏叶提取物减轻糖基化终末产物对大鼠肾脏 TGF-β 及CTGF 表达的影响 . 中国实验诊断学 ,2011,06 期 , pp 980-982, 2011/6/25.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1获奖 :- 179 -

骨髓基质干细胞诱导免疫耐受治疗 1 型糖尿病的实验研究批准号 :30800428项目负责人 : 李银萍所在单位 : 武汉大学骨髓基质干细胞 (bone marrow mesenchymal stem cells, BMSC) 具有多向分化潜能和重要的免疫调节作用。1 型糖尿病 (type 1 diabetes, T1D) 是一种抗原特异性自身免疫学疾病 , 免疫治疗是 T1D 非常有前景的治疗措施。本研究的目的在于探讨 BMSC 的免疫调节作用在 T1D 治疗中的应用。通过尾静脉输注体外扩增的小鼠 BMSC 至 T1D 动物模型体内 , 检测血糖及血胰岛素水平 , 组织和免疫组化法检测胰腺组织病理变化及胰岛素蛋白表达水平 ,ELISA 法检测树突状细胞及 T 细胞亚群细胞因子水平。结果表明 ,BMSC 能抑制体外 T1D模型脾脏淋巴细胞增殖 , 输注 BMSC 至模型体内后能 1) 在一定程度上延缓 T1D 的发生 , 降低疾病发生率 ,2) 降低模型动物血糖水平 ,3) 减轻胰腺组织病理损伤程度 , 保护胰岛 β 细胞 , 改善胰岛素蛋白表达及血清胰岛素水平 ,4) 降低血清 Th1 细胞因子 IFNgamma 水平 , 增加 IL10 水平 , 但对 IL-12、IL-4、IL-17、TGFβ 分泌水平无显著性影响。因此 , 输注体外扩增的 BMSC 能通过减轻 T1D 模型体内炎性反应 , 诱导调节性细胞因子分泌 , 保护胰岛 β 细胞。关键词 : 骨髓基质干细胞 ; 免疫调节 ;1 型糖尿病学科代码 :H0713发表论著 :会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3获奖 :STZ 诱导的 1 型糖尿病小鼠脑动脉平滑肌细胞 Ryanodine受体 / 通道的功能改变及其机制批准号 :30800432项目负责人 : 董玲所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学申请者首次发现糖尿病小鼠脑血管平滑肌细胞上 BKCa 通道蛋白的表达和功能亚基的异常使得血管的功能改变。本课题试图解答血管平滑肌细胞钙离子相关通道如 BKCa、RyR通道在糖尿病状态下的功能改变和可能的生物学效应。因此课题组从糖尿病血管平滑肌细胞上自由基调控 BKCa 通道的电压依赖性、钙离子依赖性以及下游可能的平滑肌细胞增殖、凋亡机制 , 结合电生理学、细胞生物学、药理学、检测通道电流、蛋白表达及活性分析、细胞的增殖、凋亡及细胞内自由基水平检测等方法 , 探讨糖尿病血管平滑肌细胞内钙的改- 180 -

变及调控。研究包括 :1 进一步探讨自由基对糖尿病血管平滑肌 BKCa 通道功能的影响 2研究 BKCa 通道功能的改变除血管收缩舒张功能改变之外对平滑肌细胞凋亡的影响。研究结果部分为我们前期提出血管平滑肌细胞参与糖尿病血管功能及其平滑肌钙调控机制提供理论依据 , 期望更进一步为临床更有效防治糖尿病血管功能异常提供新资料和实验依据。关键词 : 糖尿病 ; 血管平滑肌 ; 钙离子 ; 离子通道学科代码 :H0713发表论著 :[1] Ma YG, Dong L, Ye XL, Deng CL, Cheng JH, Liu WC, Ma J, Chang YM, Xie MJ. Activationof cloned BK(Ca) channels in nitric oxide-induced apoptosis of HEK293 cells. Apoptosis.2010 Apr;15(4):426-38[2] Dong L, Xie MJ, Zhang P, Ji LL, Liu WC, Dong MQ, Gao F. Rotenone partially reversed thedecreased BKCa currents in STZ-induced diabetic cerebral artery smooth muscle cells. ClinExp Pharmacol Physiol. 2009 Oct;36(10):e57-64.[3] 张毅 , 李慧颖 , 董玲 *, 高峰链脲佐菌素诱导模拟 2 型糖尿病动物模型的研究进展中华糖尿病杂志 2011;3(5):433-435.[4] 李慧颖 , 张毅 , 杨绍松 , 董玲 * 平滑肌细胞钙离子相关通道与血管重塑性疾病 . 心脏杂志 2011,23(6):807-810会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0获奖 :甲状腺自身抗体的免疫学特性在桥本甲状腺炎疾病进程中的作用批准号 :30800530项目负责人 : 高莹所在单位 : 北京大学甲状腺球蛋白抗体 (TgAb) 和甲状腺过氧化物酶抗体 (TPOAb) 是桥本甲状腺炎 (HT)的标志性抗体。HT 患者血清中同样是 TgAb 和 / 或 TPOAb 阳性 , 但临床进程各异 , 而决定疾病进展的关键因素尚未明了。本研究通过收集处于不同疾病阶段 ( 稳定处于甲状腺功能正常、亚临床甲减及临床甲减 ) 的 HT 患者血清 , 分别比较了 TgAb、TPOAb 的免疫学特性在上述三组 HT 患者中的差异。研究结果提示 : 血清中具有高水平 TPOAb IgG2、IgG4 亚型的患者易进展至临床甲减 ;TgAb 亲合力的提升是 HT 患者进展至临床甲减的危险因素 ;HT 患者血清中的 TgAb 为多克隆的激活 , 而血清 TgAb 具有与 mAb PB2 识别的表位部分或完全相同的 HT患者可能更易进展为亚临床甲减乃至临床甲减 , 上述研究证实自身抗体的免疫学特性参与了 HT 的发病机制。考虑到 Graves 病 (GD) 合并 HT 兼有 HT 的特点 , 我们探讨了利用抗体免疫学特性鉴别 GD 合并 HT 与单纯 GD 的可行性 , 进而提出利用自身抗体免疫学特性区分自身免疫甲状腺疾病 (ATID) 临床表型的观点。上述研究为阐明甲状腺自身抗体在 AITD 发病机制中的作用补充了新的理论。- 181 -

关键词 : 甲状腺球蛋白抗体 ; 甲状腺过氧化物酶抗体 ; 自身免疫 ; 桥本甲状腺炎学科代码 :H0707发表论著 :[1] Zhang Y, Gao Y, Li M, Xie L, Huang Y, Gao Y, Guo X. Avidity of thyroglobulin antibody insera from patients with Hashimoto's thyroiditis with different thyroid functional status. ClinExp Immunol. 2010 Jul 1;161(1):65-70.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 3 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0基因表观修饰在成年期追赶生长胰岛 β 细胞功能损伤中的作用研究批准号 :30800531项目负责人 : 黎慧清所在单位 : 华中科技大学营养缺乏造成的生长抑制在营养恢复后出现快速生长现象称为追赶生长。我们经过研究发现 :1. 给予 6 周限食后开放饮食的追赶大鼠模型 GH、leptin 分泌水平有显著变化 , 血清中的总胆固醇 , 游离脂肪酸逐渐升高与对照组有显著性差异 , 可能与共同参与了脂肪沉积、胰岛素抵抗状态的形成以及糖代谢障碍。2. 高葡萄糖钳夹实验结果显示 , 追赶生长组糖负荷后一相胰岛素分泌显著低于对照组 , 证明追赶组大鼠早期已出现 beta 细胞功能损伤 ; 同时胰腺的免疫组化结果显示追赶组胰岛染色面积比率及胰岛素平均光密度值较对照组显著降低 , 同时伴有胰岛 TNUEL 凋亡检测的增高及抗凋亡因子 Bcl-2 表达的减少 , 提示追赶生长引起 beta 细胞的早期凋亡。3. 胰升血糖素样肽 -1(Pdx-1) 是调节胰腺成熟和胰岛素分泌的重要转录因子 , 追赶生长组 pdx-1 的表达较对照组显著下降 ; 在对胰岛染色质免疫沉淀的研究发现 , 追赶生长组的 H3K4me3 的富集程度较对照组明显降低 , 而该信号是染色质处于开放状态的标志 ; 相反 ,H3K9me2 的富集程度较对照组显著提高 , 该指标在常染色质是抑制性信号 ; 此外 , 追赶生长组 H3 乙酰化程度较对照组下降 , 而去乙酰化往往参与染色质的抑制。关键词 :2 型糖尿病 ; 胰岛 beta 细胞 , 胰升血糖素样肽 -1, 追赶生长学科代码 :H0713发表论著 :[1] *Liu ZH, Chen LL, Deng XL, Song HJ, Liao YF, Zeng T. Methylation Status of CpG Sites inthe MCP-1 Promoter is Correlated to Serum MCP-1 in type 2 Diabetes.2012,J EndocrinolInvest.( 已接受 ) http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2197543[2] 黎慧清 , 陈璐璐 , 邓秀玲 , 张皎月 , 廖云飞 , 刘振华 , 宋惠杰 , 追赶生长大鼠胃泌素及内脏脂肪细胞 CCK2R 表达变化。中华内分泌代谢杂志 , 2011,27(7),pp 607-609[3] 刘振华 , 黎慧清 , 陈璐璐 , 宋惠杰 . 限食后追赶生长大鼠血清 GH、IGF-1、CCK、ghrelin- 182 -

和 leptin 水平比较 . 华中科技大学学报 ( 医学版 ), 2011,40(5), pp 537-541.[4] Li H, Deng X, Li Z, Luo C, Liu J, Wang Y. Variation of serum monocyte chemoattractantprotein-1 in patients with diabetes and metabolic syndrome. J Endocrinol InvestJ HuazhongUniv Sci Technolog Med Sci.,2011,31(3), pp 312-316,[5] 刘振华 , 黎慧清 , 陈璐璐 . 追赶生长与表观遗传学 . 中华糖尿病杂志 ,2010,02(3), pp219-222.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1获奖 :PPARα 基因 Val227Ala 变异在脂肪细胞脂代谢中作用的研究批准号 :30800533项目负责人 : 吴芳所在单位 : 浙江大学本研究建立了稳定表达 pEGFP-N1-PPARα V227 和 pEGFP-N1-PPARα A227 变异基因的脂肪细胞模型。并将细胞分成四组 : 野生组、突变组、空载体组和对照组 ; 每组再分为 PPARα 激动剂 WY14643 干预组和 WY14643 不干预组 , 并用油酸钠及 H2O2 建立脂代谢紊乱及氧化应激损伤的疾病模型 , 分别采用 MTS 技术、流式细胞术、油红染色、Hochest33342及 PI 双染法和 Western blot 等方法检测各组细胞的增殖、凋亡、细胞脂肪变性程度和相关通路蛋白及信号分子的表达变化 , 以探讨 PPARα V227A 变异对肝细胞功能的影响。结果发现 (1)PPARα 基因表达促进了前脂肪细胞向成熟脂肪细胞的分化 , A227( 突变型 ) 的前脂肪细胞增殖活力低于 PPARα V227( 野生型 ),ACO2 表达低于 V227 组 , 提示 PPARα V227A基因变异可能是有益的突变 , 可能改善肥胖 ;(2)PPARα 对氧化应激损伤有保护作用 , 且A227 组保护作用更加明显。该研究为明确 PPARα 基因 V227A 变异的功能及其对机体的影响提供了重要的依据。关键词 : 过氧化物酶体增殖物激活受体 ; 脂肪细胞 ; 脂代谢紊乱 ; 基因多态性 , 氧化应激学科代码 :H0719发表论著 :[1] Wu F, Zhang W, Li L, Zheng F, Shao X, Zhou J, Li H.Inhibitory effects of honokiolon lipopolysaccharide-induced cellular responses and signaling events in human renalmesangial cells. Eur J Pharmacol. 2011;654(1):117-21会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1- 183 -

miR-21 调控 DN 系膜细胞增殖的 PI3K/PTEN 信号途径研究批准号 :30800534项目负责人 : 张政所在单位 : 重庆医科大学肾小球系膜病变是糖尿病肾病 (DN) 最突出的早期改变 ,PI3K/PTEN 信号途径异常与其发生发展关系密切。但由于其调控是多层次的复杂网络 , 单一 PI3K 途径尚不能很好解释 DN的分子机制。我们的目标是以肾脏特异性 microRNA 为切入点 , 从小分子 RNA 层面上探寻 DN中 microRNA 对 PI3K/PTEN 信号途径调控机制。方法是首先在前期通过芯片结合生物信息学技术初筛出一个早期 DN 相关的以 PTEN 基因为靶点的 miRNA-miR-21 基础上 , 构建真核表达载体 , 检测 miR-21 在高低糖培养的小鼠肾小球系膜细胞和微量白蛋白尿期 db/db 小鼠肾脏的表达水平 , 及与 PI3K/PTEN 途径在 DN 中的作用机制 , 对微量白蛋白尿期 db/db 小鼠糖、脂、胰岛素分泌及体重等影响 , 体内外实验发现 miR-21 可能通过特异性靶向调控PTEN/PI3K 信号传导途径 , 抑制肾小球系膜细胞增殖 , 延缓 db/db 蛋白尿 , 可能是一个新的糖尿病肾病的保护因子。关键词 : 糖尿病肾病 ;microRNA;PI3K学科代码 :H0713发表论著 :[1] Zhang, Zheng, Peng, Huimin, Chen, Junxia, Chen, Xin, Han, Fei, Xu, Xiaoming, He, Xiaoyan,Yan, Ning. MicroRNA-21 protects from mesangial cell proliferation induced by diabeticnephropathy in db/db mice. FEBS Letters, 2009,583(12), pp 2009-2014[2] 张政 , 罗勇军 , 彭惠民 , 何晓燕 . 早期糖尿病肾病相关微小 RNA 在小鼠肾脏的表达变化第三军医大学学报 , 2010,13 期 , pp 1383-1386[3] 张政 , 彭惠民 , 陈涛 , 徐晓明 , 何晓燕 , 晏宁 , miR-21 对早期糖尿病肾病 db/db 小鼠蛋白尿的影响 . 中华内分泌代谢杂志 ,2010,26(8), pp 690-694,[4] 张政 , 彭惠民 , 徐晓明 , 陈涛 , 何晓燕 . 糖尿病肾病相关微小 RNA 对高糖下肾小球系膜细胞增殖的影响及其机制 . 中国生物制品学杂志 , 2010,08 期 , pp 821-824[5] 张政 , 彭惠民 , 徐晓明 , 何晓燕 . 小鼠微 RNA miR-21 真核表达质粒的构建及其在小鼠肾小球系膜细胞中的表达 . 中国生物制品学杂志 ,2010,07 期 , pp708-710[6] He, Xiao-yan, Chen, Jun-xia, Zhang, Zheng, Li, Chun-lei, Peng, Qiong-le, Peng, Hui-min.The let-7a microRNA protects from growth of lung carcinoma by suppression of k-Ras andc-Myc in nude mice. Journal of Cancer Research and Clinical Oncology, 2010,136(7), pp1023-1028,[7] He, Xiaoyan, Duan, Changzhu, Chen, Junxia, Ou-Yang, Xi, Zhang, Zheng, Li, Chunlei, Peng,Huimin. Let-7a elevates p21(WAF1) levels by targeting of NIRF and suppresses the growthof A549 lung cancer cells. FEBS Letters, 2009,583(21), pp 3501-3507,会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0- 184 -

脂联素改善胰岛 β 细胞功能的电生理机制研究批准号 :30800535项目负责人 : 聂爱芳所在单位 : 上海交通大学脂联素是由脂肪组织分泌的一种重要的脂肪因子 , 它具有降低血糖 , 甘油三脂、改善胰岛素抵抗、保护心血管内皮功能、抑制动脉粥样硬化等重要作用。本研究采用各种不同的动物模型和细胞模型探讨脂联素对胰岛素分泌的调节作用及其可能的作用机制。结果显示 :(1) 在低糖 (3.3 mM) 条件下 , 脂联素抑制胰岛素的分泌 ; 高糖 (16.7 mM) 条件下 , 脂联素促进胰岛素的分泌。(2) 脂联素对胰岛 β 细胞膜上的 KATP 通道无明显作用 , 但在高糖条件下 , 显著增强糖对电压依赖性钾通道 (Kv) 的抑制效应 , 且增强高糖对胞内游离钙离子浓度的增大效应 , 进而促进胰岛素分泌。(3) 在低糖条件下 , 脂联素使膜电位超极化 , 显著抑制 Ih 电流 , 进而抑制低糖时的胰岛素分泌。(4 ) 在 AdipoR1-/- mice 胰岛 β 细胞和Adipo-/-MIN6 细胞中 , 高糖对胰岛素分泌及各种分泌相关离子通道及钙离子的作用均被削弱 , 表明糖的这些作用是依赖脂联素表达的。上述结果表明 : 脂联素可能通过作用于细胞膜上与分泌相关的离子通道 , 调节胞内游离钙离子浓度 , 进而调控胰岛素分泌 , 在不同的糖浓度时矫正异常的胰岛素分泌 , 进而保护胰岛 β 细胞功能。关键词 : 脂联素 ; 胰岛素 ; 钾通道 ; 钙离子 ; 全细胞膜片钳学科代码 :H0712发表论著 :[1] Nie, Aifang, Wei, Cailing, Meng, Ziqiang. Sodium Metabisulfite Modulation of PotassiumChannels in Pain-Sensing Dorsal Root Ganglion Neurons. Neurochemical Research,2009,34(12), pp 2233-2242,会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :锌转运蛋白 -8 基因 (SLC30A8) 影响胰岛 β 细胞功能研究批准号 :30800536项目负责人 : 徐敏所在单位 : 上海交通大学随访队列人群证实了 ZNT-8 基因对 2 型糖尿病的发生具有非常有意义的预测作用 , 并且与胰岛 beta 细胞功能进行性下降有关。中国人群发现的新的易感位点 SLC30A8 基因rs2466293 与 2 型糖尿病发病成显著相关 , 每增加一个危险等位基因 , 发生糖尿病的危险增加 21-35%, 且与 HOMA_beta 的下降呈显著正相关。选取 19 个新发现的 2 型糖尿病易感基因- 185 -

SNPs 位点进行检测。横断面结果显示 :CDKAL1 基因 rs7756992, SLC30A8 基因 rs2466293,CDKN2A/2B rs10811661 及 KCNQ1 基因 rs2237892 位点与 2 型糖尿病显著相关。GWAS 研究证实了 KCNQ1 等已知位点 , 并且首次报道了一个新的位点 MGLL, 初步研究发现该位点变异也与胰岛 beta 细胞功能下降有关。实验证实包括 ZnT-8 基因 rs13266634 位点的 CC、CT 和 TT三个基因型 , 其中有在中国汉族人群中基因型频率最低的 TT 基因型 (22%)。经基因测序确定 ZnT-8 基因的不同转录本 , 并且与转录因子的亲和力不同。这些研究将对糖尿病的预防、病理生理机制探讨及个体化治疗具有重要的意义。关键词 :SLC30A8;2 型糖尿病 ;beta 细胞功能 ; 全基因组关联研究学科代码 :H0713发表论著 :[1] Yu Xu, Zhiyun Zhao, Xiaoying Li, Yufang Bi, Min Xu, Guang Ning. Relationships betweenC-reactive protein, white blood cell count and insulin resistance in a Chinese population.Endocrine, 2010; 39(2):175-81[2] Min Xu, Yu-Fang Bi, Yu Xu, Bing Yu, Yun Huang, Li-Na Gu, Yao-Hua Wu, Xiao-Lin Zhu,Mian Li, Tian-Ge Wang, Ai-Yun Song, Jia-Ning Hou, Xiao-Ying Li, Guang Ning. CombinedEffects of 19 Common Variations on Type 2 diabetes in Chinese: Results from TwoCommunity-based Cohort Studies. PlosOne, 2010, e14022.[3] Huang Y, Xu M, Hong J, Gu W, Bi Y, Li X. Yu Xu, Zhiyun Zhao, Xiaoying Li, Yufang Bi, MinXu, Guang Ning. -607 C/A polymorphism in the promoter of IL-18 gene is associated with2 h post-loading plasma glucose level in Chinese. Endocrine. 2010; 37: 507-12.[4] Mian Li*, Min Xu*, Yufang Bi, Aiyun Song, Yu Liu, Xiaoying Li, Guang Ning. Associationbetween Higher Serum Fetuin-A Concentrations and Abnormal Albuminuria in Middle-agedand Elderly Chinese with Normal Glucose Tolerance. Diabetes Care, 2010, 33: 2462-2464.[5] 朱啸林宁光 .2 型糖尿病的全基因组关联研究 . 中华内分泌代谢杂志 2010 Vol.26No.12 P.1094-1096会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 4 分组 4培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1获奖 :Menin 对胰岛 β 细胞增殖调控的研究批准号 :30800537项目负责人 : 张宏利所在单位 : 上海交通大学Menin 是多发性内分泌肿瘤 1 型 (MEN1) 的致病基因 men1 基因所编码的蛋白 , 在 MEN1- 186 -

中 menin 的表达缺失会引起胰岛 β 细胞的肿瘤。已有研究发现 menin 可参与妊娠状态下 β 细胞的增殖调控 , 本研究发现 menin 可参与多种因素作用下的胰岛 β 细胞的增殖 , 我们重点对葡萄糖刺激的增殖进行研究发现 , 葡萄糖通过下调 menin 的表达促进胰岛 β 细胞增殖 ,具体是通过葡萄糖激活 PI3K/Akt 通路 , 下调 Foxo1 的表达实现的。而 PI3K/Akt 通路是多个胰岛 β 细胞增殖刺激因子的共同通路。本研究明确 menin 在胰岛 β 细胞增殖过程中核心的调控作用 , 并探讨其作用机制。对于深入了解 β 细胞的增殖机制以及 2 型糖尿病药物靶点的研究 , 具有一定的潜在意义。关键词 :menin; 胰岛 β 细胞 ; 增殖 ; 葡萄糖学科代码 :H0713发表论著 :[1] Hongli Zhang,Wenyi Li,Qidi Wang,Xiao Wang,Fengying Li,Cuiping Zhang,Ling Wu,Hongmei Long,Yun Liu,Xiaoying Li,Min Luo , Guo Li, Guang Ning. Glucose-mediatedrepression of Menin promotes pancreatic beta cell proliferation. Endocrinology. 2011 Dec 13.[2] hongli zhang, wenyi li, cuiping zhang, yaxin zhu, ling wu, hongmei long, guo li, min luo.Differences in Genes Expression for islet development between Wild Type and Men1Knockout Embryoid body. Molecular Medicine Reports.2011, 4: 301-305,[3] 张宏利、李文毅、李凤英、龙红梅、刘赟、吴铃、张翠平、李果、罗敏 . 短期持续高糖输注诱导胰岛 13l 细胞增殖的大鼠模型建立 . 放射免疫学杂志 ,2010, 23(3):318-321[4] 朱雅欣 , 张宏利 , 李文毅 , 吴铃 , 张翠平 , 龙红梅 , 王晓 , 李果 .Menin 对 SOX4 基因表达调控的初步研究 . 上海交通大学学报 ( 医学版 ), 2009,29(4), pp 396-398.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0获奖 :人参皂苷 Re 通过抑制炎症治疗 2 型糖尿病的机制研究批准号 :30800538项目负责人 : 张志国所在单位 : 上海交通大学人参提取物所含的人参皂苷 Re 能显著降低血糖 , 本课题对其改善 2 型糖尿病的作用进行了深入研究。在观察 Re 对高脂诱导的糖尿病大鼠的作用时发现 ,Re 干预可使高脂饮食组大鼠的胰岛素抵抗明显改善 , 并且 Re 可以明显抑制脂肪组织中与 2 型糖尿病密切相关的炎症因子 TNF 和 IL-6 的 mRNA 水平表达下降 , 并且能使 NF-Κ B 的抑制子 IΚ B 的含量增加和JNK 磷酸化程度降低 , 同时在细胞水平 , 在 3T3-L1 脂肪细胞中 TNFα 引起的 NF-κ B 通路中IKK 的磷酸化程度升高及 NF-κ B 抑制蛋白 Iκ Bα 的降解能被 Re 明显抑制 , 并使 JNK 的磷酸化程度降低。在巨噬细胞 RAW264.7 中进行的报告基因实验 , 发现 Re 能下调 NF-κ B 通路- 187 -

从而抑制炎症因子的转录 , 而这种抑制可能是通过促使糖皮质激素受体 GR 入核来实现。Re能明显下降高脂喂养大鼠的胰岛素抵抗和炎症状态 , 并且这种作用与抑制 NF-Κ B 和 JNK 的活性相关。这种抑制效果是部分通过促使糖皮质激素受体 GR 入核来实现的。本课题阐明了Re 是通过改善全身和局部的炎症状态从而发挥改善胰岛素抵抗的作用 , 这对于将 Re 及早应用于临床或将其作为先导化合物进一步开发利用 , 具有十分重要的意义。关键词 : 人参皂苷 Re; 胰岛素抵抗 ; 炎症 ; 信号转导学科代码 :H0713发表论著 :[1] Lina Jin, Guojun Shi, Guang Ning, Xiaoying Li, Zhiguo Zhang. Andrographolide attenuatestumor necrosis factor-alpha-induced insulin resistance in 3T3-L1 adipocytes. Mol CellEndocrinol. 2011 Jan 30;332(1-2):134-9.[2] 孟祥健金丽娜张志国宁光 . 氯化钴体外诱导低氧促进脂肪细胞炎症反应 . 中华内分泌代谢杂志 2011 年 9 月第 27 卷第 9 期 78-81[3] Jia HY, Zhang ZG, Gu XJ, Guo T, Cui B, Ning G, Zhao YJ.Association between interleukin21 and Graves' disease. Genet Mol Res. 2011 Oct 31;10(4):3338-46.[4] Shi G, Zhang Z, Zhang R, Zhang X, Lu Y, Yang J, Zhang D, Zhang Z, Li X, NingG.Protective effect of andrographolide against concanavalin A-induced liver injury. NaunynSchmiedebergs Arch Pharmacol. 2012 Jan;385(1):69-79.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :SREBP-1c 在 2 型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗及脂毒性中的作用及机制研究批准号 :30800539项目负责人 : 毕艳所在单位 : 中山大学胆固醇调节元件结合蛋白 -1 c(SREBP-1c) 作为控制细胞内脂肪酸合成的转录因子 ,是调控细胞内脂质含量而参与胰岛素抵抗发生的主要机制之一 , 但其是否直接影响骨骼肌胰岛素信号通路并不明确。为此 , 我们建立了高脂诱导胰岛素抵抗 L6 肌细胞模型 , 并通过转染技术在细胞水平上确定 SREBP-1c 调控肌细胞胰岛素信号通路的目标分子及作用。结果发现 , 高脂促进 L6 肌细胞 SREBP-1c 表达并转位入核 , 胰岛素受体底物 -1(IRS-1) 基因和蛋白表达下调 , 丝氨酸磷酸化 p-IRS-1 (Ser636/639) 蛋白表达上调 , 胰岛素刺激的 p-Akt(Ser473) 磷酸化能力下降。过表达 SREBP-1c 腺病毒转染 L6 肌细胞抑制了 IRS-1 基因和蛋白表达以及 p-Akt 蛋白磷酸化 , 胰岛素信号通路受损。染色质免疫共沉淀 (CHIP) 研究进一步发现 SREBP-1c 可与 IRS-1 启动子包含 SRE 序列区结合。本研究在国际上首次发现SREBP-1c 具有直接调控骨骼肌细胞胰岛素信号的作用 , 拓展和更新了 SREBP-1c 参与胰岛素抵抗发生、调控糖脂代谢的双向性作用机制 , 也为研发改善胰岛素抵抗的特异性治疗靶点- 188 -

奠定了良好基础。关键词 : 骨骼肌 ;IRS-1; SREBP-1c; 胰岛素抵抗 ;学科代码 :H0712发表论著 :[1] Bi Y, Zeng L, Zhu D, Yan J, Zhang Y, Tong G, Mu P, Shen S, Hu Y, Yu Q, Liang H, WengJ..Association of β-cell function and insulin sensitivity with fasting and 2h plasma glucose ina large Chinese population. Diabetes Obes Metab. 2012 Feb;14(2):174-80.[2] Sun W, Bi Y, Liang H, Cai M, Chen X, Zhu Y, Li M, Xu F, Yu Q, He X, Ye J, WengJ.Inhibition of obesity-induced hepatic ER stress by early insulin therapy in obese diabeticrats. Endocrine. 2011 Jun;39(3):235-41.[3] Bi Y, Zhu D, Jing Y, Hu Y, Feng W, Shen S, Tong G, Shen X, Yu T, Song D, YangD.Decreased beta cell function and insulin sensitivity contributed to increasing fastingglucose in Chinese. Acta Diabetol. 2010 May 15. [Epub ahead of print][4] Bi Y, Zhu D, Cheng J, Zhu Y, Xu N, Cui S, Li W, Cheng X, Wang F, Hu Y, Shen S, WengJ.The status of glycemic control: a cross-sectional survey in outpatients with type 2 diabetesmellitus across tertiary, secondary and primary hospitals in Jiangsu Province of China. ClinTher, 2010, 32(5): 973-983.[5] Bi Y, Cai M, Liang H, Sun W, Li X, Wang C, Zhu Y, Chen X, Li M, Weng J.Increased CPT-1expression and decreased SREBP-1c expression is associated with reduced intramusculartriglyceride accumulation after insulin therapy in high fat diet and streptozotocin induceddiabetic rats. Metabolism, 2009, 58(6):779-786.[6] 毕艳 ( 第一作者 ). 胆固醇调节元件结合蛋白 -1c 与胰岛素抵抗 — 早期胰岛素治疗改善胰岛素抵抗的可能分子机制 . 中华内科杂志 ,2011,50(11):982-983[7] 毕艳 ( 第一作者 ). 早期胰岛素治疗对糖尿病大鼠骨骼肌胆固醇调节元件结合蛋白 -1c表达的影响 . 中华糖尿病杂志 ,2010,2(1):43-46会议报告 : 国际大会 4 分组 4 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3中国人 2 型糖尿病全基因组关联研究中发现易感位点的大样本关联研究批准号 :30800617项目负责人 : 胡承所在单位 : 上海交通大学根据前期全基因组 SNP 芯片检测 , 并与香港中文大学合作分析 , 共入选上海地区 8000例病例对照研究样本及 248 个 2 型糖尿病患病家系 , 香港地区 7800 例病例对照研究样本及178 个 2 型糖尿病患病家系 , 进一步验证了 2 个潜在位点与 2 型糖尿病的关系 , 发现 rs10**3与 2 型糖尿病相关性 P 值为 2.6×10-8, 随后 , 又与日本、韩国、新加坡、英国的合作者联系 , 入选不同人种样本累积 88,166 例 , 最终确认 rs10**3 与 2 型糖尿病相关 [P=1.9×10-10]。此外 , 还参与了东亚人群全基因组关联研究的荟萃分析 , 新发现了 8 个东亚人群的 2 型糖尿病易感位点 , 分别是 GLIS3、PEPD 等。另外 , 完成了国外报道的 2 型糖尿病易感- 189 -

位点及影响血糖及胰岛素水平的位点在中国人中的验证工作 , 研究发现 KCNQ1 等基因的 SNP与 2 型糖尿病相关 ;GCK、G6PC2 等基因与空腹血糖水平相关。还开展了糖尿病微血管并发症的遗传学研究 , 发现 CPVL/CHN2 基因 SNP 与糖尿病视网膜病变的相关性。在药物基因组学方面 , 发现 KCNQ1 基因影响瑞格列奈的药物降糖疗效。本项目累计发表 SCI 论文 11 篇。关键词 :2 型糖尿病 ; 遗传 ; 基因组 ; 关联研究学科代码 :H0711发表论著 :[1] Cho YS, Chen CH, Hu C,Long J, et al. Meta-analysis of genome-wide association studiesidentifies 8 new loci for type 2 diabetes in East Asians. Nature Genetics.2011Jun;43(6):531-8. Epub 2011 May 15.[2] Hu C, Zhang R, Yu W, Wang J, Wang C, Pang C, Ma X, Bao Y, Xiang K, Jia W.CPVL/CHN2 genetic variant is associated with diabetic retinopathy in Chinese type 2diabetes patients. Diabetes, 60(11), pp 3085-3089,[3] Yu, W., Hu, C., Zhang, R., Wang, C., Qin, W., Lu, J., Jiang, F., Tang, S., Bao, Y., Xiang, K.,Jia, W. Effects of KCNQ1 Polymorphisms on the Therapeutic Efficacy of Oral AntidiabeticDrugs in Chinese Patients With Type 2 Diabetes. Clinical Pharmacology & Therapeutics,89(3),pp 437-442,[4] Hu, C., Wang, C., Zhang, R., Ng, M. C., Bao, Y., Wang, C., So, W. Y., Ma, R. C., Ma,X.,Chan, J. C., Xiang, K., Jia, W.Association of genetic variants of NOS1AP with type 2diabetes in a Chinese population. Diabetologia, 53(2), pp 290-298,[5] Hu, C., Zhang, R., Wang, C., Ma, X., Wang, C., Fang, Q., Bao, Y., Xiang, K., Jia, W. Agenetic variant of G6PC2 is associated with type 2 diabetes and fasting plasma glucose levelin the Chinese population. Diabetologia, 52(3), pp 451-456[6] Hu, C., Wang, C., Zhang, R., Ma, X., Wang, J., Lu, J., Qin, W., Bao, Y., Xiang, K., Jia, W.Variations in KCNQ1 are associated with type 2 diabetes and beta cell function in a Chinesepopulation. Diabetologia, 52(7), pp 1322-1325.[7] Cheng Hu, Rong Zhang,Congrong Wang, Jie Wang,Xiaojing Ma, Jingyi Lu, Wen, Qin, uhongHou, Chen Wang, Yuqian Bao, Kunsan Xiang, *Weiping JiaPPARG, KCNJ11, CDKAL1,CDKN2A-CDKN2B, IDE-KIF11-HHEX, IGF2BP2 and SLC30A8 Are Associated withType 2 Diabetes in a Chinese Population. PLoS One, 4(10), p e7643,[8] Hu, Cheng, Zhang, Rong, Wang, Congrong, Yu, Weihui, Lu, Jingyi, Ma, Xiaojing, Wang, Jie,Jiang, Feng, Tang, Shanshan, Bao, Yuqian, Xiang, Kunsan, Jia, WeipingEffects of GCK,GCKR, G6PC2 and MTNR1B Variants on Glucose Metabolism and Insulin Secretion. PLoSOne, 5(7), p e11761,[9] Hu, Cheng, Zhang, Rong, Wang, Congrong, Wang, Jie, Ma, Xiaojing, Hou, Xuhong, Lu,Jingyi, Yu, Weihui, Jiang, Feng, Bao, Yuqian, Xiang, Kunsan, Jia, Weiping .Variants fromGIPR, TCF7L2, DGKB, MADD, CRY2, GLIS3, PROX1, SLC30A8 and IGF1 AreAssociated with Glucose Metabolism in the Chinese. PLoS One, 5(11), p e15542,[10] Lu, J., Hu, C., Hu, W., Zhang, R., Wang, C., Qin, W., Yu, W., Xiang, K., Jia, W.A commonvariant of NOS1AP is associated with QT interval duration in a Chinese population withType 2 Diabetes. Diabetic Medicine, 27(9), pp 1074-1079,[11] Zhang Rong, Hu Cheng, Wang Cong-rong, Ma Xiao-jing, Bao Yu-qian, Xu Jing, Lu Jing-yi,- 190 -

Qin Wen, Xiang Kun-san, Jia Wei-pingAssociation of apelin genetic variants with type 2diabetes and related clinical features in Chinese Hans. Chinese Medical Journal, 122(11), pp1273-1276会议报告 : 国际大会 3 分组 0 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :糖尿病对七氟醚心肌保护作用的影响及其分子机制的研究批准号 :30801078项目负责人 : 江晓菁所在单位 : 中国医科大学利用结扎大鼠前降支建立大鼠心肌缺血和再灌注模型。再灌注开始前吸入七氟醚进行后处理。链脲霉素诱导建立糖尿病大鼠模型。检测大鼠心肌梗死面积评价心肌保护效果。Western blot 检测心肌组织中相关蛋白的表达及磷酸化水平。结果显示七氟醚后处理可以显著减少大鼠心肌缺血再灌注后的梗死范围。JAK2 抑制剂 AG490 可以取消七氟醚后处理的心肌保护作用。七氟醚后处理可以显著提高心肌组织中 JAK2、STAT3 的磷酸化水平。糖尿病本身不增加缺血再灌注后的心肌梗死范围 , 但是完全取消了七氟醚后处理的心肌保护作用。给予 GSK-3β 抑制剂 SB216763 对糖尿病和非糖尿病大鼠均有心肌保护作用。对于非糖尿病大鼠 , 七氟醚后处理可以提高心肌组织中 GSK-3β Ser9, Akt Ser473 和 ERK1/2 的磷酸化水平 , 而这一作用在糖尿病大鼠中完全消失。我们的研究表明七氟醚后处理可以产生显著的心肌保护作用 , 这一作用与 JAK2-STAT3 通路激活和 GSK-3β 抑制密切相关。糖尿病可以取消七氟醚后处理的心肌保护作用 , 这与 GSK-3β 及其上游信号分子 PI3K/Akt 和ERK1/2 磷酸化受损密切相关。关键词 : 七氟醚 ; 后处理 ; 缺血再灌注 ; 糖尿病学科代码 :H0713发表论著 :[1] Tai W, Shi E, Yan L, Jiang X, Ma H, Ai C. Diabetes Abolishes the Cardioprotection Inducedby Sevoflurane postconditioning in the Rat Heart in vivo: roles of Glycogen SynthaseKinase-3β and its Upstream Pathways. J Surg Res. 2012 Mar 30. [Epub ahead of print][2] 颜丽晖 , 江晓菁 . JAK2-STAT3 通路对七氟醚后处理在体大鼠缺血 / 再灌注心肌的影响 .中国药理学通报 .2011;27:1368-73.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2获奖 :- 191 -

胰岛素协同生长激素调节泛素 - 蛋白酶体途径介导的脓毒症高批准号 :30801086项目负责人 : 虞文魁所在单位 : 南京大学分解代谢及机理研究脓毒症状态下的高分解代谢是目前临床营养支持所面临的难题。生长激素 (GH) 虽对轻、中度应激病人具有良好的代谢调理作用 , 但脓毒症时炎症介质大量释放、泛素系统过度活化 , 导致机体存在明显的获得性生长激素抵抗 (AGHR), 从而使 GH 的促进合成效应受到抑制、不良效应增加。申请者前期研究表明 , 胰岛素能抑制炎症介质释放和泛素系统活性 , 减少脓毒症时骨骼肌降解。申请人推测胰岛素能通过抑制泛素系统活性 , 改善 AGHR,从而协同 GH 改善脓毒症机体的高分解代谢。该研究采用动物实验和体外研究相结合的方式 , 应用代谢组学和传统检测手段相结合的方法 , 在国内外首次探讨脓毒症时胰岛素能否协同 GH 改善高分解代谢 , 及胰岛素发挥协同作用的给药时机和具体剂量 ; 并探讨其机理 :胰岛素 → 泛素系统 →AGHR→ 发挥协同作用 ? 最后了解胰岛素发挥 GH 协同等作用的可能信号通路。以期为临床脓毒症等严重应激状态下的代谢调理治疗提供新的治疗思路和研究方法关键词 : 胰岛素 ; 生长激素 ; 脓毒症 ; 泛素 - 蛋白酶体途径 ; 代谢组学学科代码 :H0730发表论著 :[1] Zou B, Chen Q, Tang S, Gao T, Zhang J, Xi F, Yu W.Time of Insulin TherapyAffect the Inflammation Response in Endotoxemic rats.Inflammation.2012Apr;35(2):723-9.[2] Chen, Qiyi Li, Ning Zhu, Weiming Li, Weiqin Tang, skeletal muscle protein by inhibiting theubiquitin-proteasome system in septic rats. Journal of Inflammation-London,2011, 8, pp1-13[3] 陈启仪 , 虞文魁 , 龚剑锋 , 朱维铭 , 李维勤 , 李宁 . 黎介寿不同剂量胰岛素联合生长激素对内毒素刺激后单核细胞分泌细胞因子的影响 . 肠外与肠内营养 , 2010.05 期 , pp291-294[4] 张娟娟 , 虞文魁 , 姜军 , 朱维铭 , 龚剑峰 , 高涛 , 石慧 , 习丰产 , 李宁 . 限制性液体治疗对重度功能性便秘术后康复的影响 . 医学研究生学报 ,2011.02, pp 158-162,[5] 唐少秋 , 虞文魁 , 陈启仪 , 邹波 , 童智慧 , 李维勤 . 胰岛素不同时机给药对脓毒症大鼠炎性反应的影响 . 肠外与肠内营养 ,2010.06 期 , pp 363-366[6] 陈启仪 , 虞文魁 , 李宁 . 胰岛素通过泛素系统对脓毒症病人骨骼肌代谢的调理作用 . 肠外与肠内营养 , 2010.01, pp 51-54会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 7 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 5- 192 -

获奖 :新型微粒生物人工胰反应器构建的研究批准号 :30801107项目负责人 : 韩宝三所在单位 : 上海交通大学针对目前困扰生物人工胰研究进展中微囊制备的缺陷 , 用超分子化学自组装和自沉积原理的可控性优势 , 依仿生学原理用生物活性大分子材料模拟细胞膜层状结构 , 构建具有足够物理强度和良好生物相容性的半透膜性质的新型超分子层层自组装微囊 (SPLS-MC),并包被胰岛细胞而构建微粒生物人工胰反应器 -MR-BAP。用 LSCM、AFM、SEM、FCM、IHC、原位杂交、RT-PCR、WesternBlot、Elisa、全自动生化分析仪等仪器、方法对 MR-BAP 的理化特性、物理强度、生物相容性和对抗体、淋巴细胞及细胞因子介导的体液、细胞免疫反应的隔离效应以及 MR-BAP 中胰岛的胰岛素分泌代谢活性和调节血糖的体内外生物活性进行系统表征 , 以期建立一种新型 MR-BAP, 为更好的解决目前困扰胰岛移植研究深入的免疫排斥的难题提供新的有益尝试。SPLS-MC 对于其它组织细胞移植治疗神经 / 内分泌及代谢疾病也会有重要的借鉴价值。关键词 : 生物人工胰 ; 超分子化学 ; 自组装 ; 微囊 ; 胰岛移植学科代码 :H0704发表论著 :[1] 叶萍 , 常兆华 , 刘宝林 , 赵庆孝 , 彭承宏 , 沈柏用 , 韩宝三 ; 微囊化细胞的低温保存 .中国组织工程研究与临床康复 , 2011,15(8):1449-1453。[2] 杨晓昀 , 陈儿同 , 周燕 , 刘宝林 , 张华 , 徐文强 , 李巧巧 , 叶萍 , 彭承宏 , 韩宝三 ;微囊化技术在医学领域中的应用与进展 . 中国组织工程研究与临床康复 ,2010,14(29):5483-5488。[3] 周燕 , 刘宝林 , 杨波 , 王欣 , 彭承宏 , 韩宝三 ; 微载体培养技术的研究与进展 , 中国组织工程研究与临床康复 , 2010,14(16):2945-2948[4] 王加祥 , 韩宝三 , 吴旭波 , 余松林 , 黄芳 , 匡杰 , 彭承宏 . 肝细胞微囊化技术理论进展与临床应用 , 中国组织工程研究与临床康复 , 2010,14(3):549-551[5] Han Baosan, Shen Baiyong, Zhang Rui, Wang Zhaohai, Chen Quanning, Chen Dongfeng,Shi Minmin, Li Hongwei, Peng Chenghong; Microcarrier cytodex3 culture technique foramplification of a large amount of adult bone marrow mesenchymal stem cells , 中国组织工程研究与临床康复 , 2009,13(10):1996-2000[6] Ye Ping, Chen Ertong, Xu Bingkai, Peng Chenghong, Shen Baiyong, Li Hongwei, HanBaosan A microscopic study of the alginate/chitosan/alginate microcapsules cryopreservation,中国组织工程研究与临床康复 , 2009,13(8):1577-1581[7] 陈儿同 , 杨晓昀 , 叶萍 , 彭承宏 , 韩宝三 ; 微囊胰岛移植的实验研究进展 , 中国组织工程研究与临床康复 , 2009,13(3):561-565[8] 叶萍 , 陈儿同 , 徐彬凯 , 彭承宏 , 沈柏用 , 李宏为 , 杜志勇 , 张瑞 , 王兆海 , 韩宝三 ; 海藻- 193 -

酸钠 / 壳聚糖微囊冻存的低温显微实验 , 中国医药生物技术 , 2008, 3(6): 409-414[9] 彭采宇 , 仝维鏊 , 韩宝三 , 王兆海 , 高长有 , 沈家骢 ;. 不同表面性质聚电解质多层膜的制备及蛋白质吸附和血液相容性能 , 高等学校化学学报 , 2009,30(11):2311-2318;[10] Yu Songlin, Han Baosan, Peng Chenghong. A Preliminary Study of Alginate,Heparin–Chitosan- Alginate, Heparin Microencapsulated Hepatocytes System. ManuscriptNo: 11638 has been accepted for publication in Hepato-Gastroenterolog( 已接受 )会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 6上皮钙离子通道 TRPV6 参与调节成骨细胞骨形成作用的研究批准号 :30801172项目负责人 : 叶添文所在单位 : 中国人民解放军第二军医大学背景 : 骨质疏松与钙离子代谢失衡关系密切。TRPV6 参与调节钙离子代谢 , 但其在成骨细胞骨形成中的作用不明确。方向 : 应用 western blot 法、RT-PCR、细胞染色等技术 ,研究 TRPV6 与成骨细胞增殖分化能力的关系及参与调节成骨细胞骨形成的作用。内容 :TRPV6 在成骨细胞表达及分布特点 ;TRPV6 缺陷成骨细胞的增殖、分化和凋亡情况 ;TRPV6基因敲除鼠骨形成代谢和成骨能力。结果 :siRNA 转染后成骨细胞的增殖能力显著降低。G1 期细胞比例明显增多 , 而 S 期和 G2/M 期细胞比例显著降低。siRNA 转染后成骨细胞 ALP的分泌减少 , 细胞凋亡率增高。Western blot 检测促凋亡蛋白 Apaf-1、Bax 蛋白表达增强 , 增殖蛋白 PCNA 表达明显下调。2 个月龄 TRPV6 敲除小鼠血清骨源性碱性磷酸酶、I 型胶原 C- 前肽、骨钙蛋白 , 明显高于野生型小鼠。1 个月野生型小鼠骨折端骨痂多于 TRPV6 剔除小鼠。结论 :TRPV6 的表达程度与成骨细胞增殖分化能力呈正相关 , 与凋亡能力呈负相关 ,TRPV6 参与调节成骨细胞骨形成作用。意义 : 丰富骨质疏松的发病机制理论 , 为骨质疏松的防治提供新的途径和方法胞骨形成作用。关键词 :TRP 离子通道 ; 成骨细胞 ; 骨形成学科代码 :H0726发表论著 :[1] 郭清河 , 叶添文 ( 通讯作者 )TRPV5/TRPV6 调节骨代谢作用的研究进展 . 中国矫形外科杂志 ,2011.12;19(23);P1976-1978.[2] 叶添文 , 匡颖 , 安静等。瞬时性受体电位通道香草酸受体亚型 6 基因剔除小鼠模型的建立 [J]。第二军医大学学报 ,2012.33(1): 10-15[3] Tianwen Ye, Aimin Chen, Wen Yuan et al. Management of Grade III Open Dislocated AnkleFractures: Combined Internal Fixation with Bioabsorbable Screws/Rods and External Fixation[J]. Journal of the American Podiatric Medical Association, 2011.8;101(4); P307-315.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0- 194 -

TAZ 基因在 hMSCs 细胞转分化和治疗动物骨质疏松症中的作用批准号 :30801173项目负责人 : 尹战海所在单位 : 西安交通大学骨质疏松症威胁着老年人特别是绝经后妇女的健康。目前对骨质疏松症的研究与治疗多着眼于破骨与成骨作用的失衡。但近来的研究表明 , 骨质疏松症患者骨髓中成骨减退、成脂增加是骨髓间充质干细胞 (MSCs) 向成骨细胞和脂细胞分化失衡的结果。转录调节因子TAZ 是 MSCs 成脂和成骨分化的 “ 调节器 ”,TAZ 可以在结合 PPARγ 抑制细胞成骨分化的同时结合 Runx2 促进成骨分化。申请者在体外构建了 MSCs 成脂后成骨转分化体系 , 观察到hTAZ 在成脂后成骨分化的早期 1-7 天内表达增高。进一步实验证实 hTAZ 过表达可以促进成脂分化后的 MSCs 成骨分化 ,hTAZ 基因抑制可抑制成脂分化后的 MSCs 成骨分化。动物实验证实大鼠鼠尾悬吊和卵巢切除去势 (OVX) 可造成大鼠股骨近端骨密度下降 (DEXA 和组织形态计量 ), 出现明显的骨质疏松 ; 同时免疫组织化学和 Western blot 检测证实骨质疏松的大鼠股骨近端 TAZ 表达下降 , 进一步证实了 TAZ 基因在骨质疏松症中的作用。进一步的 TAZ慢病毒激活 Atelocollagen 载体股骨近端注射治疗实验正在进行 TAZ 基因局部应用防止骨质疏松骨折的探索。关键词 : 骨质疏松 ;TAZ; 基因治疗 ; 大鼠 ;OVX学科代码 :H0726发表论著 :[1] 张璐 , 尹战海 , 史学涛 .pLenti6/V5-DEST-TAZ 载体的构建及其对成骨前体细胞MC3T3-E1 分化的影响 . 吉林大学学报 ( 医学版 ), 03 期 , pp 429-433,[2] Yang, Bo, Yin, Zhanhai, Cao, Junling, Shi, Zhongli, Zhang, Zengtie, Song, Hongxing, Liu,Fuqiang, Caterson, Bruce In vitro cartilage tissue engineering using cancellous bone matrixgelatin as a biodegradable scaffold. Biomed Mater. 2010 Aug;5(4):045003. Epub2010 Jun 11.[3] 张小卫 , * 尹战海 , 李新友 , 张银刚 . 单枚融合器加椎弓根螺钉治疗腰椎间盘退变性疾病中华临床医师杂志 ( 电子版 ), 11 期 , pp155-156[4] 张小卫 , * 尹战海 , 张银刚 , 王金堂 . 后路半椎体切除短节段固定矫正先天性脊柱侧凸畸形 24 例 . 陕西医学杂志 , 39(11), pp 1467-1468[5] 张小卫 , * 尹战海 , 刘凯 , 王金堂 .MRA-MRI 在椎动脉型颈椎病诊断与治疗中的指导作用中国脊柱脊髓杂志 , 01 期 , pp 11-15[6] 张小卫 , 李新友 , * 尹战海 , 任志伟 , 王金堂 . 颈前路后纵韧带显微切除减压治疗严重脊髓型颈椎病中华显微外科杂志 , 33(5), pp 421-423会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3获奖 :- 195 -

miRNA 调控血管平滑肌细胞向成骨细胞分化的研究批准号 :30801174项目负责人 : 袁凌青所在单位 : 中南大学本研究探讨 miR-204 调控血管平滑肌细胞 (VSMCs) 向成骨细胞分化以及对动脉钙化的影响。我们采用 Real-time PCR 证实 miR-204 在 VSMCs 向成骨细胞分化过程中表达逐渐降低。进一步通过 loss-of-function 和 gain-of-function 方法观察到其对 ALP、OC 和 Runx2表达的影响 , 我们发现采用 miR-204 mimics 过表达 miR-204 可降低 Runx2 蛋白表达 , 抑制VSMCs 向成骨细胞分化 ; 而采用 miR-204 inhibitor 则促进 Runx2 蛋白表达 , 促进 VSMCs 向成骨细胞分化。通过荧光素酶报告基因系统证实 Runx2 是 miR-204 的靶基因。然后通过维生素 D 诱导动脉钙化模型小鼠 , 同时采用 miR-204 agomir 进行尾静脉注射 , 证实 miR-204 可抑制动脉钙化的形成。本研究分别在体内和体外研究中证实 miR-204 可抑制动脉钙化的发生发展 , 为动脉钙化的发病机制及防治提供了新的靶点和理论依据。关键词 :miR-204, 动脉钙化 , 血管平滑肌细胞 , 成骨细胞学科代码 :H0730发表论著 :[1] Yuan LQ, Zhu JH, Wang HW, Liang QH, Xie H, Wu XP, Zhou H, Cui RR, Sheng ZF, ZhouHD, Zhu X, Liu GY, Liu YS, Liao EY. RANKL Is a Downstream Mediator forInsulin-Induced Osteoblastic Differentiation of Vascular Smooth Muscle Cells .PLoS ONE,6(12), p e29037,[2] Cui, Rong-Rong, Mao, Ding-An, Yi, Lu, Wang, Cheng, Zhang, Xing-Xing, Xie, Hui, Wu,Xian-Ping, Liao, Xiao-Bo, Zhou, Hua, Meng, Ji-Cai, *Yuan, Ling-Qing, *Liao, Er-Yuan.Apelin suppresses apoptosis of human vascular smooth muscle cells via APJ/PI3-K/Aktsignaling pathways. Amino Acids, 39(5), pp 1193-1200,[3] Yuan, Ling-Qing, Liu, Wei, Cui, Rong-Rong, Wang, Dan, Meng, Ji-Cai, Xie, Hui, Wu,Xian-Ping, Zhou, Hou-De, Lu, Ying, Liao, Er-Yuan. Taurine inhibits osteoclastogenesisthrough the taurine transporter .Amino Acids, 39(1), pp 89-99,[4] Liu, You-Shuo, Lu, Ying, Liu, Wei, Xie, Hui, Luo, Xiang-Hang, Wu, Xian-Ping, *Yuan,Ling-Qing, *Liao, Er-Yuan. Connective tissue growth factor is a downstream mediator forpreptin-induced proliferation and differentiation in human osteoblasts. Amino Acids, 38(3),pp 763-769.[5] Xie, Hui, Yang, Bing, Zhou, Xin-min, Song, Feng-lin, Li, Jian-ming, Zhou, Kang, Hu, Wen,Peng, Yi-qun, Tang, Si-yuan, Yuan, Ling-qing, Xiong, Si-yuan, Liao, Xiao-bo. L-carnitineand taurine synergistically inhibit the proliferation and osteoblastic differentiation of vascularsmooth muscle cells .Acta Pharmacologica Sinica, 31(3), pp 289-296,[6] Liao, Xiao-Bo, Peng, Yi-Qun, Zhou, Xin-Min, Yang, Bing, Zheng, Zhe, Liu, Li-Ming, Song,Feng-Lin, Li, Jian-Ming, Zhou, Kang, Meng, Ji-Cai, Yuan, Ling-Qing, Xie, Hui. Taurinerestores Axl/Gas6 expression in vascular smooth muscle cell calcification model. Amino- 196 -

Acids, 39(2), pp 375-383.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 3获奖 :钾依赖钠钙交换蛋白 6 在衰老所致 β 细胞功能下降中的作用及其机制研究批准号 :30801201项目负责人 : 刘瑜所在单位 : 中国人民解放军总医院我们在本课题资助下发现衰老过程中 β 细胞胰岛素分泌功能逐渐下降 ,β 细胞增殖下降 ,β 细胞凋亡增加 ,β 细胞量减少。同时发现衰老过程中胰岛细胞自噬相关蛋白如Atg8/LC3、Atg5、Atg7 等表达逐渐下降 , 受自噬途径降解的有害大分子物质 p62 和polyubiquitin 在 β 细胞中积聚增加 , 线粒体氧化应激标志物 8-OHdG 表达下降 , 线粒体肿胀和线粒体嵴断裂明显 , 提示衰老过程中胰岛 β 细胞自噬功能下降引起 β 细胞中大分子聚集、线粒体氧化应激损伤加重 , 从而导致 β 细胞功能下降。新基因钾依赖钠钙交换蛋白 6(NCKX6) 在老年大鼠胰岛中表达下降 , 它在 β 细胞中过表达可以促进增殖 , 抑制表达可以抑制 β 细胞增殖 , 因此它可以调控胰岛 β 细胞增殖。同时研究发现 NCKX6 过表达可以促进胰岛 β 细胞自噬 , 逆转高糖培养对 β 细胞自噬功能的抑制作用。NCKX6 过表达后可以进一步增加高糖诱导的 INS-1 细胞内 Ca2+ 浓度 , 因此它作为钠钙交换蛋白可能通过调控 β 细胞内钙离子浓度而发挥对 β 细胞功能、增殖和自噬的影响 , 在延缓衰老所致胰岛 β 细胞功能下降中可能发挥重要作用。本研究为我们寻找早期防治糖尿病的有效方法和药物奠定了良好的基础。关键词 : 钾依赖钠钙交换蛋白 6; 胰岛 β 细胞 ; 衰老 ; 钙离子学科代码 :H0712发表论著 :[1] Gu Z, Du Y, Liu Y, Ma L, Li L, Gong Y, Tian H, Li C. Effect of aging on islet beta-cellfunction and its mechanisms in Wistar rats. Age, 2011 Sep[2] 刘瑜李春霖 .BTBD10 基因的原核表达和多克隆抗体制备 . 军医进修学院学报 2011;32(12):1263-1265[3] 刘瑜李春霖 .BTBD10 蛋白在大鼠胰岛和 INS-1 细胞株的表达 . 军医进修学院学报 2011;32(10):1046-1048[4] 刘瑜李春霖 .BTBD10 对胰岛 β 细胞增殖的影响和作用机制研究 . 中华内科杂志 2012;51(2):1-3[5] 刘瑜李春霖 . BTBD10 基因的真核表达载体构建和亚细胞定位 . 中国分子心脏病学杂志2009;9(1):16-18[6] 刘瑜王宣春 . 钾依赖钠钙交换蛋白 6 对人胚胎肾细胞钙离子浓度的影响 . 中国分子心- 197 -

脏病学杂志 209;9(2):94-96微生态调节剂防治饮食诱导代谢综合征的肠内作用机制研究批准号 :30801205项目负责人 : 陈津津所在单位 : 上海交通大学目的 : 探讨双歧杆菌防治饮食诱导代谢综合征的肠内作用机制。方法 : 建立造模组、干预组、对照组 , 检测各组代谢综合征相关生理、生化指标 , 对肝、肠、脂肪等内脏组织称重并进行病理检测 , 对代谢性内毒素水平、肠组织内的炎症细胞因子进行测定 , 检测肠粘膜 Reg 基因的表达及转录水平及其对 TLRs/NF-κ B 信号通路的影响。结果 : 双歧杆菌干预后明显改善了高脂饮食诱导的代谢综合征相关生理、生化参数水平 , 改善了代谢综合征相关的内脏脂肪堆积 , 降低高脂饮食诱导的代谢性内毒素水平及肠粘膜炎症因子的高分泌 ,上调了肠粘膜 Reg I 基因的表达 ; 同时发现干预后肠道粘膜 TLR2 和 TLR9 高表达并激活 NFκB 释放。结论 : 微生态调节剂通过调节肠道免疫、改善炎症水平防治饮食诱导的代谢综合征。关键词 : 代谢综合征 ; 双歧杆菌 ; 肠屏障功能 ; 再生基因 ;Toll 样受体学科代码 :H0717发表论著 :[1] Chen J, Wang R, Li XF, Wang RL.Bifidobacterium adolescentis supplementation amelioratesvisceral fat accumulation and insulin sensitivity in an experimental model of metabolicsyndrome. Br J Nutr. 2012 May;107(10):1429-34. Epub 2011 Sep 14.[2] Chen JJ, Wang R, Li XF, Wang RL.Bifidobacterium longum supplementation improvedhigh-fat-fed-induced metabolic syndrome and promoted intestinal Reg 1 gene expression.Experimental Biology and Medicine, 236(7), pp 823-831,[3] Wang R, Chen J.Early colonization of intestinal bifidobacteria and lactobacilli in thepostoperative neonates with congenital intestinal atresia. Saudi Medical Journal, 32(3), pp265-270,[4] 高脂饮食诱导胰岛素抵抗模型建立及其内脏损伤的研究 . 陈津津中华临床医师杂志( 电子版 ), 5(6), pp1630-1633,[5] 高脂饮食诱导代谢综和征模型建立陈津津中国临床保健杂志 , 14(2), pp 160-162,会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2获奖 :新基因 CL91 在肝糖异生中的抑制作用和机制研究- 198 -

