手把手教你小鼠心肌梗死模型(结扎左前支)的构建

手把手教你小鼠心肌梗死模型(结扎左前支)的构建

一、模型构建方法


1、术前准备:

实验小鼠术前禁食 12 h。将小鼠放进麻醉机的诱导箱,开启氧气调节气流量 (0.25 MPa,1 L/min),调整麻醉药(异氟烷)浓度为 5%,约 1 min 完成小鼠诱导麻醉,之后调整麻醉药浓度至 2%,连接小鼠面罩并持续吸入。


2、手术操作:

小鼠仰卧位固定,左胸前手术区域剔除鼠毛并消毒。距胸骨左缘约1~2mm 皮肤处做长约1.5cm纵向切口,切口处行垂直外翻褥式缝合预留缝线。逐层钝性分离胸壁肌肉,从第3或第4 肋间隙快速进入胸腔,用止血钳撑开肋间隙,配合心脏跳动左手轻轻挤压使心脏从孔隙中弹出。在左心耳下缘1~2mm、肺动脉圆锥旁 0.5mm处以8-0带线缝合针穿过冠状动脉前降支将其结扎,松紧适宜,控制进针深度(以隐约可见细针为宜)和行针宽度(2mm左右),当看到左心室前壁外表面变成苍白色时证明缺血成功。


由于不借助通气装置,要求开胸时间不要超过30s,结扎操作尽量控制在10s左右完成。结扎完成后轻柔地将心脏送回胸腔,挤压胸腔排出空气同时收紧结扎切口处预留缝线,完成手术。术中逐步调整麻药浓度至零,取下面罩后将小鼠置于恒温垫上约3~5 min 即可复苏。


模型评价方法及结果分析


1、心电图判断:心肌梗死会导致心电图出现特定的异常波形,如 ST 段抬高、T波倒置等。





心肌梗死的心电图


2、超声检查心功能:在心肌梗死模型中,超声心动图通常显示心脏扩大、心肌变薄、心肌收缩功能下降等。


3、TTC染色和病理染色。


4、心肌酶谱检测:肌红蛋白、肌钙蛋白及肌酸激酶同工酶。

四、技术要领


① 快:短时间内完成冠脉结扎术,尽快完成冠脉结扎并闭合胸壁,降低长时间暴露胸腔可能导致心律失常、气胸等致死风险。


② 准:冠脉结扎位置的选择至关重要,由于小鼠血管细小,侧枝循环丰富且走行不易观察,因此要求实验者操作精确,既要保证能够引起足够面积的心肌梗死,又要避免梗死面积过大而导致死亡,尽量在同一高度结扎形成较为一致的模型;


③ 稳:小鼠心室壁较薄,操作者需要严格控制穿刺深度,避免穿刺过深直接刺破室壁造成大出血。

发布于 2024-01-09 15:16・IP 属地河北