MONOGRAFIAS MED. VET. 22 (1-2) 22-29, 2002 LEUCEMIA VIRAL FELINA (Parte 1) Marcela Valenzuela, Loreto Mufioz, Gladys Villouta y Luis Tello Hospital Clinico Veterinario, Universidad de Chile Bilbao 2854 - Providencia - Santiago Clinica de Animales Pequefios Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Chile Santa Rosa 11735 - La Pintana - Santiago Itello@ uchile.cl CARACTERISTICAS DEL VIRUS LEUCEMIA FELINA El virus de la leucemia felina (FeLV) perte- “nece a la familia Retroviridae, la que esta constituida por tres subfamilias (Zenger, 1992; Ban et.al., 1995; Lappin, 1997). - Spumaviridae, la que incluye al virus sincisial Felino (FeSFV). - Oncornaviridae, la que incluye el virus de la leucemia felina (FeLV), el virus leucemia bovina (VLB), el virus sarcoma felino (FeSV), RD - 114 y secuendas enddgenas relacio- nadas al FeLV, - Lentiviridae, compuesta por el virus de la inmunodeficiencia felina (FIV) y el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). Temario * Caracteristicas * Epidemiologia y Transmisién del FeLV * Patogénesis de la Infeccion con el FeLV * Categorias * Bibliograffa Consultada Estructura del Fel V En la estructura viral del FeLV se distinguen tres partes: la mas interna es la nucleocapside 0 «core» proteico, encarga- da de proteger el material genético, que co- rresponde a una sola hebra de acido ribonucleico (ARN) y la enzima transcriptasa reversa, Esta nucleocapside esta constitui- da por tres proteinas denominadas plO, pI5 interna (c) y p27. El segundo componente es la capa interna, la cual rodea la nucleocapside y esta for- mada por un solo tipo de proteina, la p12. La tercera parte es la envoltura externa, ori- ginada a partir de la membrana citoplasmatica de la célula infectada, cuyo componente principal es la glicoproteina gp70, que esta sostenida por la protefna transportadora p15 externa (E). Esta ultima estructura es responsable del reconocimien-to molecular, mediante el cual el virus iden- tifica a los linfocitos, permitiendo que se adhiera al receptor de membrana de dichas células, inicidndose asi el proceso de infec- cién (Zenger, 1992; Sherding, 1994; Ban et. al., 1995). En la organizacién genémica del provirus hay tres genes principales: gag, pol y env que codifican para las proteinas de la en- voltura. Asi el gen gag, codifica para las proteinas p15 E, p10 y p27; el gen pol, lo hace para la enzima transcriptasa reversa y el gen env para proteinas de membrana p15 Ey gp70 (Ban et. al., 1995; Gorman, 1995). Los virus sarcoma felino (FeSVs) son muta- ciones del FeLV, que se originaron por recombinacién «in vivo» entre genes del FeLV y los de la célula huésped. La recombinacién generalmente resulta por una pérdida parcial del gen gag, de todo el gen pol, y por la pérdida parcial o completa de! gen env, unido a la insercién de un oncogene celular. La fusién de las proteinas del virus y el huésped, que resultan de la recombinacién en FeSVs, son las respon- sables de la produccién relativamente rapi- da y efectiva del fibrosarcoma por ese virus (Ban et. al., 1995). Como resultado de la sintesis viral en las células huésped se produce alta cantidad de proteina p27, que es el antigeno detec- tado en las pruebas diagnésticas comercia- les para FeLV. Los anticuerpos para p27 no son protectivos contra la viremia y los com- plejos inmunes de antigeno p27 - anticuer- po, son importantes en la patogénesis de las enfermedades inmunomediadas en los gatos infectados con FeLV. El desarrollo de los anticuerpos neutralizantes para gp70, jugaria un rol esencial en la respuesta inmune protectora; sin embargo, algunos gatos virémicos per- sistentes tienen anticuerpos neutralizantes para gp70, y no presentan recuperacién (Ban et al., 1995). La proteina interna p15, se ha asociado con la presentacion de inmunosupresi6n y ane- mia no regenerativa, pese a que su impor- tancia en la patogénesis de la infeccién no esta