批准号 :30801208项目负责人 : 孙亮所在单位 : 卫生部北京医院胰岛素抵抗状态下肝糖异生异常是导致 T2DM 空腹高血糖的主要原因 , 其受胰岛素信号和胰高血糖素信号通路调节 , 本项目组前期工作中通过 PGC1 转录活性的高通量细胞功能筛选发现新基因 CL91 具有抑制效应 ,CL91 基因除大规模测序发现其具有基因结构之外 , 暂无任何基因功能线索的报道。本课题以 HepG2 肝癌细胞系为主 , 佐以小鼠原代肝细胞和动物实验 , 通过腺病毒介导新基因 CL91 过表达和 knockdown , 发现 CL91 能通过下调PGC1 的表达水平从而调控糖异生和脂代谢基因的表达 ,FOXO1 的磷酸化和转位到细胞核外是可能的机制。同时 , 研究发现 CL91 与线粒体共定位 , 可能参与呼吸链氧化磷酸化作用和线粒体介导的凋亡途经 , 与胰岛素促凋亡的过程有协同作用。最后针对于 CL91 下调 PGC1转录活性的机制我们做了深入研究 , 通过截断体、凝胶阻滞实验和报告记忆实验 , 我们明确 CRE 元件和 CREB 转录因子都参与其对 PGC1 启动子转录活性的负调控过程。该课题为后续深入挖掘 CL91 基因的功能并且明确其在糖脂代谢中可能的参与作用和机制提供了理论依据。关键词 :CL91; PGC1;FOXO1; 肝糖异生学科代码 :H0712发表论著 :[1] Shi XH, Sun L, Wang L, Jin F, SunJF, Zhu XQ, Tang L, Qu Y and Yang Z. Haptoglobin 2-2genotype is associated with increased risk of T2DM in northern Chinese. Genet Test MolBioma 2012, (Accepted, in press)[2] Xiuqing Huang, Jing Zhang, Jin Liu, Liang Sun, Hongye Zhao, Yonggang Lu, JianchangWang, and Jian Li C-Reactive Protein Promotes Adhesion of Monocytes to Endothelial CellsVia NADPH Oxidase-Mediated Oxidative Stress,Journal of Cellular Biochemistry accepted,DOI 10.1002/jcb.23415 JCB.[3] Sun liang, Wang Xiaoxia, Yang ze. The application of a high resolution melting-based methodin studing the association between FTO rs9930506 polymorphism and metabolic syndrome inBeijing population, Chin J Intern Med. 51(1)Jan 2012会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :牛磺熊脱氧胆酸调节内质网应激治疗糖尿病肾病蛋白尿的基础研究 :批准号 :30801214不依赖于线粒体氧化应激的新途径- 199 -

项目负责人 : 陈瑜所在单位 : 南京医科大学探讨糖尿病肾病的发病机制、延缓糖尿病肾病的进展是当今国际医学界临床和科研工作中亟待解决的重要课题。本研究旨在运用牛磺熊脱氧胆酸 , 从内质网应激入手 , 从动物、细胞水平寻找减少足细胞损伤和凋亡 , 治疗糖尿病肾病蛋白尿的新方法。本项目主要研究在糖尿病肾病发生发展过程中 , 内质网应激介导足细胞凋亡的作用以及与糖尿病肾病蛋白尿的关系和意义。此外 , 还观察了牛磺熊脱氧胆酸是如何调节内质网应激和足细胞凋亡 , 以及对糖尿病肾病小鼠的蛋白尿的影响 , 这为最终解析糖尿病肾病蛋白尿的发病机制提供重要依据。本申请项目将为牛磺熊脱氧胆酸在糖尿病肾病治疗中运用提供更有力的理论依据 , 以造福于广大的糖尿病肾病患者。关键词 : 糖尿病肾病 ; 蛋白尿 ; 内质网应激 ; 足细胞 ; 牛磺熊脱氧胆酸学科代码 :H0713发表论著 :[1] Chen Y, Liu CP, Xu KF, Mao XD, Lu YB, Fang L, Yang JW, Liu C.Effect oftaurine-conjugated ursodeoxycholic acid on endoplasmic reticulum stress and apoptosisinduced by advanced glycation end products in cultured mouse podocytes. American Journalof Nephrology.2008;28(6): 1014~1022[2] 陈瑜 . 整合素连接激酶与糖尿病肾病 . 医学研究生学报 .2009;22(1) :100~103会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1获奖 :蛋白磷酸酶 4 在 TNF-α 诱导的胰岛素抵抗中的作用与调控机理研究批准号 :30801218项目负责人 : 黄秀清所在单位 : 卫生部北京医院该项目以人肝癌细胞 HepG2 以及原代肝细胞为细胞模型 , 以 db/db 小鼠和 TNF-α 诱导的胰岛素抵抗小鼠为动物模型 , 利用过表达腺病毒 , 干扰腺病毒 ,PP4 活性抑制等手段 ,首次探讨了 PP4 在肝脏胰岛素抵抗中的作用 , 结果显示 PP4 在 TNF-α 诱导的胰岛素抵抗以及遗传性胰岛素抵抗 db/db 小鼠中起重要作用。(1) 在肝胰岛素抵抗的细胞和动物模型中PP4 的表达及活性的变化显著增强。(2)PP4 是胰岛素信号通路的调控因子。高水平的 PP4能诱导 HepG2 细胞 / 原代肝细胞发生胰岛素抵抗 , 而降低 PP4 表达 , 改善了细胞及动物模型的胰岛素抵抗。(3)PKC 介导的氧化应激在 TNF-α 诱导的 PP4 活化过程中起到重要作用 (4)PP4 可能通过两条途径参与肝脏胰岛素信号通路的调控。一方面 ,PP4 通过可能参与 TNF-α-JNK-IRS1 信号通路的激活 , 进而促进胰岛素抵抗。另一方面 ,PP4 通过与 IRS-1 直接相互- 200 -

作用 , 参与胰岛素信号通路。该项目提示 PP4 确实是肝脏胰岛素抵抗中新的调控因子 , 为以 PP4 作为靶标防治肝脏胰岛素提供理论依据。关键词 : 胰岛素抵抗 ; 蛋白磷酸酶 4;db/db; 肿瘤坏死因子 α学科代码 :H0712发表论著 :[1] Xiuqing Huang, Mingxiao Sun, Dongxiao Li, Jin Liu, Hanbang Guo, Yuan Dong, Lei Jiang,Qi Pan, Yong Man, Shu Wang, Jian Li. Augmented NADPH oxidase activity and p22phoxexpression in monocytes underlie oxidative stress of patients with type 2 diabetes mellitus.Diabetes Res Clin Pract. (2011)(91)371-380;[2] Xiuqing Huang, Jing Zhang, Jin Liu, Liang Sun, Hongye Zhao, Yonggang Lu, JianchangWang, and Jian Li;C-Reactive Protein Promotes Adhesion of Monocytes to Endothelial CellsVia NADPH Oxidase-Mediated Oxidative Stress,Journal of Cellular Biochemistry,Journalof Cellular Biochemistry,(2012)113(3)857-867[3] Dan Gao, Shanwei Nong, Xiuqing Huang, Yonggang Lu, Hongye Zhao, Yajun Lin, YongMan,Shu Wang, Jiefu Yang and Jian Li, The effects of palmitate on hepatic insulin resistance aremediated by NADPH oxidase 3-derived reactive oxygen species through JNK and p38MAPKpathways, J. Biol. Chem. 285 (2010): 29965-733[4] Lanfang Li, Qinghua He, Xiuqing Huang, YongMan, Yingsheng Zhou, Shu Wang,JianyeWang,Jian Li, NOX3-derived reactive oxygen species promote TNF-α-induced reductions inhepatocyte glycogen levels via a JNK pathway, Febs letters 584 (2010), Issue 5, Pages995-10005[5] 黄秀清 , 赵红叶 , 焦娟 , 黎健。TNF-α 通过激活蛋白磷酸酶 4 调节 HepG2 细胞中 JNK磷酸化医学分子生物学杂志 ;2011; 8(3): 210-214会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0获奖 :人类肥胖相关基因 LYRM1 的生物学特性及对胰岛素敏感性的作用和机制研究批准号 :30801256项目负责人 : 张敏所在单位 : 南京医科大学LYRM1 基因 , 是本研究小组在先前研究中 , 以抑制性差减杂交技术筛选肥胖与健康人网膜脂肪组织中差异表达基因时 , 发现的一条在肥胖者脂肪组织中表达显著上调的功能未知基因。研究发现 :1.LYRM1 基因与蛋白均呈现在肥胖者脂肪组织中高丰度差异表达的趋势 ;2. 人多组织表达特征为在脂肪组织中表达最高 ;3.LYRM1 基因在人前体脂肪细胞诱导分化第 2 天时其核酸及蛋白表达水平即明显上调 ;4. 成熟脂肪细胞中 LYRM1 基因的表达受到- 201 -

游离脂肪酸、肿瘤坏死因子 -α 、抵抗素、罗格列酮的影响 ;5.LYRM1 基因具有促进脂肪细胞增殖、抑制脂肪细胞凋亡的作用 ;6.LYRM1 基因过表达能显著降低成熟脂肪细胞胰岛素刺激后的葡萄糖摄取率 ;7.LYRM1 过表达可能抑制胰岛素信号转导途径中 IRS1-PI3K/AKT 信号通路的活性 , 从而诱导骨骼肌细胞产生胰岛素抵抗 ;8.LYRM1 基因过表达可导致线粒体损伤 ; 线粒体功能障碍可能是 LYRM1 致胰岛素敏感性降低的重要机制之一。关键词 : 人 LYRM1 基因 ; 肥胖 ; 胰岛素敏感 ; 线粒体学科代码 :H0716发表论著 :[1] Qiu J, Gao CL, Zhang M, Chen RH, Chi X, Liu F, Zhang CM, Ji CB, Chen XH, Zhao YP, LiXN, Tong ML, Ni YH, Guo XR. LYRM1, a novel gene promotes proliferation and inhibitsapoptosis of preadipocytes. European Journal of Endocrinology, 160(2), pp 177-184,[2] Zhang, Chun-Mei, Gu, Ying, Qing, Da-ni, Zhu, Jin-gai, Zhu, Chun, *Zhang, Min, Guo,Xi-Rong. Tissue-specific distribution of uncoupling proteins in normal rats and rats withhigh-fat-diet-induced obesity. Molecular Biology Reports, 37(7), pp 3177-3182,[3] Zhang, Chun-Mei, Zhang, Min, Zhu, Jin-Gai, Ji, Chen-Bo, Zhu, Chun, Kou, Chun-Zhao, Qin,Da-Ni, Tong, Mei-Ling, Guo, Xi-Rong. Short Report: Tissue-specific Expression Profiles ofthe Uncoupling Protein Family in Normal Control Mice and Genetically ob/ob Mice. Journalof Bioenergetics and Biomembranes, 42(3), pp 255-259,[4] Cao, Xin-Guo, Kou, Chun-Zhao, Zhao, Ya-Ping, Gao, Chun-Lin, Zhu, Chun, Zhang,Chun-Mei, Ji, Chen-Bo, Qin, Da-Ni, *Zhang, Min, Guo, Xi-Rong. Overexpression ofLYRM1 induces mitochondrial impairment in 3T3-L1 adipocytes. Molecular Genetics andMetabolism, 101(4), pp 395-399,[5] Kou CZ, Cao XG, Qin DN, Ji CB, Zhu JG, Zhang CM, Zhu C, Gao CL, Chen RH, Guo XR,*Zhang M. Over-expression of LYRM1 inhibits glucose transport in rat skeletal muscles viaattenuated phosphorylation of PI3K(p85) and AKT. Mol Cell Biochem, 348(1), pp 149-154,[6] 邱洁 , 郭锡熔 , 周晓玉 , 程锐 , 曹兴国 , 王玢 , * 张敏 . 人类肥胖相关新基因 LYRM1 在人前体脂肪细胞分化过程中的表达变化 . 中国儿童保健杂志 , 17(04), pp 433-435[7] 邱洁 , 郭锡熔 , 周晓玉 , 程锐 , 张春梅 , 季晨博 , 高春林 , * 张敏 . 人类肥胖相关新基因 LYRM1 的克隆及其生物信息学分析 . 实用儿科临床杂志 , 24(19), pp 1470-1473.[8] 邱洁 , 张敏 , 周晓玉 , 程锐 , 曹兴国 , 王玢 , 郭锡熔 . 人类肥胖相关新基因 LYRM1 真核表达载体的构建及稳定转染 3T3-L1 细胞系的建立 . 浙江大学学报 ( 医学版 ), 38(05),pp 493-497,[9] 邱洁 , 郭锡熔 , 周晓玉 , 程锐 , 曹兴国 , 王玢 , * 张敏 . 人类肥胖相关新基因 LYRM1 原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 . 实用儿科临床杂志 , 25(07), pp 478-481,[10] 邱洁 , 郭锡熔 , 周晓玉 , 程锐 , 曹兴国 , 王玢 , * 张敏 .LYRM1 基因绿色荧光蛋白融合载体的构建及表达 . 中国儿童保健杂志 , 17(06), pp 667-669,[11] 邱洁 , 张敏 , 周晓玉 , 程锐 , 曹兴国 , 王玢 , 郭锡熔 . 人类肥胖相关新基因 LYRM1 多克隆抗体的制备及鉴定 . 细胞与分子免疫学杂志 , 26(04), pp 389-390,[12] 寇春兆 , 张敏 , 曹新国 , 秦大妮 , 季晨博 , 邱洁 , 郭锡熔 .LYRM1 基因过表达对大鼠骨骼肌细胞线粒体功能的影响 . 实用儿科临床杂志 , 25(19), pp 1467-1469.[13] 戴家振 , 洪琴 , 张春梅 , 张敏 , 池霞 , 童梅玲 , 郭锡熔 . 早期喂养方式对 2 岁以下婴幼儿肥胖影响的纵向研究 . 中国儿童保健杂志 , 19(06), pp 502-504- 202 -

[14] Zhang M, Zhao HM, Qin ZY, Qin R, Chen XH, Zhao YP, Zhang CM, Gao CL, Zhu C, Ji CB,Cao XG, Guo XR. Regulation of LYRM1 Gene Expression by Free Fatty Acids,Adipokines,and Rosiglitazone in 3T3-L1 Adipocytes. Exp Diabetes Res.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 3探讨溶酶体膜蛋白 Sidt2 在细胞自噬 / 凋亡中的作用批准号 :30801257项目负责人 : 张惠文所在单位 : 上海交通大学溶酶体疾病是儿科较常见的遗传代谢性疾病。除了经典的 " 垃圾 " 处理器作用外 , 溶酶体还参与了其他很重要的细胞生物学过程 , 溶酶体膜蛋白的作用尤其值得关注。溶酶体参与凋亡过程的作用机制还不清楚 , 也是近期研究的热点。我们用细胞器蛋白组学方法在溶酶体膜蛋白上发现了一个新蛋白 Sidt2,GEO 资料显示 Sidt2 可能参与了细胞凋亡过程。本项目拟制备 Sidt2 的抗体 , 进一步验证其内源性表达的溶酶体膜蛋白定位 ; 用 Sidt2 基因剔除小鼠的细胞或者 Sidt2 基因沉默的细胞证实参与细胞自噬 / 凋亡 ; 详细研究 Sidt2 是通过影响溶酶体膜的通透性还是通过影响细胞自噬而参与细胞凋亡作用 ; 并研究 Sidt2 对溶酶体形态和功能的影响 , 以明确溶酶体在细胞凋亡中的作用 , 为理解、诊断及治疗溶酶体相关的奠定坚实的理论基础。关键词 : 溶酶体 ; 膜蛋白 ; 自噬 ; 凋亡 ;Sidt2学科代码 :H0728发表论著 :[1] Zhang H, Li J, Zhang X, Wang Y, Qiu W, Ye J, Han L, Gao X, Gu X.Analysis of the IDS genein 38 patients with Hunter syndrome: the c.879G>A (p.Gln293Gln) synonymous variationin a female create exonic splicing. PLoS One, 6(8), p e22951,[2] Zhang H, Gao J, Ye J, Gong Z, Gu X.Maternal origin of a de novo microdeletion spanning theERCC6 gene in a classic form of the Cockayne syndrome. European Journal of MedicalGenetics, 54(4), pp 389-393[3] Zhang, Huiwen, Wang, Yi, Han, Lianshu, Gu, Xuefan, Shi, Dingping. A Large Deletion ofPROP1 Gene in Patients with Combined Pituitary Hormone Deficiency from Two UnrelatedChinese Pedigrees. Hormone Research in Paediatrics, 74(2), pp 98-105,[4] Jialin G, Xuefan G, Huiwen Z.SID1 transmembrane family, member 2 (Sidt2): a novellysosomal membrane protein. Biochemical and Biophysical Research Communications(BBRC), 402(4), pp 588-594.[5] Zhang H, Liu X, Gu X.Two novel missense mutations in the aspartoacylase gene in a Chinesepatient with congenital Canavan disease. brain and development, 32(10), pp 879-882,会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 1 分组 0- 203 -

培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0H07 内分泌系统 / 代谢和营养支持地区科学基金项目IKKα/β 调控高糖诱导血管内皮胰岛素抵抗及功能失常的 NF-κB 非依赖途径批准号 :30860111项目负责人 : 黄起壬所在单位 : 南昌大学血管内皮胰岛素抵抗及功能失常是心脑血管事件共同的病理生理基础 , 但高糖引起血管内皮胰岛素抵抗及功能失常的机制尚未完全阐明。IKKα /β 是 NF-κ B 信号通路中上游激酶 , 它参与了炎症、细胞增殖、分化和凋亡等调节。研究认为 IKKα /β 以 NF-κ B 依赖途径参与了高糖诱导血管内皮胰岛素抵抗及功能失常的调节 , 但是否存在 NF-κ B 非依赖机制 ,目前还未见报道。本研究拟在整体、离体和细胞水平上确认高糖应激是否影响 IKKα /β 的表达及活性改变 , 并观察内皮细胞损伤 , 血管舒张功能和内分泌功能的变化及与 IKKα /β的关系 ; 并从 IRS-1/PI3K/Akt/NO 和 Raf-1/MAPK/ET-1 通路探讨 IKKα /β 介导高糖引起血管内皮胰岛素抵抗 / 功能失常的 NF-κ B 非依赖机制。最后运用基因沉默策略进一步进行确证。旨在进一步探讨糖尿病血管病变的分子机制 , 为寻找糖尿病血管病变的防治的新分子靶点和治疗策略拓展新的思路。关键词 :IKK;NF-κB; 内皮细胞 ; 胰岛素抵抗 ;Raf-1学科代码 :H0712发表论著 :[1] Huang QR, Li Q, Chen YH, Li L, Liu LL, Lei SH, Chen HP, Peng WJ, He M. Involvementof anion exchanger-2 in apoptosis of endothelial cells induced by high glucose through anmPTP-ROS-Caspase-3 dependent pathway. Apoptosis, 2010; 15(6): 693-704[2] 刘丽丽 , 陈芳辉 , 李宙雪 , 占日新 , 高艳 , 陈元红 , 李丽 , * 黄起壬。IKKalpha 基因靶向 shRNA 真核表达载体的构建及表达。世界华人消化杂志 , 2010;18(21): 2253-2257。会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5基质 GLA 蛋白在绝经后骨质疏松症发病中的作用及机理的初步研究批准号 :30860112项目负责人 : 杨雅- 204 -

所在单位 : 南昌大学绝经后骨质疏松症 (PMOP) 与动脉钙化是绝经后女性常见且同时存在的疾病。近十余年研究发现基质 GLA 蛋白 (MGP) 与动脉钙化密切相关 ,MGP 基因的多态性与 PMOP 密切相关 ,但 MGP 是否为两种疾病联系的纽带及 MGP 在 PMOP 发病机理中的作用仍不明。本课题通过初步研究发现 (1) 去卵巢 (OVX) 大鼠血清及尿液中 MGP 的表达 , 免疫组化观察腰椎及动脉血管内皮 ucMGP,SD 大鼠成骨细胞及其腰椎 MGP 基因与对照组及药物干预组相比有显著差异 , 初步证实 MGP 直接参与了 PMOP 的发病机制 (2) 观察了小剂量雌二醇、维生素 K、PTH、维生素 D 及 alendronate 干预后 OVX 大鼠及其成骨细胞 MGP 基因及蛋白表达的变化 , 初步证明MGP 可能作为骨细胞调节因子作用的靶点在 PMOP 的发病机制中起作用。本课题将为 PMOP 的发病机制提出新的理论 , 为将来更深入研究 MGP 在 PMOP 发病机制中的作用奠定基础。具有重要的理论价值和应用前景关键词 : 基质 GLA 蛋白 ; 去卵巢大鼠 ; 成骨细胞 ; 绝经后骨质疏松学科代码 :H0726发表论著 :[1] 陈雪英 , 赖晓阳等 . 维生素 K2 对 SD 去卵巢大鼠基质 GLA 蛋白及其腰椎基因表达的影响 . 中国骨质疏松杂志 .2011.08.[2] 杨雅等 . 基质 GLA 蛋白与绝经后骨质疏松 . 中国骨质疏松杂志 .2008.11.839-841[3] 丁颖等 . 基质 Gla 蛋白与动脉钙化骨质疏松关系的研究进展 . 实用临床医学 .2010.7.129-132会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 4获奖 :壮汉族糖尿病家系的 PGC-1α 基因 Gly482Ser变异分析及突变蛋白功能研究批准号 :30860113项目负责人 : 路文盛所在单位 : 广西壮族自治区人民医院研究分为两大部分 :■ 遗传学研究 : 招募华南壮汉民族 2 型糖尿病 (T2DM) 杂合子家系各 150 个。HRR、TDT-ETDT 显示 482 位点 A 等位基因由杂合子父母更多地向患者传递(P

结论 :482A 变异增加了华南人群患 2 型糖尿病的风险 , 这一作用可能是通过降低 PGC-1α-MEF2C-GLUT4 通路活性 , 进而影响骨骼肌对葡萄糖摄取而实现的。关键词 :PGC-1α 基因 ;HRR;TDT; 定点诱变 ; 蛋白质相互作用学科代码 :H0711发表论著 :[1] 路文盛 , 颜晓东 , 黄勤 , 胡映玉 , 钟玫 , 黄忠 , 陈晖 , * 程桦 . PGC-la 基因 MEF2C 结构域482G/A 变异参与 2 型糖尿病发病的机制研究 . 中华医学遗传学杂志 ,2008.25(6), pp616-623.[2] 庞静 , * 路文盛 . 过氧化物酶增殖物激活受体 γ 辅助激活因子 -1a 对线粒体能量代谢的影响 . 中国临床新医学杂志 ,2011.4(8), pp 801-804.[3] *Shen-Hong Qu, Min Li, Jian-Ping Liang, Zheng-Zhong Su, Shi-Qiang Chen, Xiao-Guang HeLaryngotracheal Closure and Cricopharygeal Myotomy for Intractable Aspiration andDysphagia Secondary to Cerebrovascular Accident. Journal forOto-Rhino-LaryngologyIts,Head and Neck Surgery, 2009.71(6), pp 299-304[4] 瞿申红 , 李敏 , 黄永坚 , 欧志英 , 林志斌 , * 梁建平 , 路文盛 . 变应原和糖皮质激素对变应性鼻炎患者外周血 Thl7 细胞及其转录因子 RORγ t 的作用 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 ,2009,44(12),pp996-1000.[5] * 胡映玉 , 颜晓东 , 路文盛 , 刘红燕 , 黄忠 . 踝臂指数在老年 2 型糖尿病患者合并周围动脉疾病诊断中的应用价值 . 《广西医科大学学报》,2009,26(3),pp 413-415.[6] * 胡映玉 , 刘红燕 , 路文盛 , 颜晓东 , 陈友华 .2 型糖尿病患者高尿酸血症与下肢外周动脉病关系的临床研究 . 临床内科杂志 ,2009,26(3),pp172-174.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3获奖 :新疆维吾尔族 MODY 家系相关危险因素与神经 -内分泌 - 免疫调节网络的相关性研究批准号 :30860114项目负责人 : 帕它木 · 莫合买提所在单位 : 新疆医科大学本研究主要完成了维吾尔族 MODY 家系的脂代谢特点分析 ; 家系血清代谢组学研究和膳食调查及尿微量元素代谢 ;MODY 疾病相关基因的检测。研究表明各家系成员血糖在正常范围内时即出现血脂紊乱。MODY 家系高血糖成员体内肝糖原分解和肌糖源酵解下降 ; 高血压成员体内脂肪代谢受阻。膳食摄入呈现 " 高钠低钙 " 现象。糖尿病组成员尿中微量元素代谢异常。疾病相关基因的检测发现了 17 种多态性。HNF-4α 基因的 IVS4-52G>C 和 NEUROD1基因的 Exon1 c. 164G>A 变异为新变异 , 未曾报道。提示 MODY1-6 基因的变异不是该三个- 206 -

维吾尔族 MODY 家系的主要致病基因。MODY 基因突变存在种族异质性 , 提出了 :" 维吾尔族MODY 家系中可能存在 MODYX 基因 " 的观点 , 需更多维吾尔族糖尿病家系资料和遗传分析进一步证实 MODY 基因在维吾尔族早发糖尿病中的作用。在一定的遗传易感性基础上 , 生活方式、环境因素、饮食习惯也可能增加 MODY 家系成员的糖尿病易感性。所筛查到 MODY 基因多态性可能增加了家系内成员糖尿病的易感性 , 结果将为维吾尔族 MODY 家系遗传易感性研究和 MODY 基因与 2 型糖尿病相关性研究奠定重要的前期研究基础关键词 : 维吾尔族 MODY 家系 ; 代谢组学 ; 遗传分析 ; 膳食调查 ; 脂肪代谢学科代码 :H0711发表论著 :[1]. Rebiya Nuli, Patamu Mohemaiti, Yilihamujiang Yimamu, Aierken Taxitiemuer. Sequencingof MODY1-6 genes in uyghur early-onset diabetes pedigree [J]. Indian Journal ofEndocrinology and Metabolism, 2011, 15(1):56-57.[2]. Rebiya Nuli, Yilihamujiang Yimamu,Patamu Mohemaiti, Aierken Taxitiemuer. Sequencingof HNF-1α gene in a Uyghur patient with Maturity-onset diabetes of the young: a case report[J]. British Journal of Diabetes & Vascular Disease. 2012.(Accepted).[3]. 帕它木 · 莫合买提 , 热比亚 · 努力 , 伊力哈木江 · 伊马木等 . 维吾尔族早发糖尿病家系中 MODY1-6 基因缺陷的分子筛查 . 科技导报 ,2011,29(15):28-34.[4]. 艾尔肯 · 塔西铁木尔 , 帕它木 · 莫合买提 , 伊力哈木江 · 依马木 , 热比亚 · 努力 . 维吾尔族青少年发病的成人型糖尿病家系成员血清代谢组学研究 . 中华内分泌代谢杂志 ,2012,28(1):8-13.[5]. 安幸 , 伊力哈木江 · 伊马木 , 帕它木 · 莫合买提等 . 维吾尔族 MODY 家系的脂代谢特点 .中国糖尿病杂志 .2010,18(6):427-430.[6]. 艾尔肯 · 塔西铁木尔 , 帕它木 · 莫合买提 , 伊力哈木江 · 依马木 , 热比亚 · 努力 . 维吾尔族 MODY 家系膳食结构及营养调查分析 . 地方病通报 ,2011,2:56-59.[7]. 热比亚 · 努力 , 帕它木 · 莫合买提 , 沙吉旦 · 阿不都热衣木等 . 糖尿病血糖、血脂及钾、钠、氯、镁元素的相关性分析 [J]. 微量元素与健康研究 ,2011, 28(3):24-27.[8]. 热比亚 · 努力 , 帕它木 · 莫合买提 . 外显子组测序是发现单基因病致病基因的捷径 .中华医学遗传学 ,2011.28(5):525-527.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 6获奖 :骨内靶向表达腺相关病毒介导的 Dkk1-siRNA 治疗激素性骨质疏松的实验研究批准号 :30860288项目负责人 : 武宇赤- 207 -

所在单位 : 内蒙古医学院经典 wnt 信号在成骨、成脂分化中起重要作用 ,wnt 信号的阻断抑制成骨、促进成脂分化。DKK1 为 wnt 信号抑制因子 , 研究发现 , 糖皮质激素作用下成骨细胞 DKK1 明显表达 ,且抑制成骨分化。我们推断糖皮质激素性骨质疏松可能是由于提高 DKK1 的表达而发挥作用的。本项目检测 DKK1 在骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化中的表达 , 通过 sh-RNA-DKK1 分析其在骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化早期的调节作用 , 探索其是否为骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化的定向因子。同时证实糖皮质激素调节 DKK1 的表达而抑制骨髓间充质干细胞成骨分化。最后构建腺相关病毒介导 tet-on-shRNA-DKK1 靶向骨组织治疗激素性骨质疏松。通过本实验研究结果 , 初步得出以下结论 :1、DKK1 在骨髓间充质干细胞成脂分化早期发挥重要调节作用 ,sh-DKK1 明显抑制骨髓间充质干细胞成脂分化。2、sh-DKK1 促进成骨蛋白表达 ,DKK1 在骨髓间充质干细胞成骨分化早期可能通过调节成骨相关蛋白而发挥作用。3 、激素抑制骨髓间充质干细胞成骨分化可能通过提高 DKK1 表达激活DKK1-osteocalcin 独立信号机制发挥作用 , 有待进一步证实。关键词 :sh-RNA-DKK1、骨髓间充质干细胞、成骨分化、成脂分化、激素学科代码 :H0726发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 4获奖 :RAAV 介导 IGF-1 基因逆向特异性转染治疗糖尿病性膀胱的实验研究批准号 :30860297项目负责人 : 鲁雄兵所在单位 : 南昌大学应用分子克隆技术构建重组腺相关病毒载体 , 应用无辅毒的质粒共转染技术获取高滴度 , 高质量的重组腺相关病毒颗粒 , 注射到膀胱壁 , 利用 rAAV 能循神经轴索逆向轴浆运输的特性 , 定点整合 IGF-1 基因至支配膀胱的神经元 , 局部表达 IGF-1。应用定量 RT-PCR,Western blot 技术、电镜技术以及尿动力学技术研究转 IGF-1 基因治疗对糖尿病性膀胱支配神经的营养作用 ; 对糖尿病性膀胱的轴索和突触超微病变的逆转作用 ; 对病变膀胱的感觉和运动神经功能的恢复作用。该研究综合应用了神经生物学和病毒学的新成果以及分子克隆技术 , 以期获得一种有效治疗糖尿病性膀胱的全新治疗策略 , 从而改变目前仅能保守治疗糖尿病性膀胱而不能恢复病变功能的局面 ; 也将为基因治疗其它糖尿病性神经病变或其它神经原性膀胱提供一种新的思路。关键词 : 腺相关病毒 ; 胰岛素样生长因子 -1; 糖尿病性膀胱 ; 基因治疗- 208 -

学科代码 :H0713发表论著 :[1] 鲁雄兵 . 糖尿病大鼠膀胱周细胞与上皮细胞凋亡的改变 . 广州医学院学报 ,2011,39(6),pp 45-48.[2] 杨炜青 , 李逊 , 鲁雄兵 , 吴文起 , 雷鸣 , 曾国华 , 何永忠 , 何朝辉 . 腺相关病毒介导胰岛素样生长因子 Ⅰ 对高糖诱导神经元凋亡的保护作用 . 中华生物医学工程杂志 ,2009.15(5), pp 330-335会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0外源性甲状腺素对胎儿酒精效果大鼠脑发育的影响批准号 :30860306项目负责人 : 金福所在单位 : 延边大学目前 , 女性饮酒及酒精成瘾比率正快速增长 , 孕期饮酒已成为引起其后代精神发育迟缓的最常见原因。甲状腺素在中枢神经系统发育过程中起重要作用。研究目的 : 揭示胎儿酒精效果对大鼠不同部位脑发育的影响及与外源性甲状腺素 (Thyroxine,T4) 的相关关系。研究结果 : 酒精 + T4 组母鼠血液中甲状腺素含量显著高于酒精组 , 但较正常组无显著差异 ; 酒精组子鼠大脑中 BDNF 蛋白量在 P14、21、28 时较正常组及酒精 + T4 组显著减少 , 酒精 + T4 组子鼠大脑中 BDNF 蛋白量在 P14 及此以后日龄中均较正常组无显著性差异 ; 酒精 +T4 组子鼠大脑皮层及海马中 P7 始出现形态与正常组类似的成熟的 BDNF- 和 TrkB- 阳性神经细胞 , 小脑中 P14 始出现成熟的 BDNF- 和 TrkB- 阳性的浦肯野细胞 , 并此结果持续到 P90,但酒精组子鼠中始终未出现成熟的 BDNF- 和 TrkB- 阳性的神经细胞及浦肯野细胞。研究提示外源性甲状腺素能促进大脑皮层 , 海马及小脑中 BDNF 和其特异性受体 TrkB 的合成 , 促进BDNF- 及 TrkB- 阳性神经细胞的发育 , 进而能够改善胎儿酒精效果等低甲状腺素所引起的脑发育障碍 , 并为防治胎儿酒精效果脑损伤提供了理论依据。关键词 : 胎儿酒精效果 ; 大鼠脑发育 ; 甲状腺素 ; 脑源性神经营养因子 ; 酪氨酸激酶受体学科代码 :H0730发表论著 :[1] 金福 . 外源性甲状腺素对胎儿酒精效果出生后大鼠小脑发育的改善 . 临床儿科杂志 ,2011,29(8), pp760-765,[2] 金福 . 出生前接触酒精对大鼠小脑中 BDNF 和 TrkB 的影响现代预防医学 ,2011,38(12), pp2334-2336会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 0 分组 0- 209 -

培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2获奖 :H07 内分泌系统 / 代谢和营养支持国际合作研究项目JAZF1 基因介导糖脂代谢紊乱及信号传导通路的分子机制研究批准号 :81110408016项目负责人 : 李伶所在单位 : 重庆医科大学关键词 :学科代码 :H0713发表论著 :[1].Li L, Yang Y, Yang G, Lu C, Yang M, Liu H, Zong H. The role of JAZF1 on lipid metabolismand related genes in vitro. Metabolism. 2011,60:523-530[2].Li K, Li L, Yang M, Liu H, Liu D, Yang H, Boden G, Yang G.Short-term continuoussubcutaneous insulin infusion decreases the plasma vaspin levels in patients with type 2diabetes mellitus concomitant with improvement in insulin sensitivity. Eur J Endocrinol.2011Jun;164:905-910.[3]. Zhang L, Li L, Yang M, Liu H, Yang G. Elevated circulating vaspin levels were decreased byrosiglitazone therapy in T2DM patients with poor glycemic control on metformin alone.Cytokine. 2011; 56: 399-402[4]. Li K, Li L, Yang M, Liu H, Boden G, Yang G. The effects of fibroblast growth factor-21knockdown and over-expression on its signaling pathway and glucose-lipid metabolism invitro. Mol Cell Endocrinol. 2012; 348: 21–26[5]. Li L, Miao Z, Liu R, Yang M, Liu H, Yang G. Liraglutide Prevents HypoadiponectinemiaInduced Insulin Resistance and Alterations of Gene Expression Involved in Glucose andLipid Metabolism. Mol Med. 2011;17 : 1168 - 1178会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :批准号 :81110408024下丘脑 nesfatin-1 多肽激素作用的体内代谢组学研究- 210 -

项目负责人 : 杨刚毅所在单位 : 重庆医科大学关键词 :学科代码 :H0713发表论著 :[1].Increased plasma levels of nesfatin-1 in patients with newly diagnosed type 2 diabetes mellitus.Exp Clin Endocr Diab 2011,Oct 21. [Epub ahead of print][2]. Efficacy and Safety of Mitiglinide Versus Nateglinide in Newly Diagnose Patients with Type2 Diabetes Mellitus: A Randomized Double Blind Trial. Diabetes, Obesity and Metabolism, 2011Sep 5. doi: 10.1111/j.1463-1326.2011.01494.x. [Epub ahead of print][3]. Elevated plasma levels of SPARC in patients with newly diagnosed type 2 diabetesmellitus. Eur J Endocrinol. 2011; 165: 597–601[4].Glucagon-like peptide-1 receptor agonists (GLP-1 RA) versus insulin in inadequatelycontrolled patients with type 2 diabetes mellitus: a meta-analysis of clinical trials. Diabetes ObesMetab. 2011; 13: 972–981[5].Subcutaneous insulin infusion on fasting plasma fibroblast growth factor-21 levels in patientswith newly diagnosed type 2 diabetes mellitus. Plos One 2011; 6: e26359会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :脂肪酸结合蛋白作为诊断与治疗糖尿病血管并发症靶分子的价值及机制研究批准号 :30831160518项目负责人 : 周智广所在单位 : 中南大学目的 : 探讨脂肪酸结合蛋白 (A-FABP) 作为诊断与治疗糖尿病血管并发症靶分子的价值及机制。方法 : 我们分别在 ApoE-/- 小鼠的主动脉和人内皮细胞中探讨了 A-FABP 选择性抑制剂对内皮功能紊乱的改善作用及机制。我们用 2 型糖尿病队列 8 年前瞻性研究 , 评估A-FABP 对 2 型糖尿病患者亚临床动脉粥样硬化的预测价值。结果 :BMS309403 干预 6 周的ApoE-/- 小鼠主动脉的内皮依赖性舒张功能明显改善 , 且磷酸化及总 eNOS 的表达明显增加 , 并降低甘油三酯的水平。在人内皮细胞中 ,BMS309403 可改善脂质诱导的 A-FABP 的表达及降低的磷酸化 eNOS。新诊断 2 型糖尿病患者血浆 A-FABP/APN 比值与动脉内中膜厚度呈正相关 , 与内皮依赖性、非依赖性舒张功能呈负相关。8 年后发生了亚临床动脉粥样硬化的患者基线血浆 A-FABP 显著升高 ; 基线血浆 A-FABP 是 2 型糖尿病患者发生亚临床动脉粥样硬化的一个独立预测因子。结论 ; 内皮细胞 A-FABP 表达增高与其功能紊乱有关 , 而 A-FABP- 211 -

选择性化学抑制剂 BMS309403 可改善内皮功能 ;A-FABP 可作为中国 2 型糖尿病患者发生动脉粥样硬化的独立血清预测标志物。关键词 : 糖尿病 ; 炎症 ; 内皮功能障碍 ; 肥胖 ; 脂肪细胞因子学科代码 :H0713发表论著 :[1] Xiang, Yufei, Zhou, Pengcheng, Li, Xiaojue, Huang, Gan, Liu, Zhenqi, Xu, Aimin, Leslie, R.David, *Zhou, Zhiguang. Heterogeneity of Altered Cytokine Levels Across the ClinicalSpectrum of Diabetes in China Diabetes Care, 2011 Jul. 34(7), pp 1639-1641[2] Xiao, Yang, Xu, Aimin, Law,Lawrence S. C, Chen,Cheng, Li, Hui, Li, Xia, Yang, Lin, Liu,Shiping, *Zhou, Zhiguang, Lam, Karen S. L. Distinct Changes in Serum Fibroblast GrowthFactor 21 Levels in Different Subtypes of Diabetes Journal of Clinical Endocrinology&Metabolism, 2012 Jan,97(1), pp E54-E58[3] Lee, Mary Y. K., Li, Huiying, Xiao, Yang, Zhou, Zhiguang, Xu, Aimin, *Vanhoutte, Paul M.Chronic administration of BMS309403 improves endothelial function in apolipoproteinE-deficient mice and in cultured human endothelial cells. British Journal ofPharmacology,2011 April, 162(7), pp1564-1576,[4] Hui, Xiaoyan, Li, Huiying, Zhou, Zhiguang, Lam, Karen S.L., Xiao, Yang, Wu, Donghai,Ding, Ke, Wang, Yu, Vanhoutte, Paul M., *Xu, Aimin. Modulates Inflammatory Responsesin Macrophages through a Positive Feedback Loop Involving c-Jun NH2-terminal Kinasesand Activator Protein-1. The Journal of biological chemistry, 2010, April. 285(14), pp10273-10280,[5] Li, Hui, Xiao, Yang, Liu, Hui, Chen, Xiaoyan, Li, Xinying, Tang, Weili, Liu, Shiping, Xu,Aimin, *Zhou, Zhiguang. Hypoadiponectinemia predicts impaired endothelium-independentvasodilation in newly diagnosed type 2 diabetic patients: an 8-year prospective study.ChineseMedical Journal (English Version), 2011 Nov,124(22), pp 3607-3612.[6] 肖扬 , 姚岚 , 李兴 , 钟慧 , 陈小燕 , 唐炜立 , 刘石平 , 徐爱民 , * 周智广 . 新诊断 2 型糖尿病脂肪细胞脂肪酸结合蛋白 / 脂联素比值与股动脉中膜厚度及内皮舒张功能的关系中华医学杂志 , 2010,90(4), pp 231-235,[7] 姚岚 , 肖扬 , * 刘石平 , 徐爱民 , 周智广 . 肥胖症患者血清对人源单核细胞细胞上 Toll 样受体 4/ 转录因子 -κB 信号通路的影响 . 中华医学杂志 , 2010,90(44), pp 3119-3123,[8] . 姚岚 , 肖扬 , * 刘石平 , 徐爱民 , 周智广 .TLR4/NF-κB 信号通路介导肥胖症患者血清的致炎作用 . 中国动脉硬化杂志 , 2010.18(11), pp 873-877.[9] 郭皖北 , 车志宏 , 肖扬 , 周鹏程 , 徐爱民 , * 周智广 . 明胶酶相关脂笼蛋白 2 变化及其临床意义研究 . 中国实用内科杂志 ,2010. 06 期 , pp 525-527.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 4 分组 4培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 3获奖 :- 212 -

H12 眼科学面上科学基金项目病理性近视致病基因的研究批准号 :30871350项目负责人 : 张丁丁所在单位 : 四川省医学科学院 ( 四川省人民医院 )病理性近视 (Pathological myopia,PM) 是主要致盲眼病之一。迄今为止尚无有效的PM 预防手段 , 对 PM 的治疗也极为有限。对 PM 的病因、病理机制的研究是解决 PM 问题的关键。我们在已经收集了大量 PM 病人资料的基础上 , 采用遗传连锁分析、侯选基因定位法和外显子组重测序技术对家系 PM 患者进行 PM 致病基因的定位 , 发现新的 PM 相关位点 / 基因 , 并通过全基因组关联研究及病例 - 对照分析 , 进行 PM 发病机制研究 , 为 PM 预防和治疗奠定基础。关键词 : 病理性近视 ; 病因与发病机制 ; 疾病基因学科代码 :H1206发表论著 :[1] Zhang D, Shi Y, Gong B, He F, Lu F, Lin H, Wu Z, Cheng J, Chen B, Liao S, Ma S, Hu J,Yang Z.An association study of the COL1A1 gene and high myopia in a Han Chinesepopulation. Mol Vis. 2011;17:3379-3383.[2] Shi Y, Qu J, Zhang D, Zhao P, Zhang Q, Tam PO, Sun L, Zuo X, Zhou X, Xiao X, Hu J, Li Y,Cai L, Liu X, Lu F, Liao S, Chen B, He F, Gong B, Lin H, Ma S, Cheng J, Zhang J, Chen Y,Zhao F, Yang X, Chen Y, Yang C, Lam DS, Li X, Shi F, Wu Z, Lin Y, Yang J, Li S, Ren Y,Xue A, Fan Y, Li D, Pang CP, Zhang X, Yang Z. Genetic variants at 13q12.12 are associatedwith high myopia in the Han Chinese population. The American Journal of Human Genetics,2011;88(6):805-813.[3] Shi Y, Li Y, Zhang D, Zhang H, Li Y, Lu F, Liu X, He F, Gong B, Cai L, Li R, Liao S, Ma S,Lin H, Cheng J, Zheng H, Shan Y, Chen B, Hu J, Jin X, Zhao P, Chen Y, Zhang Y, Lin Y, LiX, Fan Y, Yang H, Wang J, Yang Z.Exome sequencing identifies ZNF644 mutations in highmyopia. PLoS Genet. 2011 Jun;7(6):e1002084.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 2 博士 0 硕士 4获奖 :Toll 样受体介导的细胞再编程在角膜抗真菌感染免疫中的作用及机制研究- 213 -

批准号 :30872807项目负责人 : 吴欣怡所在单位 : 山东大学真菌性角膜感染是严重的致盲眼病 , 合理调节机体抗真菌免疫和增强角膜先天防御能力是从根本上防治角膜真菌感染的关键。近年研究发现 TLR 配体预处理可诱导细胞再编程使细胞对病原的反应性降低 , 并且增强宿主抵抗和杀灭致病原的先天防御能力。本课题旨在研究 TLR2 或 TLR4 配体预处理诱导角膜上皮细胞再编程 , 调控角膜对真菌感染的炎症反应 , 从分子水平揭示 IRAK、MAPK 及 NF-κ B 信号通路在角膜上皮细胞再编程及功能重塑中的作用 , 并进行动物体内 TLR 配体预处理调控角膜真菌感染炎症反应和宿主防御功能的研究。通过明确 TLR 介导的细胞再编程在角膜抗真菌免疫中的作用及机制 , 寻找调控炎症反应和增强先天免疫的关键信号通路或特异性靶点 , 为研究角膜抗真菌免疫机制及建立角膜真菌感染的治疗策略提供全新的理论。关键词 : 真菌角膜感染 ;Toll 样受体 ; 细胞再编程学科代码 :H1201发表论著 :[1] Guo, Hui, Wu, Xinyi. Innate responses of corneal epithelial cells against Aspergillus fumigatuschallenge. Fems Immunology and Medical Microbiology. 2009 Jul; 56(1): 88-93.[2] Zhao, Jie, Wu, Xin-yi, Yu, Fu-Shin X. Activation of Toll-like receptors 2 and 4 in Aspergillusfumigatus keratitis. Innate Immunity. 2009 Jul; 15(3): 155-168.[3] Ren, Meiyu, Gao, Li, Wu, Xinyi. TLR4: the receptor bridging Acanthamoeba challenge andintracellular inflammatory responses in human corneal cell lines. Immunology and CellBiology. 2010 Jun; 88(5): 529-536.[4] Ren, Meiyu, Wu, Xinyi. Evaluation of Three Different Methods to Establish Animal Models ofAcanthamoeba Keratitis. Yonsei Medical Journal. 2010 Jan; 51(1): 121-127.[5] Liqun Du, Xinyi Wu. Kunpeng Pang. Histological evaluation and biomechanicalcharacterisation of an acellular porcine cornea scaffold. Br J Ophthalmol. 2011 Mar, 95(3):410-414.[6] Guo H, Gao J, Wu X. Toll-like receptor 2 siRNA suppresses corneal inflammation andattenuates Aspergillus fumigatus keratitis in rats. Immunol Cell Biol. 2012 Mar; 90(3):352-357.[7] Xiaoyan Zhang, Xinyi Wu, Li Gao. Pretreatment with lipopolysaccharide modulates innateimmunity in corneal fibroblasts challenged with Aspergillus fumigatu. Innate Immunity.2011 Mar; 17(3): 237-244.[8] 张小艳 , 吴欣怡 . 固有免疫在脂多糖、烟曲霉菌诱导的角膜细胞耐受中的作用 . 现代免疫学 . 2010; 30(1): 19-23.[9] 信兆亭 , 吴欣怡 . 角膜抗真菌感染的固有免疫及调节 . 现代免疫学 , 2010; 30(2), 172-175.[10] 王乐怡 , 吴欣怡 . Toll 样受体与 NOD 样受体在炎症中作用的研究进展 . 现代免疫学 . 2010;30(5): 436-439.[11] 吴佳音 , 吴欣怡 . Nod 样受体与眼部炎性疾病的相关研究进展 . 中国实用眼科杂志 . 2011:29(10):1001-1005.- 214 -

会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 3批准号 :30872808项目负责人 : 陈剑所在单位 : 暨南大学人羊膜上皮细胞构建组织工程角膜上皮的研究本研究进行了人羊膜上皮细胞 (hAECs) 体外分离、培养、扩增 , 对 hAECs 体外培养的生物学特性观察 ; 建立了稳定的 hAECs 培养方法 ; 培养的 hAECs 表达角蛋白 CK7、CK8 和CK18, 是单层上皮细胞来源 , 并表达干细胞转录因子 OCT-4; 表达干细胞标记分子 CD29、CD34, 不表达 CD44、CD45、CD105。对 hAECs 进行 GFP 基因转染 , 首次证明目的基因人端粒酶逆转录酶基因 (hTERT) 和标记基因 EGFP 经慢病毒介导转染入 hAECs 后 , 并可在细胞内获得瞬时表达和稳定表达。以共培养方法诱导 hAECs 向角膜上皮细胞转分化 ; 在纤维蛋白胶载体上进行气 - 液界面培养 , 并形成复层上皮 , 构建组织工程角膜上皮植片。建立了兔眼角膜缘干细胞缺陷模型 , 进行上皮植片移植动物实验 , 结果表明体外培养的纤维蛋白胶组织工程人羊膜上皮细胞片在重建角膜上皮的移植术后植片存活情况良好 , 可形成类似于角膜上皮样复层结构 , 且 CK12 呈阳性表达 , 眼表结构基本稳定。初步建立羊膜上皮细胞诱导转分化为角膜上皮细胞的方法和技术程序 , 为解决眼表重建材料的短缺、移植排斥反应等难题提供了新思路。关键词 : 羊膜上皮细胞 ; 组织工程 ; 转分化 ; 眼表重建学科代码 :H1201发表论著 :[1] Xiao-Xi Yang, Jian Chen, Qing Zhou, Xian-Yin Guo, Pan Xiao, Jing Wu, Jin-Tang Xu.Troglitazone induced apoptosis of human pterygium fibroblasts through amitochondrial-dependent pathway. International Journal of Ophthalmology. 2011: 4 (2),143-146.[2] 金玲 , 陈剑 , 吴静 , 徐锦堂 , 周清 , 叶茹珊 , 张宏 . 慢病毒介导 EGFP 基因修饰的人羊膜上皮细胞重建角膜表层的实验研究 . 中华实验眼科杂志 , 2011; 29(8): 685-689.[3] 金玲 , 陈剑 , 吴静 , 徐锦堂 , 周清 , 刘小勇 . 人羊膜上皮细胞的干细胞特性 . 中国组织工程研究与临床康复 . 2011; 15 (19): 3555-3558.[4] 金玲 , 陈剑 , 吴静 , 徐锦堂 , 周清 , 刘小勇 , 赵松滨 . 人羊膜上皮细胞的分离、纯化及其生物学特性研究 . 2010; 广东医学 . 32 (16), 2055-2057.[5] 金玲 , 陈剑 , 吴静 , 徐锦堂 , 周清 , 赵松滨 . 培养的兔羊膜上皮细胞构建角膜表层移植片的研究 . 眼科研究 , 2009; 27 (4): 265-268.[6] 阮余霞 , 周清 , 陈剑 , 王彦平 , 杨筱曦 , 李红 , 唐光霞 , 吴静 . 人羊膜上皮细胞的体外培养及标记 . 广东医学 . 2011; 32 (10): 555-558.[7] 苗晓晴 , 陈剑 , 吴静 , 徐锦堂 , 王彦平 . 兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的培养及冻存 .广东医学 . 2009; 30 (2), 171-173.- 215 -

[8] 肖盼 , 陈剑 , 王彦平 , 吴静 , 郭娴吟 , 杨筱曦 , 刘小勇 . 不同消化分离方法分离人羊膜间充质干细胞效果比较 . 中国病理生理杂志 . 2010; 26 (5): 1033-1037.[9] 宋子宣 , 陈剑 , 王彦平 , 阮余霞 , 陈建苏 , 吴静 , 唐光霞 , 高松哲 . 高浓度葡萄糖对培养兔角膜上皮细胞增殖活性的影响 . 广东医学 , 2011; 32 (10): 1224-1226.[10] 杨水平 , 陈剑 . 人羊膜上皮细胞分化为结膜上皮细胞实验研究 . 中国职业医学 . 2011; 38(1): 4-7.[11] 丁姗姗 , 吴静 , 孙国栋 , 侯光辉 , 陈剑 , 徐锦堂 . 脐带间充质干细胞对角膜内皮细胞增殖能力的影响 . 实用医学杂志 . 2011; 27(1): 7-10.[12] 高松哲 , 陈剑 , 王彦平 , 肖盼 , 宋子宣 , 阮余霞 , 杨筱曦 , 吴静 , 唐光霞 . 碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人羊膜间充质干细胞增殖的影响 . 热带医学杂志 . 2011; 11 (5):543-545会议报告 : 国际大会 3 分组 3 国内大会 5 分组 5培养人才 : 博士后 0 博士 6 硕士 10获奖 :Pax6 基因对角膜上皮干细胞增殖与分化调控机理的研究批准号 :30872809项目负责人 : 李炜所在单位 : 厦门大学本课题的目的在于探讨 Pax6 基因对角膜上皮干细胞增殖与分化的影响。我们比较了健康人和 Stevens Johnson 综合症患者角膜缘上皮组织内 Pax6 的表达情况 , 发现 Pax6 的表达可能与角膜上皮干细胞的增殖成负相关。以慢病毒为载体在原代培养的角膜上皮干细胞中过表达或敲低 Pax6 的表达含量 , 可引发克隆形成率或克隆形成面积的变化。我们通过免疫荧光、免疫印记和 RT 实时 PCR 发现 Pax6 以负调控的方式影响 Δ Np63a? 的表达。组成性过表达 Δ Np63a 可阻断 Pax6 过表达所引发的 TKE2 细胞生长抑制 , 表明 Pax6 是以下调 Δ Np63a的表达来发挥抑制角膜上皮干细胞增殖的作用。本课题还研究了单独和共表达 Pax6 和 Δ Np63a 对角膜上皮干细胞特异性角蛋白表达的影响 , 通过慢病毒侵染和 RT 实时 PCR 检测发现 ,Pax6 过表达可下调角膜上皮干细胞 TKE2内 K14、K15 的表达 , 而 Δ Np63α 的组成性表达则可回复两种基因的表达 ; 在 K12 启动子 -报告基因模型中 , 我们发现 Pax6 对 K12 转录的促进作用可被 Δ Np63α 所阻断。这些实验表明Pax6 和 Δ Np63α 可拮抗影响角膜上皮干细胞的分化进程。关键词 :Pax6; 角膜上皮 ; 干细胞 ; 增殖 ; 分化学科代码 :H1201发表论著 :[1] Tan Y, Qiu F, Qu YL, Li C, Shao Y, Xiao Q, Liu Z, Li W. Amniotic Membrane InhibitsSquamous Metaplasia of Human Conjunctival Epithelium. Am J Physiol Cell Physiol. 2011Jul; 301(1): 115-125.[2] Li C, Yin T, Dong N, Dong F, Fang X, Qu YL, Tan Y, Wu H, Liu Z, Li W. Oxygen tension- 216 -

affects terminal differentiation of corneal limbal epithelial cells. J Cell Physiol. 2011 Sep;226(9): 2429-2437.[3] Lin H, Li W, Dong N, Chen W, Liu J, Chen L, Yuan H, Geng Z, Liu Z. Changes in cornealepithelial layer inflammatory cells in aqueous tear-deficient dry eye. Invest Ophthalmol VisSci. 2010 Jan; 51(1): 122-128.[4] Dong N, Li W,Lin H, Wu H, Li C, Chen W, Qin W, Quyang L, Wang H, Liu Z. Abnormalepithelial differentiation and tear film alteration in pinguecula. Invest Ophthalmol Vis Sci.2009 Jun; 50(6): 2710-2715.[5] Peng J, Li W, Li H, Jia Y, Liu Z. Inhibition of p38 MAPK facilitates ex vivo expansion of skinepithelial progenitor cells. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2009 Oct; 45(9): 558-565.[6] Changes in corneal epithelial layer inflammatory cells in aqueous tear-deficient dry eye. Lin H,Li W, Dong N, Chen W, Liu J, Chen L, Yuan H, Geng Z, Liu Z. Invest Ophthalmol Vis Sci.2010 Jan; 51(1): 122-128.[6] Dong N, Li W, Wu H, Chen W, Li C, Liu Z, Qu Y, Liu Z. [Down-regulation of Pax6 inpterygial epithelium. Yan Ke Xue Bao. 2010 Aug; 25(1): 44-47.会议报告 : 国际大会 3 分组 1 国内大会 6 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 4获奖 :[1] 眼表上皮疾病的基础与临床研究刘祖国 , 李炜 , 梁凌毅 , 林辉 , 王华 , 董诺 , 杨文照 ,胡皎月 , 陈文生 , 刘靖 2010 年福建省科技进步一等奖[2] 眼表上皮疾病的基础与临床研究刘祖国 , 李炜 , 梁凌毅 , 林辉 , 王华 , 董诺 , 杨文照 ,胡皎月 , 陈文生 , 刘靖 2009 年厦门市科技进步一等奖探讨趋化因子 CXCR4 调节血管生成的分子机制以及体内干扰其表达对角膜新生血管增生的影响批准号 :30872811项目负责人 : 余克明所在单位 : 中山大学角膜新生血管是由各种致病因素引起的一种严重角膜病变 , 前期实验采用小 RNA 干涉下调 CXCR4 的表达 , 能显著地抑制人眼视网膜微血管内皮细胞的增殖及血管生成 , 因此 ,⑴ 本课题拟采用碱性化学烧伤诱导的方法建立兔眼角膜新生血管增生的动物模型 , 发现特异性的 RNA 干涉 CXCR4 能角膜新生血管的增殖 ;⑵ 通过模拟缺氧环境 (CoCl2) 来研究 CXCR4表达的转录调控机制 , 通过 CHIP 及 REAL-TIME PCR 实验证实 CXCR4 的表达与转录因子 Nrf-1的正向调控相关 ; ⑶ 我们发现化合物 2356X 是一种安全、高效的 CXCR4 抑制剂 , 体外实验证明 2356X 能有效抑制血管内皮细胞的 CXCR4 的表达 , 阻碍细胞的迁移 , 同样 , 它能有效地抑制角膜基质细胞 CXCR4 的表达 , 却对角膜基质细胞增殖没有影响 , 因此 ,2356X 极有可能成为体内、体外抑制新生血管增殖的有效试剂 , 该研究将为治疗眼科新生血管疾病的药物开发奠定理论依据。- 217 -

关键词 :CXCR4; 角膜新生血管 ,siRNA;学科代码 :H1201发表论著 :[1] Jing Zhuang, Yiming Ye, Xuan Liua, *Keming Yua. DNA demethylation in retinal neurocytescontributes to the upregulation of DNA repair protein, Ku80. Neuroreport. 2010 Apr ; 21(4):282-286.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5获奖 :胶质细胞源性神经营养因子对体外培养的人角膜上皮细胞保护机制的研究批准号 :30872813项目负责人 : 齐虹所在单位 : 北京大学本项目属于眼表疾病研究 , 具有两个创新点 :(1) 阐述了 Th17 介导的免疫炎症反应在干眼发病机制中的作用 ;(2) 阐述了胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF) 对人角膜缘干细胞 (LSC) 的免疫保护机制。本项目通过深入研究 LSC 龛境及角膜上皮免疫学特性 , 其科学发现和创新 , 无论对于神经因子领域、LSC 领域或干眼的防治 , 都具有重要的指导意义。对申请书研究计划中 GDNF 对人 LSC 的凋亡保护机制无突破性进展 , 但对 LSC 的免疫保护机制做了纵向及横向延伸研究 , 其直接成果三篇论文已分别发表在 Stem Cells、J CellPhysiol 和 Int J Biochem Cell Biol 杂志上 , 一篇论文已经被 J Refract Surg 录用。本项目作为章节作者发表中文论著二部 , 英文论著一部 ( 已出清样 )。在国际学术会议做分组报告四次 (ARVO 年会 , 第六届 TFOS 大会 ,ESCRS 年会 ), 在全国性学术大会做分组报告三次。两次邀请国际著名眼表疾病专家来华讲学。培养北京大学医学部临床博士研究生一名 , 科研硕士研究生一名 , 其论文一篇发表在国内核心期刊 , 另有两篇分别投送Ophthalmology 及 " 中华医学教育杂志 "。关键词 : 角膜上皮 ; 免疫 ; 胶质细胞源性神经营养因子 ; 干细胞龛境 ; 眼表疾病学科代码 :H1201发表论著 :[1] Bian F, Qi H, Ma P, Zhang LL, Yoon KC, Plugfelder SC, Li DQ. An ImmunoprotectivePrivilege of Corneal Epithelial Stem Cells Against Th17 Inflammatory Stress by ProducingGlial Cell-Derived Neurotrophic Factor. Stem Cells. 2010 Dec;28(12): 2172-2181.[2] Qi H, Zheng X, Yuan X, Pflugfelder SC, Li DQ. Potential Localization of PutativeStem/Progenitor Cells in Human Bulbar Conjunctival Epithelium. J Cell Physiol. 2010Oct;225(1):180-185.- 218 -

