Protilátky proti HSV-1/HSV-2-gG (IgG) - Dynex

Vyhodnocení a interpretace testů ANTI-<strong>HSV</strong>-1/<strong>HSV</strong>-2 GLYKOPROTEIN G-2<br />

WESTERNBLOT (IgM)<br />

Manipulace: Položte inkubované pružky na filtrační papír, překryjte je savým papírem a<br />

jemným poklepáváním vysušte. Pomocí průhledné lepící pásky připevněte proužky na<br />

plastový film, který je součástí vyhodnocovacího protokolu. Přiložte vyhodnocovací matrici k<br />

blotovaným proužkům a umístěte ji tak, že černá čára nad čísly blotů tvoří přímku s čárou na<br />

vyhodnocovací matrici, která slouží k porovnání. Číslo šarže na vyhodnocovací matrici musí<br />

být shodné s číslem šarže testu, ze kterého byly použité proužky. K vyhodnocení slouží pouze<br />

jasně patrné proužky na blotech, které odpovídají značkám na vyhodnocovací matrici.<br />

Na proužcích je pod číslem kontrolní proužek. Inkubace proběhla správně, jestliže je<br />

viditelná barevná reakce na kontrolním proužku.<br />

Antigeny: Zdroj antigenů pro EUROIMMUN Anti-<strong>HSV</strong>-1/<strong>HSV</strong>-2 glykoprotein G-2<br />

WESTERNBLOT je tvořen kompletními antigeny <strong>HSV</strong>-1 a afinitní chromatografií čištěným<br />

<strong>HSV</strong>-2 glykoproteinem G-2 (1-2). Kultivované Herpes simplex viry byly rozděleny podle<br />

molekulové hmotnosti pomocí diskontinuální polyakrylamidové gelové elektroforézy a<br />

separované proteiny byly přeneseny na nitrocelulózovou membránu. Potom byla na<br />

membránu nanesena slabá linie purifikovaného glykoproteinu G-2. Z každé testovací<br />

soupravy byly vyjmuty 2 kontrolní testovací proužky a byly inkubovány s referenčním sérem.<br />

Jeden z těchto obarvených kontrolních proužků je součástí soupravy, druhý zůstává<br />

v EUROIMMUN pro účely dokumentace.<br />

Specifita antigenů na testovacích proužcích<br />

Proužek Molekulová Antigen<br />

Specifita<br />

hmotnost<br />

gC-1 130 kDa <strong>HSV</strong>-1 glykoprotein C-1 (gC-1) Vysoce specifické pro Herpes<br />

simplex virus -1<br />

gB-1 120 kDa <strong>HSV</strong>-1 glykoprotein B-1 (gB-1) Specifické pro Herpes simplex<br />

virus<br />

gD-1 60 kDa <strong>HSV</strong>-1 glykoprotein D-1 (gD-1) Specifické pro Herpes simplex<br />

virus<br />

gD-2<br />

<strong>HSV</strong>-2 glykoprotein G-2 (<strong>gG</strong>-2) Vysoce specifické pro Herpes<br />

simplex virus -2<br />

I<strong>gG</strong> třída <strong>proti</strong>látek <strong>proti</strong> Herpes simplex viru<br />

K vyhodnocení získaných signálů slouží jednak umístění proužků, jednak jejich barevná<br />

intenzita. Viz inkubovaný kontrolní proužek na vyhodnocovací matrici.<br />

Interpretace výsledků pro I<strong>gG</strong> <strong>proti</strong>látky:<br />

Na základě zkušenosti s výsledky soupravy ANTI-<strong>HSV</strong>-1/<strong>HSV</strong>-2 GLYKOPROTEIN G-2<br />

WESTERNBLOT (I<strong>gG</strong>) lze detekovat infekci Herpes simplex virem. Proužek odpovídající<br />

antigenu <strong>HSV</strong>-2 <strong>gG</strong>-2 slouží k odlišení <strong>proti</strong>látek <strong>proti</strong> <strong>HSV</strong>-1 a/nebo <strong>HSV</strong>-2 (<strong>HSV</strong>-2 <strong>gG</strong> je<br />

ve vyhodnocovacím protokolu vystínován šedě).

---

Herpes simplex-1 viry preferují oblasti úst a nosu, herpes simplex 2 viry genitálie. Velmi<br />

časté je opakování onemocnění.<br />

Protilátky <strong>proti</strong> <strong>HSV</strong>-2 mohou být detekovány v séru skoro všech pacientů, u nichž se<br />

projevilo onemocnění. Více než polovina dospělých byla infikována. Avšak <strong>proti</strong>látky nejsou<br />

schopny zabránit opakování onemocnění, či reinfekci.<br />

Literární odkazy:<br />

1. Kuhn, J., Biber, M., Doerr, H.W., Braun, R.: Diagnostik der Herpes-Simplex-Virus<br />

(<strong>HSV</strong>)-Infection. Artz.Lab (32).1986: 91-98.<br />

2. Rabenau, H., Eibner, J., Weber, B., Bahrdt, B., Doerr, H.W.: Detection of Herpes simplex<br />

virus (<strong>HSV</strong>) type specific antibodies by microtechnique Western blot assay. Lab.med. 16,<br />

1992: 327-331.<br />

3. Simmonds, P., Smith, I.W., Peutherer, J.F.: Detection of antibody to viral proteins<br />

following primary infection with Herpes simplex virus. J.Med.Virol. 23. 1987: 191-205.<br />

4. Ashley, R., Benedetti, J., Corey, L.: Humoral immune response to <strong>HSV</strong>-1 and <strong>HSV</strong>-2<br />

viral proteins in patients with primary genital herpes. J. Med. Virol 17,1985: 153 –166.