clara. Sin embargo, la inoculacién de vacunas preparadas con virus inactivo, que contiene p15, produce inmunosupresién (Ban et. al., 1995; AAFP, 1997) Otro antigeno de importancia cuestionable es el FOCMA (antigeno de membrana aso- ciado a oncornavirus felino). Esta es una proteina expresada sobre la membrana de células tumorales infectadas por FeLV y FeSV y se cree que puede ser producto de la recombinacién genética entre gp70 del FeLV y las secuencias endégenas retrovirales. Los anticuerpos ,para FOCMA tienen alguna actividad protectiva contra el desarrollo de neoplasias relacionadas al FeL\, pero ellas no previenen las manifes- taciones no neoplasicas inducidas por éste (Jain, 1993; Ban et. al. 1995). Alrededor del 25 a 38% de los gatos expues- tos a FeLV pueden desarrollar titulos de anticuerpos contra FOCMA. Sin embargo, la presencia de anticuerpos FOCMA en ga- tos no virémicos puede indicar latencia per- sistente 0 infeccién de baja actividad (Jain, 1993, Ban et. al. 1995). Subgrupos virales Se han descrito a lo menos 3 subgrupos del FeLV: A, B y C. El subgrupo A se describe en mas del 90% de los gatos positivos al FeLV, es altamente transmisible desde un gato a otro y causa una répida viremia des- pués de la infeccién. Los subgrupos B y C .del FeLV son el resultado de un polimorfismo 23 de la glicoproteina gp70 (Ban et, al., 1995). El subgrupo B en coinfeccién con el subgrupo A se ha hallado en el 50% de los gatos infectados; se transmiten con facilidad y rara vez producen viremia. Solamente 1% de los gatos infectados transporta el virus del subgrupo C, y generalmente como una coinfeccién con el subgrupo A (Ban et. al., 1995) De la infeccién con el subgrupo C del FeLV, resulta una viremia persistente en animales neonatos, pero es transitoria en la mayoria de los gatitos de mas de 2 semanas de edad(Ban et al., 1995). En condiciones de laboratorio, el subgrupo A del FeLV crece solamente en células de origen felino. El subgrupo B y C replica en una gran variedad de cultivos celulares de distintas especies incluyendo algunas célu- las humanas (Ban et.al., 1995). La infecci6n virémica con el subgrupo A tie- ne un efecto patégeno reconocido, especial- mente combinado con los subgrupos B y C, aunque en infecciones Unicas crénicas pue- den provocar linfosarcoma. Gatos j6venes con infecciones persistentes de FeLV C pue- den desarrollar anemia aplastica. Sin em- bargo la mayoria de los gatos con cuadros clinicos graves asociados a enfermedades mieloproliferativas, mielosupresivas e inmunosupresivas estan coinfectados con los subgrupos A y B (Jain, 1993; Loar, 1993; Ban et al., 1995). Los gatos tienen susceptibilidad variable relacionadas con la edad frente a los subgrupos de FeLV. En gatos jévenes ino- culados experirnentalmente con e1 subgrupo A, se ha observado anemia macrocitica, asociada con una activa eritropoyesis en médula 6sea y hematopoyesis extramedular en bazo (Jain, 1993). En gatos jévenes infectados experimental- mente con el subgrupo C se desarrollé una anemia aplasica 0 una anemia macrocitica normocrémica no regenerativa, ambas fa- tales. Esta anemia se relaciona a una mar- cada inhibicion del crecimiento y/o diferen- ciacién de los progenitores de células eritroides en médula ésea. La actividad inhibitoria del FeLV C en eritrocitos, ha sido localizada en el N - terminal de la superficie de la glicoproteina de envoltura gp70 (Jain, 1993) Se han descrito dos virus tipo C morfolégicamente similares en asociacién con el linfoma felino, el primero es ocasio- nalmente agente causal de Linfoma, y el segundo, el virus felino tipo C (RD - 114), es un virus endégeno del gato y no se le ha descrito como causal de enfermedad (Jain, 1993). Existen otras cepas virales no clasi- ficadas que se han asociado con algunas manifestaciones del virus leucemia felina, una de ellas es la cepa Kawakami -Thellen que provoca un aumento marcado en