[3] 王淼 , 齐虹 , 夏英杰 , 陈跃国 . 0.5% 马来酸噻吗洛尔滴眼液对 LASIK 术后屈光回退的疗效分析 . 中华眼视光学与视觉科学杂志 . 2010; 12(6): 451-455.[4] Lu R, Bian F, Zhang X, Qi H, Chuang EY, Pflugfelder SC, Li DQ. The beta-catenin/Tcf4/survivin signaling maintains a less differentiated phenotype and high proliferative capacity ofhuman corneal epithelial progenitor cells. Int J Biochem Cell Biol. 2011 May;43(5):751-759.会议报告 : 国际大会 4 分组 4 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1获奖 :氧自由基 (ROS) 介导角膜上皮损伤修复及其相关信号传导机制的研究批准号 :30872814项目负责人 : 姚玉峰所在单位 : 浙江大学活性氧自由基 ROS 是细胞在氧化还原代谢中产生的小分子 , 以往的研究多关注它对视网膜、角膜或其他器官的毒性损伤作用。然而 , 近年来越来越多的依据证明生理浓度 ROS具有细胞信使作用。本项目首次证实了无论是 EGF- 内源性 ROS, 还是低浓度外源性 ROS 均具有促进角膜上皮粘着、移行、增殖 , 以及损伤修复的作用。与此同时 , 本项目还对 ROS 促进角膜上皮损伤修复的机制及信号传导通路进行了研究 , 得出外源性 ROS 通过细胞内弥散 , 可产生与 EGF- 内源性 ROS 信号通路类似的作用 , 促进了Src(pY416),EGFR(pY845),vinculin(pY1065), 以及 FAK(pY576) 酪氨酸位点磷酸化 , 从而达到调控角膜上皮细胞粘着、迁移等损伤修复的发生。本项目研究结果不仅为进一步阐明角膜上皮损伤修复机制奠定了基础 , 也为将来促进角膜上皮损伤修复的药物开发提供了基本理论。研究结果已总结发表了 2 篇高水平的 SCI 论文 , 分别为 2009 年的 Experimental EyeResearch ( IF2.56 ), 和 2011 年 Investigative Ophthalmology & VisualScience(IF:3.77)关键词 : 活性氧自由基 ; 角膜上皮 ; 损伤修复 ; 生长因子 ; 细胞传导通路学科代码 :H1201发表论著 :[1] Qing Pan, Wen-Ya Qiu, Yanan Huo, Yu-Peng Yao, Marjorie F. Lou. Levels of HydrogenPeroxide Stimulate Corneal Epithelial Cell Adhesion, Migration, and Wound Healing. InvestOphthalmol Vis Sci. 2011 Mar; 52(3): 1723-1734.[2] Yanan Huo, Wen-Ya Qiu, Qing Pan, Yu-Peng Yao, Kuiyi Xing, Marjorie F. Lou. Reactiveoxygen species (ROS) are essential mediators in epidermal growth factor (EGF)-stimulatedcorneal epithelial cell proliferation, adhesion, migration, and wound healing ExperimentalEye Research. 2009 Nov; 89(6): 876-886.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2- 219 -

培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0获奖 :MICA 分子在角膜组织的表达及其与角膜排斥反应相关性的实验研究批准号 :30872815项目负责人 : 徐建江所在单位 : 复旦大学角膜排斥反应是角膜植片衰竭的主要原因。经典 MHC 抗原分子是参与角膜移植排斥反应的主要免疫分子。近年的研究表明 , 非经典 MHC 抗原分子对免疫细胞的激活作用也可能参与了角膜移植排斥反应的发生发展。作为 NK 细胞及 CD8+ 细胞的主要激活配体 , 非经典MHC 分子 MICA 分子与人体器官移植相关免疫反应的研究近年来取得了显著的成果 , 但它与角膜排斥反应的关系未见文献报道。本项目组成员首先通过临床病理学研究发现正常、发生排斥反应的角膜上皮细胞存在 MICA 分子的表达。与此同时 , 通过体外培养发现未处理的人角膜上皮细胞低表达 MICA 分子 , 细胞培养上清未检测到可溶性 MICA; 利用 IFN-γ 处理后人角膜上皮细胞在 MICA 转录水平及蛋白水平表达均上调 , 且呈现浓度依赖性。异体 NK 细胞及 CD8+T 细胞对 IFN-γ 处理及转染 MICA 基因的人角膜细胞杀伤能力显著加强。本研究证实MICA 分子可能参与了角膜上皮细胞的免疫监视 , 为探讨角膜排斥反应的发生机制提供新的思路。关键词 : 角膜排斥反应 ; 角膜上皮细胞 ;MICA; 细胞毒性作用学科代码 :H1201发表论著 :[1] Hong J, Shao T, Sun X, Li G, Xu J. Interferon-γ Up-RegulatesMajor-Histocompatibility-Complex Class I-Related Chain A Expression and EnhancesMajor-Histocompatibility-Complex Class I-Related Chain A-Mediated Cytolysis of HumanCorneal Epithelium by Natural Killer Cells In Vitro. J Interferon Cytokine Res. 2012 Mar; 32(3):115-120.[2] Le Q, Chen Y, Wang X, Li Y, Hong J, Xu J. Vision-related quality of life in patients withocular chemical burns. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2011 Nov ; 52 (12): 8951-8956.[3] Hong J, Zheng T, Xu J, Deng SX, Chen L, Sun X, Le Q, Li Y. Assessment of limbus andcentral cornea in patients with keratolimbal allograft transplantation using in vivo laserscanning confocal microscopy: an observational study. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol.2011 May; 249 (5):701-708.[4] Wei A, Hong J, Sun X, Xu J. Evaluation of age-related changes in human palpebralconjunctiva and meibomian glands by in vivo confocal microscopy. Cornea. 2011 Sep; 30(9): 1007-1012.[5] Le Q, Hong J, Zhu W, Sun X, Xu J. In vivo laser scanning confocal microscopy of vernalkeratoconjunctivitis. Clin Experiment Ophthalmol. 2011 Jan; 39 (1):53-60.- 220 -

[6] Zhu W, Hong J, Zheng T, Le Q, Xu J, Sun X.. Age-related changes of human conjunctiva onin vivo confocal microscopy. Br J Ophthalmol. 2010 Nov; 94 (11): 1448-1453.[7] Hong J, Zhu W, Zhuang H, Xu J, Sun X, Le Q, Li G, Wang Y. In vivo confocal microscopyof conjunctival goblet cells in patients with Sjogren's syndrome dry eye. Br J Ophthalmol.2010 Nov; 94 (11): 1454-1458.[8] Hong J, Qiu T, Wei A, Sun X, Xu J. Clinical characteristics and visual outcome of severeocular chemical injuries in Shanghai. Ophthalmology. 2010 Dec; 117 (12): 2268-2272.[9] Le Q, Wang Y, Xu J. In vivo confocal microscopy of long-standing mixed-form vernalkeratoconjunctivitis. Ocul Immunol Inflamm. 2010 Oct; 18 (5): 349-351.[10] Wang Y, Zhao F, Zhu W, Xu J, Zheng T, Sun X.. In vivo confocal microscopic evaluation ofmorphologic changes and dendritic cell distribution in pterygium. Am J Ophthalmol. 2010Nov; 150 (5): 650-655.会议报告 : 国际大会 4 分组 4 国内大会 6 分组 6培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 5获奖 :个体化人眼角膜前表面三维数字模型的自动建模及成像研究批准号 :30872816项目负责人 : 施明光所在单位 : 温州医学院本研究根据立题计划完成如下三项主要任务 :1, 角膜地形图正切曲率半径原始数据采集与数学处理 , 推导个体人眼角膜数字模型数学路线的二次方程 , 利用正切曲率半径推算出中间数值 , 最终计算出角膜表面各截痕的非球面系数 Q 值 ;2, 对子午面截痕 Q 值非球面特性及屈光状态的相关性分析 ;3, 利用计算机程序对 360 个子午面截痕 Q 值综合处理 , 建立个体化定量性人眼角膜前表面三维成像。本研究的创新点在于 ;1, 首次提出正切曲率半径对角膜半子午线截痕 Q 值计算 , 真实体现出角膜子午面截痕的非球面特性 ,2, 采用线性回归方法处理二次曲线方程 , 使非线性的曲率半径方程进行线性处理 ;3, 利用了 360 条子午线截痕的 Q 值 , 通过计算机处理定量性角膜前表面的三维成像 , 一种真实空间意义的角膜前表面数学模型。本研究对于人眼角膜波前像差中最为重要的高级像差 - 球差研究 , 角膜屈光性手术尤其是 Q 值引导的 Lasic 手术以及 RGP 角膜接触镜的个体化设计能提供角膜前表面形态的相关信息。关键词 : 角膜表面 ; 非球面性 ;Q-value; 三维成像学科代码 :H1201发表论著 :[1] 施明光 , 王波 . 正常国人全角膜数字模型的建立 . 中华眼科杂志 .2007; 43(8: 694-697.[2] 朱乐如 , 王波 , 施明光 . 正视儿童角膜前表面数学模型的建立及非球面分析 . 眼视光杂- 221 -

志 . 2009;(11)2:123-128.[3] 陈媛媛 , 王波 , 施明光 . 运用正切曲率半径分析角膜前表面的 Q 值规律 . 眼视光杂志 .2009;(11)3: 207-210.[4] 陈凯迪 , 王波 , 施明光 . Matlab 平台在构建角膜三维模型中的应用 . 眼视光杂志 .2009;(11)5:375-357.[5] 陈如利 , 王波 , 王若洁 , 施明光 . 正切曲率半径对高度近视眼角膜表面 Q 值计算及特性分析 . 中华眼视光学与视觉科学杂志 . 2011; 13(1): 34-38.[6] 陈凯迪 , 王波 , 施明光 . 角膜子午线截痕成像及特征分析 . 中国生物医学工程学报 .2009;28(2): 304-308.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 5眼前房免疫微环境与角膜移植免疫排斥反应机理的实验研究批准号 :30872817项目负责人 : 史伟云所在单位 : 山东省眼科研究所角膜移植是角膜盲患者复明的重要手段 , 而术后的免疫排斥反应是导致手术失败的最主要原因 , 其发病机理尚不明确。本课题主要围绕眼前房免疫微环境与角膜移植免疫排斥反应关系进行研究并取得一定成果 :1、角膜移植术后 , 眼前房免疫微环境发生了改变 , 出现了大量的高表达 MHCⅡ 分子和共刺激分子的活化成熟的抗原提呈细胞及 CD4+T 淋巴细胞。2、眼内微环境具有诱导 Treg 细胞的形成的功能 , 当眼内发生免疫炎症反应时大量进入眼内的 CD4+T 细胞被诱导形成了 Treg 细胞。3、进一步研究证实 c-Rel 是调控眼内 Treg 细胞形成的重要的上游信号通路同时也参与调控角膜移植术后免疫排斥反应。4、角膜移植术后免疫排斥反应时血 - 房水屏障功能破坏 , 虹膜睫状体组织紧密连接蛋白 ZO-1、occludin 表达减少 , 血管通透性增高。5、不同病因可致角膜新生血管和新生淋巴管形态各不相同。本课题系列研究为研究角膜移植术后免疫排斥反应的发生机理和治疗提供了重要的数据。本课题系列研究共发表论文 6 篇 , 其中 SCI 收录论文 5 篇 , 参加国内外学术会议 8 次。关键词 : 角膜移植 ; 免疫排斥 ; 前房 ; 免疫微环境 ;学科代码 :H1201发表论著 :[1] *Shi, Weiyun, Liu, Juncai, Li, Man, Gao, Hua, Wang, Ting. Expression of MMP, HPSE, andFAP in Stroma Promoted Corneal Neovascularization Induced by Different Etiological Factors.Current Eye Research, 35(11), pp 967-977, 2010/11([2] *Shi W, Ming C, Liu J, Wang T, Gao H Features of corneal neovascularization andlymphangiogenesis induced by different etiological factors in mice. Graefes Arch Clin ExpOphthalmol. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2011 Jan;249(1):55-67. Epub 2010 Jul 17.,249(1), pp 55-67, 2010.([3] The microRNA-21-PDCD4 axis prevents type 1 diabetes by blocking pancreatic beta cell death.- 222 -

Ruan Q, Wang T, Kameswaran V, Wei Q, Johnson DS, Matschinsky F, Shi W, *Chen YH.Proc Natl Acad Sci U S A. 2011 Jul 19;108(29):12030-5., 108(29), pp 12030-12035, 2011.[4] Shi W, Li S, Gao H, Xie L. Clinical features and surgical treatment of peripheral staphyloma.Cornea, 30(4), pp 395-399, 2011/4.[5] Wang, Ting, Shi, Weiyun. Expression of Fibroblast Activation Proteins in Corneal StromalNeovascularization. Current Eye Research, 34(2), pp 112-117, 2009[6] 李素霞 , 史伟云 , 方淑芬 , 刘明娜 . 不同因素诱导的小鼠角膜新生血管和淋巴管生长关系的研究 . 中华眼科杂志 , 46(5), pp 452-455, 2010会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 5 分组 5培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 19获奖 :[1] 感染性角膜病创新理论及其技术应用 . 谢立信 , 史伟云 , 王宜强 , 董晓光 . 2011 年国家科技进步奖二等奖[2] 角膜及眼表手术创新及相关应用研究 . 史伟云 , 高华 , 王婷 , 谢立信 . 2010 年山东省科技进步一等奖[3] 感染性角膜病的应用基础研究及其临床应用 . 谢立信 , 史伟云 , 董晓光 , 翟华蕾 . 2010 年中华医学科技奖二等奖专利[1] 眼内植入缓释药物 . 谢立信 , 史伟云 , 韩宝琴 , 董晓光 . 200610068571.4( 专利号 )2009.04.08[2] 白芨胶为载体的雷帕霉素 . 吴祥根 , 史伟云 , 谢立信 . 200810093989.X( 专利号 )2010.06.16[3] 有协同治疗作用的眼用药物缓释载体 . 吴祥根 ; 史伟云 ; 谢立信 . 200810093990.2( 专利号 )2010.03.24[4] 阳离子黏附型那他霉素纳米滴眼液 . 史伟云 , 吴祥根 . 200810140337.7( 专利号 )2010.06.09[5] 阳离子黏附型霉酚酸酯纳米滴眼液 . 吴祥根 , 史伟云 , 辛萌 . 200910016344.0( 专利号 )2011.03.16[6] 人角膜内皮细胞培养液及其制备方法和应用 . 史伟云 , 高彦 , 周庆军 , 杨玲玲 . ( 专利号 )200910016346.X 2011.10.26视网膜色素上皮细胞通过 Dll4-Notch 信号参与脉络膜新生血管生成新通路的研究批准号 :30872818项目负责人 : 王雨生所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学缺氧可通过缺氧诱导因子 1(HIF-1) 调控血管内皮生长因子 (VEGF) 表达 , 促进脉络膜新生血管 (CNV) 生成。但局部组织过表达 VEGF 并非引发 CNV 的唯一途径。已发现 Notch信号通路在血管生成和血管发育中发挥与 VEGF 同等重要的作用 , 但它在 CNV 中的作用机制- 223 -

尚不明确。本项目研究 Dll4-Notch 信号激活是否参与 CNV 生成。本研究检测了激光诱导的有色大鼠和小鼠 CNV 模型中 Dll4-Notch 信号的表达和激活情况 ; 明确缺氧情况下视网膜色素上皮 (RPE) 细胞及猴脉络膜视网膜血管内皮细胞 (RF/6A 细胞系 )Dll4 的表达变化及其与 VEGF 通路的交互作用 ; 观察 VEGF 阻断剂 Avastin 对 Notch 信号通路的潜在影响 ; 构建Dll4 高表达和 Dll4 低表达的 RPE 及 RF/6A 细胞亚系 , 观察 Dll4 不同表达水平对 RPE 细胞及 RF/6A 细胞生物学行为的影响 ; 探讨 Dll4 不同表达水平对在缺氧的共培养体系中 RPE 细胞和 RF/6A 细胞的功能影响。阐明了 Dll4-Notch 信号通路通过调控 RPE 细胞和血管内皮细胞参与 CNV 生成的作用 , 从新的角度探索 CNV 的发病机制 , 为防治 CNV 提供新策略。关键词 : 脉络膜新生血管 ; 视网膜色素上皮 ;Dll4-Notch 信号 ; 血管内皮生长因子学科代码 :H1205发表论著 :[1] 窦国睿 , 王雨生 . Delta 样配体 4-Notch 信号在眼底血管发育和新生血管生成中的作用 . 中华眼底病杂志 . 2009;25(2):157-160.[2] Dong X, Wang YS, Dou GR, Hou HY, Shi YY, Zhang R, Ma K, Wu L, Yao LB, Cai Y, ZhangJ. Influence of Dll4 via HIF-1α-VEGF signaling on the angiogenesis of choroidalneovascularization under hypoxic conditions. PLoS One. 2011 Apr;6(4):e18481.[3] Dou GR, Wang L, Wang YS, Han H.. Notch Signaling in Ocular Vasculature Developmentand Diseases. Mol Med. 2012 Feb;18(1):47-55.[4] Hou HY, Liang HL, Wang YS, Zhang ZX, Wang BR, Shi YY, Dong X, Cai Y. ATherapeutic Strategy for Choroidal neovascularization based on recruitment ofmesenchymal stem cells to the sites of lesions. Mol Ther. 2010Oct;18(10):1837-1845.[5] 叶子 , 王雨生 , 张雪 . 缺氧对人视网膜色素上皮细胞 G 蛋白信号转导调节子 5 表达的影响及其可能机制叶子 . 中华眼视光学与视觉科学杂志 . 2011;13(4):258-262.[6] 朱洁 , 王雨生 , 赵炜 , 杨秀梅 , 李夏 , 姜廷帅 . 氧化衰老、细胞外基质和光感受器外节膜盘对 RPE 细胞中黏着斑激酶表达的影响 . 眼科研究 . 2011;29(6):544-548.[7] 屈晓杰 , 王雨生 , 张鹏 , 储昭节 . 脯氨酸羟化酶 2 对氧诱导视网膜病变新生血管生成的影响 . 眼科新进展 . 2011;6 期 :511-515.[8] 叶子 , 王雨生 , 蔡岩 , 马可 . G 蛋白信号转导调节子 5 参与实验性脉络膜新生血管生成的可能机制 . 中华眼科杂志 . 46(8);2010:731-738.[9] 马可 , 李晓 , 王雨生 , 叶子 , 蔡岩 . Notch-Dll4 在激光诱导的大鼠脉络膜新生血管生成中的作用 . 眼科新进展 . 2010;5 期 : 401-405+410.[10] 王雨生 . 从黄斑变性治疗的重大突破看临床学科研究生的培养 . 医学研究生学报 .2009;22(11):1124-1126.[11] * 王雨生 , 侯慧媛 . 重视抗血管内皮生长因子疗法在渗出型老年性黄斑变性治疗应用中的问题 . 中华眼底病杂志 .2010;26(1): 5-7.会议报告 : 国际大会 2 分组 1 国内大会 8 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 7 硕士 2获奖 :[1] 2011 年脉络膜新生血管疾病防治的基础与临床研究陕西省科技厅 . 陕西省科学技术奖一- 224 -

等奖 . ( 第一获奖人 )[2] 2011 年脉络膜新生血管疾病防治的基础与临床研究中华医学会 . 2011 年度中华医学科技奖二等奖 . ( 第一获奖人 )视网膜 VSEL 诱导的特定阶段的 RPE 细胞移植治疗视网膜变性的研究批准号 :30872821项目负责人 : 高玲所在单位 : 中南大学本研究探讨胚胎干细胞向 REP 定向诱导 , 结果如下 (1) 从视网膜分选 Sca1+Lin-CD45-细胞 , 表达胚胎干细胞标记基因 , 不表达 RPE 标记性基因 , 具有干细胞的特性。(2) 分步法诱导胚胎干细胞向 RPE 分化 , 28 天后检测到 RPE 相关基因和蛋白 (RPE65 除外 ) 不同程度表达 , 提示向 RPE 方向分化。(3) 揭示 RPE 相关蛋白在 BN 鼠视网膜发育中的表达规律。探讨抑癌基因 RASSF1A 启动子的甲基化状态和去甲基化药物 5- 氮杂 2- 脱氧胞苷对 RB细胞的生长抑制作用。结果如下 :(1)RASSF1A 基因启动子甲基化是 RB 组织中常见频发的表观遗传修饰 :1) RB 组织中甲基化率为 66.7%( 单侧 RB 者高达 79.3%), 高于瘤旁组织 ;2) 视神经侵犯者血中甲基化率 70.0%, 有助于肿瘤的预后评估。(2)0.5-5.0uM 5- 氮杂2- 脱氧胞苷通过阻滞细胞周期于 G0/G1 期、诱导细胞凋亡等机制有效地抑制 RB 细胞的增殖 , 以剂量和时间依赖的方式抑制甲基化 , 从而促进抑癌基因和蛋白的表达 , 可能成为 RB肿瘤治疗的有效靶点。关键词 : 干细胞 ; 视网膜色素上皮细胞 ; 视网膜母细胞瘤 ; 甲基化 ; 5- 氮杂 2- 脱氧胞苷学科代码 :H1205发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 4获奖 :轴突导向因子 -1 在视网膜新生血管形成中调控作用的研究批准号 :30872822项目负责人 : 夏晓波所在单位 : 中南大学目的 : 探讨轴突生长因子 -1(netrin-1) , netrin-1 受体以及小窝蛋白 -1(caveolin-1) 在视网膜新生血管形成过程中的作用机制。方法 : 采用 RT-PCR,WB, 免疫组化等技术检测 netrin-1,netrin-1 受体以及 caveolin-1 在氧诱导视网膜病变 (OIR) 模- 225 -

型鼠视网膜组织中的表达差异 ; 向 OIR 模型鼠的玻璃体腔内分别注入慢病毒-netrin-1shRNA 复合物、unc5b-FC 以及脂质体 -caveolin-1 shRNA 复合物 , 然后观察这三种方法对鼠视网膜新生血管形成的抑制作用。结果 :P17 天 OIR 模型鼠视网膜组织中netrin-1、受体 unc5b 以及 caveolin-1 表达明显上调 , 受体 unc5b 在视网膜新生血管内皮细胞上有表达 ; 玻璃体腔内注入 netrin-shRNA、unc5b-FC 及 caveolin-siRNA,OIR 小鼠荧光渗漏及新生血管数量明显减少。结论 :netrin-1、unc5b 及 caveolin-1 与 OIR 小鼠视网膜新生血管的形成密切相关 ;netrin-1shRNA、unc5b-FC 及 caveolin-1siRNA 均能有效抑制鼠视网膜新生血管的关键词 :netrin-1;unc5b;caveolin-1; 视网膜新生血管学科代码 :H1205发表论著 :[1] 熊思齐 , 夏晓波 , 蒋剑 , 孙伟 . 轴突导向因子 -1 mRNA 在氧诱导血管增生性视网膜病变中的表达 . 眼科研究 . 2009; 02 期 :105-108.[2] 夏晓波 .Intravitreous high expression level of netrin -1 in patients with proliferative diabeticretinopathy. Yan Ke Xue Bao. 2011;26(2): 605-609.[4] Xu H, Liu J, Xiong S, Le YZ, Xia X. Suppression of Retinal Neovascularization byLentivirus-Mediated Netrin-1 Small Hairpin RNA. Ophthalmic Res. 2012;47(3):163-169.[4] Role of unc5b in retinal neovascularization in micewith oxygen-induced retinopathy. Int JOphthalmol.2011;4(2):137-142.[5] Tian XF, Xia XB, Xiong SQ, Jiang J, Liu D, Liu JL. Netrin-1 overexpression inoxygen-induced retinopathy correlates with breakdown of the blood-retina barrier and retinalOphthalmologica.2011;226 (2): 37-44.[6] 夏晓波 .Expression of FLT 4 in hypoxia-induced neovascular models in vitro and in vivo. Int JOphthalmol. 2011;4(1):26-29.[7] Tian XF, Xia XB, Xu HZ, Xiong SQ, Jiang J. Caveolin-1 expression regulates blood-retinalbarrier permeability and retinal neovasculariza tion in oxygen-induced retinopathy.ClinExperiment Ophthalmol. 2012 Jan-Feb;40(1):e58-66.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 0获奖 :[1] 视网膜新生血管发病机制及基因治疗的研究 . 2010 湖南省科学技术进步奖三等奖 ( 第一获奖人 ).[2] 视网膜新生血管发病机制及基因治疗研究 2009 年湖南省医学科技奖 , 二等奖 ( 第一获奖人 ).OPTC 基因 RNA 干扰对玻璃体细胞介导胶原凝胶收缩的调控批准号 :30872824项目负责人 : 马进- 226 -

所在单位 : 浙江大学Opticin 蛋白是玻璃体中特异存在的小分子结构蛋白 , 其主要参与玻璃体胶原凝胶网状结构的稳定 , 其结构异常可导致众多玻璃体视网膜疾病。我们前期研究已证实玻璃体胶原凝胶支架结构的异常铰链和空间构像的改变是导致玻璃体胶原异常收缩的内在机制 , 玻璃体细胞可能是收缩产生的动力来源。进一步研究发现 , 在玻璃体视网膜疾病的发病机制中 , 眼内血管内皮生长因子 (VEGF), 转化生长因子 (TGF-β ) 等细胞因子的异常则是其中的关键因素 , 但其具体的引起玻璃体细胞收缩的上游调控机制有待阐明。本课题通过 OPTC 基因调控为切入点应用 RNA 干扰、免疫印迹、RT-PCR、体外凝胶模型构建等技术和方法深入研究发现 :(1) 针对构建的 OPTC 基因干扰质粒中 ,OPTC-shRNA1 可有效的抑制 OPTC 基因在睫状体非色素上皮细胞中表达 opticin 蛋白 (2)OPTC 基因的干扰抑制可引起玻璃体收缩性状的改变 (3)VEGF、TGF-β 参与构建的玻璃体胶原凝胶的收缩 (4)VEGF 可上调金属基质蛋白酶 -2(MMP-2) 的活性来减少 opticin 蛋白的含量。关键词 :opticin; 玻璃体收缩 ; 玻璃体视网膜疾病 ;RNA 干扰 ; 生长因子学科代码 :H1205发表论著 :[1] Ma J, Zhu T, Tang X, Ye P, Zhang Z. Zhang Z. Effect of an intravitreal injection ofbevacizumab on the expression of VEGF and CD34 in the retina of diabetic rats. ClinExperiment Ophthalmol. 2010 Dec;38(9):875-884.[2] Ma J, Zhang Q, Moe MC, Zhu T.. Regulation of cell-mediated collagen gel contraction inhuman retinal pigment epithelium cells by VEGF compared to TGF-{beta}2. ClinExperiment Ophthalmol. 2012 Jan-Feb;40(1):e76-86.[3] 马进 , 朱铁培 , 张倩茹 , 欧会林 . 缺氧以及血管内皮生长因子对视网膜色素上皮细胞opticin 分泌的影响 . 中华眼科杂志 . 2011; 10 期 .[4] 张倩茹 , 马进 , 朱铁培 , 姚克 . 血管内皮生长因子和转化生长因子 -β2 对人视网膜色素上皮细胞分化及其介导胶原凝胶收缩的机制研究 . 中华眼科杂志 . 2012;1 期 .[5] 马进 , 朱铁培 , 张倩茹 . 大鼠 OPTC 基因 shRNA 真核表达质粒的构建及鉴定。中华眼底病杂志 .2011; 第 1 期[6] 陈瑛 , 马进 , 朱铁培 . 糖尿病小鼠眼 opticin 蛋白表达的研究 . 中华眼底病杂志 .2010;9 期[7] 糖尿病小鼠眼 opticin 蛋白表达的研究 . 陈瑛 , 马进 , 朱铁培 . 中华眼底病杂志 .2010;9 期会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 8获奖 :小胶质细胞失稳态在光损伤视网膜变性中作用研究批准号 :30872825项目负责人 : 徐格致所在单位 : 复旦大学- 227 -

视网膜变性疾病的分子病理机制及治疗仍是目前研究的难点。近年来小胶质细胞的作用受到重视。光感受器损伤后激活小胶质细胞 , 导致进一步神经元损伤已得到证实。但光感受器损伤和小胶质细胞激活之间的分子对话机制仍不清楚 , 阻止该过程成为从同一途径延缓视网膜变性发展的关键。研究提示趋化因子 Fractalkine 可能是二者功能对话的重要介质。本研究拟采用光损伤视网膜模型、体外光感受器和小胶质细胞共培养模式 , 研究Fractalkine 及受体 CX3CR1 信号在光感受器损伤后的时空变化 , 着力于分析该信号的变化规律及与视网膜小胶质细胞激活、神经元凋亡之间潜在的关系 , 并深入探讨其调控小胶质细胞激活的细胞内信号途径 , 阐明神经元损伤和小胶质细胞激活之间的分子机制 , 为延缓视网膜变性疾病的进展开拓新治疗思路。关键词 : 视网膜变性 ; 趋化因子 ; 信号通路 ; 小胶质细胞 ; 光感受器 ;学科代码 :H1205发表论著 :[1] Ye X, Xu G, Chang Q, Fan J, Sun Z, Qin Y, Jiang AC. ERK1/2 signaling pathways involvedin VEGF release in diabetic rat retina. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010Oct;51(10):5226-5233.[2] Ren H, Xu G, Qian J, Zhou M, Gonzales J, Ni Y. Müller cells upregulate the expression ofSAP97 in light-injured rat retina. Neuroreport. 2010 Aug 23;21(12):832-836.[3] Wu H, Jiang C, Gan D, Liao Y, Ren H, Sun Z, Zhang M, Xu G. Different effects of low- andhigh-dose insulin on ROS production and VEGF expression in bovine retinal microvascularendothelial cells in the presence of high glucose. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2011Sep;249(9):1303-1310.[4] Qin Y, Xu G, Fan J, Witt RE, Da C. High-salt loading exacerbates increased retinal content ofaquaporins AQP1 and AQP4 in rats with diabetic retinopathy. Exp Eye Res. 2009Nov;89(5):741-747.[5] Liu W, Xu GZ, Jiang CH, Da CD. Expression of macrophage colony-stimulating factor(M-CSF) and its receptor in streptozotocin-induced diabetic rats. Curr Eye Res. 2009Feb;34(2):123-133.[6] Liu W, Xu GZ, Jiang CH, Tian J. Macrophage colony-stimulating factor and its receptorsignaling augment glycated albumin-induced retinal microglial inflammation in vitro. BMCCell Biol. 2011 Jan 25;12:5.[7] Zhang Y, Xu G, Ling Q, Da C. Expression of aquaporin 4 and Kir4.1 in diabetic rat retina:treatment with minocycline. J Int Med Res. 2011;39(2):464-479.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 6 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 7 硕士 1获奖 :批准号 :30872827抑制眼部新生血管新肽的作用机制研究- 228 -

项目负责人 : 许迅所在单位 : 上海交通大学最近本课题组应用生物信息学方法发现 , 一种由 6 个氨基酸组成的新肽 , 可抑制鸡胚尿囊膜和小鼠视网膜新生血管 , 进一步研究发现该小肽可消减 VEGF 诱导小鼠角膜新生血管 , 与其对体外培养血管内皮细胞迁移的拮抗作用有关 (PCT 国际专利申请已受理 )。许多肿瘤新生血管抑制剂分子量大而难以透过眼内屏障 , 和 / 或对眼组织有毒副作用 , 因此老年性黄斑变性等以新生血管为病理特征的致盲性眼疾治疗棘手。我们将以上述发现为基础 , 进一步探讨该小肽对 VEGF 诱导细胞迁移相关的 FAK、MAPK 等信号通路的影响 ; 应用LC/MS 和荧光标记测定其对血 - 眼屏障等眼部屏障的通透性 ; 应用裂隙灯、电生理和透射电镜等分析其对眼内正常组织的影响。序贯前期研究 , 旨在从分子机理、组织通透性和生物安全性等多方面阐释该新肽抑制眼部新生血管的作用机制 , 可望发现一种适于眼球组织的安全有效的新生血管抑制剂 , 为防治新生血管性眼病开辟新途径 , 具有向临床成果转化的价值。关键词 : 眼 ; 新生血管 ; 新生血管抑制剂 ; 肽学科代码 :H1205发表论著 :[1] Su L, Xu X, Zhao H, Gu Q, Zou H.In vitro and in vivo antiangiogenic activity of a noveldeca-peptide derived from human tissue-type plasminogen activator kringle 2 BiochemBiophys Res Commun. 2010 Jun 11;396(4):1012-1017.[2] Zhao H, Jin H, Li Q, Gu Q, Zheng Z, Wu H, Ye S, Sun X, Xu X, Ho PC.Inhibition ofPathologic Retinal Neovascularization by a Small Peptide Derived from HumanApolipoprotein(a) . Invest Ophthalmol Vis Sci. 2009 Nov;50(11):5384-5395.[3] Xu Y, Zhao H, Zheng Y, Gu Q, Ma J, Xu X.A novel antiangiogenic peptide derived fromhepatocyte growth factor inhibits neovascularization in vitro and in vivo. Mol Vis. 2010 Oct7;16:1982-1995.[4] Yi ZF, Cho SG, Zhao H, Wu YY, Luo J, Li D, Yi T, Xu X, Wu Z, Liu M. A novel peptidefrom human apolipoprotein(a) inhibits angiogenesis and tumor growth by targeting c-Srcphosphorylation in VEGF-induced human umbilical endothelial cells. Int J Cancer. 2009 Feb15;124(4):843-852.[5] Jin H, Yang X, Liu K, Gu Q, Xu X.Effects of a novel peptide derived from humanthrombomodulin on endotoxin-induced uveitis in vitro and in vivo. FEBS Lett. 2011 Nov4;585(21):3457-3464.[6] Yang X, Jin H, Liu K, Gu Q, Xu X. A novel peptide derived from humanpancreatitis-associated protein inhibits inflammation in vivo and in vitro and blocksNF-kappa B signaling pathway. PLoS One. 2011;6(12):e29155.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 7 硕士 0获奖 :- 229 -

SOCS-3 在糖尿病性视网膜病变发病中作用机制及意义批准号 :30872828项目负责人 : 郑志所在单位 : 上海交通大学最近 , 本课题组实验发现 ,Janus 激酶 2/ 信号转导转录激活因子 3(JAK2/STAT3) 信号通路的激活 , 可导致糖尿病大鼠血管组织损伤 , 促进视网膜细胞的凋亡。新近又发现 ,对 JAK2/STAT3 信号通路有负反馈调节作用的细胞因子信号抑制因子 3(SOCS-3) 在高糖孵育的牛视网膜血管内皮细胞 (BRECs) 中表达上调。本课题以这些发现为基础 , 应用 siRNA 技术 , 探讨 SOCS-3 通路对活性氧的作用 ; 培养恒河猴脉络膜视网膜内皮细胞 (RF/6A) 并传代 , 了解在高糖孵育下 ,SOCS-3 的表达明显上调 , 且上调幅度随着孵育时间的延长而增加明显 ; 利用 western blot 和 RT-PCR 技术 , 进一步探讨培哚普利对 SOCS-3 蛋白表达及 mRNA表达的影响。分别应用 TUNEL、透射电子显微镜及分子生物学等方法揭示了罗格列酮对糖尿病大鼠视网膜病变干预效果及其机制以及 SOCS-3 在糖尿病性视网膜病变 (DR) 患者发病中的意义。这些研究目前在国际上尚属空白 , 可望获得若干新的发现 , 对于了解 SOCS-3 新功能 , 阐明其在 DR 发病中作用及其分子机制具有理论创新意义 , 可望形成新的研究领域 ,加深 DR 发病机制及其防治的认识。关键词 :JAK2/STAT3;SOCS-3; 糖尿病性视网膜病变 ; 活性氧 ; 基因重组学科代码 :H1205发表论著 :[1] Zheng Z, Chen H, Ke G, Fan Y, Zou H, Sun X, Gu Q, Xu X, Ho PC.Protective effect ofperindopril on diabetic retinopathy is associated with decreased vascular endothelial growthfactor-to-pigment epithelium-derived factor ratio: Involvement of a mitochondria-reactiveoxygen species pathway . Diabetes. 2009 Apr;58(4):954-964.[2] Zheng Z, Chen H, Zhao H, Liu K, Luo D, Chen Y, Chen Y, Yang X, Gu Q, Xu X. Inhibitionof JAK2/STAT3-mediated VEGF upregulation under high glucose conditions by PEDFthrough a mitochondrial ROS pathway in vitro. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010Jan;51(1):64-71.[3] Li P, Xu X, Zheng Z, Zhu B, Shi Y, Liu K. Protective effects of rosiglitazone on retinalneuronal damage in diabetic rats. Curr Eye Res. 2011 Jul;36(7):673-679.[4] 李倩 , 郑志 , 顾青 , 许迅 . 培哚普利及高糖对 RF/6A 细胞 SOCS3 表达的影响 . 眼科新进展 .2011;03 期 :201-204.[5] 李倩 , 郑志 , 许迅 . 细胞因子信号抑制因子 3 与糖尿病视网膜病变 . 眼科新进展 .2010;30(8), 785-788.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1获奖 :- 230 -

轴突变性修复剂聚乙二醇和转基因嗅鞘细胞移植联合治疗视神经损伤的研究批准号 :30872829项目负责人 : 游思维所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学移植的嗅鞘细胞对损伤中枢神经的再生有着确定的促进作用 , 但这种作用受到轴突损伤后快速退缩变性与胶质瘢痕屏障作用的制约。本项目拟在申请人既往嗅鞘细胞移植修复视神经损伤的研究基础上 , 首次将轴突变性修复剂聚乙二醇用于转基因嗅鞘细胞和软骨素酶 ABC 联合修复视神经损伤的研究。将视神经横断后对接吻合 , 在损伤局部应用聚乙二醇延缓视神经变性和软骨素酶 ABC 特异性破坏胶质瘢痕的基础上 , 将具有特异性促进视神经再生作用的睫状神经营养因子转染的嗅鞘细胞植入损伤区 , 转基因嗅鞘细胞在视神经内存活、增殖并易于穿越胶质瘢痕而远距离迁移 , 损伤近侧段视神经内再生轴突沿嗅鞘细胞形成的 " 桥梁支架 ", 跨越损伤区到达靶组织上丘并形成突触结构 , 最终获得视觉功能的部分恢复。本研究对聚乙二醇修复视神经损伤以及嗅鞘细胞移植的理论研究、临床应用和可能的新型药剂的开发均有重要的价值。关键词 : 视神经损伤 ; 聚乙二醇 ; 嗅鞘细胞 ; 软骨素酶 ; 大鼠学科代码 :H1209发表论著 :[1] 刘玲 , 武明媚 , 游思维 . 地西泮对大鼠视神经切断后视网膜神经节细胞保护作用的研究眼科新进展 .2009;29(11):805-807.[2] 王涛 , 杨浩 , 游思维 . 两种不同纯度的嗅鞘细胞在体外存活与生长的比较 . 神经解剖学杂志 . 2009;25(5):541-545.[3] Yang H, Cui GB, Jiao XY, Wang J, Ju G, You SW. Thymosin-beta4 AttenuatesEthanol-induced Neurotoxicity in Cultured Cerebral Cortical Astrocytes by InhibitingApoptosis. Cell Mol Neurobiol. 2010 Jan;30(1):149-160.[4] Yang H, Qian XH, Cong R, Li JW, Yao Q, Jiao XY, Ju G, You SW. Evidence forheterogeneity of astrocyte de-differentiation in vitro: astrocytes transform into intermediateprecursor cells following induction of ACM from scratch-insulted astrocytes. Cell MolNeurobiol. 2010 Apr;30(3):483-491.[5] 丛锐 , 刁金美 , 游思维 . 臂丛神经下干不同损伤诱发神经病理性痛大鼠后足的痛行为学特征 . 中华手外科杂志 . 2010;26(3):137-140.[6] Wu MM, Fan DG, Tadmori I, Yang H, Furman M, Jiao XY, Young W, Sun D, You SW.Death of Axotomized Retinal Ganglion Cells Delayed after Intra-optic Nerve Transplantationof Olfactory Ensheathing Cells in Adult Rats. Cell Transplant. 2010;19(2):159-166.[7] Yang H, Cong R, Na L, Ju G, You SW. Long-Term Primary Culture of highly-Pure RatEmbryonic Hippocampal Neurons of Low-Density.Neurochem Res. 2010Sep;35(9):1333-1342.[8] Wang T, Cong R, Yang H, Wu MM, Luo N, Kuang F, You SW. Neutralization of BDNFattenuates the in vitro protective effects of olfactory ensheathing cell conditioned medium oninjured retinal ganglion cells. Cell Mol Neurobiol. 2011 Apr;31(3):357-364.- 231 -

[9] Irintchev A, Wu MM, Lee HJ, Zhu H, Feng YP, Liu YS, Bernreuther C, Loers G, You SW,Schachner M. Glycomimetic improves recovery after femoral injury in a non-human primateJ Neurotrauma. 2011 Jul;28(7):1295-1306.[10] 刘曌 , 王涛 . 游思维 . 不同穴位和频率的电针刺激对成年大鼠视神经切断后视网膜神经节细胞存活的作用 . 神经解剖学杂志 .2012;28(1):17-22.会议报告 : 国际大会 2 分组 0 国内大会 5 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 5 硕士 5C 型利钠肽基因治疗降眼压的实验研究批准号 :30872830项目负责人 : 刘旭阳所在单位 : 四川大学青光眼是一种不可逆性视神经病变 , 眼压升高是主要危险因素。因此 , 降眼压是目前青光眼治疗的主要手段。目前大多降眼压药存在费用高 , 疗效不理想 , 患者依从性差和副作用等问题。副作用中 , 以肾上腺素能 beta 受体阻滞剂的全身副作用尤为突出。在众多的降眼压药物研究中 , 利钠肽以其明显的降眼压效果曾受到重视。利钠肽可通过激活其在组织中的相应受体参与眼压调节 , 减少房水生成 , 但易被中性内肽酶水解而需反复给药以维持治疗效果 ; 但利钠肽角膜通透性差 , 只能通过结膜下、眼内注射进入眼内 ( 前者效差 );而反复眼内注射无临床实际意义 , 因此利钠肽未能广泛应用于青光眼的治疗。针对以上问题 , 本课题拟用基因治疗的方法进行利钠肽降眼压研究 , 用病毒载体将 C- 型利钠肽基因一次性导入大鼠及猴玻璃体腔 , 观察转基因的表达对眼压的影响及不良反应等 , 为利钠肽基因治疗青光眼打下基础 , 争取在人类第二大致盲眼病青光眼的治疗上有所突破。关键词 : 青光眼 ; 眼压 ; 利钠肽 ; 基因治疗学科代码 :H1204发表论著 :[1] Yu W, Cao G, Liu X, Qiu J, Ma J, Li N, Yu M, Yan N, Chen L, Pang IH. Evaluation ofMonkey Intraocular Pressure by Rebound Tonometer. Molecular vision. 2009;15:2196-2201.[2] Chen X, Yan N, Yun H, Sun J, Yu M, Yin H, Zhou J, Cao G, Li M, Liu X. Sequence analysisof MYOC and CYP1B1 genes in a Chinese pedigree of juvenile glaucoma withgoniodysgenesis Mol Vis. 2009; 15:1530-1536.[3] Liu X, Rasmussen CA, Gabelt BT, Kaufman PL. Glaucoma gene therapy: where arewe.Survey of Ophthalmol. 2009 ;54(4):472-86.[4] Yin H, Gong C, Shi S, Liu X, Wei Y, Qian Z. Toxicity Evaluation of Biodegradable andThermosensitive PEG-PCL-PEG Hydrogel as a Potential In Situ Sustained Ophthalmic DrugDelivery System. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 2010; 92:129-137.[5] Ma J, Yu W, Wang Y, Cao G, Cai S, Chen X, Yan N, Yuan Y, Zeng H, Fleenor DL, Liu X,Pang IH. Neuroprotective Effects of C-Type Natriuretic Peptide on Rat Retinal GanglionCells. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010. 51(7): 3544-3553.[6] Liu G, Zeng T, Yu W, Yan N, Wang H, Cai S, Pang IH, Liu X. Characterization of intraocular- 232 -

pressure responses of the Tibetan monkey (Macaca thibetana). Mol Vis. 2011; 17:1405-1413.[7] Chen J, Cai S, Yu w,Yan N, Tang L, Chen X,Liu X. Sequence Analysis of MYOC andCYP1B1 in a Chinese Pedigree of Primary Open angle Glaucoma. Mol Vis. 2011; 17:1431–1435[8] Wang L, Zhang X, Cai S, Ma J, Liu X, Wang N. Correlated or not: Glaucoma prevalenceand modern industrialization. Medical Hypotheses. 2011;76 (2) :220–224.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 5 硕士 3获奖 :压力相关 TRPC6 通道在青光眼神经性致盲眼病发病和防治中的作用批准号 :30872831项目负责人 : 张秀兰所在单位 : 中山大学青光眼是神经性致盲眼病 , 主要由慢性高眼压引起 , 最终视网膜神经节细胞 (RGCs) 凋亡、视功能丧失。然而 , 高眼压为何选择性损伤 RGCs 尚未清楚。本研究将首次在青光眼研究中引入 TRPC6 通道参与致病的机制。TRPC6 是一个新的、压力敏感钙离子通透膜通道蛋白。本研究通过三年的努力 , 证实了 RGCs 上有 TRPC6 的表达 ,TRPC6 通道激活具有青光眼RGCs 神经保护作用 , 这种保护作用是通过 BDNF 所介导 , 而 ProBDNF-P75NTR 信号通路促进RGCs 细胞死亡 ; 原发性开角型青光眼患者血液中 , 有 TRPC6 基因的表达差异。本项目的开展 , 将为青光眼发病机制的研究提供开创性的前期研究结果 , 也为进一步防治青光眼提供新的思路和药物干预靶点。关键词 :TRPC 通道 ; 青光眼 ; 视网膜神经节细胞 ; 凋亡 ;siRNA学科代码 :H1204发表论著 :[1] 王晓蕾 , 张秀兰 . 青光眼动物模型研究进展 . 实验动物科学 . 2010;27(01):45-52.会议报告 : 国际大会 7 分组 5 国内大会 11 分组 7培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 4获奖 :蛋白质积聚体毒性作用在原发性开角型青光眼发病中的分子机制研究批准号 :30872832项目负责人 : 卓业鸿- 233 -

所在单位 : 中山大学为阐明在原发性开角型青光眼发病过程中 , 突变型 MYOC 蛋白异常交联和堆积是否为最根本的分子、蛋白水平的病理变化 , 本课题组对另一家族性开角型青光眼家系 - - 普宁 1号家系 (PN.1) 进行研究 , 经全基因组扫描、单倍体型分析等发现其致病基因位于 1 号染色体的 TIGR/MYOC 基因 , 且存在 Pro370Leu 突变型 , 初步揭示了该家系独特表型背后的遗传本质以及疾病发生发展过程和 TIGR/MYOC 基因突变的可能相关机制。对正常人及青光眼患者小梁细胞进行内质网应激、压力损伤、氧化损伤等 , 探索其在蛋白及分子水平的不同反应 , 证实青光眼患者小梁细胞的高敏性及易损伤性。研究发现以上损伤所致的细胞凋亡可能是 POAG 患者眼小梁细胞数目减少的原因之一。为寻找有效的干预手段与药物靶点 , 进一步对细胞及动物体内的损伤进行保护研究 ,发现小分子肽类药物对小梁细胞及视神经具有靶向性保护作用 , 因其具有分子量小、制造工艺简单等优势 , 受体选择性小分子肽很有可能成为新型的视神经保护药物 , 本课题组系列研究内容为今后在分子水平及蛋白水平有效防治原发性开角青光眼提供新的理论依据。关键词 : 基因突变 ; 蛋白质积聚体 ; 毒性作用 ; 原发性开角青光眼学科代码 :H1204发表论著 :[1] Wei YT, Li YQ, Bai YJ, Wang M, Chen JH, Ge J, Zhuo YH. Pro370Leu myocilin mutation ina Chinese pedigree with juvenile-onset open angle glaucoma. Mol Vis. 2011Jun;17(1):1449-1456.[2] Chai F, Luo R, Li Y, Bai Y, He Y, Wei Y, Yan Z, Ge J, Zhuo Y. Down-regulation of GRP78in human glaucomatous trabecular meshwork cells. Mol Vis. 2010 Jun 17;16:1122-1131.[3] Yang X, Liu B, Bai Y, Chen M, Li Y, Chen M, Wei Y, Ge J, Zhuo Y. Elevated pressuredownregulates ZO-1 expression and disrupts cytoskeleton and focal adhesion in humantrabecular meshwork cells. Mol Vis. 2011;17:2978-2985.[4] Zhuo YH, He Y, Leung KW, Hou F, Li YQ, Chai F, Ge J. Dexamethasone disrupts intercellularjunction formation and cytoskeleton organization in human trabecular meshwork cells. MolVis. 2010 Jan 16;16:61-71.[5] Bai YJ, Li YQ, Chai F, Yang XJ, Zhang YC, Wei YT, Huang JJ, Ge J, Zhuo YH. Comparisonof FP-7 and S-2 Ahmed glaucoma valve implantation in refractory glaucoma patients forshort- term follow-up. Chin Med J (Engl). 2011 Apr;124(8):1128-1133.[6] Yan ZC, Bai YJ, Tian Z, Hu HY, You XH, Lin JX, Liu SR, Zhuo YH, Luo RJ. Anti-proliferation effects of Sirolimus sustained delivery film in rabbit glaucoma filtration surgery.Mol Vis. 2011;17:2495-2506.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 7 分组 3培养人才 : 博士后 1 博士 4 硕士 1获奖 :[1] 2010 年国家科技进步二等奖 .[2] 2009 年教育部科技进步一等奖 .[3] 2009 年广东省科学技术奖励一等奖 .- 234 -

α 晶状体蛋白促进视神经再生的分子机制研究批准号 :30872833项目负责人 : 王一所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学视神经损伤后再生是眼科临床未解难题 , 也是眼科基础研究难点和热点。近年发现晶状体损伤后释放的物质能显著促进视神经再生 , 并与上丘形成功能性突触联系。我们前期研究证明 :α 晶状体蛋白是晶状体来源的促进视神经再生的主要作用物质 , 且能结合在视网膜神经节细胞 (RGCs) 胞膜上 , 并拮抗髓鞘抑制物的阻碍作用促进 RGCs 突起生长。因此 , 我们提出 RGCs 膜上存在 α 晶状体蛋白受体 ,α 晶状体蛋白通过与其特异性受体结合 , 作用于再生抑制物信号传导通路关节点 "RhoA/ROCK" 促进视神经再生的假说。拟用受体结合和竞争抑制实验、光学生物传感技术、亲和层析、肽指纹质谱分析、蛋白质测序等方法 , 探寻并获得 RGCs 膜上的 α 晶状体蛋白受体 , 并通过在体和离体实验 , 研究 α 晶体蛋白对RhoA/ROCK 及下游物质活化和生长锥萎缩情况的影响 , 探讨 α 晶体蛋白促进视神经再生的分子机制。为视神经再生研究寻求突破 , 为新药设计奠定基础。关键词 :α 晶状体蛋白 ; 受体 ; 视网膜神经节细胞 (RGCs); 神经再生 ;RhoA/ROCK学科代码 :H1202发表论著 :[1] Wang YH, Wang DW, Wu N, Wang Y, Yin ZQ. Alpha-Crystallin Promotes Rat AxonalRegeneration Through Regulation of RhoA/Rock/Cofilin/MLC Signaling Pathways. J MolNeurosci. 2012 Jan;46(1):138-44.[2] Wang YH, Wang DW, Wu N, Wang Y, Yin ZQ. Alpha-Crystallin Promotes Rat RetinalNeurite Growth on Myelin Substrates in vitro. Ophthalmic Res. 2011;45(3):164-168.[3] 王兴利 , 王一 . 外源性 α- 晶状体蛋白作用于视网膜神经节细胞的定位研究 . 中华实验眼科杂志 . 2009; 29(8):681-684.[4] 应希 , 王一 , 曾玉晓 , 吴燕 . 大鼠视网膜神经节细胞中内源性 alpha 晶状体蛋白的表达及其变化规律 . 眼科新进展 . 2010; 30(9):815-818.[5] Wang Y, Wang Y, Wang D, Wu N, Liu D, Yin Z, Zhu M. In vitro Study of the Effects of LensExtract on Rat Retinal Neuron Survival and Neurite Outgrowth. Ophthalmic Res. 2009;42 (1):29- 35.[6] Wu N, Wang YH, Zhao HS, Liu DN, Ying X, Yin ZQ, Wang Y. alpha-CrystallinDownregulates the Expression of TNF-alpha and iNOS by Activated Rat Retinal Microglia invitro and in vivo. Ophthalmic Res. 2009;42(1):21-28.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 2- 235 -

获奖 :Lumican 基因突变与病理性近视的相关性研究批准号 :30872834项目负责人 : 张丰菊所在单位 : 首都医科大学目的探讨光蛋白聚糖基因 Lumican 与病理性近视的相关性。方法一方面 , 收集病理性近视患者血样 , 行 Lumican 和 LAMA1 基因单核苷酸多态性的病例对照研究 , 并分析其在基因编码区及邻近区域的变异情况及与病理性近视的相关性 ; 收集巩膜组织标本 , 利用RT-PCR 法分析 Lumican 基因在巩膜组织中转录及表达水平 ; 另一方面针对 Lumican 基因构建可疑突变位点的基因敲入动物模型 , 检测动物眼巩膜中 Lumican、LAMA1 基因编码蛋白的表达水平及巩膜组织的结构变化特征等。结果在 LAMA1 基因 promoter 区的一个阳性SNP 位点 rs2089760, 及位于 LUM 基因 5'UTR 区的 SNP 位点 rs3759223 与病理性近视相关 ;而巩膜组织中 LUM 基因转录水平的研究发现病理性近视合并开角型青光眼与单纯开角型青光眼组中 LUM 基因的转录水平无显著性差异 , 但以上两组均与正常对照组间存在显著性差异 ; 基因敲入动物模型实验的观察结果显示 , 转基因阳性鼠较阴性对照组眼轴有所延长 ,其后极部巩膜组织变薄。结论 lumican 基因突变与病理性近视发病机制可能存在相关性。关键词 : 病理性近视 ;Lumican 基因突变 ; 人巩膜组织 ; 基因敲入 ; 动物学科代码 :H1206发表论著 :[1] Zhang F, Zhu T, Zhou Z, Wu Y, Li Y.Association of Lumican Gene with Susceptibility toPathological Myopia in the Northern Han Ethnic Chinese. J Ophthalmol. 2009;2009:514306.[2] Zhao YY, Zhang FJ, Zhu SQ, Duan H, Li Y, Zhou ZJ, Ma WX, Li Wang N.The association ofa single nucleotide polymorphism in the promoter region of the LAMA1 gene withsusceptibility to Chinese high myopia. Mol Vis. 2011 Apr;17:1003-1010.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 3获奖 :Bcl-2 转基因小鼠再生视神经向外侧膝状体的生长导向研究批准号 :30872835项目负责人 : 杨柳所在单位 : 北京大学- 236 -

视神经再生后轴突在脑内的正常投射是一个非常复杂的过程 , 应该有很多导向分子的参与 , 本研究的目的就是初步探讨 Slit/Robo 对视神经轴突生长导向中的作用。研究主要探索 Slit/Robo 在神经轴突损伤后的表达及可能的导向作用。研究首先在成年野生型小鼠视神经损伤模型上 , 分析视神经的轴突和胶质细胞的改变 , 并通过荧光染色法标记 Slit-1、Robo-2 在视神经、视交叉、视束的表达 , 以期发现其损伤后表达的改变 , 从而进一步研究其导向作用。结果发现 , 损伤后视神经、视交叉、双侧视束均未见阳性表达。Q-PCR 示损伤视神经的 Robo-2 表达量早期降低 , 随后呈增高趋势。由于 Slit/Robo 途径并未如项目预期 , 我们随后开始探索了另一种导向因子 Ephrin b2及其受体 EphB1 在视神经损伤中的作用。我们已完成 Bcl-2 小鼠品系的维持 , 建立了 Bcl-2转基因小鼠视神经损伤模型 , 并探讨导向分子在转基因小鼠中的表达。由于视神经再生导向的研究属于探索性 , 这方面仍需深入艰难的研究。本研究增加了视网膜疾病神经损害和保护的研究内容 , 利用米诺环素等进行视网膜脱离和视网膜色素变性的光感受器细胞凋亡的研究。关键词 : 视神经 ; 再生 ; 小鼠 ;Slit/Robo;Eph-B1学科代码 :H1204发表论著 :[1] 刘丹 , 杨柳 . 建立小鼠视神经损伤模型的实验研究 . 现代预防医学 . 2010;23(18):3414-3415.[2] 魏文斌 , 朱瑞琳 , 杨柳 . Situation of low vision and blindness in China and their prevention.中华医学杂志 . 2011;124(8):1123-1127.[3] 彭媛 , 杨柳 . 视神经视网膜疾病的神经保护 . 中华临床医师杂志 . 2011;05:1262- 1265.[4] 彭媛 , 杨柳 . 丙戊酸钠对视网膜色素变性小鼠光感受器细胞的保护作用 . 标记免疫分析与临床 . 2009;16(03):156-159.[5] Yang L, Kim JH, Kovacs KD, Arroyo JG, Chen DF. Minocycline inhibition of photoreceptordegeneration. Arch Ophthalmol. 2009 Nov;127(11): 1475- 1480.会议报告 : 国际大会 3 分组 3 国内大会 5 分组 5培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 1获奖 :OREBP 对晶状体纤维细胞分化过程中 AQP0 C- 末端与 Cx 细胞内段的相互作用的影响批准号 :30872836项目负责人 : 张劲松所在单位 : 中国医科大学白内障作为一种常见的年龄相关性疾病 , 是全身器官功能老化、蛋白质变性引起的衰老相关疾病的代表。年龄相关性白内障的致病机制是国际上眼科学研究领域的前沿和热点。缝隙连接介导的细胞间通讯 (GJIc) 在白内障发病过程中有重要作用。本项目从渗透压- 237 -

反应元件蛋白 (OREBP) 与缝隙连接蛋白 43(Cx43) 之间的关系、DNA 损伤对 GJIC 和 Cx43的影响以及晶状体正常蛋白质谱分析三个角度研究缝隙连接蛋白、渗透压反应元件蛋白在晶状体细胞中的重要作用 , 利用蛋白质谱分析、蛋白电泳、定量 PCR 等分子生物学研究方法 , 发现了 OREBP 对 Cx43 的调控作用及 UVA 照射制作的 DNA 损伤模型中观察到的 DNA 损伤可以梯度性地减少细胞内的缝隙连接介导的细胞间通讯、Cx43 从蛋白水平及 RNA 水平的表达都下降等结果。并且利用蛋白质谱分析 , 鉴定出人晶状体蛋白质 574 种 , 其中包括 Cx43等缝隙连接通道蛋白 , 还有许多未知蛋白和蛋白亚型被鉴定出。这些实验结果在不同层面为阐明白内障的发病机制提出了不同的实验依据和理论依据。关键词 : 缝隙连接介导的细胞间通讯 ; 缝隙连接蛋白 ; 渗透压反应元件蛋白 ;学科代码 :H1202发表论著 :[1] Zhao J, Kawai K, Wang H, Wu D, Wang M, Yue Z, Zhang J, Liu YH. Loss of Msx2 FunctionDown Regulates the FoxE3 Expression and Results in Anterior Segment DysgenesisResembling Peter’s Anomaly American Journal of Pathology. Am J Pathol. 2012 Apr13[Epub ahead of print].[2] Yao Z, Yu H, Xuan D, Sha Q, Hu J, Zhang J. Analysis of protein-protein interactions andproteomic profiles of normal human lenses. Curr Eye Res. 2010 Jul;35(7):605-619.[3] Wang XL, Yu T, Xia DZ, Zhang JS, Yan QC, Luo YH.Measurement of retinal nerve fiberlayer thickness in optic atrophy eyes of patients with optic neuritis using optical coherencetomography. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2010 Jul;248(7):1013-1018.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 2获奖 :玻璃体切除术后白内障发病机制及 N- 乙酰半胱氨酸治疗的研究批准号 :30872837项目负责人 : 严宏所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学玻璃体切除术 ( 玻切 ) 在玻璃体视网膜疾病和眼外伤的救治过程中 , 对提高视力 , 保护眼球功能等具有重要的作用 , 已得到了广泛应用。但是玻切术后核性白内障的发生率明显增高 , 造成视力的再次严重损害。玻切术后晶状体周围氧分压升高诱导的氧化损伤可能在玻切术后白内障发生中起重要的作用 , 但其确切的发病机制仍不清楚 , 从而限制了防治方法的研究。我们将利用在高氧离体和玻切术后晶状体变化以及抗氧化药物 (N- 乙酰半胱氨酸 ) 对白内障抑制作用的实验结果基础上 , 研究在氧化损伤环节中 , 以谷胱甘肽为核心 , 谷胱甘肽还原酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、Na+-K+ATP 酶的活性及 mRNA 和蛋白质表达 ,α - 晶状体蛋白分子伴侣功能的作用 ; 采用蛋白质组学方法 , 研究高氧诱导晶状体蛋白质的变化 , 明确它们之间的相互关系 ; 并研究 N- 乙酰半胱氨酸对玻切术后晶状体改变的抑- 238 -

制作用 , 这对阐明玻切术后白内障发生的关键环节和药物防治奠定理论基础和提供新思路。关键词 : 白内障 ; 玻璃体切除手术 ; 高氧 ;N- 乙酰半胱氨酸学科代码 :H1202发表论著 :[1] Liu, Xiao-Cui, Wang, Ping,Yan, HongA rabbit model to study biochemical damage to thelens after vitrectomy:Effects of N-acetylcysteine. Experimental Eye Research. 2009 Jul;88(6),1165- 1170.[2] Wang, Ping, Liu, Xiao-Cui, Yan, Hong, Li, Ming-Yong. Hyperoxia-induced lens damage inrabbit: protective effects of N-acetylcysteine. Molecular Vision. 2009 Dec15(312-14);2945-2952.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 4获奖 :自发性视网膜退行性变大鼠视觉信号回路间的相互影响批准号 :30872838项目负责人 : 张作明所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学视觉信息包含视锥与视杆两种类型的信号回路共同作用 , 而这两种系统的相互作用机制十分复杂。以往的视网膜退行性变疾病动物模型视网膜形态常有明显改变 , 不利于对视网膜神经回路的研究。我们实验室的先天性静止性夜盲 (congenital stationary nightblindness, CSNB) 大鼠和视网膜锥体细胞失功能 (retinal cone dysfunction, RCD) 大鼠具有基本正常的视网膜结构 , 主要表现为功能的障碍。利用这 2 种大鼠 , 对视网膜电生理、细胞电生理、突触蛋白表达等进行了研究 , 并对 RCD 大鼠致病基因进行了鉴定和基因治疗。结果表明 ,CSNB 大鼠视网膜超微结构发生了改变 , 外网状层变薄 , 水平细胞、ribon 小体数目减少 , 突触囊泡蛋白等表达下降 ; 视杆双极细胞 L- 钙通道功能降低 , 影响终末神经递质释放 ; 神经节细胞场电位下降 ,ON/OFF 型细胞比例改变。RCD 大鼠致病基因为 Opn1mw, 该突变使中波长视蛋白表达量下降 ; 而 RCD 视网膜结构没有明显改变 ; 基因治疗后 RCD 大鼠出现明适应 ERG 波形。本项目研究加深了对视网膜神经信号回路和 2 种疾病发病机制的认识 , 并为进一步研究创造了条件。关键词 : 视网膜变性 ; 信号回路 ; 模式大鼠学科代码 :H1206- 239 -

发表论著 :[1] Gu Y, Wang L, Zhou J, Guo Q, Liu N, Ding Z, Li L, Liu X, An J, Yan G, Yao L, Zhang Z. Anaturally-occurring mutation in Cacna1f in a rat model of congenital stationary nightblindness. Mol Vis. 2008 Jan;14:20-28.[2] Xie B, Nakanishi S, Guo Q, Xia F, Yan G, An J, Li L, Serikawa T, Kuramoto T, Zhang Z. Anovel middle-wavelength opsin (M-opsin) null-mutation in the retinal cone dysfunction rat.Exp Eye Res. 2010 Jul;91(1):26-33.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 5 硕士 5获奖 :C3 基因抗青光眼滤过术后瘢痕化的实验研究批准号 :30872839项目负责人 : 陈晓明所在单位 : 四川大学滤过术是青光眼的主要疗法之一 , 而术后滤过区瘢痕化将影响长期的降眼压效果。目前大多数抗瘢痕化的药物均存在疗效、依从性和毒副作用等问题。研究表明 ,Tenon 氏筋膜成纤维细胞肌动蛋白及其相关细胞连接在瘢痕形成中起关键作用 , 降解肌动蛋白可抑制瘢痕化。针对 Tenon 氏筋膜肌动蛋白细胞骨架的基因治疗可望相对长期改变该组织构形 , 抑制术后瘢痕化。本课题在前期工作基础上开展外酶 C3 转移酶 (C3) 基因治疗滤过术后瘢痕化的动物实验研究 :(1) 通过猫慢病毒载体将 C3 基因导入滤过术后兔眼的滤过区 , 观察组织瘢痕化、房水流畅度和眼压的变化情况 ;(2) 观察转基因表达对眼的副作用 ;(3) 通过组织学 ( 含超微结构 ) 研究 , 阐明基因治疗抗瘢痕化的作用机理及可能的副作用。本项目率先探讨基因治疗抗滤过术后兔眼的滤过区瘢痕化 , 为基因治疗抗滤过术后瘢痕化的临床应用打下基础。关键词 : 滤过手术 , 瘢痕化 , 肌动蛋白 , 外酶 C3 转移酶 , 基因治疗学科代码 :H1204发表论著 :[1] Chen X, Yan N, Yun H, Sun J, Yu M, Yin H, Zhou J, Cao G, Li M, Liu X. Sequence analysisof MYOC and CYP1B1 genes in a Chinese pedigree of juvenile glaucoma withgoniodysgenesis Mol Vis. 2009 Aug;15:1530-1536.[2] Association of tumour necrosis factor alpha (TNF-alpha) polymorphisms with Graves' disease:A meta-analysis. Clin Biochem. 2008 Jul;41(10-11):881-886..[3] 吕仲平 , 陈晓明 . 华西医院青光眼住院患者构成及其变化 . 国际眼科杂志 . 2011;11期 :1953-1956.[4] 崔敏 , 陈晓明 . 视盘损伤可能度和杯盘比与 POAG 视野缺损的关系 . 国际眼科杂志 .- 240 -

2011;04 期 : 617-619[5] 崔敏 , 陈晓明 , 邓应平 . 对比视盘损伤可能度、杯盘比和青光眼可能性评分诊断原发性开角型青光眼的能力 . 眼科新进展 . 2011;04 期 :357-360.[6] 傅方 , 陈晓明 , 沈建通 , 周荣乐 .Tono-pen 眼压计的可重复性和准确性研究 . 眼科新进展 .2011;01 期 : 78-80.[7] 崔敏 , 陈晓明 , 黄永志 . 视盘损伤可能度与原发性开角型青光眼视盘结构和功能的关系国际眼科杂志 . 2010;06 期 :1140-1142.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 0获奖 :突变型 EYA1 蛋白在眼发育中的致病机理批准号 :30872840项目负责人 : 申煌煊所在单位 : 中山大学EYA1 蛋白虽然是眼发育的关键因子之一 , 但是迄今为止还没有文献报道 EYA1 突变会导致眼发育异常。在两例眼发育异常患者中 , 申请者却筛查到其 EYA1 基因发生了突变 ; 成功分离了一个与眼发育相关的蛋白复合体 ( 以下简称蛋白 A), 发现 LSD1( 第一个去甲基化酶 ) 是其新组分 ; 另外 , 申请者的研究还改变了有关发育的某些传统观念。基于这些基础 , 本课题拟用分析蛋白 A 的方法 ( 蛋白复合体沉淀 ,protein complexpulldown), 以突变型 EYA1 蛋白为主要研究对象 , 分离其蛋白质复合体 , 了解突变型与正常 EYA1 蛋白复合体组分之间的差别。利用 EYA1 蛋白已有的研究基础 ( 自我磷酸化及磷酸化下游底物 ), 通过分析蛋白复合体组分在眼发育中的功能 , 揭示传导的信号通路 , 阐明眼发育异常的机制 , 为针对性的治疗方案提供分子依据关键词 :EYA1 蛋白 ; 蛋白复合体 ; 基因突变 ; 病变机理学科代码 :H1211发表论著 :[1] Zha X, Hu Z, He S, Wang F, Shen H, Zhang H. TSC1/TSC2 inactivation inhibits AKTthrough mTORC1-dependent up-regulation of STAT3-PTEN cascade. Cancer Lett. 2011 Dec27;313(2):211-217.[2] Ma J, Meng Y, Kwiatkowski DJ, Chen X, Peng H, Sun Q, Zha X, Wang F, Wang Y, Jing Y,Zhang S, Chen R, Wang L, Wu E, Cai G, Malinowska-Kolodziej I, Liao Q, Liu Y, Zhao Y,Sun Q, Xu K, Dai J, Han J, Wu L, Zhao RC, Shen H, Zhang H. Mammalian target ofrapamycin regulates murine and human cell differentiation throughSTAT3/p63/Jagged/Notch cascade. J Clin Invest. 2010 Jan;120(1):103-114.[3] Gu Y, Lin S, Li JL, Nakagawa H, Chen Z, Jin B, Tian L, Ucar DA, Shen H, Lu J, HochwaldSN, Kaye FJ, Wu L.Altered LKB1/CREB-regulated transcription co-activator (CRTC)- 241 -

signaling axis promotes esophageal cancer cell migration and invasion. Oncogene. 2012 Jan26;31(4):469-479.[4] Chen J, Kesari S, Rooney C, Strack PR, Chen J, Shen H, Wu L, Griffin JD.Inhibition ofnotch signaling blocks growth of glioblastoma cell lines and tumor neurospheres. GenesCancer. 2010 Aug;1(8):822-835.[5] Jin B, Shen H, Lin S, Li JL, Chen Z, Griffin JD, Wu L. The Mastermind-like 1 (MAML1)Co-activator Regulates Constitutive NF-κB Signaling and Cell Survival. J Biol Chem.2010 May 7;285(19):14356-1465.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 7获奖 :12 眼科学青年科学基金项目Muller 细胞在视网膜神经节细胞继发性损伤中作用的实验研究批准号 :30700921项目负责人 : 李树宁所在单位 : 首都医科大学本研究目的是探讨 Müller 细胞是否在视网膜神经节细胞继发性损伤中发挥作用。本研究第一部分建立视神经切断模型 , 造成原发性视网膜神经节细胞损伤 , 证实了神经节细胞凋亡 , 可以激活 Müller 细胞 , 表现为 GFAP 表达增加 ,TNF-α 表达增加 , 代谢谷氨酸的功能增强 , 其谷氨酸转运体表达增强而谷氨酰胺合成酶表达无明显增加。第二部分通过自行设计的大鼠视神经切断模具 , 制作了重复性好的大鼠视神经部分切断模型 , 为进一步研究视网膜神经节细胞继发性损伤创造基础。第三部分通过体外培养 Müller 细胞和视网膜神经节细胞系 RGC-5, 证实了 Müller 细胞只表达 Sortilin,RGC-5 同时表达 P75 和 Sortilin, 使用在胚胎发育中可导致神经元细胞凋亡的神经营养因子前体 ProNGF 孵育 Müller 细胞和RGC-5, 均无凋亡发生 , 其中 Müller 细胞经过 ProNGF 孵育后 , 分泌 TNF-α 较对照组增加。根据以上结果我们得出结论 : 视网膜神经节细胞损伤可以激活 Müller 细胞 , 激活的 Müller细胞可过多分泌 TNF-α , 这可能是导致神经节细胞继发性损伤的机制。关键词 :Müller 细胞 ; 神经节细胞 ; 继发性损伤学科代码 :H1205发表论著 :- 242 -

会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2获奖 :新的 CMN 致病基因的定位与克隆批准号 :30800615项目负责人 : 肖学珊所在单位 : 中山大学先天性运动性眼球震颤 (congenital motor nystagmus, CMN) 是以双眼不自主震颤运动为特征的疾病 , 推测由脑部控制眼球运动的神经网络异常有关 , 属单基因遗传病 , 分子机制不明。我们对常染色体显性遗传 CMN 大家系进行了全基因组扫描连锁分析和全外显子组测序分析 , 结果将两个 CMN 大家系分别定位在同一染色体区域 (1q31), 我们所发现的这个新的 CMN 基因位点相关结果部分已在国际知名期刊发表、部分待发表。本研究为揭示 CMN致病基因及其致病机制提供了重要基础 , 后续研究正在继续进行。我们还对伴眼球震颤相关眼病进行了研究。已发表标注本基金资助的国际 SCI 期刊论文 6 篇 ( 其中第一或通讯作者4 篇 )。关键词 : 先天性运动性眼球震颤 ; 定位 ; 致病基因 ; 机制学科代码 :H1208发表论著 :[1] Xiao X, Li S, Zhang Q.Microphthalmia, late onset keratitis, and iris coloboma / aniridia in afamily with a novel PAX6 mutationOphthalmic Genet. 2011 Dec 15. [Epub ahead of print][2] Xiao X, Li S, Guo X, Zhang Q.A novel locus for autosomal dominant congenital motornystagmus mapped to 1q31-q32.2 between D1S2816 and D1S2692. Hum Genet Hum Genet.2012 May;131(5):697-702.[3] Xiao X, Guo X, Jia X, Li S, Wang P, Zhang Q.A recurrent mutation in GUCY2D associatedwith autosomal dominant cone dystrophy in a China family Mol Vis. 2011;17:3271-3278.[4] Zhang X, Wang P, Li S, Xiao X, Guo X, Zhang Q. Mutation spectrum of PAX6 in Chinesepatients with aniridia.Mol Vis. 2011;17:2139-2147.[5] Xiao X, Li W, Wang P, Li L, Li S, Jia X, Sun W, Guo X, Zhang Q.Cerulean cataract mappedto 12q13 and associated with a novel initiation codon mutation in MIP Mol Vis. 2011;17:2049- 2055.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 0获奖 :- 243 -

重组腺相关病毒表达 galectin-9 干预 Tim-3 信号通路诱导角膜移植免疫耐受批准号 :30801260项目负责人 : 胡维琨所在单位 : 华中科技大学角膜移植排斥反应是角膜移植手术失败的首要原因 , 高危患者排斥率高达 60% 以上。研究证实角膜移植排斥反应主要是 Th1 细胞介导的免疫应答 ,Tim-3 是 Th1 细胞的特异性标志 , 而 galectin-9 是 Tim-3 配体 (Tim-3L)。本项目建立高危角膜移植排斥反应小鼠模型 ,发现 Tim-3 和 galectin-9 的表达在角膜移植排斥反应中发生动态改变 , 证实 Tim-3/galectin-9 通路可作为角膜排斥反应调控新靶点。进一步构建 rAAV-galectin-9, 使角膜植片高表达 galectin-9, 激活 Tim-3/galectin-9 信号通路 , 诱导角膜移植特异性免疫耐受 ,明显延长角膜植片存活时间 , 解决排斥反应 , 使角膜植片长期存活并保持透明 , 而采用Tim-3 抗体则促进角膜移植排斥反应 , 角膜存活时间明显缩短。同时在分子、细胞和整体水平阐明 Tim-3/galectin-9 通路作用机制 , 包括 Th1/Th2 细胞平衡、CD4+CD25+ 调节 T 细胞等。关键词 :Tim-3;galectin-9;Th1 细胞 ; 角膜移植 ; 免疫耐受学科代码 :H1201发表论著 :[1] Wei-Kun Hu, Xiao-Xia Lu, Shou Yang, Guo-Peng Xu, Fen Lan, Shi-Xin Chen, Wang Ni,Wei-Ning Xiong. Expression of the Th1-specific cell-surface protein Tim-3 increases in amurine model of atopic asthma. Sheng-Dao Xiongournal of Asthma. 2009 November; 46(9):872-877.[2] Wei-Kun Hu, Rong Liu, Han Pei, Bin Li. Endoplasmic reticulum stress-related factors protectagainst diabetic retinopathy. Experimental Diabetes Research. Accepted, 2012, doi: 10.1155/2012 /507986.[3] Lu Xiao-Xia, Hu Wei-Kun, Xiong Sheng-Dao, Xu Guo-Peng, Lan Fen. Tim-3mRNAexpression in peripheral blood lymphocytes from asthmatic patients. Frontiers of Medicine inChina. 2009 June; 3(2):187-190.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :骨髓来源细胞在角膜真菌感染早期免疫反应中的作用的研究- 244 -

批准号 :30801261项目负责人 : 张永明所在单位 : 浙江大学真菌性角膜炎感染早期病原的识别和清除以及免疫反应启动机制目前尚未阐明。本项目主要利用荧光标记真菌孢子的 eGFP 嵌合体小鼠角膜真菌感染模型 , 研究角膜骨髓来源细胞在角膜中的募集 ; 通过免疫荧光、免疫组化、ELISA 和 RT-PCR 分析不同时间点角膜和引流淋巴结内 eGFP+ 细胞的分布和分型 , 特异性的 T 细胞增殖反应以及相关趋化因子和细胞因子的表达。研究发现在角膜真菌感染早期角膜内可见骨髓来源细胞在感染初期即募集至角膜感染部位 , 免疫荧光和免疫组化染色可见 CD45+CD11b+ 细胞以及 MHC-II 的表达改变 , 在角膜真菌感染早期角膜内可检测到 CXCL1 和 CXCL2 及其 mRNA 表达及上调 , 对小鼠颌下淋巴结进行检测未发现 eGFP+ 骨髓来源细胞的改变 , 淋巴结内未出现的细胞增殖反应 ,定量 RT-PCR 技术检测 IL2、IL12、IFNγ 、IL4、IL10、IL6 等细胞因子 mRNA, 未发现Th1/Th2 特异性的细胞因子 mRNA 表达改变。研究结果表明骨髓来源细胞在角膜真菌感染早期主要参与了病原的识别、炎症趋化因子的分泌从而启动机体免疫反应 , 角膜角膜真菌感染早期并未诱发 Th1/Th2 特异性的免疫反应。关键词 : 骨髓来源细胞 ;eGFP 嵌合体小鼠 ; 角膜真菌感染 ; 中性粒细胞趋化因子学科代码 :H1201发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :羊膜干细胞在眼表碱烧伤修复中作用的研究批准号 :30801262项目负责人 : 刘敬波所在单位 : 温州医学院眼表上皮干细胞破坏和缺失是造成角膜严重碱烧伤致盲的关键因素。羊膜是目前减轻和治疗这类病变的重要方法之一。为充分发挥羊膜在眼表创伤修复中的重要作用 , 参考最新的羊膜干细胞筛选、鉴定、诱导、分化等研究成果 , 结合我们前期建立人角膜缘上皮细胞株、诱导胚胎干细胞向角膜上皮细胞定向分化、眼表生物膜构建和移植的工作积累 , 本研究旨在建立并诱导羊膜干细胞向角膜上皮细胞定向分化 , 并以羊膜为载体重新构建成富含干细胞的羊膜植片 , 移植治疗眼表碱烧伤。通过印迹细胞学、免疫组织化学、分子生物学等手段检测和评价移植后细胞的表型变化、功能重建能力和特点 , 了解羊膜干细胞、羊膜基质、内含生长因子在重建眼表中的作用 , 提出相应的处理方法 , 以期建立综合治疗严重眼表碱烧伤的新方法- 245 -

关键词 : 羊膜干细胞 ; 角膜缘干细胞缺乏症 ; 碱烧伤 ; 眼表重建 ; 再生医学学科代码 :H1201发表论著 :[1] New grading system to improve the surgical outcome of multirecurrent pterygia Jingbo Liu, YaoFu, Ying Xu, Scheffer CG TsengArch Ophthalmol., 2012 Jan; 130(1): 39-49.[2] Oral mucosal graft with amniotic membrane transplantation for total limbal stem cell deficiency.Jingbo Liu, Hosam Sheha, Yao Fu, Matthew Giegengack, Scheffer CG TsengAm JOphthalmol, 2011 Nov; 152(5): 739-747.[3] Update on amniotic membrane transplantation. Jingbo Liu, Hosam Sheha, Yao Fu, Lingyi Liang,Scheffer CG Tseng Expert Rev Ophthalmol, 2010 Oct; 5(5): 645-661.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :角膜内皮细胞压力调控机制的研究批准号 :30801263项目负责人 : 袁进所在单位 : 中山大学角膜内皮细胞是位于角膜后表面的单层细胞 , 其特有的液体屏障和活跃的离子泵功能对于维持角膜的半脱水状态、正常厚度及透明性起着关键作用。本研究拟通过自加压三维培养系统 , 观察不同压力梯度下角膜内皮细胞的形态、活性以及生物学功能的变化规律 ,分析正常眼压对角膜内皮细胞活性的正向调节作用以及调节通路 , 筛选优化细胞功能的理想压力 , 同时探讨高压力下角膜内皮细胞损伤的病理机制和启动环节。理想压力下优化的角膜内皮细胞接种于脱细胞生物载体 , 构建工程化角膜内皮移植膜 , 检测其物理特性、组织结构以及生物学功能 , 综合评价三维仿生培养技术的效率。最终阐明角膜内皮细胞的压力调控机制 , 为建立一种全新的角膜内皮细胞仿生培养体系提供实验依据和理论依据 , 同时也可为青光眼治疗策略中的内皮细胞保护提供潜在的药物干预靶点。关键词 : 角膜内皮细胞 ; 压力 ; 三维仿生培养 ; 组织工程学科代码 :H1201发表论著 :[1] 袁进 , 粱玲玲 , 胡晓琴 , 周世有 , 陈家祺 , 幸正茂 . 角膜内皮细胞压力调节培养的初步研究 . 中华眼科杂志 . 2011; 47(4): 347-352.[2] 梁玲玲 , 袁进 , 陈家祺 , 廖洪斐 , 幸正茂 , 周世有 . 角膜内皮细胞高压力损伤机制的实验研究 . 眼科 . 2011; 25(3): 155-160.[3] 梁玲玲 , 袁进 , 廖洪斐 , 石浔 . 角膜内皮细胞压力调控的研究进展 . 国际眼科纵览 , 2009;33(6), 371-374.- 246 -

会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1获奖 :抗原特异性调节性 T 细胞过继转移诱导高危角膜移植免疫耐受的实验研究批准号 :30801264项目负责人 : 接英所在单位 : 首都医科大学本研究通过获取供体小鼠角膜主要可溶性抗原 , 作用于树突状细胞 , 使之具有抗原特异性 , 采用免疫磁珠分离 CD4+CD25+ 调节性 T 细胞 , 与负载供体角膜特异性抗原的树突状细胞相互作用 , 获得抗原特异性调节性 T 细胞 , 在体外进行培养扩增 , 发现其在第 7 天增殖达到高峰 ,CD25 和 Foxp3 分子高表达 , 而且对于效应性 T 细胞有明显的抑制功能。以C57BL/6 小鼠为供体 ,BALB/L 小鼠作为受体 , 建立小鼠角膜移植动物模型 , 将获得的调节性 T 细胞通过球后注射的方式过继转移给受体小鼠 , 观察对角膜植片存活时间的影响 , 结果表明新鲜分离的和体外诱导的调节性 T 细胞均能够明显延长角膜植片的存活时间 , 体外诱导的调节性 T 细胞具有更明显的疗效 , 组织病理学可以看到调节性 T 细胞治疗组角膜植片混浊水肿明显减轻。通过绿色荧光蛋白 CFSE 标记调节性 T 细胞 , 继而将其球后注射受体小鼠 , 发现在小鼠脾脏、外周血和下颌淋巴结中均可以发现标记的调节性 T 细胞 , 而外周血中的细胞数量明显升高。本研究表明经过体外分离、培养、扩增的供体角膜抗原特异性的调节性 T 细胞球后注射 , 可以发挥全身免疫调节作用 , 明显的抑制角膜移植免疫排斥反应 , 具有一定的临床应用前景。关键词 : 调节性 T 细胞 ; 抗原特异性 ; 角膜移植学科代码 :H1201发表论著 :[1] 何彦、接英、潘志强 . Adoptive transfer of donor corneal antigen-specific regulatory T cellscan prolong mice corneal grafts survival. Cornea. 2010; 29, 11(S1): S25-31.[2] 接英、潘志强、陈钰 . CD4+NKT 细胞在超抗原 SEB 诱导大鼠高危角膜移植免疫耐受中的作用机制研究 . 眼科研究 . 2010; 28(4): 289-294.[3] 刘丽敏、接英、潘志强 . 供体骨髓细胞输注诱导免疫耐受延长猪猴异种角膜移植植片存活时间的研究 . 首都医科大学学报 . 2010; 31(1): 18-25.会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2- 247 -

获奖 :抗 VEGF 对早产儿视网膜病变作用的研究批准号 :30801265项目负责人 : 石璇所在单位 : 北京大学早产儿视网膜病变 ( Retinopathy of prematurity, ROP) 是一种严重致盲性视网膜病变 , 视网膜新生血管形成在其发病机制中起主导作用。血管内皮生长因子 (VascularEndothelial Growth Factor,VEGF) 存在两种可变剪切从而产生了两个功能相反的 VEGF 家族 , 分别是 : 促新生血管生成 VEGF(VEGFxxx) 家族和抑新生血管 VEGF(VEGFxxxb) 家族。本实验首次发现在 ROP 小鼠模型中 ,VEGF165 和 VEGF165b 的表达趋势明显不同 , 并且与视网膜新生血管形成密切相关 : 伴随着新生血管的生成 ,VEGF165 升高 , 同时 VEGF165b 出现了显著的下降。结合进一步研究玻璃体腔注射 Bevacizumab 在氧诱导小鼠视网膜病变模型中对新生血管的抑制作用以及对正常小鼠视网膜血管发育的影响 ;VEGF165 与 VEGF165b 亚型表达的变化 , 发现 VEGF165b 的相对含量随着新生血管的消退有了明显的升高 , 进一步论证了 ROP 的发生机制 , 推测 VEGFxxx 家族特异性抑制剂药物可能成为将来治疗新生血管性视网膜疾病更为有效的药物。关键词 : 早产儿视网膜病变 ; 氧诱导视网膜病变 ;Bevacizumab; VEGFxxx; VEGFxxxb学科代码 :H1205发表论著 :[1] Zhao M, Shi X, Liang J, Miao Y, Xie W, Zhang Y, Li X. Expression of pro- and antiangiogenicisoforms of VEGF in the mouse model of oxygen-induced retinopathy. Exp EyeRes. 2011 Dec;93(6):921-926.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0获奖 :不同细胞表面 Toll 样受体 4 参与糖尿病视网膜病变的作用和机制批准号 :30801266项目负责人 : 肖青所在单位 : 华中科技大学糖尿病视网膜病变 (DR) 致盲率占眼科双盲第一位 , 目前认为它是以血 - 视网膜屏障(BRB) 损伤为核心的无菌性炎症反应 , 其启动受体及细胞基础等亟待探索。Toll 样受体 4(TLR4) 是启动机体炎症反应的跨膜受体 , 与糖尿病血管并发症密切相关 , 表达于眼部多种- 248 -

细胞。我们的前期研究及临床发现提示 TLR4 可能参与非感染性视网膜炎症损伤 , 推测TLR4 在 DR 及 BRB 损伤中扮演重要角色。因此我们以 C3H/HeJ 及 C3H/HeN 小鼠为研究对象 ,通过骨髓移植建立髓系及非髓系细胞 TLR4 差异表达嵌合体 , 以 STZ 分别诱导纯合体与嵌合体小鼠 DR 模型 , 在体研究不同细胞表面 TLR4 在 DR 中的作用。结果 BRB 在 WT 小鼠损伤最重 ,TLR4 突变型小鼠最轻 , 异种骨髓移植者较 WT 轻 , 但较基因突变者重 ; 野生型小鼠比基因突变小鼠 TLR4 及炎症因子的表达高 , 基因突变小鼠接受野生型小鼠骨髓移植组的视网膜TLR4 及炎症因子比野生型小鼠接受基因突变小鼠骨髓移植组的表达水平高。结论 TLR4 参与糖尿病视网膜病变的发生发展过程 , 而且骨髓细胞来源的 TLR4 在促进病变进展方面发挥的作用更明显。关键词 : 糖尿病 ; 视网膜病变 ;Toll 样受体 ; 屏障 ; 骨髓移植学科代码 :H1205发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3获奖 :无创电刺激调控小胶质细胞促进大鼠感光细胞存活的实验研究批准号 :30801267项目负责人 : 干德康所在单位 : 复旦大学视网膜色素变性 (RP) 是一类以感光细胞凋亡为特点的致盲疾病 , 目前还没有能够延缓 RP 病变进展和恢复视网膜功能的有效治疗方法。现已有大量实验表明电刺激促进了凋亡的神经元存活和再生 , 我们也利用大鼠光损伤感光细胞模型证明无创性经角膜电刺激对感光细胞具有保护作用。为了进一步证明这种保护作用的机制 , 我们运用体内和体外实验动物模型发现 , 光损伤后的视网膜感光细胞激活了小胶质细胞 (MG) 从而使其被趋化至外核层 , 并且分泌大量炎症因子 , 进一步加重了感光细胞的损伤 , 而凋亡的感光细胞也促使Müller 细胞发生了反应性胶质化 , 上调了其神经营养因子的分泌。而作用于大鼠的经角膜电刺激和作用于体外共培养系统的电刺激都一定程度上抑制了小胶质细胞的活化 , 并下调了炎症因子的表达 , 同时进一步促进 Müller 细胞分泌神经营养因子 , 在这种情况下为视网膜感光细胞提供了有利的营养环境从而实现电刺激对它的保护作用。同时我们还探索发现了电刺激抑制小胶质细胞活化可能是通过调控了整流钾离子通道信号通路实现的。通过以上的研究 , 电刺激对视网膜感光细胞的保护作用被进一步确定 , 为其用于延缓视网膜色素变性病人的感光细胞凋亡提供了理论依据。关键词 : 电刺激 , 光损伤感光细胞凋亡 , 小胶质细胞 ,Müller 细胞 , 调控学科代码 :H1205- 249 -

发表论著 :[1] Gan DK, He CL, Shu HR, Hoffman MR, Jin ZB. Novel RPGR-ORF15 mutations in X-linkedretinitis pigmentosa patients.Neurosci Lett. 2011 Aug;500(1):16-19.[2] Ni YQ, Gan DK, Xu HD, Xu GZ, Da CD. Neuroprotective effect of transcorneal electricalstimulation on light-induced photoreceptor degeneration. Exp Neurol. 2009Oct;219(2):439-452.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0获奖 :MicroRNA 在糖尿病视网膜病变过程中对血管内皮生长因子的调控作用研究批准号 :30801268项目负责人 : 吴晋晖所在单位 : 中国人民解放军第二军医大学糖尿病性视网膜病变 (DR) 是主要致盲性眼病的之一 , 其发生机制尚未清楚。目前认为血管内皮生长因子 (VEGF) 起重要作用。针对 VEGF 的 RNA 干扰是重要的研究方向。microRNA 是近年来发现的一类 19-25 个核苷酸大小的内源性单链 RNA, 在动物和人眼的生理和病理生理状态下发挥重要调控作用 , 已经发现视网膜相关疾病特异表达的 miRNA。为研究 miRNA 是否参与 DR 形成中对 VEGF 的调控作用 , 课题组通过 STZ 诱导建立糖尿病视网膜病变大鼠模型 , 发现在病变早期 microRNA 在视网膜中的表达出现明显异常 , 相关研究已发表于《Ophthalmic Research》, 同时利用生物信息学预测技术 , 对可能作用于 VEGF、PDGF等视网膜内皮细胞相关的生长因子进行 miRNA 的筛选 , 发现了一些 miRNA 能作用于VEGF/PDGF, 进而抑制内皮细胞的生长。本研究在 miRNA 调节水平 , 为解释 DR 的发生机制及其防治和新药开发提供了理论依据和新思路。关键词 :microRNA; 血管内皮生长因子 ; 糖尿病视网膜病 ; 大鼠学科代码 :H1205发表论著 :[1] Jin-Hui Wu, Yu Gao, An-jing Ren, *Ming Zhong, *Lin Liu. Erythropoietin receptor antibodyinhibits oxidative stress induced retinal neovascularizationin mice. 国际眼科杂志 .2011;4(3): 243-246.[2] Chen GQ, Lian WJ, Wang GM, Wang S, Yang YQ, Zhao ZW.Altered microRNA expressionprofiles in diabetic retinas with retinopathy. Ophthalmic Research. Mol Med Report. 2012May;5(5):1362-1368.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1- 250 -

获奖 :氨甲酰促红细胞生成素对糖尿病性视网膜病变的治疗作用及其机制研究批准号 :30801269项目负责人 : 朱弼珺所在单位 : 上海交通大学糖尿病性视网膜病变本质上是高血糖引起的微血管病变和视神经退行性病变 , 许多研究证实其神经退行性病变先于微血管病变发生。本课题根据这些研究证据 , 分析了糖尿病视网膜病变中视网膜各层厚度变化和神经节细胞凋亡情况 , 进一步验证了视网膜神经病变的发生 ; 促红细胞生成素 (erythropoietin,EPO) 对早期糖尿病大鼠视网膜神经细胞具有保护作用 , 并抑制神经胶质细胞的活化 ; 通过免疫学方法检测发现猕猴视网膜 / 脉络膜血管内皮细胞 (RF/6A) 具有 IGFBP-rP1 的表达 ,IGFBP-rP1 具有抑制 VEGF 诱导的促细胞增殖、促细胞移行和抗细胞凋亡的作用 ; 罗格列酮 (rosiglitazone,ROSI) 作为降血糖药物 , 可能通过激活细胞信号抑制因子 (suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3), 抑制磷酸化的信号传导和转录激活因子 3 ( phospho-signal transducer and activator oftranscription 3,p-STAT3), 从而减少视网膜神经元的损伤。关键词 : 糖尿病性视网膜病变 ; 促红细胞生成素 ; 糖尿病神经病变 ; 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白 -1; 罗格列酮学科代码 :H1205发表论著 :[1] Sun T, Cao H, Xu L, Zhu B, Gu Q, Xu X.Insulin-like growth factor binding protein-relatedprotein 1 mediates VEGF-induced proliferation, migration and tube formation of retinalendothelial cells. Curr Eye Res. 2011 Apr;36(4):341-349.[2] Li P, Xu X, Zheng Z, Zhu B, Shi Y, Liu K.Protective effects of rosiglitazone on retinalneuronal damage in diabetic rats. Curr Eye Res. 2011 Jul;36(7):673-679.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1获奖 :Fibulin-5 对脉络膜新生血管的阻抑及其对 AMD 修复机制的研究批准号 :30801270项目负责人 : 李付亮所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学- 251 -

[ 摘要 ] 目的 : Fibulin 5 转染原代培养大鼠 RPE 细胞 , 观察体外对 CEC(RF/6A 细胞系 ) 增殖和迁移的抑制作用及其机制。并进行体内视网膜下腔移植实验。方法 : 利用Edwards 改良方法进行 LE 大鼠 RPE 培养。构建 Fibulin5 慢病毒表达载体并鉴定 , 进行培养RPE 细胞转染 ,W-B 检测 Fibulin5 的胞外表达和分泌。转染的 RPE 细胞与 CEC Transwell共培养 , 通过 MTT、细胞周期测定、细胞染色检测分泌的 Fibulin 5 对脉络膜微血管内皮细胞增殖和迁移的影响 ,RT-PCR 检测对 Fibulin5 对 CEC 表达 CXCR4、TGF-beta、VEGF 含量的影响。结果 : 成功培养 LE 大鼠 RPE 细胞培养 , 成功构建 Fibulin 5 慢病毒并可转染 RPE,W-B 证实了转染后的胞外过表达并分泌 , 继而发挥生物作用。体外共培养结果显示 Fibulin5 对脉络膜微血管内皮细胞增殖和迁移有抑制作用 , 并使 VEGF 和 CXCR4 含量降低。结论 :Fibulin 5 慢病毒表达载体的成功构建并转染大鼠 RPE, 共培养时能抑制 CEC 的增殖和迁移 , 并可能与 CXCR4 和 VEGF 的合成抑制有关。关键词 :Fibulin 5; 慢病毒表达载体 ;RPE;CNV;CEC学科代码 :H1205发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 065kDaAIF 新片段在外源性氧化应激损伤 (H2O2) 诱导视网膜神经节细胞凋亡机制中的作用批准号 :30801271项目负责人 : 李光宇所在单位 : 吉林大学在诸多眼病中 , 氧化应激损伤是导致视神经节细胞死亡的重要因素。65kDaAIF 是我们在研究外源性氧化应激损伤诱导视神经节细胞死亡机制中发现的新蛋白片段。为了进一步证实它的作用 , 本课题进行了深入研究。我们首先确认了氧化应激损伤是以特殊的坏死方式诱导视神经节细胞死亡 , 同时分离出 65kDaAIF, 利用肽指纹图谱证实了它的同源性。另外在细胞内检测到其上游信号 Calpain 的活化 , 证实了相互间的酶切关系。我们还观测到 AIF 转位到细胞核 , 并利用 siRNA 干涉技术验证了 AIF 诱导细胞死亡的生物学功能。根据已获得的实验结果和理论依据我们分析后提出 : 外源性氧化应激损伤是以一种新的程序化坏死方式诱导视神经节细胞死亡 ,65kDaAIF 参与了该死亡信号机制并发挥重要作用。本课题研究将诠释一条新的细胞死亡信号途径 ; 另外也为开发新的神经保护药物提供有力的实验和理论依据。目前共发表课题相关学术论文 5 篇 , 有 3 篇被 SCI 收录 , 其中 2 篇分别发表于国际眼科权威杂志《Experimental Eye Research》和《Molecular Vision》, 本研究还获得了吉林省自然科学成果二等奖。关键词 : 程序化坏死 ; 凋亡诱导因子 (Apoptosis inducing factor,AIF);Calpain; 视神经节细胞 ; 氧化应激损伤- 252 -

学科代码 :H1205发表论著 :[1] Li GY, Fan B, Ma TH. Visible light may directly induce nuclear DNA damage triggering thedeath pathway in RGC-5 cells. Mol Vis. 2011;17:3279-3289.[2] Li GY, Fan B, Su GF. Acute energy reduction induces caspase-dependent apoptosis andactivates p53 in retinal ganglion cells (RGC-5). Exp Eye Res. 2009 Oct;89(4):581-589.[3] Li GY, Fan B, Zheng YC. Calcium overload is a critical step in programmed necrosis ofARPE-19 cells induced by high-concentration H₂ O₂ .. Calcium overload is a critical step inprogrammed necrosis of ARPE-19 cells induced by high-concentration H2O2. BiomedEnviron Sci. 2010 Oct;23(5):371-377.[4] 李光宇 , 范斌 . PARP-1 在光诱导视网膜神经节细胞凋亡中的作用 . 眼科研究 . 2008;26(11):805-809.[5] 李光宇 , 范斌 , 李亚萍 , 崔极哲 . Staurosporine 诱导 RGC-5 细胞分化作用的研究 . 眼科研究 .2008;26(10):721-726.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 4 分组 4培养人才 : 博士后 1 博士 2 硕士 0获奖 :[1] 视网膜神经节细胞 (RGC-5) 及色素上皮细胞凋亡及保护研究 . 2011 年吉林省科学技术协会 , 吉林省自然科学学术成果奖二等奖 ( 第一获奖人 )LINGO-1 与 TrkB 的分子关系及其拮抗剂与 BDNF 对青光眼中视网膜节细胞的协同保护作用批准号 :30801272项目负责人 : 付清玲所在单位 : 中山大学青光眼是一类以视网膜节细胞 (retinal ganglion cell, RGCs) 的死亡为特征的神经退行性病变 , 目前的神经保护剂包括脑源性神经营养因子 (Brain-derived neurotrophinfactor,BDNF) 只是延缓 RGCs 的死亡。LINGO-1 是 Nogo receptor(NgR) 的共同分子 , 他们在中枢神经系统 (CNS) 中专有、可对轴突再生、细胞存活起抑制性作用。本课题通过建立大鼠慢性高眼压模型 , 发现联合应用 BDNF 和 LINGO-1 拮抗剂可以促进高眼压后 RGCs 的长期存活 ; 高眼压后 LINGO-1 是与 TrkB 绑定并且负性调节 TrkB 的活化。我们还进一步发现 ,高眼压后早期存在节细胞的突触变性 , 可能与 NgR 的配体 NogoA 的表达增多有关 , 而且应用NgR 的拮抗剂可以通过抑制突触变性而促进节细胞的存活。本项目的研究结果揭示了LINGO-1、NgR1 拮抗剂可以保护青光眼引发的节细胞及其突触的变性 , 本研究还进一步提供了一定的分子机制 , 为青光眼提供了一个长期有效的并有理论根本的治疗方案。- 253 -

关键词 : 青光眼、LINGO-1、NgR1、视网膜节细胞、突触学科代码 :H1204发表论著 :[1] Fu QL, Liao XX, Li X, Chen D, Shi J, Wen W, Lee DH, So KF. Soluble nogo-66 receptorprevents synaptic dysfunction and rescues retinal ganglion cell loss in chronic glaucoma.Invest Ophthalmol Vis Sci. 2011 Oct;52(11):8374-8380.[2] Fu QL, Hu B, Li X, Shao Z, Shi JB, Wu W, So KF, Mi S. LINGO-1 negatively regulates TrkBphosphorylation after ocular hypertension. Eur J Neurosci. 2010 Mar;31(6):1091-1097.[3] Fu QL, Li X, Yip HK, Shao Z, Wu W, Mi S, So KF. Combined effect of brain-derivedneurotrophic factor and LINGO-1 fusion protein on long-term survival of retinal ganglioncells in chronic glaucoma. Neuroscience. 2009 Aug;162(2):375-382.[4]Liao XX, Chen D, Shi J, Sun YQ, Sun SJ, So KF, Fu QL. The expression patterns of Nogo-a,myelin associated glycoprotein and oligodendrocyte myelin glycoprotein in the retina afterocular hypertension: the expression of myelin proteins in the retina in glaucoma. NeurochemRes. 2011 Nov;36(11):1955-1961.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1重庆地区汉族人开角型青光眼家系相关 SNPs 及其单体型分子标志研究批准号 :30801273项目负责人 : 崔馨所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学原发性开角型青光眼 (POAG) 是严重的致盲性眼病 , 遗传因素与其发病密切相关。本课题旨在采用传递不平衡检验 (TDT) 策略在重庆汉族 POAG 家系中研究其相关基因 (MYOC、OPTN) 的 SNPs 位点 , 以确认此类人群 POAG 相关 SNPs 和单体型。然后收集家系成员、患者的相关资料 , 运用比例 - 风险 (proportional-hazards) 回归模型、条件 logistic 回归模型等高级统计方法 , 系统分析 POAG 的危险因子与相关基因的 SNPs 位点及其单体型与 POAG之间的关系 , 从而比较不同群体的基因型差异及其对 POAG 的易感性 , 从分子水平探讨POAG 的发病机制 , 对其易感患者早期检出和预防具有重要意义 , 并将有助于阐明 POAG 的遗传本质 , 为预防和治疗此病提供坚实的理论依据和实践指导。关键词 : 原发性开角型青光眼 ; 遗传 ;SNP 位点 ; 单体型学科代码 :H1204发表论著 :[1] Cui X, Xu N, Liao W, Xu J, Ge C, Ye J, Liu X, He X. Gene Expression ProfileDetermination in Rat Retina Tissue after Ocular Hypertension through Oligo Microarray.Ophthalmic Res. 2011;45(2):57-64.- 254 -

[2] 崔馨 , 贺翔鸽 . Oligo 基因芯片筛选视网膜慢性高眼压损伤差异表达基因的初步数据分析 .第三军医大学学报 .2011;33(13):1333-1335.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :人晶状体膜蛋白 MIP 突变体的功能研究批准号 :30801274项目负责人 : 林辉所在单位 : 哈尔滨医科大学具有水通道和膜连接双重作用的晶状体膜蛋白 MIP, 对保持晶状体透明有极其重要的作用 , 其 C- 末端含有与钙调蛋白结合的结构域。C- 末端还与胚胎早期晶状体中的连接蛋白 Cx45.6 连接 , 在成熟的晶状体内两者的连接消失 , 因此该末端可以促进 Cx45.6 发育成熟。本课题申请人在以往的研究中发现了 MIP 的 C- 末端 p.R233K 的突变 , 是世界首次报道。本课题拟对该突变体蛋白的功能进行首次研究 , 以期揭示该突变致白内障的机理 , 从氨基酸水平更深入的了解 MIP 的功能。第一方面研究 p.R233K 突变是否改变了蛋白质的生物化学性质 , 从而影响了蛋白质的功能 ; 第二方面研究此 C- 末端突变是否影响了 MIP 与钙调蛋白的结合 , 从而影响了钙调蛋白对 MIP 水通透性的调节 , 引起晶状体混浊 ; 第三方面研究该突变型蛋白是否与胚胎早期的连接蛋白 Cx45.6 连接 , 研究突变是否影响了其促发育的作用。关键词 :MIP; 突变体 ; 功能学科代码 :H1202发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 1 博士 1 硕士 0获奖 :新基因 NDRG2 在年龄相关性白内障中的功能及分子机制研究批准号 :30801275项目负责人 : 张自峰所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学- 255 -

年龄相关性白内障 (ARC) 是一种多因素所致的常见病 , 其发生与晶状体上皮细胞衰老和外界氧化损伤密切相关。人 NDRG2 是我校克隆到的一个与细胞衰老和氧化应激确切相关的新基因。本课题旨在阐明 NDRG2 在 ARC 中的生物学功能及可能的分子机制。我们较好的完成了课题的预定目标 , 并取得了以下成果 :1 在 mRNA 和蛋白水平 ,NDRG2 在 ARC 晶状体上皮组织中的表达上调约 2 倍 ;2 通过低浓度过氧化氢长期刺激建立了培养人晶状体上皮细胞衰老模型 ,NDRG2 在衰老细胞中表达增加 ;3 NDRG2 表达上调可致晶状体上皮细胞呈类成纤维细胞样外观 , 细胞活力下降 , 凋亡增加 , 对外界氧化损伤敏感性增强 ;4 小鼠在体晶状体电转移上调 NDRG2 表达后 , 可致部分晶状体上皮细胞脱失 ;5 NDRG2 通过 PI3K/Akt及 MAPK 信号转导通路参与晶状体的生理病理过程 ;6 另外 ,NDRG2 蛋白广泛表达于胚胎眼及成人眼多种组织的各种主要组成细胞 , 且随组织的发育成熟表达量升高 , 提示其在人眼的发育过程中可能发挥重要作用。本课题的完成由基因角度、分子水平进一步揭示了 ARC的发病机制 , 也丰富了 NDRG2 的生物学功能及作用机制研究。关键词 :NDRG2 基因 ; 年龄相关性白内障 ; 细胞衰老 ; 氧化损伤学科代码 :H1202发表论著 :[1] Zhang ZF, Zhang J, Hui YN, Zheng MH, Liu XP, Kador PF, Wang YS, Yao LB, Zhou J.Up-regulation of NDRG2 in senescent lens epithelial cells contributes to age-related cataractin human. PLoS One.2011;6(10):e 26102.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2特异性 microRNAs 在鼠眼发育和先天性青光眼中的生物学功能批准号 :30801276项目负责人 : 李妮所在单位 : 四川大学眼的发育是一个极其复杂的生物学过程 , 其中的具体分子机制尚不清楚。MicroRNA通过对基因表达的调控而在细胞增殖、分化发育、胚胎发育过程中其中重要作用。本课题目的为研究在眼部房角发育过程中特异性 microRNA 极其生物学功能。研究发现新生和成年鼠眼部 microRNA 组织中差异表达 miRNA 共有 28 个。MicroRNAs 在眼部不同发育阶段的具体作用机制尚需进一步研究。关键词 :microRNA; 青光眼 ; 鼠学科代码 :H1204发表论著 :[1] Li N, Zhou Y, Du L, Wei M, Chen X. Overview of Cytochrome P450 1B1 gene mutations in- 256 -

patients with primary congenital glaucoma. Exp Eye Res. 2011 Nov;93(5):572-529.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 :Th17 细胞亚群在甲状腺相关免疫眼眶病中的作用研究批准号 :30801277项目负责人 : 迟玮所在单位 : 中山大学甲状腺相关免疫眼眶病 (TRIO) 是一类常见致盲眼病和器官特异性自身免疫性疾病。本项目以 IL-23/Th17 细胞、Th22 细胞 /IL-22 为研究轴线进行了以下研究和成果 :⑴ 研究TRIO 患者外周血和眼眶球后组织中 Th17 细胞及其细胞因子 - - IL-17 的数量和表达的变化 ,证实了 TRIO 患者外周血和眼眶局部病变组织中 Th17 细胞数量增多、IL-17 表达上调 , 提示Th17 及其核心细胞因子 IL-17 在 TRIO 发病中发挥致病作用。(2) 证实了 IL-23 可以诱导TRIO 患者体内 IL-17 分泌 ,IL-23 在 TRIO 患者局部病变组织中表达上调 , 说明 TRIO 患者体内上调的 IL-23 通过诱导 IL-17 的分泌而在疾病的发病过程中发挥作用 ;⑶ 研究证实环孢霉素 A 可以抑制 Th17 细胞的分化 , 提示环孢霉素 A 可能通过抑制 TRIO 发病中关键的致炎因子- - IL-17 而发挥治疗作用。(4) 我们的研究还证实了 Th22 及其核心细胞因子 IL-22 在 TRIO发病中的致病作用 , 提示 TRIO 的发病过程是一个多群 Th 细胞参与的器官特异性自身免疫性疾病 , 以 Th17 和 Th22 的靶点将为 TRIO 的诊断和治疗提供新的方向。关键词 : 甲状腺相关免疫眼眶病 (TRIO), 白介素 (IL-23), 辅助性 T(Th)17 细胞 ,IL-17,IL-22学科代码 :H1203发表论著 :[1] Chi W, Yang P, Zhu X, Wang Y, Chen L, Huang X, Liu X. Production of interleukin-17 inBehcet’s disease is inhibited by cyclosporin A. Mol Vis. 2010 May;16:880-886.[2] Chi W, Zhu X, Yang P, Liu X, Lin X, Zhou H, Huang X, Kijlstra A. Upregulated IL-23 andIL-17 in Behçet patients with active uveitis. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2008Jul;49(7):3058-3064.[3] Chi W, Yang P, Li B, Wu C, Jin H, Zhu X, Chen L, Zhou H, Huang X, Kijlstra A. IL-23promotes CD4+ T cells to produce IL-17 in Vogt-Koyanagi-Harada disease. J Allergy ClinImmunol. 2007 May;119(5):1218-1224.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1获奖 :- 257 -

双眼形觉剥夺再激活成年大鼠视皮层可塑性的分子机制研究批准号 :30801278项目负责人 : 余涛所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学弱视是儿童低视力和致盲主要原因 , 也是成人单眼视觉障碍首要病因 , 目前尚无有效治疗方法。视皮层可塑性与弱视发生、治疗密切相关 , 视觉环境改变在幼年视皮层可塑性关键期内扮演着重要角色 ; 而抑制性神经通路和细胞外间质的成熟在幼年视皮层关键期终止机制中的作用已成为关注焦点。新近研究证实 , 视皮层可塑性在成年期并未完全消失 ,异常视觉环境能够导致其再激活 , 但机制不明。本项目在既往幼年视皮层可塑性关键期终止机制研究基础上 , 引入双眼形觉剥夺的无创方法 , 成功建立成年大鼠视皮层可塑性再激活模型 , 采用免疫荧光染色、免疫印迹和脑片膜片钳全细胞记录及电流分离技术 , 发现双眼形觉剥夺 14 天可以使成年大鼠视皮层内 tPA 的表达和活性增加 , 从而对 CSPGs 的降解增多 , 减少 PNNs 的形成 , 并且视皮层 GABA A1 受体表达减少和其介导的 GABA 能抑制性神经回路强度的减弱。证实了成年视皮层可塑性再激活机制与抑制性神经通路减弱和细胞外间质去成熟相关的假说 , 深入阐明了双眼形觉剥夺再激活成年大鼠视皮层可塑性的分子机制 ,为成年弱视的治疗提供理论依据。关键词 : 弱视 ; 视皮层 ; 可塑性 ; 双眼形觉剥夺 ; 成年学科代码 :H1206发表论著 :[1] 余涛 . 双眼形觉剥夺后成年大鼠视皮层可塑性再激活模型建立 . 眼科新进展 . 2009;29(7):481-484.[2] 余涛 . 双眼形觉剥夺对成年大鼠视皮层兴奋性突触后电流的影响 . 眼科研究 .2009;27(4):261-264.[3] 余涛 . 双眼形觉剥夺对成年大鼠视皮层兴奋性递质受体表达和分布的影响 . 眼科新进展 .2009;29(2): 84-89.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1H12 眼科学地区科学基金项目云南省汉族和三种少数民族 50 岁以上人群青光眼流行病学调查批准号 :30860309项目负责人 : 袁援生所在单位 : 昆明医学院- 258 -

目的 : 调查中国农村地区白族、傣族、彝族和汉族青光眼的患病率和危险因素 , 视力损伤和盲的情况。方法 : 采用随机整群抽样的方法在云南少数民族地区农村对 50 岁以上的白族人群进行横断面调查 , 所有受检人员均进行眼科检查 , 同时进行问卷调查 , 包括询问青光眼确诊史、家族史、发作史及手术史 , 对可疑青光眼者行进一步检查。结果 : 抽样 12050人 , 实际检查 9532 人 , 受检率 79.1%。。四个民族中青光眼总的的患病率为 2.0%。原发性开角型青光眼的患病率最低 .9% 最高 1.1%, 而原发性闭角型青光眼的患病率是从 0.74% 到0.95%。青光眼的患病率和年龄和性别相关。使用最佳矫正视力情况下 , 视力损伤的患病率是 7.13%, 而盲的患病率为 2.92%。四个民族中视力损伤患病率最低为 6.54%, 最高是 8.18%,盲的患病率从 2.02% 到 4.21%. 视力损伤和盲患病率随受检者的年龄增加而显著增加 ; 随受检者的受教育程度增加而降低 ; 和性别无关。结论 : 三个少数民族两种类型青光眼的患病率相似 ; 视力损伤和盲的患病率明显高于国内汉族地区。青光眼是不可逆视力损伤和盲的最主要原因。关键词 : 患病率 ; 青光眼 ; 危险因素 ; 视力损伤 ; 盲学科代码 :H1204发表论著 :[1] 袁援生 . 青光眼流行病学研究进展 . 昆明医学院学报 . 2010;31(9):1-3.[2] 李训 , 钟华 , 袁援生 . 翼状胬肉的流行病学 . 国际眼科纵览 . 2011;35(2):106-110.[3] 李娟娟 , 袁援生 . 中老年人屈光不正的流行病学研究进展 . 国际眼科纵览 . 2010;34(5):321-324.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 6获奖 :H13 耳鼻咽喉头颈科学面上项目Beta-Ⅲtubulin 在嗅感觉神经元分化增生过程中的作用批准号 :30772414项目负责人 : 姜学钧所在单位 : 中国医科大学至今已经确认 α 、β 、和 γ 三种共属微管蛋白超家族成员的蛋白。β 微管蛋白中的 β -Ⅲ tubulin 具有神经特异性 , 广泛存在于中枢和周围神经元中。但在视觉、听觉和嗅觉器官发育起始阶段只有在嗅基板中可以检测到它的表达。为了探讨 β -Ⅲ tubulin 在早期嗅觉发育中有何特殊或重要作用 , 我们在体外培养小鼠胚胎头部组织切片和游离的嗅觉神经元前体细胞 ; 分别以降低微管结构稳定性的秋水仙素 , 促微管聚合类天然化合物紫杉醇和特异性阻碍 β -Ⅲ tubulin 表达的 siRNA 处理 ; 并在免疫荧光显微镜下观察嗅觉神经上皮发- 259 -

育和神经细胞形态变化 , 在透射电镜下观察嗅感觉神经元亚细胞结构如细胞骨骼的变化。通过上述研究 , 我们期望深入了解 beta-Ⅲ tubulin 在嗅感觉神经元分化和增生过程中的作用 , 为前景广阔的干细胞诱导分化在鼻科应用积累更多经验 .关键词 :β-Ⅲ tubulin; 嗅感觉神经元 ; 发育 ; 分化学科代码 :H1301发表论著 :[1] 魏宏权 , 戴丽丽 , 姜学钧 . 单鼻腔通气障碍小鼠模型嗅黏膜的组织学变化 . 中国现代医学杂志 . 2011; 27: 3372-3375.[2] 张阳 , 姜学钧 , 魏宏权 . β -Ⅲ 微管蛋白和嗅标志蛋白在不同胎龄胎鼠嗅上皮中的表达 .广东医学 . 2010; 21: 2758-2760.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 1应用免疫组织化学和膜片钳技术对小鼠嗅感觉神经细胞的5- 羟色胺 1 受体的研究批准号 :30872844项目负责人 : 唐玥玓所在单位 : 四川大学嗅觉在我们日常生活中起着重要的作用 , 嗅觉障碍对生活质量有明显的影响。然而 ,我们对嗅觉产生的过程仍不是很清楚 , 嗅觉障碍仍是一个具有挑战性的疾病。鼻腔嗅上皮的嗅感觉神经细胞是构成嗅觉通路的主要元素。5-HT 是一种具有多种功能的单胺类神经递质 , 对嗅觉系统功能的调节起着重要的作用。然而 ,5-HT 受体在嗅感觉神经细胞的分布及其生物学功能 , 尚不清楚。在本研究中 , 我们采用 RT-PCR 技术、免疫组织化学技术 , 证实了 5-HT1A 和 5-HT1B 受体在小鼠嗅粘膜的表达和分布。为了进一步阐明 5-HT 对小鼠嗅感觉神经细胞的电生理作用 , 我们用全细胞膜片钳技术研究急性分离的嗅感觉神经细胞 , 结果显示 5-HT 对小鼠嗅感觉神经细胞外向钾电流 ( 包括瞬时和延迟成分 ) 有抑制效应 , 并呈现出一定的浓度依赖性。该效应可通过缩短嗅感觉神经细胞动作电位复极化的时相 , 从而增加神经元的兴奋性 ; 另外该抑制效应可被 5-HT1A 以及 5-HT1B 受体的阻断剂减弱 , 表明这两个受体参与了这个调节过程。这些结果提示嗅感觉神经细胞的 5-HT 受体可能在嗅感觉机制中起重要作用 , 本研究可能为进一步研究与 5-HT 有关的治疗嗅觉障碍的靶向药物提依据。关键词 : 嗅感觉神经细胞 ;5- 羟色胺受体 ; 膜片钳技术 ; 免疫组织学技术学科代码 :H1306发表论著 :[1] Long L, Tang Y, Xia Q, Xia Z, Liu J. The expression of atrial natriuretic peptide receptor in- 260 -

the mouse inner ear labyrinth. Neuro Endocrinol Lett. 2010; 31(1):126-30.[2] 唐玥玓 . 5 - 羟色胺及其受体在嗅觉系统的研究进展 . 华西医学 2008; 23(6):1479-1480。[3] 唐玥玓 .REGULATION OF 5-HT1A AND 5-HT1B RECEPTORS IN MOUSEOLFACTORY RECEPTOR NEURONS.2010 年。ORL Congresos. 第一届欧盟耳鼻咽喉科学会议 .会议报告 : 国际大会 3 分组 3 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 0全反式维甲酸对 T 细胞谱系选择和变应性鼻炎的干预作用批准号 :30872845项目负责人 : 许庚所在单位 : 中山大学Th17 细胞是新发现的一类与 Treg 细胞功能相关的 Th 细胞 , 在变应性鼻炎发病过程中的作用和相关机制不明。本研究在检测变应性鼻炎患者鼻黏膜和外周血 T 细胞中 Th17 细胞的分化情况及相关信号通路的基础上 , 采用全反式维甲酸进行诱导 Treg 细胞分化和抑制Th17 细胞分化的相关研究 , 并将全反式维甲酸结合 TGF-β 共诱导的 Treg 细胞转输变应性鼻炎小鼠模型 , 进行治疗研究 , 以探讨全反式维甲酸抑制 Th17 细胞分化在变应性鼻炎发病中的可能作用及潜在的治疗价值 , 结果发现 :(1)Th17 细胞 ( 或 IL-17A) 在变应性鼻炎发病过程中高表达 , 并且能够调节鼻黏膜上皮细胞表达 TSLP;(2)miR-23b 能够通过Notch/NFkappaB 信号通路调节树突状细胞的表型 , 并且能够诱导 Treg 细胞的生成 ;(3)全反式维甲酸能够通过 miR-146a 诱导变应性鼻炎患者外周血 Treg 细胞的生成 , 抑制 Th17细胞的分化 , 对变应性鼻炎存在治疗作用。本研究的结果初步阐明了变应性鼻炎发病过程中 Th17 细胞和 Treg 细胞的相互关系和转换机制 , 并为变应性疾病的全反式维甲酸免疫干预探索了一条新的可能途径。关键词 : 变应性鼻炎 ;Treg 细胞 ;Th17 细胞 ; 转录因子 ; 全反式维甲酸学科代码 :H1301发表论著 :[1] Xu G, Xia J, Hua X, Zhou H, Yu C, Liu Z, Cai K, Shi J, Li H. Activated mammalian targets ofrapamycin is associated with T regulatory cell insufficiency in nasal polyps. Respir Res. 2009;10:13.[2] Xu G, Zhang L, Wang DY, Xu R, Liu Z, Han DM, Wang XD, Zuo KJ, Li HB. Opposing rolesof IL-17A and IL-25 in the regulation of TSLP production in human nasal epithelial cells.Allergy. 2010; 65(5):581-589.[3] Shi J, Luo Q, Chen F, Chen D, Xu G, Li H. Induction of IL-6 and IL-8 by House Dust MiteAllergen Der p1 in Cultured Human Nasal Epithelial Cells is Associated withPAR/PI3K/NFκB Signaling. ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec. 2010; 72(5):256-65.[4] Fan Y, Xia W, Liu W, Chen R, Li X, Xu R, Xu G, Shi J, Li H. Increased nasal IL-5 levels actas a predisposing factor of asthma in southern China. J Allergy Clin Immunol. 2011;- 261 -