el numero de macrotrombocitos asociados a una trombocitopenia clinica. La cepa Rickard de FeLV (FeLV - R) es el agente causal del linfoma timico compues- to de protimocitos 0 timocitos corticales inmaduros. También se ha descrito un nue- vo aislado de FeLV (FeLV AB/ GM - 1), que ha sido asociado con la induccién de leucemia mieloide aguda en una elevada 24 proporcién de natos durante la 5a a 8a se- manas post infecci6n (Jain, 1993; Shelton y Linenberger, 1995). Otra cepa de FeLV de- nominada FeLV - FAIDS, fue descrita como causal de sindrome de inmunodeficiencia en gatos jovenes al provocar la destruccién de linfocitos T (Jain, 1993; Ban et. al., 1995). Estudios moleculares han descrito varian- tes de los de virus FeLV que expresan los genes env, FeLV - FAIDS y FeLV - Sarma, determinando dos mecanismos patolégicos: 1.- Citopaticidad de linfocitos T con inmunosupresién aguda inducida por las variantes FeLV- FAIDS. 2. Aplasia pura de las células rojas induci- das por el FeLV - Sarma. Ademés ambas variantes parecen jugar un rol en el desarrollo del linfoma asociado ala Leucemia Viral Felina (Jain, 1993; Linenberger y Abkowitz, 1995). La proteina p15 E, puede dajiar la funcién normal de los linfocitos «in vitro» ein vivo». Esta misma proteina produce en los neutréfilos de gatos infectados con FeLv, una disminucién de la actividad en el tracto respiratorio y de la capacidad quimiotactica, particularmente en gatos jdvenes (Jain, 1993). En gatos con enfermedad linfoproliferativa, inducida por el FeLv, se ha observado una inmunosupresién de células T helper, al igual que en los gatos infecta- dos con Virus de Inmunodeficiencia (FIV). Alrespecto se describe que los gatos infec-tados con FeLV tienen un numero reducido de linfocitos con marcadores celulares CD4+ y una relacion de marcadores CD4: CD8 normal Jain, 1993). I-EPIDEMIOLOGiA Y TRANSMI- SION DEL FeLv. El FeLV fue identificado en 1964 por Jarret y col., como el supuesto agente etiolégico del linfosarcoma en un grupo de gatos. El mismo autor postula que este virus se origi- 6 hace mas de un millén de afios atras, cuando un retrovirus endégeno de ratén in- fecté a un antecesor de gato doméstico (Ban et al., 1995). El virus leucemia felina infecta a gatos domésticos en todo el mundo y esporddicamente en algunos felinos no do- mésticos (Hansen, 1980; Gruffydd -Jones, 1994; Ban et. al., 1995; AAFP, 1997, Lappin, 1997). El FeLV es el virus que con mayor frecuen- cia se asocia a la presentacion de enferme- dades y muerte de gatos (Reinacher, 1987; Loar, 1994). Se estima que entre el 2 al 3% de los gatos de Estados Unidos estan infec- tados con el FeLV. En poblaciones de alto riesgo, como gatos con exposicién recono- cida al virus 0 gatos que conviven con indi- viduos positivos; alrededor del 13% son po- sitivos al FeLV (Ban et al., 1995). La infecci6n persistente de FeLV se ha des- crito comunmente en criaderos de gatos en los cuales el FeLV es enzostico. En estos grupos, entre el 70 a 100% de los gatos tie- nen evidencia seroldgica de la infeccién y de ellos, un 30% desarrolla infecciones per- sistentes con el virus (Ban et al., 1995). Lappin en 1997, describe seroprevalencias en criaderos de gatos de Estados Unidos de 6,8% entre los gatos sanos y de 21,1% en gatos enfermos con distintas entidades patolégicas. Otro estudio realizado en Esta- dos Unidos entre los afios 1990 y 1991 es- tablecié que de una poblacion de 27.976 gatos, el 13% fueron positivos al virus leucemia (Sherding, 1994). Por otra parte, Lappin en 1997, describié que el 1,5% de los gatos estan infectados simul- taneamente con el virus leucemia felina y con el virus de la inmunodeficiencia felina. Loar en 1994 sefiala que entre el 1 al 3% de los gatos con FIV estan coinfectados con el FeLV. Gatos positivos a FeLV son casi cua- tro veces més seropositivos al FIV que aque- llos seronegativos a FeLV (Jain, 1993). En Inglaterra, en