127:1312-1313.[5] Zheng J, Jiang HY, Li J, Tang HC, Zhang XM, Wang XR, Du JT, Li HB, Xu G.MicroRNA-23b promotes tolerogenic properties of dendritic cells in vitro through inhibitingNotch1/NF-κB signalling pathways. Allergy. 2012; 67(3):362-70.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0获奖 : 国际学术奖 1EBi3 和 Foxp3 对变应性鼻炎调节性 T 细胞免疫抑制功能的调控机制批准号 :30872846项目负责人 : 张罗所在单位 : 首都医科大学调节性 T 细胞 (Treg 细胞 ) 与变应性疾病关系密切 , 而转录因子 Foxp3 是 Treg 细胞的特征性标记且对其功能的维系至关重要。本课题以致敏动物模型和变应性鼻炎患者为研究对象 , 旨在通过体外分选、培养、功能抑制试验、RNA 干扰技术 (RNAi) 等手段验证 Treg细胞中转录因子 Foxp3 和 EBI3 对 Treg 细胞功能调控机制及其在变应性鼻炎发病中的作用。通过 FOXP3 和 FCER1A 基因的基因多态性分析探讨与变应性鼻炎发病的关系。研究表明 EBI3和 FOXP3 共同表达于小鼠的 CD4+CD25+T 细胞 ; 二者在过敏性鼻炎小鼠的 Treg 细胞中表达下调 , 低于正常对照 , 提示 EBI3 作为 Treg 细胞发挥免疫抑制作用的一个调节因子 , 在过敏性鼻炎的发病机制中起重要作用。此外 , 还发现变应性鼻炎患者天然性 Treg 细胞与正常人间无数量差异 , 且体外功能研究表明该细胞可抑制效应性 T 细胞增殖和 Th1 细胞因子生成 , 但对 Th2 细胞因子无明显作用。1 型调节性 T 细胞 (Tr1 细胞 ) 明显少于健康人 , 提示后者对变应性鼻炎发病的意义更大。FOXP3 和 FCER1A 的 SNP 改变与变应性鼻炎发病无相关。关键词 :Foxp3;EBi3; 变应性鼻炎 ; 调节性 T 细胞 ;学科代码 :H1301发表论著 :[1] Han D, Wang CS, Lou W, Wang Y, Gu Y, Wang Y, Luo Z. Allergen-specific IL-10-secretingtype I T regulatory cells, but not CD4+CD25+Foxp3+ T cells, are decreased in peripheralblood of patients with persistent allergic rhinitis. Clin. Immunol. 2010; 136: 292-301.[2] Zhang Y, Liu C, Han D, Zhang L. Correlation of Routine Examinations for the Diagnosis ofHouse Dust Mite Allergic Rhinitis. Orl-Journal for Oto-Rhino-Laryngology and Its RelatedSpecialties. 2011; 73(4):182-188.[3] Han D, Chen L, Cheng L, Liu S, Fu Z, Zhang W, Wang C, Xi L, Zhang L. A MulticenterRandomized Double-Blind 2-Week Comparison Study of Azelastine Nasal Spray 0.1% versusLevocabastine Nasal Spray 0.05% in Patients with Moderate-to-Severe Allergic Rhinitis.Orl-Journal for Oto-Rhino-Laryngology and Its Related Specialties. 2011; 73(5):260-265.[4] Ouyang Y, Nakao A, Fan E, Li Y, Zhao L, Zhang W, Han D, Zhang L. Decreased Expression- 262 -

of EBI3 and Foxp3 in CD4+CD25+ Regulatory T Cells in Murine Experimental AllergicRhinitis. Orl-Journal for Oto-Rhino-Laryngology and Its Related Specialties. 2011;73(6):313-320.[5] Jiao J, Wang H, Lou W, Jin S, Fan E, Li Y, Han D, Zhang L. Regulation of ciliary beatfrequency by the nitric oxide signaling pathway in mouse nasal and tracheal epithelial cells.Experimental Cell Research.2011; 317(17):2548-2553.[6] Gu Y, Wang C, Han D, Zhang L. INCREASED FREQUENCIES OF CD4(+) CD25(+)FOXP3(+) REGULATORY T CELLS IN HUMAN NASAL INVERTED PAPILLOMA.Head and Neck-Journal for the Sciences and Specialties of the Head and Neck. 2011;33(7):1005-1012.[7] Zhang Y, Lin X, Desrosiers M, Zhang W, Meng N, Zhao L, Han D, Zhang L. AssociationPattern of Interleukin-1 Receptor-Associated Kinase-4 Gene Polymorphisms with AllergicRhinitis in a Han Chinese Population. PLoS One. 2011; 6(6):p e21769.[8] Jiao J, Han D, Meng N, Jin S, Zhang L. Regulation of Tracheal Ciliary Beat Frequency byNitric Oxide Synthase Substrate L-Arginine. Orl-Journal for Oto-Rhino-Laryngology and ItsRelated Specialties. 2010; 72(1):6-11.[9] Zhang Y, Duan S, Lin X, Zhang W, Meng N, Zhao L, Zhao Y, Han D, Zhang L. SNPs in theFCER1A Gene Region Show No Association with Allergic Rhinitis in a Han ChinesePopulation. PLoS One. 2010; 5(12):e15792.[10] Han D, Xi L, Fan E, Li Y, Zhang L. Expression of the Foxp3 Gene in Spleen MononuclearCells of a Mouse Model with Allergic Rhinitis. Orl-Journal for Oto-Rhino-Laryngology andIts Related Specialties. 2009; 71(6):317-322.[11] Han D, Lai X, Gjesing B, Zhong N, Zhang L, Spangfort MD. Spangfort, Michael D. Thespecific IgE reactivity pattern of weed pollen-induced allergic rhinitis patients. ActaOto-Laryngologica. 2011; 131(5):533-538.[12] 张罗 , 韩德民 . 重视鼻部炎症的诊断问题 . 中国耳鼻咽喉头颈外科 . 2010; 12: 617-618.[13] 王成硕 , 张伟 , 王向东 , 锡琳 , 欧阳昱辉 , 赵岩 , 王阳 , 张罗 . 儿童变应性鼻炎免疫治疗的临床疗效及免疫学机制研究 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 46(1): 36-39.[14] 张伟 , 赵岩 , 王成硕 , 张罗 . 过敏性鼻炎患者伴发食物过敏原致敏状态分析 . 首都医科大学学报 . 2011; 32(1): 8-12.[15] 张媛 , 赵延明 , 贺飞 , 张罗 . 儿童过敏性鼻炎的吸入性过敏原 . 首都医科大学学报 . 2011;32(1): 13-16.[16] 王鸿 , 矫健 , 金善哲 , 张罗 . 小鼠鼻腔及气管黏膜上皮细胞的构成和纤毛反应性比较研究 . 首都医科大学学报 . 2011; 32(1): 21-25.[17] 杨酉 , 刘仲燕 , 韩德民 , 张罗 . 非过敏性鼻炎伴嗜酸性粒细胞增多综合征患者的鼻通气功能评估 . 首都医科大学学报 . 2011; 32(1): 26-31.[18] 段甦 , 张媛 , 张罗 . 过敏性疾病的自然进程及干预 . 首都医科大学学 . 2011; 32(1): 55-59.[19] 程雷 , 张罗 . 解读《过敏性鼻炎及其对哮喘的影响》2010 年修订版 . 国际耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 35(4): 236-239.[20] 杨酉 , 刘仲燕 , 张媛 , 刘承耀 , 张罗 . 血管运动性鼻炎患者鼻通气功能的评估 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2010; 45(12): 988-992.[21] 佘文煜 , * 张罗 . 过敏性鼻炎诊疗进展 . 鼻腔细胞学研究现状 . 中国耳鼻咽喉头颈外科 .2011;18(12): 642-645.[22] 张罗 , 王学艳 , * 韩德民 . 过敏性疾病免疫治疗 100 年 . 中国耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011;- 263 -

18(12): 625-627.[23] 赵延明 , 张媛 , * 张罗 . MicroRNA 在过敏性疾病中的研究进展 . 中国耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 18(12): 646-649.[24] 张罗 , 孙永昌 , * 韩德民 . 变应原特应性皮下免疫治疗 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 .2011; 46(12): 1063-1068.[25] 王成硕 , 张伟 , 王向东 , * 张罗 . 变炎性鼻炎屋尘螨变应原集群免疫治疗与常规免疫治疗的对照研究 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 46(12): 981-985.[26] 杨酉 , 赵岩 , 王成硕 , 王向东 , * 张罗 . 变应性鼻炎患者 10030 例吸入性变应原谱分析 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 46(11): 914-920.[27] 张罗 , * 韩德民 . 重视过敏性鼻炎研究 . 中国耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 17(11):561-562.[28] * 张罗 , 高倩 , 张媛 , 王成硕 , 赵岩 . 鼻用皮质类固醇对变应性鼻炎患者口鼻呼出气一氧化氮浓度的影响 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 25(20): 913-915.[29] 锡林 , 张伟 , 赵岩 , * 张罗 . 过敏性鼻炎患者心理人格特征研究 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 46(8): 646-649.[30] 张罗 , 矫健 , 王鸿 , 金善哲 . 一氧化氮信号传导通路对小鼠纤毛运动的调控研究 . 首都医科大学学报 . 2011; 32(1): 17-20.会议报告 : 国际大会 10 分组 8 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 1 博士 2 硕士 1慢性鼻 - 鼻窦炎中 Clara 细胞 10-KDa 蛋白表达抑制的调控机制批准号 :30872847项目负责人 : 刘争所在单位 : 华中科技大学探讨 Clara 细胞 10-kDa 蛋白 (CC10) 在上呼吸道炎症性疾病 ( 慢性鼻 - 鼻窦炎和变应性鼻炎 ) 中表达抑制的机制及其在疾病中的作用。主要发现 1、在上呼吸道嗜酸粒细胞性炎症中 CC10 分泌细胞的减少可能与该细胞向三叶因子 -1 分泌细胞表型的转化有关 , 糖皮质激素可能通过抑制这种表型转换而上调 CC10 的表达。2、发现上呼吸道嗜酸粒细胞性炎症过程中骨桥蛋白表达明显增高并和 CC10 表达的减少有关 ,CC10 可以调控上呼吸道嗜酸粒细胞性炎症过程骨桥蛋白表达和功能。3、发现白细胞介素 10 可以上调 CC10 的表达并抑制 Th2 反应。4、嗜酸粒细胞性慢性鼻 - 鼻窦炎中 CC10 可以通过调节壳聚糖酶 3 样蛋白 1 而抑制 Th2反应的发生和发展。5、CC10 表达和 Th17 反应相关 ,CC10 可以通过树突状细胞抑制变应性鼻炎中 Th17 反应。我们的研究结果提示 CC10 局部表达水平与炎症因子的调控及细胞表型的转化有关 ,CC10 可以通过影响炎症反应的多个环节而在上呼吸道炎症性疾病的发生、发展中起重要的调控作用。关键词 : 鼻炎 ; 鼻 - 鼻窦炎 ;Clara 细胞 10-kDa 蛋白 ; 表达 ; 作用学科代码 :H1301发表论著 :[1] Cui YH, Wang YY, Liu Z. Transdifferentiation of Clara cell 10-kDa protein secreting cells in- 264 -

experimental allergic rhinitis. American Journal of Rhinology & Allergy. 2011; 25:1-7.[2] Liu Y, Lu X, Yu HJ, Hua XY, Cui YH, Huang SK. *Liu Z. The expression of osteopontin andits association with Clara cell 10 kDa protein in allergic rhinitis. Clinical and ExperimentalAllergy. 2010; 40(11):1632-1641.[3] Wang H, Long XB, Cao PP, Wang N, Liu Y, Cui YH, Huang SK, Liu Z. Clara Cell 10-kDProtein Suppresses Chitinase 3-Like 1 Expression Associated with Eosinophilic ChronicRhinosinusitis. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 2010;181(9):908-916.[4] Cao PP, Li HB, Wang BF, Wang SB, You XJ, Cui YH, Wang DY, Desrosiers M, Liu Z.Distinct immunopathologic characteristics of various types of chronic rhinosinusitis in adultChinese. Journal of Allergy and Clinical Immunology. 2009; 124(3):478-484.[5] Zhang XH, Lu X, Long XB, You XJ, Gao QX, Cui YH, *Liu Z. Chronic rhinosinusitis withand without nasal polyps is associated with decreased expression of glucocorticoid-inducedleucine zipper. Clinical and Experimental Allergy. 2009; 39(5):647-654.[6] Cui YH, Zhang F, Xiong ZG, You XJ, Gao QX, Liu Z. Increased serum complementcomponent 3 and mannose-binding lectin levels in adult Chinese patients with chronicrhinosinusitis. Rhinology. 2009; 47(2):187-191.[7] Lu X, Wang N, Long XB, You XJ, Cui YH, Liu Z. The cytokine-driven regulation ofsecretoglobins in normal human upper airway and their expression, particularly that ofuteroglobin-related protein 1, in chronic rhinosinusitis. Respiratory Research. 2011;12(1):1-10.[8] Zeng M, Long XB, Cui YH, Liu Z. Comparision of efficacy of mometasone furoate versusclarithromycin in the treatment of chronic rhinosinusitis without nasal polyps in Chinsesadults. Am J Rhinol Allergy. 2011; 25(6):203-207.[9] Zhang XH, Zhang YN, Li HB, Hu CY, Wang N, Cao PP, Liao B, Lu X, Cui YH, Liu Z.Overexpression of miR-125b, a novel regulator of innate immunity, in eosinophilic chronicrhinosinusitis with nasal polyps. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine.2012; 185(2):140-51.[10] 刘争 , 高起学 , 崔永华 . 慢性鼻 - 鼻窦炎 : 加强对国人自身特点的研究 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2009; 23(23): 1057-1058.会议报告 : 国际大会 2 分组 1 国内大会 6 分组 5培养人才 : 博士后 0 博士 9 硕士 9小干扰 RNA 抑制 SP 及其受体表达对变应性鼻炎治疗机制的研究批准号 :30872848项目负责人 : 章如新所在单位 : 复旦大学通过小干扰 RNA(small interfering RNA,siRNA) 技术抑制变应性鼻炎 (allergicrhinitis,AR) 中 P 物质 (substance P, SP) 及速激肽 -1 受体 (neurokinin-1 receptor,NK1-R) 基因的表达 , 探讨 P 物质及受体小干扰 RNA(SP-siRNA ,NK1R-siRNA) 对 AR 的治疗机制。通过设计、构建 siRNA 表达载体 , 用抗体芯片、real time PCR、免疫荧光、免疫组- 265 -

化、ELISA 等方法 , 检测 SP、NK-1R 及多种炎性因子的表达 , 并观察 AR 病理变化。结果显示 ,SP-siRNA 及 NK1R-siRNA 表达载体可抑制肥大细胞 RBL-2H3 中 SP 及 NK1R 的表达 , 引起肥大细胞脱颗粒水平下降。用 SP-siRNA 及 NK1R-siRNA 进行干预治疗 , 明显降低 AR 鼻黏膜局部 SP 及 NK1R 基因的表达 , 抑制鼻黏膜中 IL-4,IL-6,IL-9,Eotaxin 等多种炎性因子表达 , 减少嗜酸性粒细胞在鼻黏膜及鼻分泌液中的含量 , 缓解 AR 症状。该研究为 AR 基因治疗研究提供了理论依据。关键词 : 变应性鼻炎 ;P 物质 ; 速激肽 -1 受体 ; 小干扰 RNA学科代码 :H1301发表论著 :[1] Hu H, Zhang R, Fang X, Yu M, Yu S, Zhang J, Wang H. Effects of endogenous substance Pexpression on degranulation in RBL-2H3 cells. Inflamm Res. 2011; 60(6):541-6.[2] Shaoqing Y, Ruxin Z, Guojun L, Zhiqiang Y, Hua H, Shudong Y, Jie Z. Microarray analysisof differentially expressed microRNAs in allergic rhinitis. Am J Rhinol Allergy. 2011;25(6):242-6.[3] Hua H, *Zhang R, Yu S, Wang H, Zhao Y, Yu S, Li W. Tissue-type plasminogen activatordepletion affects the nasal mucosa matrix reconstruction in allergic rhinitis mice. AllergolImmunopathol (Madr). 2011; 39(4):206-11.[4] Shaoqing Y, *Ruxin Z, Yinjian C, Jiangqiu C, Zhiqiang Y, Genghong L. Down-Regulation ofEndogenous Hydrogen Sulfide Pathway in Nasal Mucosa of Allergic Rhinitis in Guinea Pigs.Allergol Immunopathol (Madr). 2009; 37(4):180-7.[5] Shaoqing Y, *Ruxin Z, Yinjian C, Jiangqiu C,Zhiqiang Y, Genghong L. A meta-analysis ofthe association of exhaled carbon monoxide on asthma and allergic rhinitis. Clin Rev AllergyImmunol. 2011; 41(1):67-75.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 4 分组 3培养人才 : 博士后 1 博士 2 硕士 2TLR2 在鼻炎 - 鼻窦炎 - 鼻息肉发生发展过程中的作用机制及意义的研究批准号 :30872849项目负责人 : 曹志伟所在单位 : 中国医科大学鼻黏膜上皮细胞在呼吸道黏膜免疫中有非常重要的作用。近年来 Toll 样受体 2(TLR2)的研究是国际上免疫研究中的热点。我们已证实 TLR2 和炎症因子之间的协同促进表达在炎症中的重要意义 , 但 TLR2 在鼻炎 , 鼻窦炎和鼻息肉疾病中全面的实验和临床研究尚不充分 ,TLR2 在鼻腔细菌性和过敏性炎症中的作用机制有待探索。本项目拟应用 RealtimePCR,Western blot 等分子和细胞生物学技术 , 实现目的 (1) 通过制作鼻炎小鼠模型 , 检测 TLR2 在小鼠鼻炎不同类型和不同时期的表达特点 ;(2) 收集临床上鼻炎、鼻窦炎和鼻息肉患者及术后复发者的不同阶段鼻腔黏膜标本进行检测 , 明确 TLR2 在 " 鼻炎 - 鼻窦炎 - 鼻息肉 " 发生发展过程中的表达变化 ;(3) 应用 TLR2 基因敲除小鼠进一步检测 TLR2 表达对鼻腔- 266 -

黏膜炎性病变演进的作用机制。本研究对明确 TLR2 在鼻炎 - 鼻窦炎 - 鼻息肉中的表达相关性有重要的理论意义和科学价值。关键词 :Toll 样受体 2; 鼻炎 ; 鼻窦炎 ; 鼻息肉 ; 复发学科代码 :H1301发表论著 :[1] Gu Z, Jin M, Cao Z. Role of eotaxin-3 in chronic rhinosinusitis with nasal polyps.Otolaryngol Head Neck Surg. 2011; 145(2):324-6.[2] Jin M, Gu Z, Bian Z, Yang J, Cao Z, Yu X, Guo G. Developing a mouse model of acutebacterial rhinosinusitis. Eur Arch Otorhinolaryngol. 2011; 268(6):857-61.[3] Gu Z, Cao Z, Jin M. Expression and role of acidic mammalian chitinase and eotaxin-3 inchronic rhinosinusitis with nasal polyps. J Otolaryngol Head Neck Surg. 2011; 40(1):64-9.[4] 曹志伟 , 顾兆伟 , 边志刚 , 舒红 . 双侧嗅裂区呼吸道上皮腺瘤样错构瘤临床病理特点 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2010; 24(11): 507-510.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 4c-Myc 及 Cyclin A2 诱导豚鼠耳蜗前体细胞增殖的实验研究批准号 :30872857项目负责人 : 邱建华所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学哺乳动物的耳蜗毛细胞为特殊分化的终末细胞 , 损伤后不能再生。本课题通过体内外实验 , 观察细胞周期相关分子 c-Myc 和 Cyclin A2 对耳蜗前体细胞增殖、分化的影响 , 评估c-Myc 和 Cyclin A2 对耳蜗毛细胞损伤及听功能的作用 , 为感音神经性耳聋的临床治疗提供新的理论基础。流式细胞技术及 Brdu 染色证实 :Ad-c-Myc-EGFP、Ad-CyclinA2-EGFP 共转染组使耳蜗前体细胞具有增殖能力 , 并证实其可能的调控机制为经典的 CKI-cyclin-CDK途径。此外 , 我们发现在同样噪声暴露条件下 , 大鼠耳蜗内注射 Ad-c-Myc-EGFP 可有效的降低噪声对外毛细胞及听功能的损伤作用 , 其作用机制还有待进一步阐明。关键词 :c-Myc;Cyclin A2; 细胞周期 ; 增殖 ;学科代码 :H1303发表论著 :[1] Han Y, Hong L, Chen Y, Zhong C, Wang Y, Zhao D, Xue T, Qiao L, Qiu J. Up-regulation ofNob1 in the rat auditory system with noise-induced hearing loss. Neurosci Lett. 2011;491(1):79-82.[2] Han Y, Zhong C, Hong L, Wang Y, Qiao L, Qiu J. Effect of c-myc on the ultrastructuralstructure of cochleae in guinea pigs with noise induced hearing loss. Biochem Biophys Res- 267 -

Commun. 2009; 390(3):458-62.[3] Han Y, Hong L, Zhong C, Xue T, He Y, Chen J, Chunyu X, Qiao L, Qiu J. The expression ofNOB1 in spiral ganglion cells of guinea pig. Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 2009;73(2):315-9.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0获奖 : 省部级科技进步奖二等 1 项内毛细胞损伤动物模型的建立及其听觉电生理学研究批准号 :30872858项目负责人 : 龚树生所在单位 : 首都医科大学听神经病 ( AN) 因存在病因不明、病变部位及发病机制不清、治疗效果不肯定等诸多争议 , 是临床诊疗较为棘手的致聋性疾病。本课题通过谷氨酸及其受体抑制剂灌流 , 对动物模型进行电生理及形态学等一系列的研究得出如下结论 :1: 谷氨酸对耳蜗内毛细胞及螺旋神经元有明显的毒性作用 , 并可通过 AIF 诱导螺旋神经元的凋亡。2:DNQX 能拮抗谷氨酸的生理作用 , 而对耳蜗没有明显的毒性作用。3: 采用灌流谷氨酸、DNQX 混合液的方法能建立损伤在内毛细胞的动物模型。关键词 : 听神经病 ; 内毛细胞 ; 谷氨酸抑制剂 ; 动物模型学科代码 :H1303发表论著 :[1] Lu H, Wang X, Sun W, Hu Y, Gong S. New insights into glutamate ototoxicity in cochlearhair cells and spiral ganglion neurons. Acta Oto-Laryngologica. 2010; 130(12):1316-1323.[2] 鲁海涛 , 龚树生 . Blackman 包络短音的时程对听性脑干反应的影响 . 听力学及言语疾病杂志 . 2010; 03: 253-256.[3] 鲁海涛 , 龚树生 . 短声和短音诱导豚鼠 SP-AP 电位的比较 . 听力学及言语疾病杂志 . 2010;02: 157-159,[4] 鲁海涛 , 龚树生 . 谷氨酸诱导细胞凋亡的机制及对内毛细胞突触复合体的损伤 . 国际耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2009; 33(6): 604-606.会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 2 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 1批准号 :30872859儿童植入人工耳蜗后开放式听觉言语发育特性研究- 268 -

项目负责人 : 刘莎所在单位 : 首都医科大学本项目是针对接受人工耳蜗植入 (Cochlear implant,CI) 的低龄听障儿童重获听力后随年龄增长听觉言语发育过程的研究 , 依据言语听辨邻域激活模型与噪声竞争下儿童言语发育机制理论 , 采用 M-LNT,MMLNT 和 MHINT-C 等评价工具 , 对正常儿童进行跟踪研究 , 建立了 M-LIN 词表在正常人中的强度识别函数曲线 , 得到了各类性质词表的言语识别阈及临界差值。并获得到了 MHINT 词表在正常儿童及成人的言语识别阈及校正因子。在此基础上同时对 CI 儿童进行跟踪测试 , 得出 CI 儿童在记忆中组织和提取词汇的方式与听力正常儿童一致 , 单词频率和邻域密度对其言语识别有显著影响。对 CI 儿童安静及噪声环境下词汇发育特性研究表明 , CI 儿童与听力正常儿童的听觉言语发育遵循同样的轨迹 , 但 CI 儿童相对滞后 , 聆听技巧的掌握及发挥双耳对噪声压制作用对 CI 儿童言语理解尤其是噪声下言语理解有帮助。这些结果的获得为 CI 儿童的听觉言语发育规律提供可靠的数据 , 为 CI 儿童康复策略和预期目标提供有效的理论依据。关键词 : 儿童 ; 听觉言语 ; 发育 ; 人工耳蜗学科代码 :H1303发表论著 :[1] Zhang N, Liu S, Xu J, Liu B, Qi B, Yang Y, Kong Y, Han D. Development and applications ofalternative methods of segmentation for Mandarin Hearing in Noise Test in normal-hearinglisteners and cochlear implant users. . 2010; 130(7):831-7.[2] Liu C, Liu S, Zhang N, Yang Y, Kong Y, Zhang L. Standard-Chinese Lexical NeighborhoodTest in normal-hearing young children. Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 2011; 75(6):774-81.[3] 张宁 , 刘莎 . 人工耳蜗使用者噪声环境下言语识别能力研究 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 .[4] 王素菊 , 刘莎 . 普通话儿童词汇相邻性测试词表总体信度评估 . 首都医科大学学报 .[5] 徐娟娟 , 刘莎 . 儿童噪声下听觉言语发育特性及测听材料的选择 . 听力学及言语疾病杂志 .会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5XIAP 对老年性聋皮层 GABA 能神经元凋亡的抑制作用及其机制批准号 :30872861项目负责人 : 陈继川所在单位 : 中国人民解放军第三军医大学老年性聋是临床常见病 , 严重影响患者生活质量。我国老年患病率为 33.7%, 发病机制不清 , 疗效不佳。X 染色体相关凋亡抑制蛋白 (XIAP) 在预防或治疗神经退行性病变中具有重要作用 , 研究发现听觉神经细胞凋亡是老年性聋重要的病理学变化 , 听皮层 γ - 氨基丁酸 (GABA) 能神经元与老年听功能衰退密切相关 , 提示 XIAP 可能经某一途径调控了 GABA 神经- 269 -

元的凋亡进程。为此我们拟采用老年性聋动物模型 C57BL/6J 小鼠 , 借助 Ad-XIAP 与XIAP-RNAi 从正、反两方面干扰皮层 GABA 能神经元的凋亡进程 , 通过对年轻组与老年组听皮层 GABA 能神经元凋亡、XIAP 表达水平、AERP、ABR、DPOAE 等指标的检测 , 研究听皮层GABA 能神经元的凋亡程度对老年性聋动物听功能的影响及其机制 , 证实听皮层 GABA 能神经元在老年性聋发病过程中的重要作用 , 揭示 XIAP 在老年性聋发病中的重要作用 , 为防治老年性聋提供重要的理论依据。关键词 : 听皮层 ; 老年性聋 ;XIAP;GABA; 神经元学科代码 :H1303发表论著 :[1] 胡玥 , 姬长友 , 陈继川 . 重组腺病毒载体介导外源性 XIAP 抑制听皮层 GABA 能神经元凋亡与老年性聋相关性研究进展 . 听力学及言语疾病杂志 . 2011; 06: 579-581.[2] 胡玥 , 陈继川 , 吴晓平 , 任红苗 , 姬长友 . 构建 Ad-XIAP 感染原代培养老年性聋模型小鼠皮层神经细胞的实验研究 . 山东大学耳鼻喉眼学报 . 2011; 04:16-19.[3] 李洪波 , 陈继川 , 姬长友 . C57BL/6J 小鼠初级听皮层神经元凋亡与 caspase-3 表达的年龄相关性改变 . 听力学及言语疾病杂志 . 2009; 03:248-251.[4] 李洪波 , 陈继川 , 姬长友 . XIAP 在年龄相关性听力减退 C57BL/6J 小鼠初级听皮质的表达中华耳科学杂志 . 2009; 01: 85-88.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3药物性耳聋相关线粒体基因突变的发生和致病机制研究批准号 :30872862项目负责人 : 戴朴所在单位 : 中国人民解放军总医院完成了近八千例全国各地聋人标本的线粒体 A1555G 和 C1494T 突变的筛查工作 , 完成了所有家系的家族史调查和系谱图绘制 , 详细收集了家族内药物性耳聋发生的相关信息 , 完成了部分家庭的线粒体全序列分析 , 并进行了单倍体型分析 , 结果表明导致药物性耳聋的线粒体常见突变可能是多发性起源。第一次在世界上发现了线粒体 A1555G 新发生的证据 ,找到了线粒体 A1555G 突变是热点突变的直接证据。合作实施了 " 北京市高危人群致聋基因筛查项目 ", 对 20839 例北京市残联在册的持证聋人进行致聋基因筛查 , 其中 442 例为A1555G 和 C1494T 突变携带者。此外发现 6 例双基因突变耳聋患者 , 其在携带 A1555G 或C1494T 突变的同时 , 为 GJB2 基因或 SLC26A4 基因双位点突变的携带者 , 据此对这 6 例家庭进行正确的遗传咨询。绘制 mtDNA A1555G 和 C1494T 线粒体基因组单倍体型的地区分布图 ,绘制可能的特定单体型的迁移路线和线粒体树分支。确定 mtDNA A1555G 和 C1494T 为热点突变。申请人所领导的课题组在本课题基金资助下已发表论文 14 篇 , 其中 SCI 收录的英文论文 8 篇 , 累计影响因子 38.54- 270 -

关键词 : 药物性耳聋 ; 线粒体基因 ; 致病机制 ; 单倍体型分析 ; 预防干预 ;学科代码 :H1303发表论著 :[1] Zhu Y, Li Q, Chen Z, Kun Y, Liu L, Liu X, Yuan H, Zhai S, Han D, Dai P. Mitochondrialhaplotype and phenotype of 13 Chinese families may suggest multi-original evolution ofmitochondrial C1494T mutation. Mitochondrion. 2009; 9(6):418-428.[2] Dai P, Yu F, Han B, Liu X, Wang G, Li Q, Yuan Y, Liu X, Huang D, Kang D, Zhang X, YuanH, Yao K, Hao J, He J, He Y, Wang Y, Ye Q, Yu Y, Lin H, Liu L, Deng W, Zhu X, You Y, CuiJ, Hou N, Xu X, Zhang J, Tang L, Song R, Lin Y, Sun S, Zhang R, Wu H, Ma Y, Zhu S, WuBL, Han D, Wong LJ. GJB2 mutation spectrum in 2063 Chinese patients with nonsyndromichearing impairment. J Transl Med. 2009; 7:26(1-12).[3] Yuan Y, You Y, Huang D, Cui J, Wang Q, Yu F, Kang D, Yuan H, Han D, Dai P.Comprehensive molecular etiology analysis of nonsyndromic hearing impairment fromtypical areas in china. J Transl Med. 2009; 7:79.[4] Liu XZ, Yuan Y, Yan D, Ding EH, Ouyang XM, Fei Y, Tang W, Yuan H, Chang Q, Du LL,Zhang X, Wang G, Ahmad S, Kang DY, Lin X, Dai P. Digenic inheritance of non-syndromicdeafness caused by mutations at the gap junction proteins Cx26 and Cx31. Hum Genet. 2009;125(1):53-63.[5] Dai P, Stewart AK, Chebib F, Hsu A, Rozenfeld J, Huang D, Kang D, Lip V, Fang H, Shao H,Liu X, Yu F, Yuan H, Kenna M, Miller DT, Shen Y, Yang W, Zelikovic I, Platt OS, Han D,Alper SL, Wu BL. Distinct and novel SLC26A4/Pendrin mutations in Chinese and U.S.patients with non-syndromic hearing loss. Physiol Genomics. 2009; 38:281-290.[6] Liu X, Han D, Li J, Han B, Ouyang X, Cheng J, Li X, Jin Z, Wang Y, Bitner-Glindzicz M,Kong X, Xu H, Kantardzhieva A, Eavey RD, Seidman CE, Seidman JG, Du LL, Chen ZY,Dai P, Teng M, Yan D, Yuan H. Loss-of-function mutations in the PRPS1 gene cause a typeof nonsyndromic X-linked sensorineural deafness, DFN2. Am J Hum Genet. 2010; 86(1):65-71.[7] Huang S, Han D, Yuan, Wang G, Kang D, Zhang X, Yan X, Meng X, Dong M, Dai P.Extremely discrepant mutation spectrum of SLC26A4 between Chinese patients with isolatedMondini deformity and enlarged vestibular aqueduct. J Transl Med. 2011; 9(1):167.[8] Dai P, Yuan Y, Huang D, Zhu X, Yu F, Kang D, Yuan H, Wu B, Han D, Wong LJ. MolecularEtiology of Hearing Impairment in Inner Mongolia: mutations in SLC26A4 gene and relevantphenotype analysis. J Transl Med. 2008; 6:74 (1-12).[9] 韩明昱 , 黄莎莎 , 王国建 , 袁永一 , 康东洋 , 张昕 , 戴朴 . 43 例耳聋家庭再生育前的遗传学分析与指导 . 中华耳鼻咽喉头颈杂志 . 2011; 46(11): 909-913.[10] 王国建 , 袁永一 , 韩冰 , 黄莎莎 , 康东洋 , 韩东一 , 戴朴 . 不同年龄的重度感音神经耳聋患者常见耳聋基因突变的阳性率分析 . 中华耳科学杂志 . 2011; 9(1): 60-65.[11] 宋跃帅 , 高松 , 韩东一 , 袁永一 , 王国建 , 戴朴 . 耳显微外科立体幻灯系统的搭建与应用 . 中华耳科学杂志 . 2011; 4: 407-411.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 5 博士 4 硕士 4- 271 -

获奖 : 国家级科技进步奖一等 1 项 , 省部级科技进步奖一等 1 项 .噪声性耳蜗损伤后下丘神经元可塑性的实验研究批准号 :30872863项目负责人 : 刘良发所在单位 : 中国人民解放军总医院噪声性耳蜗损伤被列为世界性七大公害之首。噪声暴露达到一定的强度和时间都将导致不同程度的听力下降 , 同时伴有听觉过敏、响度重振和言语识别率下降。目前已经在动物和人类证实 , 耳蜗损伤可以导致听觉中枢耳蜗背核水平以上听觉中枢的地形图功能重组 , 但是这些可塑性改变和耳蜗损伤后的临床症状之间的关系仍不明确。听觉中枢的时间编码机制是否也发生了某些改变仍不清楚。本研究拟分别以豚鼠对侧、同侧和双侧噪声性耳蜗损伤为模型 , 于右侧下丘作在体单电极记录。比较噪声性耳蜗损伤前后下丘中央核神经元对纯音、噪声、复合音刺激的反应特点 ; 通过本研究 , 将明确噪声性耳蜗损伤后下丘神经元的部位编码的重组是否同时伴随时间编码机制的改变 , 兴奋 / 抑制、双耳组合 / 分离机制在下丘神经元的可塑性中的作用 , 耳蜗损伤后听力下降、耳鸣、重振及言语识别能力下降的可能机制。为开辟噪声性耳蜗损伤的新防治措施提供理论和实验依据。关键词 : 噪声性聋 ; 听觉可塑性 ; 时间编码 ; 听觉功能重组 ; 频率分辨学科代码 :H1303发表论著 :[1] 王丰 , 刘良发 , 洪波 , 郭维 , 刘会占 , 韩东一 . 正常豚鼠下丘的电生理特性中华耳科学杂志 . 2010; 02: 207-215.[2] 王丰 , 刘良发 . 外周听器损伤所致听觉中枢改变的研究进展 . 中华耳科学杂志 . 2010;02: 179-182.[3] 王丰 , 刘良发 , 洪波 , 郭维 , 刘会占 , 韩东一 . 噪声性耳蜗损伤后豚鼠下丘 γ- 氨基丁酸 (GABA) 的改变 . 中华耳科学杂志 . 2010; 02: 216-220.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 3WFS1 基因异质性突变致遗传性耳聋表型差异的发病机制研究批准号 :30872864项目负责人 : 刘玉和所在单位 : 北京大学本课题研究遗传性耳聋的致聋基因突变以及突变基因的致聋机制。在两个常染色体显- 272 -

性遗传性耳聋家系中采用全基因组扫描 ,SNP 连锁分析的方法连锁分析获得耳聋家系相关基因的定位 , 分别定位于 9 号染色体和 4 号染色体。然后采用全基因组外显子捕获技术结合相关基因定位区间内全部基因功能分析 , 确定 DFNB31 基因是一个常显家系的致病基因 , 其基因错义突变导致氨基酸的改变 , 通过软件分析确定该突变改变了 dfnb31 蛋白的空间结构和激酶功能。进一步研究突变基因的致聋机理包括通过免疫组织化学法检测 WFS1 基因在鼠耳蜗组织和听觉中枢的表达分布 , 然后分别检测低频遗传性聋患者与正常听力者的成纤维细胞中 wolframin 蛋白的含量。通过分析不同突变型 WFS1 基因编码蛋白的稳定性以及对耳蜗不同部位细胞功能的影响 , 结合临床听力学特点 , 揭示突变致遗传性聋表型差异的机制。本研究一方面确定了两个常染色体显性遗传性耳聋家系的致聋基因 , 另一方面也揭示了 WFS1 基因异质性突变致遗传性耳聋表型差异的机制。本研究将对进一步研究同一基因不同突变致不同遗传表型的致聋机制研究具有重要的意义。关键词 : 遗传性聋 ; 基因突变 ; 蛋白 ; 机制学科代码 :H1303发表论著 :[1] Xue J, Li T, Sun X, Liu Y. Focal defect of mastoid bone shell in the region of thetransverse-sigmoid junction: a new cause of pulsatile tinnitus. J Laryngol Otol. 2012;126(4):409-13.[2] 薛俊芳 , * 刘玉和 . 线粒体脑肌病的临床听力学特点 . 中国听力语言康复科学杂志 . 2011;45(2): 29-31.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3前庭胆碱能传出神经系统在梅尼埃病中的作用及机制批准号 :30872865项目负责人 : 孔维佳所在单位 : 华中科技大学在本项目资助下 , 我们应用全细胞膜片钳技术、单细胞 RT-PCR 技术及离子影像技术检测新鲜单离的豚鼠前庭终器 II 型前庭毛细胞上的 ACh 受体通道 , 通过电生理学和分子生物学、离子影像实验技术相结合 :(1) 发现并证实了豚鼠 II 型前庭毛细胞存在一功能性 m2 型胆碱能受体。此受体与细胞内 G 蛋白相耦联 , 通过激动细胞内 Giβ γ 亚单位 - 腺苷酸环化酶/cAMP-PKA 通路介导 II 型前庭毛细胞表面 BK 通道蛋白磷酸化 , 引起 BK 通道开放 , 细胞内钾离子外流 , 导致 II 型前庭毛细胞超极化 ;(2) 进一步我们发现庆大霉素 (GM) 可逆性、非竞争性抑制豚鼠 VHCs II 上 ACh- 敏感性 BK 电流 , 并且依赖于细胞外钙离子浓度 , 而与细胞钳制电位无关 , 故推测作用机制可能为 GM 与钙离子竞争钙通道使钙内流减少 , 进而抑制 BK电流 ;(3) 我们建立了自身免疫性内耳病 (AIED) 的动物模型 , 该模型为研究 AIED 提供了较为理想的的工具 ;(4) 同时 , 进行了工具酶作用的研究 , 为本研究的继续深入奠定了良好的基础。(5) 我们研究了线粒体 DNA 缺失突变在年龄相关动物及正常动物中的现象及突变机- 273 -

制 , 为进一步探讨 DNA 突变在梅尼埃病中的作用机制奠定了基础。关键词 : 前庭 ; 毛细胞 ; 梅尼埃病 ; 胆碱能 ; 庆大霉素学科代码 :H1303发表论著 :[1] Kong WJ, Wang DY, Huang X, Ding GF. High dose combination pertussis toxin inducesautoimmune inner ear disease in Sprague-Dawley rats. Acta Oto-Laryngologica. 2011;131(7):692-700.[2] Yao Q, Cheng H, Guo C, Zhou T, Huang X, Kong W. Muscarinic acetylcholine receptorsubtype expression in type vestibular hair cells of guinea pigs. J Huazhong Univ SciTechnolog Med Sci. 2011; 31(5):682-6.[3] Zhong Y, Hu YJ, Chen B, Peng W, Sun Y, Yang Y, Zhao XY, Fan GR, Huang X, Kong WJ.Mitochondrial transcription factor A overexpression and base excision repair deficiency in theinner ear of rats with D-galactose-induced aging. FEBS J. 2011; 278(14):2500-10.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 8 硕士 0频域转换提高人工耳蜗植入者语音识别作用的试验研究批准号 :30872867项目负责人 : 陈兵所在单位 : 复旦大学由于儿童言语测听难于操作 , 大多数儿童人工耳蜗 (Cochlear Implant,CI) 研究仅仅局限于简单基本的感知测试。而 CI 儿童相对较难的汉语普通话言语识别 ( 如多说话者的双音节词和语句识别 ) 的研究更是非常有限。此外 , 竞争性音乐识别对于 CI 患者来说尤其困难 , 音高 , 音色和时间因素可能用于竞争性旋律的分离和分组。本研究探究 CI 儿童的人口统计学因素对相对较难的汉语普通话言语识别表现的影响以及音高 , 音色和时间因素对 CI患者的竞争性音乐识别表现的影响。本研究测试了 37 名 CI 儿童的多说话者 (2 男 ,2 女 )的开集汉语普通话双音节词和语句识别 , 同时测试了 CI 患者和听力正常者的带有和不带有掩蔽的音乐轮廓识别。结果显示早期人工耳蜗植入对重度耳聋儿童具有重要意义。对相对较难的言语识别测试的较好表现表明开集词汇和语句识别可用于年长的 CI 儿童的言语识别表现评估。听力正常人群竞争性音乐识别表现很好 ; 而 CI 患者的表现较差。有些 CI 患者可以应用或综合音高 , 音色和时间因素进行竞争性音乐的识别 , 而多数则不能 , 表明较差的分离表现是由于人工耳蜗的较差的频谱分辨率。关键词 : 人工耳蜗植入 ; 言语 ; 汉语普通话 ; 音乐 ; 分离学科代码 :H1303发表论著 :- 274 -

[1] Zhu M, Fu QJ, Galvin JJ 3rd, Jiang Y, Xu J, Xu C, Tao D, Chen B. Mandarin Chinese speechrecognition by pediatric cochlear implant users. Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 2011;75(6):793-800.[2] Zhu M, Chen B, Galvin JJ 3rd, Fu QJ. Influence of pitch, timbre and timing cues on melodiccontour identification with a competing masker (L). J Acoust Soc Am. 2011; 130(6):3562-5.[3] 陶朵朵 , 陈兵 . 讲方言成人语后聋患者 REZ-Ⅰ 型人工耳蜗植入后疗效分析 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 16: 735-737.[4] 陶朵朵 , 陈兵 . REZ-1 型人工耳蜗成人语后聋植入者普通话声调识别分析 . 中华医学杂志 .2011; 91(30): 2096-2098.[5] 陶朵朵 , 陈兵 . 人工耳蜗植入对耳蜗残余听力的影响 . 国际耳鼻咽喉头颈外科杂志 .2010; 34(4): 209-211.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1抗坏血酸和谷氨酸异体交换机制在耳鸣发病机制中的作用批准号 :81070788项目负责人 : 马芙蓉所在单位 : 北京大学在经典的耳鸣动物模型的基础上 , 利用最新创建的微电极原位伏安分析方法 , 将尺寸微小的 ( 直径 7 微米 , 长度 200-500 微米 ) 的表面功能化碳纤维电极准确置入耳蜗微区以及听觉通路上各级中枢核团内 , 在基本不破坏生物体内环境及保持内耳微环境相对稳定的情况下活体实时动态研究耳鸣动物模型耳蜗鼓阶微区外淋巴液以及听觉传导通路上各级神经核团中抗坏血酸和谷氨酸的变化规律以及抗坏血酸 - 谷氨酸异体交换的具体过程 , 为阐明抗坏血酸 - 谷氨酸异体交换机制参与耳鸣发病机制提供直接的实验证据和有价值的理论根据 , 这对临床上避免谷氨酸受体拮抗剂在精神方面上的副作用和提高抗氧化剂的疗效具有重要的生物学意义和理论价值。实现在耳鸣病理变化过程中 , 多种方法和技术 ( 听力学、形态学、活体微区原位电化学分析 ) 研究和开发一些与耳鸣防治相关的、有实际实用价值的谷氨酸转运体相关的抑制剂或激动剂 , 为耳鸣的治疗提供新的药物作用靶点 , 具有重要临床指导意义。关键词 : 耳鸣 ; 耳蜗 ; 谷氨酸 ; 抗坏血酸 ; 微电极原位伏安分析方法学科代码 :H1304发表论著 :[1] 李涛 , 马芙蓉 . 水杨酸钠对豚鼠下丘镁离子的影响 . 中国耳鼻咽喉头颈外科 . 2011;18(4): 181-184.[2] 柯嘉、马芙蓉 . 儿童及青少年慢性化脓性中耳炎临床特点 . 中国耳鼻咽喉头颈外科 .2011; 18(7): 342-344.- 275 -

会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 6 硕士 0紧密连接蛋白在噪声性听力损伤中的作用及其调控机制批准号 :81070790项目负责人 : 卢连军所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学听觉功能的好坏是衡量生活质量的重要因素之一 , 而环境噪声是引起听觉功能障碍的主要危险因素。血迷路屏障在维持内耳微环境的平衡和内耳功能方面起着重要作用 , 血管纹和螺旋韧带中的毛细血管内皮细胞间的紧密连接蛋白在维持血迷路屏障的完整性方面发挥重要作用。本课题拟通过噪声性听力损伤模型 , 应用免疫组织化学、激光共聚焦显微镜、电子显微镜、western blot 等方法在整体水平观察噪声暴露对豚鼠血迷路屏障通透性的影响以及在此过程中紧密连接蛋白表达水平的变化 , 旨在探讨紧密连结蛋白在噪声所致的血迷路屏障通透性损伤中的作用 ; 阐明 ERK 信号转导通路在噪声所致血迷路屏障通透性损伤中的保护作用 , 并明确其调控的分子途径 , 为进一步研究噪声性听力损伤的机制、探讨防治措施提供新的思路和理论依据。关键词 : 噪声 ; 听力损伤 ; 血迷路屏障 ; 紧密连结蛋白 ;MAPK 信号转导通路学科代码 :H1304发表论著 :[1] 吴永翔、朱国霞、刘新秦、米文娟、刘顺利、卢连军 . 噪声对豚鼠耳蜗血管纹紧密连接蛋白 claudin-5 表达及血迷路屏障通透性的影响 . 听力学及言语疾病杂志 , 已接收 .会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1H13 耳鼻咽喉头颈科学青年科学基金项目- 276 -

糖皮质激素受体对慢性鼻 - 鼻窦炎激素治疗抵抗的影响及超抗原参与作用的信号途径研究批准号 :30801279项目负责人 : 王明明所在单位 : 山东省立医院阐明激素抵抗的病理机制和分子基础 , 对于指导临床上合理应用激素、制定有效的治疗方案及解决激素抵抗的实验研究 , 具有重要的临床价值和理论意义。本研究通过对 Ⅰ、Ⅱ 型慢性鼻 - 鼻窦炎 (CRS) 患者药物 + 手术规律治疗后 1.5~2.0 年的随访 , 对激素治疗敏感和抵抗 (Ⅲ 型 CRS) 患者进行鼻组织超抗原检测 , 依据检测结果分组 , 进行体内不同病理状态下糖皮质激素受体 (GR)α /β 、GR 表达影响因子 (NF-κ B,TNF-α ,IFNs)、激素效应相关因子 (IL-2,IL-4) 的检测分析。同时 , 进行鼻粘膜上皮细胞的体外培养 , 分别在超抗原、GR 表达影响因子和糖皮质激素刺激及 GRβ 重组腺病毒载体转染上皮细胞等培养条件下 , 进行相关因子的检测。通过体内、体外研究 , 提示金葡菌超抗原与 CRSwNP 激素抵抗的形成有关 , 在 CRS 发生、发展及复发中可能是通过 NF-kB、IFNα 等因子的表达上调或抑制 , 诱发 GRβ 的异常表达 , 使得机体产生获得性激素治疗抵抗。关键词 : 受体 ; 糖皮质激素 ; 超抗原 ; 鼻窦炎 ; 激素抵抗学科代码 :H1301发表论著 :[1] Wang M, Shi P, Chen B, Shi G, Li H, Wang H. Superantigen-induced glucocorticoidinsensitivity in the recurrence of chronic rhinosinusitis with nasal polyps. Otolaryngol HeadNeck Surg. 2011 Nov; 145(5): 717-722.[2] 刘亦青 , 李红 , 纪宏志 , 何明强 , 时光刚 . 165 例慢性鼻 - 鼻窦炎患者变应性相关临床资料分析 . 山东大学耳鼻喉眼学报 . 2011; 06: 74-76.[3] 王明明 , 张国栋 , 王小婷 , 李建峰 , 王海波 . 人鼻息肉黏膜上皮细胞 3 种原代体外培养方案的比较 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 17: 796-799.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2嗅觉功能客观评估体系的建立及其临床应用研究批准号 :30801281项目负责人 : 刘剑锋所在单位 : 中日友好医院嗅觉功能客观评估是嗅觉研究的重点和难点。本研究建立起了嗅觉事件相关电位、嗅觉结构核磁影像学和嗅觉功能核磁影像为核心的嗅觉客观评估体系。嗅觉事件相关电位是嗅觉电生理评估 , 在完善嗅觉诱发电位仪研制基础上 , 完成了嗅觉事件相关电位的主要影- 277 -

响因素的确立、正常值建立以及嗅觉相关疾病的 OERP 变化特点的总结。嗅觉结构核磁影像学是以特殊扫描技术显示嗅觉系统的细微结构 : 嗅球、嗅束以及梨状皮层等嗅觉相关中枢。本项目通过完善扫描技术 , 完成了部分嗅觉系统结构影像学参数 , 探讨了嗅觉相关疾病的嗅路结构 MRI 特点。嗅觉功能核磁影像学是以 fMRI 显示嗅觉脑活化区 , 本项目通过完善 fMRI 设计、采样分析技术 , 探讨主要相关影像因素 , 建立了正常年轻人嗅觉脑功能区 ,探讨嗅觉相关疾病的脑活化区变化特点。并将该评估体系综合应用于临床嗅觉评估 , 为嗅觉障碍相关疾病的诊治提供客观有效的依据。关键词 : 嗅觉 ; 嗅觉障碍 ; 事件相关电位 ; 功能影像 ; 核磁影像学科代码 :H1301发表论著 :[1] Qu Q, Liu J, Ni D, Zhang Q, Yang D, Wang N, Wu X, Han H. Diagnosis and ClinicalCharacteristics of Congenital Anosmia: Case Series Report. J Otolaryngol Head Neck Surg.2010; 39(6):723-731.[2] Guan J, Ni DF, Wang J, Gao ZQ. Discordance between olfactory psychophysicalmeasurements and olfactory event related potentials in five patients with olfactorydysfunction following upper respiratory infection. Chin Med J. 2009; 122(13):1554-1557.[3] Wang J, You H, Liu JF, Ni DF, Zhang ZX, Guan J. Association of Olfactory Bulb Volume andOlfactory Sulcus Depth with Olfactory Function in Patients with Parkinson Disease. AJNRAm J Neuroradiol. 2010; 32:677-681.[4] 倪道凤 , 陈志宏 , 刘剑锋 , 王剑 , 关静 , 朱莹莹 , 邹绮娟 , 万桂莲 , 王晓巍 , 有慧 , 王娜亚 ,程靖宁 , 刁雯雯 , 邱恩慧 , 上官翰京 , 李志春 , 王茂鑫 . 嗅觉基础与临床 . 人民卫生出版社 . 2010; 327.[5] 王剑 , 有慧 , 张振馨 , 关静 , 陈兴明 , 刘剑锋 , 杨大海 , 商莹莹 , 朱莹莹 , 邹琦娟 , 高志强 ,倪道凤 . 磁共振成像测量健康中老年人嗅球体积的特点 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 .2009; 44(12):1006-1009.[6] * 刘剑锋 , 王剑 , 有慧 , 倪道凤 , 杨大章 . 孤立性先天性失嗅临床以及 MR 影像学特点 . 中华医学杂志 . 2010; 90(20):1424-1426.[7] 王剑 , 倪道凤 , 关静 , 刘剑锋 , 陈兴明 , 杨大海 , 商莹莹 , 朱莹莹 , 邹琦娟 , 亓放 , 高志强 .以嗅觉障碍为主要症状的慢性鼻 - 鼻窦炎临床分析 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2010;24(12):529-534.[8] 关静 , 倪道凤 , 王剑 , 朱莹莹 , 徐春晓 , 陈兴明 , 刘剑锋 . 上呼吸道感染和鼻部炎性疾病嗅觉障碍的治疗 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2010; 24(11):484-488.[9] 刘剑锋 , 陶泽璋 , 杨大章 . 细菌生物膜与慢性鼻及鼻窦炎 . 国际耳鼻咽喉头颈外科杂志 .2010; 34(2):71-73.会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0耳聋相关 SLC26A4 基因突变类型和临床表型相关性研究- 278 -

批准号 :30801285项目负责人 : 袁永一所在单位 : 中国人民解放军总医院本项目建成并完善了覆盖全国 27 个省市自治区、涉及 21 个民族 , 共 3000 例感音神经性耳聋患者的 DNA 库 , 绘制了高质量的中国耳聋人群 SLC26A4 基因突变及多态性图谱、SLC26A4 基因突变的地区分布图以及各种不同突变在中国各主要民族的分布图 , 同时进行了 SLC26A4 基因突变频率分析 ; 比较了 SLC26A4 基因不同突变类型的表型差异 , 探讨了国内外未报道的新发现突变与表型的相关性 , 初步制定了 SLC26A4 基因病理性突变的标准 ; 在正常人和非内耳畸形的患者中进行了 SLC26A4 基因筛查 , 排除了 SLC26A4 基因突变与不伴内耳形态异常的耳聋的关联性 ; 初步分析了 Pendred 综合征在中国的发病情况。本项目阐述了中国人群大前庭水管综合征性耳聋的主要遗传方式、致病基因和突变分布 , 根据地域、民族差异建立了 SLC26A4 基因筛查的相应策略 ; 建立了完善的大前庭水管基因诊断方法 ,实现了分子流行病学调查中 90% 大前庭水管通过基因筛查先于内耳影像学检查的方法而明确诊断的目标。在上述 SLC26A4 基因分子流行病学研究基础上研制了针对 SLC26A4 基因 8种常见致病突变的检测试剂盒 , 并通过了初步临床验证。关键词 :SLC26A4(PDS) 基因 ; 表型 ; 突变类型 ; 大前庭水管 ;Pendred 综合征学科代码 :H1303发表论著 :[1] Yuan Y, You Y, Huang D, Cui J, Wang Y, Wang Q, Yu F, Kang D, Yuan H, Han D, Dai P.Comprehensive molecular etiology analysis of nonsyndromic hearing impairment fromtypical areas in China. J Transl Med. 2009; 7:79.[2] Yuan Y, Zhang X, Huang S, Zuo L, Zhang G, Song Y, Wang G, Wang G, Huang D, Han D,Dai P. Common molecular etiologies are rare in nonsyndromic Tibetan Chinese patients withhearing impairment. PLoS One. 2012; 7(2):30720.[3] Yuan Y, Yu F, Wang G, Huang S, Yu R, Zhang X, Huang D, Han D, Dai P. Prevalence of theGJB2 IVS1+1G>A mutation in Chinese hearing loss patients with monoallelic pathogenicmutation in the coding region of GJB2. J Transl Med. 2010; 8:127.[4] 袁永一 , 黄莎莎 , 王国建 , 康东洋 , 韩东一 , 黄德亮 , 戴朴 . 27 个省市聋校学生基于SLC26A4 基因 IVS7-2 A>G 突变的全序列分析 . 2011 年发表于中华耳科学杂志 .[5] 袁永一 , 王国建 , 黄德亮 , 康东洋 , 戴朴 . 大前庭水管相关 SLC26A4 基因热点突变区域筛查方案探讨 . 2010 年发表于中华耳科学杂志 .[6] 袁永一 , 戴朴 , 朱秀辉 , 康东洋 , 张昕 , 黄德亮 . 中国赤峰地区耳聋患者病因分析 . 2009年发表于中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 .[7] 张国正 , 张勋 , 袁永一 . SLC26A4 基因研究进展 . 2011 年发表于中国听力语言康复科学杂志 .[8] 张国正 , 张勋 , 杨仕明 , 袁永一 . 突变型 SLC26A4 基因表达载体的构建及在 HELA 细胞中的表达 . 2011 年发表于中华耳科学杂志 .[9] 武健 , 张国正 , 杨仕明 , 戴朴 , 袁永一 . 野生型 SLC26A4 基因表达载体的构建及在 293 细胞中的表达 . 2011 年发表于中华耳科学杂志 .[10] 袁永一 , 张国正 , 王国建 , 黄德亮 , 刘良发 , 武文明 , 王嘉陵 . 复发性先天性颈侧瘘管及- 279 -