la poblacién de gatos sa- nos, alrededor de un 40% de los gatos muestran evidencia serolégicas de exposi- cién. Sin embargo, la mayoria de ellos se recuperan de la infeccién. En la poblacién de gatos enfermos por otras causas, la pre- valencia de la infeccién con FeLV es de un 41a 17%. (Ramsey, 2001). Los gatos con viremia persistente, eliminan gran cantidad de virus, principalmente por saliva, y en menor proporcion por orina, fa grimas y leche. La transmisi6n ocurre prefe- rentemente por via horizontal, a través de la exposicién a fluidos durante peleas, acicaladuras 0 contacto con alimentos con- taminados, agua 0 platillos. La transmisién por mordeduras es probablemente el méto- do mas eficiente para extender la infeccién, pero el simple contacto cercano entre gatos también aumenta la probabilidad de trans- misién del FeLV. La infeccién con el FeLV termina con una muerte fetal o neonatal en un 80% de las hembras prefiadas e infecta- das (Ban et al., 1995). La transmisién placentaria o transmamaria de FeLV es otra forma de infeccién y ocurre en alrededor de! 20% de los gatos supervi- vientes de madres infectadas. En lo referente ala transmision por fomites 0 aerosoles, es poco probable por la escasa sobrevida de! agente en el medio ambiente. Lo mismo sucede si es eliminado por orina y fecas (Jain, 1993; Loar, 1993; Ban et. al., 1995, Mccaw, 1995; Lappin, 1997). Alrededor de las tres semanas de infeccién, en los gatos virémicos existe gran cantidad de virus en la saliva. Los felinos virémicos sanos excretan 5 a 10 veces mas virus que los gatos leucémicos, siendo la frecuencia de presentacién de gatos virémicos sanos 10 a 20 veces mayor que la de enfermos (Jain, 1993).No existen evidencias de que el FeLV pue- da infectar a seres humanos nia perros, tam- poco se conocen asociaciones entre enfer- mos con el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) y el contagio con el FeLV. Si se ha demostrado que el virus puede cre- cer en cultivos celuiares de origen humano (Hardy el al., 1974; Ban et ai, 1995; Miller et. al., 1998). La relacién macho: hembra entre los seropositivos al FeLV es de 1 La preva- lencia de la infeccién es mayor para gatos entre 1 y 6 afios de edad, con un promedio de 3 afios (Loar, 1993). PATOGENESIS DE LA INFEC- CION CON EL FeLV Existe un numero significativo de factores que inciden sobre la progresion 0 inhibicién de la replicacién viral; el subtipo del FeLV, via de ingreso del virus y el volumen de vi- rus que ha ingresado, edad del animal, el tipo y cronologfa de la produccién de anticuerpos posterior a la exposicién (Loar, 1993; Wolf, 1993; Lappin 1997). La susceptibilidad a la viremia persistente esta fuertemente influenciada por la edad de los gatos expuestos. La mayoria de los gatos neonatos (70 - 100%), manifiestan la viremia persistente cuando se exponen al FeLV, mientras que solamente el 30 a 50% de los gatitos mayores a 8 semanas y me- nas de! 30% de los gatos adolescentes y adultos ta desarrollan, El desarrollo de la resistencia relacionada a la edad se atribu- ye al aumento de la inmunocompetencia del animal (Jarret, 1982; Loar, 1993; Wolf, 1993; Ban et. al., 1995; Lappin, 1997). La infeccién con el FeLV puede ser dividida en cinco estados (Zenger, 1992; Loar, 1993; Ban et. al., 1995). 1. - Ingreso y replicacién viral en tonsilas y nédulos linf&ticos periféricos (exposicién oronasal), 0 en nodulos \infaticos reglonales. ocurre por exposicién, por inoculacién o mordedura dentro de los 2 a 4 dias post exposicién. = Infeccién de un pequefio numero ‘de linfocitos circulantes (primariamente células B) y macréfagos, los cuales diseminan el virus a través del organismo del animal. Ocurre dentro de los 14 dias posteriores a la exposicin. 3. - Replicacién del FeLV en bazo, tejido linfoide asociado a intestino, nédulos linfaticos, células de la cripta intestinal y pre- cursores celulares en médula. 