囊肿治疗方式的回顾性分析 . 2011 年发表于临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 .[11] 袁永一 , 戴朴 , 朱庆文 , 康东洋 , 黄德亮 . 1552 例重度感音神经性聋患者与 SLC26A4 基因 IVS7-2 A>G 突变相关的全序列分析 . 2009 年发表于中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 .[12] 袁永一 , 黄德亮 , 韩东一 , 戴朴 , 金政策 . 实时荧光定量 Taqman 探针法检测线粒体 DNA1494C>T 突变技术的建立及应用研究 . 2009 年发表于听力学及言语疾病杂志 .会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3获奖 : 省部级科技进步奖一等 2 项内耳血管纹边缘细胞负反馈机制的研究批准号 :30801287项目负责人 : 屈涓所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学耳蜗血管的自身调控研究对阐明内耳缺血性疾病的发病机制具有重要意义。研究发现 : 血管纹的边缘细胞胞浆中 , 可见大量直径为 250-350nm 的球形颗粒 , 以核两端相对较多 ;基底细胞和血管内皮细胞胞浆内含量较少。经免疫组化实验显示 ANP 在耳蜗组织中分布广泛。提示 : 边缘细胞可能具有分泌或者胞吞 ANP 的功能 , 并且对耳蜗血管的自身调控起着重要的作用。本研究根据 ANP 的生物活性及其在心血管系统重要作用 , 研究其在耳蜗血管纹边缘细胞以及螺旋神经节细胞的分布状况 , 在建立动物耳蜗缺血状况下 , 观察耳蜗血流变化的基础上 , 采用免疫组织化学 , 电镜 ,PCR 等技术观测生理及病理状况下 ANP 于 mRNA表达及定位 ; 采用激光多普勒血流测定仪等检测在施以 ANP 阻止剂时边缘细胞对 ANP 的功能对耳蜗血流及听力的影响。旨在揭示边缘细胞是否分泌 ANP, 以及它在缺血性疾病耳蜗微循环的调节机制 , 为内耳缺血性疾病的治疗提供新的思路和理论。关键词 : 边缘细胞 ; 分泌 ;ANP; 耳蜗微循环学科代码 :H1303发表论著 :[1] Qu J, Li X, Wang J, Mi W, Xie K, Qiu J. Inhalation of hydrogen gas attenuatescisplatin-induced ototoxicity via reducing oxidative stress. Int J Pediatr Otorhinolaryngol.2012; 76(1):111-5.[2] Qu J, Li X, Wang J, Mi W, Xie K, Qiu J. Inhalation of hydrogen gas attenuatescisplatin-induced ototoxicity via reducing oxidative stress. Int J Pediatr Otorhinolaryngol.2012; 76(1):111-5.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1- 280 -

羊膜来源 SP 细胞诱导分化及内耳移植治疗噪音性耳聋的研究批准号 :30801288项目负责人 : 崔勇所在单位 : 广东省人民医院本项目主要内容为研究羊膜上皮来源细胞诱导分化为内耳细胞的可行性。在我们的工作中 , 成功完成了羊膜上皮细胞的原代培养和传代培养 , 并且经过免疫荧光染色 ,Westernbolt 以及 RT-PCR, 证明其表达 Oct-4,Nanog,SSEA-4 等干细胞 Marker, 提示其具有分化潜能。我们采用 NGF 和 bFGF 两阶段诱导分化法 , 反复实验均未成功诱导分化。目前已经有数篇文献报道羊膜细胞较成熟细胞更易形成 iPS 细胞 , 故尝试进行 iPS 细胞诱导分化为毛细胞的研究。本研究首先将 iPS 形成拟胚体 , 在悬浮培养阶段加入 Wnt 和 BMP的抑制剂以及 IGF-1, 悬浮培养 9 天 , 其后贴壁培养 , 贴壁阶段加入促进内耳前体细胞形成的 bFGF, 贴壁 3~4 日形成花环结构 , 免疫荧光染色显示 Pax-6 阳性。实时定量荧光 PCR 显示Oct-4,Nanog 等下降 , 而神经干细胞的 Maker,Pax-6,Pax-2 等表达在贴壁前后达到峰值 ,表明该诱导方法可以促进 iPS 细胞向神经外胚层方向分化。然而 , 毛细胞前体细胞 Marker截至实验进行 , 仅有 jagged1 表达增加 , 而其他 Marker 并无增加 , 还需进一步研究。关键词 : 羊膜上皮细胞 ; 多能诱导干细胞 ; 毛细胞 ; 感音神经性耳聋学科代码 :H1303发表论著 :[1] 耿娟娟 , 崔勇 ( 通讯作者 ). 羊膜上皮细胞的体外培养及干细胞特性研究 . 实用医学杂志 .2012; 28(2):172.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0H13 耳鼻咽喉头颈科学地区科学基金项目新疆维、汉族变应性鼻炎患者吸入变应原谱调查及发病相关基因多态性研究批准号 :30860310项目负责人 : 张华所在单位 : 新疆医科大学近年来 , 变应性鼻炎已成为新疆地区的常见病和多发病。由于环境、经济因素的制约 , 本地区不同民族变应性鼻炎的流行病学和遗传学资料十分有限 , 治疗手段比较单一。本研究拟采用问卷调查方法 , 收集新疆地区变应性鼻炎患者的相关资料 , 并通过对部分地区维吾尔族、汉族变应性鼻炎患者吸入变应原谱的检测分析 , 进一步探讨变应性鼻炎与气候、空气污染、种族及家族遗传等因素的关系 , 为临床积极有效的预防和治疗提供理论依据 ; 采用 PCR 扩增、聚合酶链反应 - 限制性片段长度多态性分析 (PCR-RFLP) 法、聚合酶链反应 - 序列特异性引物等技术以及 SNaPshot SNP 分型技术检测维、汉族变应性鼻炎患者- 281 -

CD14、Tim-3 和 HLA 等位基因序列 , 探讨基因多态性与维、汉族变应性鼻炎易感性的关系以及不同民族间变应性鼻炎的发病机制和分子遗传学的差异 , 为变应性鼻炎的筛查、基因治疗和发展特异性药物疗法奠定基础 , 为制订我区的疾病干预措施、规范诊疗程序提供科学依据。关键词 : 变应性鼻炎 ; 维吾尔族 ;CD14;HLA; 多态性学科代码 :H1301发表论著 :[1] 王燕 , 刘志连 , * 张华 . 新疆维吾尔族和汉族人群 Tim-3 基因多态性与变应性鼻炎的相关性研究 . 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 46(9): 712-717.[2] 韩勇 , 张华 . 石河子市区三年级小学生变应性鼻炎的流行病学调查研究 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2009; 23: 1074-1078.[3] 崔忠涛 , 张华 , 刘云连 , 阳玉萍 , 向阳冰 . 新疆部分地区维、汉族变应性鼻炎患者HLA-DQB1 基因多态性分析 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 14:645-648.[4] 张华 , 胡海芳 , 刘志连 , 孙捷 , 阳玉萍 , 王燕 , 谭国萍 , 向阳冰 . 新疆维吾尔族和汉族变应性鼻炎与 CD14 基因的相关研究 . 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2011; 23: 1076-1080.[5] 胡海芳 , 王燕 , 张华 , 谭国萍 , 向阳冰 . 维吾尔族 CD14 基因单核苷酸多态性和遗传结构分析 . 中国现代医学杂志 . 2011; 16: 1831-1835+1840.[6] 张华 , 王燕 , 孙捷 , 阳玉萍 . 新疆维吾尔族、汉族人群 Tim-3 基因 rs6555849 位点多态性与变应性鼻炎的关联性研究 . 中国耳鼻咽喉头颈外科 . 2011; 11: 599-602.[7] 王燕 , 胡海芳 , 张华 . 新疆维吾尔族健康人中 Tim-3 基因结构分析 . 山东大学学报 ( 医学版 ). 2011; 49(2): 88-92.[8] 崔忠涛 , 张华 . 新疆部分地区汉族变应性鼻炎患者 HLA-DRB1 基因多态性分析 . 新疆医科大学学报 . 2010; 33(3): 253-257.[9] 王燕 , 张华 , 刘志连 , 胡海芳 , 王惠妩 , 向阳冰 , 谭国萍 , 阳玉萍 . 新疆维吾尔族、汉族人群 TIM-3 启动子区 rs10053538 与过敏性鼻炎的相关性 . 新疆医科大学学报 . 2011; 34(1):21-24.[10] 胡海芳 , 张华 , 孙捷 , 阳玉萍 , 王燕 , 谭国萍 , 向阳冰 , 陈俞 . 新疆维、汉人群 CD14 基因单核苷酸多态性的连锁不平衡和单倍型分析 . 新疆医科大学学报 . 2011; 07: 682-686.[11] 陶冶 , 孙捷 , 张华 . 慢性鼻 - 鼻窦炎、鼻息肉患者功能性鼻内窥镜手术生活质量结局评估 .新疆医科大学学报 . 2011; 09: 911-916+919.[12] 陈庆勇 , 刘志连 , 阳玉萍 , 向阳冰 , 张华 . TAP1*rs1057141 基因多态性与新疆维吾尔族变应性鼻炎的相关性研究 . 新疆医科大学学报 . 2011; 09: 920-924.[13] 韩娜 , 雍军 , 孙捷 , 伊力哈木 · 伊玛木 , 张华 . 194 例慢性鼻窦炎、慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者与支气管哮喘及肺功能的相关性分析 . 新疆医科大学学报 . 2011; 09: 925-929.[14] 范宇琴 , 刘志连 , 张华 . 微波理疗在 50 例儿童急性分泌性中耳炎中的临床应用分析 . 新疆医科大学学报 . 2011; 09:930-932.[15] 崔忠涛 , 张华 . 人类白细胞抗原基因多态性与变应性鼻炎 . 国际耳鼻咽喉头颈外科杂志 .2010;34(3):166-169.[16] 王燕 , 张华 . T 细胞免疫球蛋白黏蛋白分子 -3 与免疫性疾病 . 国际耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2010;34(4):221-224.[17] 胡海芳 , 张华 . CD14 基因多态性与变应性疾病 . 国际耳鼻咽喉头颈外科杂志 . 2010;34(4):225-228.- 282 -

[18] 李雅琼 , 张华 . 变应性鼻炎非特异性非免疫学增强因素 . 国际耳鼻咽喉头颈外科杂志 .2011;35(3):173-176.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 5水杨酸钠对幼年和成年豚鼠耳蜗毛细胞和听觉初级神经元差异性调控及其机制批准号 :30860312项目负责人 : 尹时华所在单位 : 广西医科大学采用豚鼠为试验对象分三个阶段进行实验 : 首先 :1. 分离出生 1 天豚鼠耳蜗毛细胞和听觉初级神经元 , 采用无水杨酸钠和含水杨酸钠细胞培养并设计混合、分开和先分开后混合三种不同方式进行细胞培养 ;2. 通过 Brdu 抗体测试耳蜗毛细胞和听觉初级神经元在不同的培养方式下的凋亡和增殖情况 ;3. 激光共聚焦显微镜检测不同培养方式胞内游离Ca2+ 含量。以明确毛细胞与听觉初级神经元是如何共生和相互影响的。其次 :1. 在体水杨酸钠给药观测幼年和成年豚鼠听觉初级神经元神经递质 GABA 、GLu 在螺旋神经节的含量、分布 ;2. 生物电镜观测毛细胞、听觉神经纤维及神经末梢突触超微结构的改变 ;3. 测试双侧耳 DPOAE、ABR 阈值、CAP 和 CM 振幅以及潜伏期的改变。明确水杨酸钠如何差异性调控幼年和成年豚鼠耳蜗毛细胞和听觉初级神经元及其产生的听力学后果 ; 最后 : 损毁单侧耳蜗后在体水杨酸钠给药观察与第二阶段同样的技术指标 , 以进一步明确其机制。关键词 : 豚鼠 ; 水杨酸 ; 毛细胞 ; 凋亡与增值 ; 超微结构学科代码 :H1303发表论著 :[1] Feng H, Yin SH, Tang AZ, Cai HW, Chen P, Tan SH, Xie LH. Caspase-3 activation in theguinea pig cochlea exposed to salicylate. Neuroscience Letters. 2010; 479(1):34-39.[2] Feng H, Yin SH, Tang AZ. Blocking caspase-3-dependent pathway preserves hair cells fromsalicylate-induced apoptosis in the guinea pig cochlea. Molecular and cellular biochemistry.2011; 353(1-2):291-303.[3] Feng H, Yin SH, Tang AZ, Tan SH. Salicylate Initiates Apoptosis in the Spiral GanglionNeuron of Guinea Pig Cochlea by Activating Caspase-3. Neurochem Res. 2011;36(6):1108-1115.[4] 饶兴旺 , 陈琴娟 , 张博 , 周琦 , * 尹时华 . 损毁豚鼠一侧耳蜗后水杨酸钠给药对对侧耳螺旋神经节 GLU、GABA 表达的影响 . 《中国耳鼻咽喉头颈外科》期刊文章 2012 录用 .会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 9- 283 -

H14 口腔颅颌面科学面上项目微囊化成骨细胞 / 原位成型磷酸钙骨水泥材料的研究批准号 :30772447项目负责人 : 谢秋菲所在单位 : 北京大学磷酸钙骨水泥 (CPC) 具有良好的骨传导特性 , 可注射 , 可任意塑型、原位固化 , 但仍有许多需要改进的地方。如何提高 CPC 降解速度和增强生物学活性是目前国际上的研究热点之一。本课题组与清华大学合作 , 开发和应用 β -TCP/ 磷酸钙骨水泥为实验材料 , 进行体外细胞实验和体内动物实验均证实 , 固化完成后的 β -TCP/ 磷酸钙骨水泥具有良好的生物相容性 , 但 CPC 浆料的固化过程对成骨细胞造成了不利的影响 , 使细胞的增殖、功能、数目显著低于固化块组。针对这一问题 , 我们研究采用微囊化技术保护植入细胞 , 应用海藻酸钙 (A)、海藻酸钙 - 壳聚糖 (AC) 包封成骨细胞 , 微囊直径约 150-250μ m。包封细胞的海藻酸钙液化是释放细胞的关键。通过体外研究实现了载细胞的 A 和 AC 微囊接种到 CPC 浆料中 , 微囊可以自动溶解、释放细胞 , 成骨细胞原位粘附、存活和分化 , 使 CPC 具有一定的细胞活性。同时 , 微囊复合 CPC 增加固化后材料孔隙和提高孔径。动物实验初步结果表明 , 与未复合细胞组相比 ,CPC 复合微囊化细胞组 CPC 降解较快 , 矿化组织和骨组织层板样结构较明显。本研究结果为最终开发具有国际水平、拥有自主知识产权的新型原位固化CPC 奠定了实验基础。关键词 : 可注射支架 ; 磷酸钙骨水泥 ; 成骨细胞 ; 微囊化 ; 细胞快速释放学科代码 :H1402发表论著 :[1] 孟丹、谢秋菲 . 新型壳聚糖微球 / 磷酸钙骨水泥的动物体内植入研究 . 北京大学学报 ( 医学版 )2009;41(1): 80-85.[2] 孟丹、谢秋菲 . 两种磷酸钙骨水泥浆料固化过程对成骨细胞影响的初步研究 . 中国组织工程研究与临床康复 2009;13(3): 471-474.[3] 张洲、乔朋艳、肖军军、董利民、谢秋菲、徐韬 . 成骨细胞复合原位成型磷酸钙骨水泥的细胞学研究 . 北京大学学报 ( 医学版 ) 2011,43(1): 67-72.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 0批准号 :30872428神经肌接头阻滞差异性在术中面神经监测的应用基础研究- 284 -

项目负责人 : 陈莲华所在单位 : 复旦大学术后面神经麻痹是耳科、颅底外科和头颈外科中涉及面神经的手术的重要并发症 , 如何合理使用肌松药 , 是涉及 EEMG 监测的手术麻醉的关键问题。我们的临床研究证明 : 面肌和四肢骨骼肌对肌松药的敏感性可能存在差异。本项目利用大鼠面神经急性压榨伤模型 ,在离体实验水平 , 比较罗库溴铵对正常面神经、功能受损面神经支配的口轮匝肌和胫神经支配的腓肠肌的肌张力振幅的抑制程度 , 观察三种神经肌接头的突触前膜乙酰胆碱量子式释放数目、突触后膜乙酰胆碱受体数目与分布、肌纤维构成的差异。三组肌肉的肌张力振幅均随罗库溴铵浓度升高而呈剂量依赖性减小 , 口轮匝肌的 MTAI% 明显低于腓肠肌 ; 正常及损伤侧口轮匝肌与腓肠肌终板区 AChR 密度依次递减 , 各浓度梯度下腓肠肌对罗库溴铵的饱和度均明显高于口轮匝肌 ; 损伤面神经的 EPP/MEPP 降低较之于正常面神经明显。面神经支配的口轮匝肌对罗库溴铵的敏感性低于肢体神经支配的腓肠肌 , 其机制既与运动终板AChR 受体密度及受体对罗库溴铵的亲和力有关又与突触前膜乙酰胆碱量子式释放有关 ; 损伤面神经支配的口轮匝肌较之于正常面神经支配的口轮匝肌更容易受到罗库溴铵的抑制 ,机制主要与突触前膜乙酰胆碱量子式释放有关关键词 : 罗库溴铵 ; 口轮匝肌 ; 腓肠肌 ; 乙酰胆碱 ; 受体学科代码 :H1406发表论著 :[1]Cai YR, Xu J, Chen LH, Chi FL. Electromyographic monitoring of facial nerveunder different levels of neuromuscular blockade during middle earmicrosurgery. Chin Med J (Engl). 2009;122(3):311-4.[2]Chen JL, Li SQ, Chi FL, Chen LH, Li ST. Different sensitivities to rocuroniumof the neuromuscular junctions innervated by normal/damaged facial nerves andsomatic nerve in rats: the role of the presynaptic acetylcholine quantalrelease. Chin Med J (Engl). 2012; 125(10): 1747-1752.[3]Zhou RY, Xu J, Chi FL, Chen LH, Li ST. Differences in sensitivity to rocuroniumamong orbicularis oris muscles innervated by normal or damaged facial nervesand gastrocnemius muscle innervated by somatic nerve in rats. Laryngoscope.2012 Apr 20. doi: 10.1002/lary.23286.[4] 周汝元 , 吴淦桐 , 王浩 , 李绍清 , 陈莲华 . 大鼠面神经支配的口轮匝肌及腓肠肌对罗库溴铵敏感性的比较 . 复旦学报 ( 医学版 ). 2009; 2:186-190.[5] 汝元 , 徐静 , 陈莲华 , 金慰芳 , 钟高仁 , 徐培康 . 大鼠口轮匝肌和腓肠肌乙酰胆碱受体密度及其与罗库溴铵亲和力的比较 . 中华麻醉学杂志 . 2011; 31(1): 34-36.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3脂联素 (Adiponectin) 调控颌骨骨吸收的实验研究- 285 -

批准号 :30872868项目负责人 : 扈英伟所在单位 : 山东大学炎症时 T 细胞被激活 , 通过释放众多因子调控破骨细胞性骨吸收 , 这些因子或促进骨吸收或抑制骨吸收。Th1 细胞来源的 IFNg 及 Th2 来源的 IL-4 在体外抑制骨吸收 , 分别与RANKL 或 LPS 联合应用诱导小鼠 RAW264.7, 通过 TRAP 染色、PCR 及 Western blot 检测 mRNA表达及蛋白水平 , 结果提示 ,IL-4 驱动 LPS 诱导的细胞朝破骨细胞方向分化 , 而 IFNg 及IL-4 皆抑制 RANKL 的破骨细胞生成作用 , 促进细胞表达巨噬细胞的特性 , 进一步的吞噬试验和骨吸收实验也显示出上述趋势。IP3 受体 (IP3R) 是钙振荡形成的主要钙离子通道 , 而钙振荡在破骨细胞前体细胞分化过程中有重要意义。在破骨细胞前体细胞分化过程中 ,IP3R 表达增加。TNFα 可明显增强骨髓来源单核细胞中 IP3 受体亚型 I(IP3R1) 的表达。磷脂酰胆碱特异性磷脂酶 C(PC-PLC)特异性抑制剂 D609 抑制了 TNFα 对 IP3R1 的上调作用 , 同时消除了 TNFα 对破骨细胞生成的影响。上述结果提示 TNFα 可能通过活化 PC-PLC, 促进 IP3R1 的表达 , 以增强破骨前体细胞中钙离子震荡 , 最终促进 RANKL 诱导的破骨细胞生成。关键词 : 骨吸收 ; 破骨细胞 ;IL-4; IP3R; 磷脂酰胆碱特异性磷脂酶 C学科代码 :H1402发表论著 : 无会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1TLR9 信号途径在成牙本质细胞天然免疫反应及DSPP 基因表达调控中作用的研究批准号 :30872869项目负责人 : 何文喜所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学成牙本质细胞是牙髓最先接触细菌微生物的细胞。TLR9 是细菌 DNA 的天然免疫受体 ,参与细胞天然免疫反应。DSPP 是牙本质形成和矿化中的关键分子。为了验证 TLR9 参与成牙本质细胞天然免疫反应并调控 DSPP 基因表达的假说 , 本项目通过分子生物学手段证实成牙本质细胞表达 TLR9, 可与细胞外特异性配体 CpG DNA 结合 , 启动下游的 MyD88 信号途径 ,激活 NF-κ B 和 MAPK 信号途径 ( 含 ERK,P38 和 JNK MAPK), 活化 NF-κ B 和 AP-1 转录因子 ,进而调控下游炎性细胞因子和矿化相关基因 ( 含 DSPP 基因 ) 的表达 , 其中 NF-κ B 信号途径参与所有靶基因的调控 , 而 MAPK 信号途径则针对靶基因不同有较大差异。另外 , 利用染色质共沉淀 (Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) 对 TLR9 信号途径在 DSPP 基因启动子上转录因子 NF-κ B 和 AP-1 的结合位点进行定位。研究初步阐明了 TLR9 介导成牙本质细胞免- 286 -

疫反应和调控 DSPP 基因表达的分子机制 , 对揭示阐明牙髓病病因、牙髓损伤修复的分子机制和 DSPP 基因表达调控规律有一定意义。关键词 :TLR9;DSPP;CpG DNA; 成牙本质细胞学科代码 :H1404发表论著 :[1] He W, Qu Tie, Yu Q, Wang Z, Wang H, Zhang J, Smith AJ.Lipopolysaccharide enhancesDecorin expression through the Toll-like receptor 4, MyD88, NF-KappaB and MAPKpathways in odontoblast cells. J Endod. 2012;38(4):464-9.[2] He W, Yu Q, Zhou Z, Wang P. CpG oligonucleotides induce an immune response ofodontoblasts through the TLR9, MyD88 and NF-κ B pathways. Biochem Biophys ResCommun. 2010;20;399(2):274-8.[3] 胡楠 , 何文喜 , 王玮 , 李鹏 , 余擎 . TLR9 在成牙本质细胞中的表达 . 口腔医学研究 .2010;26( 4): 464 – 466.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 4渐进性咬合紊乱对牙周力感受器及其相关蛋白表达影响的动物实验研究批准号 :30872870项目负责人 : 王美青所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学牙周 Ruffini endings 是牙周主要的力感受器 , 近来研究表明其形态及相关蛋白的表达与咬合力刺激密切相关。目前关于咬合力指标的设计仅集中在是否有咬合接触、是否咬合过高等方面。渐进性咬合紊乱将正常轴向尖窝吻合的咬合接触改为近远中向凸 - 凸不吻合的咬合接触 , 进而改变了传导至牙根的咬合力方向。本项目的研究目的是研究大鼠渐进性咬合紊乱模型中移动牙的对颌牙与移动牙相比较 , 牙周 Ruffini endings 超微结构的变化及其相关蛋白表达的变化 , 以及牙周有髓神经纤维超微结构的变化。本项目采用电镜技术和免疫荧光及双标记技术观察 Ruffini endings 超微结构及其相关蛋白表达变化情况 , 以及牙周有髓神经纤维超微结构的变化情况。实验结果表明渐进性咬合紊乱可使移动牙的对颌牙出现同移动牙相似的牙周膜腔改变 , 同时伴有相似的牙周鲁菲尼神经末梢的改建、其标记物 PGP 9.5 表达变化 , 雪旺细胞结构标志物 S-100 和 NT-3 表达的变化 , 以及牙周有髓神经纤维超微结构的变化。关键词 : 咬合 ; 牙周 Ruffini endings; 力感受器 ; 有髓神经纤维 ; 雪旺细胞学科代码 :H1407发表论著 :[1]Wang MQ, He JJ, Chen CS, Widmalm SE. A preliminary anatomical study on the- 287 -

association of condylar and occlusal asymmetry. Cranio. 2011;29(2):111-6.[2] 鹿蕾 , 王美青 , 刘晓东 , 于世宾 . 正畸牙移动造成大鼠牙周 S-100 表达改变的实验研究 . 医学研究杂志 . 2011;4:27-30.会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1牙龈卟啉单胞菌自诱导体 -2 信号分子干扰与牙周炎防治的研究批准号 :30872872项目负责人 : 徐屹所在单位 : 四川大学以牙龈卟啉单胞菌 (P.g.) 为代表的牙周致病菌慢性感染的阻断途径是牙周炎防治的关键之一。自诱导体 -2(AI-2) 是在细菌的致病性中起重要作用的信号分子 , 在 P.g. 菌斑生物膜形成和毒力因子表达中起调控作用。溴化呋喃酮是新近发现的对 AI-2 具有抑制作用的信号分子拮抗物。本课题通过基因重组技术构建 P.g. 的 luxS 基因的缺失变异株 , 利用扫描电镜观察、PCR、基因重组等方法探讨溴化呋喃酮通过干扰 AI- 2 信号对 P.g. 生物膜形成和毒力因子基因表达的影响。研究结果显示 , 溴化呋喃酮在不影响细菌生长的情况下 , 具有抑制牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌生物膜形成的作用 , 使生物膜内菌细胞数量减少、结构疏松。并且 , 在生物膜形成过程中 , 溴化呋喃酮对于抗菌剂甲硝唑具有协同杀菌的作用。因此 , 溴化呋喃酮的应用可能为牙周病的抗菌治疗提供一条新的途径。关键词 : 溴化呋喃酮 ; 自诱导体 -2; 生物膜 ; 牙龈卟啉单胞菌学科代码 :H1405发表论著 :[1]Gao L, Xu Y, Meng S, Wu Y, Huang H, Su R, Zhao L. Identification of the putativespecific pathogenic genes of porphyromonas gingivalis with type II fimbriae.DNA Cell Biol. 2012 Jan 18.[2] 张利平 , 王爽 , 周向葛 , 徐屹 . 群体感应抑制剂溴化呋喃酮对牙龈卟啉单胞菌生物膜形成影响的研究 . 华西口腔医学杂志 . 2011;29(5):469-472.[3] 段丁瑜 , 王爽 , 张利平 , 赵蕾 , 徐屹 . 不同细菌密度的浮游牙龈卟啉单胞菌及其生物膜对甲硝唑敏感性的体外研究 . 华西口腔医学杂志 . 2011;29(6):571-575.[4] 李永凯 , 段丁瑜 , 赵蕾 , 吴亚菲 , 徐屹 . 牙周菌斑生物膜的体外模型建立 . 国际口腔医学杂志 . 2012;39(1):37-39.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5口腔黏膜归巢 CD4+CD25+T 调节细胞归巢特征的实验研究- 288 -

批准号 :30872874项目负责人 : 程斌所在单位 : 中山大学本项目开展的研究内容和结果主要是 :1、构建了大鼠口腔黏膜异种移植模型 , 发现中性粒细胞浸润是急性排斥的早期事件 ,巨噬细胞可识别并直接参与排斥异种移植物的动态过程 ,CXCL1-CXCR2 轴作为中性粒细胞主要的趋化因子在口腔黏膜移植早期的炎症反应中发挥重要作用。2、构建了小鼠舌腹迟发性超敏反应样炎症模型 , 发现病损组织中有明显的以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润 ; 角朊细胞在口腔黏膜炎症免疫反应中的不同阶段起着不同的作用 ,并挖掘出重要的信号通路及分子相互作用的网络结点。但在进一步通过磁珠分选富集口腔黏膜归巢 T 细胞的过程中 , 因细胞量少及纯度低 , 暂缓了后继研究。3、开展了 CD4+CD5+T 调节细胞 (regultatory T cell,Treg) 相关的临床研究 , 对口腔扁平苔藓 (oral lichen planus,OLP) 病损组织 CD4+CD5+Treg 进行定量研究 , 明确了FOXP3+Treg 与 OLP 的亚型和活动性相关 ; 对病损组织进行基因组学分析 , 成功构建了 OLP病损全基因组表达谱 , 检测出重要的差异表达基因 ; 并分选了 OLP 病损组织浸润的 CD3+T细胞 , 送去进行全基因组表达谱检测。关键词 : 调节性 T 细胞 ; 动物模型 ; 口腔扁平苔藓 ; 分选学科代码 :H1405发表论著 :[1]Tao XA, Li CY, Xia J, Yang X, Chen XH, Jian YT, Cheng B. Differential geneexpression profiles of whole lesions from patients with oral lichen planus.J Oral Pathol Med. 2009;38(5):427-33.[2]Tao XA, Xia J, Chen XB, Wang H, Dai YH, Rhodus NL, Cheng B. FOXP3 T regulatorycells in lesions of oral lichen planus correlated with disease activity. OralDis. 2010;16(1):76-82.[3]Wu T, Jia L, Du R, Tao X, Chen J, Cheng B. Genome-wide analysis reveals theactive roles of keratinocytes in oral mucosal adaptive immune response. ExpBiol Med (Maywood). 2011;236(7):832-43.[4]Wang H, Tao XA, Xiang J, Xia J, Huang Y, Cheng B. Neutrophils infiltration isearly event of an oral mucosal xenotransplantation model. Med Oral Patol OralCir Bucal. 2011;16(3):e341-7.[5] 戴耀晖 , 陶小安 , 夏娟 , 程斌 . IL-17 在口腔扁平苔藓病损组织的表达研究 . 中华口腔医学研究杂志电子版 . 2009;3(6):22-25.[6] 左雯鑫 , 王红 , 李晓宇 , 陶小安 , 程斌 . 大鼠口腔黏膜急性排斥反应外周血 CD68水平与巨噬细胞浸润的相关性研究 . 中华口腔医学杂志 . 2011;46(1):35-37.[7] 左雯鑫 , 王红 , 李晓宇 , 程斌 . 口腔黏膜异种移植模型巨噬细胞浸润及他克莫司干预的实验研究 . 实用口腔医学杂志 . 2011;27(2):164-168.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 3- 289 -

获奖 :[1] 奖励 : 程斌 . 口腔黏膜癌前损害发病机制的应用基础研究 . 广东省人民政府 , 2009 年度广东省科学技术奖 ( 三等奖 , 排名第一 , 奖励时间 :2009.7).运用 Life-course 方法纵向研究婴幼儿龋发病危险因素批准号 :30872875项目负责人 : 林焕彩所在单位 : 中山大学我国乳牙龋患病率一直居高不下。而过往研究发现 3 岁时乳牙龋患已经十分严重 , 这提示在更早年龄阶段控制龋病的发生将是减低乳牙龋病高发的关键。本课题运用生命历程流行病学 (life-course epidemiology) 研究方法 , 根据龋病病因学理论、近年该领域研究进展和本课题组的横断面调查结果建立研究模型 , 纵向监测 8 至 32 月龄婴幼儿各项关键因素及累积因素对乳牙龋发病过程的影响。通过问卷纵向调查影响乳牙龋的行为及社会危险因素 , 运用实时定量 PCR 法动态检测变异链球菌的定植变化 , 利用选择性培养基分离鉴定各时点婴幼儿牙菌斑中的乳杆菌 , 采用发病密度测量每阶段龋病发病情况 , 广义估计方程分析发病危险因素。结果显示 : 发病密度随年龄增加呈上升趋势 ; 母亲受教育程度较低 ,釉质发育不全 , 营养不良 , 口腔卫生较差及感染变异链球菌是婴幼儿龋发病的危险因素 ;剖腹产、低出生体重、釉质发育不全、吃甜食次数多及可视菌斑百分比高是影响婴幼儿变异链球菌定植的影响因素 ; 各月龄组患龋婴幼儿乳杆菌检出率均显著高于无龋组。因此 ,加强对高危幼儿人群的早期监测 , 针对相关危险因素采取预防措施 , 有助于乳牙龋病的早期干预。关键词 : 生命历程流行病学 ; 婴幼儿龋 ; 危险因素学科代码 :H1404发表论著 :[1] Zhou Y, Lin HC, Lo ECM, Wong MCM Risk indicators for early childhood caries in2-year-old children in southern China. Australian Dental Journal,2011;56(1):33-39.[2] Zhou Y, Yang JY, Lo EC, Lin HC. The contribution of life course determinantsto early childhood caries: a 2-year cohort study. Caries Res. 2012;46(2):87-94.[3] 吴燕玲 , 周燕 , 成凡平 , 林焕彩 . 纵向研究婴幼儿乳杆菌的检出情况及其与龋病的关系 .中华口腔医学研究杂志电子版 , 2011;5(5):494-498.[4] 吴燕玲 , 周燕 , 支清惠 , 陶冶 , 林焕彩纵向研究 0-2 岁婴幼儿变异链球菌群与早期婴幼儿龋的关系 . 现代口腔医学杂志 , 2011;25(6): 417-419.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1细胞外基质磷酸化糖蛋白对牙髓牙本质复合体修复再生的调控作用研究- 290 -

批准号 :30872876项目负责人 : 韦曦所在单位 : 中山大学牙髓牙本质复合体构成牙齿的主体 , 其修复再生是牙髓病学的研究重点之一。细胞外基质磷酸化糖蛋白 (matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE), 是 SIBLING蛋白家族的新成员 , 与硬组织的形成矿化密切相关 , 是牙本质发育缺陷的重要候选基因 ,但具体机制尚不清楚。本课题完成了牙髓细胞 (dental pulp cells, DPCs) 表面表型和分化潜能的检测 , 发现 MEPE 基因随 DPCs 矿化表达上调 , 明确了外源性 rhMEPE 可促进 DPCs 增殖和成牙本质向分化 , 同时建立过表达 MEPE 的 DPCs 模型 , 利用实时定量 PCR 芯片等技术检测MEPE 调控 DPCs 成牙本质分化的下游靶基因 , 探讨 MEPE 对 DPCs 增殖和分化的影响及其信号途径 , 揭示 MEPE 在牙髓损伤修复中的作用机制 , 为进一步将 MEPE 基因修饰的 DPCs 应用于牙髓损伤修复的临床实践提供新思路。发表论文 8 篇 , 其中 SCI 收录 4 篇 , 培养硕士生 2 名。关键词 : 细胞外基质磷酸化糖蛋白 ; 牙髓细胞 ; 牙髓牙本质复合体 ; 损伤 ; 再生学科代码 :H1404发表论著 :[1] Liu L, Wei X, Ling J, Wu L, Xiao Y. Expression Pattern of Oct-4, Sox2, and c-Myc in thePrimary Culture of Human Dental Pulp Derived Cells. J Endod. 2011 Apr;37(4):466-72.[2] Wang J, Wei X, Ling J, Huang Y, Gong Q.Side Population Increase after Simulated TransientIschemia in Human Dental Pulp Cell. J Endod. 2010;36(3):453-8.[3] Liu L, Ling J, Wei X, Wu L, Xiao Y. Stem Cell Regulatory Gene Expression in Human AdultDental Pulp and Periodontal Ligament Differentiation Undergoing Odontogenic/OsteogenicCells. J Endod. 2009;35(10):1368-76.[4] 韦曦 , 吴莉萍 , 凌均棨 , 刘路 . 细胞外基质磷酸化糖蛋白在人牙髓细胞成牙本质分化中的表达 . 中华口腔医学杂志 . 2009;44(9):524-528.[5] 韦曦 , 吴莉萍 , 凌均棨 , 刘路 . 人牙髓细胞向成牙本质细胞分化的蛋白质组学研究 . 中华口腔医学杂志 . 2009;44(2)85-86.[6] 刘路 , 韦曦 , 吴莉萍 , 凌均棨 . Notch 信号通路在牙髓和牙周细胞矿化及组织损伤修复中的调控作用研究 . 口腔生物医学 .2010;01(4):169-185.[7] 刘路 , 韦曦 , 凌均棨 , 吴莉萍 . 碱性成纤维细胞生长因子和骨形成蛋白 2 在牙源性细胞分化中的表达及意义 . 中华口腔医学研究杂志电子版 . 2011;05(1);5-11.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2批准号 :30872877项目负责人 : 侯本祥慢性根尖周炎根尖生物膜的结构和形态学研究- 291 -

所在单位 : 首都医科大学本课题采用 16SrDNA 克隆测序法分析持续性根尖周炎根管内、外细菌类群多样性和分布特点 , 检测优势菌和未知菌种 , 分析根管内外优势菌的相关性 ; 建立优势菌生物膜体外模型 , 研究其结构特点和次氯酸钠对生物膜的清除能力 ; 并通过研究根管内折断器械、根管充填方法、MTA 修补穿孔和感染优势菌致病能力等与持续性根尖周炎感染的关系。结果表明 , 持续性根尖周炎根管内外存在持续的细菌感染 , 菌群结构复杂 , 具有广泛的菌种多样性 , 包括已培养菌和未培养菌 , 优势菌为 E. faecalis,S.intermedius D.invisus,Falocis,F nucleatu, 根外感染部位包括根尖生物膜和根尖周病损组织 , 二者在细菌构成和检出量存在明显不同 , 明确侵入到根管外的细菌以植于根尖周病损组织中和 / 或以根尖生物膜形式引起慢性的持续性的感染。针对 E. faecalis 根尖表面生物膜模型 , 不同浓度次氯酸钠溶液对生物膜清除效果不同 ; 根管内折断器械、充填方法和根管穿孔是持续性根尖周炎的重要相关因素 , 热牙胶根管充填可提高根管治疗质量 ,MTA 修补穿孔可以提高慢性根尖周炎临床预后。关键词 :16SrDNA; 持续性根尖周炎 ; 优势菌 ; 生物膜 ; 次氯酸钠学科代码 :H1404发表论著 :[1] Zhang C, Huang W, Sun Z, Hou B. A comparison of two gutta-percha master pointsconsisting of different phases in filling of artificial lateral canals and depressions in the apicalregion of root canals when using a warm vertical compaction technique. Int Endod J.2011;44(11):1041-6.[2] 王变红 , 葛丽华 , 侯本祥 . 感染根管优势菌致病能力的实验研究 . 北京口腔医学 ,2011;19(4):186-189.[3] Fu M, Zhang Z, Hou B. Removal of broken files from root canals by using ultrasonictechniques combined with dental microscope: a retrospective analysis of treatment outcome.J Endod. 2011;37(5):619-22.[4] 侯惠敏 , 侯本祥 , 卫书盛 , 葛丽华 . 氢氧化钙和 MTA 修复比格犬髓室底穿孔的组织病理学观察 . 牙体牙髓牙周病学杂志 . 2010;20(08):445-44.[5] 宣玮 , 侯本祥 , 臧滔 . 不同牙本质粘结系统处理后的牙釉质表面及粘结界面扫描电镜观察 . 北京口腔医学 . 2010;18(03):138-140.[6] 张海英 , 侯本祥 , 陈薇 , 宿颖 . 亚甲蓝对玻璃离子水门汀物理特性的影响 . 北京口腔医学 . 2010;18(03):141-142.[7] 张志苓 , 付梅 ,* 侯本祥 . 超声法取根管内折断器械对根管壁损伤的体外研究 . 北京口腔医学 .2010;18(03):33-35.[8] 宣玮 , 侯本祥 . 冷热循环对牙本质粘结系统与牙釉质粘结强度的影响 . 北京口腔医学 .2009;17(03):241-243.[9] 付梅 , 侯本祥 , 张志苓 . 超声法取根管内折断的镍钛和不锈钢根管锉的效果比较 . 北京口腔医学 .2009;17(03):187-189.[10] 张琛 , 黄巍 , 侯本祥 . 四种根管充填技术根充同质性和致密度评价 . 中华口腔医学杂志 ,2010;45(11):673-677.[11] 张琛 , 孙正 , 侯本祥 . 三氧化矿物凝聚体修补医源性根管穿孔的疗效分析 . 中华口腔医学杂志 , 2011;46(1):12-14.- 292 -

[12] 刘琨 , 侯本祥 , 杨圣辉 . PCR 检测慢性根尖周炎临床标本中牙髓卟啉单胞菌 . 实用口腔医学杂志 . 2009;25(05):702-705.[13] 付梅 , 侯本祥 , 张志苓 . 根管弯曲度和器械分离位置对分离器械取出的影响 . 华西口腔医学杂志 , 2010;28(6):607-610.[14] Zhang C, Hou BX, Zhao HY, Sun Z. Microbial diversity in failed endodontic root-filled teeth.Chinese Medical Journal, 2012;125 (6) : 1163-1168.会议报告 : 国际大会 1 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 21Toll 样受体 2/4 介导的炎性通路在牙周炎和 COPD病因关联机制中作用的研究批准号 :30872878项目负责人 : 王左敏所在单位 : 首都医科大学TOLL 样受体 (TLRs) 亚型 2/4 炎症通路蛋白可能解释牙周炎和 COPD 之间共同的遗传易感机制。本研究建立了 1200 人的病例数据库 , 进行了病例对照、实验室、动物试验、基因和蛋白功能等研究 , 完成了所有样本 TLR2/4 的 9 个多态性位点的基因型检测及构建单倍体型 , 筛选出 2 个阳性关联位点 , 并根据阳性 SNP 位点检测不同基因型对蛋白功能的影响。结果 : 牙周炎症显著影响 COPD 患者的症状、呼吸困难程度、生活质量和急性发作频率 ; 伴牙周炎的 COPD 患者血清中炎性因子水平显著增高 ; 控制混淆因素后 , 单纯牙周炎症可促发COPD;TLR4 基因多态性与牙周炎易感性密切相关 , 单倍型 G-C-G(rs1927907- rs11536889-rs7873784) 是其危险因素 ;TLR4 多态性是牙周炎易感 COPD 的危险因素 , 其 SNP 多态性会导致 COPD 更严重的应答损伤 ;TLR4 rs1927907 和 rs11536889 两个阳性关联位点可能影响Toll 样受体下游分子的表达 , 引起相应细胞因子水平的变化。结果证实牙周炎是 COPD 的独立危险因素 ,TLR4 单核苷酸多态性及单倍体型及其对蛋白功能的影响 , 是两种疾病相关联的部分机制。关键词 :COPD; 牙周炎 ;TLR2;TLR4; 基因多态性学科代码 :H1405发表论著 :[1]Zhou X, Wang Z, Song Y, Zhang J, Wang C. Periodontal health and quality of lifein patients with chronic obstructive pulmonary disease. Respir Med.2011;105(1):67-73.[2]Liu Z, Zhang W, Zhang J, Zhou X, Zhang L, Song Y, Wang Z. Oral hygiene, periodontalhealth and chronic obstructive pulmonary disease exacerbations. J ClinPeriodontol. 2012;39(1):45-52.[3]Si Y, Fan H, Song Y, Zhou X, Zhang J, Wang Z. Association between periodontitisand chronic obstructive pulmonary disease (COPD) in a Chinese population. J- 293 -

Periodontol. 2012; doi:10.1902/jop.2012.110472.[4]Zhou X,Han J, Song Y, Zhang J, Wang Z. Serum levels of 25-hydroxyvitamin D,oral health, and chronic obstructive pulmonary disease. J Clin Periodontol.2012; doi: 10.1111/j.1600-051X.2012.01852.x.[5] 王左敏 , 李一梓 , 庞宝森 , 王辰 . 血清白细胞介素 20 在牙周炎及慢性阻塞性肺疾病中作用的初步探讨 . 现代口腔医学杂志 . 2010;24(2): 90-92.[6] 赵倩 , 王左敏 , 李威 , 李一梓 . 牙周炎和慢性阻塞性肺疾病对血清白细胞介素 17 表达的影响 . 牙体牙髓牙周病学杂志 . 2010;10(4): 183-186.[7] 林梅 , 林婷 , 张菁 , 李一梓 , 张良琼 , 庞宝森 , 王左敏 . 慢性阻塞性肺疾病和慢性牙周炎患者血清白介素 19 的表达分析 . 中国医药 ; 2010;5(7): 588-590.[8] 张冬雪 , 林梅 , 庞宝森 , 张菁 , 王左敏 . 牙周炎和慢性阻塞性肺疾病动物模型的建立及其相关性分析 . 中华口腔医学杂志 . 2010;45(11): 668-672.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5Klf4 在成牙本质细胞分化中的作用批准号 :30872880项目负责人 : 陈智所在单位 : 武汉大学本项目利用人牙髓细胞和已构建的小鼠牙乳头永生化细胞为研究模型 , 探讨了 Klf4在成牙本质细胞分化中的作用。经体外诱导 , 成牙本质细胞重要分化标志 Dmp1,Dsp,AlpmRNA 和蛋白质水平上调 , 同时 Klf4 表达也显著上调。过表达 Klf4 后 ,Dmp1,Dsp,Alp 表达显著上调 , 细胞增殖能力下调。抑制 Klf4 表达后 ,Dmp1,Dsp,Alp 表达水平及矿化结节形成能力显著下调 , 细胞增殖能力上调 , 证明 Klf4 可促进成牙本质细胞分化 , 并在此过程中是必需的。通过启动子序列分析 , 发现在 Dmp1 启动子中存在可能的 Klf4 结合序列。EMSA和 ChIP 结果显示 ,Klf4 可与预测位点结合。双荧光素酶实验证实 Klf4 可激活 Dmp1 的启动子。在 Klf4 被抑制的小鼠牙乳头细胞系中过表达 Dmp1 可挽救矿化形成能力 , 及其他细胞分化指标如 :Dsp 和 Alp 的下调 , 证明 KLF4 通过上调 Dmp1 表达促进成牙本质细胞分化。本项目第一篇研究成果已发表在 J Endod, 大量后期的研究数据已整理完成待投递 , 目前已申报一项发明专利。关键词 :KLF4; 成牙本质细胞 ; 分化学科代码 :H1404发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0- 294 -

PED 相关粪肠球菌体外生物膜的形成及控制研究批准号 :30872881项目负责人 : 范兵所在单位 : 武汉大学根管治疗后疾病 (Post-Endodontic Disease, PED) 是指根管治疗后患牙的根尖周病变未愈合或出现新的根尖周病变 , 多为 1~3 种革兰阳性兼性厌氧菌 , 其中粪肠球菌的检出率高达 77%。PED 发生的主要原因包括 : 根管内存在不易清理和充填的不规则区如峡区 , 且该区域内有持续存在的感染 , 如粪肠球菌能在根管的不规则区形成生物膜。本研究通过Micro-CT 扫描及三维重建技术对下颌磨牙根管峡区形态进行研究 , 提出了根管峡区三维形态的分类 ; 通过 Micro-CT 扫描和断面形态分析 , 筛选出带有根管峡区的上颌前磨牙 , 构建出 PED 相关根管及峡区内粪肠球菌生物膜模型 , 通过 SEM 及 CLSM 技术获得了根管及峡区内粪肠球菌生物膜的微生态特征 , 同时对粪肠球菌 Ace 基因表达情况进行了研究 ; 研究了不同冲洗药物和半导体激光对根管峡区生物膜的清理效果 ; 设计出下颌第二磨牙 C 形根管相对应的清理通路 , 通过三维可视化模型验证 , 为制订清除 PED 相关生物膜的临床策略提供科学依据。关键词 : 根管治疗后疾病 ; 粪肠球菌 ; 生物膜学科代码 :H1405发表论著 :[1]Fan B, Min Y, Lu G , Yang J, Cheung GS, Gutmann JL. Negotiation of C-shapedcanal systems in mandibular second molars. J Endod . 2009; 35(7):1003-8.[2]Fan B, Pan Y, Gao Y, Fang F, Wu Q, Gutmann.JL. Three-dimensional morphologicanalysis of isthmuses in the mesial roots of mandibular molars. J Endod. 2010;36, (11): 1866-9.[3]Ding J, Gutmann JL, Fan B, Lu Y, Chen H. Investigation of apex locators andrelated morphological factors. J Endod. 2010; 36,(8): 1399-1403.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 4CD4+Th 细胞新亚群 —Th17 在根尖周骨破坏中的作用批准号 :30872882项目负责人 : 彭彬所在单位 : 武汉大学Th17 是 CD4+Th 细胞中除 Th1/Th2 外新发现的细胞亚群 , 其分泌的 IL-17 具有显著的促炎作用。本研究探讨了 Th17/IL-17 在根尖周病发病中的作用及可能机制。本研究发现 :1 大鼠根尖周炎病损中存在破骨细胞、RANKL、IL-17 和 Th17 扩增关键因子 IL-23 的表达 ,- 295 -

且 IL-17 表达和 IL-23、中性粒细胞数目以及进展期根尖骨破坏面积成正比 ;?2IL-17 在患者根尖周病变组织中存在表达 , 且 IL-17 与 IL-8 mRNA 表达呈正相关 ;3IL-17 可上调牙周膜细胞 RANKL/OPG 表达及调控牙周膜细胞介导的根尖周骨破坏 ;4IL-17 可上调牙周膜细胞促炎介质 IL-6 与 IL-8 的 mRNA 和蛋白表达 ;5Th17 相关因子 IL-17/IL-1β 可调控牙周膜细胞产生 IL-23, 在根尖周炎症放大和牙槽骨破坏中起作用 ;6IL-17 具有调控牙周膜细胞MMPs 表达及介导根尖周基质降解的直接作用 ;7 甘草中活效单体异甘草素可阻抑体外破骨细胞介导的骨破坏。研究结果提示 :Th17 同时参与根尖周病的炎症恶化和骨破坏进程。通过本项目的研究工作 , 我们建成了多项技术平台 , 在根尖周病领域发表 SCI 论文 7 篇。关键词 :Th17; 根尖周病 ; 炎症 ; 骨破坏学科代码 :H1404发表论著 :[1] Xiong H, Wei L, Peng B. Immunohistochemical Localization of IL-17 in Induced RatPeriapical Lesions Journal of Endodontics. 2009;35(2):216-220.[2] Wang L, Zhang R, Peng B. Expression of a Novel PDGF Isoform, PDGF-C, in ExperimentalPeriapical LesionsJournal of Endodontics. 2009;35(3):377-381.[3] Yang L, Zhang C, Peng B. Immunolocalization of Tumor Necrosis FactorReceptor-Associated Factor 6 in Rat Periapical Lesions Journal of Endodontics.2009,35(6):834-837.[4] Zhang C, Yang L, Peng B. Critical role of NFATc1 in periapical lesions. InternationalEndodontic Journal. 2010;43(2):109-114.[5] Xiong H, Wei L, Hu Y, Zhang C, Peng B. Effect of alendronate on alveolar bone resorptionand angiogenesis in rats with experimental periapical lesions. International EndodonticJournal. 2010;43(6):485-491.[6] Zhu L, Wu Y, Wei H, Xing X, Zhan N, Xiong H, Peng B. IL-17R activation of humanperiodontal ligament fibroblasts induces IL-23 p19 production: Differential involvement ofNF-κB versus JNK/AP-1 pathways. Molecular Immunology. 2011;48(4):647-656.[7] Wang L, Zhang R, Xiong H, Peng B. The involvement of Platelet-derived growth factor-A inthe course of apical periodontitis. International Endodontic Journal. 2011;44(1):65-71.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 6 硕士 3线粒体基因突变与牙周炎易感性关系的研究批准号 :30872883项目负责人 : 栾庆先所在单位 : 北京大学牙周炎是细菌等外界因素和宿主因素相互作用的结果 , 线粒体 DNA 是细胞核外唯一的遗传物质 , 它可以综合体现这两方面的因素 , 既承载着遗传信息 , 线粒体 DNA 的高突变率- 296 -

又反映了局部炎症等因素的作用。本研究尝试从线粒体 DNA 入手 , 将其先天的遗传背景与后天发生的突变结合起来加以考虑 , 通过分析全长线粒体 DNA 序列 , 比对侵袭性牙周炎者( 易感组 ) 和对照组 ( 非易感组 ) 线粒体 DNA 多态位点和突变的异同 , 研究结果表明 :8701A-9540T- 10400C" 和 10398A 基因型与侵袭性牙周炎相关 , 采用直接测序的方法 , 发现血细胞、牙龈组织和颊粘膜脱落细胞线粒体 DNA 序列完全相同。初步的 TTGE 检测结果显示侵袭性牙周炎组和对照组间存在着差异 , 大片段缺失检测也显示可能存在差异。mtDNA10398 位点的单核苷酸多态性与慢性牙周炎的严重程度没有明显的相关性。但在代谢综合征个体中 ,mtDNA 10398 G 基因型明显高于非代谢综合征个体。并且 10398G 基因型的个体患代谢综合征的风险明显高于 10398A 基因型。同时 10398G 基因型与甘油三脂代谢和超重 / 肥胖也有显著的相关性。关键词 : 线粒体 DNA; 牙周炎易感性 ; 牙龈组织 ; 基因序列分析学科代码 :H1405发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1破骨细胞分泌功能对成骨细胞作用及相关信号调控在牙槽骨吸收重建中的意义批准号 :30872884项目负责人 : 陈莉丽所在单位 : 浙江大学牙槽骨吸收和重建的机制至今未完全明了 , 近年国外研究发现破骨细胞可通过分泌生物因子影响成骨细胞功能 , 但其相关信号通路和调控机制及在牙槽骨吸收和修复中的作用不明。本研究成功构建了破骨细胞骨吸收模型和大鼠牙槽骨吸收模型 , 用半定量 RT-PCR、Western Blot、免疫组化和激光共聚焦观察等技术 , 证实了在体内牙槽骨吸收过程中OPG/RANK/RANKL 系统的重要调节作用 ,ephrinB2 与 EphB4 也参与了该过程。体外破骨细胞骨吸收上清具有抑制成骨样细胞增殖 , 及促进其分化和钙化成骨的作用。破骨细胞骨吸收上清可通过促进成骨细胞表面 OPG 的表达 , 抑制 RANKL 的表达来发挥促成骨作用 , 伴随着PI3K 信号通路的调节亚基 P85 及下游 AKT 磷酸化水平的增高。上述研究结果为进一步阐明牙槽骨吸收过程中破骨细胞影响成骨细胞功能的分子机制做出了有益的探索 , 有较高学术价值及创新性。关键词 : 牙槽骨 ; 破骨细胞 ; 成骨细胞 ; 分泌功能 ; 信号传导学科代码 :H1402- 297 -

发表论著 :[1] Chen LL, Lei LH, Ding PH, Tang Q, Wu YM. Osteogenic effect of Drynariae rhizomaextracts and Naringin on MC3T3-E1 cells and an induced rat alveolar bone resorption model.Arch Oral Biol. 2011;56(12):1655-62.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 6获奖 :变形链球菌密度感应欺骗行为规避机制的研究初探批准号 :30872886项目负责人 : 黄正蔚所在单位 : 上海交通大学大量的研究发现单细胞微生物具有着复杂的社会学行为 , 不仅有着利他的合作 , 同样还有着自私的欺骗。然而为维护种群的繁衍 , 在整个微生物社区内对这些欺骗行为存在着有效的规避 , 但其具体机制仍有待研究。在前期研究工作的基础上 , 本课题组已构建了变形链球菌密度感应的欺骗株 , 并发现该欺骗株能利用这一欺骗能力获得更好的个体发展 ,可是从整个变形链球菌种群来说 , 该欺骗行为同样能被成功的规避 , 不会在种群中占优势 , 也不会影响到野生株的发展。本研究正是在此基础上提出 , 探索利用社会微生物学的学说来解释前期实验中发现的一些现象 , 通过观察不同接种比的欺骗株与野生株的生物膜形成以及定植能力 , 探讨种群对此欺骗行为的规避模式 , 以及通过不同密度感应信号结构类似物的干扰 , 和功能蛋白质质谱分析的研究手段来推断这一规避行为的可能机制。利用本研究建立口腔生物膜环境中社会微生物学的研究平台 , 为龋病预防以及微生物生态学作出新的探索。关键词 : 社会微生物学 ; 变形链球菌 ; 密度感应欺骗行为 ; 规避学科代码 :H1404发表论著 :[1] Shao ZY, Tang ZS , Yan C, Jiang, YT, Ma R, Liu Z, Huang ZW. Effects ofintensity-modulated radiotherapy on human oral microflora. J Radiat Res. 2011;52(6):834-9.[2] Ma R, Liu J, Jiang YT, Liu Z, Tang ZS, Ye DX, Zeng J, Huang ZW. Modeling of DiffusionTransport through Oral Biofilms with the Inverse Problem Method. Int J Oral Sci.2010;2(4):190-7.[3] Huang Z, Jiang Y, Liang J. Pathogenesis could be one of the anti-cheating mechanisms forPseudomonas aeruginosa society. Med Hypotheses. 2011;76(2):166-8. .[4] 胡曰健 , 王倩 , 马瑞 , 唐子圣 , 朱彩莲 , 何智妍 , 刘正 , 黄正蔚 . 生物膜定量分析仪对不同细菌早期生物膜形成能力的比较研究 . 中国微生态学杂志 . 2011;23(9): 850-852+856.[5] 何智妍 , 黄正蔚 . 密度感应拮抗剂 C-30 对变异链球菌生物膜的影响 . 牙体牙髓牙周病- 298 -

学杂志 .211;21(9):489-493.[6] 王倩 , 黄正蔚 . 大肠杆菌密度感应缺陷株中 sahH 基因克隆与表达的研究 . 口腔医学 .2011;31(8):449-452.[7] 何智妍 , 黄正蔚 . 变异链球菌社会欺骗行为规避模式的观察研究 . 口腔生物医学 .2011;2(1):13-16.[8] 王倩 , 唐子圣 , 马瑞 , 刘正 , 朱彩莲 , 黄正蔚 . 变异链球菌 luxS 基因对多糖基质代谢的影响 . 上海口腔医学 . 2011;20(1):6-9.[9] 黄正蔚 , 刘正 , , 马瑞 , 朱彩莲 . 变形链球菌 luxS 基因缺失对生物膜早期形成的影响 .中华口腔医学杂志 , 2009;44(2):72-74.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3专利 :1 项人 PD-L2 融合蛋白对角质形成细胞 /T 细胞共培养模型作用的研究批准号 :30872888项目负责人 : 唐国瑶所在单位 : 上海交通大学口腔扁平苔藓 (OLP) 是口腔黏膜疾病中常见的 T 细胞介导的慢性自身免疫性疾病 , 但目前该病缺乏根本有效的治疗方法。本项目通过研究 OLP 中介导免疫传导的共刺激分子的表达特点 , 探索特异性免疫靶向治疗 OLP 的可能性。本项目首先从蛋白与 mRNA 两个水平检测 OLP 患者外周血与局部损害组织中 PD-L1 与 PD-L2 分子的表达特点 , 筛选出 PD-L2 作为下一步研究的目标分子 , 建立了模拟 OLP 损害局部发病机制的角质形成细胞 /T 细胞共培养模型后 , 最终检测 PD-L2 融合蛋白在上述模型中对 T 细胞功能的影响。本研究发现 , 与正常对照组比较 ,PD-L2mRNA 在 OLP 患者局部损害组织中表达升高 10.69 倍 , 在 OLP 患者外周血中表达下降 0.33 倍 ;PD-L2 融合蛋白抑制了共培养模型中 T 细胞增殖与细胞因子 IL-2、INFγ表达水平 (p