4, - Liberacion de neutrofilos infectados y plaquetas desde médula ésea al sistema cir- culatorio. Ocurre dentro de las 2 a 4 sema- nas posteriores a la exposicién. 5. - Infeccién de multiples epitelios y tejidos glandulares, incluyendo tejido de glandulas salivales y vejiga urinaria, con eliminacién subsecuente de una gran cantidad de virus a través de saliva y orina. En los retrovirus, la replicacién productiva y transformacién puede ocurrir en algunas células. Aunque el genoma viral de los retrovirus es el ARN, éste se copia en una doble cadena de ADN por medio de la enzi- ma transcriptasa reversa. La copia de ADN del provirus migra al nucleo celular, en don- de se integra al ADN cromosomal y es transcrito para ,producir un nuevo genoma de ARN viral y asi codifica para las protei- nas virales (Ban et al., 1995). Los nuevos viriones se ensamblan en la membrana plasmatica y son envueltos por una mem- brana no citopatica. Todas las células infec- tadas expresan en su superficie la Glicoproteina denominada gp70 (Gorman, 1994, Ban et al., 1995). IV CATEGORIAS Estudios seroepidemiol6gicos descritos por Jain, 1993; Loar, 1993; Ban et. al., 1995 su- gieren que luego del contacto con el Fel ocurren los siguientes hechos en poblacio- nes de felinos susceptibles expuestos al FeLv: a) Categoria 1 (persistentemente infecta- dos): cerca del 30% de los gatos expues- tos a FeLV no desarrollan una respuesta in- 26mune adecuada ,para el retrovirus, y mani- fiestan la infeccién persistente dentro de las primeras 4 a 6 semanas (ELISA positivo, IFA positivo y anticuerpos virus neutralizante (Vnab) negativo). b) Categoria 2 (infeccion recurrente): al- rededor del 60% de los gatos desarrollan una infeccién autolimitada, porque montan una respuesta inmune adecuada, presen- tando un ELISA negativo, IFA negative y Vnab positivo. El riesgo de desarrollar en- fermedades relacionadas al FeLV en esos gatos es bajo. Alrededor del 30 a 40% de los gatos en esta categoria pueden mante- ner al provirus latente. Ellos raramente pa- sana ser virémicos, desarrollando enferme- dades relacionadas al FeLV o linfoma no re- jacionado a FeLv. El estado de latencia viral puede ser reactivado por la administracion de glucocorticoides y por otras drogas inmunosupresivas. Dentro de las complica- ciones del estado de latencia, es que el re- sultado positivo al test de ELISA es transi- torio y puede ser mal interpretado por los clinicos (Lappin, 1997). c) Categoria 3 (virémicos transitorios): aproximadamente el 30 a 40% de os gatos de la categoria 2, pueden pasar a ser virémicos transitorios durante el periodo temprano, luego de la exposicién al FeLV (ELISA positivo, IFA negativo/positivo, Vnab negativo). d) Categoria 4 (infeccién atipica): airededor de un § a 10% de los gatos mues- tran una infeccién atipica o secuestrada {ELISA positivo, IFA negativo, Vnab positi- vo/negativo). Estos gatos poseen la infec- cién de FeLV localizada en tejidos selecti- vos como médula ésea, bazo, nédulos linfaticos e intestino delgado. Ellos pueden evidenciar un bajo grado de viremia inter- mitente y eventualmente progresar a la ca- tegoria 162 BIBLIOGRAFIA AMERICAN ASSOCIATION OF FELINE PRACTITIONERS (AAFP). (1997) American Association of Feline practitioners / Academy of Feline Medicine: 27 Recomendation for feline leukemia virus testing. Compendium on continuing education for the practicing veterinarian. 19 (10): 1105 - 1107. ANIMAL CLIINIC. (1998). Feline leukemia virus diseases. http:/Avww.animalclinic.com/ FELVEASY.htm BABYAK, S. D.; Groves, M. G.; Dimski, D.S.; Taboada, J. (1996). Evaluation of a saliva test Kit for feline leukemia virus antigen. J. AM. ANIM. HOSP. ASSOC. 32 (5): 397 - 400. BAN, M.; Olsen, C.; Scott, F. (1995). Feline viral diseases. In: Ettinger, S. y Felman, E. Texbook of Veterinary Internal Medicine. 4th ed, Philadelphia, W.B. 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