[3] 杜观环 , 李琴 , 周永梅 , 沈雪敏 , 唐国瑶 . PD-L2 融合蛋白对角质形成细胞 /T 细胞共培养模型的作用 . 临床口腔医学杂志 . 2010; 26(6):337-340.[4] 杜观环 , 秦孝鹏 , 李琴 , 周永梅 , 沈雪敏 , 唐国瑶 . PD-L1mRNA 与 PD-L2mRNA 在口腔扁平苔藓中的表达特点及可能作用 . 上海口腔医学 . 2011; 20(6), pp 619-622.[5] 李琴 , 杜观环 , 唐国瑶 . 口腔扁平苔藓相关细胞模型的建立 . 上海口腔医学 . 2011;20(1): 16-20.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 3 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 4下神经支配对组织工程化骨骼肌舌向特化的影响批准号 :30872890项目负责人 : 唐休发所在单位 : 四川大学目的 : 舌缺损的整复是口腔颌面部组织器官修复重建面临的重要任务 , 但舌肌较躯体骨骼肌复杂 , 传统方法难以获得功能性修复。只能寄希望于组织工程方法研究出替代舌肌形态及功能的组织。方法 : 从 Lewis 大鼠乳鼠提取成肌细胞 (Mb) 体外培养。将携带胶质源性神经营养因子 (GDNF)cDNA 的重组腺病毒转导 Mb 后行相应分子生物学、MTT 检测。雄性Lewis 乳鼠来源 Mb 及 MbGDNF 与胶原海绵支架材料在体外复合培养并植入雌性 Lewis 大鼠背部缺损或舌下神经断端 ,1、6、12 周后行 H.E 染色、免疫组化染色、Y 染色体检测、过氧化物酶示踪染色等检查。结果 : 转导后 Mb 能高表达重组 GDNF mRNA 及蛋白。Mb 在支架上生长良好。Y 染色体检测阳性。舌下神经植入组可检到 myogenin 及 AChRα 1 染色阳性细胞 , 逆行过氧化物酶示踪染色 MbGDNF 组舌下神经核内运动神经元数量 1 周及 6 周时显著多于 Mb组。结论 : 基因工程修饰的 Mb 能高表达重组 GDNF。胶原海绵材料具有生物相容性和降解性。植入的组织工程化骨骼肌与舌下神经断端发生了直接物质联系 ,MbGDNF 产生的重组GDNF 能通过逆行运输的方式保护舌下神经核团内运动神经元的存活。关键词 : 组织工程 ; 骨骼肌 ; 舌下神经 ; 胶质源性神经营养因子学科代码 :H1402发表论著 :[1] 梁爽 , 李权 , 唐休发 , 冯扬 , 何等旗 . 静电纺丝纳米纤维膜作为骨骼肌组织工程支架材料的细胞相容性研究 . 中国组织工程研究与临床康复 . 2011;15(12):2171-2174.[2] 何等旗 , 唐休发 , 华成舸 . 人基质细胞衍生因子 1α 和 hVEGF165 基因转染成肌细胞的实验研究 . 中国修复重建外科杂志 . 2011;25(10):1239-1244会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1NELL-1 基因调控颌骨发育的分子及信号转导机制- 300 -

批准号 :30872892项目负责人 : 李祖兵所在单位 : 武汉大学NELL-1 基因在颅面部骨骼发育中发挥重要作用 , 并可能调控成骨细胞和软骨细胞的分化 , 但其调控机制尚不明确。通过检测 NELL-1 在颌骨早期发育过程中的表达 , 结果显示下颌骨形成早期梅克尔软骨退化过程中 , 随着软骨细胞的肥大化至死亡消失 ,NELL-1 表达逐渐增强 , 表明 NELL-1 在软骨细胞的分化及死亡过程中发挥作用。随后 , 我们构建了慢病毒介导的 NELL-1 过表达载体 , 并转染软骨细胞 , 结果显示细胞增殖下降、凋亡细胞增加 ,同时 MMP9 等表达明显增强。NELL-1 过表达转基因小鼠模型正在构建中。此外 , 研究表明在梅克尔软骨退化过程中 , 肥大软骨细胞的自噬标记物 BECLIN1 和 LC3 表达增强 , 且未见凋亡信号表达 , 表明自噬可能促进软骨细胞的死亡。通过本项目研究 , 我们完成了下颌骨早期发育过程中 NELL-1 的时空表达的检测 , 探讨了自噬与软骨细胞死亡的关系 , 初步阐明了NELL-1 基因参与调控下颌骨早期发育的机制。为后续研究的开展打下了良好的基础。关键词 :NELL-1, 软骨细胞 , 细胞死亡 , 凋亡 , 自噬学科代码 :H1401发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0氧稳态维持与血管瘤内皮细胞发育及其调控机制批准号 :30872894项目负责人 : 赵怡芳所在单位 : 武汉大学本项目主要研究了低氧环境在血管瘤发生及发展过程中的作用。以鼠源性血管内皮瘤细胞和人脐静脉内皮细胞为研究对象 , 研究低氧对内皮细胞增殖、凋亡和自噬的影响。结果显示短时间低氧培养能诱导内皮细胞发生自噬 , 同时促进其增殖和生长。而长时间低氧在同样诱导内皮细胞发生自噬的情况下 , 相反却降低了细胞活力并诱导其凋亡。抑制自噬能有效阻断短期低氧对内皮细胞增殖的促进作用 , 同时诱导更多的早期凋亡细胞。而另一方面 , 抑制自噬却能显著减弱长期低氧对细胞凋亡的诱导作用 , 提示 : 低氧可能通过诱导 "双向性自噬 " 对内皮细胞的生存与死亡起双向调控作用。这与婴幼儿血管瘤快速增殖后缓慢消退的特征具有高度相似性。通过免疫组织学研究 , 我们发现缺氧诱导因子 HIF-1α 及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 p-mTOR 在增生期血管瘤中高表达 , 且其表达与自噬分子的活化具有相关性。综合而言 , 本研究明确了低氧环境对血管内皮细胞的双向调控作用及其在婴幼儿血管瘤发生发展过程中的作用。通过本课题的研究 , 我们构建了多项技术平台 , 在脉管性疾病及口腔肿瘤领域发表标注本基金支持 SCI 论文 4 篇 , 部分研究成果多次参加国际和国内学术议交流。- 301 -

关键词 : 婴幼儿血管瘤 ; 低氧 ; 自噬 ; 缺氧诱导因子 ; 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白学科代码 :H1406发表论著 :[1]Sun ZJ, Cai Y, Zhao YF, Hu X, Zhang W, Chen XM, Lai FM. Epithelioid angiomatousnodule of head and neck.. Pathol Res Pract. 2009;205(11):753-7.[2]Sun ZJ, Cai Y, Chen G, Wang R, Jia J, Chen XM, Zheng LW, Zhao YF. LMO2 promotesangiogenesis probably by up-regulation of bFGF in endothelial cells: animplication of its pathophysiological role in infantile haemangioma.Histopathology. 2010;57(4):622-32.[3]Jia J, Cai Y, Wang R, Fu K, Zhao YF. Overexpression of allograft inflammatoryfactor-1 promotes the proliferation and migration of human endothelial cells(HUV-EC-C) probably by up-regulation of basic fibroblast growth factor.Pediatr Res. 2010;67(1):29-34.[4]Sun ZJ, Chen G, Zhang W, Hu X, Huang CF, Wang YF, Jia J, Zhao YF. Mammaliantarget of rapamycin pathway promotes tumor-induced angiogenesis in adenoidcystic carcinoma: its suppression by isoliquiritigenin through dual activationof c-Jun NH2-terminal kinase and inhibition of extracellular signal-regulatedkinase. J Pharmacol Exp Ther. 2010;334(2):500-12.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 2 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1获奖 :[1] 张志愿 , 赵怡芳 , 周国瑜 , 郑家伟 , 秦中平 , 范新东 , 赵吉宏 , 竺涵光 , 张陈平 ,王延安 . 口腔颌面部血管瘤与脉管畸形的临床治疗研究 . 中华人民共和国国务院 , 2010年度国家科技进步奖 ( 二等奖 , 奖励时间 :2010.11.)应用细胞片层技术构建血管化组织工程骨的实验研究批准号 :30872896项目负责人 : 李宁毅所在单位 : 青岛大学背景 : 细胞片层技术是近年来组织工程领域的新型技术。细胞片层除了可以提供骨质形成的细胞 , 还可以提供类似自然骨质形成过程中成骨细胞的排列状态。方向 : 利用细胞片层技术构建组织工程骨主要内容 : 实验一 : 分离培养犬骨髓基质干细胞 (BMSCs), 制备BMSCs 细胞片层 ; 制备脱钙骨基质 (DBM); 构建 BMSCs 细胞片层 /DBM 复合体。实验二 :16 只犬分为 4 组 , 将 DBM/rhBMP-2/BMSCs/BMSCs 细胞片层复合体植入犬一侧背阔肌下 , 以不加细胞片层植入另一侧作为对照。实验三 : 16 只犬分为 4 组 , 将BMSCs/rhBMP-2/VEGF/PLGA/BMSCs 细胞片层复合体植入犬一侧下颌骨缺损中 , 以不加细胞片层植入另一侧作为对照。实验二三皆在 4、8、12、16 周分别行 x 线、组织学等检查。结- 302 -

果 : 实验一 : 成功构建细胞片层复合体。实验二 :BMSCs 细胞片层复合体植入组成骨及血管化好于对照组。实验三 :BMSCs 细胞片层复合体植入组成功修复下颌骨缺损 , 可见板层骨。成骨好于对照组。本实验利用细胞片层技术成功构建出组织工程骨 , 为大块的颌骨缺损修复有良好供血的有正常骨结构和一定功能的组织工程骨提供了新的方法和依据。关键词 : 组织工程骨 ; 细胞片层 ; 骨髓基质干细胞 ; 脱钙骨基质学科代码 :H1402[1] 谭帅 , 荆恒 , 高振华 , 李宁毅 . 犬同种异体脱钙骨基质复合细胞片层的体外培养与观察( 英文 ) 中国组织工程研究与临床康复 . 2010;14(03):555-558.[2] 荆恒 , 谭帅 , 高振华 , 陈立强 , 李宁毅 . 犬骨髓间充质干细胞片层的体外培养与制备 . 中国组织工程研究与临床康复 . 2010;14(10):1825-1828.[3] 荆恒 , 李宁毅 , 谭帅 , 高振华 , 陈立强 . 骨髓基质干细胞的体外培养及其细胞片层制备 .国际口腔医学杂志 . 2010;37(03):272-274.[4] 高振华 , 李宁毅 , 刘凤芝 , 荆恒 , 谭帅 , 姚如永 . 骨髓基质干细胞片层的制备及其在组织工程骨中应用的初步研究 . 中华老年口腔医学杂志 . 2010;8(4):235-238.[5] 谭帅 , 李宁毅 , 荆恒 , 高振华 , 陈立强 . 犬同种异体脱钙骨基质复合骨髓基质干细胞片层与内皮祖细胞的体外培养 . 上海口腔医学 . 2010;19(04):393-397.[6] 卜令学 , 高振华 , 荆恒 , 陈立强 , 刘凤芝 , 李宁毅 . 犬骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化及细胞片层的制备 . 现代口腔医学杂志 . 2010 24(05):350-354.[7] 卜令学 , 荆恒 , 陈立强 , 高振华 , 李宁毅 . 犬骨髓基质干细胞片层制备及向成骨细胞的分化 ( 英文 ). 中国组织工程研究与临床康复 . 2010;14(40):7593-7596.[8] 陈涛 , 王艳辉 , 卜令学 , 荆恒 , 高振华 , 谭帅 , 王玲玲 , 李宁毅 . 应用细胞片层技术构建组织工程骨 . 中国组织工程研究与临床康复 . 2011;15(02):191-195.[9] 王玲玲 , 李宁毅 , 樊功为 , 卜令学 , 杨学财 , 高振华 . 犬骨髓基质细胞片层在构建组织工程骨中的作用 . 中国口腔颌面外科杂志 . 2011;9(02):96-100.[10] 王玲玲 , 李宁毅 , 樊功为 , 卜令学 , 袁荣涛 , 高振华 , 邢士超 . 应用骨髓基质细胞片层构建组织工程骨的实验研究 . 口腔医学 . 2011;31(04):199-202.[11] 高振华 , 卜令学 , 袁荣涛 , 冯元勇 , 王玲玲 , 李宁毅 . 血管内皮祖细胞对组织工程骨成骨能力的影响 . 上海口腔医学 . 2011;20(04):342-346.[12] 陈涛 , 王艳辉 , 卜令学 , 李宁毅 . 应用细胞片层技术构建功能性组织工程骨的动物实验研究 . 华西口腔医学杂志 . 2011;29(04):442-445.[13] 卜令学 , 王艳辉 , 李宁毅 , 高振华 , 陈欣 , 荆恒 . 应用骨髓基质细胞片层构建组织工程骨的实验研究 . 中华口腔医学杂志 . 2011; 46(12):747-750.会议报告 : 国际大会 3 分组 3 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 6批准号 :30872898项目负责人 : 胡敏解剖特异性神经趋向性生长与面神经修复的相关基础研究- 303 -

所在单位 : 中国人民解放军总医院在前期单分支神经修复导管、脱细胞面神经及去轴突面神经研究基础上 , 课题组首先通过比较兔、猪、狗、猴面神经颅外段解剖结构 , 选择出合适的研究面神经解剖特异性趋向性再生及修复的实验动物模型。其次课题组采用模具成型法构造多分支壳聚糖面神经修复导管 , 并通过分别对比多分支神经修复导管、脱细胞面神经和去轴突面神经修复面神经缺损模型疗效 , 确定神经生长因子、许旺氏细胞和神经基膜在神经解剖特异性趋向生长中的作用及意义。在进一步研究中 , 课题组采用荧光金示踪法和双重示踪法等手段研究面神经延伸径路 , 分析面神经各分支在主干中的分布情况 , 进而通过局部解剖病理学和微三维重建研究神经趋向性生长的方式。研究结果表明 : 神经生长因子、许旺氏细胞和神经基膜在面神经解剖特异性趋向生长中均发挥重要作用 , 其中神经生长因子对面神经解剖趋向性再生的作用在 5mm 之内最为明显 ; 而神经纤维基膜在面神经的解剖特异性趋向性修复过程中存在接触诱导作用 ; 另外兔全面神经修复过程中 , 存在轴突的优势生长现象。关键词 : 面神经 ; 解剖特异性趋向性生长 ; 神经修复导管 ; 脱细胞面神经 ; 去轴突面神经学科代码 :H1406发表论著 :[1]Hu M, Zhang L, Niu Y, Xiao H, Tang P, Wang Y. Repair of whole rabbit facialnerve defects using facial nerve allografts. J Oral Maxillofac Surg.2010;68(9):2196-206.[2] 肖红喜 , 胡敏 , 牛宇 , 李妍 , 乔言平 . 异种脱细胞神经移植修复大鼠面神经缺损的实验研究 . 口腔医学 . 2010;8:449-451.[3] 牛宇 , 刘辉 , 孔祥国 , 高俊明 , 曲亚荣 , 胡敏 . 化学去细胞异体全面神经移植的再生差异性研究 . 中华老年口腔医学杂志 . 2010;3:137-139.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 1牙源性角化囊性瘤中 PTCH1 基因失活的遗传学及表观遗传学研究批准号 :30872900项目负责人 : 李铁军所在单位 : 北京大学在以往工作基础上 , 本项目又完成 40 例牙源性角化囊性瘤 (KCOT;11 例 Gorlin 综合征相关、29 例散发 ) 的 PTCH1 基因突变检测 , 加上以往病例共计 102 例中 , 约 84% 的 Gorlin综合征相关 KCOT(26/31) 和 35% 的散发 KCOT(25/71) 中发现 64 处 PTCH1 突变 , 提示 PTCH1基因突变可能与颌骨 KCOT 的发病紧密相关 ; 采用微卫星技术 , 发现约 35% 的病例 (15/43)还存在染色体 9q22.3-q31 区段的杂合性缺失 ; 检测 PTCH1 启动子区的甲基化水平 , 结果未发现异常甲基化现象 , 提示过甲基化可能不参与 KCOT 中 PTCH1 基因的失活 ; 综合分析结- 304 -

果 , 约 30%(13/44)KCOT 的 PTCH1 基因是通过所谓 " 二次打击 " 机制而失活的 ( 即一对等位基因分别发生了突变或杂合性缺失 ),32%(14/44) 病例仅发生了 " 一次打击 "( 只有一条等位基因发生突变或杂合性缺失 ), 因此在 KCOT 中 ,PTCH1 基因失活除了存在经典的 " 二次打击 " 模式外 , 还可能通过 " 一次打击 " 而表现单倍体剂量不足或显性抑制型等多种复杂模式来实现 ; 部分病例不表现 PTCH1 的任何异常 , 提示其发病过程中可能还存在多基因作用的机制。关键词 : 牙源性角化囊性瘤 ;Gorlin 综合征 ;PTCH1; 突变 ; 表观遗传学学科代码 :H1406发表论著 :[1]Pan S, Li TJ. PTCH1 mutations in odontogenic keratocysts: are they related toepithelial cell proliferation? Oral Oncol. 2009;45(10):861-5.[2]Luo HY, Li TJ. Odontogenic tumors: a study of 1309 cases in a Chinese population.Oral Oncol. 2009;45(8):706-11.[3]Huang JW, Luo HY, Li Qing, Li TJ. Primary intraosseous squamous cell carcinomaof the jaws: a clinicopathological study of 39 cases. Arch Pathol Lab Med. 2009;133:1834-1840.[4]Pan S, Xu LL, Sun LS, Li TJ. Identification of known and novel PTCH mutationsin both syndromic and non-syndromic keratocystic odontogenic tumors. Int J OralSci. 2009; 1(1): 42-46.[5]Pan S, Dong Q, Sun LS, Li TJ. Mechanisms of inactivation of PTCH1 gene inkeratocystic odontogenic tumors: modification of the two-hit hypothesis. ClinCancer Res. 2010;16:442-450.[6]Dong Q, Pan S, Li TJ. Orthokeratinized odontogenic cysts: a clinicopathologicalstudy of 61 cases. Arch Pathol Lab Med. 2010; 134:271-275.[7]Zhang JY, Dong Q, Li TJ. Differences in collagen fibers in the capsule wallsof parakeratinized and orthokeratinized odontogenic cysts. Int J OralMaxillofac Surg. 2011; 40:1296-300.[8] 李铁军 , 孙丽莎 , 罗海燕 , 袁峻伟 , 高丽 , 谷小美 , 李雪芬 , 徐丽莉 . 颌骨牙源性角化囊性瘤的研究 . 北京大学学报 ( 医学版 ). 2009; 41(1):16-20.会议报告 : 国际大会 4 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 12 硕士 1PRG4 在颞下颌关节盘前移位中的作用及调控机制研究批准号 :30872901项目负责人 : 谷志远所在单位 : 浙江中医药大学蛋白多糖 4 (proteoglycan4,PRG4) 是近年发现的一种存在于滑液和关节表面的粘性- 305 -

糖蛋白 , 由 PRG4 主导的边界润滑功能有助于缓冲过大的负荷 , 对维持关节功能和形态至关重要 , 但 PRG4 在颞下颌关节紊乱病中的作用尚不清楚。本研究通过动物模型和细胞培养的方法 , 对颞下颌关节盘移位前后 PRG4 表达的动态改变及不同压力和细胞因子对双板区滑膜细胞 PRG4 表达的调控进行研究 , 探讨 PRG4 的表达、分布、调控与颞下颌关节紊乱病发病机制和转归的联系。研究表明 , 关节盘前移位后 , 髁突软骨细胞 PRG4 mRNA 一过性升高以保护髁突软骨表层的完整性 , 促进滑液润滑 , 有利于实现关节的适应性改建。在静压力和相关成骨促进生长因子作用下 PRG4mRNA 表达和分泌蛋白变化 , 探讨在应力和生长因子共同作用下滑膜细胞润滑功能的调控 , 从关节润滑角度进一步探索颞下颌紊乱病的适应性改建 , 为颞下颌关节病临床治疗提供改善关节润滑功能方面的思路。关键词 : 蛋白多糖 4; 关节润滑 ; 颞下颌关节 ; 滑膜细胞学科代码 :H1407发表论著 :[1]Feng J, Gu Z, Lin X, Fan Y.Postnatal development of type II collagen and aggrecanmRNA expression in a rabbit craniomandibular joint. Anat Rec (Hoboken).2010;293(9):1574-80.[2] 冯剑颖 , 谷志远 , 林新平 , 吴梦婕 . 持续静压力对大鼠成纤维样滑膜细胞 PRG4 表达的影响 . 口腔颌面修复学杂志 . 2010; 11(02): 75-78.[3] 冯剑颖 , 谷志远 , 林新平 , 吴梦婕 , 王伟 . 兔关节盘前移位后髁突软骨 PRG4 mRNA 表达改变的研究 . 口腔医学 . 2010; 30(06): 324-327.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0仿牙骨质活性涂层的新型钛种植体设计、制备及其生物学评价批准号 :30872902项目负责人 : 赵士芳所在单位 : 浙江大学通过胶原、纳米羟基磷灰石共混体系与透明质酸 (HA) 的 RGD 序列衍生物 HA-GRGDSPC交替沉积 , 构建了 ( 胶原 + 纳米羟基磷灰石 )/HA-GRGDSPC 杂化复合涂层 , 通过将半胱氨酸残基上的自由巯基转化为双硫键 , 实现了涂层的交联稳定。在此基础上 , 将人重组骨形成蛋白因子 (rhBMP-2) 引入到涂层中 , 制备了胶原、羟基磷灰石和透明质酸为涂层基质、双硫键交联的、含 RGD 和 rhBMP-2 双活性因子的生物活性涂层 , 该涂层组分上仿牙骨质 , 功能上仿骨基质对骨细胞的作用 , 可以促进种植体和骨之间的骨整合。最后 , 我们将碱性成纤维生长因子 (bFGF) 引入到该涂层中 , 构建了含 RGD 和 bFGF 双活性因子的生物活性涂层 ,该仿生涂层亦能促进种植体骨整合。关键词 : 类牙骨质涂层 ; 杂化 ; 表面改性 ; 生物活化 ; 牙种植体学科代码 :H1409- 306 -

发表论著 :[1]Li X, Lu T, Zhang J, Xu J, Hu Q, Zhao S, Shen J. A study of properties of‘‘micelle-enhanced” polyelectrolyte capsules: Structure,encapsulation and in vitro release. Acta Biomater. 2009;5(6):2122-31.[2]Li X, Zhang J, Hu Q, Li X. From the 2-dimensional unstable polyelectrolytemultilayer to the 3-dimensional stable dry polyelectrolyte capsules. J ColloidInterface Sci. 2011;363(1):64-72.[3]Zhang F, Huang Y, Li X, Zhao S. Surface modification and its effects on attachemnt,spreading, and proliferation of huaman gingival fibroblasts. Int J OralMaxillofac Implants. 2011;26(6):1183-92.[4]Huang Y, Luo Q, Li X, Zhang F, Zhao S. Fabrication and in vitro evaluation ofthe collagen/hyaluronic acid PEM coating crosslinked with functionalized RGDpeptide on titanium. Acta Biomater. 2012;8(2):866-77.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 5 硕士 7获奖 :[1] 赵士芳 . 牙种植体表面仿生活性涂层的构建及其生物学评价 . 中华口腔医学会 , 口腔医学创新研究奖 ( 优秀奖 , 奖励日期 :2009.9)角质干细胞对皮肤疤痕形成影响的实验研究批准号 :30872904项目负责人 : 王佐林所在单位 : 同济大学改善伤口愈合的质量、防治伤口愈合后的疤痕增生是目前口腔颌面外科和整形外科研究的热点和难点问题之一。该项目拟通过研究 OPN 诱导后的皮肤角质干细胞生物学特性的改变 , 探索皮肤角质干细胞在正常皮肤及伤口处皮肤所具有的不同演变规律 , 探讨在疤痕形成过程中的作用。本项目通过体外分离培养 SD 鼠颌面部皮肤的角质干细胞 , 将含有OPN-cDNA 的质粒导入干细胞后 , 研究其在伤口愈合及正常皮肤再生过程中的演变规律 , 研究结果表明 ,OPN 促炎性因子分泌并促进伤口愈合。成功构建 OPN 慢病毒表达载体 , 建立了合理的细胞模型 , 研究了 OPN 的疤痕治疗效果。本研究成果为进一步后续研究提供理论基础和参考依据 , 具有重要的理论意义及潜在的临床应用价值。关键词 : 角质干细胞 ; 骨桥蛋白 ; 热休克蛋白 47; 疤痕 ;RNA 干扰学科代码 :H1403发表论著 :[1] 武金峰 , 王佐林 . 骨桥蛋白在新生大鼠背部皮肤创伤愈合过程中的表达 . 口腔颌面外科杂志 . 2010;20(4):232-236.- 307 -

[2] 苏菊 , 王佐林 . 大鼠 OPN 真核表达载体的构建和体外表达 . 口腔颌面外科杂志 . 2010;20(1):4-9.[3] 武金峰 , 王佐林 . 大鼠骨桥蛋白干扰质粒的构建及其干扰效率的鉴定 . 口腔颌面外科杂志 . 2009;19(6):385-389.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 7 硕士 5计算机辅助颅颌面整形外科手术规划与高精度手术导航系统关键技术研究批准号 :30872906项目负责人 : 沈国芳所在单位 : 上海交通大学上海交通大学附属九院口外开展的颅颌面整形手术在全国处于领先地位 , 总就医人数、特别是复杂牙颌面及严重颅颌面畸形患者就诊率较高。颅颌面畸形和缺损的整复治疗由于解剖结构的复杂性和治疗目的的特殊性 , 必须做出准确的术前规划和精确的术中定位操作 , 与计算机辅助手术规划和术中导航技术相结合是本领域国际前沿趋势。本研究小组已在这方面开展了 5 年的合作 , 初步建立了软硬件和临床实验研究平台。在此基础上提出了 5 项国内外具创新性的导航手术 , 并医工进一步合作研发一个集术前手术规划、整形手术效果仿真、颅颌面专用手术导航设备为一体的高精度计算机辅助颅颌面整形手术临床工程系统。其实现将在国际同行中处于前沿水平。关键词 : 颅颌面整形外科 ; 手术规划 ; 高精度导航 ; 虚拟现实学科代码 :H1410发表论著 :[1]Yu H, Shen G, Wang X, Zhang S. Navigation-guided reduction and orbital floorreconstruction in the treatment of zygomatic-orbital-maxillary complexfractures. J Oral Maxillofac Surg. 2010;68(1):28-34.[2]Zhang W, Wang C, Yu H, Liu Y, Shen G. Effect of fiducial configuration on targetregistration error in image-guided cranio-maxillofacial surgery. JCraniomaxillofac Surg. 2011;39(6):407-11.[3]Zhang S, Gui H, Lin Y, Shen G, Xu B.Navigation-Guided Correction of MidfacialPost-Traumatic Deformities (Shanghai Experience With 40 Cases). J OralMaxillofac Surg. 2012;70(6):1426-33.[4] 于洪波 , 沈国芳 , 刘炳凯 , 范秀敏 , 王旭东 , 张诗雷 . 基于虚拟现实技术的正颌手术模拟预测方法的建立 . 中国口腔颌面外科杂志 , 2009; 7(6): 519-523.[5] 于洪波 , 沈国芳 , 刘炳凯 , 范秀敏 , 王旭东 , 张诗雷 . 应用纹理映射法建立颅颌面三维形貌模型 . 中国口腔颌面外科杂志 . 2009; 7(5): 441-445.[6] 辛鹏飞 , 桂海军 , 陈之彪 , 张诗雷 , 徐兵 , 沈国芳 . 3dMD 摄影测量系统辅助颅颌面软- 308 -

组织畸形整复的初步报道 . 中国口腔颌面外科杂志 . 2011; 7(9): 307-311.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 6获奖 :[1] 沈国芳 . 高精度导航系统辅助颅颌面骨畸形整复与重建外科的开发和应用研究 . 中华口腔医学会口腔医学创新研究奖 ( 奖励时间 :2009)[2] 张文斌 , 沈国芳 . 用于颅颌面手术导航的定位跟踪机构 (ZL 2011 2 0100087.1). 国家知识产权局 .2011.11.结构可靠性理论用于口腔修复体预测寿命和优化设计的研究初探批准号 :30872907项目负责人 : 张少锋所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学本课题探索将结构可靠性理论应用于口腔修复体的优化设计和寿命预测研究。研究中通过文献检索和统计分析获得了中国人下颌第一磨牙日常咀嚼力概率分布图谱和齿科全瓷材料的疲劳极限强度曲线 , 同时建立了用于全瓷冠桥崩瓷失效分析的随机有限元模型 , 在此基础上运用应力 - 强度干涉理论进行可靠性分析。研究结果显示 : 随机咬合力作用下 , 咀嚼接触面积的大小对全瓷冠的可靠性影响显著 , 即大接触面积时的可靠度显著大于小接触面积时 ; 口腔日常温度变化对全瓷冠的可靠性影响不显著 ; 多因素综合作用对全瓷冠的可靠性有显著影响 ; 日常咀嚼力作用下 , 全瓷冠 1 到 20 年的疲劳强度可靠性计算值与临床随访调查结果趋势一致、数值略高 ; 连续变化多参数有限元分析法可对全瓷冠的咬合面厚度、肩台宽度、饰瓷厚度和核瓷厚度等进行优化设计 , 并得到相应的优化区间 ; 在预期寿命 1-20 年条件下实现了对全瓷冠桥连接体的优化设计。本研究结果表明 , 结构可靠性理论适合用于口腔修复体的寿命预测和优化设计 , 为修复体的有关研究探索出了一条新路 , 但研究中仍需注意尽量全面的模拟相关影响因素以使计算结果更加接近临床实际。关键词 : 口腔修复体 ; 全瓷冠 ; 可靠性 ; 优化设计 ; 寿命预测学科代码 :H1409发表论著 :[1]Zhang, L, Wang, ZY, Chen JJ, Zhou W, Zhang SF. Probabilistic fatigue analysisof all-ceramic crowns based on the finite element method. J of Biomech. 2010;43(12):2321-2326.[2] 张磊 , 张少锋 , 周威 , 杨雪 . 应用 ALGOR 软件对全瓷冠使用寿命与安全性研究 . 临床口腔医学杂志 . 2009;11: 657-659.[3] 李岩 , 张少锋 , 陈建军 . 下颌第一磨牙全瓷冠强度的可靠性的三维有限元分析 . 中华口腔医学杂志 . 2010;45(4):233-236.[4] 周威 , 张磊 , 李萌 , 李萍 , 张少锋 . 全瓷冠疲劳强度可靠性及各随机参数的分析研究 .临床口腔医学杂志 . 2010;8:457-459.- 309 -

[5] 李岩 , 张少锋 , 陈建军 , 张磊 . 随机咬合力与随机温度载荷下下颌第一磨牙全瓷冠的可靠性研究 . 实用口腔医学杂志 . 2010; 26(03):325-328.[6] 王卫国 , 张少锋 , 陈建军 , 李岩 . 合面厚度与肩台宽度连续变化的下颌第一磨牙全瓷冠三维有限元分析 . 中华口腔医学杂志 . 2011; 46(4):205-209.[7] 王卫国 , 张少锋 , 陈建军 , 李垒 . 下颌第一磨牙全瓷冠参数化三维有限元模型的建立 .临床口腔医学杂志 . 2011;1: 8-11.[8] 王卫国 , 张少锋 , 陈建军 . 基于全瓷冠饰瓷厚度及基底厚度连续变化的全瓷冠三维有限元分析 . 牙体牙髓牙周病学杂志 . 2011;5:272-275.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 3牙科全瓷修复体疲劳及失效行为的实验和数值模拟研究批准号 :30872908项目负责人 : 赵克所在单位 : 中山大学口腔内的受力环境和模式复杂 , 使全瓷修复体疲劳失效行为的实验结果与临床情况相差甚远 ; 而选择参数的差异性又影响了有限元模拟结果的准确性。本项目将实验表征、数值模拟和临床观察结果三者相互校验 , 建立可信的瓷修复体有限元模型 , 解决其疲劳失效评价可靠性的难题。从动疲劳实验获取疲劳参数 n、A 和 B 及全瓷材料弯曲强度的 Weibull分析数据等 , 以构建与口腔实际工作状况相符的全瓷冠桥三维有限元模型开始 , 然后模拟循环加载情况 , 计算并分析其在循环载荷下裂纹走向及疲劳寿命等 ; 再通过瓷修复体疲劳失效实验表征与临床失效全瓷冠桥修复体断口形貌分析 , 校验所建有限元模型的准确性和有效性 ; 再在验证的模型上变换修复体各项参数和加载模式来模拟和分析其疲劳断裂及失效行为 , 并预测其工作寿命。此研究结果将有力推动新型牙科全瓷材料的研制和应用 , 并为临床全瓷修复体优化设计、可靠性及耐久性评价和寿命预测提供可靠的实验与理论依据。关键词 : 牙科陶瓷 ; 生物力学 ; 疲劳 ; 失效 ; 有限元分析学科代码 :H1409发表论著 :[1]Zhao K, Pan Y, Guess PC, Zhang XP, Swain MV. Influence of veneer applicationon fracture behavior of lithium-disilicate-based ceramic crowns. Dent Mater.2012 ;28(6):653-60.[2] 张骏 , 赵克 , 王勤琴 , 范丹妮 , 吴晓平 , 张新平 . 不同直径压头对磨牙 e.max 全瓷冠失效模式的影响 . 中华口腔医学研究杂志 ( 电子版 ). 2008; 2(4):347-351.[3] 程绮婷 , 赵克 , 张新平 . 牙科陶瓷力学性能与可靠性的研究方法 . 中华口腔医学研究杂志 ( 电子版 ). 2009;3(3):331-335.[4] 潘娱 , Michael V Swain, 马骁 , 张新平 , 赵克 . 饰瓷对磨牙 e.max 双层全瓷冠断裂类型的影响 . 口腔医学研究 . 2011; 27(2):97-100.- 310 -

[5] 吴玮琦 , 程绮婷 , 张骏 , 马骁 , 张新平 , 赵克 . 牙科陶瓷的动疲劳性能研究及循环疲劳寿命数值计算 . 中华口腔医学研究杂志 ( 电子版 ). 2011;5(1):37-43.[6] 吴晓平 , 李大圣 , 张骏 , 马骁 , 赵克 , 张新平 . 不同代型材料对全瓷冠断裂强度和断裂类型的影响 . 中华口腔医学杂志 . 2009;44(8):483-487.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 8抗菌性口腔钛修复体的研究批准号 :30872909项目负责人 : 张祖太所在单位 : 首都医科大学钛具有良好的生物相容性 , 作为医用材料广泛应用于口腔修复及整形外科种植体等 ,但由于钛表面细菌的聚集和粘附 , 易导致修复体、种植体等周围组织的炎症 , 也是导致种植体失败的主要原因之一。本课题通过铸造的方式将氯、氟等元素注入到钛的表层 , 从而获得抗菌性钛的一项基础应用研究。首先利用耐高温的氧化物作为耐火剂、氧化铝水泥系作为结合剂和金属粉末作为热膨胀剂成功研制铸钛基础包埋材料 , 该包埋材料在铸造时既不与溶化的钛发生反应 , 又能补偿钛的铸造收缩 , 然后在其中加入一定量的含氯、氟元素的化合物 , 利用钛在熔化状态下的化学活泼性 , 在铸造体的表层形成 Ti-Cl、Ti-F 层 , 从而获得抗菌性钛铸造体 , 并对铸造体进行 XPS、XRF 分析 , 确认氯、氟元素存在。然后用口腔内常见细菌 S mutan 进行抑菌性实验 , 钛铸造组的抗菌特性明显高于对照组纯钛 ; 而用小鼠成纤维细胞 (L929) 对其生物相容性等进行检测 , 结果显示 , 钛铸造组的细胞增殖与对照组无显著性差异。因此抗菌性口腔钛修复体的研制 , 对于提高口腔钛种植体的成功率、预防口腔内钛的固定修复、活动修复以及全口义齿基托修复带来的牙龈炎、牙周炎、粘膜炎及继发龋等具有积极的意义。关键词 : 钛铸造 ; 种植体 ; 修复体 ; 抗菌性 ; 生物相容性学科代码 :H1409发表论著 :[1] 丁宁 , 张祖太 , 李靖桓 , 韩秀欣 , 玉置幸道 , 宫崎隆 . 铝酸钙水泥作为结合剂铸钛包埋材料的性能测试 . 北京口腔医学 . 2011;19(1):12-15.会议报告 : 国际大会 2 分组 2 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2- 311 -

FFC 法调节骨内修复体形态的和生物力学个性化的基础研究批准号 :30872910项目负责人 : 王贻宁所在单位 : 武汉大学熔盐电脱氧法 (FFc) 是一种新型纯钛冶炼技术 , 目前尚未在生物医学领域应用。由于该方法具备可以根据实际需求对样本的形态、生物力学性能以及表面元素进行调控等优点 , 因此相对于传统的钛制备技术而言 ,FFc 钛 (FFcTi) 在口腔个性化种植体制作方面具有潜在的应用前景。本课题组在项目实施工程中探索和优化了石墨磨具、等离子烧结和二次还原等技术工艺 , 成功制备了柱状种植体 , 使 FFc 法制备个性化种植体的设想成为可能。同时课题组通过体内外生物学实验发现 ,FFcTi 的骨生物相容性与商业纯钛相当。为了进一步提高 FFcTi 的生物活性 , 课题组尝试了多种材料表面改性技术。一方面我们在制作过程中将钙和锶的氯化盐作为熔盐 , 成功地将骨活性元素引入 FFcTi; 另一方面我们通过电化学沉积的方法成功地在钛金属表面制备了壳聚糖 / 明胶和壳聚糖 / 丝素蛋白另种新型涂层。课题组最新研究表明 , 由于 FFcTi 的纳 - 微米表面 , 两种新涂层在 FFcTi 表面具有更高地结合强度。目前 , 课题组已发表 SCI 论文 4 篇 ,3 项专利申请获得申请号。本课题的成功实施为今后 FFcTi 的临床应用奠定了坚实的基础。关键词 : 熔盐电脱氧法 ; 种植体 ; 钛学科代码 :H1409发表论著 :[1]Jiang T, Zhang Z, Zhou Y, Liu Y, Wang Z, Tong H, Shen X, Wang Y.Surfacefunctionalization of titanium with chitosan/gelatin via electrophoreticdeposition: characterization and cell behavior. Biomacromolecules.2010;11(5):1254-60.[ 2 ] Zhang Z, Jiang T, Ma KN , Cai XJ, Zhou Y, Wang YN. Low temperatureelectrophoretic deposition of porous chitosan/silk fibroin composite coatingfor titanium biofunctionalization. Mater Chem. 2011; 21:7705-7713.[3]Liu Y, Jiang T, Zhou Y, Zhang Z, Wang ZJ, Tong H, Shen XY, Wang YN. Evaluationof the attachment, proliferation, and differentiation of osteoblast on acalcium carbonate coating on titanium surface. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl.31(5):1055-1061.[4]Zhou Y, Qian M, Liang Y, Liu Y, Yang X, Jiang T, Wang Y. Effects of leukemiainhibitory factor on proliferation and odontoblastic differentiation of humandental pulp cells. J Endod. 2011;37(6):819-24.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 0辛伐他汀磷酸钙骨水泥聚合物对剩余牙槽嵴骨修复及机制的研究- 312 -

批准号 :30872912项目负责人 : 吴哲所在单位 : 吉林大学从仿生学的角度采用溶剂挥发法制备完成无机 - 有机生物复合材料聚乳酸聚羟基乙酸磷酸钙骨水泥 (PLGA/CPC) 作为辛伐他汀药物的载体 , 采用 XRD、电子显微镜等技术表征其结构和功能 , 按质量比 PLGA/CPC(2:1) 的配比所制备的复合支架材料平均孔径大小约 120μm, 能满足骨组织工程支架材料的要求 ; 评价了辛伐他汀 /PLGA/CPC 复合支架材料的细胞生物学功能 , 载辛伐他汀 PLGA/CPC 复合支架材料具有良好的生物相容性 , 材料浸提液能促进大鼠成骨细胞的增殖及成骨细胞的分化 , 具有促骨形成的作用 ; 以非载药载体为对照 , 将支架材料植入大鼠拔牙创 , 采用影像学、组织学等技术研究辛伐他汀 /PLGA/CPC 对剩余牙槽嵴骨修复影响及在拔牙创骨愈合的不同阶段局部组织内与成骨细胞分化 , 骨矿化及骨吸收相关基因的表达规律 , 发现载辛伐他汀 /PLGA/CPC 组可诱导拔牙窝内新骨的形成 , 且在成骨数量上优于单一的 PLGA/CPC 支架材料组。由此 , 本研究探讨了载辛伐他汀 /PLGA/CPC的制备方法 , 阐述了载辛伐他汀 PLGA/CPC 促进剩余牙槽嵴骨修复的机制 , 证明了 PLGA/CPC支架材料用于辛伐他汀载体促进拔牙创骨修复的可行性。关键词 : 辛伐他汀 ; 聚乳酸 - 聚羟基乙酸 ; 牙槽嵴 ; 骨组织工程学科代码 :H1402发表论著 :[1] Liu C, Wu Z, Sun HC. The effect of simvastatin on mRNA expression of transforminggrowth factor-beta1, bone morphogenetic protein-2 and vascular endothelial growth factor intooth extraction socket. Int J Oral Sci. 2009;1(2):90-8.[2] 许莹莹 , 王蕊 , 郭冲冲 , 宋光子 , 庞宇轩 , 吴哲 . 载辛伐他汀磷酸钙骨水泥 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸新型材料对拔牙创骨改建影响的实验研究 . 口腔医学研究 . 2011;(11): 954-956.[3] 赵磊 , 刘畅 , 韩晓谦 , 周倜 , 何盼 , 吴哲 . 载辛伐他汀 PLGA/CPC 复合材料的制备及表征 .口腔医学研究 . 2011;(09): 752-755.[4] 吴健 , 钱明 , 吴哲 , 马冬丽 , 孙宏晨 . 局部应用辛伐他汀对拔牙窝内 BMP-2 mRNA 表达的影响及意义 . 吉林大学学报 ( 医学版 ). 2010;(05):851-853+814.[5] 方鸿满 , 刘畅 , 吴哲 , 许莹莹 , 赵磊 , 孙宏晨 . 局部应用辛伐他汀对拔牙窝内 VEGFmRNA 表达的影响及意义 . 口腔医学研究 . 2010;(01) :4-6.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5雌激素受体在骨髓间充质干细胞向牙周组织细胞分化中的调控作用研究批准号 :30872913- 313 -

项目负责人 : 丁寅所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学牙周组织结构破坏、牙槽骨吸收是牙周病的主要病理变化 , 牙周治疗的关键是重建牙周组织结构。骨髓间充质干细胞 (BMSCs) 具有分化为牙周膜成纤维细胞的潜力 , 是牙周组织工程种子细胞的理想来源。雌激素受体 (ER) 对 BMSCs 体外增殖、成骨与成脂分化具有重要影响。本课题选择大鼠 BMSCs 体内移植引导牙周组织再生为切入点 , 采用细胞培养、基因转染 / 沉默、动物实验、生化检测 ( 免疫组化、RT-PCR、Western-Blotting 印迹分析 )、Micro-CT 等技术与方法 , 研究牙周组织微环境中 ,BMSCs 向牙周组织细胞分化的分子调控 , 及 ER 对 BMSCs 向牙周组织细胞分化的调控作用及相关机理。研究结果表明 :rBMSCs 表达雌激素受体 ERα 与 ERβ ; 雌激素通过 ER 影响 BMSC 的成骨与成脂分化 ;ERα 促进 BMSCs成骨分化 ,ERβ 促进 BMSCs 成脂肪分化。雌激素促进 BMSCs 的成骨分化可能与 PI3K/Akt 信号的激活有关。牙周膜细胞具有诱导 BMSCs 向牙周膜细胞分化的特性。体内实验结果表明 , 利用 BMSCs 与 FG 复合能够较好的修复大鼠牙槽骨缺损。以上研究结果为临床应用组织再生技术修复牙周组织缺损奠定了研究基础。关键词 : 雌激素 ; 雌激素受体 ; 骨髓间充质干细胞 ; 牙周组织再生学科代码 :H1402发表论著 :[1] Zhang B, Li Y, Zhou Q, Ding Y. Estrogen deficiency leads to impaired osteogenicdifferentiation of periodontal ligament stem cells in rats. Tohoku J Exp Med.2011;223(3):177-86.[2] 张亮 , 丁寅 , 邵金陵 , 董金山 . 骨髓间充质细胞联合纤维蛋白凝胶修复大鼠牙槽骨缺损的研究 . 华西口腔医学杂志 .2011; 29(2)125-128.[3] 章斌 , 丁寅 , 曹猛 , 倪华 . 去势大鼠骨髓基质干细胞分离培养鉴定及增殖特性的变化 . 第四军医大学学报 . 2009;30(7):620-623.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 5无托槽隐形矫治微型测力系统的建立与实验研究批准号 :30872914项目负责人 : 白玉兴所在单位 : 首都医科大学无托槽隐形矫治技术是近年来出现的一种新型正畸矫治技术 , 具有美观、舒适、高效、可预测性等特点 , 但有关该技术的确切生物力学机制仍不清楚。本研究将首先采用微电子机械技术、微型传感器技术等开发研究适合于隐形矫治技术中矫治力测量的微型应力传感器芯片 , 建立精确的无托槽隐形矫治技术的微型测力系统 , 深入分析隐形矫治过程中牙齿在三维方向的受力情况。在此基础上对隐形矫治器材料的厚度进行精确测量 , 探讨矫- 314 -

治器材料厚度、STL 模型的高度对矫治力的影响 ; 同时 , 对隐形矫治中不同牙齿移动类型中附件的形态和大小对产生的矫治力的影响进行研究。本研究将逐步深入研究探索无托槽隐形矫治技术的生物力学机制 , 为今后隐形矫治技术及相关技术的研究提供了一个科学、可靠的研究平台。关键词 : 无托槽隐形矫治 : 矫治力 : 微型传感器 : 附件学科代码 :H1408发表论著 :[1]Shi Y, Ren CC, Hao W, Zhang M, Bai YX, Wang ZY. An ultra-thin piezoresistivestress sensor for measurement of tooth orthodontic force in invisible aligners.IEEE Sens J. 2012; 12(5): 1090-1097.[2] 任超超 , 白玉兴 , 王喆垚 , 张敏 . 无托槽隐形矫治微型测力系统的建立 . 中华口腔医学杂志 . 2011; 46(10): 600-603.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 2儿童生长快速期颌骨发育与呼吸功能关系的纵向研究批准号 :30872915项目负责人 : 高雪梅所在单位 : 北京大学本文旨在观察颌骨长、宽、高各方向的生长发育对上气道形态和呼吸功能的影响 , 这是主观推测多而缺乏实际观测的领域。本课题 (1) 对 2659 名错合畸形少年儿童进行睡眠呼吸障碍的调查 , 观察在颅面畸形儿童中睡眠呼吸障碍的比例 , 并遴选追踪对象 ;(2) 对 370张头颅侧位片资料进行颅面骨骼类型和上气道形态关系的分析 , 初步分析影响上气道的骨骼特征 ;(3) 对 15 对严格配比的有无睡眠呼吸障碍的儿童进行颅面骨骼比较 , 筛选对睡眠呼吸功能有影响的骨骼指标 ;(4) 对 8、9、10、11 岁四个年龄组的无睡眠呼吸障碍儿童的一般状况、颅面骨骼 ( 头影测量 )、上气道形态 (MRI) 和睡眠呼吸功能 (PSG) 进行为期 3年的前瞻性纵向研究 , 研究骨骼发育对睡眠呼吸的形态和功能上的影响。结果发现 : 虽然颅面畸形儿童的睡眠呼吸障碍比例并未见明显增高 , 但矢向和垂直向不同的生长型对上气道形态有影响 , 下颌骨的长度指标和长面相关的指标且和睡眠呼吸功能有关 , 正常发育儿童上气道的形态特征随快速发育出现明显改变 ,8 至 9 岁间上颌快速发育期的影响较明显。提示对少儿期生长发育关注的重要性 , 对少儿期的监测是对成人睡眠呼吸障碍的预测、阻断的研究基础。关键词 : 少年儿童 ; 生长发育 ; 颌骨 ; 睡眠呼吸学科代码 :H1401发表论著 :- 315 -

[1] 弓煦 , 赵颖 , 高雪梅 .OSAHS 患者戴用口腔矫治器后颅面、上气道改变的追踪研究 . 中华口腔正畸学杂志 ,2009,16(3): 130-134.[2] Zhong Z, Tang ZH, Gao XM, Zeng XL. A Comparison Study of Upper Airway amongDifferent Skeletal Craniofacial Patterns in Nonsnoring Chinese Children. Angle Orthodontist.2010; 80(2): 267 – 274.[3] 弓煦 , 赵颖 , 高雪梅 , 曾祥龙 . 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征鼾症戴用口腔矫治器 6 年以上牙合改变 . 北京大学学报 ( 医学版 ),2011;43(2)280-284.[4] 邓金荣 , 高雪梅 , 弓煦 , 曾祥龙 . 错合畸形青少年儿童中鼾症的发病情况调查 . 中华口腔正畸学杂志 ,2011,18(1):32-35.[5] 刘杉杉 , 邓金荣 , 弓煦 , 高雪梅 . 8-11 岁儿童颅面形态对睡眠呼吸影响的研究 . 中华保健医学杂志 ,2011;13(2):87-91.会议报告 : 国际大会 3 分组 1 国内大会 7 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3低摩擦矫治系统的探索及其正畸摩擦力的综合模拟实验研究批准号 :30872916项目负责人 : 林久祥所在单位 : 北京大学正畸矫治力是牙齿移动的原动力 , 但由于托槽 - 弓丝 - 结扎丝 ( 圈 ) 之间的摩擦力 , 大大影响了牙齿的顺利移动 , 降低了固定矫治器的效率 , 因此探索低摩擦矫治系统及实现轻力矫治成为正畸学发展的必然趋势。本课题建立了新型的正畸摩擦力测试系统 , 模拟正畸过程中牙齿的倾斜移动 , 不断改变托槽 - - 弓丝间的相对位置关系 , 对国内外现有的几种热点低摩擦矫治系统 - - 国产传动直丝弓矫治器与国外的自锁托槽及 Tip-Edge Plus 托槽在被动状态和主动状态下的摩擦力进行动态的对比研究 , 揭示其摩擦力的大小及变化规律 ,分析各种影响摩擦力的因素 ; 此外 , 还通过扫描电镜和白光干涉表面形貌仪对不同矫治器的表面形貌测定及托槽槽沟粗糙度的测量 , 分析各种低摩擦矫治器的表面摩擦学特性 , 为进一步探索新的低摩擦矫治系统以及临床应用提供科学依据和指导。关键词 : 摩擦力 , 正畸托槽 , 表面粗糙度学科代码 :H1408发表论著 :[1] 丁鹏 , 林久祥 , 周彦恒 . 口腔正畸动态摩擦力测试系统的研发与初步应用 . 北京大学学报 ( 医学版 ).3:319-323.[2] 林久祥 . 传动直丝弓矫正器及技术的研发和临床初步应用 . 中华口腔正畸学杂志 .2011;18(2):61-67.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0- 316 -

H14 口腔颅颌面科学青年科学基金转录因子 RBP-Jkappa 在牙髓细胞老化中的作用及机制研究批准号 :30801289项目负责人 : 庄姮所在单位 : 北京大学牙髓细胞的老化作为一种生理性细胞退化对于牙髓在受外界刺激后的自我修复方面有重要的影响。但目前对于牙髓细胞老化的信号调节尚无相关研究。Notch 信号作为物种进化中高度保守的细胞间作用途径 , 在牙齿发育、牙髓损伤再生中可调节细胞的分化、增殖和凋亡。本课题组在研究中发现 Notch 经典信号通路中的重要转录因子 RBP-Jkappa 的表达与小鼠牙髓细胞的老化密切相关 , 并筛选出了相关的调控基因。在 RBP-Jkappa 条件性基因敲除小鼠的切牙中发现成牙本质细胞和牙本质的形态较野生小鼠而言发生了很大改变。通过采取对 Notch/RBP-Jkappa 信号途径进行抑制或激活等技术路线 , 观察到对Notch/RBP-Jkappa 的干预可影响牙髓细胞的增殖、相关代谢酶的表达及老化相关基因的表达 , 牙髓细胞一些分化的标志性分子表达也随之上调或下调。课题组并在人牙髓细胞进行了相关的验证实验。本课题的研究结果表明 Notch 信号通路在牙髓细胞老化过程中起到调控作用 , 从分子水平阐释了牙髓细胞老化的机制。关键词 :Notch; 老化 ; 基因敲除 ; 牙髓细胞学科代码 :H1404发表论著 :[1] 庄姮 , 金岩 , 邹晓英 , 岳林 , 高学军 . 牙乳头细胞多向分化的观察 . 北京大学学报 ( 医学版 ), 2009;41(01):62-65.[2] Zou XY, Zhuang H, Yue L, Gao XJ.Involvement of Notch signalling pathway in senescenceof human dental pulp cells. Chinese Journal of Dental Research, 2010;13(1):45-49.[3] 常思佳邹晓英庄姮岳林 .Notch 信号通路与细胞老化的关系 . 牙体牙髓牙周病学杂志 ,2011;21(7):412-414.会议报告 : 国际大会 3 分组 3 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1DcR3 在破骨细胞中介导的反向信号传递研究批准号 :30801290项目负责人 : 张晓磊所在单位 : 同济大学DcR3 是一种小分子游离态蛋白 , 参与破骨细胞的分化发育。本课题拟研究 DcR3 及其- 317 -

反向信号通路在根尖病变过程中 , 如何调控根尖牙槽骨的吸收破坏。收集临床根尖病变标本 , 同时构建大鼠根尖病变模型 , 在活体局部病变组织中均未发现 DcR3 及下游信号通路相关分子的阳性表达。体外培养人牙髓细胞 , 用梯度浓度的厌氧菌脂多糖 (LPS) 刺激细胞 ,发现破骨细胞关键性基因 RANKL 和 OPG 呈剂量依赖性变化。另外 , 以生理浓度的雌激素与细胞共培养 , 可以显著降低 LPS 刺激引发的 RANKL 基因高表达。最近的文献表明 , 适当的力学刺激 (mechanical loading) 能够明显抑制破骨细胞的活动 , 同时促进成骨细胞的生成。在大鼠腿骨植入镍钛种植体 , 采用高频振动力学刺激 , 组织学评价种植体周围骨量形成和种植体愈合 , 实验发现该刺激能明显促进骨形成与种植体愈合。小结 (1)DcR3 及下游反向信号通路在根尖病变骨吸收过程中并不发挥主导作用 ;(2) 在根尖、牙髓炎症微环境中 , 经典 RANKL-OPG 信号通路可能主导破骨活动 , 雌激素可作为拮抗剂抑制成骨细胞基因的高表达 ;(3) 高频振动力学刺激能够在种植体愈合过程中促进种植体周围的骨量形成。关键词 :DcR3;RANKL; 根尖病变 ; 破骨细胞 ; 力学刺激学科代码 :H1402发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 2 分组 2培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0感染根管生物膜特性及其致病机制研究批准号 :30801291项目负责人 : 姜云涛所在单位 : 上海交通大学根管生物膜的存在是根管感染经久不愈、治疗失败的根源 , 因此对其特性的研究成为口腔医学界关注的焦点。根管生物膜作为微生物赖以生存的环境 , 在疾病发生、发展不同阶段 , 其组成不仅具有明显种群多样性 ; 而且生物膜状态下 , 细菌将启动一套完全不同的基因系统 , 表达不同的功能蛋白来调控整体和局部的细菌生理代谢 , 使其具有更强的耐药性和毒力 , 导致根管的持续感染和再感染。因此全面认识根管微生物群落组成 , 寻找生物膜状态下病原菌的毒力基因 / 蛋白质 , 可为生物膜感染控制策略制定提供潜力靶标。本研究拟收集各型根尖周炎、根管治疗失败病例 , 应用 DGGE、Real-time PCR 等方法筛选、鉴定根管感染、再感染相关病原菌 , 分析其定植模式 ; 并进一步应用蛋白质组学和基因芯片技术寻找再感染主要病原菌 - - 粪肠球菌生物膜及浮游状态下基因 / 蛋白表达的差异 , 揭示根管生物膜的致病机理 , 为寻找正确根管治疗方法、提高根管治疗的成功率提供理论依据关键词 : 根管生物膜 ; 粪肠球菌 ; 变性梯度凝胶电泳 ; 无标记蛋白定量 ; 基因芯片学科代码 :H1404- 318 -

发表论著 :[1] Jiang YT, Xia WW, Li CL, Jiang W, Liang JP. Preliminary study of the presence andassociation of bacteria and archaea in teeth with apical periodontitis. Int Endod J.2009;42(12):1096-103.[2] 姜云涛 , 夏文薇 , 梁景平 , 闫培芳 , 马善奋 . 原发性感染、再感染根管中古细菌的 RT-PCR分析 . 牙体牙髓牙周病学杂志 . 2009, 19 (2):84-87.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 4 分组 4培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0专利 :1 项Notch 和 Wnt 信号的 “ 对话 ” 在 EMPs 作用骨髓基质细胞促进牙周再生中的调控机制研究批准号 :30801292项目负责人 : 宋忠臣所在单位 : 上海交通大学釉基质蛋白 (EMPs) 联合骨髓基质细胞 (BMSCs) 用于牙周组织工程技术可促进牙周再生。Notch 和 Wnt 信号通路是决定 BMSCs 命运最关键的两个信号系统 , 但在 EMPs 作用 BMSCs促进牙周再生中的信号调控机制的报道尚未见报道。本课题研究 EMPs 作用于人 BMSCs 后 ,用 Real-time PCR, Western Blot 及 RNA 干扰等技术分析 Notch 及 Wnt 的信号变化 ; 观察Wnt-Notch 的 " 对话 " 对 Runx2 的影响。研究发现 EMPs 可促进人 BMSC 的增殖和成骨分化 ; 影响细胞周期变化 ;EMPs 作用 BMSCs 后 Notch1 基因表达上调 ,Wnt1 基因表达下调。高表达Notch1 基因后 , 能促进细胞增殖 , 而对细胞凋亡和分化无明显影响。RNA 干扰 Notch1 基因后 , 细胞增殖受到抑制 , 促进了细胞凋亡和细胞分化。高表达 Wnt1 基因抑制细胞增殖 , 促进细胞成骨分化。Runx2 是 Notch1 和 Wnt1 信号通路重要的骨发生转录因子。结果表明Runx2 介导的 Notch1 和 Wnt1 的 " 对话 " 可能是 EMPs 作用 BMSCs 向牙周组织分化的关键调控机制 , 进一步阐明了 EMPs 作用 BMSCs 促进牙周再生的机制。关键词 : 釉基质蛋白 ; 骨髓基质细胞 ; 牙周组织再生 ;Notch; Wnt学科代码 :H1402发表论著 :[1] Song ZC, Shu R, Zhang XL Cellular responses and expression profiling of human bonemarrow stromal cells stimulated with enamel matrix proteins in vitro. Cell Prolif. 2010,43(1):84-94.[2] 宋忠臣 , 束蓉 , 谢玉峰 . 釉基质蛋白对人骨髓基质细胞增殖和矿化的影响 . 实用口腔医学杂志 . 2008, 24(6):831-834.[3] 宋忠臣 , 束蓉 , 李希庭 , 胡景超 , 张秀丽 . 氯化钴化学模拟低氧对牙周膜成纤维细胞增殖及凋亡的影响 . 上海口腔医学 . 2009, 18(5):489-492.- 319 -

[4] 胡景超 , 束蓉 , 宋忠臣 , 程岚 . 人釉原蛋白基因转导对人骨髓基质细胞增殖和碱性磷酸酶合成的影响 . 上海交通大学学报 ( 医学版 ).2011, 31(5):18-22.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2获奖 :专利 :1 项氯离子共转运体 KCC2/NKCC1 参与牙髓炎疼痛的中枢调控机制批准号 :30801293项目负责人 : 吴礼安所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学牙髓炎是口腔常见病、多发病 , 临床表现主要是剧烈的疼痛 , 尤以夜间为甚。目前尚无有效的镇痛手段。探讨牙髓炎疼痛的中枢机制降低其对患者的折磨具有广泛的临床应用前景。本课题组前期研究结果发现 , 牙髓炎模型中 GABA 诱发延髓背角 II 层神经元产生去极化电流 , 并伴随一组能够调节细胞内外氯离子浓度差的氯离子共转运体 KCC2/NKCC1 表达变化 , 但其机制及在牙髓炎疼痛中的作用尚不清楚。本课题拟以 GAD67-GFP 基因敲入小鼠为研究工具 , 以延髓背角 II 层为靶区 , 采用膜片钳记录、单细胞 PCR、氯成像、形态学以及行为学等方法 , 研究 :1 牙髓炎模型中对 GABA 产生去极化电流的神经元的性质和化学构筑特征 ;2 氯离子共转运体 KCC2/NKCC1 对 GABA 效应转化的调控作用 ; 3 干扰 KCC2/NKCC1对牙髓炎小鼠痛行为学的影响。本研究旨在从新的角度阐明牙髓炎疼痛的中枢调控机制 ,为发展新一代临床镇痛药物提供实验依据。关键词 : 牙髓炎 ;KCC2/NKCC1;GABA; 兴奋性转化 ; 延髓背角 II 层学科代码 :H1404发表论著 :[1] Wu LA, Huang J, Wang W, Wang W, Wang XJ, Wu SX. Down-regulation ofK + –Cl − co-transporter2 in mousemedullarydorsalhorn contributes to the formalin-inducedinflammatory orofacial pain. Neurosci Lett 2009; 457:36-40.[2] Wu LA, Yuan GH, Yang GB, Cui Y, MacDougall M, Donly KJ, Harris S, Chen S.Immortalization and characterization of mouse floxed Bmp2/4 osteoblasts. Biochem BiophysRes Commun 2009; 386(1):89-95.[3] Wu LA, Huang J, Wang W, Wang W, Li YQ, Wang XJ, Wu SX. Activation of GABAergicNeurons following Tooth Pulp Stimulation. J Dent Res 2010; 89(5): 532-536.[4] Li YQ, Li H, Wei J, Qu L, Wu LA. Expression changes of K+-Cl- co-transporter 2 andNa+-K+-Cl- co-transporter1 in mouse trigeminal subnucleus caudalis following pulpalinflammation. Brain Res Bull 2010; 81(6): 561-564.[5] Wu LA, Feng J, Wang L, Mu YD, Baker A, Donly KJ, Gluhak-Heinrich J, Harris SE,MacDougall M, Chen S. Immortalized mouse floxed Bmp2 dental papilla mesenchymal cell- 320 -

lines preserve odontoblastic phenotype and respond to BMP2. J Cell Physiol. 2010;225(1):132-9.[6] Wu LA, Feng J, Mu YD, Heinrich JG, Baker A, Donly KJ, Wang L, Harris S, Macdougall M,Chen S. Regulation of Osteoblast Differentiation and ECM Remodeling by BMP2/4 in vitro.Bulletin du GIRSO, 2010, 49(3) 94-97.[7] Huang J, Wang W, Chen J, Ge SN, Wei YY, Wang YY, Kaneko T, Li YQ, Wu SX.Neurochemical features of enkephalinergic neurons in the mouse trigeminal subnucleuscaudalis. Neurochem Int 2011; 58: 44-51.[8] Wu LA, Feng J, Wang L, Mu YD, Baker A, Donly KJ, Harris S, Macdougall M, Chen S.Development and characterization of a mouse floxed Bmp2 osteoblast cell line that retainsosteoblast genotype and phenotype. Cell Tiss Res, 2011; 343(3):545-58.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 1 博士 1 硕士 0疾病相关性 ⅡfimA 型 P.g 特异性感染致病基因的研究批准号 :30801295项目负责人 : 赵蕾所在单位 : 四川大学牙龈卟啉单胞菌 (P.g) 是牙周病主要致病菌 , 多项研究显示 : 菌毛 fimA 基因 Ⅱ 型 P.g在牙周病患者中检出率最高 , 毒性致病作用更强。表明 Ⅱ 型 P.g 可能为疾病相关性菌株 ,感染宿主过程中可能表达特异性致病因子。本研究分离获得多株 Ⅱ 型 P.g 菌株 , 比较 Ⅱ 型P.g 与疾病非相关性 Ⅰ 型 P.g 粘附和侵入、以及诱导牙龈上皮细胞表达致炎细胞因子的差异 ; 采用寡核苷酸基因表达芯片筛选侵入细胞过程中 Ⅱ 型 P.g 特异表达基因谱 ; 并在获得潜在致病基因的基础上 , 构建基因缺陷株 , 深入探讨特异性致病基因的功能。结果显示 :与 Ⅰ 型 P.g 模式株 ATCC33277 及临床株相比 ,3 株 Ⅱ 型 P.g 粘附和侵入上皮细胞的能力并无显著性差异 , 但可明显诱导细胞分泌 IL-1β 和 IL-6; 全基因组表达芯片分析显示 : 在侵入上皮细胞的过程中 ,ⅡfimA 型 P.g 可特异性表达 37 条基因 , 包括 19 条上调和 18 条下调基因。这些基因的功能包括 : 辅因子生物合成 ; 细胞信封结构的调控 ; 能量代谢 ; 蛋白加工合成 ; 核苷酸还原酶、ABC 转座子及未知功能蛋白的合成等。研究结果从基因水平为揭示ⅡfimA 型 P.g 特异性致病力的原因提供了一定的理论基础。关键词 : 牙龈卟啉单胞菌 ,fimA 基因 , 基因芯片 , 致病机理学科代码 :H1403发表论著 :[1] Gao L, Xu Y, Meng S, Wu Y, Huang H, Su R, Zhao L. Identification of the Putative SpecificPathogenic Genes of Porphyromonas gingivalis with Type II Fimbriae. DNA Cell Biol. 2012Jan 18. [Epub ahead of print][2] Gao L, Miao D, Meng S, Zhao L, Guo SJ, Wu YF. Heterogenic abilities in adhesion and- 321 -

invasion among clinical isolates of Porphyromonas gingivalis with type II fimbriae. AfricanJournal of Microbiology Research 2012;6(11):2727-2734.[3] 段丁瑜 , 王爽 , 张利平 , 赵蕾 , 徐屹 . 不同细菌密度的浮游牙龈卟啉单胞菌及其生物膜对甲硝唑敏感性的体外研究 . 华西口腔医学杂志 2011;9(6):571-575.[4] 李永凯 , 段丁瑜 , 赵蕾 , 吴亚菲 , 徐屹 . 牙周菌斑生物膜的体外模型建立 . 国际口腔医学杂志 2012;39(1): 37-42.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 2Treg 对 DCs 破骨细胞向转化的调控机制研究批准号 :30801296项目负责人 : 赵川江所在单位 : 中山大学为了探讨牙周炎症状态下 CD4+CD25+Treg 对树突状细胞来源破骨细胞 (DDOCs) 转化的调控机制 , 本课题首先对牙周炎患者进行检测 , 结果显示重度 CP 和 GAgP 患者CD4+CD25+Treg 的数量和免疫抑制功能显著下降 ; 而 Pg-LPS 能够增强 CD4+CD25+ Treg 的免疫抑制作用 , 此效应与 Foxp3 基因表达的上调有关。动物模型研究显示 :BALB/c 小鼠炎性牙周骨破坏区存在 DDOCs 的表达 , 但是数量较少 ; 而 CD25 基因敲除不影响 DDOCs 表达的部位和数量。进一步细胞共培养显示 :CD4+CD25+Treg 能够抑制 CD4+T 细胞对 DDOCs 形成的促进作用 , 并且这种抑制作用与 IL-10、TGF-β 以及 RANKL 通路无关 , 而更可能是由 CTLA-4所介导的。本研究结果表明 :CD4+CD25+Treg 免疫抑制功能的改变可能与严重的牙周组织破坏相关 ;CD25 缺失并不会直接影响 DDOCs 的生成 , 但是 CD4+CD25+Treg 可以通过 CTLA-4依赖的方式抑制炎症状态下 DDOCs 的产生。这从一个方面揭示了 DDOCs 转化的调控机制 , 为进一步研究 Treg 和 DCs 在牙周炎性破坏中的作用奠定了一定的实验基础。关键词 : 树突状细胞 ; 调节性 T 细胞 ; 破骨细胞 ; 牙周炎 ;CTLA-4学科代码 :H1405发表论著 :[1] 赵川江 , 徐琛蓉 , 周玉竹 , 苏小鹏 . 侵袭性牙周炎患者外周血 CD-4+CD-25+ 调节性 T细胞的检测及功能分析 . 中华口腔医学杂志 . 2009; 44(7): 413-415.[2] 赵川江 , 徐琛蓉 , 俞少杰 , 章锦才 . 牙龈卟啉单胞菌脂多糖对 CD4~+CD25~+ 调节性 T细胞免疫抑制功能的影响 . 中国微生态学杂志 . 2009; 2: 149-151.[3] 徐琛蓉 , 赵川江 , 江丽 . 慢性牙周炎病人外周血 CD4~+CD25~+ 调节性 T 细胞的检测和免疫抑制功能分析 . 牙体牙髓牙周病学杂志 . 2009; 19(09): 493-496.[ 4 ] 赵川江 , 金钊 , 左渝陵 . 健脾护齿方对伴放线放线杆菌超声提取物作用下CD4~+CD25~+ 调节性 T 细胞免疫抑制功能的影响 . 四川中医 . 2010; 28(05): 13-15.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0- 322 -

培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2乳牙牙髓干细胞介导牙本质再生的研究批准号 :30801297项目负责人 : 郑颖所在单位 : 首都医科大学牙髓的保存对于维持牙齿机能的完整性具有十分重要的意义。临床上深龋和可复性牙髓炎治疗中出现意外露髓直径大于 1mm 时 , 只能去除暴露的牙髓 , 降低了牙齿的抗力性。由于乳牙牙髓干细胞组织来源充分 , 性能优良 , 是良好的种子细胞。本课题组完成了对小型猪乳牙牙髓干细胞的分离和鉴定工作 , 并将其与生物成骨材料 β -TCP 复合 , 进行牙本质缺损的再生修复 , 为其过渡到临床应用搭建桥梁。本研究包括克隆形成率 , 鉴定细胞分子表面标记如 Stro-1, Vimentin, 绿色荧光蛋白体外示踪。体内研究应用 CT 扫描及组织学方法定量分析乳牙牙髓干细胞与生物材料复合修复牙髓 - 牙本质复合体的能力。本项目研究获得良好的种子细胞及再生牙本质 , 并为下一步的活髓保存治疗研究奠定了基础。关键词 : 乳牙牙髓干细胞 ; 牙本质再生 ; 牙髓保存治疗学科代码 :H1404发表论著 :[1] 郑颖 , 王晓颖 , 张春梅 . 小型猪乳牙牙髓干细胞体外分离培养及鉴定 . 北京口腔医学 ,201018(03):125-128.[2] Zheng Y, Liu Y, Zhang CM, Zhang HY, Li WH, Shi S, Le AD, Wang S. L.Stem Cells fromDeciduous ToothRepair Mandibular Defect in Swine. Journal of Dental Research,2009;88(3):249-254.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1获奖 :专利 :1 项CyPA 和 EMMPRIN 配体 - 受体结合效应在牙周炎发生发展中的机制研究批准号 :30801298项目负责人 : 曹正国所在单位 : 武汉大学许多研究表明环孢素 A 结合蛋白 A(CypA) 和其受体 EMMPRIN 的配体 - 受体结合效应可以有效促进炎性细胞趋化至炎性区 , 有效降低炎症的严重性 ; 另外一方面 , 激活- 323 -

EMMPRIN 的下游信号通路 , 即诱导成纤维细胞合成分泌基质金属蛋白酶 MMPs 的上调。我们课题小组前期研究已证实牙周炎患者的牙周组织破坏区存在 CypA 和 EMMPRIN 的表达 ; 牙周炎组织降解过程中很可能存在 EMMPRIN/MMPs。在炎性状态 ,EMMPRIN 的表达范围和表达强度均显著增加。不仅在上皮全层呈强表达 , 而且在成纤维细胞 , 血管内皮细胞和渗出的炎性细胞中呈强弱不等的表达。而且其表达与 MMPs 呈正相关 , 与牙周炎症程度成正比。为此本课题为证实我们首次提出的假设 , 在牙周炎病理过程中 ,CypA 的表达 , 其一方面诱导炎性细胞趋化到炎症区 , 分泌产生炎性细胞因子 ; 另一方面 , 正是 CypA 和 EMMPRIN 的配体 -受体结合效应参与牙周炎的发生发展。关键词 : 环孢素 A 结合蛋白 A; 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子 ; 牙周炎 ; 基质金属蛋白酶 ; 炎性细胞学科代码 :H1405发表论著 :[1]Cao Z, Xiang J, Li C. Expression of extracellular matrix metalloproteinaseinducer and enhancement of the production of matrix metalloproteinase-1 intongue squamous cell carcinoma. Int J Oral Maxillofac Surg. 2009 ;38(8):880-5.[2]Liu L, Li C, Cai C, Xiang J, Cao Z. Cyclophilin A (CypA) is associated withthe inflammatory infiltrates and alveolar bone destruction of an experimentalperiodontitis. Biochem Biophys Res Commun. 2010;391(1):1000-6.[3]Cao Z, Li C, Zhu G. Inhibitory effects of baicalin on IL-1β- induced MMP-1/TIMP-1and its stimulated effect on collagen-I production in human periodontal ligamentcells. Eur J Pharmacol. 2010;641(1):1-6.[4]Cao Z, Li C, Xiang J. Effect of matrix metalloproteinase-1 promoter genotypeon interleukin-1beta-induced matrix metalloproteinase-1 production in humanperiodontal ligament cells. J Periodontal Res. 2010;45(1):109-15.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 0基于有限元的记忆合金牵张器优化及个体化下颌骨牵张实验研究批准号 :30801299项目负责人 : 李岩峰所在单位 : 中国人民解放军总医院各种原因造成的下颌骨体缺损和牙槽嵴过低在临床较为多见 , 是学者关注的难题。牵张成骨是目前较为先进的修复方法 , 但存在牵张器偏大 , 价格昂贵 , 术区易感染 , 加力不能持续 , 牵张方向易偏差等问题需要解决。近年国内外一些学者利用钛镍记忆合金超弹性的优点制作了完全埋置、自动加力的牵张器进行牵张成骨取得较大进展。我们的前期工作发现不同形状的记忆合金牵引器释放相对恒定的弹力时存在差异 , 且对牵引骨量缺乏可预见的定量研究。本研究将在前期工作基础上 , 运用有限元法优化钛镍记忆合金牵张器的设计 , 使之力量相对恒定且持久 ; 基于实验犬和新鲜尸骨的 CT 影像资料 , 获取个体化各项异- 324 -

性下颌骨的材料参数 , 运用力学分析中可以在体无创评估各向异性下颌骨生物力学状况的有限元法 , 探讨了记忆合金牵张器牵张成骨 ( 下颌骨延长和增高 ) 过程的力学特征和规律。为量化和术前预测应用记忆合金牵张器的牵张成骨提供数值参考 , 为临床应用提供理论依据。关键词 : 记忆合金 ; 牵张器 ; 牵引成骨 ; 有限元 ; 下颌骨学科代码 :H1402发表论著 :[1] 李岩峰 , 胡敏 , 吴子恒 , 林峰 . 不完全截骨牵张成骨重建犬下颌骨节段缺失的有限元模型建立 . 华西口腔医学杂志 , 2009;02:135-138.[2] 李岩峰 , 胡敏 , 张建强 , 孙鹏 , 范丽娜 . 犬下颌骨单侧不全截骨牵张时牵张侧位移状况有限元分析口腔医学 2011;01:9-11.[3] 李岩峰 , 胡敏 , 张建强 , 刘斌 , 范丽娜 . 犬下颌单侧不全截骨牵张时两侧位移有限元对比研究 . 临床口腔医学杂志 , 2010;10:604-606.[4] 李岩峰 , 曾祥龙 , 张建强 , 胡敏 . 受单一垂直力的多曲方丝弓有限元应力分析 . 中国医学物理学杂志 ,2010;05 期 :2157-2160.[5] 李岩峰 , 曾祥龙 , 张建强 , 刘斌 , 胡敏 . 犬下颌单侧不全截骨牵张成骨有限元模型建立与分析 . 中国医学物理学杂志 ,2010;04 期 :2063-2065.[6] Chen KF, Li YF.On the Integration Schemes of Retrieving Impulse Response Functions fromTransfer Functions.Mathematical Problems in Engineering, 2010;(12):1-9.[7] 刘雪梅 , 李岩峰 , 胡敏 , 张建强 , 刘斌 , 范丽娜 . 有限元法探讨犬下颌单侧不全截骨牵张时非牵张侧位移趋势 . 华西口腔医学杂志 , 2011;02:220-222.[8] 王心玲 , 范丽娜 , 李岩峰 . 犬下颌骨非牵张侧移动状况的有限元分析 . 中国医学物理学杂志 ,2011;03:2686-2688.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2光学导航定位多自由度机器人辅助颅颌面骨畸形整复的开发应用研究批准号 :30801302项目负责人 : 张诗雷所在单位 : 上海交通大学目前整个外科领域对医用机器人的主要研究及其应用尚处于起步阶段并仅限于少数科学发达国家 , 涉及的学科领域也比较局限。国际上还未见有基于光学导航定位机器人辅助颅颌面骨畸形整复手术研究成果的系统文献报道 , 在国内该项领先技术几乎没有应用。本研究小组在已经自主建立的三维导航辅助正颌外科手术技术路线和对 MOTOMAN 机器人离线编程、工程应用的工作基础上 , 将首次创建并系统研究基于光学导航定位多自由度机器人辅助颅颌面骨畸形整复手术的技术方法。旨在显著提高手术疗效、扩大适应症、减少并发症、使颅颌面整复手术更趋于精确和微创。研发出的机器人样机通过临床实践后有望进入- 325 -

产业化进程 , 基于此技术 , 将产生全新安全的手术类型及一系列高难度手术的普及应用 ,为医用机器人的发展和应用奠定有效的基础 , 以期填补国内口腔颌面外科医用机器人辅助手术研究的空白 , 具有极高的社会经济价值和深远的临床应用意义。关键词 : 光学导航 ; 多自由度机器人 ; 颅颌面骨畸形 ; 整复 ; 虚拟现实学科代码 :H1402发表论著 :[1] 张诗雷 ; 林艳萍 , 沈国芳 , 徐兵 , 王旭东 , 王成焘 . 高精度光学导航辅助颅颌面骨畸形整复的技术方法建立与应用 . 中国口腔颌面外科杂志 , 2010, 8(1):10-15.[2] 桂海军 ; 张诗雷 , 沈国芳 , 栾楠 , 林艳萍 , 徐兵 . 光学导航定位多自由度机械臂辅助颅颌面骨畸形整复技术方法的建立及初步应用 . 中国口腔颌面外科杂志 , 2011, 9(3):178-182.[3] 辛鹏飞 , 桂海军 , 陈之彪 , 张诗雷 , 徐兵 , 沈国芳 .3dMD 摄影测量系统辅助颅颌面软组织畸形整复的初步报道 . 中国口腔颌面外科杂志 , 2011, 9(4):307-311.[4] 林艳萍 , 陈晓军 , 张诗雷 , 沈国芳 , 王成焘 . 手术模拟及实时导航技术在颌面部陈旧性骨折修复中的应用 . 上海交通大学学报 ( 医学版 ), 2010, 30(1):112-115.[5] 张晓明 ; 栾楠 ; 桂海军 . 手术机器人及操纵杆控制装置的设计与实现 . 机械与电子 , 2011,(5): 62-66.[6] 徐俊虎 ; 栾楠 ; 张诗雷 ; 张晓明 .7 自由度机械臂的运动学逆解与优化 . 机电一体化 , 2011,(6): 28-33.[7] Zhang S, Gui H, Lin Y, Shen G, Xu B.Navigation-guided correction of midfacialposttraumatic deformities (Shanghai experience with 40 cases).J Oral Maxillofac Surg. 2011Jul 30. [Epub ahead of print]会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 4 硕士 5获奖 :专利 :4 项。MAPK 信号转导通路在胶质细胞参与口颌面疼痛调控中的作用批准号 :30801303项目负责人 : 刘晓东所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学疼痛研究集中于神经元网络上 , 现在研究发现胶质细胞在慢性疼痛中的作用至关重要。MAPK 是胶质细胞激活的关键分子。颞下颌关节病是最常见的口颌面部慢性疼痛 , 胶质细胞是否参与了 TMD 疼痛的中枢调控呢 ? 在 " 咬合创伤 -TMD" 动物模型上 , 我们发现咀嚼肌疼痛和初级中枢小胶质细胞标记物升高。采用神经形态学和 Western 发现初级中枢中磷酸化 MAPK(p-p38MAPK 和 pERK) 表达增高 , 而且 p-p38 和 pERK 均出现于小胶质细胞。动物行为学研究显示 : 咬合创伤可以导致咀嚼肌的痛觉敏感 , 分别抑制胶质细胞 , 小胶质细胞 ,两种 MAPK 信号分子 , 动物咀嚼肌的疼痛受到缓解。我们的研究表明 , 小胶质细胞在咬合创伤导致口颌面部疼痛中有重要作用 ,p38 和 ERK 是小胶质细胞激活的关键分子。本研究可以- 326 -

进一步阐明口颌面疼痛中枢机制 , 同时为临床上有效预防和治疗提供实验基础。关键词 : 口颌面痛 ; 胶质细胞 ;MAPK;学科代码 :H1407发表论著 :[1]Liu XD, Wang JJ, Sun L, Chen LW, Rao ZR, Duan L, Cao R, Wang MQ. Involvementof medullary dorsal horn glial cell activation in mediation of massetermechanical allodynia induced by experimental tooth movement. Arch Oral Biol.2009 ;54(12):1143-50.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0成脂 - 成骨前体细胞成骨与成脂分化调控机制研究批准号 :30801304项目负责人 : 林云锋所在单位 : 四川大学本课题组前期研究从脂肪基质细胞中发现了新的细胞亚群 , 它同时表达成骨及成脂两种分化方向的特异性蛋白和基因 , 并命名为成骨 - 成脂前体细胞 (OAPs)。本课题拟通过基因芯片的方法 , 比较 APs 在成骨及成脂分化过程中发生变化的基因 ; 结合 Realtime PCR的方法从中筛选重要的目的基因 , 分析在 OAPs 在成骨和成脂分化过程中相关基因的定量表达变化和相互关系。在此基础上 , 选择关键的基因 , 采用 RNA 干扰技术 , 研究这些基因下调对 OAPs 成骨和成脂分化的影响。结合基因芯片、Realtime PCR 及 RNAi 研究结果 ,分析成骨和成脂分化相关性的分子调控机制 , 为 OAPs 分化机制的进一步研究提供必要的科学依据。关键词 : 成骨 - 成脂前体细胞 ; 成脂分化 ; 成骨分化 ; 分化机制学科代码 :H1402发表论著 :[1] J Chen, J Wang, N Ye, Z Luo, W Lai, X Cai, Y Lin. Absorption, Pharmacokinetics andDisposition Properties of Solid Lipid Nanoparticles (SLNs). Curr Drug Metab.2012;13(4):447-456.[2] Jian F, Zhang Y, Wang J, Ba K, Mao R, Lai W, Lin Y. Toxicity of biodegradable nanoscalepreparations. Curr Drug Metab. 2012;13(4):440-6.[3] Wang Y, Gou M, Gong C, Wang C, Qian Z, Lin YF, Luo F. Pharmacokinetics and Dispositionof Nanomedicine Using Biodegradable PEG/PCL Polymers as Drug Carriers. Curr DrugMetab. 2012;13(4): 338-53.[4] Yang X, Cai X, Wang J, Tang H, Yuan Q, Gong P, Lin Y. Mechanical stretch inhibits- 327 -

adipogenesis and stimulates osteogenesis of adipose stem cells. Cell Prolif. 2012;45(2):158-66.[5] Cai X, Gong P, Huang Y, Lin Y. Notch signalling pathway in tooth development and adultdental cells. Cell Prolif. 2011;44(6):495-507.[6] Cai X, Lin Y, Hauschka PV, Grottkau BE. Adipose stem cells originate from perivascularcells. Biol Cell. 2011;103(9):435-47.[7] Cai X, Zhang Y, Yang X, Grottkau BE, Lin Y. Uniaxial cyclic tensile stretch inhibitsosteogenic and odontogenic differentiation of human dental pulp stem cells. J Tissue EngRegen Med. 2011;5(5):347-53.[8] Jing W, Xiao J, Xiong Z, Yang X, Huang Y, Zhou M, Chen S, Lin Y, Tian W. Explant culture:an efficient method to isolate adipose-derived stromal cells for tissue engineering. ArtifOrgans. 2011;35(2):105-12.[9] Huang Y, Yang X, Wu Y, Jing W, Cai X, Tang W, Liu L, Liu Y, Grottkau BE, Lin Y.gamma-secretase inhibitor induces adipogenesis of adipose-derived stem cells by regulationof Notch and PPAR-gamma. Cell Prolif. 2010;43(2):147-56.[10] Jing W, Xiong Z, Cai X, Huang Y, Li X, Yang X, Liu L, Tang W, Lin Y, Tian W. Effects ofgamma-secretase inhibition on the proliferation and vitamin D(3) induced osteogenesis inadipose derived stem cells. Biochem Biophys Res Commun. 2010;12;392(3):442-7.[11] Wu L, Cai X, Dong H, Jing W, Huang Y, Yang X, Wu Y, Lin Y. Serum regulates adipogenesisof mesenchymal stem cells via MEK/ERK-dependent PPARgamma expression andphosphorylation. J Cell Mol Med. 2010;14(4):922-32.[12] Grottkau BE, Purudappa PP, Lin YF. Multilineage differentiation of dental pulp stem cellsfrom green fluorescent protein transgenic mice. Int J Oral Sci. 2010;2(1):21-7.[13] Yang X, Gong P, Lin Y, Zhang L, Li X, Yuan Q, Tan Z, Wang Y, Man Y, Tang H.Cyclictensile stretch modulates osteogenic differentiation of adipose-derived stem cells via theBMP-2 pathway. Arch Med Sci. 2010;30;6(2):152-9.[14] Cai X, Lin Y, Friedrich CC, Neville C, Pomerantseva I, Sundback CA, Zhang Z, Vacanti JP,Hauschka PV, Grottkau BE. Bone marrow derived pluripotent cells are pericytes whichcontribute to vascularization. Stem Cell Rev. 2009;5(4):437-45.[15] Grottkau BE, Chen XR, Friedrich CC, Yang XM, Jing W, Wu Y, Cai XX, Liu YR, Huang YD,Lin YF. DAPT enhances the apoptosis of human tongue carcinoma cells. Int J Oral Sci.2009;1(2):81-9.会议报告 : 国际大会 4 分组 0 国内大会 3 分组 0培养人才 : 博士后 2 博士 3 硕士 4牙齿功能性长轴方向加载下个性化应力分析的研究批准号 :30801307项目负责人 : 李鸿波所在单位 : 中国人民解放军总医院深入研究传统口腔生物力学理论 , 进行定量、功能化和个性化的分析是口腔医学发展- 328 -

的重要方向。本研究提出牙齿功能性长轴的概念 , 根据确定重心 → 最小二乘确定中心轴线的方法可以在三维立体图像中的确定牙齿的功能长轴。在应力分析中 , 与经验方向加载相比 , 以牙齿功能性长轴方向加载在同等载荷下应力分布更为均匀 , 采用该轴可以规范应力分析的加载方向。定量研究牙周支持水平 , 分析了牙周膜支持面积与冠根比、牙槽骨吸收程度之间的定量对应关系 , 结果表明各牙位冠根比与牙周膜面积之间高度相关 ; 各牙位冠根比、牙槽骨吸收程度、牙周膜面积与牙根组织最大应力值之间呈明显相关。采用种植体修复单个磨牙缺失 , 如果缺牙间隙近远中距离超过 1.6cm 时 , 采用 1 颗种植体修复将导致种植体周围应力集中明显增加 , 应考虑采用两颗较小的种植体修复。将 CT 扫描重建的牙根形态与硅橡胶印模得到的牙列或牙冠形态整合的方法 , 可以建立精度高的个性化三维有限元分析模型。本研究结果丰富了传统的生物力学理论、并定量描述这些理论 ; 建立规范统一、个性化的应力分析方法必将有助于提高修复体的设计 , 具有较高的临床应用价值。关键词 : 牙齿长轴 ; 有限元法 ; 冠根比 ; 牙周膜面积 ; 牙颌模型学科代码 :H1409发表论著 :[1] 孙力 , 李鸿波 , 储冰峰 . 三种印模材料制取模型的三维精度比较 . 南方医科大学学报 .2010; 30:257-9.[2] 孙力 , 郭亚娟 , 赵妍 , 李鸿波 , 储冰峰 . 根据 CT 扫描数据及印模三维重建牙列数字模型精度的初步研究 . 口腔颌面修复学杂志 . 2011; 12(1):6-9.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 1获奖 :[1] 储冰峰 , 刘洪臣 , 温宁 , 李鸿波 . 老年口腔龋病微创治疗的基础研究及临床应用 . 军队医疗成果奖 ( 二等奖 , 第四完成人 , 奖励时间 : 2010)靶向牙龈卟啉菌 RgpA 基因防治种植体周围炎批准号 :30801308项目负责人 : 蓝菁所在单位 : 山东大学牙龈蛋白酶 (Rgp、Kgp) 是牙龈卟啉单胞菌 (P.gingivalis) 的重要致病因子 , 本实验旨在应用其编码基因 rgpA、kgp 构建基因疫苗 , 验证其在防治牙龈卟啉单胞菌诱导的种植体周围炎中的作用。实验共用 Beagle 犬 12 只 , 于下颌骨双侧第二、三前磨牙拔牙窝内即刻种植4 颗种植体。以成功构建的 pVAX1-rgpA、pVAX1-kgp 及前期构建的 pVAX1-fimA 注射作为实验组 (A、B、C 组 ), 以空白 pVAX1 注射作为对照组 (D 组 )。后以绑线法构建种植体周围炎 ,采用自身对照 , 一侧绑线 , 另一侧不绑线。定期采集动物血液、唾液 , 并进行种植体周探诊 ,X 线观察记录。实验结束后 , 截取种植体周组织制作切片 , 光镜下观察骨丧失程度。Elisa 法测定血液和唾液中的 IgG、IgA 免疫球蛋白 , 验证实验组动物免疫球蛋白在重复免疫后明显提高 , 这三组均较 D 组有显著差异 (P

程度明显低于 D 组 (P0.05)。结果验证了新构建质粒在防治种植体周围炎中有一定效果。关键词 :rgpA;kgp; 种植体周围炎 ;DNA 疫苗 ; 牙龈卟啉单胞菌。学科代码 :H1409发表论著 :[1]Yin K, Wang Z, Fan X, Bian Y, Guo J, Lan J. The experimental research ontwo-generation BLB dental implants - Part I: surface modificationand osseointegration. Clin Oral Implants Res. 2011 May 12. doi:10.1111/j.1600-0501.2011.02209.x.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 9新型功能单体 - 膨胀单体的合成及其改性口腔粘接材料的基础研究批准号 :30801309项目负责人 : 孙翔所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学以双酚 A 双甲基丙烯酸缩水甘油酯 (Bis-GMA) 为代表的甲基丙烯酸酯类树脂在牙科复合树脂中应用相当广泛 , 但聚合过程中普遍存在的体积收缩及应力导致了一系列临床问题 , 成为口腔高分子材料领域亟待解决的问题之一。本研究利用膨胀单体 DB-TOSU 开环膨胀聚合特性 , 将其与环氧树脂单体 ECHM-ECHC 共同添加到 Bis-GMA 复合树脂中赋予树脂材料低收缩的特性。结果发现 : 添加 (DB-TOSU+ECHM-ECHC) 可以降低复合树脂的聚合体积收缩率和收缩应力 ; 添加适量的 (DB-TOSU+ECHM-ECHC) 不会影响复合树脂的机械强度、吸水性和溶解性、热稳定性能以及粘结性能 ; 改性后的复合树脂能够提高预防微渗漏的效果 , 有利于粘结界面的长期稳定性。该改性复合树脂为预防牙科粘接界面微渗漏的产生、提高粘接耐久性提供了有效途径 , 具有良好的临床应用前景。关键词 : 膨胀单体 ; 环氧树脂 ; 聚合收缩 ; 微渗漏学科代码 :H1409发表论著 :[1]Sun Z, Shen L, Sun X, Tong G, Sun D, Han T, Yang G, Zhang J, Cao F, Yao L, WangH. Variation of NDRG2 and c-Myc expression in rat heart during the acute stageof ischemia/reperfusion injury. Histochem Cell Biol. 2011;135(1):27-35.[2]Sun X, Li YC, Xiong J, Hu XY. Shrinkage properties of a modified dental resincomposites containing a novel spiro-orthocarbonate expanding monomer.Materials Letters. 2011; 65:3586-3589.[3]Li YC, Sun X, Chen JH, Xiong J. Polymerization shrinkage/stress and dentin bond- 330 -

strength of silorane and dimethacrylate-based dental composites. J ApplPolymer Sci. 2011; 124(1):436-443.[4]Xiong J, Sun X, Li YC, Chen JH. Polymerization shrinkage, stress, and degreeof conversion in silorane- and dimethacrylate-based dental composites. J ApplPolymer Sci. 2011; 122: 1882-1888.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 0功能加载对即刻种植体周围骨改建的影响及其分子机制初探批准号 :30801310项目负责人 : 班宇所在单位 : 四川大学本课题研究功能加载产生的应力对即刻植入种植体周围骨组织改建的影响及初步探索研究其分子机制。建立成骨细胞体外三维培养体系以及适宜生理力学加载模型 ; 建立即刻种植即刻负荷的动物模型 , 通过渐进性垂直加载实现对种植体的适宜负荷。对获得的组织样本进行 :1 种植体周围骨组织进行形态学分析 (MicroCT 和硬组织切片 );2 体外三维培养体系下成骨细胞功能变化 ;3 从核酸和蛋白水平进行定性和定位分析 ( 免疫组化和原位杂交 ) 和定量分析 (Realtime-PCR 和 ELISA/WB) 和骨组织改建相关的因子 (Wnt-1,Wnt-4、Wnt-9a、Wnt-10b、β -catenin、LRP5、FZ、Runx2、ALP、OCN 和 Collagen I)。力图揭示 :1 渐进性功能加载作用下即刻植入种植体周围骨组织改建特点 ;2 成骨细胞应力作用下的改变和意义 ;3 Wnt/β -catenin 信号通路在即刻种植即刻负荷的种植体周围骨改建中的分子机制。关键词 : 即刻种植 ; 成骨细胞 ; 功能改建 ; 三维培养 ; 机制学科代码 :H1402发表论著 :[1] Ban Y, Wu YY, Yu T, Geng N, Wang YY, Liu XG, Gong P. Response of osteoblasts to lowfluid shear stress is time dependent. Tissue Cell. 2011;43(5):311-7.[2] Wu YY, Ban Y, Geng N, Wang YY, Liu XB, Y, T, Gong P. Evaluation of different culturetechniques of osteoblasts on 3D scaffolds Central European Journal of Biology.2010;5(4):456-465.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 6咬合支持丧失对认知功能损害发生发展的影响及干预研究- 331 -

批准号 :30801311项目负责人 : 江青松所在单位 : 首都医科大学通过本项目研究进一步证实了咬合支持丧失对认知功能的影响。其可能的作用机制之一是 : 磨牙缺失导致小鼠咀嚼功能下降 , 从而使咀嚼活动通过三叉神经上传到三叉神经脊束核的活动减少 , 三叉神经脊束核通过脑干网状结构投射到皮层的活动性刺激减低 , 最终导致皮层、海马、三叉神经脊束核和杏仁核后皮层区域 BDNF 活性依赖性表达下降 , 其受体TrkB 在皮层中的表达也活性依赖性降低 , 从而导致 BDNF-TrkB 共同维持的神经元兴奋性活动与抑制性活动失衡 , 引起下游通路一系列反应 , 从而最终引起学习记忆能力下降。咬合支持丧失可能加速老年人神经退行性疾患的发生发展 , 同时先天性牙齿缺失等疾病对儿童认知等脑功能发育的影响需要引起更多的重视。关键词 : 磨牙缺失 ; 学习记忆 ; 脑源性神经营养因子 ; 认知功能 ; 小鼠学科代码 :H1407发表论著 :[1]Jiang QS, Liang ZL, Wu MJ, Feng L, Liu LL, Zhang JJ.Reduced brain-derivedneurotrophic factor expression in cortex and hippocampus involved in thelearning and memory deficit in molarless SAMP8 mice. Chin Med J (Engl).2011;124(10):1540-4.[2]Jiang Q, Bai T, Shen S, Li L, Ding H, Wang P. Increase of cytosolic calciuminduced by trichosanthin suppresses cAMP/PKC levels through the inhibition ofadenylyl cyclase activity in HeLa cells. Mol Biol Rep. 2011;38(4):2863-8.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2巨噬细胞对不同骨内植入材料的应答及其对骨髓间充质干细胞行为的影响批准号 :30801312项目负责人 : 李智勇所在单位 : 武汉大学为观察巨噬细胞对不同材料的反应差异 , 分别在不同材料表面培养 RAW264.7 巨噬细胞 , 观察细胞的形态变化和增殖情况 ; 检测细胞表达的 TNF-α 、MCP-1、MIP-2、TGF-β 等活性物质的水平。用全骨髓贴壁分离法提取小鼠的骨髓基质细胞 , 与 RAW264.7 巨噬细胞共培养后观察 ALP 活性、I 型胶原的表达和钙化结节的变化情况。将带有环形凹槽的纯钛种植体和聚甲基丙烯酸甲酯种植体分别植入 SD 大鼠的股骨远端髁突内 , 观察种植体 - 骨间隙愈合界面的多核巨细胞分布以及骨桥蛋白和骨涎蛋白表达。结果发现不同材料表面影响RAW264.7 巨噬细胞的增殖活性 , 而且影响 TNF-α 、MCP-1、MIP-2、TGF-β 等基因的表达。不同材料表面骨髓基质细胞与 RAW264.7 巨噬细胞共培养后影响骨髓基质细胞的 ALP 活性、I- 332 -

型胶原的表达和钙化结节数量。种植体 - 骨间隙愈合界面的多核巨细胞分布以及骨桥蛋白和骨涎蛋白的表达受不同种植材料和植入时间的影响。这些结果表明巨噬细胞的活性会受到材料种类的影响 , 且可能影响骨髓基质细胞的分化方向。不同骨内种植材料会影响种植体 -骨界面多核巨细胞的分布和转归。关键词 : 巨噬细胞 ; 骨内种植体 ; 钛 ; 骨髓间充值细胞学科代码 :H1409发表论著 :[1]Gao SH, Duan HY, Li ZY. Influence of abutment material on the stress ofimplant-supported all-ceramic single crown. J of Wuhan University ofTechnology-Mater.Sci.Ed. 2012; 27(1):20-25.[2] 李智勇 , 夏海斌 , 徐晓乾 , 施斌 . 不同骨内植入材料对巨噬细胞活性的影响 . 口腔医学研究 .2011; 27(11): 986-989.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3正畸保持期龈沟液骨保护素与核因子 kappa B 受体活化因子配体水平对牙齿稳定的意义批准号 :30801313项目负责人 : 刘妍所在单位 : 北京大学本项目探讨正畸时牙周齦沟液骨保护素 (OPG) 和核因子 Kappa B 受体活化因子配体(RANKL) 的变化与牙周组织改建状态稳定与否的关系 , 并对正畸保持期采用 OPG 转染手段抑制牙齿复发移动以及牙根吸收后的修复进行深入研究。本研究第一部分探讨龈沟液中OPG/RANKL 水平的改变及相应牙周组织内 OPG/RANKL 表达的变化 , 证实齦沟液中 sRANKL/OPG的比值和牙周组织 RANKL/OPG 的比值变化近似。说明齦沟液中 sRANKL/OPG 的比值可以在一定程度上反映牙周组织中骨改建。研究二观察 OPG 转染干预对保持期牙齿稳定性的影响。在保持期局部进行 OPG 转染 , 采用三维激光扫描测量牙齿回复移动的三维位移量 ; 同时检测相应时间点牙周组织内 OPG/RANKL mRNA 表达的变化 , 证实 OPG 局部转染可以促进保持期牙齿位置的稳定。研究三观察 OPG 转染干预对保持期已经发生的牙根吸收的修复促进作用。在保持期局部转染 OPG, 采用 Micro CT 扫描发现牙根吸收体积明显少于对照组 , 免疫组化结果也支持转染组牙根周围 OPG 表达明显强于对照组 , 说明保持期 OPG 转染有助于牙根吸收的修复。该研究内容在国内外均属首次。关键词 : 骨保护素 ; 核因子 Kappa B 受体活化因子配体 ; 牙根吸收 ; 保持 ; 齦沟液学科代码 :H1402发表论著 :- 333 -

[1] Zhao N, Lin J, Kanzaki H, Ni J, Chen Z, Liang W, Liu Y. Local osteoprotegerin gene transferinhibits relapse of orthodontic tooth movement. Am J Orthod Dentofacial Orthop.2012;141(1):30-40.[2] 赵宁宁 ; 林久祥 ; 陈智滨 ; 刘妍 . 正畸保持期齦沟液骨保护素 / 核因子 Kappa B 受体活化因子配体水平对牙槽骨改建状态的意义 . 北京大学学报医学版 , 2012;44(1):78-82.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 0颈椎骨龄系列图像量化分期法及其对上下颌骨生长预测的研究批准号 :30801314项目负责人 : 陈莉莉所在单位 : 华中科技大学以颈椎骨龄判断青少年正畸患者生长发育的状况 , 是正畸学关注的热点 , 鉴于颈椎骨规则的形状易于定点和测量 , 且随年龄增长呈规律性改变 , 从而使建立精确而量化的颈椎骨龄评价标准具有可能。本研究运用国内唯一的正常牙合青少年 8-18 岁纵向资料 , 在手腕骨龄和颈椎骨龄高度相关性的基础上 , 以 Fishman 手腕骨龄分期法为金标准 , 首次利用高精度的计算机几何分析 , 半自动定点、测量并计算参数、建立相关性模型、优化搜索选择最佳分期参数 , 探索颈椎系列图像精确的增龄变化 , 建立颈椎骨龄序列图像量化分期法 ,国内外未见相似报告。进而对 8-18 岁纵向群体按颈椎骨龄进行分期 , 探讨上下颌骨生长发育的变化规律 , 采用时间序列分析的方法 , 首次建立以颈椎骨龄量化分期为参考的、能体现上下颌骨生长发育规律的多元自回归滑动平均模型 , 预测上下颌骨的生长能力或潜力 ,为正确的正畸诊断及设计提供科学依据 , 减少直观判断颈椎骨龄的主观性 , 并避免加拍手腕骨 X 线片。关键词 : 颈椎骨龄 ; 手腕骨龄 ; 相对生长速率 ; 组合参数 ; 回归方程学科代码 :H1402发表论著 :[1] Chen L, Liu J, Xu T, Long X, Lin J. Quantitative skeletal evaluation based on cervicalvertebral maturation: a longitudinal study of adolescents with normal occlusion. Int JOral Maxillofac Surg. 2010;39(7):653-9.[2] Chen L, Liu J, Xu T, Lin J. Longitudinal study of relative growth rates of the maxilla and themandible according to quantitative cervical vertebral maturation. Am J Orthod DentofacialOrthop. 2010;137(6):736-7.[3] Chen L, Lin J, Xu T, Long X. The longitudinal sagittal growth changes of maxilla andmandible according to quantitative cervical vertebral maturation. J Huazhong Univ SciTechnolog Med Sci. 2009;29(2):251-6.[4] Chen L, Lan Z, Xu X, Lin J, Hu H. Accuracy and repeatability of computer aided cervical- 334 -

vertebra landmarking in cephalogram. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci.2012;32(1):119-23.[5] 蓝智聪 , 陈莉莉 , 许向阳 , 刘加荣 , 郑晓丹 , 章婷 . 计算机辅助颈椎分析系统识别颈椎标志点的准确性和重复性探讨 . 临床口腔医学杂志 . 2010;26(9):526-30.会议报告 : 国际大会 2 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 8诱导型腺相关病毒载体的构建以及在促进下颌骨髁突生长中的应用与机制研究批准号 :30801315项目负责人 : 戴娟所在单位 : 中国人民解放军第四军医大学Ihh 和 VEGF 在下颌骨髁突生长改建中起着重要的作用。本研究利用腺相关病毒 (AAV)载体平台 , 运用分子生物学方法构建携带 Ihh 和 VEGF 基因的 AAV 载体。体外研究证明 :VEGF 的过表达促进了软骨细胞的增殖和分化 , 以 VEGFR2 型受体介导激活了 Cbfa1, OPG 的表达。 IHH 基因的过表达通过其受体 Ptc 和 Smo, 激活了下游通路 PTHrP,Cbfa1, 促进了软骨细胞向肥大软骨细胞的分化。体内研究证明 : 随着年龄的增长 , 大鼠髁突组织中 VEGF的表达逐渐降低 ,Ihh 的表达没有显著改变。组织学和 MicroCT 研究表明 , 随着髁突的生长改建 , 软骨逐渐变薄 , 软骨下骨逐渐增厚 , 其中雌性大鼠的改建更为显著。联合携带 VEGF和 IHH 基因的 AAV 病毒 , 局部感染大鼠髁突组织后 , 促进了下颌髁突的生长改建 , 促软骨细胞分化相关因子 Coll X,PTHrP,Cbfa1 等的高表达。咬合异常诱导的 TMJOA 模型中 ,VEGF和 IHH 相关信号通路表达活跃 , 软骨破坏。该研究证明 AAV 是进行颞下颌关节基因治疗的有效载体 , 调控 VEGF 和 IHH 基因的表达可以促进下颌髁突的改建 , 为深入开展颌骨领域的基因治疗提供试验依据。关键词 :Ihh;VEGF; 腺相关病毒 ; 下颌髁突学科代码 :H1407发表论著 :[1]Jiao K, Dai J, Wang MQ, Niu LN, Yu SB, Liu XD.Age- and sex-related changesof mandibular condylar cartilage and subchondral bone: Ahistomorphometric and micro-CT study in rats. Arch Oral Biol.2010;55(2):155-63.[2]Jiao K, Niu LN, Wang MQ, Dai J, Yu SB, Liu XD, Wang J. Subchondral bone lossfollowing orthodontically induced cartilage degradation in the mandibularcondyles of rats. Bone. 2011;48(2):362-71.[3]Wang QY, Dai J, Kuang B, Zhang J, Yu SB, Duan YZ, Wang MQ. Osteochondral- 335 -

angiogenesis in the rat mandibular condyles with osteoarthritis-likechanges. Arch Oral Biol. 2012 Jan 10.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 1 硕士 1机械应力下 Sonic hedgehog(Shh) 信号通路在 Malassez 上皮剩余细胞(ERM) 表达机制的体内外研究批准号 :30801316项目负责人 : 陈雨雪所在单位 : 四川大学Malassez 上皮剩余细胞 (ERM) 是牙周膜内唯一残存的上皮细胞 , 近年陆续发现其在牙周组织再生、合成和分泌细胞外基质和表面蛋白等方面具有潜在功能。 Sonichedgehog(Shh) 信号通路相关蛋白主要在上皮组织中表达 , 呈高度保守性 , 在牙及牙根发育中发挥了关键性调控作用。本课题设计了系列体内、外实验 , 通过研究机械应力下 ,Shh信号通路相关蛋白在 ERM 内有无表达 ? 其表达的强弱是否影响 ERM 的功能状态 ? 以及 Shh可否通过调控 ERM 的功能而在牙移动中发挥重要作用等 ? 为探讨 ERM 在牙移动、牙周组织再生、维持牙周膜内环境稳定等方面的功能 ; 明确 ERM 发挥这些功能的分子作用机制等进行初步的探索。拟为今后能否运用基因调控手段 , 调节 Shh 信号通路相关蛋白在 ERM 的表达 ,进而影响 ERM 的功能 , 从而控制牙移动、修复吸收的牙骨质、恢复牙周膜内环境稳态、防止复发 , 提供重要的理论依据和探索出一条全新的治疗思路。关键词 :ERM; Shh; 牙移动 ; 机械应力学科代码 :H1408发表论著 :会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 3 硕士 2- 336 -

H14 口腔颅颌面科学地区科学基金项目防御素与口腔念珠菌病相互关系研究批准号 :30860313项目负责人 : 陶人川所在单位 : 广西医科大学本研究针对口腔念珠菌病易感群体 , 包括口腔扁平苔藓、舍格伦综合症患者、2 型糖尿病患者等 , 在临床研究的基础上 , 结合基础研究手段 , 探讨唾液及粘膜组织以 HBD2、HBD-3 及 LL-37 等为主的防御素在蛋白水平及 mRNA 水平表达与临床指标探讨防御素口腔内表达规律 , 包括在健康个体 , 念珠菌易感人群以及慢性牙周炎患者 GCF 等内的表达规律 ,为探讨防御素与念珠菌病 , 牙周炎等口腔慢性感染性疾病的关系得到初步证据。同时结合病原微生物研究探讨病原微生物与宿主的相互关系。另通过体外培养人牙龈上皮细胞 , 抗菌试验、透射电镜观察 HBD3 与 Hst5 对白色念珠菌的抗菌作用及抑制白色念珠菌对口腔上皮细胞的粘附的基础研究 , 进一步为探讨防御素在口腔局部免疫中的作用奠定基础。研究显示 :HBD3、Hst5 对白色念珠菌显示强大抗菌活性 , 可抑制菌体对牙龈上皮的粘附 ; 同时HBD2 及 LL-37 在扁平苔藓、舍格伦综合症的粘膜组织上的蛋白水平及 mRNA 水平表达均高于健康组织 ;2 型糖尿病患者易发生口腔念珠菌感染 , 且唾液 HBD-2,-3 水平上调 ; 而 HBD-2 在慢性牙周炎患者龈沟液中的呈低表达。以上均提示唾液抗菌肽在口腔抗感染免疫防御中起重要作用。关键词 : 抗菌肽 ; 防御素 ; 念珠菌 ; 口腔疾病 ; 口腔粘膜学科代码 :H1406发表论著 :[1] 林小洁 , 陶人川 , 杨亦萍 . 口腔黏膜疾病临床病理诊断统计分析 . 广西医科大学学报 .2009; 26(04): 503-506.[2] 陶人川 . 异基因干细胞移植术后口腔慢性移植物抗宿主病病例报告 . 中华口腔医学杂志 . 2009; 44(10): 639-640.[3] 陶人川 , 陈波 , 李雅灵 , 马飞 . 2 型糖尿病患者罹患口腔假丝酵母菌感染危险因素的Logistic 回归分析 . 华西口腔医学杂志 . 2010; 28(01):40-44.[4] 陶人川 , 邹杰 , 杨亦萍 , 曾启新 . LL37 多肽及其 mRNA 在口腔扁平苔藓病损表达研究 .实用口腔医学杂志 . 2010; 26(01): 60-63.[5] 肖丽婷 , 邹杰 , 陶人川 , 杨亦萍 , 曾启新 . 人类 β 防御素 2 在口腔扁平苔藓病损中表达的研究 . 广西医学 . 2011; 33(5): 516-519.[6] 肖丽婷 , 彭圆媛 , 陶人川 , 赖永榕 . 广西地区异基因造血干细胞移植后患者口腔黏膜健康状况研究 . 口腔医学研究 . 2011; 27(10): 881-885.会议报告 : 国际大会 1 分组 1 国内大会 3 分组 3培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 5- 337 -

慢性牙周炎和冠心病相关性分子机制的研究批准号 :30860314项目负责人 : 钟良军所在单位 : 新疆医科大学流行病学研究显示 : 慢性牙周炎与冠心病的发病相关 , 二者都具有不同程度的遗传性或家族倾向。本研究采用聚合酶链反应 - 限制性片段长度多态性法和实时荧光定量 PCR 法 ,筛选出慢性牙周炎和 / 或冠心病的易感基因 , 在慢性牙周炎合并冠心病患者的龈下菌斑和粥样硬化斑块中检测 Pg、Pi、Fn 和 Tf, 分析易感基因的携带与牙周致病菌感染的关系 , 探讨慢性牙周炎与冠心病的相关性机制。结果表明 IL-1B-31 等位基因 T 可能是慢性牙周炎的易感基因 ,TNFA-863CC 基因型和 C 等位基因以及 CRP+1059/+1044 位点的单倍型 GT 可能是慢性牙周炎合并冠心病的易感基因 ;IL-1B-31 位点等位基因 T 分布与粥样硬化斑块中 Pi 的分布存在相关关系 ; 在龈下菌斑 P.g 占总菌的百分比会随着 PD 的增加而增大 ; 在粥样硬化斑块中 , 当 PD 超过 6mm 时 P.g 占总菌的百分比会随着 PD 的增加而增大 ; 在龈下菌斑中 Tf 和Fn 的检出具有相关性 , 可能 Tf 和 Fn 对慢性牙周炎具有联合致病作用。综上所述 , 本研究结果为慢性牙周炎和冠心病的病因学提供遗传学依据 , 为慢性牙周炎和冠心病的相关性发病机制研究提供实验和理论依据 , 为二者的临床防治提供新的思路和指导。关键词 : 慢性牙周炎 ; 冠心病 ; 易感基因 ; 牙周致病菌 ; 实时荧光定量 PCR学科代码 :H1405发表论著 :[1] 钟良军 , 徐隽 , 张源明 , 倪佳 , 周晓欢 , 史芳川 . 慢性牙周炎和动脉粥样硬化动物模型的建立及研究 . 中华口腔医学杂志 . 2009;44(8):464-468.[2] 张源明 , 倪佳 , 徐隽 , 钟良军 , 杨文圣 , 周晓欢 . 白细胞介素 -6 在大鼠慢性牙周炎合并动脉粥样硬化模型中的表达 . 中华口腔医学研究杂志电子版 . 2009;3(03):12-15.[3] 徐隽 , 钟良军 , 倪佳 , 张源明 , 周晓欢 , 史芳川 , 杨文圣 . 基质金属蛋白酶 -3 在慢性牙周炎和动脉粥样硬化结合模型中的表达及相关性分析 . 口腔医学 . 2009;29(5):225-229.[4] 倪佳 , 张源明 , 徐隽 , 钟良军 , 史芳川 , 周晓欢 . 炎症因子在大鼠慢性牙周炎合并动脉粥样硬化模型中的表达 . 牙体牙髓牙周病学杂志 . 2009;19(03):136-140.[5] 王进涛 , 李刚 , 史芳川 , 钟良军 . 异体脱细胞真皮基质与珊瑚羟基磷灰石联合修复根尖周组织缺损的临床研究 . 牙体牙髓牙周病学杂志 .2010;20(5):297-300.[6] 史芳川 , 钟良军 , 王进涛 , 张源明 , 徐隽 , 倪佳 . 基质金属蛋白酶 -3 在慢性牙周炎孕鼠模型中的表达 . 口腔医学 . 2010;30(02):70-72.[7] 钟良军 , 史芳川 , 张源明 , 徐隽 , 王进涛 , 罗健 . 慢性牙周炎孕鼠致早产及低体重新生鼠的动物模型研究 . 中华口腔医学研究杂志电子版 . 2010;4(04): 35-37.[8] 钟良军 , 张琼 , 张蕾 , 孙大磊 , 张源明 . 白细胞介素 -1 基因型与慢性牙周炎、冠心病相关性研究 . 牙体牙髓牙周病学杂志 . 2010;20(12): 694-697.[9] 孙大磊 , 钟良军 , 刘扬 , 张琼 , 张蕾 , 张源明 . C 反应蛋白基因型与慢性牙周炎和冠心病相关性研究 . 中华实用诊断与治疗 . 2011;25(3): 219-222.[10] 张蕾 , 钟良军 , 张琼 , 孙大磊 , 张源明 . 肿瘤坏死因子 A-863C/A 基因型与慢性牙周- 338 -

炎和冠心病的相关性研究 . 口腔医学 . 2011;31(05):261-264.[11] 刘杨 , 钟良军 , 孙大磊 , 曹卫彬 , 刘景 . 慢性牙周炎致病菌与冠状动脉粥样硬化相关性研究 . 口腔医学 . 2011;31(1):5-8.[12] 刘景 , 钟良军 , 史芳川 , 张蕾 , 张琼 , 孙大磊 . 慢性牙周炎孕鼠胎盘中肿瘤坏死因子的表达 . 中华口腔医学杂志 . 2011;46(5):276-279.会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 2 硕士 18HIV 相关口腔疱疹病毒感染的研究批准号 :30860315项目负责人 : 段开文所在单位 : 昆明市延安医院目的 : 初步弄清 HIV 感染者口腔疱疹病毒 (HHV) 相关损害的发病特征和唾液中 HHV分布。方法 : 采用现况调查和随访前后对照及实时定量 PCR 法 , 分析 HIV 感染者常见口腔HHV 感染损害的发病率、唾液 HHV 感染率及其与 CD4 和 HAART 等的关系。结果 :(1)HIV感染者口腔 HHV 损害发病率为 21.07%, 其中单纯疱疹、带状疱疹、毛状白斑、口腔溃疡和卡波西氏肉瘤分别为 10.79%、0.71%、9.07%、9.27% 和 0.50%。这些损害主要见于 CD4 低于200 个 /mm3 的患者 , 且与 HIV 病毒载量成正相关。HAART 治疗后仅毛状白斑发病率降低 , 同时唾液中 EBV 检出率下降。(3) 患者和对照组唾液中至少一种 HHV DNA 检出的几率分别为96.9% 和 81.2%(P

M3 受体蛋白的表达及其在干燥综合征患者发病机制中的作用批准号 :30860316项目负责人 : 王永福所在单位 : 内蒙古科技大学包头医学院干燥综合征 (SS) 是一种以口干、眼干为主要表现 , 严重时可出现肺间质纤维化、肾小管酸中毒等严重并发症的系统性自身免疫性疾病。有研究报道抗毒蕈碱 3(M3) 受体抗体与干燥综合征有密切的关系 , 该抗体可以阻断正常的乙酰胆碱对 M3 受体的激活作用 , 干扰信号的传导 , 导致唾液、泪液的分泌减少。由于 M3 受体蛋白跨膜七次 , 故难以利用原核或真核系统表达出完整的 M3R 蛋白 , 故本课题后期改用化学合成 M3 受体的胞外第二环来完成实验计划。M3R 受体第二环被认为是 SS患者 IgG 抗体的主要表位。而 IL-17 也在 SS 模型小鼠的泪腺中被检测到 , 提示 IL-17 也参与了 SS 的发生发展。故我们用合成后的胞外第二环免疫了 NOD 小鼠 , 观察小鼠血清中抗M3R 抗体的变化 , 以及细胞因子的变化。同时在体外将 NOD 小鼠脾细胞与第二环多肽共培养 , 观察细胞因子的变化。实验结果显示了在多肽静脉注射小鼠后 , 抗 M3R 抗体早期明显降低 , 后期则明显升高。而血清中 IL-17 的水平则明显下降。在体外实验中 ,IL-17 则维持在一定的水平 , 对照组明显下降。该实验结果说明了 M3R 胞外第二环在干燥综合征的发病过程中起着相当重要的作用。关键词 : 干燥综合征 ; 发病机制 ;M3 受体蛋白 ;M3R 胞外第二环学科代码 :H1405发表论著 :会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 1 分组 1培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 3新疆维吾尔语腭裂患者术后语音障碍矫治模式的研究批准号 :30860317项目负责人 : 阿地力 . 莫明所在单位 : 新疆医科大学腭裂术后语音障碍的治疗是腭裂序列治疗的重要目的之一 , 国内开展的此类研究均以汉语为标准及治疗内容。但是 , 作为全国唇腭裂高发区 , 在使用维吾尔语占多数的新疆 ,目前尚缺乏维吾尔语腭裂语音病理学研究及符合该语言特点的语音矫治模式。为此 , 我们按照黏着性语言特有的语音学理论 , 在维吾尔语语音声学特征参数数据库的基础之上 , 综合现代维吾尔标准语的相关语音语法原则 , 首创建立了符合维吾尔语腭裂术后语音障碍患者语音特点的清晰度词表 , 它为维吾尔语腭裂术后患者进行异常语音的分类、诊断、规范化治疗及疗效评价构建了标准化的模板 , 在此理论基础上 , 初步建立了新疆维吾尔语腭裂- 340 -

患者术后语音障碍矫治模式 , 填补了国内外此项空白。关键词 : 维吾尔语 ; 腭裂 ; 语音清晰度表学科代码 :H1403发表论著 : 无会议报告 : 国际大会 0 分组 0 国内大会 0 分组 0培养人才 : 博士后 0 博士 0 硕士 2- 341 -

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